Manual Toma de Muestras Microbiologia. Hospital de Rancagua. 2011

Manual Toma de Muestras
Microbiologa.
Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

TM. M. Elena Daz F.
Dr. Sonia Correa Dr. Adriana Pinto T.
TM. Maximiliano
Ramrez A. BQ. Rodrigo Gonzlez.
TM. Antonio Sanaguas

I.
Fecha: 01/08/2011 Fecha: 21/09/2011 Fecha: 21/09/2011

Firmas Firma Firma
Manual Toma de Muestras Microbiologa

Cdigo: SGC-LC-TMB V0
Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

Microbiologia. Versin: 0
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INDICE
INTRODUCCION 3
Requisitos para una buena toma de muestra 3
Uso correcto de las rdenes de exmenes 5
NORMA DE TOMA DE CULTIVOS 6
COMITE DE INFECCIONES ASOCIADAS
A LA ATENCION DE SALUD IAAS 7
Criterios de Rechazo de Solicitudes y/o Muestras 7
CULTIVO DE ANAEROBIOS 8
CULTIVO ASPIRADO ENDOTRAQUEAL CUANTITATIVO (AET) 10
CULTIVO LQUIDO BILIAR 12
CULTIVO CATETER VENOSO CENTRAL 13
COPROCULTIVO 14
EXPECTORACION 15
CULTIVO FARINGEO 16
HEMOCULTIVO 17
Relacin sangre / caldo y tipos de frascos 18
HEMOCULTIVOS CUANTITATIVOS 20
BACTEREMIA ASOCIADA A CVC. 22
INFECCIONES A LA PIEL Y TEJIDO SUBCUTANEO 23
LESIONES SUPERFICIALES ERITOMATOSAS 23
ULCERAS Y NODULOS 25
SENOS PARANASALES 26
INFECCIONES DE HERIDAS 27
MORDEDURAS 28
LAVADO BRONCO-ALVEOLAR 29
LEUCOCITOS FECALES 30
LIQUIDO ASCITICO 31


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LIQUIDO ARTICULAR O SINOVIAL 32

CULTIVO LQUIDO CEFALORRAQUIDEO (LCR) 34
LIQUIDO PERITONEAL 36
LIQUIDO PLEURAL 37
CULTIVO NASAL 38
MYCOPLASMA HOMINIS Y UREAPLASMA UREALYTICUM 39
CULTIVO OCULAR 40
CULTIVO OTICO 41
ROTAVIRUS Y ADENOVIRUS en deposiciones. 42
CULTIVO SENOS PARANASALES 43
CULTIVO TEJIDOS, BIOPSIAS y ABSCESOS. 44
MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL FEMENINO. 46
MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL MASCULINO 48
UROCULTIVO. 50
VIRUS RESPIRATORIOS POR IFI. 53
BORDETELLA POR IFD. 55
BIBLIOGRAFIA. 58


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INTRODUCCION
El diagnostico de las enfermedades infecciosas, se basa en el estudio de

los sntomas y signos clnicos, as como en la demostracin de la presencia del
agente, de sus productos o de la huella que este ha dejado en su contacto con el
sistema inmune del individuo.
El diagnstico clnico es, en muchos casos, orientador luego de evaluar los
datos que ofrecen la historia clnica y la exploracin, pero, la confirmacin de un
diagnstico clnico, requiere, en enfermedades infecciosas, del diagnstico
etiolgico que confiere el laboratorio de Microbiologa Clnica.
La informacin diagnostica que el laboratorio de Microbiologa puede
proporcionar, depende de la calidad de la muestra recibida.
Una muestra mal tomada, en escasa cantidad o mal transportada,
determinara un posible fallo en la recuperacin de o los agentes patgenos,
induciendo errores en el diagnstico, como tambin en un tratamiento inadecuado
del enfermo.
Requisitos para una buena toma de muestra.
1. Personal idneo en la toma de muestra.
2. Indicaciones claras al paciente respecto del examen se le va a realizar.
3. Preparacin adecuada del paciente, como aseo previo, uso de antispticos,

uso de tapn vaginal, cuando corresponda.
4. Muestra representativa del proceso infeccioso.
5. Muestra tomada antes del tratamiento antimicrobiano. De lo contrario

especificar en la orden.
6. Muestra tomada con la cantidad adecuada.
7. Uso correcto de los medios de transporte.


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MUESTRA MEDIO DE TRANSPORTE
Aspirado nasofarngeo para virus respiratorios. Buffer pH 7.2.
Aspirado nasofarngeo para Bordetella. Suero fisiolgico.
Coprocultivo. Cary Blair.
Secreciones en trula. Stuart.
8. Nmero de muestras adecuada.
9. Las muestras recolectadas en tubos estriles sin medio de transporte, deben

enviarse al laboratorio a la brevedad.
10. Como bioseguridad, las muestras deben transportarse al laboratorio, dentro de

unidades trmicas, sin hielo o unidad refrigerante, a excepcin de los
aspirados nasofarngeos para pesquisa de virus respiratorios.
11. Especificar examen solicitado, bacteria o grupo de microorganismo que se

desea pesquisar, Ej.
Anaerbios.
Hongos, Levaduras.
Difteria.
Gonococo.
Vrus Respiratrio.
Enterococo de deposicin.
12. Frente a cualquier duda o consulta referente a determinada muestra, resultado

de examen, toma de muestra que no aparezca en este manual, etc.,
contactarse con el laboratorio de Microbiologa, en horario de 8.00 16.50 hrs.
de lunes a viernes o con el tecnlogo mdico de turno fuera de este horario.
13. Es importante que la solicitud de examen, especifique la edad del paciente, ya

sea porque algunos hallazgos bacteriolgicos se deben enviar al Instituto de
Salud Pblica con todos los datos o porque algunos procedimientos de uso de
algn determinado medio de cultivo, depende exclusivamente de la edad del
paciente: flujos vaginales se les agrega Agar Mac Conkey en menores de 14
aos; la vigilancia de Vibrio cholerae difiere en aquellos pacientes mayores de
18 aos, de los que tienen menos de sta edad.


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Uso correcto de las rdenes de exmenes.
EXAMEN ORDEN
Orden normal de Bacteriologa adicionada
VIRUS RESPIRATORIO
de IRA grave en caso de estudio de
(inmunofluorescencia)
virus influenza AH1N1.
BORDETELLA PERTUSSIS
Orden normal de bacteriologa
(inmunofluorescencia):
PARALISIS FLACCIDA: Formulario especial del ISP
SARAMPION: Formulario especial del ISP
HANTA VIRUS: Formulario especial del ISP


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NORMA DE TOMA DE CULTIVOS.
En relacin a la solicitud de cultivos microbiolgicos, se recomienda lo

siguiente:
La solicitud de toma de cultivo debe corresponder a una hiptesis

diagnstica de infeccin, que requiere su confirmacin por laboratorio junto
a la identificacin del agente causal y el antibiograma para realizar
tratamiento especfico.
No est indicado realizar cultivos rutinarios de vigilancia, como escaras y

lceras de decbito, TET, CUP, Catter Venoso Central o al trasladar
pacientes desde un servicio a otro, sin una clara sospecha clnica de
infeccin, ya que es sabido que el paciente en menos de 48 hrs. desde su
ingreso al establecimiento, es colonizado por microorganismos
intrahospitalarios y sus resultados (+) pueden producir confusin y estimular
el uso inadecuado de antimicrobianos con el consiguiente aumento de los
costos de atencin.
Se debe consignar la toma de muestras en la ficha clnica y hoja de

enfermera en el caso de traslado de paciente desde un servicio a otro,
evitando repetir la toma de muestra.
En el caso de mltiples heridas o escaras con signo de infeccin, se

recomienda la toma de solo una muestra del sitio ms representativo
(mayor presencia de secrecin purulenta), previo aseo con suero fisiolgico.
Se debe considerar adems, que al solicitar un cultivo se debe esperar su

resultado final (hasta 72 hrs.) antes de solicitar nueva muestra, ya que las
muestras seriadas en 24 hrs. no han demostrado mejor rendimiento
diagnstico (excepto hemocultivos).
No est indicado tomar muestras de loquios, objetos inanimados, manos y

nariz del personal (excepto en estudios de portacin en casos de brotes) y
de antispticos y desinfectantes (estudios en casos y condiciones
especiales).


