Sunteți pe pagina 1din 6

UNIVERSITATEA DE TIINE AGRONOMICE I MEDICIN VETERINAR DIN BUCURETI

BIOPREPARATE
DESTINATE STIMULRII
CRETERII PLANTELOR
DE TOMATE

Profesori coordonatori : Catalina Voaides, Oana Sicuia


Studenta: Toma Iulia Ion
Grupa :6401 B
CUPRINS

Introducere

CAPITOLUL I - Stadiul actual al cunoaterii n domeniul temei abordate

1. Biopreparate microbiene de uz agricol


2. Mecanisme de promovare a creterii plantelor
(fitohormoni, biodisponibilizare compui greu solubili cu P, Zn etc., activitate ACC-
deaminazic .a. descrierea mecanismelor)
3. Specii bacteriene cu activitate de stimulare a creterii plantelor
Genul Bacillus
Genul Pseudomonas
(caractere morfologice, celulare i de cultur/coloniale, proprietari PGPB)
4. Biopreparate bacteriene i forme de condiionare

CAPITOLUL II - Contribuii personale

1. Scop i obiective

2. Materiale i Metode
2.1. Materiale utilizate
- tulpini microbiene
- medii de cultur
2.2. Metode de selectare a tulpinilor bacteriene
2.3. Metode de identificare a tulpinilor selecionate
2.4. Testarea in vitro a efectului stimulator aspra germinrii seminelor de tomate
2.5. Condiionarea tulpinilor bacteriene selecionate
2.6. Testarea in vivo a biopreparatelor bacteriene asupra rsadurilor de tomate

3. Rezultate i discuii
3.1. Tulpini bacteriene selecionate
3.2. Identificarea i caracterizarea tulpinilor selecionate
3.3. Efectul bacterizrii asupra germinrii seminelor de tomate
3.4. Efectul biopreparatelor bacteriene asupra stimulrii creterii plantelor de tomate.
Legumele au un rol deosebit n alimentaie, datorat att coninutului complex de substane
nutritive i energetice, dar i influenei favorabile asupra tuturor funciilor organismului uman.
Cele mai multe legume au proprieti organoleptice foarte diferite n funcie de un soi, unele
dintre ele fiind bogate n uleiuri eterice, glicozizi ce stimuleaz pofta de mncare, pigmeni i
vitamine cu rol antioxidant (Apahidean i Maria Apahidean, 2000; Ciofu i colab., 2004; Berar
i Pota, 2005; Indrea i colab., 2012).
Specia Lycopersicon esculentum Mill. aparine genului Lycopersicon, subfamilia
Solanaceae, familia Solanaceae cu formul genomic 2n=24. n Romnia se folosete un
sortiment de peste 70 de soiuri, hibrizi i populaii locale.
La nivel global, sortimentul este mult mai diversificat, peste 500 de specii de tomate,
catalogat conform preferinelor consumatorilor, intereselor productorilor i n acord cu
normele ecologice i cu sistemele de cultur (Stan i colab., 2003; Ciofu i colab., 2004).
Ptlgeaua roie este o plant ierboas, anual la noi n ar, fiind una din legumele cele mai
folosite i mai valoroase din punct de vedere alimentar.
Modificrile biochimice se caracterizeaz prin nsuiri, care dau calitatea comercial
i valoarea alimentar a tomatelor, precum gustul, fermitatea, culoarea i aroma. n timpul
maturrii fructelor se acumuleaz compui organici glucide, proteine, lipide, ap i substane
minerale. Coninutul de glucide, substane fenolice i acizi organici i raportul dintre ele, la
tomatele n curs de maturare, determin gustul caracteristic ale acestora (Gherghi i colab.,
1983; Burzo i colab., 2000; Sand, 2001).

