Obtencion, transporte ) y procesamiento de especimenes prosesamients de Ine mepocimence que analiza los laboramoriow clinica ACCIONES INICIALES Bl primer paso antes de realizar La extraccién del expécimen ex confirmar la identidad del paciente. Las ctiquetes de Ino imprososde peticién deben onincidir con los datos que nos propercona el paciente. Normalmente, el lugarde extrac Gdn dispone de etiquetas impresas con una numeracién correlative, con oddigo de barras, con el numero correspondiente en forma decimal. Enel momento de Ja extraccin se pega ura ctiqueta a cada recipiente del espécimen y otra al impreso de peticén También puede conectarse con el sistema informatica de para generar las etiquetas necesarias previamente a la extraccién ESPECIMENES DE SANGRE La sangre puede recogerse de lan venas, las arterias y los capilares. Para La mayoria de las determinaciones que se realizan en los laboratorics clinicos, no hay diferencias entre La sangre arterial y la vencea, por lo que suele utilizarse esta debido a que es ms fécil obtenerla. Para algunas determinaciones donde hay diferencias entre ambos tipos de sangre, came las de los gases en sangre, el espécimen mis adecuado es la arterial. Los especimenes de sangre se obtienen para realizar enellos una gran varie- dad de pruchas, entre las que eatin los cultives microbiolégicns (hemoculti- calidad de un laboratoric diinico. Al ser la dnica actividad de este en la que existe un contacto directo entre el personal del laboratorie y el paciente, las malas extrecciones afectarin negativamente la valoracién que haga el pacente de la calidad del laboratario. Por el contrario, una extracciGn sanguinea cuida-doss y bien hecha da gran confianza al pasiente respecte a la calidad de los resultados de las pruebas analiticas. AANTICOAGULANTES: Una ver fuera de las venas y las arteries, la sangre coagula en unos minutos son la heparina, el etilendiaminotetrascetats (EIDTA) y el citrato, Heparina Es un polisaciride presente en la mayoria de los tejidas, en concentraciones na puede emplearse como sal sddica, potisica, aménica o de litio, y su comoen- tracién debe ser de unas 20 U/ml de sangre extraida; puede usarse come sol- cién o secarse sobre las paredes de los tubos donde se recoja la sangre. La heparina es el antinagulante que menos interfiere en las determinaciones de & jen clin ‘Bl etilendiaminotetraacetato (FIDTA) ejerce su sccidn uniendo con fuerza el calcio iénico del plasma, to que bloques de forma eficaz la coagulacin y ba agregacién de las plaquetas. Sus quatre hidrogenos sim#étricos pueden susti- ‘tuirse por potasio, sodio o litio pasa formar sales mas solubles. H EDTAse usa ‘como anticoagulante en forma de sal dinédion, dipotisica o tripotiisics. La can- de extandarizacén han recomendado concentracones de 1a 2mg/ml desan- gre. Estas concentraciones de EDTA parecen no afectar de forma adversa nin- uno de los pardmetros eritrocitarios o leucocitarios. Cuando por algin moti- vol volumen de sangre de la extracci6n sea menor de lo que conviene, puede producirse un aumento de ba anticnagulscién.con cambios significativos dela morfologia y del tamane celular En | sctuslidad, el EDTA es el anticoagulan- te estandar en hematologia ‘Citrato ‘Es otro anticoagulante que actia formando complejos con el calcio del plas- ma. Suele emplearse el ctrato sédion, con una concentracién de alrededor de 30 mg/ml desangre. Se utiliza para procedimientes de coagulacién, incluides Jos tiempos de protrombina y tromboplastins. Hl citrate ayuda a evitarel rapido deteriora de los factores Ksbiles de la coagulacién, come los factores V y VILCGLAUIEA Me da pciastoNLin Forscparnirauunmanes rors JERINGAS Y AGUJAS PARA LAS TOMAS DE ESPECIMENES ‘Las jeringas y agujas (fig. 5-1) son el métede mds antigue de obtencién de sangre por puncién venosa: Jeringas. Inicialmente, Las jeringas empleadas eran de vidrio-y se esteriliza- ban para volver 2 usarse Desde hace ya muchos afios se usan jeringas de plastica desechables de un solo uso. Sus tamafios mas habituales son 3,5, 10 ¥ 15 ml, y pueden ser de dos o tres pieras Las de tres se deslizan mejor, pues su émbolo esté revestide de goma. Hay jeringas con un adaptador de la aguja. excintrico, que permiten una puncidn con ingulos menares de 15°. Agujes, Las agujas que se adaptan a las jeringas son de diferentes tamafios; Jas mis utilizadas tienen entre 19 y 25 mm de longitud, y el color desu cono suele indicar su calibre. Este sefiala el grosor dela aguja,de forma que cuanto mayor sea el calibre menor serd el grosor. Las agujas mas usadasson las de un calibre comprendide entre 19 y 23 (de 0,9 a 1,1 mm). Debe comprobarme siem- pre que el extremo de la aguia esté abierto y que no tenga aristas o extremos romos, que puedan producir dolor a los pacientes. Las aguijas deben estar Siempre estériles; en cambio, no es necessrio que las jeringas lo estén, aunque, come se ha sefialado, nunca deben reutilizarse. SISTEMA DE VACIO PARA LA RECOGIDA El sistema de tubos de vacio para recoger expecimenes de sangre venosa per mite obtener esta directamente en los contenedores definitivos y sin limitacién de volumen, con molestias minimas. En la figura 5-2 se representan los com- ponentes de este sistema, Son tres: el dispositive de sujecién de los tubos, La aguja y los mbox: Dispositive de sujecidu de los tubes. Tiene por finalidad actuar de soporte fisico para mantener fos [oe tubo en el momento de ls extraccion yen