Universidade de Braslia

Instituto de Qumica
Programa de Ps- graduao em Qumica

Obteno do alcalide indlico bufotenina de sementes

de Anadenanthera sp (Fabaceae: Mimosideae) do
bioma Cerrado e sua utilizao para sntese de
substncias bioativas.

Luciana Machado Ramos

Orientadora: Dra Maria Lucilia dos Santos
Co-orientadora: Dra Maria Mrcia Murta

Braslia, Agosto de 2008

 Universidade de Braslia
Instituto de Qumica
Programa de Ps-graduao em Qumica

Obteno do alcalide indlico bufotenina de sementes

de Anadenanthera sp (Fabaceae: Mimosideae) do
bioma Cerrado e sua utilizao para sntese de
substncias bioativas.

Luciana Machado Ramos

Dissertao apresentada ao Instituto de Qumica da Universidade de Braslia

como parte dos pr-requisito para obteno do ttulo de Mestre em Qumica.

Orientadora: Dra Maria Lucilia dos Santos

Co-orientadora: Dra Maria Mrcia Murta
rea: Qumica Orgnica

Braslia, 22 de Agosto de 2008

ii
Dedico aos meus pais, Ablio e Paraciaba, sem os quais jamais teria conseguido
vencer mais esta luta.

iii
 Agradecimentos

Agradeo a todos aqueles que participaram de forma positiva neste trabalho

com opinies, discusso, ajuda e companheirismo, marcando de forma
significativa esta dissertao.
professora Maria Lucilia por sua orientao, disposio, pacincia,
compreenso e pelo ensino.
professora Maria Mrcia Murta, por disponibilizar tempo para discusso de
contedos, seja nas disciplinas em que encontrei dificuldade seja, pela
compreenso, ensinamento e pacincia durante minha estadia no LITMO.
professora Ins, pelas explicaes e orientao dada a mim nos momentos
que precisei, seja no estgio ou em analises de espectros.
Aos meus pais, cujo apoio, Amor e educao foram essenciais para esta
conquista.
s minhas irms: Juliana e Tatyana, pela amizade de sempre, pelo amor e
fora recebida a cada encontro. Ao Cristiano e ao Murilo (meu sobrinho) por
participar de mais uma vitria.
amiga de todos os momentos, Ana Paula. Obrigado por estar comigo e
acreditar em mim at nos momentos que me dei por vencida.
Aos colegas Wagner, Tarcsio, Leandro, Andr, Wellington e Camila, por terem
sido meus companheiros de conversas e brincadeiras em longas tardes no
laboratrio;
Ao colega Leandro, pelas ajudas e analises de CG-EM;
Aos amigos Dino e Karine, que foram meus leais companheiros e conselheiros.
Obrigado pelas trocas de experincia, pelas conversas e opinies. Serei
eternamente grata por to sincera amizade, e por estarem comigo nos
momentos mais difceis, e que no foram poucos.
Aos meus familiares, cujos nomes no citados, mas grata por toda fora e
credibilidade.
Aos amigos de todos os momentos: Pollyana, Luciana Vieira (Lu Momento) e
Dalton, pelas palavras de carinho e companheirismo, mesmo diante de tanta
distncia.

iv
 Aos amigos que fiz nessa passagem em Braslia: Inanna, Drako, Kernus e
Lunnah. Obrigado por me abrigar em sua casa e por serem minha companhias
nesse momento.
Aos colegas: Elaine, Alexandre, Adolfo, Guilherme, Edimar, e aos que
esqueci por descuido os nomes.
Aos funcionrios da secretria do IQ que sempre me prestaram excelente
atendimento nas questes burocrticas.
Profa. Dra. Ins Sabioni Resck e ao Sr. Wilson pelas analises de espectros
RMN e IV.
Finalmente, agradeo a todos aqueles que contriburam direta ou indiretamente
na concretizao dessa jornada.
A todas as pessoas que me ajudaram durante esse perodo e que por
esquecimento no citei aqui.

v
ndice

Lista de Abreviaturas e Acrnimos viii

Lista de Figuras ix
Lista de Esquemas x
Lista de Tabelas xi
Lista de Fluxogramas xii
Lista de Anexos xiii
Resumo xiv
Abstract xv
1. Introduo 01
1.1. Potencialidades do gnero Anadenanthera como fonte de frmacos 04
1.2. Alcalides no gnero Anadenanthera 06
1.3. Biognese de alcalides indlicos 09
1.4. Propriedades farmacolgicas da bufotenina e possveis aplicaes
12
biolgicas.
1.5. Preparao e aplicaes sintticas de compostos indlicos 17
2. Objetivos 22
2.1 Objetivos Gerais 22
2.2 Objetivos Especficos 22
3. Metodologia 23
4. Resultados e Discusso. 25
4.1. Estudo fitoqumico de semente de espcies de Anadenanthera 25
4.2. Modificaes qumicas na bufotenina 38
4.2.1. Preparao de teres da bufotenina 38
4.2.2. Preparao de acilderivados 40
5. Parte Experimental 42
5.1. Procedimentos experimentais 42
5.2. Identificao botnica de espcies de Anadenanthera sp. 43
5.3. Fracionamento e caracterizao dos componentes qumicos das
sementes de Anadenanthera peregrina (BCE e APCEF) e Anadenanthera 44
colubrina (CO.)
5.3.1. Extrao pelo mtodo Stromberg 44

vi
5.3.2. Extrao em Sohxlet 44
5.3.3. Saponificao e esterificao do material oleaginoso 45
5.3.4. Propriedades fsico-qumicas e espectromtricas de bufotenina (2) 45
5.3.5. Preparao do monopicrato de bufotenina 46
5.4. Modificaes qumicas da bufotenina 46
5.4.1. Iodeto de N,N,N-trimetil bufotenina 46
5.4.2. Preparao do cinamato de bufotenina 47
5.4.3. Preparao do acetato de bufotenina 47
5.4.4. Preparao do benzoato de bufotenina 48
6. Concluses e Perspectivas 49
7. Referncias bibliogrficas 50
8. Anexos 55

vii
 Lista de Abreviaturas e Acrnimos
AC Acetila
Associao dos profissionais da Caixa
APCEF
Econnica Federal
BCE Biblioteca Central
BnOH lcool benzlico
BChE Butilcolinesterase
Cbz Carbobenzxi
CCD Cromatografia em camada delgada
CO Centro Olmpico
COSY Correlated Spectroscopy
Cromatografia gasosa acoplada em
CG-EM
espectrmetro de massa
DCM Diclorometano
Distortionless Enhancement by Polarization
DEPT
Transfer

DMAP Dimetilaminopiridnio

DMSO Dimetilssulfxido
DMT Dimetiltriptamina
Eq. Equivalente
Et Etila
HMQC Heteronuclear Multiple Quantum Correlation
Inibidores seletivos da recaptao da
ISRS
serotonina
LiEt3BH Trietilboroidreto de ltio
MAO Monoaminooxidase
Me Metila
NCEs Novas entidades qumicas
PEA Feniletilamina
p.f. Ponto de fuso
Ph Fenila
Py Piridina

viii
 Ressonncia Magntica Nuclear de Carbono
RMN13C
13
1
RMN H Ressonncia Magntica Nuclear de Hidrognio
SNC Sistema nervoso central
t.a. Temperatura ambiente

ix
Lista de Figuras

Figura 1. Novos frmacos, 1981-2002, por origem (n = 1031). 02

Figura2. Anadenanthera peregrina (Piptadenia falcata Benth). Detalhe
05
das folhas, inflorescncia, da vagem e sementes.
Figura 3. Exemplos de alcalides naturais conhecidos. 07
Figura 4. Ncleo indlico. 07

Figura 5. Principais alcalides indlicos presentes em Anadenanthera 08

Figura 6. Cinamida e benzoato anlogos da serotonina. 14
Figura 7. Marcadores qumicos 15
Figura 8. Bufotenina e seu ismero, psilocina 15
Figura 9. Sistema -carbolnico 16
Figura 10. A. peregrina (BCE) Detalhes do ramo, da vagem, da
27
inflorescncia, das sementes e da germinao.
Figura 11. A. colubrina (CO). Detalhes da vagem, inflorescncias e
28
das sementes.
Figura 12. A. peregrina (APCEF) Detalhes das sementes. 28
Figura 13. Cromatograma (CG-EM) da bufotenina (pico maior) e
30
impurezas.
Figura 14. Bufotenina pura: slido amarelado. 34
Figura 15. Comparao do espectro de massa da bufotenina com
36
dados da biblioteca virtual.
Figura 16. Cristais de picrato de bufotenina 36

x
Lista de Esquemas

Esquema 1. Formao de alguns aminocidos via cido chiqumico 10

Esquema 2 . Biossntese de indol etilaminas 11
Esquema 3. Proposta mecanstica para a sntese de Fisher 18
Esquema 4. Sntese de derivados da melatonina 19
Esquema 5. Preparao de 2-(2-piridil)-indol apartir de hidrazina 19
Esquema 6. sntese geral de Madelung 19
Esquema 7. Mtodo de Madelung-Houlihan 20
Esquema 8. Tetraidro--carbolina (42) via ciclizao de Pictet
20
Spengler.
Esquema 9. Sntese de tetraidro- -carbolinas 21
Esquema 10. Derivados da bufotenina 24
Esquema 11. Equao qumica da saponificao/esterificao de um
31
triacilglicerol genrico
Esquema 12. Formao do sal de bufotenina 39
Esquema 13. Preparao indireta de O-metil bufotenina 40

xi
Lista de Tabelas

Tabela 1. Resultado dos processos extrativos no Shxlet em 28

diferentes condies.
Tabela 2: Teor de bufotenina e triacilgliceris nos extratos etanlicos. 29
Tabela 3: Teor de leo e composio de cidos graxos nas sementes 32
de A. peregrina
Tabela 4: Dados espectroscpicos de RMN 1H e RMN 13C da bufotenin 35
isolada
Tabela 5. Resultados dos processos extrativos com Anadenanthera 37
peregrina (BCE).
Tabela 6. Resultado das reaes de metilao. 38

xii
Lista de Fluxogramas
Fluxograma 1. Fracionamento das sementes de A. peregrina por 28
macerao.
Fluxograma 2. Saponificao e esterificao do leo extrado de A. 31
peregrina.
Fluxograma 3. Obteno da bufotenina de sementes de 33
Anadanathera segundo o mtodo de Stromberg.

xiii
Lista de Anexos
Anexo 1. Chave de Classificao 56
Anexo 2. IV Bufotenina A. peregrina var. peregrina 59
Anexo 3. RMN H1 Bufotenina A. peregrina var. peregrina 60
Anexo 4. RMN C 13 Bufotenina A. peregrina var. peregrina 61
Anexo 5. APT - Bufotenina A. peregrina var. peregrina 62
Anexo 6. HMQC - Bufotenina A. peregrina var. peregrina 63
Anexo 7. CG-EM - Bufotenina A. peregrina var. peregrina 64
Anexo 8. IV Triacilglicerol 65
Anexo 9. RMN H1- Triacilglicerol 66
Anexo 10. CG Metil steres (amostra 1) 67
Anexo 11. CG Metil steres (amostra 2) 68
Anexo 12. IV Bufotenina A. peregrina var. falcata 69
Anexo 13. RMN H1 - Bufotenina A. peregrina var. falcata 70
Anexo 14. RMN C 13 - Bufotenina A. peregrina var. falcata 71
Anexo 15. IV - Bufotenina A. colubrina var. cebil 72
Anexo 16. RMN H1 - Bufotenina A. colubrina var. cebil 73
13
Anexo 17. RMN C - Bufotenina A. colubrina var. cebil 74
Anexo 18. IV Monopicrato de bufotenina 75
Anexo 19. RMN H1 Monopicrato de bufotenina 76
Anexo 20. RMN C 13 Monopicrato de bufotenina 77
Anexo 21. IV Iodeto de N,N,N - trimetil bufotenina 78
Anexo 22. RMN H1- Iodeto de N,N,N - trimetil bufotenina 79
13
Anexo 23. RMN C - Iodeto de N,N,N - trimetil bufotenina 80
Anexo 24. RMN H1 Derivado cinamato de bufotenina 81
Anexo 25. RMN H1 Derivado acetilado de bufotenina 82

xiv
 Resumo

O bioma Cerrado Brasileiro tem uma grande variedade de espcies vegetais ricas
em substncias qumicas orgnicas de interesse, especialmente alcalides,
encontradas em diferentes teores nas folhas, frutos, caules, razes e sementes. O
presente estudo incidiu sobre a fitoqumica da Anadenanthera (Fabaceae:
Mimosoideae), uma rvore perene generalizada no Cerrado Brasileiro, conhecida
popularmente como angico-do-cerrado, angico-cascudo, angico-do-campo e
arapiraca. Uma ateno especial foi destinada ao estudo comparativo do alcalide
indlico bufotenina em sementes de diferentes espcies de Anadenanthera e
investigao de seu potencial como matria-prima para preparao de anlogos da
serotonina que exibem atividade antimicrobiana, antitumoral e capturadores de
radicais livres, assim como derivados tetrahidro--carbolina capazes de atuar no
sistema nervoso central. Partes das plantas (folhas, flores, caule e sementes) de
espcies do gnero Anadenanthera foram coletadas de agosto a setembro de 2006,
nos arredores de Braslia. Exsicatas foram preparadas e depositadas no Herbrio da
Universidade de Braslia. As espcies coletadas foram identificadas como sendo
Anadenanthera peregrina (vars. peregrina e falcata) e Anadenanthera colubrina (var.
cebil). As sementes foram submetidas a diversos mtodos extrativos. O extrato
etanlico (Soxhlet) das sementes apresentou uma frao menos polar e abundante
composta basicamente por triglicerdeos de cidos graxos e uma frao mais polar
constituda apenas pelo alcalide indlico bufotenina. O mtodo de Stromberg
demonstrou ser um mtodo mais eficiente para a extrao, purificao e
quantificao da bufotenina. A presena de bufotenina em extratos das variedades
foi confirmada por FT-IR, RMN H1, RMN C13 e CG-EM. O estudo fitoqumico
confirmou que estas espcies so fontes promissoras da bufotenina (cerca de 2,9%)
e a literatura sugere que modificaes estruturais adequadas na bufotenina podem
fornecer compostos com elevado potencial bioativo.

Palavras-chave: Anadenanthera, alcalides indlicos, bufotenina.

xv
 Abstract

The biome Brazilian Cerrado (Savannah) has a variety of plant species rich in
organic chemicals of interest, especially alkaloids, found at different levels in the
leaves, fruits, stems, roots and seeds. The current study focused on the
phytochemistry of the Anadenanthera (Leguminosae: Mimosoideae), a perennial tree
widespread in the Brazilian Cerrado, popularly known as angico-do-cerrado, angico-
cascudo, angico-do-campo and arapiraca. Special emphasis was intended for
comparative investigation of the indole alkaloid bufotenine in seeds of different
species of Anadenanthera and its potential utilization as raw-material for the
preparation of serotonin analogous, which have shown to exhibit antimicrobiana,
antitumoral and free radical scavenging activities as well as tetrahydro--carboline
derivatives which can be active in the central nervous system. Parts of the plants
(leaves, stems, flowers, and seeds) of the genus Anadenanthera were collected
around Brasilia from august to setember, 2006, vouchers were prepared and
deposited in the University of Brasilia Herbarium. The species were identified as
Anadenanthera peregrina (vars. peregrina and falcata) and Anadenanthera
columbrina (var. cebil). Seeds were submited to different extraction metodologies.
The seed ethanolic extract (Soxhlet) shown a less polar and abundant fraction that
the main chemical components are triglycerides of fatty acids and a more polar
fraction constituted only by the indole alkaloid bufotenin. The Stromberg methods
shown to be a more efficient methodology for extraction, purification and
quantification of the bufotenine. The presence of bufotenine in extracts of these
1 13
varieties was confirmed for FT-IR, H NMR, C NMR, and GC-MS. The
phytochemical study confirmed that these species are promising source of the
bufotenine (about 2,9%) and the literature suggests that appropriate structural
modifications on bufotenine may afford potential bioactive compounds.

