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Genero corynebacterium:
Las especies del gnero Corynebacterium y bacterias relacionadas por lo comn
tienen una forma irregular o en palillo de tambor; aunque no todas las cepas tienen
las configuraciones irregulares, los trminos bacterias corineformes o difteroides
son convenientes para designar el grupo. Estas bacterias tienen un alto contenido
de guanosina ms citosina.
Epidemiologa
La difteria es una enfermedad de distribucin universal, fundamentalmente en las
zonas urbanas desfavorecidas donde existen condiciones de hacinamiento y el
nivel de inmunidad inducida por la vacuna es bajo. La mayor epidemia registrada a
finales del siglo XX ocurri en la antigua Unin Sovitica, donde en 1994 se
documentaron casi 48.000 casos y 1.746 fallecimientos. C. diphtheriae se
mantiene en la poblacin como consecuencia del estado de portador asintomtico
en la bucofaringe o en la piel de las personas inmunizadas (por la exposicin a C.
diphtheriae o vacunacin). Se transmite de una persona a otra a travs de gotitas
respiratorias o mediante contacto cutneo. El ser humano representa el nico
reservorio conocido de este microorganismo. La difteria se ha convertido en una
enfermedad infrecuente en EE. UU. gracias a la introduccin de un programa de
vacunacin activa, como lo demuestra el hecho de que en 1921 se recogieran ms
de 200.000 casos, pero desde 2003 no se han notifi cado casos. La difteria es
fundamentalmente una enfermedad peditrica, pero la incidencia ms elevada
corresponde a los grupos de ms edad en las zonas donde se implementaron
programas de vacunacin activa para la poblacin peditrica. Tambin se
producen infecciones cutneas por C. diphtheriae toxignico (difteria cutnea),
aunque no se conoce cul es su incidencia debido a que se trata de una
enfermedad cuya declaracin no es obligatoria.
Enfermedades clnicas
La presentacin clnica de la difteria viene determinada por: 1) el lugar de la
infeccin; 2) el estado inmunitario del paciente, y 3) la virulencia del
microorganismo. La exposicin a C. diphtheriae puede originar colonizacin
asintomtica de las personas con inmunidad completa, enfermedad respiratoria
leve en las personas parcialmente inmunizadas o enfermedad fulminante, y
algunas veces mortal, en los pacientes no inmunizados (v. cuadro 263). Difteria
respiratoria. Los sntomas de la difteria que afectan al aparato respiratorio se
desarrollan despus de un perodo de incubacin de 2 a 4 das. Los
microorganismos se multiplican en el interior de clulas epiteliales de la faringe o
de superficies adyacentes e inicialmente producen un dao localizado como
consecuencia de la actividad de la exotoxina. El inicio es abrupto, con malestar
general, dolor de garganta, faringitis exudativa y febrcula. El exudado se
transforma en una seudomembrana formada por bacterias, linfocitos, clulas
plasmticas, fibrina y clulas muertas que puede recubrir las amgdalas, la vula y
el paladar, y se puede extender en la parte superior hasta la nasofaringe y en la
parte inferior hasta la laringe. La seudomembrana se encuentra firmemente
adherida al tejido respiratorio y es difcil de desprender sin que sangre el tejido
subyacente (caracterstico de la difteria). Cuando el paciente se recupera tras
alrededor de 1 semana de enfermedad, la membrana se desprende y es
expectorada. Las complicaciones sistmicas en los pacientes con formas graves
de la enfermedad afectan principalmente al corazn y el sistema nervioso. Es
posible detectar evidencias de miocarditis en la mayor parte de los pacientes con
difteria, que se manifiestan tpicamente a las 1-2 semanas de la enfermedad y
cuando los sntomas farngeos empiezan a mejorar. Los sntomas pueden
aparecer de forma aguda o gradual y su gravedad se acenta hasta la insufi
ciencia cardaca congestiva, las arritmias cardacas y la muerte. La neurotoxicidad
es proporcional a la gravedad de la enfermedad primaria, que viene condicionada
por la inmunidad de los pacientes. La mayor parte de los enfermos con una
enfermedad primaria grave sufren neuropata, que inicialmente se limita al paladar
blando y la faringe, pero que posteriormente condiciona una parlisis oculomotora
y ciliar que evoluciona a una neuritis perifrica.