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COMITE DE INFECCIONES ASOCIADAS A LA ATENCION DE SALUD IAAS.
Criterios de Rechazo de Solicitudes y/o Muestras
Si las solicitudes y/o las muestras no cumplen los requisitos mnimos

indispensables para su correcto procesamiento el laboratorio deber aclarar las
discrepancias con el servicio que las envo, previo a su realizacin y en algunos
casos ser imposible su procesamiento hasta tanto se enve la muestra correcta.
Los siguientes son algunos ejemplos de ello:
A. Discrepancia entre la identificacin del paciente que figura en la solicitud del

examen y la que figura en el rotulo de la muestra. Accin: Rechazo de la
muestra, hasta que se enve correctamente, por parte del Servicio
Clnico.
B. No se indica en la solicitud de examen, el tipo de muestra a analizar y/o
procedencia anatmica del mismo. Accin: Llamar al servicio que lo envi.
No se procesar hasta tanto se conozcan esos datos, imprescindibles
para la realizacin del estudio.
C. Muestra enviada en frasco no estril o con conservantes (formol). Accin:
Rechazo de la muestra, hasta que se enve correctamente, por parte del
Servicio Clnico.
D. Muestra enviada en envase o tubo con prdida o derrame Accin: No
procesar. Esterilizar la muestra y solicitar una nueva.
E. Muestra inadecuada para realizar el estudio solicitado. Accin: No procesar.
Informar al servicio que la muestra es inadecuada e indicar cual muestra
deber enviar.
F. Cultivo anaerobio solicitado en exudado farngeo, expectoracin, orina,
secreciones vaginales, lceras o fstulas entre otras. Accin: No procesar
.Comunicarse con el servicio y explicar las razones.
G. Muestra en cantidad insuficiente para realizar los exmenes solicitados:
Accin: Solicitar muestra adicional, si no es posible establecer
prioridades de procesamiento en acuerdo con el mdico tratante.
H. Muestras repetidas por ms de una vez en el mismo da, excepto
hemocultivos. Accin: Procesar una sola muestra por da y comunicarse
al servicio para que justifique el procesamiento de las muestras
restantes.
I. Muestra evidentemente contaminada. Accin: Descartar la muestra y
solicitar otra.


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CULTIVO DE ANAEROBIOS
TOMA DE MUESTRA: Debe ser realizada por profesional idneo
SITIO ANATOMICO MUESTRA METODO

LCR
Abscesos Puncin Lumbar
SNC Biopsias de tejidos Aspiraciones con aguja
Autopsias o material y jeringa
quirrgico
Abscesos
AREA DENTAL Material de Biopsias
(Odo-Nasal-Garganta Sinusal en Sinusitis Aspiraciones con jeringa
Senos paranasales) crnica.
Quirrgica.
Transtraqueal Aspiracin con jeringa
AREA PULMONAR Pulmn Puncin percutnea
Broncoscopa Catter con protector
de doble envoltura.
AREA ABDOMINAL Lquido de paracentesis Aspiracin con jeringa
Abscesos profundos libre de contaminacin
Ciruga intestinal.
Laparoscopa quirrgica
TRACTO GENITAL Cavidad endometrial Aspiracin con jeringa.
FEMENINO Lquido amnitico
Placenta
TRACTO URINARIO Orina Aspiracin supra pbica
Artritis supurativa Aspiracin de Articulaciones.
HUESOS Y Material de drenaje Aspiracin profunda.
ARTICULACIONES despus de ciruga: Ej.:
Osteomielitis.


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Abrir y hacer aspiracin

Heridas. profunda del margen
orilla o lesin sea
subyacente.
Del fondo de la herida
Biopsias despus de limpieza por
arrastre con suero
fisiolgico.
Aspiracin con jeringa y
TEJIDOS BLANDOS: Senos paranasales pequeo catter plstico
despus de asepsia de piel
con alcohol 70%
Abscesos profundos
Celulitis anaerobia. Aspiracin con jeringa.
Gangrena vascular
infectada.
Mionecrosis gangrenosa
Muestras quirrgicas. Aspiracin con jeringa.
Biopsias.
Superficies ulcerosas.
Pus.
Cantidad de muestra: En lo posible 1-5 ml
Transporte de la Muestra: Se utiliza un medio de transporte comercial para

anaerobios: Portagem de Biomerieux, diseado
para muestras lquidas. Una vez colocada la
muestra dentro del frasco de transporte,
mantener a temperatura ambiente. Enviar a
laboratorio.
Entrega de Resultados: Informe preliminar a las 48 - 96 horas.


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CULTIVO ASPIRADO ENDOTRAQUEAL CUANTITATIVO (AET).
INDICACIONES:
A todo paciente con sospecha de neumona asociada a ventilacin

mecnica, por ms de 48 horas y presencia de criterios clnicos radiolgicos, en el
cual no se hayan efectuado cambios de tratamiento antimicrobiano durante las
ltimas 72 horas.
TOMA DE MUESTRA:
Debe ser tomada en forma estril utilizando un catter de aspiracin

introducido en el tubo endotraqueal y conectado el otro extremo del catter, a un
colector o trampa estril apropiada.
El procedimiento debe ser realizado por un profesional entrenado con
ayudante. El catter debe ser introducido hasta encontrar resistencia y no se debe
diluir la muestra con el fin de facilitar su recoleccin.
Si las secreciones son espesas, se deben aplicar aspiraciones intermitentes
hasta conseguir la muestra.
La muestra debe ser enviada rpidamente al laboratorio, especificando que
se requiere cultivo de aspirado endotraqueal cuantitativo ( AETC ).
TRANSPORTE:
Se transporta en trampa de aspiracin, cerrada a temperatura ambiente.
HORARIO DE RECEPCION:
De Lunes a Viernes hasta las 12 AM. No enviar fuera de este horario ni en

das festivos (sin excepcin).
ENTREGA DE RESULTADOS:
A las 48 72 horas. Se informar cada microorganismo aislado con su

recuento de colonias y estudio de sensibilidad correspondiente.


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PUNTO DE CORTE:
Recuento >= 1.000.000 UFC /ml.
Sensibilidad para NAVM : 71 82 %
Especificidad para NAVM : 83-86 %
Recuento <= 1.000 UFC / ml.: Exclusin de diagnstico de NAVM.
Recuento entre > 1.000 y < 1.000.000 UFC / ml.: Interpretacin segn criterios
mdicos.


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CULTIVO LQUIDO BILIAR.
INDICACIONES:
Colangitis
Estudio de portacin de Salmonella typhi.
TOMA DE MUESTRA:
La bilis se puede recolectar:
Por puncin directa de la va biliar durante la ciruga.

A travs de endoscopia digestiva alta, desde la ampolla de vater.
Recolectar en un tubo estril sin medio de transporte.
CANTIDAD:
4 a 5 ml. es suficiente. Recolectar en tubo de polietileno estril, tapa rosca.
TRANSPORTE:
Transportar al laboratorio lo ms pronto posible, dentro de unidad de transporte

trmico
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 hrs. mnimo.


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CULTIVO CATETER VENOSO CENTRAL
INDICACIONES:
El estudio de catteres que se realiza en forma rutinaria a nivel del

Laboratorio de Microbiologa es la tcnica semicuantitativa de Maki. Esta tcnica
permite valorar la contaminacin extraluminal del catter, principal mecanismo por
el cual se contaminan los catteres de corta permanencia y pueden llegar a ser el
origen de una bacteriemia.
Paciente con catter venoso central que presente fiebre sobre 38 grados C.
aumento de volumen, enrojecimiento, aumento de temperatura local en sitio de
insercin del catter, que presente fiebre > 38, sin foco detectado, que se
sospeche bacteremia asociada a CVC, y que se retire el catter.
TOMA DE MUESTRA:
Desinfectar con alcohol al 70% una zona de piel de unos 10cm

correspondientes a la zona de entrada del catter. Hacerlo en forma de
crculos comenzando por el centro.
Retirar el catter con la mxima asepsia.
Ayudndonos de las pinzas y las tijeras estriles, cortar los 3 cm dstales del
catter que corresponden a la porcin intravascular.
Introducir el segmento de catter en un tubo de polietileno, tapa rosca, estril,
correctamente identificado, o tubo de vidrio sin medio de transporte.
TAMAO DE LA MUESTRA:
3 cm de la porcin ms distal. Porciones mayores dificultan el procesamiento en el

laboratorio. Debe acompaarse de 2 hemocultivos perifricos.
TRANSPORTE:
La muestra deber enviarse al laboratorio en un periodo inferior a 30

minutos. Cuando esto no sea posible deber conservarse a 4C por 12 horas
como mximo. Llevar a laboratorio.


