Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Finalmente, los chorros se pueden combinar con dispositivos mecnicos de dis persin
con el fin de aumentar la dispersin del gas. Este mtodo se emplea en el diseo de las
boquillas de flujo radial que se utilizan en algunas aplicaciones a gran escala destinadas
al tratamiento de aguas residuales, como por ejemplo los reactores BIOHOCH de
Hoechst32,45. En este diseo, un chorro vertical ascendente de lquido choca con un disco
desde cuyo centro se dispersa el aire. Para mejorar la circulacin del lquido, estas
boquillas radiales se colocan dentro de los tubos de corriente en el interior del reactor.
Cuando se utilizan chorros, la localizacin del chorro y la configuracin de! depsito
sern de gran importancia en el diseo global. Por ejemplo, la empresa BASF utiliza un
gran nmero de chorros de dos fases (de 40 a 56) para dispersar e! aire dentro de unos
tanques de aireacin de 125 m de largo, 20 m de ancho y 5 m de profundidad, con unas
eficiencias de transferencia de oxgeno en tomo a 1,5- 1,6 kg 0 2/kWh4L4S. Tambin se
usan otras configuraciones, en las cuales las boquillas se encuentran reunidas en grupos
de cuatro sobre el fondo de tanque de
86
Biorreactores de bucle
Los biorreactores de bucle son tan slo reactores de flujo pistn con recircua- cin. Sin
embargo, el trmino reactor de bucle se refiere por lo general a los reac tores con una
tasa de recirculacin mucho mayor que la tasa de afluente. En estos reactores, el lquido
se mueve fundamentalmente en un circuito movido por una bomba localizada en la lnea
de recirculacin. En el tratamiento de aguas residua- les, los canales de oxidacin son
un buen ejemplo de reactores de bucle (vase ms adelante Canales de oxidacin).
Las lagunas aireadas son similares a las lagunas aerobias descritas anteriormente, con la
diferencia de que las lagunas aireadas vienen provistas de aireadores superfi ciales que
promocionan la transferencia de oxgeno y mantienen las condiciones aerobias en toda la
laguna. Histricamente, las lagunas aireadas tienen una profun didad de entre 2 y 5 m.
Estos valores son significativamente mayores que los presen tados por las lagunas no
aireadas, ya que el sistema de agitacin est diseado para transferir suficiente oxgeno
y proporcionar un poder de mezcla capaces de asegurar las condiciones aerobias incluso
en el fondo de la laguna, adems de lograr la sus pensin completa de los slidos
mantenindolos fuera del fondo de la laguna 1314 .
La energa mecnica requerida por el sistema de agitacin para alcanzar estos
objetivos es bastante importante (normalmente del orden de 3 a 4 kW/m 5 ), Sin embargo,
existen lagunas cuyos agitadores se disean especficamente para entre gar una menor
cantidad de energa. En consecuencia, estas lagunas no se encuen tran bien mezcladas.
Por ello, operan aerobiamente en casi toda su profundidad pero mantienen condiciones
anaerobias en el fondo, donde se acumula la biomasa aerobia (fangos) que se
descompondr anaerobiamente. Estas lagunas se denomi nan lagunas facultativas y se
tratarn ms adelante en la seccin sobre sistemas anaerobios-aerobios mezclados.
Desde un punto de vista microbiolgico, las lagunas bien aireadas y completa : mente
aerobias operan de_forma similar-al proceso defangos activados que se des cribe"
continuacin, en el cual los organismos aerobios se alimentan del material orgnico y
crean flculos microbianos. Sin embargo, al contrario que en el proce so de fangos
activados, muchas lagunas aerobias operan generalmente como un sistema de flujo
continuo de paso nico sin recirculacin. Esto quiere decir que la densidad de la biomasa
normalmente es baja (0,05 gramos de biomasa seca por litro) 32 , y que el efluente de la
laguna contiene flculos microbianos que han de ser separados antes del vertido de las
aguas residuales tratadas. Por todas estas razones, las lagunas aerobias generalmente
forman parte de un sistema de lagunas. En estos sistemas, a la laguna aerobia le sigue
una laguna facultativa y/o una laguna de sedimentacin donde los fangos aerobios son
parcialmente descompuestos o sedimentados. Algunas lagunas aireadas se operan incluso
con un flujo de recirculacin, mediante el cual los fangos aerobios se recrculan
parcialmente desde una instalacin de sedimentacin localizada despus de la laguna 9 .
