ROLUL METABOLIC AL PIRUVATULUI

Acidul piruvic format n urma glicolizei este dirijat spre ciclul Krebs prin
intermediul a dou enzime:
- piruvat-carboxilaza care catalizraz reacia de formare a oxalacetatului
- piruvat-dehidrogenaza care catalizeaz sinteza acetil-CoA
Piruvatul este un nod metabolic pentru c poate urma ci de transformare
diferite. Se pot obine intermediari principali ai unor ci metabolice majore.
Conversia n acetil-CoA sub aciunea piruvat-dehidrogenazei
Conversia n oxalacetat sub aciunea piruvat-carboxilazei
Conversia n lactat sub aciunea lactat-dehidrogezazei
Transformarea n alanin sub aciunea alanin-aminotransferaza
Modul de utilizare a piruvatului citoplasmatic depinde de necesitile
organismului i de particularitile metabolice tisulare:
- n perioadele interalimentare, piruvatul este dirijat spre gluconeogenez;
- n perioadele post-prandiale, piruvatul este dirijat spre biosinteza acizilor
grai
- n celulele aerobe piruvatul este convertit n acetil-CoA n vederea
producerii de energie;
- n celulele anaerobe, piruvatul este transformat n lactat care este exportat n
circulaie i este captata n special de ficat.
Reacia de decarboxilare oxidativ a piruvatului n acetil-CoA este un proces
foarte complex catalizat de un ansamblu de 3 enzime i 5 co-enzime diferite
(complex multienzimatic).
Reaciile care au loc sunt: piruvat-dehidrogenaza (E1) catalizeaz
decarboxilarea acidului piruvic alturi de coenzima TPP. Se formeaz CO 2 i
dihidroxietil-tiamin pirofosfat (HE-TPP) care reacioneaz direct cu gruparea
prostetic lipoamid a dihidro-lipoil-transacetilaza (E2). E2 este format din acid
lipoic i un rest de lizin (legate printr-o legtur amidic). Se prezint sub forma
disulfuric capabil s oxideze i s fixeze fragmentul care conine cei 2 atomi de

1
carbon de HE-TPP sub form de acetil-lipoamid. Apoi este transferat gruparea
acetil pe CoA. Se formeaz acetil-CoA i o lipoamid dehidrogenat. Aceasta
interacioneaz cu coenzima FAD a enzimei dihidrolipoil-dehidrogenaza (E3) i se
formeaz FADH2 i lipoamida n form disulfurat. n final E3-FADH 2 reduce
NAD+ la NADH.

Produii de reacie nu difuzeaz, ei sunt preluai de enzima urmtoare din

cadrul complexului multienzimatic.
Decarboxilarea piruvatului n acetil-CoA este o reacie ireversibil. Ea este
strict controlat de produii de reacie: E2 este inhibat de aceti-CoA iar E3 este
inhibat de NADH.

2
 LANUL RESPIRATOR MITOCONDRIAL
Reprezint un ansamblu de reacii localizate n membrana intern
mitocondrial unde se gsesc transportorii de electroni. Produii finali sunt ATP i
ap.
Lanul respirator mitocondrial este format din 2 etape distincte:
- lanul transportor de electroni un lan de reacii de oxido-reducere = respiraia
celular
- fosforilarea ADP la ATP
Cele dou ansambluri de reacii formeaz fosforilarea oxidativ.
Din punct de vedere funcional, lanul transportor de electroni este format
dintr-o succesiune de sisteme (reacii) de oxidoreducere. Fiecare sistem poate
exista ntr-o form redus i ntr-o form oxidat, trecerea de la o form la alta
corespunde fluxului de electroni i/sau protoni. Fiecare element aflat n form
oxidat preia echivalenii reductori de la vecinul su anterior, este transformat n
forma redus i cedeaz echivalenii reductori vecinului urmtor, aflat n form
oxidat.

3
 Substraturile principale ale LRM (lan respirator mitocondrial) sunt NADH
+ H+ i FADH2. Oxigenul molecular provine din aerul inspirat (respiraie
circulaie sanguin difuziune n esuturile periferice).
Moleculele de FADH2 sunt localizate intramitocondrial. Sursele de FADH 2
sunt:
oxidarea glicerol-3-fosfat la dihidroxi-aceton-fosfat din cadrul navetei
glicerol-3-fosfat
oxidarea succinatului n fumarat catalizat de succinat-dehidrogenaza,
enzim care aparine ciclului Krebs dar i complexului II al LCR.
Oxidarea acil-CoA din cadrul -oxidrii acizilor grai
Moleculele de NADH + H+ sunt localizate intramitocondrial sau n citosol
(transport intramitocondrial prin intermediul navetelor mitocondriale).
Surse mitocondriale de NADH + H+ :
Ciclul Krebs = cea mai important surs
Oxidarea piruvatului sub aciunea piruvat-dehidrogenazei
Catabolismul lipidelor
Catabolismul corpilor cetonici
Catabolismul proteinelor
Catabolismul alcoolului

Surse citoplasmatice de NADH + H+

oxidarea fosfo-gliceraldehidei n cursul glicolizei

4
 conversia lactatului n piruvat
oxidarea alcoolului
Lanul transportor de electroni este format din 4 complexe enzimatice fixe
(complexele I, II, III, IV) i 2 transportori mobili (coenzima Q i citocromul c).