La ora actual, cea mai important direcie de perspectiv pentru combaterea bolilor plantelor
de cultur: plante legumicole, via de vie, etc., este obinerea preparatelor microbiene pe baz
de bacterii i ciuperci, direcie care necesit studii de izolare i selecie a microorganismelor cu
efect antagonist, studii de tehnologie, toxicologie i testri pe bacteriile i ciupercile patogene.
Bacteriozele sunt maladii produse de bacteriile fitopatogene ca: Xanthomonas campestris,
Erwinia carotovora, Pseudomonas lacrymans, Agrobacterium tumefaciens, etc. [1. Broggini,
G., 2005 - Plant Pathology, vol. 111, nr.2, pp. 93-100. 2. Cook, R.J., 2000 - Phytopathol, 38:95-
116. 3. Severin V., 2006 -Bolile bacteriene ale plantelor, pp. 244. 4. Vernescu, S.V., 2003 -
Protecia plantelor, Ed. Printech. 5. Vernescu, S.V., 2004 - Patogenii i dunatorii plantelor de
cultur, pp. 35-40, Ed. Pantheon.]
n prezent, cercetrile de protecie fitosanitar a viei de vie, plantelor legumicole i a altor
plante de cultur sunt orientate spre gsirea mijloacelor de obinere a maximului de recolt in
condiiile conservarii i potenrii active i dinamice a sistemului natural exploatat. Astfel se
aprofundeaz studii privind combaterea integral i raional a bolilor i dunatorilor plantelor
hortiviticole prin creterea ponderii fitoproteciei sanitare, biologice i biotehnice n scopul
eliminrii pesticidelor foarte toxice i poluante. Exist diferite microorganisme utilizate ca
antagoniti microbieni pentru bacterioze printre care Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Bacillus
amyloliguefaciens, Bacillus licheniformis, Bacillus megaterium, etc. [6] care conin
lipoproteine cu efect de antibiotic.
[6. Xu, Jin, 2003 - Plant Protection, vol. 29, nr. 5, 40-42.]
Biopreparatele de uz agricol, realizate pe baza unor microorganisme constituie o orintare
important n agricultura modern, datorit avantajelor pe care le prezint i anume: reducerea
polurii mediului acvatic i terestru, sunt bine tolerate de fiinele vii i nu au efecte secundare
asupra omului i animalelor vizavi de produsele chimice.
1. Specii bacteriene cu activitate de stimulare a creterii plantelor
Genul Bacillus
Genul Pseudomonas
Bacillus subtilis este o specie de bacterii bine studiate, omniprezente n natur utile
pentru domeniul biotehnologiei, industriale i aplicaii agricole
Specia grupului subtilis Bacillus, n particular B. subtilis,
B.licheniformis,B.amyloliquefaciens i B.pumilus sunt intens studiate pentru importana lor n
Industria biotehnologic i agricultura, ca antagoniti fitopatogeni sau promotori de cretere a
plantelor.
PGPR Plant Growth Promoting Rhizobacteria = rizobacterii favorizante creterii
plantelor; entomopatogeni; antagoniti ai fitopatogenilor, insecte prdtoare si parazitoide)
Utilizarea PGPR (plant growth promoting rhizobacteria rizobacterii care stimuleaza
cresterea plantelor) ca biofertilizatori este una din cele mai promitatoare biotehnologii utilizata
pentru imbunatatirea productiilor agricole cu un adaos mic de ingrasaminte chimice. Stimularea
dezvoltarii plantelor se realizeaza prin diverse mijloace: biocontrol, mobilizarea nutrientilor,
producere de fitohormoni, fixarea azotului.
Cu toate acestea, Pseudomonas i speciile Bacillus constituie, mpreun cu specii de
Streptomyces, cele mai multe bacterii adesea gsite n rizosfera de multe plante de cultur. In
ultimii ani, interesul n utilizarea PGPR pentru a promova creterea plantelor a crescut.
Beneficiar al efectului PGPR asupra creterii plantelor implic abiliti de a aciona ca
fitostimulatori si biofertilizatori. PGPR ar putea spori randamentul culturilor prin absorbie i
de cretere a plantelor regulatori de nutrieni. PGPR ar putea aciona de asemenea ca ageni de
biocontrol prin producerea de antibiotice, declannd o rezisten local sau sistemic indus
sau prevenirea efectelor nocive ale xenobioticelor prin degradare (rhizoremediatorilor)
acionnd ca rhizoremediatori.(Jacobsen 1997; Somers et al. 2004; Aseri et al. 2008; Glick et
al. 2007; Van Loon 2007).
Aplicarea lor ca inoculani ai culturilor pentru biofertilizare ar fi o opiune atractiv
pentru a reduce utilizarea ngrmintelor chimice (Bloemberg i Lugtenberg 2001; Vessey
2003). In plus, PGPR au o mare adaptare la medii dure, inclusiv stresul secetei (Arshad et al
2008;.. Arzanesh et al 2011), stresul de sare (. Maiak et al 2004), la temperaturi ridicate,
uscciune , precipitaiile din rile tropicale (Da Mota et al 2008), i mediile contaminate (Burd
et al 2000;.. Gupta et al 2002;.. Dell'Amico et al 2008), ceea ce indic faptul c acestea ar putea
contribui la ameliorarea culturilor de plante n zonele cu potenial agricol srac.
In biocontrolul bolilor plantelor, rizobacteriile PGPR i bacteriile non-PGPR n modul
n care suprimeaza bolile plantelor ar putea duce la nici o intensificare a creterii plantelor, ci
numai n protecia mpotriva agenilor patogeni de plante. Aciunea bacteriilor din rizosfer este
de asemenea limitat de capacitatea lor de a coloniza rizosfera. ntr-adevr, n practic, nu
putem concluziona c o bacterie este un PGPR numai dup izolarea sa de la rhizobacteria i
reintroducerea acesteia prin inoculare a plantelor, urmat de evaluarea capacitii sale de a
coloniza in rizosfer .Aceasta corespunde doar 2-5% din rhizobacterie (Kloepper i Schroth
1978).
Fusarium oxysporum f. sp. lycopersid (Sacc.) Snyd. & Hansen (LOI) i F. Oxysporm f.sp.
radids-lycopersid Jarvis & Shoemaker (Forl) sunt cele dou ciuperci care sunt responsabile
pentru pierderile de recolte semnificative punct de vedere economic n productiile de tomate la
nivel mondial. Nu au fost elaborate msuri de control corespunztoare pentru aceste boli (jarvis
1988)
Fusarium oxysporum f. sp.lycopersici este specific pentru tomate, dar exist multe alte
fusarioze specifice gazdele lor care prezint semne similare.