Estos sistemas, por lo tanto, se operan de forma idntica al proceso de fangos activados.
Como las lagunas aireadas, las lagunas aerobias pueden verse afectadas de for ma
importante por las variaciones diarias y estacionales de temperatura, que pue den tener
efectos diversos sobre la poblacin microbiana y su capacidad para se parar
contaminantes.
El efluente del reactor aireado, que contiene una cantidad importante de bio masa.
va a un tanque de sedimentacin o decantador (separador de fangos), un dispositivo
capaz de separar el sobrenadante claro de la biomasa. El sobrenadante se lleva a un
proceso de tratamiento final (si es necesario) o se vierte. La biomasa (fango) se
recircula parcialmente al reactor de aireacin. El exceso ,se evaca o trata por
separado para reducir su volumen, el contenido en agua, y mejorar su estabilidad. Los
fangos en exceso suponen un producto residual importante en el proceso de fangos
activos, y se utilizan diversos sistemas alternativos para su tra tamiento y evacuacin
final.
Cuando se dan condiciones no favorables, como cargas txicas, fluctuaciones de
temperatura, o cambios del pH, los organismos filamentosos dominan a las po blaciones
microbianas en el tanque de aireacin. Entonces, el proceso se espesa y los flculos
microbianos tienden a quedarse suspendidos en lugar de sedimentar se. Como
consecuencia de todo esto, el decantador no es capaz de separar y recir cular la
biomasa, y el proceso entero falla. El esponjamiento tambin se puede ver afectado por
el diseo del reactor, tal y como se ver a continuacin.
Los procesos de fangos activos no difieren en su principio bsico operativo (que
siempre es el mismo) sino en la configuracin de los dos componentes princi pales del
proceso, es decir, el tanque de aireacin, y el decantador secundario. Actualmente
existen muchos diseos de reactores, y los ms importantes se exa minarn en las
secciones siguientes.
Reactores de fangos activos con mezcla completa. La configuracin bsica de este tipo
de reactor es la de un depsito en el que se mezcla y airea completa mente el contenido,
por lo tanto, la composicin del lquido en el interior ser la misma en cualquier punto,
como se muestra en la Figura 4.11a. Esto se puede lograr fcilmente en un tanque
pequeo equipado con un sistema de agitacin diseado apropiadamente. Si el
volumen del tanque es grande, se emplean mltiples agitadores o recirculadores
internos, y chorros. stos normalmente son depsitos de hormign en los que la
aireacin se proporciona mediante aireacin de superfi cie o difusores. Los detalles
sobre requisitos de aireacin, energa y aireacin ya han sido proporcionados
anteriormente en la seccin Configuraciones bsicas de los biorreactores.
Los sistemas de mezcla completa tienen la ventaja de que minimizan la reduc cin
de nutrientes (incluyendo al oxgeno) en cualquier parte del tanque de airea cin.
Adems, toleran bastante bien las sobrecargas puntuales, ya que cualquier variacin en
la composicin del afluente se amortigua en la disolucin que se ge nera cuando el
afluente se mezcla con el contenido del reactor.
Si las aguas residuales tratadas contienen una alta concentracin de hidrocar buros
fcilmente degradables, la composicin de la poblacin microbiana estar dominada
por los organismos filamentosos, y es probable que se produzca un es ponjamiento. En
estas circunstancias, no se recomienda el uso de un sistema de mezcla completa ya que
ste tendera a mantener las condiciones de esponjamien to en el tanque de aireacin.
