UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN DE TACNA

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

Escuela Profesional de Ingeniera Pesquera
CATEDRA : BIOLOGIA PESQUERA I
PROFESOR : Blgo. Pesq. NELVER CORONEL FLORES.

PRACTICA N 07:
OBSERVACION DE CELULAS ANIMALES
I. OBJETIVOS

Realizar observaciones de distintos tipos de clulas animales mediante microscopa ptica.

Ejercitar la preparacin de muestras para la observacin.
Reconocer las estructuras celulares visibles con el microscopio ptico compuesto.
Relacionar la estructura con la funcin de cada una de las partes constituyentes de la clula.
Determinar el tamao de algunas clulas y organelos.
Adquirir prctica en el empleo del microscopio ptico y en el clculo de los aumentos de
observacin
Registrar las observaciones mediante esquemas y comparar con microfotografas.

II. OBSERVACIONES

A. OBSERVACIN DE CELULAS DE LA MUCOSA BUCAL

Fundamento
La cavidad bucal, como toda cavidad en contacto con el exterior, est tapizada por una
membrana de superficie hmeda, llamada mucosa bucal.

Materiales: Microscopio, Palillos de madera, Portaobjetos, Cubreobjetos, Azul de metileno,

Mechero de alcohol, Agua destilada, Pinzas de madera, Vidrio de reloj.

Material biolgico: Mucosa bucal humana.

Procedimiento:

1. Raspamos con un palillo la mucosa interna de la mejilla de la boca de un voluntario,

depositando el producto extrado en el centro de un portaobjetos con una gota de agua.

2. Realizamos una extensin ms o menos uniforme, con la ayuda de una aguja u otro
porta y, con ayuda de unas pinzas de madera, calentamos suavemente el portaobjetos,
pasndolo por la llama del mechero hasta la desecacin de la extensin. As queda
fijada al porta.

3. Colocamos el portaobjetos sobre el vidrio de reloj y aadimos unas gotas de azul de

metileno sobre la extensin.

4. Despus de teir durante dos minutos, lavamos con agua destilada, ayudndonos del
frasco lavador.

5. Retiramos el exceso de agua con un poco de papel secante, dejando que empape el
agua, sin arrastrar.

6. Colocamos la muestra preparada en la platina del microscopio.

Observacin al microscopio

Observamos clulas de origen animal de forma ameboide, con sus respectivos ncleos.
Alrededor de ellos se ve el citoplasma, ms claramente teido, y la membrana que las rodea
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Biolog. Pesq. I. Prct. 07: Observacin de Clulas Animales Prof. Nelver Coronel Flores
 en tono ms oscuro.

Resultados

Habiendo visto clulas de tejido vegetal y, ahora, de tejido animal, podemos resolver que las
clulas animales son de menor tamao que las vegetales. Su forma es desigual, mientras
que una clula vegetal tiene forma polidrica. Tambin podemos apreciar, que la membrana
celular de la mucosa, se ve menos intensa que la pared celular de la clula vegetal.

Hacer esquemas o dibujos de las observaciones.

Sealar mediante flechas los nombres de las partes que se identifican
Sealar el aumento con el cual se observa el preparado a travs del microscopio.

B. OBSERVACIN MICROSCPICA DE CELULAS SANGUINEAS

Fundamento:

En la mayora de laboratorios, el colorante ms empleado para la tincin hematolgica es el

colorante policromtico de Wright, que se basa en el de Romanowsky. Una tincin de
Romanowsky consiste en azul de metileno y sus productos de oxidacin, as como eosina .
La accin combinada de estos colorantes produce el efecto de Romanowsky y da una
coloracin purprica a los ncleos de los leucocitos y a los grnulos neutrfilos y de color
rosado a los eritrocitos.