Key words: Anadenanthera, indole alkaloids, bufotenine.

xvi
1. Introduo:

A utilizao de produtos naturais como recurso teraputico to antiga

quanto civilizao humana e, por muito tempo, produtos minerais, vegetais e
animais constituram o arsenal teraputico. Com o desenvolvimento da qumica
orgnica, os produtos sintticos foram adquirindo primazia no tratamento
farmacolgico e isto ocorreu, entre outros fatores, pela maior facilidade de obteno
de compostos puros, com o desenvolvimento de processos de modificaes
estruturais (com vistas a frmacos mais ativos e mais seguros) e pelo crescente
poder econmico das grandes companhias farmacuticas. Mesmo assim, os
produtos naturais no perderam seu lugar na teraputica, sendo considerados
equivocadamente pela populao como medicamentos seguros, garantindo um
crescimento em sua utilizao. 1
O reino vegetal aquele que tem contribudo de forma mais significativa
para o fornecimento de substncias teis ao tratamento de doenas que acometem
os seres humanos. Por volta de 1990, estimou-se que cerca de 80% da populao
mundial procurava as plantas como fonte principal de medicamentos. Nos dias
atuais, verifica-se que grande parte dessa populao, principalmente aqueles pases
que esto em desenvolvimento, usam como medicamentos extratos ou pores
oriundas de plantas. Em um estudo recente, foi demonstrado que mais da metade
dos agentes teraputicos disponibilizados no mercado no perodo de 1981-2002 so
produtos naturais ou originado destes. So classificados como agentes teraputicos
de origem natural (Figura 1): os produtos naturais propriamente ditos, seus
derivados semi-sintticos e os produtos baseados em prottipos naturais, ou seja,
modelados a partir destes. 2

1
Montanari, C. A.; Bonzani, V. S.; Quim. Nova, 2001, 24, 105.
2
Newman, D..J.; Cragg, G. M.; Snader, K. M. J. Nat. Prod. 2003, 60, 1022.

1
Figura 1. Novos frmacos, 1981-2002, por origem (n = 1031). B: biolgica; N: produto natural; ND:
derivado de produto natural (semi-sinttico); S: totalmente sinttico; S*: produzido por sntese total,
porm o farmacforo inspirado em um produto natural; V: vacina; NM: mimetiza um produto natural
(Fonte: Newman, D..J.; Cragg, G. M.; Snader, K. M. J. Nat. Prod. 2003, 60, 52).2.

O conhecimento adquirido com o estudo qumico biomonitorado de

espcies brasileiras pode permitir no s o desenvolvimento de novos frmacos ou
de modelos para novas molculas bioativas como tambm servir de subsdio para o
controle de qualidade de fitoterpicos, por exemplo, atravs da definio de
marcadores qumicos. Adicionalmente, o conhecimento de caractersticas qumicas
de vegetais pode contribuir para o conhecimento das vias metablicas bem como
para estudos taxonmicos de diferenciao de espcies.
O Brasil conta com importantes ecossistemas, representando uma mega
diversidade biolgica onde se estima existirem incontveis exemplares de plantas
com uso teraputico comprovado ou com conhecido potencial para esse fim.
Diversos ecossistemas incluem representantes de mais de 70% dos organismos
vivos do planeta, dos quais cerca de 20% so encontrados somente aqui no Brasil.
Mesmo sem contar com um inventrio preciso das espcies existentes, considera-se
que existam 55.000 tipos de plantas superiores, muitas delas com uso teraputico
tradicionalmente adotado por determinadas comunidades, alm de outras j
identificadas por pesquisadores, com princpios ativos capazes de atuar em diversas
enfermidades. Tem sido amplamente debatido como esse potencial teraputico,
utilizado de forma racional e sustentvel, pode ser fonte geradora de vantagem
competitiva para as empresas nacionais. 3

3
Lewis, G. P.; Schrire, B.; Mackinder, B. & Lock, M.: Legumes of the world. Royal Botanic Gardens,
Kew, 2005, 577.

2
 Contudo, a dimenso do territrio brasileiro e a diversidade de biomas
existente ainda representam desafios quando se fala em conservao e
gerenciamento de recursos biolgicos. Alguns pontos, em particular, devem ser
tratados com maior profundidade, como, por exemplo, a adequao das instituies
publicas s peculiaridades de cada bioma e disponibilidade de informao
cientfica referente ao mapeamento e localizao de diferentes espcies.
A Fabaceae com cerca de 727 gneros e 19.325 espcies considerada
a terceira maior famlia de angiospermas. No Brasil est representada
aproximadamente por 188 gneros e 2.100 espcies, distribudas em quase todas
as formaes vegetais. Mimosoideae compreende 78 gneros e aproximadamente
3.270 espcies, distribudas nas regies tropicais, subtropicais e clido-temperadas.
Quase dois teros das espcies conhecidas esto subordinadas a trs gneros:
Accia, Mimosa e Inga. A flora brasileira considerada uma das mais ricas do globo
e a Fabaceae apontada como uma das famlias mais representativas nas
formaes florestais neotropicais.3
A potencialidade do Cerrado Central Brasileiro como fonte de substncias
interessantes, sob o ponto de vista qumico e farmacolgico, vem estimulando uma
srie de pesquisas visando descoberta de princpios ativos e o desenvolvimento
de novos frmacos.3
Neste estudo, nfase especial foi destinada ao gnero Anadenanthera,
pertencente famlia das Fabaceae (Mimosoideae), popularmente conhecida como
angico-do-cerrado, angico-cascudo, angico-do-campo e arapiraca, de vasta
distribuio no Distrito Federal, Gois, Mato Grosso, Mato Grosso do Sul, Minas
Gerais, Paran, Pernambuco e So Paulo, e muito utilizada em arborizao de ruas
e praas. 4

4
Almeida, S. P.; Proena, C.E.B.; Sano, S. M. e Ribeiro, F. J. Cerrado - Espcies vegetais teis.
Planaltina DF, EMBRAPA. 1998, 35.

3
1.1. Potencialidades do gnero Anadenanthera

No Brasil central, a famlia das Fabaceae a mais rica tanto nas

formaes de cerrado como de matas, produzindo sementes ricas em nitrognio,
permitindo que as plntulas contenham folhas com alto teor de nitrognio nessa fase
juvenil e, portanto, cresam rapidamente. Adicionalmente, os tecidos ricos em
nitrognio so fontes de nutrientes abundantes em protena para homens e animais
em quase todas as partes do mundo e vrias espcies desta famlia constituem
culturas valiosas para o agronegcio. Elas podem crescer em solos pobres sem
nitrognio porque desenvolvem ndulos nas suas razes contendo bactrias
simbiticas que fixam o nitrognio atmosfrico ou pelo desenvolvimento de
associaes ectomicorrzicas com capacidade acentuada de captar nitrognio. 5
No gnero Anadenanthera (Figura 2) existem duas espcies
(Anadenanthera peregrina e Anadenanthera colubrina) e quatro variedades restritas
ao Novo Mundo, distribudas em regies de climas tropicais e subtropicais. 6
Provavelmente, o centro de origem do gnero est nos cerrados (Figura 2). 7
Segundo Altschul,6 A. peregrina apresenta fruto opaco, escamoso e verrugoso,
anteras no glandulares e o invlucro a do pednculo. Enquanto a A. colubrina
possui frutos reticulados e lustrosos, anteras glandulares e invlucros abaixo do
receptculo.5 A descrio botnica do gnero Anadenanthera contempla entre as
principais caractersticas: porte arbreo pouco ramificado, de at 20 metros de
altura, com dimetro altura do peito variando de 19,5 a 108,6 cm. O fruto um
legume, achatado, grande, at com 25 cm de comprimento. As sementes, de
marrom avermelhado a escura, so achatadas, com pequenas reentrncias hiliar. 8,9
A casca da A. peregrina normalmente, pardoavermelhada, grossa, muito rugosa,
e apresenta acleos no caule e jovens ramos lisos. A casca ao ser ferida exsuda

5
Sprent, J. I. Nitrogen acquisition systems in the Leguminosae. In : Sprent, J. I. & McKey, D. (eds.)
Advances in Legume Systematics, part 5. The Nitrogen Factor. Royal Botanic Gardens, Kew, UK.
1994, 1-16.
6
Altschul, S. Von R. A taxonomic study of the genus Anadenanthera. In: Contributions to the Gray
Herbarium 1964, 193, 1-65.
7
Fagg, C. W . Leguminosas da APA de Cafuringa. In: Netto, PB, Mecenas, V.V. e Cardoso ES (Edits)
APA de Cafuringa, a ltima fronteira natural do DF. Brasilia: Semarh. 2005, 147-152 e 453-457.
8
Almeida, E.R. Plantas medicinais brasileiras: conhecimentos populares e cientficos. Heemus ed.
Limitada. 1993. 341
9
Lorenzi, H.;rvores brasileiras - Manual de Identificao e cultivo de Plantas arbreas Nativas do
Brasil- ed. Plantarum, Nova Odessa vol I- So Paulo SP, 1992, 352.

4
uma resina avermelhada e apresentam inflorescncia com flores brancas, alvas
dispostas em glomrulos fasciculados axilares.

Figura 2. Anadenanthera peregrina (Piptadenia falcata Benth). Detalhe das folhas, inflorescncia, da
vagem e sementes (Fonte: Almeida E.R.).4

A Anadenanthera peregrina uma planta melfera de crescimento e de

germinao rpida, utilizada para arborizao de ruas e praas. A madeira dura e

5
compacta sendo, portanto, usada na construo civil. A casca adstringente e
usada para curar ferida e para curtumes. Da casca retira-se corante para tinturaria, 10
a goma usada no tratamento de doenas pulmonares 11 e substituto para colas
industrializadas. A espcie A. colubrina tambm produz madeira de grande
durabilidade para a construo civil (vigas e assoalhos), e fornece lenha e carvo de
boa qualidade. A goma comestvel como goma arbica ou mastigada como
chiclete e, tambm utilizada como remdio contra tosse, bronquite e afeces do
pulmo. A casca rica em taninos (de 15 a 20%) o que a qualifica como eficiente
cicatrizante. 12,13
A infuso das flores de ambas as espcies de angico tem as mesmas
propriedades curativas sendo utilizada na forma de ch como depurativo do
sangue.13 As folhas fenadas ou secas constituem boas forragens, entretanto quando
ingeridas por bovino, caprino, eqino ou ovino pode ocasionar a morte. 14 A casca e
as sementes, pelo tanino que possuem (32%), tm ampla utilizao industrial, como
no curtimento de couro, na indstria de plstico e de tintas, 15 possuindo tambm
outros constituintes qumicos, incluindo alcalides.

1.2. Alcalides no gnero Anadenanthera

O bioma cerrado dispe de grande variedade de espcies vegetais ricas

em substncias qumicas de interesse biolgico, principalmente alcalides,
encontrados em diferentes teores nas folhas, frutos, caule, razes e sementes.4
Os alcalides compem um grupo de substncias naturais com estrutura
molecular bastante diversificada (Figura 3) contendo pelo menos um nitrognio
bsico em sua estrutura e que apresentam, freqentemente, atividade farmacolgica

10
Carvalho, P. E. R. Espcies florestais brasileiras: recomendaes silviculturais, potencialidades e
uso da madeira. Colombo: EMBRAPA-CNPF 1994, 640.
11
Corra, M. P. Dicionrio das plantas teis do Brasil e das exticas cultivadas. Rio de Janeiro:
Ministrio da Agricultura / Instituto Brasileiro de Desenvolvimento Florestal, 1984,1, 747.
12
Milano, M. S.; Rizzi,N. E. e Kaniaok, V.C. Princpios bsicos de manejo e administrao de reas
silvestres. Curitiba: ITCF, 1986, 55.
13
Maia, G.N. Caatinga: Arvores e arbustos e suas utilidades. So Paulo: D & Z Computao Grfica e
Editora. 2004, 104-113.
14
Tokarnia, C.H; Peixoto, P.V.; Dobereiner, L.; Intoxicao experimental por piptadenia macrocarpa
(Leg. Mimodoideae) em bovinos. Pesquisa veterinria brasileira. 1994.14 (2/3): 57-63
15
Rezende, S.J. Barbatimo. Ruralidade. 1975,17.

6
pronunciada. 16, 17 , 18 O grande interesse em alcalides advm muito provavelmente
dessas aes farmacolgicas intensas observadas desde os primrdios da
civilizao. 19, 20 , 21

HO N COOMe
H

O O N
O
N
H H N
H
HO
Morfina Cocana Nicotina

Figura 3. Exemplos de alcalides naturais conhecidos: morfina (extrado da Papaver somniferium L),
cocana (Erythroxylon coca Lam) e nicotina (Nicotina tabacum L)

Os alcalides indlicos fazem parte de uma classe de compostos

constituda por molculas contendo o indol (Figura 4) na estrutura bsica, sistema
heteroaromtico planar, formado por cinco pares de eltrons conjugados
provenientes das ligaes duplas carbono-carbono e dos eltrons no-ligantes do
tomo de nitrognio. 22

N
Indol

Figura 4. Estrutura bsica de alcalides indlicos.

At 1980, o nmero de alcalides indlicos estruturalmente conhecidos

era de aproximadamente 1200. 23 Aps duas dcadas, o nmero de substncias
conhecidas contendo o anel indlico aumentou, perfazendo mais de 3000 alcalides

16
Correia, C. R. D.; Sntese estereosseletiva de alcalides e N-heterociclo, UFSCar, 2001.
17
Kuboyama,T., Yokoshima, S., Tokuyama, H., Fukuyama,T.; PNAS, 2004 ,101 (33), 11966.
18
M. Kutchan. The Plant Cell, 1995, 7, 1059.
19
Simes, C. M. O., Schenkel, E. P., Gosmann, G.; Mello, J. C .P., Mentz, L. A.; Petrovick, P. R.;
Farmacognosia da planta ao medicamento. Editora UFSC. 2007.
20
Goossens A.; Rischer, H.; Phytochem Rev . 2007, 6, 35.
21
Facchini, P. J.; Annu. Rev. Plant Physiol. 2001, 52, 29.
22
Sundberg, R. J. Indoles, Academic Press Inc., London, 1996.
23
Phlipson, J. D.; Zenk, M.H.; ndole and Biogenetically Related Alkaloids. Academic Inc. New
York.1980

7
isolados, dentre os quais cerca de 40 so agentes medicinais com diversas aes
teraputicas. 24
Em 1954, Stromberg isolou das sementes de Piptadenia peregrina (A.
peregrina) coletadas no Haiti (Amrica Central), uma quantidade significativa do
alcalide indlico bufotenina (2). 25 No ano seguinte, Fish, et AL, 26 trabalhando com
sementes de P. peregrina, P. macrocarpa e P. paniculada coletadas em Porto Rico,
Brasil e USA (Flrida), observaram um maior teor de alcalides nas sementes e uma
quantidade inferior nas vagens e, em algumas variedades, a inexistncia dos
mesmos. Em 1959, Zacharias et AL, 27 trabalharam com as sementes de P. colubrina
(coletadas no Brasil), observando-se em todos os casos quantidades traos de
outros alcalides. Mais tarde, Fellows e Bell, 28 estudando o metabolismo de indis
na mesma planta (coletadas no Caribe e Amrica do Sul), mostraram que alm da
bufotenina (5-hidrxi-N,N-dimetiltriptamina, 1), tambm estavam presentes a
serotonina (2) e outros derivados triptofnicos [5-hidroxi-N-metiltriptamina (5-HT, 3),
triptamina (4) e N,N-dimetiltriptamina (5)] (Figura 5). 28
R1
R1
N R2
N R2

R3

NH
NH
1. R1=R2= CH3, R3= OH bufotenina 4. R1=R2= H triptamina
5. R1=R2= CH3, N,N-dimetiltriptamina
2. R 1=R2= H, R3= OH serotonina
3. R1=H, R2= CH3, R3= OH 5- hidrxi N-metiltriptamina

Figura 5. Principais alcalides indlicos presentes em Anadenanthera.

