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GOTA GRUESA

1. OBJETIVO
Preparar una muestra de sangre para su estudio microscpico, comprobando la
presencia o ausencia de parsitos hematolgicos en ella, durante el proceso de
observacin.
2. FUNDAMENTO
La preparacin de gota gruesa es un tipo de tcnica que se utiliza para el estudio de
parasitosis en sangre, como las distintas especies de Plasmodium, responsables de la
Malaria o Paludismo, y para la identificacin de distintas especies de Trypanosoma (T.
gambiense y T. rhodesiense, responsables de la enfermedad del sueo o
tripanosomiosis africana; T. cruzi, agente responsable de la enfermedad de Chagas).
Los procedimientos especficos usados para diagnosticar los parsitos comunes de los
tejidos pueden resumirse en el siguiente cuadro:

Existen ms de 150 especies de Plasmodium que infectan diferentes vertebrados, pero


solamente cuatro (P. falciparum, P. vivax, P. ovale y P. malariae) infectan al hombre. Las
dos especies ms comunes son:
P. falciparum
P. vivax
La malaria es trasmitida por la picadura de mosquitos del gnero Anopheles infectados
con Plasmodium.
El ciclo vital de los plasmodios es complejo, pero lo vamos a resumir en el siguiente
esquema:

Cuando estudiamos muestras sanguneas con un microscopio ptico de forma rutinaria,


se hace una preparacin de gota gruesa y otra en forma de extensin fina en el mismo
porta.
La extensin fina se realiza para confirmar un diagnstico de malaria, prestando
atencin en los hemates infectados y en los parsitos que hay dentro de ellos.
La gota gruesa se observa la morfologa de los parsitos, ya que son ms abundante
que en la extensin y ms compactos.
3. MATERIALES NECESARIOS
2 portaobjetos.
Microscopio ptico.
Muestra sangunea (propia o donada).
Colorante Giemsa al 3% en agua destilada.
4. DESARROLLO DE LA PRCTICA
Obtenemos un poco de sangre.
Colocamos una gota de la muestra, con ayuda de una pipeta pasteur, en el
centro de un portaobjetos.
A la derecha de esta, colocamos tres gotas un poco ms grandes,
aproximadamente a 1cm de distancia de la gota central.

Realizamos una extensin con la gota central, con ayuda de otro


portaobjetos.

Con una esquina del portaobjetos extensor, mezclamos las tres gotas de
sangre restantes, de manera que formen una capa gruesa uniforme.

Cuando la extensin est seca la fijamos con metanol, dejndola actuar


durante aproximadamente un minuto.
Una vez fijada la extensin, dejamos secar la muestra hasta el da siguiente,
pues la gota gruesa necesita 24 horas para su procesado.
Una vez transcurridas las 24 horas, colocamos un puente de tincin sobre un
cristalizador, ponemos los portas con las muestras encima y aadimos
Giemsa al 3%, el cual dejamos actuar de 30 a 45 minutos.
1. Para finalizar, desechamos el exceso de colorante y retiramos con ayuda de agua
destilada el que quede por encima de la preparacin. Lavamos hasta que deje de
salir agua con colorante.
2. El porta se deja secar de forma vertical y listo para el estudio microscpico.

5. RESULTADO
La muestra de sangre tratada no presenta ningn parsito visible y se observa lisis
celular.

6. VALORACIN DE LOS RESULTADOS


La extensin es vlida, pero la muestra de gota gruesa no. El individuo al que
pertenece la sangre debe ser considerado como: No infestado por Plasmodium.

7. OBSERVACIONES
En la gota gruesa no se puede realizar el estudio, pues las clulas sanguneas se ven
apelmazadas y muy oscuras por la tincin.
En general, la preparacin completa, frotis y gota gruesa, no ha dado buenos
resultados, posiblemente a causa de un mal proceso de tincin.

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