MTODOS DE ESTERILIZACIN, MEDIOS DE CULTIVO Y MTODOS DE

SIEMBRA.

Objetivos:

Acondicionar los materiales a utilizar para su esterilizacin por medio fsico

de calor hmedo.
Clasificar, preparar los medios de cultivo en la prctica microbiolgica.
Aplicar los diferentes mtodos de siembra para obtener bacterias bien
aisladas.

INTRODUCCIN.
Leer ms: http://www.monografias.com/trabajos89/limpieza-desinfeccion-materiales-laboratorio-
clinico/limpieza-desinfeccion-materiales-laboratorio-clinico.shtml#ixzz4lnFtbreT
En el laboratorio es bsico contar con conocimientos elementales para la seguridad
personal como del laboratorio, la desinfeccin y esterilizacin de los materiales a
trabajar. Durante el trabajo que se realizan en el laboratorio se manipulan muestras
e instrumentos, que pueden contener agentes infecciosos, que se deben eliminar al
descartar los envases respectivos. As mismo algunos materiales del laboratorio,
necesitan de una limpieza y esterilizacin apropiada, tal que puedan ser utilizados
posteriormente.

Se define como esterilizacin aquellos procedimientos que permiten la eliminacin

de todas las formas de vida ubicadas sobre objetos inanimados, con la cual se logra
destruir las formas vegetativas y esporas de los microorganismos, obtenindose
como consecuencia la proteccin antibacteriana total de todos los instrumentos y
materiales (R.Nardys & Cloy, 2009). La esterilizacin es un proceso a travs del
que se logra la destruccin total de los microorganismos viables presentes en un
determinado material. Este procedimiento es de gran utilidad ya que existen
muchos procesos que requieren la utilizacin de materiales estriles. Entre stos
podemos destacar:

El acondicionamiento del material (pipetas, tubos, placas de Petri, pinzas, etc.)

que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiologa.

La preparacin de medios de cultivo que sern empleados con diferentes

propsitos (cultivo de microorganismos, control de ambiente, etc.)

La descontaminacin de material utilizado.

MARCO TERICO.

La limpieza consiste en eliminar todo agente contaminante sea de; materia orgnica
tierra y manchas. Esta limpieza incluye el cepillado, la aspiracin, el lavado con un
pao y agua con jabn o detergente. El no lavar, desinfectar o esterilizar
correctamente el material, se convierte en un factor de error grande, ya que el
material contaminado puede albergar microorganismos e interferir con la accin de
los descontaminantes (antispticos, germicidas qumicos y desinfectantes). La
limpieza previa es importante para una correcta desinfeccin, ya que muchos
productos germicidas solo son activos sobre el material previamente limpio. La
limpieza se realiza para evitar la exposicin a agentes infecciosos.

Existen diversos mtodos de esterilizacin. La seleccin del mtodo a aplicar en

cada caso est determinada por el tipo de producto a esterilizar.

MTODOS

QUMICOS FSICOS

Formaldehido Calor seco

Compuestos Calor
clorados hmedo

Alcohol 70o Limpieza

Los mtodos de esterilizacin ms utilizados son: Calor Hmedo o Autoclave,

Chemiclave o vapor qumico, Calor seco intenso, sustancias qumicas esterilizantes.
A nivel industrial existe la esterilizacin por radiacin. Para escoger un mtodo de
esterilizacin se debe de tener en cuenta los siguientes factores:

1. De fcil operacin: escoger el mtodo de esterilizacin menos complicado en

el manejo.

2. Un sistema econmico: que se adapte a las necesidades pero seguro para

la manipulacin y seguridad del estudiante.
 3. Seguridad: es decir, que en el instrumental no quede ningn residuo
contaminante en el equipo, que el utilizar el mtodo no le produzca ningn
perjuicio.

4. Confiable: que se tenga la certeza de que el mtodo de esterilizacin

empleado destruya todo los agentes contaminantes.

Todo instrumento antes de ser sometido al proceso de esterilizacin debe de estar

completamente seco, previamente desinfectado, si tienen contenido de humedad,
debe de quitarse con un papel absorbente o utilizar toallas de papel desechable.

AUTOCLAVE.

La alta temperatura combinada con un alto grado de humedad es un mtodo

efectivo para destruir microorganismos. Hay que distinguir entre calor hmedo y
calor seco.

El hmedo destruye los microorganismos porque coagula sus protenas siendo ms

rpido y efectivo que el calor seco que los destruye al oxidar sus constituyentes
qumicos. La muerte de las bacterias por el calor es consecuencia de la
desnaturalizacin de sus protenas (Accin del calor seco y el calor hmedo en los
microorganismos, n.d.).

Autoclave de vapor de agua:

Se realiza la esterilizacin por el vapor de agua a presin. Esteriliza a 120C a una

atmsfera de presin (estas condiciones pueden variar) y se deja el material durante
20 a 30 minutos una vez se alcance la temperatura de 120oC, aproximadamente en
1 hora.

Llama directa:

ste mtodo consiste en colocar el material directamente al fuego hasta que ste
se ponga al rojo vivo. De esta forma se queman los contaminantes hasta reducirlos
a ceniza. Su eficacia depende de la calidad de la llama. Procedimiento sencillo que
se realiza en los laboratorios de microbiologa para esterilizar el asa o el filamento
con la llama del mechero.

MATERIALES EQUIPOS

Cajas de Petri de vidrio Autoclave u olla presin

Erlenmeyerde 250 ml Mechero de alcohol

Papel peridico de envoltura

 Pipetas de 1 ml, 5 ml, 10 ml

Tubos de ensayo con y sin tapn

PROCEDIMIENTO.

Lavar previamente el material que se va a esterilizar.

Envolver el material de vidrio en papel peridico.
Colocar el material que se va a esterilizar en el autoclave (olla presin)
Iniciar el cronmetro por un perodo de 1 hora.
Luego de 1 hora en el autoclave, apagar y dejar enfriar, para abrir y permitir
por unos segundos que el vapor salga de la cmara y poder sacar el
material que se esteriliza, para su posterior utilizacin.

OBSERVACIONES Y ANLISIS.

Describir el procedimiento de esterilizacin, sacar conclusiones basadas en las

lecturas propuestas en el blog (Botero, Castao, Saldarriaga, & M., 2013)

Elaborar informe.

BIBLIOGRAFA.

ACCIN DEL CALOR SECO Y EL CALOR HMEDO EN LOS

MICROORGANISMOS. (n.d.). Retrieved from
file:///C:/Users/PC/Downloads/236093759-Accion-Del-Calor-Seco-y-El-Calor-
Humedo-en-Los-Microorganismos.pdf
Botero, O. M. J., Castao, Z. J., Saldarriaga, C. A., & M., C. T. A. (2013). Manual
prctico de bacteriologa vegetal. (C. C. A. Jaramillo, Ed.) (1era edici).
Manizales - Colombia.
R.Nardys, R., & Cloy, E. (2009). Mtodos de Desinfeccin, Esterilizacin y
Barreras de Proteccin. Nicaragua. Retrieved from
file:///C:/Users/ACER/Desktop/MANUALES DE LABORATORIO/esterilizacin
1.pdf