Alm de encontrar-se amplamente distribuda entre as plantas,

principalmente na famlia das leguminosas, a bufotenina (1) pode ser encontrada em
vertebrados (fluido corpreo em humanos)26, 29 , 30 e invertebrados.31-37 Nos anfbios
esta molcula associada geralmente ao mecanismo de defesa contra predadores,
devido a suas propriedades txicas, ocorrendo na secreo de pele de anfbios
anuros, principalmente de sapos do gnero Bufo, mas tambm em Leptophryne

24
Austin, J. F.; McMillan, D.W.C.; J. Am Chem. Soc. 2002, 124, 1172.
25
Stromberg, V. L.; J.Med. Chem. 1954, 76, 1707.
26
Fish, M. S, Joohnson, M. e Horning, E.C.; J. American Chem. Soc. 1955, 77, 5892-95.
27
Pachter, I. J; Zacarias, D. E , Ribeiro, 0.; J. Org. Chem. 1959, 24, 1285-87.
28
Fellows, L. E.; Bell, E. A.; Phytochemistry, 1971,10, 2083.
29
Karkkainem, J; Raisanen, M, Biological Psychiatry, 1992, 32, 1042-1048.
30
Falkenerg, G. Acta Cryst, 1972, 28 (Pt11), B 3219.

8
borbonica, Capensibufo rosei, Litoria adelaidensis, Litoria granulosa, Litoria
pearsoniana, Rana dalmatina, R. iberica, R. temporaria, Osteocephalus taurinus, O.
oophagus e O. langsdorffi. 31,32 A bufotenina extrada de Leptodactylus pentadactylus
teve a sua atividade bactericida e fungicida comprovada. 33
Outras fontes naturais de bufotenina so: (a) Phalaris aquatica, uma
grama perene com potencial agronmico, associado sndrome da morte-repentina
em bovinos; 34 (b) Brosimum acutifolium (Moraceae), uma planta medicinal e txica
na Guiana francesa conhecida como takini, takweni, tauni ou murur, cujo ltex
usado como um alucingeno e para alvio reumatismos 35 e (c) Cogumelos do gnero
Amanita contm bufotenina, 5-hidrxitriptofano e 5-hidrxitriptamina, 36 (d) Musa
sapientum (banana). 37
De forma geral, conclui-se que os registros sobre Anadenanthera
demonstram de forma consistente que a bufotenina (1) o nico alcalide
significativo nas sementes maturas de Anadenanthera peregrina e Anadenanthera
colubrina.

1.3 Biognese de alcalides indlicos

Levando-se em conta que as substncias produzidas via metabolismo

secundrio desempenham papis muito importantes para o organismo que as
produz estando, portanto, intimamente relacionadas com a sua sobrevivncia no
ambiente como, por exemplo, atuando na produo de energia para o
organismo.19,38 Os vegetais, os microorganismos e uma minoria de animais,
conseguem produzir, transformar e acumular substncias atravs do metabolismo
secundrio cujos produtos garantem vantagens para a sua sobrevivncia. Alguns
dos metablitos secundrios possuem atividade biolgica importante, sendo
31
Costa, T. O. G.; Morales, R. A. V.; Brito, J. P.; Gordo, M.; Pinto, A. C.; Bloch Jr, C.; Toxicon, 2005,
46, 371.
32
Erspamer, V. in: Heatwole, H., Barthalmus, G.T. (Eds.), Bioactive secretions of the amphibian
integument amphibian biology. The Integument, vol. 1. Ed Surray Beatty and Sous, Chipping
Norton, Australia, 1994, 178350.
33
Habermehl, G.; Preusser, H. J. Z. Naturforsh B. 1970, 25, 1451-2.
34
Zhou, L.; Hopkins; A. A.; Huhman; D. V.; Sumner, L. W. J. Agric. Food Chem. 2006, 54, 9287
35
Moretti, C.; Gaillard,Y.; Grenand,P.; Fabien B.F.; Prvost, J.M.; J.Ethanopharmac. 2006, 106, 198.
36
Beutler, John A.; Der Marderosian, Ara H.; J. Nat Prod. 1981, 44, 422-31.
37
Fellows, L. E.; Bell, E. A.; Phytochemistry, 1970, 9, 2389.
38
Dewick, P. M.; Medicinal Natural Products, 2nd ed.; Wiley, New York, 2002.

9
utilizados na indstria farmacutica, j que esses metablitos ou seus derivados,
muitas vezes so ativos no controle de algumas doenas. 39
A elevada capacidade biossinttica das plantas, evidenciada pelo grande
nmero de substncias produzidas e sua diversidade em uma mesma espcie,
constitui a principal caracterstica do seu metabolismo secundrio. A origem dos
alcalides (Esquema 1) provm da gliclise e, no caso especfico dos alcalides
indlicos, ocorre a partir do intermedirio cido chiqumico.19
Glicose

Ciclo das Pentoses Gliclise

P O
-
H O O

HO O CH2
PO
OH
eritrose Piruvato
4-fosfato H2PO4-
H2O NADPH+ H+
NADP+ -
O O

Chiquimato

HO OH
CH3

O -
O

Corismato CH2
-
O
O
OH O

HO HO
O
O COOH

NH2
NH2
Antranilato HO
O Prefenato

OH O
O
NH2
NH OH
OH
triptofano NH2
NH2
HO
Tirosina Fenilalanina

N
H N
Indol Quinolina

Esquema 1. Formao de alguns aminocidos via cido chiqumico.19

39
Sullivan, R. J.; Hagen, E. H.; Addiction, 2002, 97, 389.

10
 Na elucidao estrutural de uma substncia extrada de uma planta ou
microorganismo, a prpria estrutura qumica fornece alguns indcios de sua
biognese. A descarboxilao do L-triptofano (6) e 5-hidrxitriptofano (7) formam a
triptamina (4) e serotonina (2), respectivamente. Essas aminas podem sofrer
modificaes gerando outras estruturas, como por exemplo: por hidroxilao da
triptamina (4) so produzidas a serotonina (2) e a 6-hidrxitriptamina (11); por
metilao da serotonina (2) formam-se a bufotenina e 5-metxitriptamina (9); por N-
oxidao forma-se o N-xido de bufotenina (10) e por acetilao da 5-
metxitriptamina (9) produzida a melatonina (8) (Esquema 2). 40
H2PO3 CH3 CH3

NH2 O N OH N
CH3 CH3

N N N
HO H
H H
6-hidroxitriptamina (11) psilocibina (12) psilocina (13)

CH3

NH2 N
O CH3

OH 1

NH2 N N
NH H H

L - triptofano (6) triptamina (4) N,N- dimetiltriptamina (5)

O CH3
2
OH NH2 N
CH3
HO HO HO
NH2 1

N N N
H H H
bufotenina (1)
5-hidroxi-L triptofano (7) serotonina (2)

3 CH3

NH2 N
CH3
O
HO
NH H3C O

H3C O CH3
N N
H -
N O
H
melatonina (8) 5 - metoxitriptamina (9) N-xido de bufotenina (10)

Enzimas: 1-triptofano descarboxilase, 2- triptofano 5-monoxigenase, 3-triptofano- metil transferase.

Esquema 2. Biossntese de indol etilaminas.40

40
Luckner, M.; Secondary Metabolism in Microorganisms, Plants, and Animals, 3a, New York 1990.

11
 De acordo com o Esquema 2, os alcalides indlicos originam-se do
triptofano via descarboxilao, metilao e/ou hidroxilao especficas do
26,39,41
aminocido. No entanto, no existe um modelo biossinttico comum para os
alcalides indlicos nas plantas que os sintetizam, as quais podem mostrar
diferenas na suas composies qumicas. As diferenas nos teores de alcalides
indlicos em variedades de Anadenanthera devido a fatores genticos ou
ambientais, o que justifica a ausncia de certos alcalides em determinadas
espcies.26,28
A bufotenina (1) formada via triptofano (6) por diferentes rotas
metablicas e por ao de enzimas especficas26,39,40 (Esquema 2). Por meio de uma
srie de experimentos em que eventuais precursores de bufotenina, no marcados e
marcados com C-14 ou H-3, foram incubados com tecidos de P. peregrina, Fellow e
Bell concluram que o principal caminho biossinttico da bufotenina ocorre via
triptofano (6) ou triptamina (4).28

1.4. Propriedades farmacolgicas dos alcalides indlicos e

possveis aplicaes biolgicas

Com poucas excees, os neurnios do SNC so incapazes de se dividir

ou de sofrer regenerao quando seus axnios so interrompidos. Destarte, um
processo patolgico passvel de provocar perda neuronal geralmente tem
conseqncias irreversveis. Acredita-se que cerca de 1,5 bilhes de pessoas em
todo o mundo sejam acometidas de doenas neurolgicas ou psiquitricas, como a
depresso e a ansiedade, a epilepsia, dor neuroptica e a enxaqueca. Dados da
Organizao Mundial de Sade (OMS) indicam que 13-20% da populao mundial
apresentam sintomas depressivos, sendo 2-3% desse total atribudo a indivduos
com transtornos afetivos graves. 42 Outras patologias como esquizofrenia e os
transtornos uni/bipolar so observadas em uma parte da populao. Na maior parte
destas doenas, pelo menos 25% dos doentes no tm um diagnstico correto nem
recebem o tratamento adequado. 43

41
Udenfriend. S.; Titus, E.; Weissbach, H.; Peterson, R.E. JBC, 1995, 335.
42
Romeiro, L. A.S.; Fraga,C.A. M.; Barreiro, E.J.; Quim. Nova, 2003, 26, 347-358,
43
Rebelatto, J. R; Morelli, J. G. S; Fisoterapia Geritrica. 2a , 2007, 241.

12
 As patologias neurodegenerativas tais como Doena de Alzheimer e
Parkinson bem como desordens cerebrovasculares constituem uma das principais
causas de morbidade e de mortalidade na vida adulta. O desequilbrio entre os
sistemas de gerao e de proteo antioxidante celulares, chamado de estresse
oxidativo, desempenha um papel importante nos danos neurais causados pelos
processos isqumicos, provocando alteraes funcionais em macromolculas e
promovendo lipoperoxidao de membranas. Substncias com dupla atividade
anticolinestersica e antioxidante vm sendo consideradas como uma nova
abordagem teraputica para o tratamento farmacolgico do Doena de Alzheimer,
incentivando a investigao e o estudo de produtos naturais para o desenvolvimento
de frmacos novos e mais eficientes. 44,45
Derivados triptofnicos apresentam importante funo no sistema nervoso
central (SNC) e controlam aes cardiovasculares, respiratrias, gastrointestinais,
46
alm de sintomas de humor e ansiedade.
A serotonina (2), um neurotransmissor natural, responsvel pelo efeito
modulador geral da atividade psquica, regulando o humor, o sono, o apetite, o ritmo
cardaco e as funes neuroendcrinas.46 Os efeitos da serotonina so sentidos de
maneira mais proeminente no sistema cardiovascular, com efeitos adicionais no
sistema respiratrio e nos intestinos. A vasoconstrio a resposta clssica
administrao de serotonina.
Derivados biossintticos da serotina, as cinamidas (14) e o benzoato
sinttico (15) (Figura 6), exibiram atividade antimicrobiana e antioxidante. 47,48 Outros
derivados da serotonina mostram atividade antimicrobiana e atuam como
capturadores de radicais livres. 49,50

44
Yu, Q.; Holloway, H. W.; Utsuki, T.; Brossi, A.; Greig, N. H. J. Med. Chem. 1999, 42, 1855.
45
Zhu, X.; Greig, N. H.; Holloway, H. W.; Whittaker, N. F.; Brossi, A.; Yu, Q. Tetrahedron Lett. 2000,
41, 4861.
46
Marais, W.; Holzapfel, C. W.; Synth. Commun. 1998, 28, 3681.
47
Kumarasamy, Y; Middleton, M; Reid, R. G; Nahar, L; Sarker, S. D; Fitoterapia, 2003, 74, 609.
48
Stoll, A; Toxller, F.; Peyer, J.; Hoffman, A.; Helvetica Chimica Acta, 1955, 38, 1452.
49
Kumarasamy, Y.; Middleton, M.; Reid, R. G.; Nahar, L.; Sarker, S. D. Fitoterapia 2003, 74, 609.
50
Kang, K.; Jang, S. M.; Kang, S.; Back, K.; Plant Sci. 2005, 168, 783.

13
 R OH

H 3C
NH N CH3
O
O O
HO

NH O NH
14 15

R=H ou OMe

Figura 6. Cinamidas (14) e benzoato (15) anlogo da serotonina.

Os receptores 5-HT tm sido alvo de intensa pesquisa nas ltimas

dcadas, uma vez que muitos frmacos efetivos no tratamento da depresso e
ansiedade agem sobre este neuromodulador, tanto na forma de inibidores da
recaptao de 5-HT (ISRS), quanto agonistas ou antagonistas de seus subtipos de
receptores. Ligantes com alta afinidade pelos receptores 5-HT1A estimulam a sntese
de novos anlogos que atuem ao nvel deste receptor. De modo significativo para
este subtipo de receptor serotoninrgico, minuciosos estudos de seu
seqenciamento, clonagem e localizao nos tecidos neurais tm sido
desenvolvidos nesta ltima dcada. Seguindo esta tendncia, muitos outros ligantes,
de diferentes classes qumicas, foram sintetizados e avaliados na busca da
compreenso das interaes farmacofricas relevantes para o reconhecimento
molecular pelo receptor 5-HT1A. Entre estes compostos encontram-se derivados de
indolalquilaminas, como por exemplo, a bufotenina.42,43,49
As propriedades farmacolgicas da bufotenina (1) ainda se encontram em
estudo e indicam ser semelhantes da dimetiltriptamina (DMT), embora no
provoque alucinaes visuais como os demais alcalides indlicos. A bufotenina
pode ser encontrada na urina de pessoas normais e a sua excreo urinria em
pacientes psiquitricos um pouco mais acentuada, pois tambm reforada
pelos inibidores da MAO e por outros medicamentos antidepressivos.29, 30
Na esquizofrenia h baixa atividade no lobo mdio temporal e, ao mesmo
tempo um aumento do acetilaspartato no hipocampo. H maior fluxo sanguneo no
lobo temporal e na rea frontal quando os indivduos sofrem maior intensidade de
alucinaes. A feniletilamina (PEA), bufotenina e a mono amina cadaverina so
encontradas em altas taxas na urina e sangue de pacientes com essa patologia.
Chega-se a inferir que os marcadores bioqumicos [feniletilamina (16), fenilglicol
14
(17), cidos hidroxindolactico (18) e homovanlico(19)] no somente servem para
descobrir os estados depressivos, como tambm, mostraram-se teis nos casos de
obsesses compulsivas e esquizofrenia (do tipo I) que se normalizam aps melhora
clnica: os marcadores metilados (bufotenina, O-metilbufotenina e dimetiltriptamina)
esto relacionados com os sintomas psicticos (alucinaes, sintomas negativos,
etc).42,51
NH CH 3 O OH

17
16
OH
COOH
O
NH HO 19
OCH 3
18

Figura 7. Marcadores qumicos.

Quando ingerida em grandes quantidades, a bufotenina (1) pode provocar

muitos efeitos indesejveis do ponto de vista psicolgico e circulatrio, alm de
efeitos secundrios, tais como: suor, nuseas, viso amarelada e percepo de
pontos coloridos. 52 Uma dose oral de 100 mg no causa efeito algum, enquanto que
seu ismero extrado de um cogumelo mexicano, a psilocina (13) (Figura 8), em uma
quantidade de 4 a 8 mg causam intoxicao. 53 Gesser et al 54 sugerem que a baixa
potencialidade txica da bufotenina devido sua baixa solubilidade em lipdios e
conseqente inaptido para penetrar no SNC.

H 3C
N CH3
R2

R1

NH

1 R1= OH, R2= H bufotenina

13 R1= H, R2= OH psilocina

Figura 8. Bufotenina (1) e seu ismero, psilocina (13).