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COPROCULTIVO.
TOMA DE MUESTRA:
La muestra para el cultivo microbiolgico puede obtenerse de 2 formas,

dependiendo del estado del paciente:
TORULA RECTAL O SONDA RECTAL:
Estas tcnicas se utilizan especialmente en el nio menor.

Con trula: con trula de algodn, humedecer en el medio de transporte Cary
y Blair en introducir por el recto aproximadamente 2 cm., hacindole girar
suavemente. Volver la trula al tubo con medio de transporte.
Sonda rectal: Se debe emplear una sonda de NELATON fina y se aspira con
jeringa.
Agregar sobre el medio de transporte Cary y Blair sin la trula, 1-2 ml. del
aspirado.
Volver a colocar la trula.
RECOLECCION DE DEPOSICION EMITIDA:
El paciente debe emitir la deposicin en un recipiente muy limpio, desde el

cual se recolecta, con la trula de algodn, la fraccin de deposicin que
muestra mayor alteracin (sangre, pus, mucosidad).
Colocar la trula en el medio de transporte.
NUMERO DE MUESTRAS:
Se deben tomar 2 a 3 muestras de deposicin en tiempos diferentes. Enviar

juntas al laboratorio.
Para estudio de portadores, se deben tomar 3 a 4 muestras seriadas (en das
diferentes)
TRANSPORTE:
Las muestras se mantienen y se transportan a temperatura ambiente, en medio

de transporte Cary y Blair.
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 72 horas.


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EXPECTORACION
INDICACIONES:
Paciente con neumona

Enfermedad bronquial crnica reagudizada.
TOMA DE MUESTRA:
1. Paciente debe lavarse los dientes y realizar enjuagues con agua corriente,
para limpiar la cavidad oral.
2. Obtener el esputo tras una expectoracin profunda, luego de un esfuerzo de
tos, preferentemente matinal.
3. El kinesilogo o enfermera debe asistir al paciente durante la obtencin de
sta. La muestra debe provenir del sector bajo del tracto respiratorio.
4. La saliva no sirve para realizar este estudio.
5. De no producirse expectoracin espontnea, puede inducirse el esputo con
nebulizaciones con suero fisiolgico.
6. Obtener muestra previo inicio de la terapia antimicrobiana.
7. Depositar muestra en placa Petri estril, diseada para este propsito, o en
frasco de boca ancha tapa rosca estril.
VOLUMEN: De 2 a 10 ml. si es posible.
TRANSPORTE:
La muestra debe enviarse de inmediato al Laboratorio. No debe demorar

ms de dos horas en llegar al laboratorio. Transportar placa dentro de una unidad
de transporte trmico.
NOTA: Una muestra representativa debe presentar al Gram las siguientes

caractersticas, en cuyo caso contrario el examen se debe repetir:
25 Polimorfonucleares por campo.

10 Clulas epiteliales por campo.
HORARIO DE RECEPCION: De 8.00 a 12.00 horas, de Lunes a Viernes.
ENTREGA DE RESULTADOS: A LAS 48 72 hrs.


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CULTIVO FARINGEO.
INDICACIONES:
El agente principal de faringitis es Streptococcus pyogenes.

El estudio de Neisseria meningitidis se realiza con propsitos
epidemiolgicos.
El estudio de faringitis gonoccica debe ser solicitada en forma especfica
por el mdico.
El estudio de Corynebacterium difhtheriae se realiza slo cuando se solicita
expresamente.
TOMA DE MUESTRA:
1. SECRECION FARINGEA.
Buena iluminacin y exposicin de la faringe del paciente.
Deprimir la lengua con baja lengua.
Frotar la trula con la pared posterior de la faringe y las amgdalas tocando
cualquier exudado.
Evitar tocar la lengua, vula y pared de la boca.
2. ESTUDIO PARA CORYNEBACTERIUM DIPTHERIAE: Tomar 2 muestras con

trula, utilizando baja lengua, pasndola por el reborde de la
pseudomembrana.
3. ESTUDIO PARA NEISSERIA MENINGITIDIS: Muestra nasofarngea. Tomar la
muestra con trula, por detrs de la vula en la porcin nasal de la faringe.
4. ESTUDIO PARA N. GONORRHOEAE: Tomar la muestra con trula como en
cultivo farngeo.
TRANSPORTE:
Enviar la trula en medio de transporte Stuart, a temperatura ambiente,

dentro de una unidad de transporte trmica.
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 72 hrs


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HEMOCULTIVO.
INDICACION:
Compromiso del estado general asociado a:
Fiebre > 38 C.
Hipotermia < 36 C.
Leucocitosis > 10.000
Granulocitopenia < 1.000 polimorfonucleares x ml.
O una combinacin de ellos.
En pacientes que por su condicin debilitada no responden con fiebre,
guiarse por los sntomas y signos clnicos de sepsis: taquicardia,
palidez, hipotensin, sudoracin.
Paciente con antimicrobianos, en que se sospecha falla de tratamiento,
previo al cambio de terapia.
MOMENTO DE LA OBTENCION:
Lo antes posible despus de constatada el alza febril (38)
INTERVALO DE TIEMPO:
Tomar en forma simultnea, el set de hemocultivos pero de sitios de

puncin diferentes. (brazo izquierdo, brazo derecho).
VOLUMEN DE SANGRE POR FRASCO Y N DE MUESTRAS:
En adultos tomar 10 ml. de sangre por frasco, completando set de 2

muestras.
Endocarditis infecciosa : 3 frascos en 24 hrs.
Esperar hasta 24 hrs. antes de repetir un nuevo set de 3 frascos adicionales; si

los 3 frascos primeros estn negativos hasta ese momento.


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1. RECIEN NACIDOS: 1 ml. de sangre por frasco completando un set de 2

frascos.
2. LACTANTES 1 MES- 1 AO: 1,5 ml. de sangre por frasco, completando un set
de 2 frascos.
3. MAYORES DE 2 AOS: 2,5 ml. de sangre por frasco, completando un set de
2 frascos.
4. ADOLESCENTES: 5 10 ml. de sangre por frasco, completando un set de 2
frascos.
Relacin sangre / caldo y tipos de frascos:
Se debe mantener una relacin 1/5 a 1/10 respecto de la dilucin sangre /

caldo de cultivo. Se utilizan frascos comerciales BACT ALERT.
Frascos verdes, con 40 ml. de medio de cultivo, para pacientes adultos:
agregar 10 ml. sangre por frasco.
Frascos amarillos, con 20 ml. de medio de cultivo, para pacientes
peditricos, mximo de 4 ml. de sangre por frasco. Contienen partculas de
carbn para inactivar antibiticos.
Ambos tipos de frascos permiten el crecimiento de bacterias aerobias,

anaerobios facultativos, hongos. Para anaerobios se necesitan frascos especiales.
TOMA DE MUESTRA:
1. Muestra tomada por personal adiestrado (enfermera), con guantes de

procedimiento.
2. Seleccionar la vena perifrica de ms fcil acceso.
3. Lavar la extremidad elegida con agua y jabn.
4. Aplicar con trula de algodn, alcohol 70 %, en forma concntrica,
partiendo desde el lugar donde se va a puncionar, hacia la periferia.
5. Puncionar la vena y aspirar sangre.
6. Desinfectar la tapa frasco donde se va a inocular la sangre, con alcohol
70%
7. Pinchar la tapa de goma e inocular la sangre que se mezcla con el medio
de cultivo. No cambiar de aguja para hacer este proceso.


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TRANSPORTE:
A temperatura ambiente, como mximo 6 horas antes de incubarse en el

laboratorio.
HORARIO DE RECEPCION: Las 24 hrs. del da.
Los hemocultivos se mantienen por 5 das antes de darlos por negativos.

La excepcin se da ante la sospecha de algn microorganismo fastidioso,
de hongo o ante un diagnstico de Endocarditis bacteriana, en el cual se incuban
hasta 10 das.
En caso de estar positivos. Se da un informe preliminar.