dl se enrosca tambien la aguia. —<—aAl Ags = Cano dene FIGURA SI jornnga y aque para i puncicn wonosUsisad erammtinds FIGURA 5-2 Sstora da racogké de oxpocimencs desongra con tuber de wacio, Aguja. La aguja para los sistemas de vacio tiene los dos extremos punzan- tes;uno se introduce en la vena y el otrose dirige al interior del dispositive de sujecién. Este diltimo extremo [leva una camisa de goma como dispositive de seguridad, que sc Gerra para evitar salpicaduras de sangre cuando sc cambia deun tubo a afro. Tubos de vacio. En la tabla 5-1 20 presentan los diferentes tubos de vacio; en ellos, ef color del tapén de goma indica el tipo-de antiooagulante o conser vante que llevan. La diferencia de tamaiio entre les tubos permite obtener entre 3 y 15 ml de sangre. En Ia tabla 5-2 se muestran sus dimensiones y su carga maxima. Las tubos de vacib estén recubiertos interiormente de silicona para reducir laadhesionde los coiguios alas paredes y disminuir el riesgo ds hemolisis. La silicon puede descomponerse con el ticmpo, lo que despues de la centrifuga- cién daria lugar a especimencs con mene células. Por este motive, se reco~ minda respetar ls fecha de cadusidad. Asi pues, hay que eviter un almscens- mients demasiado prolongado de los tubos Hay distintos tipes de tubos: Tubos con separador, Estos tuboe contienen polimeroesemisélidos ensu fon do. Una vex centrifugads [a sangre, el polimers se interpone entre ef suero o el plasma y las células, por'ser su densidad intermedia entre la de ambos, le que establece entre ellos una barrera que aisla el suero o el plasma del codgulo. Tubos com un sistema de cerrado especial, Los tuboa de vacio mis emples- dos son los que [evan un sistema de cerrado especial. Se trata de tapones con2S APS ee petra Funmeenraueranemee ome cidn, El disefio erondmico de este faldén de plistico, que recubre los 2. cm superiores del tubo, proporciona una sujecién que permite controlar mejor Ls extraccién del tapén. Asimismo, la base plana del componente de caucho hace minimas las adherencias de sangre y Ia pared inferior del falddn retiene ba posibles salpicaduras aislsdas. Ala ver que ofrece una gran superficie de sujecién, el faldén de pliistico, aisla el tapén de goma, a mode de armadura. Asi, este no entra en contacto dor para muestras de suero. Las vertajas de los tubos de plistico con relacicnaleede-vidrio son que nose rompen cuando cacn sobre superficics duras, a0 producen arista: que puedan clavarse con el consiguiente rieago de contagin, pucden incinerarse con masas resulltantes muy pequefias y pesan un 30% menos que sus equivalentes de vidrio. Dispositivos de mariposa. Con vens dificiles y en los nifios pueden utili- zarse dispositivos de mariposa adaptades a los tubos de wacio Mig. $-3).\Con sisten en agujas unidas a mariposss y conectadas con la aguja que se enroscs en el dispositive de sujecién mediante un tubo de plistico. Con este sistema, Ja extraccidn de sangre venosa ex fel y cimoda para el paciente. PREPARACION ¥ APROXIMACION AL PACIENTE La preparadién adecuada de los pacientes es un factor fundamental para inter- (pretar correctamente los resultados de las determinaciones solicitadas. Es bien sebido que muchos componente: sanguincos se alteran al ingeris alimentos durante el perindo anterior a ls extraccién del espécimen de sangre Las alte- raciones dependen, en gran medida, del tipo y La cantidad de los alimentos ingeridos, asi como del tiempo transcurrido entre Ia ingestida y la toma del espécimen. Muchas prucbes no requieren ayuno, aunque siempre es preferible: que los pacientes no ingieran alimento al menos entre 4 y 6h ante:dela extrac cidn, pues esto reduce La posibilidad de una lipemia por quilomicrones que puede interferir en muchos métodos. En general, suele recomendarss un ay node unas 12h. Mis importante que la interferencia de la alimentacién es la producida por JamedicaciGn. Cuando sea posible, seha dedejar de tomar sise sabe que inter- ficreo puede interferir, al menos 48 h antes de la toma. La ealizacidn adecuada de la extraccidn de sangre no sélo implica conoci- mientos téenicos: también ex fundamental mostrar interés por el paciente, y= FFIGURA 5-3 DEpostwo ou manposa jar TuDos cm Vac.OLAV Ga pamacrAes forcradormme noes que la obtencién de los expecimenes de sangre implica un contacto directo. Por ello es mencial quelas personas que realicen este cometido tengan siempre en Es preciso indicar al paciente quese siente de forma cémoda. El brazo tiene que descansar firmemente en el apoyabraros y no ha de doblarse por el endo. En todo momento hay que ser france con él, y explicarle qué se va a hacer. Hay que decir al paciente que, aunque [a puncida venosa duele, dura poco. No se Jedebe decir que el pinchazo no le dolers, y se le ha de aviear cuando la agujs ayaa penctrar en la piel para evitar que se asuste. El personal de extracciones debe ser especialmente cuidadoso con los pacientes hospitalizados. Asimismo, ‘con los nifios es basico ganarse su conan. (8g. 54). Generalmente, la puncién suele realizarse en la mediana cubital por su grosor y superficialidad. Si hubiera problemas con esta vena puede emplear- se la basilica El brazo debe extenderse en lines recta desde el hombro hasta Ls bles, puede forzarse La afluencia de sangre a la vena dando masajee al brazo desde la mufiece hasta el code. Asimisme, puede golpearse la vena repeticia- mente con lox dedoe indice y segundo pars producir si dilatacién. También ox posible aplicar un pate caliente fa unos 40°C) en el lugar durante 5 min.