51
Paiva, L. M.; Revista da Psicossomtica, 2006, 1, 16.
52
Nunes, D. S.; Rocha Filho, G. M.; Elisabethy, E.; Barata, L. E. S.; Alcalides triptamnicos de
Piptadenia gonoacanth (mart), macbr e Anadenanthera falcata (Benth). Speng. in: Reunio anual da
Sociedade Brasileira para ao Progresso da Cincia (SBPC), Resumo 34, 1982, Campinas - SP.
53
Migliaccio, G. P.; Shiceh, T. L. N.; Hathauay, B. A.; Nichols, D. E.; J. Med. Chem. 1981, 24.206
54
Gesser, P. K.; Godse, D. D.; Krull, A. H.; McMillan, J. M.; Life Sci. 1968, 7, 267.

15
 O ncleo indlico tambm pode dar origem a alcalides mais complexos
gerando estruturas com potencial farmacolgico, por exemplo, o precursor natural da
N,N-dimetiltriptamina (DMT, 5), a triptamina (4), tm sido utilizado na sntese de
alcalides -carbolnicos que apresentam afinidade para os receptores da serotonina
(2) no SNC, de onde resulta seu efeito neurofarmacolgico, alm de atividade
citotxica. 55a,b Como mostrado na Figura 9, o sistema -carbolnico possui diferentes
graus de aromaticidade e constitui a unidade estrutural bsica de inmeros
alcalides indlicos de interesse farmacolgicos e biolgicos, a exemplo da harman
(20), harmina (21); harmalina (22) e tetraidro--carbolnico (23). 56

N
N

CH3
CH3 O N
N H
H H3C
20 21

NH
N

CH3
CH3 O N
O N H
H H3C
H3C 23
22

Figura 9. Sistema -carbolnico

O interesse biolgico ou farmacolgico por esta classe de compostos

deve-se a ocorrncia destes, sob condies fisiolgicas em tecidos e fluidos
biolgicos. Alguns relatos evidenciam a importncia farmacolgica das
57,58
carbolinas e demonstram que as -carbolinas interagem com os receptores da
dopamina e com os sistemas neurotransmissores da serotonina (2), o que chama a
ateno dos neuroqumicos em investigao que enfocam as -carbolinas como
neurotransmissores e neuromoduladores. 59 Alm de aes psicoativas e
alucingenas, essas -carbolinas tm mostrado uma grande variedade de

55
(a) Roszkowski, P.; Wojtasiewicz, K.; Leniewski, A.; Maurin, J. K.; Lis, T.; Czarnocki, Z. J. Molec.
Cat. A: Chem. 2005, 232, 143; (b) Zhaob, M.; Lanrong Bia, L.; Wangb, W.; Chao Wangb, C.; Baudy-
FlochdM.; Jingfang Juc, J.; Penga, S.; Biorganic & Med. Chem. 2006, 14, 6998.
56
Bresolin T. M. B, Cechinel Filho V.(org.) Cincias Farmacuticas: contribuio ao desenvolvimento
de novos frmacos e medicamentos. Itaja: Ed. Univali, 2006, p.43-44.
57
Ho, B. T.; Taylor, D.; Mctsooc, W. M.; Adv. Behav. Biol. 1971, 1, 97
58
Dramate, K. L.; Okungn, J. I. Plant Med. 1977, 31,193
59
Callaway, J. C.; Gynther,J.; Poso, A.; Vepsalainem, J.; Airalksinem, M. M. J. Heterocycl. Chem.
1994, 31, 431.

16
propriedades farmacolgicas, incluindo atividades antimicrobiais, antivirais,
60
anticonvulsivas, hipnticas, vasorelaxantes, anti-HIV e antitumorais.

1.5. Preparao e aplicaes sintticas de compostos indlicos

Devido atividade biolgica variada e freqentemente intensa, os

alcalides so objeto de grande interesse farmacolgico e medicinal. No entanto,
salvo raras excees, essas substncias so encontradas nas fontes naturais em
pequenas quantidades, s vezes apenas como traos. O estudo detalhado das
diversas rotas biossintticas de alcalides tem sido muito til na proposio de
derivados sintticos mais complexos, j que o nmero de estruturas alcalodicas
encontradas na natureza variado e, tem despertado grande interesse por parte de
muitos pesquisadores. Em muitas ocasies, a sntese total de uma estrutura mais
complexa, pode ser alcanada a partir da utilizao de um alcalide precursor
disponvel em maior quantidade em determinadas plantas.54
A preparao e funcionalizao de sistemas indlicos tem sido objeto de
intensas pesquisas em sntese orgnica e muitas rotas sintticas foram
desenvolvidas. Em muitos casos, a disponibilidade do material de partida (modelo de
substituio) e a tolerncia dos grupos funcionais so fatores determinantes na
escolha de uma rota. De forma geral, os indis so usualmente preparados a partir
de precursores aromticos no heterocclicos. Dentre as metodologias que se
destacam, encontram-se: sntese de Fischer e suas variantes, heteroanelao e
ciclizao de alquilanilinas, ciclizaes redutivas (nitro compostos) e outros
processos. Apresentamos abaixo, algumas metodologias prticas para preparao
de indis em larga escala, consideradas interessantes sob o ponto de vista industrial
e acadmico. 61
A sntese de Fischer amplamente utilizada na preparao de indis e
derivados em laboratrio.61 Exemplos incluem a sntese de alcalides e alcalides
marinhos, derivados da triptamina e novas estruturas indlicas com anis
funcionados, tambm tem sido utilizada em escala industrial na obteno de
intermedirios farmacuticos. Essa uma das metodologias clssicas mais usadas,

60
R. Cao, Q. Chen, X. Hou, H. Chen, H. Guan, Y. Ma, W. Peng,. Bio. Med. Chem., 2004, 12, 4613.
61
Humphrey, G. R.; Kuethe, J.T.; Chem. Rev. 2006, 106, 2875.

17
pois ocorre em uma nica etapa, a partir da reao entre um composto carbonlico e
uma hidrazina de escolha, sob catlise cida, sendo desnecessrio o isolamento da
hidrazona correspondente. O mecanismo da reao foi proposto G.M. Robinson e R.
62
Robinson: a hidrazona (24), em equilbrio com a enamina correspondente (25),
que apresenta a distribuio eletrnica apropriada para realizar o rearranjo
sigmatrpico [3,3], d origem a dupla imina (26), altamente instvel. A aromaticidade
ento imediatamente restabelecida, via o intermedirio (27) que sofre ciclizao,
seguida de eliminao de amnia, fornecendo o sistema indlico (28) (Esquema
3).61,62

R2 R1 R1
R2 R1 R2
+
H
+ H +
N N NH
NH NH H NH
24
25 26

R1 R1
-
R2 NH3 R2
NH NH NH2
28
27

Esquema 3. Proposta mecanstica da sntese de Fischer. 62

Uma aplicao interessante da sntese de Fischer que possibilita a

obteno de indis funcionalizados como, por exemplo, os derivados da melatonina
(33) e do triptofano (34) apresentada no Esquema 4. Esse mtodo vantajoso,
pois alm de sua simplicidade, permite a preparao de tais sistemas, em grande
escala e com rendimentos excelentes, a partir de reagentes de partida (29 e 30)
abundantes e de baixo custo. Os derivados da 2-hidroxipirrolidina (31 e 32) so
formados a partir da proteo de 2-pirolidinona (29) e cido piroglutmico (30) com
carbobenzoxi (Cbz) e subseqente reduo da lactama com trietilboroidreto de ltio
(LiEt3BH), em 84 e 91% de rendimento, respectivamente. O derivado da melatonina
(33) e o derivado do triptofano (34), formados a partir de uma reao indlica de
Fischer, so obtidos com rendimento maiores que 95%.61

62
Laue, T.; Plagem,A.; Named of reactions organic chemistry, Wiley, New York, 2000.

18
 CBz
NH

O R
AcOH, H2O,EtOH
NaH, CbzCl
OH Refluxo 35 min H3C
R N O 2. LiEt3BH, THF R N
O N
H CBz H 3C H
NH
NH Cl
29. R=H 31. R=H 33. R=H
30. R=CO2H 32. R=CO2H 34. R=CO2H

Esquema 4. Sntese de derivados da melatonina.61

Uma variao do mtodo de Fischer consiste em preparar indis a partir

de fenilidrazinas 35 e cetonas, em presena de cido actico com irradiao de
microondas. Esta metodologia apresenta altos rendimentos e as reaes ocorrem
em menos de um minuto. O uso de montmorilonita (K10) e cloreto de zinco na
presena de microondas, a temperaturas mais baixas e com solvente livre de cido,
forma em bom rendimento o 2-(2-piridil) indol (36), um composto cuja unidade bsica
estrutural est presente em muitos produtos naturais (Esquema 5). 63a,b

H3C ZnCl2/ K 10
N
N 143C, 60% N N
NH H
33 34
63b
Esquema 5. Preparao de 2-(2-piridil)-indol a partir de hidrazina .

Em 1912, Madelung mostrou que o 2-metilindol (38) podia ser preparado,

com 60% de rendimento, aquecendo-se a o-aceto toluidina (37) com etxido de
sdio em atmosfera inerte. O emprego desta metodologia exige condies severas
para realizar catlise bsica intramolecular na condensao entre um grupo metila
aromtico no ativado e um substituinte o-acilamino22 (Esquema 6).

CH3
NaOEt CH3
360-380C N
NH COCH H
37 3 38

Esquema 6. Sntese geral de Madelung22.

63
(a) Lipiinska, T.; Guib-Ampel, E.; Petit, A.; Loupy, A. Synth. Commun. 1999, 29 (8,) 1349. (b)
Gribble, G. W. Perkin T. I.; J. Chem. Soc. 2000, 1045-1075.

19
 Embora a sntese clssica de Madelung seja atualmente pouco
empregada, uma modificao do mtodo introduzido por Houlihan em 1981, na qual
foi utilizado butilltio (BuLi) como base, mtodo de Madelung-Houlihan, permitiu a
sntese de derivados indlicos (42) sob condies mais brandas do que a sntese
original (Esquema 7). 64a,b
H
1 Li H 3
R CH3 R
BuLi
O 200- 400C R OLi
3 N N
NH R + -
40 O Li 41 Li
39

R1=R3= H. Alquila , arila

R
N
42 H

Esquema 7. Mtodo de Madelung-Houlihan.64a

Em geral alcalides indlicos mais complexos so preparados a partir de

precursores indlicos simples. Por exemplo, o derivado -carbolnicos, 1-
triclorometil-1,2,3,4-tetraidro--carbolina (47), foi sintetizado em laboratrio a partir
da N,N-dimetiltriptamina (43) via ciclizao do tipo PictetSpengler (Esquema 8). 65
CH3 CH3
+ CH3
N N CN
CH3 CH3
CH3I, EtOH KCN, H2O

N N aquec. N
43 H 44 H 45 H
EtOH, NaOH 2M
Ni Ranney

NH2
O
Cl
Cl H
NH Cl

Tolueno N
Cl 46 H
N
Cl Cl
47 H

Esquema 8. Tetraidro--carbolina (47) via ciclizao de PictetSpengler.

64
a) Houlihan, W. J,; Uike, Y; Parrino, V. A.; J. Org. Chem. 1981,46, 4515. b) Houlihan, W. J.; Uike, Y;
Parrino, V. A.; J. Org. Chem. 1981,46,4511.
65
Bringmann, G; Feineis, D; Bruckner, R, God. R; Grote, C; Wesemann, W; Europen J.
Pharmaceutical Sciences 2006, 28, 412-422.

20
 Outro exemplo de sntese de tetrahidro--carbolinas envolvendo uma
indoletilamina encontra-se apresentado abaixo. A -metil-triptamina (48)
transformada na correspondente metilenoaziridina 50 via o brometo de vinila 49, em
duas etapas. A reao da aziridina 50 com lcool benzlico na presena de trifluoreto
de boro-eterato levou a uma mistura (8:1) de diasteroismeros 51 (Esquema 9). 66
CH3 CH3
Br Br
Br
NH2 NH
CH2 CH2
K2CO3, THF
N N
49 H
48 H

NaNH2,NH3, - 33C
CH3
CH3

NH
BnOH, BF3. OEt2 N
CH2
N H3C CH2Cl2, -30C, rt N
H O Bn H
51
50

Esquema 9. Sntese de tetrahidro--carbolinas.

Nos bancos de dados consultados no foram encontrados registros da

sntese desse triciclo tendo a bufotenina (1) como precursora.

66
Mumford, P. M.; Shiers, J. J.; Tarver, G. J.; Hayes, J. F.; Shipman, M; Tetrahedron Lett., 2008, 49,
3489.

21
2. Objetivos:

2.1. Objetivos Gerais

O presente estudo teve como objetivo central o conhecimento fitoqumico

de espcies de Anadenanthera (Fabaceae: Mimosoideae) do Cerrado Central, com
enfoque no teor de alcalides indlicos e investigao do potencial da bufotenina
como matria-prima para preparao de novas entidades qumicas (NCEs) capazes
de atuar no SNC.

2.2. Objetivos Especficos

Estudo fitoqumico comparativo de sementes de espcies/variedades de

Anadenanthera do Cerrado Central.

Determinao do teor do alcalide indlico bufotenina.

Estudos visando preparao de derivados da bufotenina com potencial

bio/farmacolgico.

22
 3. Metodologia:

As estratgias de ao desta proposta esto baseadas em vrias etapas,

envolvendo pesquisadores e estudantes de laboratrios especializados que dispem
de condies satisfatrias para o desenvolvimento das etapas envolvidas nesse
projeto, que compreendem:

i. Estudo fitoqumico comparativo de sementes de espcies/variedades de

Anadenanthera.

Aplicao de procedimentos metodolgicos clssicos de extrao de sementes das

espcies selecionadas, fracionamento do extrato bruto por meio de tcnicas,
purificao, quantificao e caracterizao fsico-qumica dos componentes
qumicos isolados. O fracionamento dos extratos e a purificao dos alcalides
indlicos presentes nas sementes de cada espcie foram realizadas por tcnicas
cromatogrficas clssicas e instrumentais (CG-EM). Na caracterizao dos
alcalides presentes na semente das plantas foram utilizados espectros
unidimensionais de hidrognio (300 MHz) e carbono-13 (75 MHz) e tcnicas
bidimensionais (APT e HMQC), cujos experimentos foram realizados em
Espectrmetro de Ressonncia Magntica Nuclear Mercury Plus - Varian
(7.05 T), com capacidade de anlises multinucleares em soluo e estado slido. As
tcnicas de Anlise Elementar (CHN) e Espectrometria de Massa foram empregadas
para confirmao das estruturas propostas.

ii. Modificao qumica da bufotenina visando preparao de entidades

qumicas com potencial bio/farmacolgico.

Empregando-se a bufotenina (1) como material de partida foram

planejados derivados indlicos da bufotenina, preparados a partir da proteo da
hidroxila fenlica, a exemplo de derivados que podero manifestar atividade
antimicrobiana e atuarem como capturadores de radicais livres com possvel
afinidade para os receptores da serotonina (3) no SNC, a exemplo dos anlogos

23
serotonnicos. O planejamento sinttico convergente compreende a explorao de
procedimentos clssicos envolvendo reaes de proteo da hidroxila fenlica da
bufotenina, explorando diferentes grupos protetores, para produo dos seguintes
derivados: metil ter 52, benzil ter 53, acetato 54, cinamato 55 e benzoato 56
(Esquema 10).
CH3

N CH3
a O
H3C

N
H
52 CH3

N CH3
b
O
CH3

N N
CH3 H CH3
53
HO N CH3

c H3C O
N
H O
1 N
H CH3
54
N CH3
d
O

O N
H
55 CH3

N CH3
e
O
O
N
H
56

Reagentes: a) MeI, acetona, K2CO3, refluxo; b) BnCl, K2CO3, acetona, refluxo; c) Ac2O, Py; d)
CynCl, Et3N, DMAP, CH2Cl2; e) BzCl, Et3N, DMAP, CH2Cl2.
Esquema 10. Derivados da bufotenina

As modificaes qumicas planejadas consideraram a utilizao de

reaes clssicas em sntese orgnica. A purificao dos intermedirios e produtos
finais foi realizada por meio de tcnicas convencionais (cromatografia e
recristalizao). A caracterizao deu-se a partir da obteno e anlise de espectros
de ressonncia magntica nuclear de hidrognio e carbono-13, espectros de
infravermelho e espectros de massa, em colaborao com pesquisadores
responsveis por laboratrios especializados em tcnicas espectromtricas.

