FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Y CIENCIAS DE LA

SALUD
Escuela Profesional de Farmacia y Bioqumica

PRACTICA 8

DETERMINACIN DE MICROORGANISMOS
EN CULTIVO DE ORINA

CURSO: MICROBIOLOGIA GENERAL

DOCENTE: VANIA MALLQUI BRITO

INTEGRANTES:

QUIQUIA URRIBARRE DIANA

TENORIO HUAMANI SONIA

ALDERETE CARHUAS JHANET

VELASQUEZ GARCIA ROCIO

QUISPE NAPAN PATRICIA

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 NDICE

I. OBJETIVOS..

II. MARCO TERICO......

2.1. Infeccin urinaria.....

2.2. Definiciones.....

2.3. Agentes etiologicos....

2.4. Patogenia.......

2.5. Mecanismo de virulencia.......

III. MATERIALES Y EQUIPOS.....

IV. PROCEDIMIENTO...

4.1. Examen fsico de la muestra de orina

4.2. Examen de sedimento de la muestra de orina..

V. FLUJOGRAMA

V.I. CONCLUSIN.

V.II BIBLIOGRAFA....

OBJETIVOS:
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MARCO TEORICO:
INFECCIN URINARIA
Se considera infeccin urinaria a la presencia de bacterias en sectores normalmente
estriles del aparato urinario, con la consiguiente respuesta inflamatoria. Las
infecciones urinarias (IU) constituyen una patologa muy frecuente, de elevada
morbilidad, en muchos pacientes son recurrentes o pueden determinar
complicaciones graves como sepsis o secuelas importantes, como dao renal.
Desde el punto de vista anatmico, cabe recordar la divisin del tracto urinario en
dos sectores, alto (riones, pelvis renales y urteres) y bajo (vejiga y uretra). (1)

DEFINICIONES
Bacteriuria: presencia de bacterias en la orina.
Bacteriuria sintomtica o asintomtica: segn se acompae o no de
sntomas vinculados al aparato urinario.
Bacteriuria significativa: nmero de bacterias por mililitro de orina que se
corresponde estadsticamente con una infeccin urinaria. (1)

AGENTES ETIOLGICOS
En la gran mayora de los casos, se trata de infecciones monomicrobianas y
predominan los bacilos gramnegativos. Los agentes pueden variar segn la edad,
sexo y patologa subyacente. El agente ms frecuente es Escherichia coli. En las
infecciones de pacientes ambulatorios predomina E. coli, seguido de Klebsiella spp.,
Proteus spp. y otros bacilos gramnegativos y cocos grampositivos, como S.
saprophyticus, Enterococcus spp. Y Streptococcus agalactiae. Proteus spp. Suele
asociarse a anomalas de la va urinaria, especialmente litiasis. Ms raramente
Haemophilus influenzae se asla de infecciones comunitarias. En infecciones
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hospitalarias, pacientes con enfermedad urolgica subyacente o portadores de
sondas, la frecuencia relativa de E. coli disminuye y se aslan Pseudomonas spp.,
otros bacilos gramnegativos no fermentadores, enterobacterias como Klebsiella
spp., Enterobacter spp., Serratia spp. y levaduras. Suele tratarse adems de cepas
ms resistentes a los antibiticos. Infecciones por S. aureus o Salmonella spp.
Indican generalmente infeccin renal metstasica en el curso de una bacteriemia.
Cabe recordar que Mycobacterium tuberculosis tambin puede producir infeccin
renal por va hematgena. Las IU polimicrobianas son excepcionales y se observan
en sondados o pacientes con fstulas que comunican la va urinaria con intestino o
vagina. Adenovirus tipo 11 causa cistitis hemorrgia epidmica, especialmente en
nios varones. Chlamydia trachomatis produce uretritis que ser tratada en otro
captulo. El papel de otros agentes (Gardnerella vaginalis, Mycoplasma h ominis,
Ureaplasma urealyticum) ha sido postulado, pero no del todo aclarado. (2)

PATOGENIA
En la gran mayora de los casos, la IU es causada por microorganismos del tubo
digestivo del propio paciente, que alcanzan el tracto urinario por la va ascendente.
Ms raramente lo hacen por va hematgena, en el curso de una bacteriemia a partir
de un foco a distancia. Una vez en la va urinaria deben ser capaces de adherirse y
multiplicarse. Como en otros casos, que se desarrolle o no IU depende de los
mecanismos de defensa del husped y los atributos patognicos del germen. (2)