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HEMOCULTIVOS CUANTITATIVOS
PROPOSITO: Detectar en forma oportuna las infecciones asociadas a catter

venoso central, con el fin de indicar con justificacin el retiro del catter. Se basa
en el recuento diferencial de bacterias presentes en la circulacin sistmica
perifrica y en el catter venoso central. No se requiere infeccin en el sitio de
insercin del catter para indicar bacteriemia asociada a CVC.
Sensibilidad: > 80%
Especificidad: 94 100 %
INDICACIONES: A todo paciente con catter venoso central, de ms de 24 horas,

con fiebre mayor o igual a 38 C, sin otro foco infeccioso documentado.
ORDEN MDICA: Se debe especificar en la orden mdica, cultivo de hemocultivos

cuantitativos, central y perifrico.
MUESTRAS: Rotular 2 jeringas CENTRAL Y PERIFERICA.
1. Preparacin de la piel para puncin perifrica, del mismo modo que para
toma de hemocultivos.
2. Extraer 1.0 ml. de sangre por vena perifrica con jeringa heparinizada.
3. Taponar jeringa.(tapones estriles)
4. Destapar catter central.
5. Con tcnica asptica, retirar suero del catter con una jeringa.
6. Extraer con jeringa heparinizada 1.0 ml. de sangre por el catter central.
7. Taponar jeringa (tapones estriles)
8. Colocar 5 ml. de suero fisiolgico estril por el catter y cerrar el circuito
9. Colocar apsitos y tela.
TRANSPORTE:
Enviar inmediatamente al laboratorio, el par de jeringas taponadas, rotuladas, a

temperatura ambiente. La orden debe indicar hemocultivos cuantitativos.
Se debe acompaar de 2 hemocultivos tradicionales.


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HORARIO DE RECEPCION:
De lunes a viernes hasta las 12 hrs. AM. No enviar fuera de este horario ni en
das Sbado y festivos.
ENTREGA DE RESULTADOS: 48 72 horas.
INTERPRETACION:
Sin crecimiento de bacterias o menos de 5 colonias por placa: Negativo a

las 72 hrs.
Si el recuento bacteriano es superior 5 a 10 veces, en el cultivo del catter
central, sobre el cultivo perifrico, con crecimiento de ms de 5 colonias por
placa: Infeccin del torrente sanguneo asociado a catter venoso central
(CVC). Se realizar identificacin y estudio de sensibilidad para tratamiento
antibitico especfico y es orden de retiro del catter.
Si por el contrario, el resultado del recuento del catter central, no es
superior al recuento perifrico, con ms de 5 colonias por placa: Probable
infeccin del torrente sanguneo asociado a catter: Interpretacin segn
clnica y agente identificado.


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BACTEREMIA ASOCIADA A CVC.
Los hemocultivos automatizados permiten agregar un mtodo adicional de

diagnstico de bacteriemia asociada a catter central.
Se toma una muestra de sangre, del CVC y otra muestra de sangre
perifrica, segn procedimiento indicado previamente.
ROTULAR: frasco 1: CVC y frasco 2: perifrico.
VOLUMEN:5- 10 ml. en pacientes adultos. Hasta 4 ml. en pacientes peditricos.
IMPORTANTE: Igual volumen en ambos frascos.
ORDEN MEDICA: Indicar Hemocultivos CVC y perifrico.
TRANSPORTE: Enviar inmediatamente al Laboratorio, a temperatura ambiente.
HORARIO RECEPCION: Las 24 hrs. del da.
Se incuban en forma habitual en equipo automatizado, y si la muestra

central es positiva con ms de 2 horas de diferencia con respecto a la muestra
perifrica, es diagnstico de bacteriemia asociada a CVC.


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INFECCIONES DE LA PIEL Y TEJIDO SUBCUTANEO
LESIONES SUPERFICIALES ERITEMATOSAS
ENFERMEDADES MICROORGANISMOS
TOMA DE MUESTRA Y
Y QUE COMUNMENTE
TRANSPORTE
SINTOMAS LA CAUSAN
EXUDATIVAS: Con trula

Desde el borde de la lesin.
Con limpieza previa.
Streptococos grupo A.
ERISEPELA
(pigenes)
COSTRAS: Remover la
Costra con suero fisiolgico
y frotar la trula.
Streptococcus grupo A.
CELULITIS Staphylococcus aureus. INFECCIONES PURULENTAS
Anaerobios. Aspirar en la zona de inflamacin
ms aparente (bordes) con aguja
y jeringa con 0.2 ml. de suero
Erisipelothrix fisiolgico estril.
ERSIPELOTHRIX
insidiosa
TRANSPORTE AEROBIO:


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Trulas en medio de
Transporte Stuart.
Secreciones purulentas en medio
de transporte Stuart sin trula.
Enviar dentro de unidad de
transporte trmico.
Streptococcus
grupo A.
IMPETIGO:
Staphylococcus TRANSPORTE ANAEROBIO:
aureus.
En medio de transporte comercial
para anaerobios dentro de unidad
Staphylococcus
aureus.
FOLICULITIS:
Pseudomonas
aeruginosa.
Staphylococcus
PARONIQUIA aureus.
Candida spp.
Staphylococcus
PANADIZO aureus.
Virus herpes simplex.


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ULCERAS Y NODULOS
MICROORGANISMOS
ENFERMEDADES Y TOMA DE MUESTRA
QUE COMUNMENTE
SINTOMAS Y TRANSPORTE
LA CAUSAN
DIFTERIA CUTANEA. Corynebacterium Toma de exudados con trula.

Diphteriae.
Toma de exudados y heridas

con trula.
Tejidos o material contaminado

con B. anthracis.
Sangre.
ANTHRAX. Bacillus anthracis. TRANSPORTE:
Trulas en medio de transporte

Stuart.
Tejidos en tubo estril.
Frascos de hemocultivo en caso
de sangre.
Enviar dentro de unidad de trans-
porte trmico.


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SENOS PARANASALES:
MICROORGANISMOS
ENFERMEDADES Y TOMA DE MUESTRA Y
QUE COMUNMENTE
SINTOMAS TRANSPORTE
LA CAUSAN
Desinfectar la piel con

alcohol 70.
Aspirar con aguja y jeringa desde

abscesos.
Actinomyces spp.
ACTINOMICOSIS Proopribacterium Material desde biopsias.
propinica.
TRANSPORTE:
para anaerobios dentro de unidad
Aspiracin con aguja y jeringa

desde abscesos.
Diversos focos Staphylocccus aureus.
de infecciones Enterobacterias.
profundas o crnicas. Pseudomonas spp. TRANSPORTE:
En tubo estril o en medio de
transporte Stuart sin la trula;
dentro de unidad de transporte
trmico.


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INFECCIONES DE HERIDAS
MICROORGANISMOS
ENFERMEDAD Y TOMA DE MUESTRA Y
QUE COMUNMENTE
SINTOMAS TRANSPORTE
LA CAUSAN
-Limpieza por arrastre con

suero fisiolgico, luego aplicar
de la lesin.
-Pus por aspiracin con aguja y
INFECCIONES Staphylococcus aureus jeringa.
DE HERIDAS Streptococcus Grupo A -Tejidos desde biopsias.
POST Enterococcus TRANSPORTE:
OPERATORIA Enterobacterias
Bacteroides AEROBIO:
Clostridium Medio de transporte Stuart
Tubo estril.
ANAEROBIO:
Medio de transporte
comercial para anaerobios.


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MORDEDURAS
MICROORGANISMOS
ENFERMEDAD Y TOMA DE MUESTRA Y
QUE COMUNMENTE
SINTOMAS TRANSPORTE
LA CAUSAN
-Limpieza por arrastre con suero

fisiolgico, luego aplicar trula
en el fondo de la lesin.
-Pus, por aspiracin con aguja y
jeringa.
TRANSPORTE:
Pasteurella multocida.
MORDEDURAS AEROBIO:
Streptobacillus moniliformes.
ANIMALES
Spirillum minus.
Trula en medio de transporte
Stuart.
ANAEROBIOS:

para anaerobios.
AEROBIO: 48 - 72 Hrs. Mnimo.
ANAEROBIO: Informe preliminar a las 48 - 96 hrs.


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LAVADO BRONCO-ALVEOLAR
INDICACIONES:
Paciente con neumona de difcil diagnstico

Pacientes inmunodeprimidos con neumona.
TOMA DE MUESTRA:
Debe ser tomada por un mdico especialista.
TRANSPORTE:
En el mismo set de toma de muestra, de inmediato al laboratorio,

sin refrigerar .
ENTREGA DE RESULTADOS: a las 48 72 hrs.


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LEUCOCITOS FECALES
TOMA DE MUESTRA:
1.- Deposicin por emisin espontnea.
2.- Deposicin obtenida por sonda rectal.
En ambos casos de deposicin se deposita en una frasco de polietileno
limpio, entregar a laboratorio.
LIMITACIONES:
FALSOS NEGATIVOS: deficiente toma de muestra.
FALSOS POSITIVOS: dermatitis del paal.
COLITIS ULCEROSA: leucocitos abundantes.
ENTREGA DE RESULTADOS: Durante el da.