24
4. Resultados e Discusso

4.1. Estudo fitoqumico de semente de espcies de Anadenanthera

Em geral, a florao do gnero Anadenanthera ocorre entre junho e

setembro e a frutificao ocorre entre agosto e setembro. Os especimens analisados
apresentaram florao, frutificao e maturao das sementes em tempos
diferentes, possibilitando a coleta de sementes entre os meses outubro e novembro
de 2006 e 2007.
De acordo com protocolos convencionais (Chave de classificao: Anexo
1 pg. 56) empregados pelo Prof. Dr. Christopher William Fagg (FT-UnB), as
espcies selecionadas foram identificadas como sendo: Anadenanthera peregrina
(Figura 9) oriunda da BCE e APCEF (vars. peregrina e falcata) (Figura 10) e
Anadenanthera colubrina coletada no CO (var. cebil) (Figura 11).
As sementes foram secadas temperatura ambiente, trituradas e
submetidas a diferentes tcnicas de extrao: macerao em solvente orgnico;
extrao contnua em Soxhlet e isolamento pelo mtodo de Stromberg.25
Inicialmente, tentou-se a tcnica de macerao em solvente orgnico
(hexano) para separao dos componentes apolares da frao polar de
Anadenanthera peregrina (BCE). Cerca de 10 g de sementes trituradas foram
extradas por trs vezes com 30 mL de hexano em intervalos de 4 horas, filtrando-se
e submetendo-se amostra a nova extrao. Os extratos hexnicos foram reunidos
e concentrados para fornecer um material oleoso que suspeitamos tratar-se de
triacilgliceris (cerca de 3%), porm contaminado com pequena poro do
componente mais polar. A torta foi extrada por cinco vezes com etanol em presena
de cerca de 1g de K2CO3, com leve aquecimento. A frao etanlica foi concentrada,
dissolvida em AcOEt, lavada com cinco pores de gua destilada, secada sob
sulfato de sdio e concentrada no rotaevaporador. O resduo foi submetido
separao por coluna cromatogrfica rpida e seca (Dry-Flash Column
Chromatography), fornecendo cerca de 0,1% de um material viscoso que,
posteriormente, foi identificado como sendo a bufotenina (1) (Fluxograma 1, p. 28).

25
Figura 10. A. peregrina (BCE) - Detalhes do ramo verdes, da vagem, da inflorescncia, das sementes
e da germinao (cortesia Juliana Machado Ramos UFG).

26
Figura 11. A. colubrina (CO). Detallhes da vagem, inflorescncias e das sementes.

Figura 12. A. peregrina (APCEF) - Detalhe das sementes.

27
 Sementes de Anadenanthera peregrina
(10 g )

- Hexano (Macerao)
- Decantao

Torta Extrato hexnico

1,648 g (3%)

- EtOH
- K2CO3, aquecimento
- Filtrao

Extrato etanlico
Torta
5,3485 g

- Acetato de etila
- Concentrao
- Coluna cromatogrfica

Bufotenina
6 mg (2,9%)

Fluxograma 1. Fracionamento das sementes de A. peregrina por macerao.

As extraes feitas no soxhlet foram realizadas com etanol comercial a 78

o
C, usando diferentes massas do material biolgico (A. peregrina, BCE) e tempos de
extrao, conforme expresso na Tabela 1.

Tabela 1: Resultado dos processos extrativos no shxlet em diferentes condies.

Entrada msemente mextrato Tempoextrao Rend. %*

1 191,3 g 47,4 g 63 h 25,0

2 32,0 g 16,1 g 30 h 50,3

3 27,5 g 9,90 g 24 h 36,0

4 19,1 g 8,00 g 15 h 41.8

5 18,0 g 8,00 g 34 h 44,4

6 9,00 g 3,80 g 34 h 42,2

*Rendimento percentual de extrato bruto, considerando a massa de semente

utilizada no processo extrativo.

28
 Por meio desse estudo verificou-se que a massa de semente utilizada e o
tempo de extrao influenciam na quantidade do extrato obtido. De acordo com os
resultados, observou-se que quando da utilizao de uma massa muito grande de
material biolgico, mesmo com exaustivo tempo de extrao o rendimento foi muito
baixo, provavelmente em funo de problemas operacionais (Entrada 1). Foram
observados melhores rendimentos quando do uso de massa compatvel com a
aparelhagem e tempo de extrao de cerca de 30 h (Entrada 2). Uma maior reduo
da massa de semente no influenciou no aumento do rendimento (Entradas 3, 4, 5 e
6). Na etapa de concentrao dos extratos, verificou-se ainda que a temperatura
influencia profundamente a eficincia do processo de obteno do alcalide, pois
quando aquecida temperatura mais elevada, para remoo do solvente no roto-
evaporador, observou-se por cromatografia em camada delgada (CCD) que a
bufotenina sofria decomposio.
Aps definida a melhor condio para extrao em sohxlet, foi realizado
um estudo comparativo do teor da bufotenina e de outros constitutintes presentes
nas espcies analisadas (A. peregrina, variaes peregrina e falcata, e A. colubrina).
Surpreendentemente, todos os extratos brutos apresentaram no mximo dois pontos
bem definidos na cromatoplaca, usando diferentes eluentes. Neste sentido, os
extratos etanlicos foram submetidos a fracionamento por cromatografia rpida em
coluna seca. Aps caracterizao por mtodos espectromtricos a frao mais polar
foi confirmada tratar-se da bufotenina (Anexos 2 - 7; pginas 59 - 64), isolada como
material viscoso que na anlise por Cromatografia Gasosa (Cromatgrafo Agilent
Technologies 6890N, detector seletivo de massas CG-EM) mostrou ainda a
presena de impurezas (Figura 13). Alm de bufotenina, todos os extratos brutos
obtidos por essa metodologia continham quantidade substancial de frao menos
polar, com aspecto oleoso que por espectroscopia de IV e RMN 1H e 13
C indicou
tratar-se de triacilgliceris (Tabela 2).
Tabela 2. Teor de bufotenina e triacilgliceris nos extratos etanlicos.

Espcie Bufotenina* Triacilgliceris

A. peregrina (BCE) 2,9% 9,97%

A. peregrina (APCEF) 0,3% 12,41%

A. colubrina (CO) 0,1% 9,6%

*Nessas condies a bufotenina foi obtida como um leo viscoso.

29
 Abundance

TIC: LP-06-EXTLP.D
2.19
380000

360000

340000

320000

300000

280000

260000

240000

220000

200000

180000

160000

140000

120000

100000

80000

60000

40000
1.47

20000

1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00 7.50 8.00 8.50 9.00
Time-->

Figura 13. Cromatograma (CG-EM) da bufotenina (pico maior) e impurezas.

A investigao da composio do material oleoso foi realizada por meio

da tcnica de Cromatografia Gasosa (CG VARIAN- STAR 3400) equipado com
injetor SPLIT/SPLTITLESS, usando como padro mistura de metil ster de cidos
graxos (SUPELCO 37 Component FAME MIX - Sigma Aldrich Co). 67 Para tanto,
amostras em duplicata foram submetidas a um processo de saponificao seguida
de esterificao gerando os steres metlicos correspondentes que se separam da
frao mais polar por centrifugao, podendo ser analisados por CG (Fluxograma 2),
(anexos 8 - 11, pginas 65 - 68).

67
Catlogo n 47885-U, Supelco 37, Sigma-Aldrich Co.

30
 Triacilglicerol
(20 mg)

- KOH, MeOH (0,5 M)

- Agitao, 70 C
-
Glicerol + RCO2

- BF3, MeOH
- Agitao, 70 C

Glicerol + RCO2Me

- NaCl, Hexano
- 1200 rpm

Precipitado Sobrenadante

Glicerol RCO2Me

CG

Fluxograma 2 - Saponificao e esterificao do leo extrado de A. peregrina.

Como mostrado no esquema abaixo, o triacilglicerol sofre uma

saponificao em KOH/MeOH, com agitao e aquecimento e na subseqente
reao com BF3/MeOH, os cidos graxos sofrem esterificao gerando os steres
metlicos correspondentes (Esquema 11).

O
O 1. KOH/ MeOH (0,5 M)
2. BF3/ MeOH OH
R3 HO
R1 O O 3. NaCl, hexano
OH
1200 rpm
Glicerol
O +
R1CO2Me
O
R2CO2Me
R2
R3CO2Me

Esquema 11. Equao qumica da saponificao/esterificao de um triacilglicerol genrico.

31
 Como mostrado na Tabela 3, a saponificao seguida de esterificao da
frao oleosa sugere que A. peregrina apresenta composio e teores variados em
termos de cidos graxos, incluindo outros componentes cidos de cadeia menor
(apenas os cidos graxos em quantidade significativa foram apresentados na
tabela).

Tabela 3. Composio qumica da frao oleosa de sementes de A. peregrina*.

cido correspondente Teor %

cido cis-11-eicosenico (C 20:1) 2,0

cido linolico (C 18:2n) 1,6

cido olico (C 18:1n) 4,0

cido esterico (C 18:0) 0,9

cido heptdecanico (C 17:0) 8,5

cido palmtico (C 16:0) 4,4

cido miristolico (C 14:1) 46

cido tridecanico (C 13:0) 17,4

cido undecanico (C 11:0) 0,8

cido cprico (C 10:0) 7,4

cido caprlico (C 8:0) 1,3

cido caprico (C 6:0) 1,0

cido butrico (C 4:0) 3,2

* Composio e teores relativos ao metil steres gerados.

Aps separao de todos os compostos da semente, conclui-se que as

sementes de A. peregrina (BCE e APCEF) e A. colubrina (CO) apresentam apenas
bufotenina e triacilgliceris (Tabela 2 e 3), nenhum dos outros alcalides
identificados por Fellows e Bell28 em Piptadenia peregrina (originrias das Ilhas
Caribenhas) foi encontrado. A espcie A. peregrina (var. peregrina) apresentou
maior teor de bufotenina.

32
 A tcnica de extrao simples pode ser utilizada para fazer uma
separao (fracionamento) usando solventes quimicamente ativos ou solventes de
reao capazes de reagir com o soluto para dar origem a um composto mais solvel.
Extraes com solventes de reao podem ser usadas para separar cidos
carboxlicos, fenis e aminas de substncias neutras, aplicando a variao do pKa
destes substratos. cidos e bases orgnicas podem ser dirigidas para qualquer uma
das fases de extrao, aquosa ou orgnica, pelo ajuste do pH da fase aquosa. O
mtodo de Stromberg25 baseia-se num processo extrativo envolvendo variao de
pH e solventes de reao, de acordo com o Fluxograma 3.

Sementes de Anadenanthera peregrina

(70 g)

- EtOH, 1% de cido tartrico

- Agitao e concentrao
- CHCl3, HCl (2M)

Fase clorofrmica Fase aquosa

- NH4OH
- CHCl3

Fase aquosa Fase clorofrmica

- Na2SO4
- Concentrada

Bufotenina
2,03g (2,9%)

Fluxograma 3. Obteno da bufotenina de sementes de Anadanathera segundo o mtodo de

Stromberg25.

Por essa metodologia a bufotenina foi isolada como um slido amarelado

que aps recristalizao de AcOEt-hexano forneceu um slido (Figura 14), com
ponto de fuso 155 0C (literatura:146,5 oC) 25.

33
 Figura 14. Bufotenina pura: slido amarelado.

A bufotenina assim isolada foi caracterizada por mtodos

espectroscpicos (IV, RMN1H, RMN 13
C) e CG-EM. As espcies analisadas,
Anadenanthera peregrina (Figura 10 e 12) oriunda da BCE e APCEF, vars.
Peregrina (anexos 2 - 7, pginas 59 - 64) e falcata (anexos 12 - 14, pginas 69 - 71)
e Anadenanthera colubrina coletada no CO, var. cebil (anexos 15 - 17, pginas 72 -
74), apresentaram os mesmos componentes polares. Na Tabela 4 so apresentadas
todas as atribuies dos hidrognios e carbonos, de acordo com a numerao dos
tomos.

34
Tabela 4: Dados espectroscpicos de RMN 1H e RMN 13
C da bufotenina isolada. Os
deslocamentos qumicos esto apresentados em (ppm) e as constantes de acoplamento
em (Hz).
12
H3C
13
N CH3
10
4
11
HO 5 9 3
2
6 N1
8
7 H

No (PPM) H(m, J)

C -
C-2 102,5 -
C-3 111,8 -
C-4 123,2 -
C-5 150,4 -
C-6 111,4 -
C-7 111,9 -
C-8 131,1 -
C-9 128,2 -
C-10 23,4 -
C-11 60,2 -
C-12 45,3
C-13 45,3
H
NH 10,42 s
H-2 6,80 d ( 2,4 Hz)
H-4 7,02 d ( 1,5Hz)
H-6 6,59 (dd (8,7 e 2,4 Hz)
H-7 7,11 dd ( 8,7 e 0,6 Hz)
H-10 2,73 m
H-11 2,49 m
H-12 2,20 s
H-13 2,20 s

Adicionalmente, a amostra de bufotenina foi analisada por CG-EM. O

cromatograma demonstrou que a amostra apresentava acentuado grau de pureza
(Figura 15a). A comparao do espectro de massa da amostra com o espectro da
bufotenina disponvel na biblioteca eletrnica do aparelho mostrou a perfeita
sobreposio dos picos, confirmando a identidade da amostra (Figura 15b).

35
 Abundance

TIC: LP-06-Lucio.D
6000000

5500000

5000000

4500000

4000000

3500000

3000000

2500000

2000000

1500000

1000000

500000

1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00 7.50 8.00 8.50 9.00
Time-->

58 146
22 42
91 117 204
51 65 77 103 128 159
0
51 65 77 89 103 117 130 159
42 146 204
22
58
40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200
Sca n 180 (2.328 min): LP-06-Luc io.D Bufotenine

Figura 15. A - Cromatograma gasoso da amostra de bufotenina slida. B - Comparao

do espectro de massa da bufotenina com dados da biblioteca virtual (bufotenina = biblioteca virtual,
bufotenina= amostra analisada).

A identidade do alcalide tambm foi confirmada por meio da formao do

monopicrato de bufotenina, 68 slido vermelho (Figura 16), Rf 0,25 eluente metanol
p.f. 166-168 C, enquanto que a literatura25,69 descreve valores 0,25 e 170C.
Adicionalmente, o picrato foi caracterizado por mtodos espectroscpicos (IV, RMN
H1 e RMN C13), (anexos 18 20, pg. 75 - 77).

Figura 16. Cristais de picrato de bufotenina

68
Armarego, W .L. F; Perrin, D. D; Chemical Methods used in Purification. ,4 ed, 1996, 51.
69
Iacobucci, G. A.; Ruveda, E. A.; Phytochemistry, 1964, 3, 3465.

36
 Os diferentes processos extrativos foram executados vrias vezes a fim
de quantificar o teor em alcalides e verificar qual o mtodo mais eficiente para
obteno da bufotenina (Tabela 5).

Tabela 5. Resultados dos processos extrativos com Anadenanthera peregrina (BCE).

Entrada Mtodo de Condies Resultados (rend. % em relao
extrao massa de semente; tcnica de
purificao)

1. EtOH, 60 h Presena de triacilgliceris (9.3%) e

1 Extrao em 2. Na2SO4, concentrada bufotenina (cerca de 0,3%), aps
Sohxlet 3.Coluna Cromatogrfica cromatografia em coluna.