Sin embargo, los reactores aerobios de mezcla com pleta se emplean con frecuencia
para tratar aguas residuales que contienen conta-
BIORREACTORES 91
= e S. + K,
donde es el tiempo medio de retencin de los fangos activados en el sistema (edad del
fango), y se define como la relacin entre el volumen del fango y el caudal de purga
del fango; ji max y Ks son constantes de la cintica de Monod para la poblacin
microbiana; ke es la constante de la velocidad de respiracin endgena; y Sa es la
concentracin del contaminante en el reactor y en el efluente. Segn la definicin
establecida, viene dado por:
Vm
0,_________
(1 - p )Qm, + |3 Qm r
. ________
donde V es el volumen del tanque de aireacin; ma, me, y mr son las concentraciones
de biomasa en el depsito y su efluente, en el efluente del decantador y en el flujo de
recirculacin, respectivamente; Q es la velocidad de flujo del afluente; y (1 - fi)Q y Q
son los caudales de la purga de fango y del fango recirculado desde el decantador,
respectivamente. Adems, a partir del balance de masas para el sus trato se obtiene la
siguiente expresin:
Vm m -o>m
i + *,e,
V = Qj 1 + a+a
l w
a
V )
una vez establecida la relacin de recirculacin a (igual a la relacin entre el cau dal
de recirculacin y el caudal del afluente).
Algunos valores tpicos para los parmetros cinticos a 20 C son: Y= 0,5; jx max =
2-6 das 1 ; Ks = 30-300 mg/1; ke = 0,05 das 1 . La edad del fango normalmente es de 6-
15 das 5 .
B I OR R E AC T OR ES 93
Reactores de flujo pistn con fangos activados.Los sistemas de flujo pistn normalmente
se utilizan para tratar aguas residuales. En estos sistemas, el agua residual fluye por
tanques de aireacin alargados y estrechos, tal y como se mues tra en la Figura 4.11b,
con lo cual se minimiza cualquier efecto de mezcla. En la prctica, es difcil obtener un
flujo pistn ideal en un sistema real. Es ms, la pre sencia de burbujas de aire tiende a
incrementar la turbulencia del sistema y a originar una dispersin axial.
El flujo pistn generalmente provoca el crecimiento de un fango de buena ca lidad
con unas excelentes caractersticas de sedimentacin. Esto es especialmente importante
para los casos en los que la composicin de las aguas residuales va a provocar el
crecimiento de organismos filamentosos, como sucede cuando contie ne altos niveles de
materiales fcilmente degradables que dan lugar al esponja miento. En estos casos, el
uso de un flujo pistn normalmente logra una rpida cada de las concentraciones del
contaminante en la primera parte del reactor, y disminuye la posibilidad de que la
concentracin en el resto del reactor propicie el crecimiento de organismos
filamentosos. Por lo tanto, el fango que sale del reactor tendr unas excelentes
propiedades de sedimentacin y se podr separar eficaz mente en el decantador.
Un inconveniente importante de los reactores flujo pistn es su sensibilidad
respecto a una sobrecarga puntual, ya que cualquier incremento de la concentra cin del
contaminante en las aguas residuales no se distribuye por igual en el reac tor, sino que se
confina en el lote de agua residual que lo contiene. Por esta razry los reactores flujo
pistn normalmente vienen precedidos de un reactor ms pe queo que funciona como un
CSTR; en este reactor se amortiguan parcialmente las fluctuaciones de concentracin.
Reactores en serie con fangos activos. Para eliminar la sensibilidad a una sobrecarga
puntual de los reactores flujo pistn con fangos activos y retener an algunas de las
caractersticas positivas de flujo, se pueden emplear diversos mto dos. Uno de ellos
consiste en dividir el reactor en una serie de reactores ms pe queos de mezcla
completa que se alimentarn en serie, tal y como se muestra en la Figura 4.11c. Otras
combinaciones incluyen el uso de un sistema de distribu cin que enva el afluente a
muchos puntos a lo largo de todo el reactor flujo pis tn (Fig. 4.1 Id), o el uso de
decantadores intermedios para la separacin parcial y recirculacin de los fangos
producidos.