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LIQUIDO ASCITICO
GENERALIDADES:
Liquido peritoneal: lquido ubicado entre el peritoneo parietal y visceral (cavidad

abdominal, peritoneal)
Ascitis: acmulo anormal de lquido en la cavidad abdominal.

Peritonitis: inflamacin del peritoneo.
Peritonitis primaria: peritonitis bacteriana sin evidencia de ruptura de
vscera.
PBE: peritonitis bacteriana espontneas Ascitis (cirrosis).
TOMA DE MUESTRA:
Por puncin y aspiracin de lquido de cavidad abdominal.

-Personal entrenado
-Tcnica asptica
NUMERO DE MUESTRAS:
1. Tubo con Heparina, tapa verde: para anlisis bioqumico (glicemia, protenas,
otros ).
2. Tubo con EDTA, tapa lila: para recuento celular y diferencial.
3.-Tubo estril para microbiologa, tubo tapa roja estril, sin anticoagulante:3-5ml
para gram y cultivo..
4. Inoculacin directa en frasco de hemocultivo peditrico (amarillo), con 1-3 ml de
lquido.
TRANSPORTE:
-Transportar lo antes posible al Laboratorio, a temperatura ambiente.
HORARIO RECEPCION:
Durante las 24 horas.
A las 48 horas, mnimo.


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LIQUIDO ARTICULAR O SINOVIAL
INDICACIONES:
Fundamentalmente para evaluar las alteraciones del lquido sinovial en las artritis.
La inflamacin de estas articulaciones se puede producir por:
Agente fsico o mecnico (traumatismos, gota)

Agentes qumicos (hemofilia)
Artritis supuradas o spticas
Artritis por reacciones inmunolgicas o autoinmunes
Artritis reumatoide y fiebre
TOMA DE MUESTRA: Se realiza por puncin articular:
Personal entrenado
Tcnica asptica
Anestesia local
Procesar antes de 4 horas de obtenido
NUMERO DE MUESTRAS:
1. Tubo con Heparina, tapa verde: para anlisis bioqumico.

3. Tubo estril para microbiologa o tubo tapa roja estril, sin anticoagulante: 3
a 5 ml, para gram y cultivo.
4. Inoculacin directa en frasco de hemocultivo peditrico (amarillo) con 1-3
ml. de lquido.
TRANSPORTE:
Piedra angular del diagnstico etiolgico:
Antes de iniciar antibiticos

Transporte y procesamiento rpido
Sensibilidad de Gram y Cultivo: 60-90%.
Transportar las muestras tomadas, lo ms rpido posible al laboratorio, a

temperatura ambiente.


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HORARIO RECEPCION: Durante las 24 horas.
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 horas, mnimo.


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CULTIVO LQUIDO CEFALORRAQUIDEO (LCR)
INDICACIONES:
-meningitis infecciosa -poliomielitis

-hemorragias menngeas -LES
-encefalitis -sarcoidosis
-neuropatas -vasculitis
-hipertensin intracraneal benigna -sfilis nerviosa
-epilepsia -hidrocefalia normo-tensa
-demencia de origen metablico -sndrome Guillain Barre
-esclerosis mltiple y sus variantes -personas VIH +
-linfoma, leucemia y otro tipo de tumores que involucran al SNC.
TOMA DE MUESTRA:
Muestra obtenida por un mdico entrenado en la tcnica de puncin lumbar.

Tcnica asptica.
PROCEDIMIENTO:
Limpieza por arrastre de la regin lumbar del paciente con agua y jabn.
Limpiar la piel con trula de algodn impregnada con alcohol 70% mediante
movimientos concntricos que van desde el lugar donde se realizar la
puncin, hacia afuera.
Proceder a la puncin lumbar con tcnica asptica (campo estril y equipo
de profesionales con vestimenta de proteccin estril.
Recolectar el LCR en frascos estriles plsticos con tapa rosca
(citoqumico, bacteriolgico y TBC cuando se sospeche).
1.-Tubo con Heparina, tapa verde: para anlisis bioqumico. (Glucosa,
y protenas) .
2.- Tubo con EDTA, tapa lila: para recuento celular y diferencial.
3.- Tubo estril para microbiologa,o tubo tapa roja estril sin anticoa-
gulante, 1-2 ml.: para gram y cultivo.
4.- Tubo estril sin anticoagulante para ADA (TBC).
5.- Tubo estril para cultivo Koch sin anticoagulante.


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Inocular adems, 1 frasco de hemocultivo peditrico (amarillo), con 1
ml. de LCR. si es posible.
Lo adecuado para el estudio bacteriolgico es de 2 ml. de LCR.

En aquellos casos en que se obtiene escasa cantidad de muestra, el clnico
debe indicar orden, cul de los estudios que se realizan con el LCR reviste
mayor importancia.
Otra forma de tomar muestra de lquido cefalorraqudeo es por drenaje
ventricular y por puncin de fontanela.
TRANSPORTE:
Se debe enviar a la mayor brevedad posible al laboratorio, en un tubo

estril plstico tapa rosca, a temperatura ambiente (no refrigerar), junto
con el frasco de hemocultivo.
Transportar dentro de una unidad de transporte trmico.
ENTREGA RESULTADOS: A las 48 hrs. mnimo.
NOTA: Si se enva frasco de hemocultivo con LCR ,no deje de enviar adems LCR
en tubo tapa roja para gram directo y siembra de la muestra.


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LIQUIDO PERITONEAL
En el caso de:
Peritonitis bacteriana 2: perforacin vscera (apendicitis, trauma).

Peritonitis 3: complicacin de peritonitis secundaria.
TOMA DE MUESTRA:
Se realiza durante el intra-operatorio con jeringa estril.
Personal entrenado
Tcnica asptica
Recolectar muestra, en tubo de polietileno, tapa rosca estril o tubo tapa roja, sin
anticoagulante, para estudio microbiolgico, de 3 a 5 ml es suficiente para realizar
el estudio de gram y cultivo.
No se recomienda inocular frasco de hemocultivo, ya que este tipo de muestras

viene con una carga bacteriana alta.
TRANSPORTE:
-Transportar lo antes posible al Laboratorio, a temperatura ambiente, dentro de

una unidad de transporte trmico.
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 horas, mnimo.


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LIQUIDO PLEURAL
INDICACIONES:
Todo paciente que presente signos clnicos y/o radiolgicos de derrame

pleural de etiologa no precisada.
TOMA DE MUESTRA:
Debe ser realizada por un mdico entrenado en la tcnica de toracentesis, la

puncin aspirativa debe realizarse bajo rigurosa tcnica asptica. Se debe
recolectar:
1. Tubo con Heparina, tapa verde: para anlisis bioqumico (glicemia,

protenas, otros)
3. Tubo estril para microbiologa, o tubo tapa roja estril, sin anticoagulante:
3-5ml, para gram y cultivo.
4. Inoculacin directa en frasco de hemocultivo peditrico (amarillo), con 1-3
ml de lquido.
5. Tubo para ADA (TBC) con citrato.
6. Tubo estril para cultivo de Koch.(TBC)
TRANSPORTE:
Transportar lo antes posible al Laboratorio, a temperatura ambiente, dentro de una

unidad de transporte trmico.


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CULTIVO NASAL
Portacin nasal de Staphylococcus aureus est presente en 20 25 % de

individuos sanos en la comunidad y con frecuencia en el ambiente hospitalario
aumenta, de modo que solo se tomarn muestras del personal del hospital en
caso de un brote intrahospitalario bien documentado, que permita establecer que
se trata de la misma cepa, indicado por comit IAAS.
MUESTRA: Secrecin nasal.
TOMA DE MUESTRA:
Introducir trula humedecida en solucin salina y rotar en el vestbulo de

ambas fosas nasales (tabique y cara interna de aletas nasales)
TRANSPORTE:
Trula en medio de transporte Stuart , a temperatura ambiente.