1. EtOH, cido tartrico Isolamento de bufotenina pura (cerca de

2 Mtodo de 2. HCl 2M, CHCl3, H2O 2,9%), aps recristalizao em
Stromberg 3. NH4OH,CHCl3. AcOEt/hexano 3:1.
4. Na2SO4

Como mostrado na Tabela 5, nas diferentes metodologias observou-se a

presena de bufotenina nos extratos. O mtodo de Stromberg (Entrada 2) mostrou-
se mais eficiente para obteno da bufotenina pura, por recristalizao direta do
extrato. Para isolamento da bufotenina quando da utilizao dos outros mtodos
extrativos avaliados foram empregadas diversas condies (recristalizao direta,
extrao com soluo diluda de HCl e coluna cromatogrfica). Apenas quando do
uso da cromatografia em coluna, o alcalide foi isolado em rendimento inferior ao
mtodo de Stromberg, porm como um leo viscoso e amarelado, que no
solidificou, mesmo quando submetido a diversas tentativas de recristalizao.

Em funo da eficincia (rendimento, aspecto fsico) o mtodo de

Stromberg foi o eleito para acmulo de bufotenina a ser utilizada na etapa de
modificao qumica. Para obteno e caracterizao dos outros constituintes
qumicos das espcies em estudo, a metodologia de extrao em soxhlet mostrou-
se mais eficiente.

37
4.2. Modificaes qumicas na bufotenina

4.2.1. Preparao de teres da bufotenina

Devido a acidez e baixo potencial redox do grupo fenlico, quando

envolvidos em rotas sintticas, a sua proteo para manipulaes qumicas
posteriores torna-se obrigatria. As reaes de proteo de grupos fenlicos
requerem o uso de grupos protetores estveis e, em certos casos, a remoo destes
torna-se um problema pois, em geral, o ncleo fenlico cercado por sensveis
funcionalidades. Tipicamente, aril alquil teres apresentam uma elevada
70
estabilidade, naturalmente isso significa que as suas clivagem so drsticas.
Geralmente, as alquilaes de compostos com hidrognios cidos so
classicamente efetuadas em meio homogneo, com a desprotonao do substrato
cido por uma base forte no nucleoflica (em geral de custo elevado), seguido por
reaes do nion formado com um agente alquilante. Essas operaes na maioria
das vezes requerem condies anidras e atmosfera inerte. 71 A tcnica de CTF
permite que essa reao seja realizada em meio aquoso e em frasco aberto, sem o
inconveniente de reaes colaterais, que poderiam ocorrer nos procedimentos
clssicos. 72
Neste estudo, diversas metodologias foram tentadas para realizar a o-
metilao da bufotenina e os resultados encontram-se registrados na Tabela 6. As
reaes de metilao foram realizadas de acordo com protocolos previamente
estabelecidos no nosso laboratrio e procedimentos descritos na literatura para
grupos fenlicos.

Tabela 6. Resultado das tentativas de metilao.

Entrada Reagentes e condies Resultados

1 Me2SO4, CH2Cl2, NaOH aq, ~10h. Desaparecimento da matria-prima e no

isolamento de produto.
2 Me2SO4, EtOH, NaOH 2M, Formao de produto solvel em gua e no
refluxo,~4h. isolado.
3 MeI, acetona, K2CO3, refluxo, 4 h. Formao de produto solvel em gua e no
isolado.

70
Marette, C; Larrouquet; Tisnes, P; Deloye, J. B; Gras, E.; Tetrahedron Lett. 47, 2006, 6947.
71
Greene, T. W; Wuts, G .M; Protective Groups in Organic Synthesis. 3 ed. 1998, 246.
72
Lang, E. S.; Comasseto, J. V.; Quim. Nova, 1988, 11, 238.

38
 Inicialmente, a bufotenina foi submetida a tratamento com sulfato de
dimetila sob condies de transferncia de fase, com diclorometano e hidrxido de
sdio 2M, procedimento usual no nosso laboratrio. Nessas condies, observou-se
o desaparecimento da matria-prima, porm no foi possvel o isolamento do
produto formado (Entrada 1). O emprego de sulfato de dimetila em presena de
NaOH e etanol, sob condies de refluxo, 73 no levou a formao o produto
esperado, mas de um material extremamente polar que, aps elaborao da mistura
reacional, migrou para fase aquosa (Entrada 2). Suspeitamos ento se tratar do
produto da superalquilao da bufotenina (sal). Utilizando iodeto de metila em
presena de carbonato de potssio, sob refluxo de acetona,63,74 observamos a
formao inicial de um produto menos polar que, na seqncia, d origem a um
produto bem mais polar (CCD) com caracterstica de um sal. Essa hiptese mostrou-
se coerente, pois aps extrao contnua lquido-lquido da fase aquosa usando o
AcOEt como solvente foi obtido pequena quantidade de um material (cerca de 20%,
Entrada 3) que na anlise espectroscpica apresentou picos nas regies
caractersticas bufotenina, porm levemente modificados em termos de
deslocamentos qumicos e muito sinais deformados (rudos).
Um experimento realizado no laboratrio consistiu em utilizar as
condies de metilao (iodeto de metila em presena de carbonato de potssio,
sob refluxo de acetona) para formar o sal, evitando-se o tratamento posterior com
gua. Por esse procedimento, obteve-se um precipitado que foi filtrado e lavado com
acetona, para isolamento de um slido branco (70%, p f 210 C), caracterizado por
anlises de RMN H1 e RMN C13 como sendo Iodeto de 5-hidrxi-N,N,N-
trimetiltriptamina (anexos 21 - 23, pg. 78 - 80).

N N+
I-

HO CH3I, Acetona HO
refluxo
NH NH
1 57

Esquema 12. Formao do sal de bufotenina72.

73
Rabjhon, N.; Organic Syntheses. Collective Vol IV. Wiley. 1963, 837.
74
Mackenzie, A, R; Moodt, C, J, Rees, C. W; Tetrahedron, 1986, 42, 3259.

39
 Benington e colaboradores 75 prepararam uma srie de o- e N-
metilderivados da bufotenina e da dimetil-triptamina. No entanto, seus estudos
apontaram para a dificuldade de se conseguir a metilao seletiva da funo fenlica
sem a quaternizao da amina na cadeia lateral, o que resultou na mudana da
seqncia sinttica inicialmente planejada.
No sentido de se evitar a superalquilao, um problema comum na
metilao de aminas, outras condies reacionais para proteo seletiva da hidroxila
fenlica sero testadas, por exemplo, a alquilao com um grupo mais volumoso
(benzil) ou, indiretamente, via a proteo do grupo amino lateral com formao do
on amnio com formaldedo, seguida de reduo com cido frmico a 100C, para
ento se tentar a metilao da hidroxila fenlica com NaH/CH3I (Esquema 13).

CH3 CH3
N CH3 N CH3

HO 1. HCHO/HCO2H/100oC O
H3C

NH NH
2. NaH/CH3I
1 52
Esquema 13. Proposta para preparao indireta de O-metil bufotenina

4.2.2. Preparao de acilderivados

Em sntese orgnica os grupos acila tambm so importantes agentes

protetores para lcoois, aminas, sulfetos e fenis e diversos agentes acilantes
podem ser empregados com esse propsito.70 No entanto, grupos acila no so to
estveis como os alquilas, sendo facilmente hidrolisados, o que limita o seu uso e
torna necessrio adequar catalisadores, solventes e tempo reacional para diferentes
alvos de proteo.65
A proteo na forma de grupo acetila uma ferramenta bastante
explorada na sntese de frmacos. Existem vrias opes de introduo do grupo
acetila em uma molcula que possui uma hidroxila fenlica. Uma estratgia clssica
consiste em tratar o composto fenlico com uma mistura de anidrido actico e
piridina.60 A aplicao dessa metodologia, para acetilao da bufotenina levou a
formao de um produto menos polar que a matria-prima (CCD) que suspeitamos
75
Benington, F.; Morin, R. D.; Clark, Leland C., Jr. J. Org. Chem. 1958, 23, 1977.

40
tratar-se do acetil derivado desejado 54. No entanto, esse produto se apresentou
muito instvel, no resistindo aos procedimentos usuais de purificao para remoo
da piridina, gerando um produto final com quantidade substancial de impurezas e
que ainda sofria decomposio na coluna cromatogrfica (espectro 24, pgina 81).
Em face dessas dificuldades, optamos por aplicar uma recente
metodologia que utiliza Ac2O em presena do MgClO4 como catalisador, na
ausncia de solvente. 76 Esse procedimento tem a vantagem da ausncia da piridina
evitando-se, portanto, o tratamento com soluo cida para sua remoo. Por
cromatografia em camada delgada observou-se a formao de um produto menos
polar, porm em funo de problemas tcnicos no foi possvel a aquisio de
dados espectroscpicos.
Paralelamente, a bufotenina foi submetida a tratamento com outros
agentes acilantes (cloreto de cinamola e cloreto de benzola) usando Et3N como
base e em presena de quantidade cataltica de DMAP. 77 Em ambos os casos,
foram observados o consumo total da matria-prima e formao de produtos com
baixa estabilidade e de difcil purificao. Os espectros obtidos da reao com
cloreto de cinamola indicam a presena de um derivado cinamola da bufotenina.
No entanto, apresentam diversos sinais adicionais que podem ser resultantes da
decomposio e interferem na caracterizao dos mesmos. Em funo de
problemas tcnicos para aquisio de novos dados espectroscpicos, no foram
adquiridos dados espectroscpicos da reao da bufotenina com cloreto de
benzola. As amostras envolvidas nesse estudo foram reservadas para posterior
purificao e identificao.

76
Chakraborti, A. K.; Sharma; L.; Gulhane, R.; Shivani. Tetrahedron, 2003, 59, 7661
77
Macor, J. E.; Cuff, A.; Cornelius, L.; Tetrahedron Lett. 1999, 40, 2733.

41
5. Parte Experimental

5.1- Procedimentos Gerais

As sementes foram secadas temperatura ambiente e reduzidas a p

em um liquidificador domstico. O material pulverizado foi reservado temperatura
ambiente, protegido de luz e umidade.

Os reagentes e solventes foram adquiridos de fornecedores comerciais

e utilizados sem purificao adicional, exceto nos procedimentos e reaes que
requereram um maior grau de pureza.

As anlises em cromatografia em camada delgada foram efetuadas em

placas de slica gel suportada em alumnio 60F254/0,2 mm (Merck), utilizando como
eluente, acetato de etila, etanol-acetato de etila; metanol, metanol-cido actico em
concentraes apropriadas e como reveladores luz ultravioleta, iodo, soluo de
vanilina sulfrica, DMPH.

As purificaes foram realizadas por recristalizao; cromatografia

rpida sob presso (Flash Column Chromatography) ou por cromatografia rpida em
coluna seca (Dry-Flash Column Chromatography), usando como suporte slica gel
60 (0,04-0,06 mm) e como eluentes: hexano, acetato de etila, etanol, metanol,
isolados e na forma de misturas em concentraes apropriadas.

Os pontos de fuso foram determinados no bloco de Kfler e se

encontram registrados sem correo.

Os espectros de IV foram registrados nos espectrmetros Bomem

Hartmann & Braun (MB 100), com valores expressos em cm-1.

Os espectros de RMN H1 e C13 foram registrados em espectrmetros

Varian (7.05 T), utilizando como solvente, CDCl3, CD3COCD3 MeOD ou DMSO-d6.
Os deslocamentos qumicos foram expressos em (ppm) com referncia ao TMS
(RMN 1H) e aos deutrios dos solventes usados (RMN C13) e os padres de
acoplamento foram definidos por: s (simpleto), d (dupleto), t (tripleto), m (multipleto),
dd (duplo dupleto) e sl (singleto largo). Alguns espectros foram processados no
Programa Mestre C. O assinalamento dos hidrognios e carbonos foi confirmado
por experimentos uni e bidimensionais (APT e HMQC).

42
 As anlises por Cromatografia Gasosa foram realizadas em CG
VARIAN-STAR 3400 equipado com injetor SPLIT/SPLTITLESS, com detector FID.
Condies: Coluna CAPTAR de slica fundida (Cdigo SPTM - 2380) de 300 m X
0,25 mm X 0,20 m (SUPELCO - Sigma Aldrich Co); Padro: mistura de metil ster
de cidos (SUPELCO 37 Component FAME MIX - Sigma Aldrich Co); Mtodo:
corrida de 30 min com N2 como gs de arraste, temperatura da coluna (140 240
C), a temperatura do injetor e detector (260C).

Os espectros de massas foram obtidos em aparelho de cromatografia

em fase gasosa acoplada espectrometria de massas (CG/EM), utilizando
Cromatgrafo Agilent Technologies 6890N, detector seletivo de massas (operando a
70 eV) Agilent Technologies 5973 Inert e coluna DB-5MS.

5.2. Identificao botnica de espcies de Anadenanthera sp.

As partes da plantas (folhas, flores e sementes) de duas espcies do

gnero Anadenanthera foram coletadas, de agosto a setembro de 2006, em trs
localidades de Braslia: nos arredores da Biblioteca Central (BCE), Centro Olmpico
(CO) Universidade de Braslia (UnB) e da Associao dos Profissionais da Caixa
Econmica Federal (APCEF). Exsicatas foram depositadas no Herbarium da
Universidade de Braslia (UB: Dos Santos, M.L. e Logrado L.P.L.), sob a orientao
da Profa Dra. Carolyn Elinora Barnes Proena (Departamento de Botnica do
Instituto de Biologia da UnB) e as espcies foram identificadas pelo Prof. Dr.
Christopher William Fagg (Professor Visitante do Departamento de Engenharia
Florestal da Faculdade de Tecnologia da UnB), de acordo com protocolos
convencionais.

43
5.3. Fracionamento e caracterizao dos componentes qumicos
das sementes de Anadenanthera peregrina (BCE e APCEF) e
Anadenanthera colubrina (CO).

5.3.1. Extrao pelo mtodo de Stromberg.25 70 g de sementes secas e trituradas

foram agitadas em 300 mL de etanol a 96% e 1% cido tartrico durante quatro
horas, com uso de agitador mecnico. A suspenso foi filtrada em funil de Buchner,
a extrao foi repetida com mais uma poro de 300 mL de etanol a 96% e 1% cido
tartrico e os filtrados foram combinados, concentrados para um volume de 150 mL.
O resduo foi diludo com 50 mL de gua destilada e soluo foram acrescentados
3 mL de HCl 2 M. A soluo resultante (pH em torno de 3-4) foi transferida para um
funil de separao e lavada por seis vezes com 70 mL de clorofrmio. A fase
aquosa foi alcalinizada a pH 8-9 com hidrxido de amnio concentrado e, em
seguida, novamente extrada por oito vezes com 70 mL de clorofrmio. Os extratos
combinados de clorofrmio foram concentrados at o surgimento de um leo
amarelado que re-dissolvido com aquecimento em acetato de etila e hexano. Aps
resfriamento, observou-se a formao de um slido marrom escuro. A gua me foi
filtrada sob presso reduzida e a massa slida foi lavada com acetato de etila frio
para fornecer 2,15 g de um slido caracterizado como sendo a bufotenina (1),
rendimento de 2,9% em relao ao extrato bruto. Aps recristalizao em AcOEt-
hexano obteve-se um slido amarelo-esverdeado com ponto de fuso 155 0C
(literatura: 146,5 oC).20

5.3.2. Extrao em Sohxlet. 20g de sementes trituradas foram colocados em um

aparelho Sohxlet e, extradas com etanol (diferentes tempos de extrao foram
testados, Tabela 1, pgina 28). O extrato etanlico foi concentrado a um leo
esverdeado no rotoevaporador. O resduo oleoso foi impregnado em slica gel, a
temperatura ambiente, e cromatografado em coluna (Dry-Flash Column
Chromatography), usando a seguinte seqncia de solventes: AcOEt; AcOEt-EtOH e
EtOH puro. Foram obtidas duas fraes: uma mais polar caracterizada por mtodos
espectromtricos como sendo a bufotenina (1) (rendimento de 0.3% em relao ao
extrato orgnico bruto) e quantidade substancial de uma frao menos polar, com

44
aspecto oleaginoso caracterizado como uma mistura de triacilgliceris, conforme
descrito abaixo.