Difteria cutnea
La difteria cutnea se adquiere por el contacto de la piel con otras personas
infectadas. El microorganismo coloniza la piel y llega al tejido subcutneo a travs
de interrupciones de la barrera de la piel. En primer lugar se forma una ppula,
que posteriormente se transforma en una lcera crnica que no desaparece, la
cual se recubre en algunas ocasiones de una membrana griscea. Es frecuente
encontrar tambin Staphylococcus aureus o Streptococcus pyogenes en la herida.
Diagnstico de laboratorio
El tratamiento inicial de un paciente con difteria se instaura sobre la base del
diagnstico clnico, no de los resultados de laboratorio, debido a la imposibilidad
de disponer de los resultados definitivos en un plazo inferior a 1 semana.
Microscopia
Los resultados del examen microscpico del material clnico no son fiables. Se han
descrito grnulos metacromticos en las bacterias teidas con azul de metileno,
pero esta propiedad no es especfica de C. diphtheriae, y la interpretacin de la
extensin requiere habilidad tcnica.
Cultivo
Las muestras para aislar C. diphtheriae se deben recoger de la nasofaringe y de la
garganta, y se deben inocular tanto en una placa de agar sangre enriquecido no
selectivo como en un medio especialmente preparado para este microorganismo
(p. ej., agar sangre con cistena-telurita [CTBA], medio de cultivo Tinsdale, agar
colistina-nalidxico [CNA]). La telurita inhibe el crecimiento de la mayor parte de las
bacterias respiratorias y los bacilos gramnegativos y se reduce por C. diphtheriae,
lo que da lugar a un color caracterstico gris a negro del agar que contiene telurita.
La degradacin de la cistena por la actividad cisteinasa de C. diphtheriae genera
un halo pardo alrededor de las colonias. El CTBA se puede almacenar mucho
tiempo (algo prctico en el caso de cultivos que se realizan con poca frecuencia),
pero inhibe algunas cepas de C. diphtheriae. El medio de cultivo Tinsdale es el
mejor para recuperar C. diphtheriae en muestras clnicas, pero se puede
almacenar poco tiempo y necesita suero de caballo (por lo que la mayor parte de
los laboratorios no lo emplean). El CNA se suele emplear en los laboratorios
clnicos, de forma que es una alternativa prctica como medio de cultivo.
Independientemente del medio de cultivo utilizado, todos los aislamientos que se
parezcan a C. diphtheriae deben ser identificados mediante pruebas bioqumicas y
se debe confirmar la presencia de exotoxina de la difteria.
Identificacin
La identificacin de sospecha de C. diphtheriae se puede realizar por la presencia
de cisteinasa y la ausencia de piracinamidasa (dos reacciones enzimticas que se
determinan con rapidez). Las pruebas bioqumicas ms amplias o la
secuenciacin de cidos nucleicos de los genes especfi cos de cada especie son
necesarias para reconocer la especie.
Pruebas de toxigenicidad
Todas las cepas de C. diphtheriae se deben analizar con respecto a la produccin
de exotoxina. Esto se ha hecho tradicionalmente mediante un anlisis de
inmunodifusin in vitro (prueba de Elek), un ensayo de neutralizacin de cultivo
tisular que emplea una antitoxina especfica. Actualmente, la mayora de los
laboratorios lleva a cabo una prueba modificada de Elek. Un mtodo alternativo de
deteccin de la toxina es la prueba de amplificacin de cidos nucleicos
desarrollada por los Centers for Disease Control and Prevention (CDC) de EE. UU.
Esta prueba es capaz de detectar el gen tox en cepas clnicas y directamente en
muestras clnicas (p. ej., los exudados de la membrana diftrica o el material de
biopsia). A pesar de la rapidez y,especifi cidad de esta prueba, las cepas
portadoras del gen tox no expresado (posiblemente porque se expresa el represor
de la toxina de la difteria) pueden obtener un resultado positivo. No se deben
pasar por alto las cepas no toxignicas de C. diphtheriae, ya que se pueden
asociar a diversas enfermedades con signifi cacin clnica, como la septicemia, la
endocarditis, la artritis sptica, la osteomielitis y la formacin de abscesos.