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MYCOPLASMA HOMINIS Y UREAPLASMA UREALYTICUM
Se enva informacin para el cultivo, identificacin y estudio de sensibilidad de

micoplasma urogenitales. Para el diagnstico de micoplasma urogenitales se
realiza:
Cultivo
Identificacin
Recuento
Test de sensibilidad
TOMA DE MUESTRA:
Para muestras vaginales, friccionar bien la mucosa para recoger la mayor

cantidad de clulas posibles.
Efectuar la toma de muestra antes de cualquier antibioterapia.
Se debe aplicar tcnica para evitar las contaminaciones por otras bacterias.
Despus de tomar la muestra, colocar inmediatamente la trula de
DRALON en el frasco R 1 (cortar con tijeras)
Enviar el frasco R 1 al laboratorio.
Identifica: Micoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum.
ANTIBIOTICOS A ESTUDIAR:
Doxicilina Ofloxacina Claritromicina Azitromicina

Eritromicina Tetraciclina Ciprofloxacino
TRANSPORTE:
-Transportar lo antes posible al Laboratorio, a temperatura ambiente, dentro de

una unidad de transporte trmico.
Informe de resultados: A las 48 horas.
Muestras diarias mximas a enviar al laboratorio: 2 muestras hasta las 14 horas,

de lunes a jueves (excepto festivos).


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CULTIVO OCULAR
GENERALIDADES:
1. Muestra precoz, tomada en la forma ms asptica posible y antes de la

aplicacin de antimicrobianos.
2. La actividad antimicrobiana de los anestsicos tpicos usados pueden
interferir con el cultivo.
MUESTRA:
SECRECION OCULAR
RASPADO CONJUNTIVAL
TOMA DE MUESTRA:
Tomar la muestra para cultivo antes de la aplicacin de anestsico tpico.

Tomar la muestra con extremo cuidado, con la ayuda de otra persona que
inmovilice la cabeza del paciente.
Obtener la secrecin con trula estril del fondo de saco inferior en el
ngulo interno del ojo del extremo interior del prpado, previo aseo ocular
con suero fisiolgico.
Rotar la trula suavemente para que toda la superficie del algodn se
empape en la secrecin.
TRANSPORTE:
Introducir la trula en el medio transporte Stuart y mantener a temperatura

ambiente.


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CULTIVO OTICO
Fluido del odo medio obtenido por Timpanocntesis ( no es un

procedimiento de rutina)
Secrecin del conducto auditivo externo.
TOMA DE MUESTRA:
1. TIMPANOCENTESIS: La muestra debe ser tomada por un

Otorrinolaringlogo.
2. SECRECION CONDUCTO AUDITIVO EXTERNO:
Aseo cuidadoso de la piel con suero fisiolgico para disminuir

posibilidades de arrastrar bacterias presentes normalmente en esta
zona.
Tomar con una trula fina llegando hasta las cercanas del tmpano.
Dirigir la trula en sentido oblicuo de atrs hacia adelante y de abajo
hacia arriba.
TRANSPORTE:
Cultivo aerobio: Transportar a temperatura ambiente en medio Stuart.
Cultivo anaerobio: Transportar en medio anaerobio comercial, a temperatura

ambiente.
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 horas mnimo.


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ROTAVIRUS Y ADENOVIRUS (Por Enzimoinmunoensayo) en deposiciones.
Rotavirus es el virus que ms frecuentemente produce diarrea en los nios

y se trasmite por contacto con alimentos, manos u objetos contaminados por
deposiciones de personas infectadas. Se presenta en forma ms grave en
menores de 2 aos y se cree que a los 3 aos todos los nios ya han tenido
contacto con el virus.
Adenovirus, corresponden a un grupo de virus que causan diferentes tipos

de enfermedades en el hombre. La mayora de ellos producen infecciones
respiratorias, y otros, menos frecuentemente, infecciones gastrointestinales.
Pueden afectar a personas de cualquier edad aunque es ms frecuente en los
nios. Se presentan durante todo el ao con un discreto ascenso a fines del
invierno, primavera y principios del verano.
TOMA DE MUESTRA:
1. Deposicin por emisin espontnea

2. Deposicin obtenida por sonda rectal.
3. Depositar en caja o frasco plstico limpio entregada por laboratorio.
4. La muestra para leucocitos fecales sirve adems para pesquisa de rotavirus.,
si la cantidad es de aproximadamente de 2 ml. de deposicin lquida o una
porcin de 1 2 gramos de deposicin slida.
TRANSPORTE:
Llevar al Laboratorio, en caja o frasco plstico a temperatura ambiente.


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CULTIVO SENOS PARANASALES
MUESTRA:
Aspirado obtenido por puncin de los senos paranasales.
TOMA DE MUESTRA:
La muestra debe ser obtenida por otorrinolaringlogo.

Limpiar la mucosa nasal en el punto de la aspiracin para eliminar
microorganismos contaminantes.
Obtener el aspirado por puncin asptica con jeringa.
CULTIVO AEROBIO:
Depositar la muestra en medio de transporte Stuart y enviar a temperatura

ambiente.,
ENTREGA DE RESULTADOS: 48 horas mnimo.
CULTIVO ANAEROBIO:
Enviar en medio de transporte comercial para anaerobios, a temperatura

ambiente.,
Informe preliminar a las 48 96 Horas.


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CULTIVO TEJIDOS, BIOPSIAS y ABSCESOS.
El examen microbiolgico de tejidos obtenidos por ciruga o muestras de

biopsias se consideran importantes, porque este tipo de muestras pueden
representar al proceso patolgico entero.
Las muestras quirrgicas van a depender del sitio anatmico, del tipo de
enfermedad, como tambin del cuidado del cuidado ejercitado durante el corte
quirrgico y dela informacin mdica, lo que ayudar a buscar el agente
etiolgico.
TOMA DE MUESTRA:
Debe ser realizada por profesional idneo.

Cuando la lesin es grande o numerosa deben tomarse varias muestras
desde diferentes sitios.
En casos de escaras, deben ser removidas antes de realizarse la biopsia y
recolectar al menos 1 gr. de tejido.
1. TEJIDOS BLANDOS: Extraer la muestra con aguja y jeringa cuando la lesin

permita la incisin y drenaje, o un trozo de tejido obtenido con tcnica
asptica.
2. MUESTRAS DE TEJIDOS POSTMORTEM: limitado para rganos especficos

en el cual se sospecha la infeccin.
3. MUESTRAS DE AUTOPSIA: obtener una porcin grande de tejido con al

menos, una superficie serosa o capsular intacta.
4. ABSCESOS: debe incluir una muestra del contenido lquido interno como
tambin una porcin de las paredes. Extraer con aguja y jeringa.


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TRANSPORTE AEROBIO:
Las muestras de biopsias y / o tejidos se colocan dentro de un frasco estril

de boca ancha.
Si la muestra es pequea o escasa, colocar suero fisiolgico.
En casos de abscesos colocar en tubo estril o en medio de transporte
Stuart sin la trula.
. TRANSPORTE ANAEROBIO:
Enviar en medio de transporte comercial para anaerobios, a temperatura

ambiente.
ENTREGA DE RESULTADOS: 48 hrs. mnimo


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MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL FEMENINO.
SITIO
MICROORGANISMOS MUESTRA RECOLECCION DE MUESTRA
ANATOMICO
TRANSPORTE
1.- irrigar con 0,5 ml. de suero
fisiolgico y aspirar.
VULVA Haemophilus ducreyi. Aspirado trula
2.-Tomar muestra desde la
lesin con trula humedecida
con suero fisiolgico.
Aspirar el absceso
con aguja y jeringa, previo aseo
genital.
Neisseria gonorrhoeae
GLANDULA
C. trachomatis. Aspirado de
DE CULTIVO AEROBIO:
Bacterias aerobias la glndula.
BARTHOLINO Enviar en medio de
y anaerobias.
transporte Stuart.
U.urealyticum.
CULTIVO ANAEROBIO:
En medio de transporte comercial.
1.-Realizar aseo genital segn
normativa.
2.-Colocar espculo sin lubricante.
3.-Introducir una sonda
a travs de la vagina,
Trichomonas vaginalis.
conectada a una jeringa
Candida albicans.
VAGINA Secrecin vaginal. que contenga 2 ml. de
Gardnerella vaginalis.
suero fisiolgico.
Streptococcus Grupo B.
4.-Hacer lavado vaginal
con el suero fisiolgico.
5.-Colocar el producto
del lavado en tubo estril.