Materiales: Microscopio, Portaobjetos, Cubreobjetos, Mechero de alcohol, Algodn, Alcohol,

Lanceta estril, Soporte y cubeta de tincin, Frasco lavador, Alcohol absoluto, Unas gotas de
sangre humana, Colorante de Wright.

Procedimiento:

1. Con la lanceta estril realizar una puncin en el dedo pulgar.

2. Depositar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos.

3. Colocar un portaobjetos como indica el dibujo y deslizarlo sobre toda la superficie del
porta de manera que se pueda obtener una fina pelcula de sangre. El porta absorbe la
gota y la arrastra, pero sin pasar nunca por encima de ella para no daar los hemates.

4. Colocar el frotis de sangre sobre la cubeta de tincin y aadir unas gotas de alcohol
absoluto y dejar que el alcohol se evapore para fijar la preparacin.

5. Cubrir toda la superficie de la preparacin con el colorante Wright. Esperar 3 - 5

minutos. Evitar la desecacin del colorante agregando ms lquido.

6. Agregar un volumen igual de solucin amortiguadora (pH 6.4) o en su defecto agua de

grifo con resultados igualmente buenos. La cantidad de agua o buffer debe ser
suficiente para cubrir la lmina completamente, pero no en exceso que caiga a la
cubeta.

7. Volver a lavar hasta que no queden restos de colorante.

8. Dejar secar aireando el porta o bien al calor muy lento de la llama del mechero.

9. Observar al microscopio.

Observacin microscpica:

Al microscopio se vern con un dominio predominante los glbulos rojos, hemates o

eritrocitos teidos de color rojo por la eosina. No tienen ncleo y son ms delgados por el
centro que por los bordes.

Los glbulos blancos o leucocitos se identifican fcilmente por la presencia de ncleo, teido
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 de morado por la hematoxilina. Hay varias clases de leucocitos:

1. Linfocitos: de tamao aproximado al de los glbulos rojos, tienen un solo ncleo que
ocupa casi todo el glbulo.

2. Monocitos: son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, ncleo grande,
redondo, son los ms mviles y su funcin principal es la fagocitosis.

3. Polimorfonucleares: ncleo fragmentado o arrosariado. Pueden ser eosinfilos, con

abundantes granulaciones teidas de rojo por la eosina, neutrfilos y basfilos.

4. Las plaquetas no son visibles ya que precisan una tcnica especial de tincin.

Resultados

Una tincin satisfactoria debe dar los siguientes resultados:

En la extensin predominan los glbulos rojos, hemates o eritrocitos, teidos de color rojo.
Son ms delgados por el centro que por los bordes. Los de mamferos no poseen ncleo
pero los del resto de los animales si lo tienen.

Los glbulos blancos o leucocitos se identifican fcilmente por la presencia del ncleo.
Hay dos clases de leucocitos:

A) Granulocitos o Polimorfonucleares: con ncleo fragmentado o arrosariado y

granulaciones en el citoplasma. Se dividen en:

- Neutrfilos : con granulaciones de color salmn. Con ncleo multilobulado.

- Eosinfilos : con granulaciones abundantes teidas en rojo. Con ncleo bilobulado.
- Basfilos: con granulaciones violetas que eclipsan al ncleo bilobulado.

B) Agranulocitos: sin granulaciones en el citoplasma. Se dividen en:

- Linfocitos : con un solo ncleo que ocupa casi toda la clula de manera que solo se
observa un pequeo anillo de citoplasma.
- Monocitos : son los de mayor tamao y poco frecuentes, ncleo bilobulado y
excntrico, son los ms mviles y su funcin principal es la fagocitosis.
Las plaquetas son fragmentos de clulas que participan en la coagulacin.

Todo este conjunto de clulas constituye el tejido sanguneo.

C. OBSERVACIN DE HONGOS: MOHO DEL PAN Y DE LA FRUTA

Objetivos de la Prctica
Estudio de hongos descomponedores de alimentos:

Fundamento Terico
Dentro de este grupo, los gneros ms importantes son Mucor, Rhizopus y Penicilium que se
localizan sobre alimentos, materia orgnica en descomposicin, etc. El primero de ellos da
lugar al llamado moho blanco del pan, el segundo al moho negro del pan y el ltimo al moho
azulado.