5.3.3. Saponificao e esterificao do leo 78 . 20 mg do leo foi tratado com 1,5

mL de uma soluo de metanlica de KOH ( 0,5 M), por 1 minuto, sob agitao. A
mistura foi colocada em banho-maria a 70C por 5 minutos e depois resfriada
temperatura ambiente. A essa mistura foi adicionada 2 mL de BF3 em metanol por 1
minuto, sob agitao, e depois em banho-maria por 5 minutos a 70C. A separao
do ster formado foi realizada por tratamento da mistura de reao com 2,5 mL de
NaCl saturado em 1 mL de hexano, seguida de centifugao por 10 minutos (1200
rpm). O sobrenadante (fase hexnica) foi analisado por CG (VARIAN- STAR 3400
equipado com injetor SPLIT/SPLTITLESS, com detector FID). (Anexos 8 - 11,
pginas 65 - 68)

5.3.4. Propriedades fsico-qumicas e espectromtricas de bufotenina (1). As

propriedades fsico-qumicas e espectromtricas da bufotenina isolada das
diferentes espcies (A. peregrina, BCE e APCEF, e A. colubrina, CO) pelo mtodo
de Stromberg apresentaram-se similares (anexos de 2 - 7 e 12 17, pginas 59 - 64
e 69 - 74):
12
H3C
13
N CH3
10
4
11
HO 5 9 3

2
6 N1
8
7 H

Constantes fsico-qumicas: Rf 0,49 (eluente MeOH), p.f. 155 0C (literatura: Rf

0.27, pf. 146,5 oC).25

IV (KBr, mx, cm-1): 3399, 3237;

RNM H1 (300 MHz, DMSO-d6) : 10,42 (s, 1H); 7,11 (dd, J= 8,7e 0,6 Hz, 1H); 7,02 (d, J=
2,4Hz, 1H); 6,80 (d, J= 1,5 Hz, 1H); 6,59 (dd, J= 8,7 Hz e 2,4 Hz, 1H), 2,72 (m, 2H), 2,20 (s,
6H).

78
Knothe, G.; Gerpen, J. V.; Krahl, J.; Ramos, L.P. Manual de Biodiesel, Ed. Edgarb Blucher, 2006.

45
RNM C13 (75 MHz, DMSO-d6) : 123,2 (C-4); 111,8 (C-3); 102,5 (C-2); 150,4 (C-5); 111,4 (C-
6); 111,9 (C-7); 128,2 (C-9); 131,1 (C-8); 23,4 (C-10); 60,2 (C-11); 45,3 (C-12 e C-13).

5.3.5. Monopicrato de bufotenina.68 Em um balo de 50 mL adaptado de um

condensador de refluxo, adicionou-se 0,15 g do extrato etanlico concentrado
dissolvido em 5 mL etanol. A esta mistura, foram adicionados 5 mL de soluo
saturada de cido pcrico (2,4,6-trinitrofenol) em 5 mL etanol, mantendo a mistura
sob agitao e refluxo at que toda matria prima fosse consumida (CCD, MeOH).
Ao final de 20 min, a mistura reacional foi resfriada e filtrada a vcuo, lavando-se
com pequena quantidade de etanol gelado. O slido vermelho foi caracterizado por
mtodos espectroscpicos (anexos de 18 a 20, pginas 75 a 77) como monopicrato
de bufotenina ( 90%; Rf 0,25 (AcOEt/ MeOH 1:1) e pf 166-168 C (literatura: Rf 0,25;
pf 170 C)68
H O-
+
N NO2 NO2

HO

NH NO2

Monopicrato de bufotenina

IV (KBr, mx, cm-1): 3374 cm-1 (CH Ar); 1574 e 1335 cm-1 (NO2);
1
RNM H (300 MHz, CD3COCD3-d6) : 7,17 (m, 1H); 7,20 (s, 1H); 2,29 (s, 1H), 8,71 (s,
1 H)

RMN C 13 (75MHz, CD3COCD3-d6) : 151,52 (C-5), 103,20 (C-6), 21, 95(C-10), 59,25
(C-11), 44,04 (C12 e C-13), 126,37 (C-16 e C-18).

5.4. Modificaes qumicas da bufotenina

5.4.1. Iodeto de 5-hidrxi-N,N,N-trimetiltriptamina (52). Em um balo de 100 mL,

foram adicionados 6 mL de acetona e 200mg (0,98 mmol) de bufotenina. Em
seguida, foi adicionado cerca de 1 mL (1,7 mmol) de iodeto de metila e a mistura foi
mantida sob refluxo por 3h. O slido formado foi filtrado e lavado com cerca de 10
mL de acetona gelada. Obteve-se 160 mg do slido branco (pf: 207-210 C),

46
caracterizado como sendo Iodeto de 5-hidrxi-N,N,N-trimetiltriptamina (anexos 21
23, pginas 78 - 80).

1
RNM H (300 MHz, DMSO d6) : 6,88 (s,1H); 7,13 (s, 1H); 10.65 (m, 2H); 3,16 (m,
2H).
RMN C 13 (75MHz, DMSO d6) : 112, 56 (C-2); 102,88 (C-4); 151,05 (C-6); 107,98 (C-
7); 128,08 (C-8); 124,52 (C-9); 19,38 (C-10); 65,83 (C-11); 40,15 (C-12, 13, 14).
12 CH 13
3
CH3
I- N+
10 CH
4 11 14 3
93
HO
5
2
6 N
7
8 H1
47

5.4.2. Cinamato de bufotenina (55) Em um balo de 50 mL, adaptado com um

condensador de refluxo, foram adicionados 204 mg de bufotenina (1,0 mmol)
dissolvidos em diclorometano seco (6 mL), 0,2 mL de Et3N (1,2 eq), 200 mg de
cloreto de cinamola (1,2 eq) e uma quantidade cataltica de DMAP. A mistura foi
deixada sob refluxo e agitao, acompanhada por CCD MeOH: AcOH (gotas de
AcOH). Ao final de 8 horas, a mistura reacional foi transferida para um funil de
separao e lavada sequencialmente com 10 mL de NaHCO3 (trs vezes) e com 7
mL de salina. A fase orgnica foi seca com Na2SO4 e, aps a evaporao do
solvente, o resduo foi dissolvido em acetato de etila/hexano e colocado na geladeira
para cristalizao. No havendo a cristalizao, o solvente foi evaporado, o resduo
foi filtrado em coluna seca e rpida (SiO2, MeOH; AcOEt) e frao representativa
recolhida foi submetida a anlise espectroscpica (anexo 24, pgina 81) pela qual
foram observados sinais caractersticos de uma espcie de cinamato de bufotenina.

1
RNM H (75MHz, CD3COCD3- d6) *: 2,35 (s, 1H); 6,64 (d, 1H); 7,9 (d, 1H), 9,27 (s, 1H).
*Sinais caractersticos de um cinamato de bufotenina.

5.4.3. Acetato de bufotenina (54). Em um balo de 50 mL foram adicionados 100

mg (0,5 mmol) de bufotenina dissolvidos em 1 mL de anidrido actico e 0,1 mL de
piridina. A mistura foi deixada sob agitao e acompanhada por CCD MeOH:ACOH
(gotas de AcOH). Ao final de 3 horas, a mistura reacional foi dissolvida em AcOEt,

47
transferida para um funil de separao e lavada com salina. A fase orgnica foi seca
com Na2SO4 e, aps a evaporao do solvente, o resduo foi dissolvido em acetato
de etila/hexano e colocado na geladeira para cristalizao. No havendo a
cristalizao, o solvente foi evaporado. O produto acetilado foi recolhida foi
submetida a anlise espectroscpica (anexo 25, pgina 82 pela qual foram
observados sinais caractersticos de uma espcie de acetato de bufotenina.

1
H RMN (75MHz, DMSO) *: 2,29
*Sinais caractersticos de um acetato de bufotenina.

5.4.4. Benzoato de bufotenina (56). Em um balo de 50 mL, adaptado com um

condensador de refluxo, foram adicionados 100 mg (0,5 mmol) de bufotenina
dissolvidos em 5 mL de diclorometano seco (5 mL), 0,1 mL Et3N (1.2 eq, 0.6 mmol),
0,1 mL cloreto de benzola (84mg, 1.2 eq, 0,6 mmol) e DMAP (quantidade cataltica).
A mistura foi deixada sob refluxo e agitao, acompanhada por CCD MeOH:ACOH
(gotas de AcOH). Ao final de 3 horas, a mistura reacional foi transferida para um funil
de separao e lavada sequencialmente com 6 mL de NaHCO3 (trs vezes) e com 5
mL de salina. A fase orgnica foi seca com Na2SO4 e, aps a evaporao do
solvente. As amostras envolvidas nesse estudo foram reservadas para posterior
purificao e identificao devido a problemas operacionais.

48
6. Concluses e Perspectivas

A necessidade de se explorar os produtos naturais oriundos da grande

biodiversidade brasileira, principalmente o Cerrado, como fonte de inspirao para o
planejamento racional de novos candidatos a frmacos potentes e seletivos que
permitam o controle da evoluo de doenas do SNC, que apresentem baixo perfil
de toxicidade, justifica a importncia da continuidade desse projeto. Um dos
objetivos do presente estudo tornar mais objetivas e menos dispendiosas as
pesquisas por constituintes qumicos de plantas, atravs do desenvolvimento
tcnicas de ensaios qumicos e bioqumicos para monitoramento e seleo de
extratos, fraes de extratos e substncias puras bio/farmacologicamente teis.
As espcies coletadas foram identificadas como sendo Anadenanthera
peregrina (vars. peregrina e falcata) e Anadenanthera colubrina (var. cebil). As
sementes foram submetidas a diversos mtodos extrativos. O extrato etanlico
(Soxhlet) das sementes apresentou uma frao menos polar e abundante composta
basicamente por triglicerdeos de cidos graxos e uma frao mais polar constituda
apenas pelo alcalide indlico bufotenina. O mtodo de Stromberg demonstrou ser
um mtodo mais eficiente para a extrao, purificao e quantificao da bufotenina.
A presena de bufotenina em extratos das variedades foi confirmada por FT-IR, 1H
13
RMN, C RMN e CG-EM. O estudo fitoqumico confirmou que estas espcies so
fontes promissoras da bufotenina (cerca de 2,9 %). No foram encontrados os outros
alcalides citados na literatura.
A literatura sugere que modificaes estruturais adequadas na bufotenina
podem fornecer compostos com elevado potencial bioativo, a exemplo dos anlogos
ou derivados da serotonina. Neste estudo foram empregadas algumas metodologias
para modificaes simples da bufotenina para obteno de derivados fenlicos (metil
ter, benzil ter, cinamato e benzoato). No entanto, essas transformaes no se
mostraram triviais em funo da competitividade das funes amino e fenlica.
Muitas dessas observaes se encontram registradas na literatura.
No presente momento, as metodologias de proteo seletiva do grupo
fenlico esto sendo aperfeioadas visando obteno de derivados com melhor
padro de qualidade e em quantidade suficiente para avaliao da atividade
biolgica e utilizao na preparao de indolaminas mais complexas, como por
exemplo, derivados -carbolnicos.

49
7. Referncias Bibliogrficas

1. Montanari, C. A.; Bonzani, V. S.; Quim. Nova, 2001, 24, 105.

2. Newman, D..J.; Cragg, G. M.; Snader, K. M. J. Nat. Prod. 2003, 60, 1022.
3. Lewis, G. P.; Schrire, B.; Mackinder, B. & Lock, M.: Legumes of the world.
Royal Botanic Gardens, Kew, 2005, 577.
4. Almeida, S .P.; Proena, C.E.B.; Sano, S. M. e Ribeiro, F. J. Cerrado - Espcies
vegetais teis. Planaltina DF, EMBRAPA. 1998, 35.
5. Sprent, J. I. 1994. Nitrogen acquisition systems in the Leguminosae. In : Sprent,
J. I. & McKey, D. (eds.) Advances in Legume Systematics, part 5. The Nitrogen
Factor. Royal Botanic Gardens, Kew, UK. 1-16.
6. Altschul, S. von R. A taxonomic study of the genus Anadenanthera. In:
Contributions to the Gray Herbarium. 1964, 193, 1-65.
7. Fagg, C. W . Leguminosas da APA de Cafuringa. In: Netto, PB, Mecenas, V.V.
e Cardoso ES (Edits) APA de Cafuringa, a ltima fronteira natural do DF.
Brasilia: Semarh. 2005, 147-152 e 453-457.
8. Almeida, E. R. Plantas medicinais brasileiras: conhecimentos populares e
cientficos. Heemus ed. Limitada. 1993, 341
9. Lorenzi, H. rvores brasileiras - Manual de Identificao e cultivo de Plantas
arbreas Nativas do Brasil- ed. Plantarum, Nova Odessa vol I- So Paulo SP,
1992, 352.
10. Carvalho, P. E. R. Espcies florestais brasileiras: recomendaes silviculturais,
potencialidades e uso da madeira. Colombo: EMBRAPA-CNPF 1994. 640.
11. Corra, M. P. Dicionrio das plantas teis do Brasil e das exticas cultivadas.
Rio de Janeiro: Ministrio da Agricultura / Instituto Brasileiro de
Desenvolvimento Florestal, v1, 1984, 747.
12. Milano, M. S.; Rizzi, N. E. e Kaniaok, V. C. Princpios bsicos de manejo e
administrao de reas silvestres. Curitiba: ITCF, 1986, 55.
13. Maia, G. N. Caatinga: Arvores e arbustos e suas utilidades. So Paulo: D & Z
Computao Grfica e Editora. 2004, 104-113.
14. Tokarnia, C. H; Peixoto, P. V.; Dobereiner, L. 1994. Intoxicao experimental
por piptadenia macrocarpa (Leg. Mimodoideae) em bovinos. Pesquisa
veterinria brasileira. 14 (2/3): 57-63

50
15. Rezende, S. J. Barbatimo. Ruralidade. 1975,17.
16. Correia, C. R. D.; Sntese Estereosseletiva de alcalides e N-heterociclo,
UFSCar, 2001.
17. Kuboyama, T., Yokoshima, S., Tokuyama, H., Fukuyama, T.; PNAS, 2004 ,101
(33), 11966.
18. M. Kutchan. The Plant Cell, 1995, 7, 1059.
19. Simes, C.M.O., Schenkel, E.P., Gosmann,G.; Mello,J.C.P., Mentz,L.A.;
Petrovick, P.R.; Farmacognosia da planta ao medicamento. Editora UFSC.
2007.
20. Goossens, A.; Rischer, H.; Phytochem Rev . 2007, 6, 35.
21. Facchini, P. J.; Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 2001, 52, 29.
22. Sundberg, R.J. Indoles, Acaemic Press Inc., Lodon, 1996.
23. Phlipson, J. D.; Zenk, M. H.; ndole and Biogenetically Realated Alkalods.
Acaddemic Inc. New York.1980
24. Austin, J. F.; McMillan, D.W.C.; J. Am Chem. Soc. 2002, 124, 1172.
25. Stromberg, V. L.; J.Med. Chem. 1954, 76, 1707.
26. Fish, M. S, Joohnson, M. e Horning, E. C.; J. American Chem. Soc. 1955, 77,
5892-95.
27. Pachter, I. J; Zacarias, D. E , Ribeiro, 0.; J. Org. Chem. 1959, 24, 1285-87.
28. Fellows, L. E.; Bell, E. A.; Phytochemistry, 1971,10, 2083.
29. Karkkainem, J; Raisanen, M, Biological Psychiatry, 1992, 32, 1042-1048.
30. Falkenerg, G. Acta Crystallographica, 1972, 28 (Pt11), B, 3219
31. Costa, T. O. G.; Morales, R. A. V.; Brito, J. P.; Gordo, M.;. Pinto , A. C .; Bloch
Jr. C.; Toxicon 2005, 46, 371.
32. Erspamer, V. In: Heatwole, H., Barthalmus, G.T. (Eds.), Bioactive Secretions of
the Amphibian Integument Amphibian Biology. The Integument, vol. 1. Ed
Surray Beatty and Sous, Chipping Norton, Australia, 1994, 178350.
33. Habermehl, G.; Preusser, H. J. Z. Naturforsh B. 1970, 25, 1451-2.
34. Zhou, L.; Hopkins; A. A.; Huhman.; D. V.; . Sumner, L. W. J. Agric. Food Chem.
2006, 54, 9287.
35. Moretti, C.; Gaillard,Y.; Grenand,P.; Fabien B.F.; Prvost, J.M.;
J.Ethanopharmac. 2006, 106, 198.
36. Beutler, J. A.; Der Marderosian, Ara H.; Journal of Natural Products 1981, 44,
422-31.