‘Extraccién con tubos de wacio: Antes de realizar una extracci6n mediante puncién venosa con tubos de vacio, deben escogerse los tubos que wana emplearse de acuerdo con las determinacic- ines solicitadas. Eate tipo de extraccitin se realiza de la siguiente forma (Big. 5-5). ‘Las tomas desangre deben haceme siempre con guantes de latex. Hay que insis- ‘hr en las medidas de seguridad de la extraccin para evitar contagios. Localizs- da bs vena como se ha, ‘nuacidn, se enrosca la aguja en el dispositive de sujecién y se introduce en La Hh FFIGURA 5.5 Exraccien oo cngra venom: con tunes a wan: (1) cokacacion eal eompresor: (2) psbaden do B won: (3) intreduecon dob agup on fa von; (4) inroduerién cal ‘tubo de vacio an Ia parte oe la agufa sttuadia dantro el ckepostive de mjacitn.SAI 7a pir Sone arash nares vena con un Sngulo de unos 15°, con el bisel de la aguia hacia arriba para evitar que resbale sobre la epidermis. Salvada la resistencia inicial de la pared de la vena, se canaliza la aguja, apoyando el bisel en su parte inferior. Despude se presiona el tubo de-vacio sobre ef extremo de la aguja situado dentro del dispo- Sitive de sujecisn, hasta pinchar #l tapéa y liberar el vacio. Cuando la sangre comience a fluir al tubo, se suctta el compresor sin moves la aguija, y el tubo se Mena hasta que se agota el vacio. Mientras se esté Ienando el tubo ne hay que cambiar su posicién. Asimismo, durante el procedimiento de Henado debe evi- terse que el contenido del febo entre en contacto con el tapén Se mantendrd una ligera presidn constante sobre el fonde del tubo en direcddn a la aguia para impedir que se suelte la camisa de cierre y se detenga el flujo de sangre. Una vez Henadoe! tubo, sesaca del dispositive desujecién y se coloca otra. Deesta manera, pueden utilizarse loa tubos quesean necesarios, Los tubos con anticoagulante deben Ilenarse hasta agotar el vacio y que cese el Mlujo de san- (pre, pues esto asegura una relaciGn adecuads entre la sangre y el anticoagulan- ‘te. Sin embargo, es normal queel tubo no se lene totalmente. Hay que mezclar bien el contenido de los tubes con anticoagulante, mediante una inversién suave. Para evitar una posible contaminacidn cruzada de los anticoagulantes, Jos tubos de wacio de recogida deben ublizarse en un orden determinado abla 5-3). Se ha sefialado que puede producirse contaminacidn de un tubo a otro cuando hay problemas en ls salids de la sangre, En general, se ha de empezar por los tubos estériles para cultives y seguir, sucesivamente, por los ‘tubos sin anticoagulantr, los tubos para estudios de coagulacién eon citrato, Jos tubos con gel separador y los que contengan heparina y, finalmente, los tubos con otros anticoagulantes, come el EDTA. Terminada la toma de sangre, el paciente debe sujetar con fuerza un algo~ én sobre el lugar de puncién, con el brazo extendide y la mano abierta para impedir La salida de la sangre. Fl algnddn puede sujetarse con un esparadrapo (gue, transcurrides unos minutes, podrd quitarse. Cuando el paciente continic sangrando, hay que presionar el lugar del pinchazo con un algodén hasta que cese de sangrar. (Cuando seusan los tubos de vacio deben tenerse en cuenta estas considera- ciones: +» Siun tubo empicca a llenarse y luego se para, cimbicac la posicién de Is aguis, dirigiéndola primero hacia delante y luego ligeramente hacia tris. Adjese el compresos. TABLA 5-1. Ordan de recogids de ios aspecimanes con trbes de waco |. Raciplentas estirtes para cults 12. TUbor eh anticeogutarts (mucre pars dotarminacionar: quricas) 3. Tubes con crate (plasma pars extudios de coaguiacite!) (4. Ubos con apart (pias para dotorminactonos quimicat) ‘5. Tubos con EDTA (plaza para recuontios hematoltgioan) (6. TUbos con morurcyosaiies (pREma para a Gorermunacion da psc) ———* Cuando un tubo no se lene de sangre, aunque la aguja esté en ls vena, habes que cambiar el mbo, pues, 2 veos, algunos tubos pueden haber perdido el vacio. También es posible que se haya producido un colapso venoso. Si ocurriera esto, siquese Is agujs y hagase la puncidnen otro lugar + Cuand sea necesario otro pinchazo, selhari enel otro brazo. Sise hiciers en ef mismo, pincheseen un lugar por debajo de la primera puncidn © Nose recomienda intentar una puncién venosa mas de dos veces. Una ver utilizadas las aguias, deben introducime en les contenedores de desechos adecuades tfig. $4) lo mas pronto posible para evitar pinchazos acci- dentales. En cualquier caso, hay que insistic, de nuevo, en el cuidadoconel que se han de manipular las agujas.en las tomas deespecimenes de sangre. Extraccion con jeringas En la actualidad, el empleo de jeringas para obtener especimencs de sangre venoaa suele producirse cuandono pueden utilizarse Ins nubos de vacio, por gjemplo, a causa de venas dificiles. Con Ia jeringa y la aguia, el pinchazo se realiza de forma semejante alo expuesto para el sistema de vacio. Una vex que haya penetrade La aguja en el interior de ls vena, se suelts el compresor con sunvidad y sc aspira la sangre deseada tirando lentamente del émbolo, con cui- dado para no colapsar la vena. Si hiciera falta mds sangre que la que cabe en la jeringa usada, se quitaria la llena, manteniendo la aguja en la vena y compri- miendo antes por encima del bisel, y se colocaria una nueva jerings. ‘Terminada la toma de sangre,se retira la aguja con la jeringa y se transfiere