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1.-Realizar aseo genital segn

VAGINA normativa
2.-Tomar la muestra con trula de

Listeria monocytogenes. Trula vaginal
la mucosa vaginal.
3.-Enviar en medio de transporte

Stuart.
1.Realizar aseo genital segn

normativa.
2.Limpiar crvix de secrecin
Trula en medio de vaginal y mucus.
CERVIX Neisseria gonorrhoeae
transporte Stuart. 3.Usar espculo sin lubricante.
4.Tomar muestra de exudado
endocervical haciendo rodar la
trula.
Aspirado transcervical a travs

Bacterias aerobias y de cateter.
ENDOMETRIO Aspirado trula
anaerobias. Trula en ciruga en medio
C.trachomatis. de transporte Stuart.
Neisseria gonorrhoeae.
TROMPAS DE
C. trachomatis. Aspirado trula La toma de muestra se hace
FALOPIO
bacterias aerobias y en la ciruga.
anaerobias.
Amniocntesis.
LIQUIDO Bacterias aerobias y Catter intrauterino.
Lquido amnitico
AMNIOTICO anaerobias. Trula desde cesrea
en medio de transporte Stuart.
NOTA: Los aspirados para cultivo aerobio se pueden transportar en medio Stuart sin la
trula. Para cultivo anaerobio utilizar medio comercial anaerobio.


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MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL MASCULINO
SITIO RECOLECCION DE
MICROORGANISMO MUESTRA
ANATOMICO MUESTRA
Y TRANSPORTE
Neisseria
gonorrhoeae. Post masaje
Masajear prstata a
Escherichia coli. prosttico
travs del recto.
Enterobacter spp. de secrecin
Colocar lquido en tubo
Klebsiella spp. uretral
estril o con trula en medio
PROSTATA: Proteus spp. tomada por
de transporte Stuart.
Serratia spp. urlogo.
Colocar en tubo estril
Pseudomonas spp.
Enrerococcus. Cultivo de
Staphylococcus semen
Saprophyticus.
Post masaje
prosttico
ABSCESO Staphylococcus Secrecin
Idem al anterior
PROSTATICO aureus uretral
tomada por
urlogo.
Neisseria
Secrecin
gonorrhoeae.
uretral
Chlamydia
Orina de
trachomatis. Trula en medio de
EPIDIDIMO primera
Enterobacterias transporte Stuart.
miccin.
Pseudomonas spp. Tubo estril.
Cultivo de
Cocaceas gram
semen
positivas.
Secrecin
Enterobacterias.
TESTICULAR tomada con En medio de transporte
Staphylococcus spp.
(ORQUITIS) trula en la Stuart.
Streptococcus spp.
ciruga.


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Realizar aseo genital.

Chlamydia Exteriorizar la secrecin
trachomatis. por presin de uretra hacia
Secrecin
Neisseria Introducir trula de
uretral.
URETRAL: gonorrhoeae. DRALON 2 cms.
Haemophilus spp. Rotar trula.
Ureaplasma Colocar en medio
urealyticum. de transporte.


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UROCULTIVO.
INDICACIONES:
1. Sospecha ITU: Disuria, hematuria, orinas turbias, mal olor.

2. Sndrome febril en estudio.
3. Examen pre-operatorio.
4. Previo procedimiento invasivo urolgico.
TOMA DE MUESTRA:
Tomar la primera miccin de la maana. Si no es posible, dejar

permanecer la orina en la vejiga el mayor tiempo posible para aumentar el
nmero de microorganismo para volumen.(> 4 horas)
La orina es un lquido estril, pero bajo ciertas condiciones puede
contaminarse con flora de la uretra, prstata o perin.
ORINA DE 2 CHORRO:
Este mtodo depende de la edad, sexo y habilidad del paciente para

cooperar. Debe instruirse al paciente en forma verbal y escrita (pacientes
que se les da hora) para tomar la muestra.
Debe ser tomada por personal adiestrado.
TOMA DE MUESTRA PARA PACIENTES FEMENINAS:
Lavarse las manos con agua y jabn, enjuagarse y secar con toalla nova.
Realizar aseo genital: con una trula de algodn con jabn, limpie los labios
mayores por separado, con un solo movimiento de arrastre de arriba hacia
abajo. Separe los labios mayores con el dedo ndice y pulgar y limpie en la
misma forma los labios menores y vestbulo.
Enjuagar con agua tibia usando el resto de las rtulas de algodn.
Colocar un tapn de gasa estril en la vagina.
Orinar una cantidad pequea en el bao y despus recolectar la orina
restante en un tubo estril o frasco. Cerrar evitando el contacto con dedos,
genitales externos o ropa.
Sacar tapn vaginal y eliminar.
Enviar antes de una hora al laboratorio.


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TOMA DE MUESTRA PARA PACIENTES MASCULINOS:
Lavarse las manos con agua y jabn, enjuagar y secar con toalla nova.
Lavado: retrae el prepucio, limpiar con trula de algodn y jabn
prolijamente con movimiento de arrastre.
Enjuagar con agua tibia y secar con trula de algodn.
Orinar: el primer chorro se elimina: recolectar la muestra de orina restante
directo al tubo estril.
Cerrar el tubo.
CATETER DE PERMANENCIA PROLONGADA (PUNCION):
Desinfectar sonda con una trula de algodn con alcohol 70 .dejando

que se evapore.
Puncionar directamente el catter con aguja en extremo distal de la sonda.
Colocar la orina aspirada en un frasco o tubo estril
CATETERIZACION:
Obtener orina por mtodo de cateterizacin de la vejiga con tcnica

asptica.
No se recomienda rutinariamente por el riesgo de introducir bacterias a la
vejiga.
Indicar en la orden de laboratorio muestra tomada por catter.
PUNCION VESICAL:
Obtenida por tcnica asptica por mdico.

Indicar en la orden: muestra por puncin.


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TRANSPORTE:
En el mismo tubo o recolector con orina, enviar antes de 1 hora al
laboratorio.
Transportar a temperatura ambiente, dentro de una unidad de transporte
trmico.
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 24 48 horas.


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VIRUS RESPIRATORIOS POR IFI.
Virus respiratorio Sincicial

Adenovirus
Parainfluenza 1- 2- 3
Influenza A
Influenza B
La actividad ms importante desarrollada por la seccin de

inmunofluorescencia es la determinacin de infecciones por virus respiratorios, los
cuales estn asociados a infecciones respiratorias agudas del tracto respiratorio
bajo y representan una de las principales causas de hospitalizacin en menores
de dos aos.
Las infecciones respiratorias agudas bajas ocupan el primer lugar en la tasa

de mortalidad entre el mes y los doce meses y el segundo lugar desde el ao a los
cuatro aos de vida. La mortalidad se incrementa ante la presencia de factores de
riesgo como displasia broncopulmonar en prematuros, cardiopatas congnitas,
inmunosupresiones, etc.
Los agentes etiolgicos asociados con mayor frecuencia a infecciones

respiratorias agudas bajas son los virus respiratorios, principalmente el virus
sincicial respiratorio, adenovirus y parainfluenza. El adenovirus es el agente
etiolgico de mayor gravedad con una mortalidad de hasta 10% con secuelas
como bronquiectasias, bronquiolitis obliterante o fibrosis pulmonar.
TOMA DE MUESTRA: ASPIRADO NASOFARINGEO
Muestra tomada por profesional idneo.

Muestra ptima es el aspirado nasofarngeo.


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MATERIALES. UNA BANDEJA CON:
1. Tubo estril, provisto de doble entrada.

2.- Una sonda estril para aspiracin (nelatn N 8)
3.- Gradilla para tubos en cubeta con bao de hielo.
4.- Bomba de vaco.
5.- Un par de guantes estriles.
PROCEDIMIENTO:
- Lavarse las manos

- Colocarse guantes
- Conectar el tubo a la sonda de aspiracin y al sistema de aspiracin.
- Introducir la sonda sin aspirar, por una fosa nasal hasta la nasofaringe y
retirar la sonda aspirando.
- Repetir el procedimiento en la otra fosa nasal.
- Aspirar un volumen aproximado de 6 8 ml. de solucin buffer pH 7.2. fro,
a travs del tubo
- Cambiar la tapa del tubo colectar.
- Enviar al laboratorio con la orden de examen. La muestra debe permanecer
todo el tiempo hasta la llegada al laboratorio, en bao de hielo.
- Se deben enviar inmediatamente.
TRANSPORTE:
La muestra debe ser transportada al laboratorio en tubo plstico, estril,

con tapa rosca, con 6-8 ml. de solucin buffer pH 7.2, con unidad
refrigerante, dentro de una unidad de transporte trmico.
Enviar de inmediato.
HORARIO DE RECEPCION : hasta las 8:30 horas.