Complexul I este format din NADH-dehidrogenaza (coenzim FMN) i de

multiple proteine cu ier i sulf, denumite centre Fe-S. Este format din 25 de
subuniti.
Oxideaz NADH + H+ la NAD reducnd n acelai timp coenzima Q
(ubichinona) la coenzima QH2. Protonii sunt pompai din matricea mitocondrial n
spaiul intermembranar.
Complexul II este format din succinat-dehidrogenaza (coenzim FAD) i din
proteine cu fier i sulf. Conine 4 subuniti.
Oxideaz succinatul la fumarat i reduce coenzima Q (ubichinona) la
coenzima QH2.
Complexul III este format din ubichinon-citocrom c reductaza citocrom b.
Conine 9 10 subuniti.
Transfer 2 electroni de la coenzima QH2 la citocromii c antrennd
reoxidarea coenzimei QH2 la Coenzima Q, care transfer 2 protoni prin membran.
Complexul IV (citocrom c oxidaza) este format din citocromii a i a 3 precum i
din ioni de Cu i Zn. Conine 13 subuniti.

5
 Transfer electronii de la citocromul c la oxigenul molecular i rezult ap.
Protonii traverseaz membrana mitocondrial.
Coenzima Q este o molecul lipidic de dimensiuni mici, solubil n stratul
fosfolipidic al membranei interne mitocondriale, unde se deplaseaz liber.
Citocromul c este o protein mobil dispus pe faa extern a membranei interne
mitocondriale.
Aceste elemente au rolul de a separa i de a transporta electronii i protonii
provenii de la cele dou substraturi formndu-se un gradient de protoni ntre
matrice mitocondrial i spaiul intermembranar.
Deoarece membrana intern mitocondrial este impermeabil pentru protoni,
disiparea gradientului format este posibil numai prin trecerea protonilor la nivelul
unui por din structura membranei interne. Acesta constituie ATP-sintetaza
mitocondrial (11 subuniti). ATP-sintetaza, numit i complexul V, utilizeaz
gradientul electric pentru sinteza de ATP.
Reaciile pot fi sintetizate astfel:

Moleculele de ATP prsesc matricea mitocondrial prin intermediul

transportorului ATP/ADP-translocaza care determin intrarea ADP n mitocondrie.

6
Bilanul energetic
LRM nu este o cale metabolic izolat, ci funcioneaz ca etap final a
principalelor ci de catabolism n vederea recuperrii energiei chimice a
substraturilor oxidate i conversia acesteia ntr-o form uor disponibil, ATP.
- glicoliza ... fosforilarea oxidativ produce 36 38 moli de ATP
- betaoxidarea palmitatului ... fosforilarea oxidativ produce 129 moli de ATP
- oxidarea corpilor cetonici (acetoacetat, beta-hidroxi-butirat) ... fosforilarea
oxidativ produce 23, respectiv 26 moli de ATP
- catabolismul glutaminei ... fosforilarea oxidativ produce 24 moli de ATP
Reglarea lanului respirator mitocondrial
1. Ageni reglatori
Reglarea LRM depinde de:
- necesitile energetice ale celulei
- de disponibilitatea substraturilor
- de concentraia de oxigen
- de necesitile termoenergetice ale organismului
Necesitile energetice celulare sunt semnalate de concentraia ADP care
crete imediat dup utilizarea intens a ATP. Are loc activarea enzimelor din LRM.
Acumularea de ATP ncetinete oxidrile celulare.
2. Inhibitori ai LRM
complexul Inhibitori
Complexul I Barbiturice, rotenonei, deficit de B2,
radicali liberi
Complexul II Malonat, deficit de B2
Complexul III Antimicina A, myxothiazol, radicali
liberi
Complexul IV CO, CN-
Complexul V Oligomicina, compui cu As
Coenzima Q Doxorubicina, radicalii liberi
Citocromul c Deficit de Fe i Cu, ischemie tisular,
CN-, CO

7
3. Decuplani ai LRM
Moleculele care mpiedic formarea gradientului de protoni se numesc
ageni decuplani. Acetia sunt transportori de protoni la nivelul membranei interne
mitocondriale care mpiedic formarea gradientului electrochimic. Are loc
decuplarea celor dou pari (lanul transportor de electroni i fosforilarea ADP la
ATP). Deci agenii decuplani mpiedic recuperarea energiei i antreneaz o
accelerare a lanului transportor de electroni.
Exemple de ageni decuplani:
- 2,4-dinitrofenolul
- fenil-hidrazonele
- arseniat
- hormonii tiroidieni
- anumite antibiotice
- dicumarolul (anticoagulant)
- termogenina.
Termogenina este o protein decuplant sintetizat sub aciunea
noradrenalinei la nivelul terminaiilor nervoase n esutul adipos brun dezvoltat n
special la nou-nscut sau la mamiferele care hiberneaz. Sub aciunea frigului
eliberarea termogeninei duce la consumarea energiei LRM pentru producerea de
cldur.
Efectul calorigen al hormonilor tiroidieni este datorat scurt-circuitrii ATP-
sintetazei, ca urmare a modificrii permeabilitii membranare pentru protoni, ceea
ce mpiedic formarea gradientului elecrochimic.