fasangre de esta lo antes posible a los tubos adecusdos, con una presién suave sobre d émbolo y dejando resbalar la sangre por las paredes del tubo. Los que contengan anticoagulante deberdn taparse y mezclarse con unainversidn sua- ve. Si se utilizase un tubs de-vacio para recoger la sangre, habria que empujar Ja aguja a través del tapén y dejar que la sangre pase al tubo utilizando su vacio. Para evitar pinchazos accidentales, manténgase el tubo de vacio en una gradilla y nose-coja con la mano. Comoene! exo del método de obtencién de sangre con el sistema de tubos de vacio, una vex empleadaslas jeringas y agu- jas, deberan introducirse en el contenedor de desechos. RECOGIDA DE ESPECIMENES PARA CULTIVOS Cuando se obtiene sangre para cultives deben tomarse precauciones adiciona- Jes con relacidn a [a limpieza de la piel para evitar contaminaciones. Se limpia bien a piel con alenhol al 70%, o con una mezela de éter-aloobol, y se extraen de5.a 10 ml desangrecoo una jeringa estéril Se punciona con la agujael tapén de goma del recipiente que contiene el medio de transporte y se descarga Ls jerings merdandobien la sangre con dicho medio. Hay también recipientes de vacio que contienen medios para hemocultives. La extraccidn oon estos siste- masse hace come se indiad para lon tubes de vacio.Fl SL SSVEA os ROSEN Fm radroNee ee rode, FFIGUBA 5-6 Contonador do agubsy dasochablor de bes tnmas da arparimance. PUNCION ARTERIAL ‘Las extracciones de sangre arterial suelen realizarse en la arteria radial del braze o-en la femoral. Las punciones arteriales son técnicamente mds dificiles que las venosas. La mayor presidn en las arterias hace mas complejo detener Ja hemorragia y aparecen hematomas con mas facilidad. Asi pues, las extrac ciones de sangre arterial deben Ulevarse a cabo con mucho cuidado, debido a Ja fragilidad de las arterias. Asimismo, puede producinse un espasme arterial, que es una constriccién refleja que restringe el flujo sanguines y pucde afectar da ciroulacidn Las extracciones de sangre arterial se efectian con jeringas de vidrio hepa- tinizadas. La heparina de litio es el anticoagulante més adecuade para los especimenes de sangre arterial Cuando se use heparina de forma liquida, esta que contienen Ia heparina liofilirads. Para estas extracciones no hay que usar jeringas de plastic normales, pues cl émbolo ne sube sélo con la presidin arte ial; tampoco tubos de vacio para punciones vencaas. La arteria se localiza por su latide, sc pincha con ls aguja y 2c deja que ba sangre fluya por la propia presién arterial. La aguja debe penctrar on La picl con undingulede entre unce45.260°, y se aproxima a la arteria lentamente. Las pulssciones de Ia sangre en [a jeringa confirman que se ha obtenido sangre arterial. Trasla puncisn arterial, ha deaplicarse una compresitin sobre el ugar depuncitin. Cuandose separe la agujade la arteria, podra doblarse para evitar que entre aire, o quitarse La aguja y tapar su cono de sujeci En el mercado hay jeringas de vidrio o de plistico de un solo uso, expecial- mente disefisdas para las tomasde sangre arterial. Las jeringas fabricadas con vvidrio de borcsilicatn tienen un pistén de goma sin influencia atmosférica sabre impiden que este se salga del cuerpo de La jeringa y no haya peligro de derra~mamientn, Estas jeringas contienen heparina de litio liofilizada, lo que evita el problema de la diluci6n y Ia acidificacién del expécimen. Hl protector de la guia lleva silicona,de forma que la aguia se sella completamente al taparse con el protector, después de haber realizado La extracciéin y expulsado el aire PUNCION CUTANEA Los expecimencs de sangre ohtenidos por puncién cutines son especialmente dedo pulgar En los nifios se emples fundamentalmente el talin, mientras que ven los adultos, ell dedo pulgar. No se recomienda ls puncidn en el lébulo de Ls oreja. La puncén enel talén ha de hacerse en les reas sefaladas en la figu- ya.$-7, puesen la mayoria de los nifios el hueso del talén no se encuentra bajo ellas, No debe reslizarse sobre un lugar de puncién previa. que puede estar infectado, ni en lacurvatura del taldn. Las punciones cutneas nose efectuaran ened Srea central del pie de un nifio (ire del arco), pues podrian causar dafio alos nervios y tendones y al cartilage, y no ofrecen ventajas rapecto ala pun én ened taldn. Con relacién a los dedos, no hay que realizar punciones cuténess en los de Jos nifios pequefies, La distancia desde la piel al hueso en la parte ms gruesa del tiltimo segmentn de todos Ios dedos de los reciéin nacidos va de 1,2 a 2.2 mm, y con las lancetas disponibles puede dafarse seriamente el hueso. En el recién nacido, la infeocidn local y la gangrene son las complicaciones poten Gales més importantes de las punciones en los dedos. Cuando se llewe a cabo este tipede puncidn, la profundidad dela incisién deberd sex menor de 25mm paraevitar el contacto con el hueso, Eldedo habra de mantenersede forma que Ja gravedad ayude a recoger la sangre de la punta. Hay que evitar masajear el dedo para estimular el flujo sanguineo, ya que provocs la salida de residuos y <3 liquide Gaulas) que no tienen la minms composicicn que plasma sangui- Debe desecharse la primera gota de sangre. ve i calemtaniesun dela piel en dl aitiode le puncién puede aumentar el Bujo sanguineo en el mismo hasta siete veces. Principalmente, aumenta el flujo arve- al, por lo que lox especimenes de lox lugares que se han calentado se dence FIGURA 5-7 Lugares de puncién on aitaibn.0 ASA Ge we patente Rep recoreieN esencial cuando se recogen especimenes para analizar el pH y gases en sangre. Para calentar, pucde utilizarse una toalla hdmeda caliente a una temperatura no superior 3. 