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BORDETELLA POR IFD.
Una de las actividades de la seccin de inmunofluorescencia es la

determinacin de infecciones por Bordetella pertussis, patgeno exclusivamente
humano, agente etiolgico de la coqueluche o tos convulsiva, enfermedad
endmica con ciclos epidmicos cada tres o cuatro aos. Produce una infeccin
respiratoria aguda, grave, altamente contagiosa, de declaracin obligatoria cuyas
manifestaciones clnicas dependen de la edad del paciente, el estado
inmunolgico, nutricional y que afecta mayoritariamente a los nios menores de un
ao de edad.
La transmisin de la enfermedad ocurre de persona a persona a travs de

aerosoles o gotas de secrecin de un individuo infectado. Luego de un perodo de
incubacin en general de siete das comienza la fase catarral que dura de una a
dos semanas y cuya sintomatologa puede confundirse con otras infecciones
respiratorias. Esta es la etapa ms contagiosa de la enfermedad. La siguiente fase
es la paroxstica que dura entre tres y seis semanas, presentndose con accesos
de tos, estridor inspiratorio y vmitos despus de la tos. En nios pequeos
pueden no desarrollarse paroxismos ni estridor pero pueden presentar cianosis,
apnea y muerte sbita. El ltimo perodo es el de convalecencia que puede llegar
a durar varios meses.
TOMA DE MUESTRA: ASPIRADO NASOFARINGEO
Muestra tomada por profesional idneo.

Muestra ptima es el aspirado nasofarngeo.


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MATERIALES. UNA BANDEJA CON:
1. Tubo estril, provisto de doble entrada.

2.- Una sonda estril para aspiracin (nelatn N 8)
3.- Gradilla para tubos en cubeta con bao de hielo.
4.- Bomba de vaco.
5.- Un par de guantes estriles.
PROCEDIMIENTO:
- Lavarse las manos

- Colocarse guantes
- Conectar el tubo a la sonda de aspiracin y al sistema de aspiracin.
- Introducir la sonda sin aspirar, por una fosa nasal hasta la nasofaringe y
retirar la sonda aspirando.
- Repetir el procedimiento en la otra fosa nasal.
- Aspirar un volumen aproximado de 6 8 ml. de suero fisiolgico, a travs
del tubo colector para arrastrar toda la secrecin.
- Cambiar la tapa del tubo colectar.
- Enviar al laboratorio con la orden de examen. La muestra debe permanecer
todo el tiempo hasta la llegada al laboratorio, en bao de hielo.
- Se deben enviar inmediatamente.
TRANSPORTE:
La muestra debe ser transportada al laboratorio en tubo plstico, estril,

con tapa rosca, con 6-8 ml. suero fisiolgico, con unidad refrigerante,
dentro de una unidad de transporte trmico.
Enviar de inmediato.


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La recepcin de las muestras se realizara en jornada normal entre las

8:00am a las 8:30pm de lunes a viernes; durante campaas de invierno se
recepcionarn las muestras en el mismo horario de jornada normal de lunes a
domingos.
Cada muestra para ser recepcionada debe venir con su respectiva orden y
rotulada en forma legible, bien sellada y como punto crtico que traiga una buena
muestra de secrecin nasofarngea; muestras que no traigan una buena muestra,
mal rotuladas o mal selladas deben ser devueltas al servicio de origen.


Pgina 58 de 59
BIBLIOGRAFIA.
Ulloa, Valenzuela, Pefaur, Martnez. Manual de Procedimientos de

Muestras Clnicas para diagnstico bacteriolgico. 1995 Santiago.
Lennette, Balows, Hauster y Shadomy. Manual de Microbiologa Clnica.

4ta. Edicin 1991, Washington D.C.
Procedimientos tcnicos de Laboratorio Clnico. Vol. 1 Instituto Salud

Pblica, 1994.
Murray, Baron, Jorgensen, Landry, Pfaller. Manual de Microbiologa Clnica.

9 Edicin 2007.
Koneman E, Allen S, Dowell V, Sommers H. Diagnstico microbiolgico.

Editorial Mdica Panamericana. 3a ed. 1992, Buenos Aires.
Lauderdale T, Chapin K, Murray P. Reagents. En: Murray PR, Baron EJ,

Pfaller MA, Tenover FC. Yolken RH. Manual of Clinical Microbiology. 7a ed.
Washington DC: American Society for Microbiology; 1999.
Mc Clatchey KD. Clinical Laboratory Medicine. Baltimore: Williams and

Wilkins, Baltimore, MD, 1994.
Koneman EW, Allen SD, Janda WM ,Schreckenberger PC, Winn WC. The
Role of the Microbiology Laboratory in the Diagnosis of Infectious Diseases:
Guideline to Practice and Management. En: Diagnostic Microbiology. 5th ed.
Philadelphia: JB Lipincott Company, 1997.
Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Tenover FC, Yolken RH. Manual of
Clinical Microbiology 7th ed. American Society for Microbiology, Washington
DC 1999.
Murray PR. Specimen Collection and Transport. ASM Pocket Guide to

Clinical Microbiology. Washington, 1996; 3: 40-705.


Pgina 59 de 59
Miller JM. A Guide to Specimen Management in Clinical Microbiology. 1996.

American Society for Microbiology, Press Wasington DC1996; 3: 37-115
Henry JB. Diagnstico y Tratamiento Clnicos por el Laboratorio. 9 Ed.

Masson-Salvat, Ediciones Cientficas y Tcnicas, SA. Mexico, 1997.
Gilberto AM, Mauricio AR. Interpretacin Clnica del Laboratorio. 6 ed. Ed.
Mdica Panamericana. LDA, Colombia, 2000.

Manual Toma de Muestras Microbiologia. Hospital de Rancagua. 2011

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Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

TM. Antonio Sanaguas

Fecha: 01/08/2011 Fecha: 21/09/2011 Fecha: 21/09/2011

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Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

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LIQUIDO ARTICULAR O SINOVIAL 32

Manual Toma de Muestras Microbiologa

Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

El diagnostico de las enfermedades infecciosas, se basa en el estudio de

Requisitos para una buena toma de muestra.

1. Personal idneo en la toma de muestra.

2. Indicaciones claras al paciente respecto del examen se le va a realizar.

3. Preparacin adecuada del paciente, como aseo previo, uso de antispticos,

4. Muestra representativa del proceso infeccioso.

5. Muestra tomada antes del tratamiento antimicrobiano. De lo contrario

6. Muestra tomada con la cantidad adecuada.

7. Uso correcto de los medios de transporte.

Manual Toma de Muestras Microbiologa

Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

MUESTRA MEDIO DE TRANSPORTE

Aspirado nasofarngeo para virus respiratorios. Buffer pH 7.2.

Aspirado nasofarngeo para Bordetella. Suero fisiolgico.

Coprocultivo. Cary Blair.

Secreciones en trula. Stuart.

8. Nmero de muestras adecuada.

9. Las muestras recolectadas en tubos estriles sin medio de transporte, deben

10. Como bioseguridad, las muestras deben transportarse al laboratorio, dentro de

11. Especificar examen solicitado, bacteria o grupo de microorganismo que se

12. Frente a cualquier duda o consulta referente a determinada muestra, resultado

13. Es importante que la solicitud de examen, especifique la edad del paciente, ya

Manual Toma de Muestras Microbiologa

Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

Uso correcto de las rdenes de exmenes.

PARALISIS FLACCIDA: Formulario especial del ISP

SARAMPION: Formulario especial del ISP

HANTA VIRUS: Formulario especial del ISP

Manual Toma de Muestras Microbiologa

Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

NORMA DE TOMA DE CULTIVOS.

En relacin a la solicitud de cultivos microbiolgicos, se recomienda lo

La solicitud de toma de cultivo debe corresponder a una hiptesis

No est indicado realizar cultivos rutinarios de vigilancia, como escaras y

Se debe consignar la toma de muestras en la ficha clnica y hoja de

En el caso de mltiples heridas o escaras con signo de infeccin, se

Se debe considerar adems, que al solicitar un cultivo se debe esperar su

No est indicado tomar muestras de loquios, objetos inanimados, manos y

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COMITE DE INFECCIONES ASOCIADAS A LA ATENCION DE SALUD IAAS.

Criterios de Rechazo de Solicitudes y/o Muestras

Si las solicitudes y/o las muestras no cumplen los requisitos mnimos

A. Discrepancia entre la identificacin del paciente que figura en la solicitud del

Manual Toma de Muestras Microbiologa

Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

TOMA DE MUESTRA: Debe ser realizada por profesional idneo

SITIO ANATOMICO MUESTRA METODO

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Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

Abrir y hacer aspiracin

Cantidad de muestra: En lo posible 1-5 ml