Materiales
Microscopio compuesto y lupa binocular, Portaobjetos y cubreobjetos, Pinzas y palillos,
Placa de Petri, Cuentagotas, Lactofenol (opcional), Material Biolgico: Cultivo de moho del
pan.

Procedimiento:

Cultivo del moho:

1. Introduce en una placa de Petri una rebanada de pan humedecida abundantemente con
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 agua y deja la placa abierta durante un da para que se contamine.
2. Pasado ese tiempo, vuelve a humedecerla con agua y tapa la caja de Petri.
3. Mantn el cultivo en reposo a temperatura ambiente durante 3 o 5 das, hasta la
siguiente sesin de laboratorio. Aparecer el moho sobre el pan. En un primer momento
se deposita sobre el pan y la fruta las esporas microscpicas presentes en el aire. Al
encontrar las condiciones de humedad apropiadas, germinan.

Observacin con la lupa binocular

1. Destapa la caja de Petri y colcala bajo la lupa binocular. Recorre todo el cultivo
detenidamente y fijndote en el aparato vegetativo (micelio) y en los rganos de
reproduccin asexual (esporangios); los encontrars en diferentes etapas de
maduracin.
2. Vers que el hongo est formado por unos filamentos llamados hifas y cuyo conjunto
forma el micelio. Observa que las hifas ms viejas presentan en sus extremos unas
bolitas muy negras, que son los aparatos reproductores, llamados esporangios, y en
cuyo interior se encuentran las esporas.
3. Observa tambin el moho blanco y moho azulado. Realiza un dibujo de los tipos de
hongos observados.

Observacin con el microscopio

1. Deposita en el centro del portaobjetos una gota de lactofenol (opcional, sirve como
liquido de soporte), sino dispones de lactofenol, coloca unas gotitas de agua y extiende
en su seno un trozo de micelio que contenga esporangios (con ayuda de las pinzas).
2. Coloca el cubreobjetos despus, procurando que no quede ninguna burbuja de aire.
3. Observa la muestra al microscopio con diferentes aumentos y recorrindola en toda su
extensin. Observars las hifas a modo de pequeos tubos, sin tabiques de separacin y
con numerosos ncleos esparcidos en el citoplasma comn (hifas sifonadas). En el
extremo de algunas hifas aparece un engrosamiento (columnilla) rodeado del
esporangio, en cuyo interior se hallan las esporas.

Anlisis y discusin de los resultados

1. Haz un dibujo coloreado de todo lo que hayas observado, indicando el nombre de las
partes que diferencies (gnero del hongo, tipo de hifa, esporangio y esporas).
2. Haz un esquema del ciclo biolgico del moho del pan.
3. Describe el aparato vegetativo de los hongos.

CUESTIONARIO

1. Qu forma tienen las clulas sanguneas humanas?.

2. De qu color aparece teido el ncleo de los leucocitos?
3. Qu forma tienen los glbulos rojos? Tienen ncleo?
4. Busca informacin sobre la funcin que tienen cada uno de los componentes celulares de la
sangre.
5. Por qu cree usted que el hombre tiene un nmero mayor de eritrocitos por mm3 de sangre
que la mujer?. Explique
6. Cul es la razn por la cual durante una infeccin se incrementa el nmero de leucocitos
en la sangre?.
7. Qu diferencia nota entre los eritrocitos y los leucocitos humanos?.
8. Por qu se considera a la sangre un tejido; y en qu tipo de tejido se ubica?.
9. Qu forma presentan las clulas epiteliales de la mucosa bucal?.
10. Ocurre algo por comer los mohos del pan?
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Tacna, 13 de junio del 2017.

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