42°C que cubra el lugar durante, al menos, 3 min. Si se recogen jyente quimico de los que se miden habitualmente en los laboratorics clinicos. Los especimencs por puncidn cutdnes pueden recogerse por accidin capilar en un tubo capilar, oa braves del tapdn de recogida de un dispositive de microrre— cogida. No se aconseja recoger la sangre gota a gota en tubos deensayo peque- fos, debido 2 que el traumatismo mecdnico de presionar el tubo sobre la piel puede aumentar la hemdlisis. Se dispone decapilares y tubos con distintos anti- ‘oagulantes. Hl llenade debe realizarse lo ms ripidamente posible para impediir Ja coagulacién. También debe evitarse la introduccién de burbujas de aire, RECOGIDA DE SANGRE DE CATETERES INTRAVENOSOS: ‘© ARTERIALES Cuando se recoge sangre de un catéter venoso central o una conduccidin arte- rial, debe garantizarse que la compesicin del espécimen no esté afectada por el liquido que se infunde. Paraello se interrumpe el liquide utilizande la Lave del catéter. Seaspiran 10 ml de sangre a través dela llavede paso y sedesechan antes de extracr el espécimen para el andlisin ‘Se puede obtener sangre de las venas de un brazo por debajo de un canducto intravenoso sin interferencia del liquide quese infunde,debide a queen las vers no se produce un flujo sanguines retrdgrads y el liquide que se infunde debe Greular por el corazdn y volver al tejide antes de alcanzar el lugar de la toma. ESPECIMENES DE ORINA Laorina ha de recogerse de acuerdo con los anslisis solicitades. Larecogida de Ja orina condiciona La interpretacidn de los resultados que se obtengan. ‘Los comtenedores para los expecimenes de orina deben estar limpios y secos, y fabricados con materiales desechables claros. Se considera que los contenedo— res desechables fabricades por empresas reconocidas estan limpios, no conta- uminados einertes con relacidn a los constituyentes urinarios. No hay que rewti- lizar comtenedores desechables_ Los contenedores para los anilisis sistemiticos de orina deben tener una capaddad de 503 100 ml y bocas redondas de, al menos, 5 cm de didmetro y tapa de rosca. Han de cerrar bien para evitar que salga el contenido, sea cual sea la posicién del contenedor. Deben ser de material transparente para ver facilmente el comtenide. En los estudios microbiolégicos hacen falta contenc- dores estériles, Pas a engids de ori ded han de wtlzare contenders de pln grandes (de 2.25 I), con bocas amplias y tapas de rosca. Para determiner das que se alteren con la luz, como las porfirinas, las ‘amecolaminas, el acidevanilmandélion, el dcido homovanilicn, el dcido f-aminolevulinicn, el dcido ‘St-hidroniindolacttico, la depamina y las metanefrinas, se utilixan recipients opa- cos. Para pediatria, sc usan bolsas de poliestirenc que se Bijan a los genitales. (CONSERVANTES: ‘De forma ideal, Ia orina debe analizarse en los 30:min siguientes «mu recogida, grandes cambios entre 6y Bh. En general, para las recogidas de orina de 24 b no suclen usarse conservan- bscterias, el pH de ls orina se vuelve alcalino y se forma amonio, low eritrocitos, Jeucocitns y cilindros sedesintegran, la glucoss va desapareciendo, se evapora Jaacctona, el écide acetoacético se convierte en acetona, la bilirrubina se oxida En ocasiones, es necesario mantener el pH dela orina por debajo de 3, para Jo cual purde utilizarse dcido acético glacial « écido dorhidrios. Se emples cide clorhidrico para acidificar la orina en las recogidas para la. de catecolaminas, metanefrinas y el dcido vanilmandélico, y se usa el dcido acético glacial en las mcogidas para determinar el dcide S-hidrndindolacétion y el écido S-aminolevulinico. Para el transporte de especimenes de orina se han comercializedo sistemas de vacio. Coratan de un tubo de vacio con una formula liofilizads de manteni- umiento y un dispositive de transferencia. Mediante este dispositivo,lacrina del recipients de recogida se transfiere al tubo que contiene el conservante licfdiza- do. Como el medio de mantenimiento impide la rapide multiplicacidn de bac- terias en a orina, la poblacén bacteriana se mantene-en el espécimen durante un periodo de 24h a temperatura ambiente, a niveles comparables = los de especimenes sin aditives, mantenidos refrigerados el mismo tiempo. TIPOS DE ESPECIMENES DE ORIMA, De acuerdo con las determinsciones que hay que realizar pueden considerarse cuatro tipos de eapecimencs de orina: orina de uns miccidn, orina primera deORLAD/OA Ge ea nance Fonacen mre saree Jamafiana, orina deun tiempo determinads y orina para cultives microbiolé- gicos. (Orina de una miccion Es la ovina recogida a cualquier hora del dia y se utiliza para los andlisis cuali- tativor poco influidos por Las variaciones periédicas en La eliminacién de las sustancias que se valoran, como los andlisis sistemadticos. ‘Orina de la primera hora de la manana ‘La orina de la primera miccién de la mafiana esta indicada para determinar la proteinuria y come forma de recogida para pacientes ambulatorios que acu- dana consultas de revisisn ode control. ‘Grina de un tiempo determinado: ‘La recogida de orina de un tiempo determinado se utiliza fundamentalmente: para las determinaciones cuantitativas metabélicas, como los