Simptomele de ofilire cauzate de Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici sau Fol pot
aprea att n faza de rsad, ct i n faza de vegetaie dup plantare. La rsadurile afectate se
observ o reducere a creterii, frunzuliele bazale devin galbene, se ofilesc i se curbeaz, apoi
toat plntua se ofilete i moare.
Simptomele caracteristice la tomate sunt culoarea mai deschis i ofilirea uoar pe
timpul zilei a frunzelor bazale (de multe ori doar o jumtate a unei frunze), mpreun cu o
decolorare pronunat a vaselor de transport, apoi, cu timpul, n condiii de temperaturi mari
sau irigare deficitar frunzele ofilite devin galben-intens, iar ofilirea i nglbenirea frunzelor
cuprind toat planta, care n scurt timp se ofilete i moare.
Abia dup moartea plantei ,ciuperca produce pe esuturile foliare moarte sporii i/sau formele
de rezisten .Frunzele afectate i pierd turgescena i se curbeaz n jos. esuturile vasculare
ale plantelor infectate sunt decolorate la nceput, apoi se coloreaz n maro i maro-nchis,
frunzele cptnd pete ruginii. Un simptom specific ofilirii vasculare cauzate de Fusarium
oxysporum la tomate este nglbenirea unilateral doar a unei jumti de frunz, cealalt
jumtate artnd complet sntoas.
La infeciile cu Fusarium oxysporum, plantele dezvolt rdcini adventive (cel mai
bine se poate observa la tomate). esutul vascular de culoare maro la baza tulpinii i din ce n
ce mai decolorat spre vrful plantei reprezint un semn caracteristic infeciei vasculare i poate
fi utilizat n diagnosticarea vizual a bolii.
Spre deosebire de alte infecii vasculare, la ofilirea vascular cauzat de Fusarium
oxysporum f.sp. lycopersici nu se observ nnegrirea mduvei tulpinii
Cel mai important grup de PGPR dintre bacteriile Gram negative sunt genurile Pseudomonas.

PGPR efect al Pseudomonas a fost n mare msur revizuit (Lemanceau 1992).


Bacteriile care aparin Pseudomonas au fost raportate ca PGPR pentru multe culturi de cartof
(Solanum tuberosum L.) (Burr et al 1978;. Schippers i colab 1987.), ridiche (Raphanus sativus
L.) (Kloepper i Schroth 1978), sfecl de zahr ( Beta vulgaris L.) (Suslow i Schroth 1982), i
salata verde (Chabot i colab. 1993).
Tulpinile de Pseudomonas fluorescent folosite n biocontrol au contribuit n mare
msur la nelegerea mecanismelor implicate n suprimarea bolii. Multe dintre aceste bacterii
ar putea preveni bolile plantelor prin diverse mecanisme: antibioza, concurena sau parazitism.
In cadrul genului Pseudomonas, Pseudomonas fluorescens care bacterii omniprezente in
rizosfer sunt grupul cel mai studiat (Weller 1988).
Membrii de Bacillus au fost raportate ca productori de antibiotice care inhib diferite
fitopatogeni, inclusiv F. oxysporum f. sp. ciceri (Kumar 1999) i Rhizoctonia solani (Asaka i
Shoda 1996).
Mecanismele implicate n Bacillus care scot la iveal promovarea creterii plantelor
includ producia auxinei (Idris et al 2004,. Deepa et al 2010.), creterea disponibilitii de
absorbie a fosforului (Idris et al 2002;.. Deepa et al 2010), abiliti de biocontrol (Asaka i
Shoda 1996;. Jacobsen i colab 2004), i inducerea rezistenei sistemice (Zehnder et al 2000;..
Jetiyanon et al 2003; Bargabus et al.2003; Kloepper et al 2004).

Tulpini de Bacillus au fost de asemenea raportate ca inductori puternici ai rezistentei sistemice


(ISR). Jetiyanon i colab. (2003) a observat c un singur amestec PGPR, B. amyloliquefaciens
i B. pumilus tulpina ,au protejat plantele prin inducerea de rezisten sistemic mpotriva
manei la tomate cauzate de Sclerotium rolfsii, antracnoza la ardeiul iute cauzate de
Colletotrichum gloeo

Agricultura durabila, bazat pe metode ecologice, tinde s utilizeze bacterii ca instrumente care
ar putea sa reduca utilizarea substanelor chimice. Este avantajos pentru agricultura durabila,
deoarece bacteriile introduse ar putea aciona ca biofertilizatori i ca biopesticide. In acest fel,
PGPR ar putea constitui un grup de bacterii de mare importan