MECANISMOS DE VIRULENCIA

Las cepas de Escherichia coli (E.coli) uropatgenas (UPEC) suelen diferir de otras
cepas de E. coli que integran la flora fecal y no se encuentran como agentes de IU (no
uropatgenas). Cepas de UPEC demuestran una mayor capacidad de adherencia a
clulas del epitelio vaginal y urinario, resistencia al poder bactericida del suero,
produccin de hemolisina, y mayor produccin de antgeno capsular (antgeno K).
Pertenecen adems a un limitado nmero de serogrupos (O1,O2, O4, O6, O7, O8,
O9, O11, O18, O22, O25, O62 Y O75) .La adherencia es importante no solo en la
infectividad, sino que ciertas cepas exhiben una mayor capacidad de producir IU altas. La
adhesin est mediada por ligandos especficos que se unen a receptores del
husped. Esos ligandos son pequeas protenas localizadas en los pili. (1)
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MATERIALES Y EQUIPOS:
Centrifuga.
Algodn.
Tubos de prueba de 13 x 100 mm.
Gradillas
Placas Petri
Agar Macconkey

Agar Macconkey Tubos de ensayo y

gradilla

PROCEDIMIENTO

EXMEN FISICO DE LA MUESTRA DE ORINA

Contenida en un frasco limpio. Primero se homogeniz la muestra del frasco para
luego trasvasarlo a un tubo de ensayo limpio y estril, para poder observar los
siguientes parmetros:

Color: amarillo
Aspecto: trasparente

EXMEN DE SEDIMENTO DE LA MUESTRA DE ORINA

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a) En el exmen de sedimento se procedi a centrifugar la muestra de orina
contenida en el tubo a 2500 rpm en un tiempo de 10 minutos.
b) Se decanta todo el sobrenadante quedando solo el sedimento.
c) Se cogi un poco de orina centrifugada del frasco inicial con un asa calibrada
de 1 ul (volumen del asa 0.001 ml), que es lo comnmente usado, aunque el
dimetro del asa puede ir de1 ul a 10 ul.
d) Se inoculo la muestra por estra simple en el medio de cultivo
agar Macconkey, se esteriliz el asa de siembra al fuego del mechero de
busten, hasta dejar la punta a rojo vivo, luego se dej enfriar el asa de
siembra por unos 5 minutos.

El agar Macconkey es un medio selectivo y diferencial utilizado para la

recuperacin de enterobacterias y bacilos Gram negativos entricos
relacionados. Contiene sales biliares y cristal violeta que inhiben el desarrollo
de bacterias Gram positivas y de algunas Gram negativas exigentes. La
lactosa es la nica fuente de carbono. El indicador es el rojo neutro.

Las bacterias fermentadoras de lactosa forman colonias de diferentes tonos

de rojo. Los fermentadores fuertes de lactosa pueden provocar la
precipitacin de las sales biliares por la gran cantidad de cidos formados, lo
que se observa fcilmente en el medio por la aparicin de zonas opacas
alrededor de las colonias. Las bacterias que no fermentan la lactosa forman
colonias incoloras o trasparentes.

e) Una vez sembradas las placas, stas fueron incubadas a 35C 37C por 24
horas.

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 Con asa de siembra tomar
muestra

Se trabaja con el
sedimento de orina.

Se inocula muestra en el agar Sembradas las placas incubar

por estra simple a 37C por 24 horas

RESULTADO
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Despus de 24 horas se observaron las placas de Agar Macconkey en la zona de
inoculacin, no se hall crecimiento de colonias bacterianas, por tal motivo se
diagnostic como:

Urocultivo negativo a las 24 horas.

Se observan las estras sin

No se observan colonias crecimiento bacteriano
resultado negativo.

CONCLUSIONES

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BIBLIOGRAFA

1. M. Torres, A. Mattera .Infeccin urinaria. TEMAS DE BACTERIOLOGA Y

VIROLOGA MDICA. Pgina 189.
http://www.higiene.edu.uy/cefa/2008/infeccionurinaria.pdf

2. C. Ruiz de Alegra Puig y B. Perea Lpez. Indicaciones y valoracin clnica del

urocultivo y coprocultivo. Medicine. 2010;10(49):3317-20
http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/Urocultivo_coprocultivo_indica
ciones_Medicine2010.pdf