aclaramientos y, en general, para medir todas Las sustancias que muestran variaciones en su climinacién. El tiempe de recogida mis utilizado son 24h y cl protacolo més: comin 6s este: = Orinar al levantarse, desechar esta orina y anotar la hora, © Recoger toda ls orina delas 24h siguientes. © Alcumplime las 2 h, orinary adicionar esta orina a la ys obtenida. Una ver recogida toda la orina, debe Ilevarse lo mais ripido posible al labo- ratorio, donde se mide el volumen, se mezcla bien yse separan alicuotas pars las determinaciones que se vayan a realizar, y el resto se tira. Durante toda el periodo de recogida debe conservarse la orina en un frigorifico (a 4°C), excep- to para algunos casos en que se mantenea temperatura ambiente bl [abora- vorie debe comunicar previamente todas estas condiciones de recogida. Orina para cultivos microbiologicos Para estos cultives ex deseable un espécimen de orina limpia de mitad de mic cidn. Es importante limpiar con una gas o un algodén el glande del pene en Jos varones y el arificio uretral en las mujeres. Ademss, en estan, debe limpiar- se primero cada lado del orificio urinario y luego Lavarse dos veces con una gas estéril o una torunda de algodén bumedecidas en agua. Durante el pro- ceso de emisién de [a orina, la mujer ha deseparar los labios mayors para que no se produzca contaminacida. INSTRUCCIONES PARA LA RECOGIDA DE ORINA Para recoger especimenes de orina, deben comunicarse las instrucciones que siguen a los pacientes. Las instrucciones pueden darse de forma oral, aunque es més conveniente de forma escrita y aser posible con ilustraciones:© En los varones no circuncidados, hay que retirar Is piel para exponer el meate uretral. Se comienza 3 orinas, se deja pasar la primera porcidn de rina al sanitario, se reenge [a intermedia en el recipiente adecuada y se desecha el resto en el sanitario, resto en el sanitario. RECOGIDA DE ESPECIMENES EN LOS NINOS: Para loe nifios pequefos, se utilizan bolsas de poliestirenc estériles que oe adhieren a ls piel. Para ello se separan las piernas del nific y se comprucha que itp zonaa pabica y perinaal etén scons y Eepina, Se adhiereLa bolon de plist oa la piel de forma que quede firmemente sujeta. En los varones se ajusta La bolsasobre el pone y sc adhicren loo salientes al perinen. En las nifias, se=cpa- ral perineo para quitar los pliegues dela piel y se apricts firmemente cl adhesive ala piel que rodes [s vagina. Debe comprobarse | bolsa cada 15 min. (Cuando haya orina, se retirard a un recipiente de almacenamiento. ESPECIMENES DE LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO Elliquide cefslorraquides (LCR) se obtiens normalments por puncitin percuts~ cnea entre los interespacios lumbares —de donde deriva el termine puncién ham~ bar—, que resliza siempre un médico. Fl paciente se tiende en ponicin lateral (posicidn fetal), La puncidin se efectia entre la tercera y la cuarta vertebras lum- bares, o entre La cuarta y la quinta. Hl interespacio L3-L4 se identifica por el plane que conecta [a parte superice de ambas crests iliscas y que cruza Ls solumna vertebral. (Con una técnica estéril, se introduce en la linea media, a través del ligamen- to amarillo y la duramadre, en el espacio subaracnoideo, una aguja fina (de 0.5 mm de grosor).con una punta de 10 om, con ef bisel paralelo al cje vertebral. Para optimizar el flujo libre la aguja se gira 0°. La presidn de salida se mide solveando un mandmetre y una vélvuls de tres vias en el ejede la agujs. fin los adultos, la prasién desalida normal comprende entre 145 y 150 mm. La exacti- tud de la presidn de salida depende de la posicidn del pacierte y de su relaja- Gdn. Se deja que fluya el liquide, que se recoge en tres recipientes extériles, En os sduling suele obtenerse un-volumen de? a 15 ml deliquide, yencada tubo serecogen de 1a 3 ml. fs fundamental abservar todos los tubos recogidos. En caso de puncidn hemorrigica, el primer recipients ex el mis hemsticn, perc si ‘ya existiers hemorragia, los tres recipientes seran igual de hemorragicos. ESPECIMENES DE EFUSIONES SEROSAS. ‘Las efusiones serosas son scumulaciones patoldgicas de liquide en cualquier ‘espacio del cuerpo, incluidos el saco pericirdicn, el espacio pleural, el espacio peritoneal y los especios articulares. En condiciones normales, el volumen de {es liquidos que chan estos espacion ex muy excase, pero encendiciones paterSLAY Gra pmmascenAMIDA Fonscpa ara deronamres oa logicas pueden acumulame grandes cantidades. La palabra sess derive de tatica capilar, y los exudades son liquidos inflamatorios, resultado de un exta~ do patolégico que produce inflamacién, con el consiguiente aumento de La permeabilidad capilar. LIQUIDO PLEURAL El liquide pleural se obtiene por formentesis, o puncién aséptica del téeax con tun aguja, realizads siempre por un médica, Se deja que Guys el iquida y oe Henan varios recipientes. Uno de ellos debe contener un. rentemente heparina, para los recuentos celulares, los cultivos y la observacién de cristales. LiQuIDO ASciTICO: Mis comiinmente, el liquide peritoneal recibe el nombre de liquide ascitico —ascitis procede de una palabra griega que significa boles— para indicar el abdomen abultadode los pacientes con una gran acumulacién. Hl liquide asci- tico se obtiene por laparccenteris, que siempre debe realizar un médico. Pars ello se desinfecta la piel def abdomen y se pinchs con una aguja de tamafio adecuads. Seaspira al liquide con una