Tratamiento, prevencin y control
El aspecto ms importante del tratamiento de la difteria es la administracin
precoz de la antitoxina diftrica con el fi n de neutralizar de forma especfi ca la
exotoxina antes de que esta se una a la clula del organismo anfi trin. La muerte
celular es inevitable tras la internalizacin de la toxina. Se usa el tratamiento
antibitico con penicilina o con eritromicina para destruir las clulas de C.
diphtheriae e inhibir la produccin de exotoxina. Tambin es importante el reposo
en cama, el aislamiento para evitar una diseminacin secundaria y, en los
pacientes con difteria respiratoria, el mantenimiento de la permeabilidad de la va
area. La vacunacin con el toxoide es necesaria tras la recuperacin del
paciente, ya que un gran nmero de sujetos no logra fabricar anticuerpos
protectores con posterioridad a una infeccin natural. La difteria sintomtica se
puede prevenir mediante la vacunacin activa de las personas con toxoide
diftrico. El toxoide, no txico e inmunognico, se prepara tratando la toxina con
formalina. Inicialmente, los nios reciben cinco inyecciones de esta preparacin
con antgenos del ttanos y de la tos ferina (vacuna DPT) a los 2, 4, 6, 15 y 18
meses de vida, as como a los 4 y 6 aos. Despus de esta edad, se recomienda
la administracin de vacunaciones de recuerdo con el toxoide diftrico combinado
con el toxoide tetnico cada 10 aos. Se puede determinar la concentracin de
anticuerpos antitoxina srica por medio de una prueba de neutralizacin de piel de
conejo o clula Vero. Las personas que estn en contacto estrecho con pacientes
aquejados de difteria confi rmada presentan riesgo de padecer la enfermedad. Se
deben obtener muestras nasofarngeas para cultivo de todos los contactos
cercanos, e instaurar inmediatamente el tratamiento profi lctico con penicilina o
eritromicina. Cualquier contacto que no haya completado la serie de vacunaciones
frente a la difteria, o bien no haya recibido una dosis de recuerdo a lo largo de los
ltimos 5 aos, debe recibir una dosis de recuerdo del toxoide. Las personas
expuestas a la difteria cutnea se deben tratar del mismo modo que las expuestas
a la difteria respiratoria. Si la infeccin cutnea o respiratoria est producida por
una cepa no toxignica, no es necesario administrar profi laxis a los contactos.
Genero Listeria
Existen varias especies del gnero Listeria. De stas, L. monocytogenes es
importante como causa de un amplio espectro de enfermedades en animales y
seres humanos. L. monocytogenes es capaz de crecer y sobrevivir en una amplia
gama de condiciones ambientales. Puede sobrevivir a temperaturas de (4C),
bajo condiciones de pH bajo y condiciones de alto contenido de sal. Por tanto,
puede superar la preservacin de alimentos y las barreras de seguridad de
manera que es un microorganismo patgeno importante transmitido en los
alimentos.
Caractersticas morfolgicas e identificacin
L. monocytogenes es un bacilo corto, Gram positivo, no formador de esporas (fi g.
12-2). Produce catalasa y tiene una motilidad de extremo sobre extremo
tambaleante a una temperatura de 22 a 28C pero no de 37C; la prueba de
motilidad rpidamente diferencia a la Listeria de los difteroides que son miembros
de la microflora normal de la piel.
Caractersticas de cultivo y crecimiento
Listeria crece bien en medios como agar sangre de cordero al 5% en el cual
muestra la pequea zona caracterstica de hemlisis alrededor de las colonias y
por debajo de las mismas. El microorganismo es un anaerobio facultativo y
produce catalasa, hidrlisis de esculina y es mvil. Listeria produce cido pero no
gas por la utilizacin de diversos carbohidratos. La motilidad a una temperatura
ambiental y la produccin de hemolisina son caractersticas primordiales que
ayudan a diferenciar Listeria de las bacterias corineformes.
Clasificacin antignica
La clasificacin serolgica se lleva a cabo slo en los laboratorios de referencia y
se utiliza principalmente para los estudios epidemiolgicos. Los serotipos 1/2a,
1/2b y 4b constituyen ms del 95% de las cepas de seres humanos. El serotipo 4b
produce la mayor parte de los brotes epidmicos transmitidos en los alimentos.
Patogenia e inmunidad
L. monocytogenes entra en el cuerpo a travs del aparato digestivo tras la
ingestin de alimentos contaminados como quesos o verduras. El microorganismo
tiene varias protenas de adhesina que facilitan la fijacin de las bacterias a las
clulas hospedadoras y que contribuyen a la virulencia. Tiene una protena de
superficie de la pared celular denominada internalina A que interacta con la E-
caderina, un receptor en las clulas epiteliales, que favorece la fagocitosis hacia
las clulas epiteliales. Despus de la fagocitosis, la bacteria es envuelta en un
fagolisosoma, donde es activada por el pH bajo para producir listeriolisina O. Esta
enzima produce lisis de la membrana del fagolisosoma y permite que las listerias
escapen hacia el citoplasma de la clula epitelial. Los microorganismos proliferan
y ActA, otra protena de superfi cie de la listeria, activa la polimerizacin de la
actina de la clula anfi triona, lo cual las impulsa hacia la membrana celular.