51
37. Fellows, L. E.; Bell, E. A.; Phytochemistry, 1970,9 ,2389.
38. Dewick, P. M.; Medicinal Natural Products, 2nd ed.; Wiley, New York, 2002.
39. Sullivan, R. J.; Hagen, E. H.; Addiction, 2002, 97, 389.
40. Luckner, M .; Secondary Metabolism in Microorganisms, plants e a animals, 3nd,
New York 1990.
41. Udenfriend. S.; Titus, E.; Weissbach, H.; Peterson, R. E. JBC, 1995, 335.
42. Rebelatto, J.R; Morelli, J. G. S; Fisoterapia Geritrica. 2ed , 2007, 241.
43. Yu, Q.; Holloway, H. W.; Utsuki, T.; Brossi, A.; Greig, N. H. J. Med. Chem.
1999, 42, 1855.
44. Zhu, X.; Greig, N. H.; Holloway, H. W.; Whittaker, N. F.; Brossi, A.; Yu, Q.
Tetrahedron Lett. 2000, 41, 4861Kang, K.; Jang, S.M.; Kang, S.; Back, K. Plant
Sci. 2005, 168, 783.
45. Romeiro, L. A.S.; Fraga, C. A. M.; Barreiro, E. J.; Quim. Nova, 2003, 26, 347-
358,
46. Marais, W.; Holzapfel, C. W.; Synth. Commun. 1998, 28, 3681.
47. Kumarasamy, Y.; Middleton, M.; Reid, R. G.; Nahar, L.; Sarker, S. D.
Fitoterapia 2003, 74, 609;
48. Kumarasamy, Y; Middleton, M; Reid, R. G; Nahar, L; Sarker, S. D; Fitoterapia,
2003, 74, 609.
49. Stoll, A; Toxller, F.; Peyer, J.; Hoffman, A. Helvetica Chimica Acta, 1955, 38,
1452.
50. Kang, K.; Jang, S. M.; Kang, S.; Back, K. Plant Sci. 2005, 168, 783.
51. Paiva, L. M.; Revista da Psicossomtica . 2006, 1,16.
52. Nunes, D. S.; Rocha Filho, G. M.; Elisabethy, E.; Barata, L. E. S.; Alcalides
triptamnicos de Piptadenia gonoacanth (mart), macbr e Anadenanthera falcata
(Benth). Speng. In: Reunio anual da Sociedade Brasileira para ao Progresso
da Cincia (SBPC), Resumo 34, 1982, Campinas - SP.
53. Migliaccio, G .P.; Shiceh, T. L. N.; Hathauay, B. A.; Nichols,D .E.; J. Md.
Chem. 1981, 24, 206
54. Gesser, P.K.; Godse, D. D.; Krull, A. H.; McMillan, J. M.; Life Sci.1968, 7,267.
55. (a) Roszkowski, P.; Wojtasiewicz, K.; Leniewski, A.; Maurin, J. K.; Lis, T.;
Czarnocki, Z. J. Molec. Cat. A: Chem. 2005, 232, 143; (b) Zhaob, M.; Lanrong
Bia, L.; Wangb, W.; Chao Wangb, C.; Baudy-FlochdM.; Jingfang Juc, J.;
Penga, S.; Biorganic & Med. Chem. 2006, 14, 6998.

52
56. Bresolin T. M. B, Cechinel Filho V.(org.) Cincias Farmacuticas: contribuio
ao desenvolvimento de novos frmacos e medicamentos. Itaja: Ed. Univali,
p.43-44.
57. Ho, B. T.; Taylor, D.; Mctsooc, W. M.; Adv. Behav. Biol. 1971, 1, 97
58. Dramate, K. L.; Okungn, J .I. Plant Med. 1977, 31,193
59. Callaway, J. C.; Gynther, J.; Poso, A.; Vepsalainem, J.; Airalksinem, M. M. J.
Heterocycl. Chem. 1994, 31,431.
60. R. Cao, Q. Chen, X. Hou, H. Chen, H. Guan, Y. Ma, W. Peng,. Bio. Med.
Chem., 2004, 12, 4613-4623
61. Humphrey, G. R.; Kuethe, J. T.; Chem. Rev. 2006, 106, 2875.
62. Laue, T.; Plagem, A.; Named of reactions organic chemistry, Wiley, New York,
2000.
63. (a) Lipiinska, T.; Guib-Ampel, E.; Petit, A.; Loupy, A. Synth. Commun. 1999,
29(8,) 1349. (b) Gribble, G. W. Recent developments in indoles ring synthesis-
methology and applications. J. Chem. Soc, Perkin Trans. I, p. 1045-1075, 2000.
64. a) Houlihan, W. J,; Uike, Y; Parrino, V. A.; J. Org. Chem. 1981,46,4515. b)
Houlihan, W. J,; Uike, Y; Parrino, V. A.; J. Org. Chem. 1981,46, 4511.
65. Bringmann, G; Feineis, D; Bruckner, R, God. R; Grote, C; Wesemann, W;
Europen J. of Pharmaceutical Sciences 2006, 28, 412-422.
66. Mumford, P. M.; Shiers, J.J.; Tarver, G. J.; Hayes, J.F.; Shipman, M;
Tetrahedron Letters , 2008, 49, 3489.
67. Catlogo n 47885-U, Supelco 37 Sigma Aldrich Co.
68. Armarego, W. L. F; Perrin, D.D; Chemical Methods used in Purification.,
4ed,1996,51.
69. Iacobucci, G. A.; Ruveda, E. A.; Phytochemistry, 1964, 3, 3465.
70. Marette, C; Larrouquet; Tisnes, P; Deloye, J, B; Gras, E;. Tetrahedron Lett.
2006, 47, 6947.
71. Greene, T.W; Wuts, G.M; Protective Groups in Organic Synthesis. 3 ed. 1998,
246.
72. Lang, E. S.; Comasseto, J. V.; Quim. Nova 1988, 11, 238.
73. Rabjhon, N.; Organic Syntheses. Collective Vol IV. Wiley. 1963, 837.
74. Mackenzie, A, R; Moodt, C,J, Rees, C.W; Tetrahedron, 1986, 42, 3259.
75. Benington, F.; Morin, R. D.; Clark, Leland C., Jr. J. Org. Chem. 1958, 23, 1977.

53
76. Chakraborti, A. K; Sharma; L; Gulhane, R; Shivani. Tetrahedron lett. 2003, 59,
7661
77. Macor, J. E; Cuff, A; Cornelius, L,; Tetrahedron Lett. 1999, 40, 2733.
78. Knothe, G.; Gerpen, J. V.; Krahl, J.; Ramos, L.P. Manual de Biodiesel, Ed.
Edgarb Blucher, 2006

54
Anexos

55
Anexo 1.
Chave de Anadenanthera

1a. Textura da superfcie do fruto rugoso, spero e opaco, anteras sem glndulas no
boto floral............................................................................................2. A. peregrina

2a. Fruto reto..........................................................1a. A. peregrina var. peregrina

2b. Fruto curvado ou em forma de foice.............1b. A. peregrina var. falcata

1b. Textura da superfcie do fruto lisa e brilhosa, anteras com glndula no boto
floral ............................................................3. A. colubrina.

3a. Fruto com margem ondulada e regularmente contrada entre as sementes, boto
floral esbranquiado, inflorescncias terminais em forma de pancula
..................................................................................2a. A colubrina var. colubrina

3b. Fruto com margem ondulada ou no e irregularmente contrada entre as

sementes, boto floral no esbranquiados, inflorescncias axilares ou terminais em
forma de racemo .............................................2b. A. colubrina var. cebil

1. Anadenanthera peregrina (L.) Speg. Physis 6:313. 1923.

Arbusto at arvore alta, tronco at 3-27m e 20-40cm dimetro; ritidoma de cor

acinzentada at quase preto com muitas lenticelas, sem ou com projees com

espinhos no tronco quando jovem, depois com ritidoma grossa, folhas

multifolioladas, folhas e caules pubrulos e depois glabras. Estpulas pubescentes

linear 6x0,5mm rapidamente decdua. Eixo foliar 12-20(30) cm, maiores raquis 10,5-

19,5 cm, pecolo 15-45mm, pecolo base mais escuro 4-8mm, glndula normalmente

basal ou s vezes at metade do pecolo e plana 0,5-5mm; pinas de (10)13-22(30)

jugos, glndulas pequenas entre ultimas 1-3(5) pares de pinas, rquis de pina

maiores 35-95mm, fololos de pinas maior (25)45-90 jugos, fololos maiores

oblongos 0,5-5(2-8) x 0,5-1(1,5) mm, uma nervura. Pednculos 1-8 por n, (1,75)2,0-

3,2(4) cm na antese, pubrulo; captulo normalmente axilar 10-18mm dimetro com

56
filamentos verde-branco ou amarelho-creme; invlucro pubrulo bi-dentato de um

mm a no base do pednculo; bractelo deltide 1-2mm; flores haplostmmones

5 ptalas; clice 0,5-2,6mm; corola 2-3,5mm, ambos campanulados; filetes brancas,

10 por flor e livres, 5-8mm, anteras sem glndula no boto floral. Fruto reto ou

falcado, oblongo-elongado 1-3 por captulo, 9-33,5x1,5-2,8mm sem estipe, estipe 1-

3,5cm, margem ondulada ou no entre sementes, textura da superfcie rugosa,

spera e opaca, 8-16 sementes; sementes muita finas e compressas, circular com

margem fina at 1mm, castanha-escura a preta e lustrosa, 10-20 mm dimetro, com

pleurograma no centro 5-7mm.

1.1 Anadenanthera peregrina (L.) Speg. var. peregrina

Sinonmia: Mimosa peregrina L., Acacia peregrina (L.)Willd., Piptadenia peregrina

(L.) Benth., Niopa peregrina (L.) Britton & Rose, Acacia angustiloba DC.

1.2 Anadenanthera peregrina (L.) Speg. var. falcata (Benth.) Altschul

Sinonmia: Piptadenia falcata Benth., Anadenanthera falcata (Benth.) Speg.

2. Anadenanthera colubrina (Vell.) Brenan Kew Bull. 2:182 1955.

Arbusto at arvore alta, tronco at 3-30m e 30-50cm dimetro; ritidoma

acinzentada 2-5cm grossa glabra ou rugosa, sem ou com projees no tronco

quando jovem, folhas multifolioladas, folhas e caules pubrulos e depois glabros.

Estpulas pubescentes lineares 6x0,5mm, rapidamente decdua. Eixo foliar (4)11-

16,5 (20) cm, maiores rquis 9,5-15 cm com sulco, pecolo 12-18mm, base de

pecolo mais escuro 6mm, glndula achatada no pecolo 0,5-4mm no centro at

57
apical posio; pinas de (7)24-33(35)jugos, glndulas pequenas entre ultimas 1-6(7)

pares de pinas, rquis de pinas maiores (12)20-40(70)mm s vezes com mucro 1,5-

2mm, fololos de maiores pinas (20)50-67(80) jugos, fololos maiores oblongos (1)2-

3(6) x 0,5-0,75(1,5)mm, nervura obscura ou com uma. Pednculos 1-7 por n, 1,5-

(4) cm no antese, pubrulos ou glabras; captulo normalmente axilar ou agrupados

em racemos ou panculas no pices, 15-20mm dimetro com filamentos brancos ou

amarelo-creme; invlucro glabro diretamente embaixo do captulo; bracteolo deltide

1-2mm; flores haplostmmones 5 ptalas; clice (0,6)-(3)mm; corola (2,5)-(4)mm,

ambos campanulado; filetes brancos, 10 por flor e livres, 5-8mm, anteras com

glndula no boto floral, rapidamente decduo. Fruto reto ou falcado, oblongo-

elongado 1-2 por captulo, 10,5-29(32)x(1)1,5-2(3)cm com estipe, estipe 1,5-2,5cm,

margem ondulada ou no entre sementes, textura da superfcie lisa e brilhosa, 8-16

sementes; sementes muita finas e compressas, circular com margem fina at 1mm,

castanha-oscura e lustrosa, 12-20 mm dimetro, com pleurograma no centro 5-4mm.

2.1. Anadenanthera colubrina (Vell.) Brenan var. colubrina

Sinonmia: Mimosa colubrina Vell., Acacia colubrina (Vell.) Mart., Piptadenia

colubrina (Vell.) Benth.

2.2 Anadenanthera colubrina (Vell.) Brenan var. cebil (Griseb.) Altschul

Sinonmia: Acacia cebil Griseb., Piptadenia macrocarpa Benth., Anadenanthera

macrocarpa (Benth.) Brenan, Piptadenia microphylla Benth., Piptadenia hassleriana
Chod.

58
Anexo 2: IV Bufotenina A. peregrina var. peregrina

59
Anexo 3: RMN H1 Bufotenina A. peregrina var. peregrina

60
Anexo 4: RMN C13 Bufotenina A. peregrina var. peregrina

61
Anexo 5: APT - Bufotenina A. peregrina var. peregrina

62
Anexo 6: HMQC - Bufotenina A. peregrina var. peregrina

63
Anexo 7: CG-EM - Bufotenina A. peregrina var. peregrina
Abundance

Abundance
Scan 32 (1.467 min): LP-06-EXTLP.D (-28) (-)
TIC: LP-06-Lucio.D
57
6000000

5500000 3000

5000000
2500
4500000

2000
4000000

73
3500000
1500
86
3000000 43
1000
2500000

115
2000000 500 143 207
101
129 166
1500000 281
0
1000000 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280
m/ z-->
500000

1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00 7.50 8.00 8.50 9.00
Time-->

58
100

50 HO

NH
42 146 204
89 117
0
40 80 120 160 200
(ma inlib ) Bufotenine

64
Anexo 8: IV Triacilgliceris

65
Anexo 9: RMN H1 - Triacilgliceris

66
Anexo 10: CG Metil steres (amostra 1)

67
Anexo 11: CG Metil steres (amostra 2)

68
Anexo 12: IV Bufotenina A. peregrina var. falcata

69
Anexo 13: RMN H1 - Bufotenina A. peregrina var. falcata

70
Anexo 14: RMN C13 - Bufotenina A. peregrina var. falcata

71
Anexo 15: IV - Bufotenina A. colubrina var. cebil

72
Anexo 16: RMN H1 - Bufotenina A. colubrina var. cebil

73
Anexo 17: RMN C13 - Bufotenina A. colubrina var. cebil

74
Anexo 18: IV Monopicrato de bufotenina

75
Anexo 19: RMN H1 Monopicrato de bufotenina

76
Anexo 20: RMN C13 Monopicrato de bufotenina

77
Anexo 21: IV Iodeto de 5-hidrxi N,N,N-trimetil bufotenina

78
Anexo 22: RMN H1 - Iodeto de 5-hidrxi N,N,N-trimetil bufotenina

79
Anexo 23: RMN C13 - Iodeto de 5-hidrxi N,N,N-trimetil bufotenina

80
Anexo 24: RMN H1 Derivado cinamato de bufotenina

81
Anexo 25: RMN H1 Derivado acetilado de bufotenina

82