jerings hasta obtencr la cantided reque~ tov rlulaner los cules yn sbucrvation de castales LIQUIDO SINOVIAL Es el liquide que Wena las cavidades de las articulaciones, y sus funciones se localmente con clorure deetilo. Se introduce una agujade tamafw adecuado: y se aspira la cantidad de liquide requerido en la jerings. El expécimen debe Tecogerse en dos mubos. Uno debecontener un anticoagulante, preferiblemente: heparina, para los cultives microbiolégiens, el recuento celular, la observaciin de cristales y la preparacién de extensiones. ESPECIMENES DE LIQUIDO AMNIOTICO Elliquide amniétice ex-el uide en el que estd inmerso el fetoen el titero mater- no. Este liquide xe obtiene por puncitn abdominal, mediante una técnica denominada amniocentesis. con ayuda de un ecégrafe para localizar la placentayy determinar la colocacién del fete. El mejor lugar para obtener el expécimen est detras del cuello fetal, debajo de Is cabeza, aunque también son buenas otras Sreas libres de la cavidad amniGtic.. Para realizar la amniocentesis, oe pincha con una aguja larga y se aspiran unce 10 ml de liquid con una jerings. ‘Luego se transfiere el liquide desdela jeringa 3 un contenedar de plistion, que etapa y oe lleva al Laboratorio para el anlisis. ESPECIMENES DE SEMEN Para Is recogida de los especimenes de semen debe guardarse abstinencia sexual, al menos 48 hy no mis de 7 diss El expécimen se obtiene por mastur- bbacidin y ne recoge en un recipiente limpic de plistico, de boca ancha, que debe hhaberse comprobade que no tenga efectos téxicos sobre los Cuando se vaya a realizar un andlisis bacteriano, el paciente habrs de orinar y Juego lavarse y enjuagarse Las manos y el pene, antes de recoger la muestra en un recipiente extéril. Nodeben utlizarse preservatives para recoger semen, ya que suelen contener que puede perderse la primera porcién del eyaculado, que suele contener [x mayor concentracién de espermatenides Adem, puede haber uns comtami- nacién celular y bacteriolégica del expécimen y el pH acide del liquido vaginal ‘jerocrd una influencia adversa sobre la motilidad de los espermatozoides. No hay que analizar especimenes incompletos, en particular si se pierde a primera porcién del eyaculade. Durante el traslado al laboratorio debe prate- gerse el e=pécimen de las tempersturas extremas. TRANSPORTE DE LOS ESPECIMENES: En los hospitales, yeneralmente el tiempo que transcurre entre la obtencién de: Jos especimenes y su llegada al laboratnrio suele ser corto, por loque, para La mayoria de las determinaciones, no son necesarias condiciones especiales de transporte. Sin embargo, algunas requieren que se refrigere el expécimen des- deel momenta dela extraccién. SISTEMAS DE TUBOS NEUMATICOS: ‘En muches hespitales funcionan sistemas de tubes ncuméticos para el trans porte de los tubos de extraccién, principalmente de los que tienen como desti- no el laboratori de urgencias. Con estos hay que tener especial cuidado, y fijarlos bien dentro de los contenedores que viajan por el tubo neumtico para cvitar su movimiento, pucs este puede producir hemélisis enles especimencs de sangre. REGLAS DE MANIPULACION El transporte de los especimenes desde los centros periféricos de extraccén debe hacerse de forma adecusda, « finde que no sc deterioren sus compo-OS AVA Ge aa pennant Forme nea dure ee noms nentes. Set pueden sefialar las siguientes reglas para manipula: losespecime- [Rs] * 2 personal, tanto el del laboratorio. como el de los centros de extraccién periféricos, debe estar instruidoen las téonicas de recogida de cada tipo deexpécimen Seaconseja disponer de un manual que exponga las instrucciones generales para obtener y manipular adecuadaments los e=pecimenss. Enviar los especimencs tan pronto come sea posible. Disponer de los contenedores adecuados para Ins envios. Evitar las temperaturas superiores 35 °C, ya que el deteriore delos componentes a menudo se acelera a temperaturas altas, = Evitar la expesicién a La luz, especialmente a la bur solar, que puede Prochci el deteriom répide de algunos componentes quitios, como + Noexponer la sangre total a temperaturas inferiores a °C, pucs La én hemoliza los expecimenes. + Procmar los esgecimencs en cuanto leguen al Laboratorio. Cuando sex preciso separar el suero cel plasma de las células, habrd que hacerlo ante: de que pasen 2h desde la obtencién del expécimen. Como regls general, no debe obtencrse tun espécimen cunndo no se tenga ls debe induiree el nombre del paciente, un nimero de referencia adecuado, las pruchas que se solicitan y el nombre y la dizeccién del salicitante. Como se ha apuntado,el envio de eapecimencs de un laboratorio a.ctre ha de hacerse en condiciones adecusdas. Los recipientes donde vayan los especime- ines (tubos @ frasces) deben ser de material plistice (polietileno o polipropile- cna). Dichos recipientes se introducen en los contenedores de transporte (sobres especiales © cajas) y, en todo momento, los tubos o loa contenedores de los ‘especimenes tienen que estar perfectamente protegidos para evitar su rotura 0 que st vierta el contenide durante el transporte. Los especimenes que necesi- ten congelacién debersn enviarse en recipientes de poliestireno expandido con isle seco o bolas congeladoras ESPECIMENES DE ORINA En cuantoa los expectmenes de cring,ex preciso llevarlos ripidamente al labora- torin para su examen. Cuande cl eapécimen no pueda transportarse inmedia- tamente, deben tomarse precauciones para