Empujando la membrana de la clula hospedadora, produce la formacin de
protrusiones elongadas denominadas fi lpodos, que son ingeridos por clulas
epiteliales adyacentes, macrfagos y hepatocitos, las listerias son liberadas y el
ciclo comienza de nuevo. L. monocytogenes se puede mover de una clula a otra
sin estar expuesta a anticuerpos, complemento o clulas polimorfonucleares.
Shigella fl exneri y rickettsias tambin usurpan la actina y el sistema contrctil de
las clulas anfi trionas para diseminar sus infecciones. El hierro es un factor de
virulencia importante. Las listerias producen siderforos y pueden obtener hierro
de la transferrina. La inmunidad para L. monocytogenes es mediada
principalmente por clulas, segn se demuestra por la ubicacin intracelular de la
infeccin y por la notable relacin de la infeccin con los estados que cursan con
alteracin de la inmunidad mediada por clulas como el embarazo, sida, linfoma y
trasplante de rganos. La inmunidad puede ser transferida por los linfocitos
sensibilizados pero no por los anticuerpos.
Resumen de Listeria
Biologa, virulencia y enfermedades
Cocobacilos grampositivos que con frecuencia se disponen en parejas, por lo que
se parecen a los enterococos
Patgeno facultativo intracelular que puede evitar la eliminacin mediada por
anticuerpos
Las cepas virulentas producen factores de adhesin a la clula (internalinas),
hemolisinas (listeriolisina O, dos fosfolipasas C) y una protena que media en la
motilidad de la actina (ActA)
Capacidad de crecer a 4 C, lo que puede ocasionar elevadas concentraciones de
bacterias en los alimentos contaminados
Epidemiologa
Se asla de la tierra, el agua, la vegetacin y de varios animales, incluyendo al ser
humano (portadores gastrointestinales de bajo grado)
La enfermedad se asocia con el consumo de alimentos
contaminados (p. ej., queso no curado, leche, pavo, vegetales crudos
[especialmente repollo]) o con la diseminacin transplacentaria de la madre al
neonato; los casos espordicos y epidmicos ocurren durante todo el ao pero
tienen un mximo en los meses ms clidos
Los jvenes, los ancianos y las mujeres gestantes, as como los pacientes con
defectos de la inmunidad celular, tienen riesgo de padecer esta enfermedad
Diagnstico
La microscopia no es sensible; los cultivos requieren incubacin durante 2 o 3 das
o enriquecimiento a 4 C Mviles a temperatura ambiente, dbilmente -hemolticos
y capaces de crecer a 4 C y elevadas concentraciones de sal (caractersticas
tiles para la identifi cacin) Tratamiento, prevencin y control El tratamiento de
eleccin para la enfermedad grave es penicilina o ampicilina, sola o en
combinacin con gentamicina Las personas de riesgo deben evitar el consumo de
alimentos de origen animal crudos o parcialmente cocinados, quesos no curados y
verduras crudas sin lavar.
Genero Propionibacterium
Los bacilos Gram positivos que no forman esporas configuran un grupo
heterogneo de bacterias anaerobias facultativas o anaerobias estrictas que
colonizan la piel y las superficies mucosas. Actinomyces, Mobiluncus,
Lactobacillus y Propionibacterium son patgenos oportunistas bien conocidos,
mientras que los miembros de los gneros Bifi dobacterium y Eubacterium se
pueden aislar en las muestras clnicas pero rara vez causan enfermedad en el ser
humano.
Propionibacterium
Las propionibacterias son bacilos grampositivos pequeos que se disponen
generalmente en cadenas cortas o en agregados. Se suelen encontrar en la piel
(en contraposicin con Actinomyces), la conjuntiva, el odo externo, la bucofaringe
y el aparato genital femenino. Los microorganismos son anaerobios o
aerotolerantes, inmviles, catalasapositivos y capaces de fermentar carbohidratos,
produciendo como principal residuo cido propinico (de ah su nombre). Las dos
especies que se aslan con una frecuencia mayor son Propionibacterium acnes y
Propionibacterium propionicum.