ssegurar su almacenamiento ade~ cuads. Sino se solicits un cxamen microbioligico, el espéci diato al laboratorio, habré que refrigerario 2 una temperatura entre 4 y 6 °Cpara evitar la multiplicacin de bacterias. Los especimenes pueden refrigerar- tubo de transporte que contenga una soluciéa estabilizante. ‘OTROS LIQUIDOS BIOLOGICOS: Los liquides biolégices diferentes a la sangre y a la rina deben Uewarse lo antes posible al laboratorio para su procssado, procurando en todo momento ‘evitar las temperaturas extremas. PROCESADO DE LOS ESPECIMENES: ay que dejar que se complete la coagulacidin y se retraiga el codgulo antes de centrifugar ya que, si no, la formacién de fibrina puede causar luego proble mas de obatruccidn en las pipetas y en las puntas de aspiracién de los especi mene: de los analizadores. La sangre coagula normalmente entre 20 y 40 min. ‘La separacidn entre Is fraccién liquida de la misma y sus componentes celula- esse efectia por centrifugacién a 1000-1500 x g durante 10 min. ‘(Cuando algiin andlisis no pueda realizarse enel mismo dia de la extraccidn delespécimen de sangre, habrs que almacenar el suero ol plasma en las condi- Determinaciones de pH y gases "ae expecimenes pars las determinaciones de pH y gases han de colocarse en un bafio de hielo tras su obtencién, llevarse con prontitud al laborstario y analizarse lo antes posible. Recuentos hematolégicos Los mcuentos hematolégicca se realizan en sangre total anticoagulada con EIDTA y no requieren tratamiento previo. Los expecimenes pueden almacenar- se hasta 24h a °C. La sangre obtenida para medir la velocidad de sedimer- tacidin globular puede mantenerse 40 5h a temperatura ambiente sin alters ciones significativas. Una vez obtenido el expécimen adecuado, debe repartiree por Las secciones: del laboratorio, de acuerdo con las peticiones y la estructura del mismo. Esta operacién se realiza, cominmente, de forma manual Para evitar trasvases. que pueden dar lugar a errores, muchos analizadares automdticos y otros equipos del laboratorie dinico pueden utilizar los mismos tubos de extraccdn como recipientes para la toma de suero o de plasma.SCL ADACA Gh va pind onapareamnee nce, ‘Los especimencs de orina para los andlisis sistemdtioos no requieren procesa- do. Una vez recibidos en ef laboratorio, se trasvasa una parte de la orina 2 tubos de volumen mas reducido y féciles de manejas. Los nubos mas utilizados son de material transparente, de 10-12 ml de capacidad, con fondo cfnico, fScilmente rotulables y con tapén. Ein estos tubos se introducen Iss tires de orina directamente. ‘Sedimento urinario ‘La realizacion del sedimento urinario exige centrifugar La orina, proceso que debe hacerse de la forma mas sistemitica posible Las principales fuentes de -variacién al abservar al sedimento proceden de la diferencia entre los voliime- es de orina, entre las fuerzas centrifugas (que crean cantidades variables de sediments), las cantidades de sedimento recogida y suspendido bajo el cubre- objetos, y de variaciones de la técnica entre las personas que realizan el proce- ‘Orinas de 24h (Con relacién a las orinas de 24 b, cuando se haya complatadola recopida debe Uevarse sin demora toda La rina al Iaboratorio, donde se mideel volumen y se realiza al fraccionamiento en alicuotas, de acuerdo con las determinaciones: que se vayan a realizar Antes de transferir el e=pécimen a lox contenedores mds pequefica, debe merdarse bien para asegurar su homogencidad. ‘OTROS LIQUIDOS BIOLOGICOS Liquid cefalorraquideo (Como se ba sefialado, ol LCR susle recogerse en tres recipientes, Hl contenido: del primer odel tercer recipiente se utiliza, en parte, para el recuentn de odlu- Jas; el resto se centrifuga ye hace una extensiéndel sediments, que se tifie con giemss para determinar la férmula leucocitasia, y con gram para observar Le presencia de microrganismes. H sobrenadantese emplea para las determina ciones bioquimicas. En cuanto al liquide del segundo recipiente, se usa para Jos cultives microbiolépicos El LCR debe cultivarse lo antes posible: cuando no pueda hacerse, tendri que mantenerse a temperatura ambiente, hasta que pueda realizarse el cultive. Liquidos pericardico, pleural, peritoneal y sinovial Estos liquidos se recogen en varios recipientes estéciles, uno de los cuales debe Uevar un anticoagulante para el recuenta celular total y la férmula leucocitaria. En el laboratorin, los liquicdes se centrifugan para separar las células, y se uti- lizan los sobrenadantes para las determinaciones bioquimicas. Cuando no pueda analizaree algiin constituyenteel mismo dia de la obtencién del liquide, se habri de congelar este y almacenarlo a -20°C hasta su anilisis.Liquide amnistico ‘Tras llegar al laboratorio, el Liquida amniética se centrifuga a baja velocidad Especimenes de semen Los especimencs de semen deben procesarse de forma semejante a los de san- gre en cuanto a las procauciones para evitar el contagio de los virus de Le hapatitic By del sida. Cuando legen al laboratorio, se observa su aspects y oe anota cualquier alteracién. Se mide el volumen con un tubo graduado o una jeringa y se evalla la consistencia y el pl. A continuscién, se mide también lx motilidad des se mide tifiéndolos con eosina ¢ una mezcla de eosina y nigrosina. Final- mente, sc hace una evtensidn del semen, que se ja con una mezcla a partes iguales deetancl (95% [v//vD) y éter, para analizar las caracteristices moriolé- gicasde le espermataznides.