Desde el punto de vista del reactor, los estanques de oxidacin son reactores de flujo
pistn con un importante caudal de recirculacin.
El aire se dispersa en varios lugares a lo largo del circuito, de tal modo que se
forman cortinas de burbujas cruzadas en el flujo de agua. Cuando las burbujas suben, se
mueven transversalmente respecto al agua. Mediante un espaciamiento calculado de los
puntos de inyeccin del aire se pueden crear zonas alternas, ricas y pobres en oxgeno, a
lo largo del circuito. All donde el oxgeno sea abundante, podr tener lugar la
oxidacin del amonaco en nitratos (nitrificacin) (adems de la oxidacin aerobia de la
DBO). Por el contrario, donde exista menos oxgeno, se favorecern las reacciones
biolgicas anxicas, como por ejemplo la conversin de los nitratos formados durante
la nitrificacin en nitrgeno molecular (desnitrificacin), con lo que se completa la
separacin de la carga de nitrgeno orgnico inicial. Esto constituye una caracterstica
atractiva de los estanques de oxidacin. Como sucede en cualquier otro proceso de
fangos activados, el efluente del estanque se separa de forma continua en un punto del
circuito antes del punto de entrada y se enva a un decantador donde se separa
parcialmente la biomasa y se re- circula.
Estos sistemas tienden a ser relativamente insensibles a las sobrecargas puntuales,
ya que estas cargas quedaran ms o menos homogeneizadas a lo largo del circuito,
debido a la alta relacin que existe entre el flujo de agua del circuito y el flujo afluente.
B I OR R E AC T OR ES 95
recogen en el fondo del decantador, en un sumidero localizado debajo del punto donde el
lquido afluente entra al decantador 12 .
Los decantadores circulares son grandes dispositivos de forma circular (de 3 a 150 m
de dimetro), con un fondo inclinado hacia el centro, tal y como se muestra en la Figura
4.13. Funcionan bajo los mismos principios que los decantadores rec tangulares. La entrada
se localiza habitualmente en el centro. El agua clarificada se mueve radialmente y se
recoge en el borde, donde fluye por encima de un ver tedero circular situado alrededor del
decantador. Se emplea un mecanismo de rasquetas para limpiar el fondo y empujar los
fangos sedimentados hacia un sumidero central donde sern recogidos 14 ' 38 .
se puede iniciar un nuevo ciclo. La digestin anaerobia de los fangos tambin se puede
incluir como uno de ios pasos del ciclo 8 .
Desde el punto de vista del tipo de reactor, un SBR es un reactor conven cional de
aireacin, equipado con sistemas de aireacin, agitacin y decantacin, que puede
asimilar los cambios que se produzcan en el nivel del lquido en cada ciclo del
proceso 49 . Esto puede realizarse utilizando un equipo de mezcla y airea cin, y un
dispositivo decantador flotante conectado a una bomba para vaciar el reactor 23 .
La ventaja de los SBRs es que pueden asimilar unas grandes variaciones de caudal
y composicin del afluente sin fallar. No se puede decir lo mismo de los procesos de
fangos activos convencionales, en los que un incremento en el afluen te provoca un
menor tiempo de retencin de las aguas residuales en el tanque de aireacin y de los
fangos en el decantador, con el posible fallo de uno de los dos procesos o de ambos.
Adems, los compuestos txicos o los cambios importantes en la carga orgnica pueden
provocar alteraciones en la dinmica de las poblacio nes microbianas dentro de los
procesos convencionales con fangos activos, con el consiguiente esponjamiento o fallo
del proceso. Sin embargo, el tiempo de reten cin de las aguas residuales en un SBR se
puede prolongar hasta que la poblacin microbiana se haya recuperado y haya
completado el proceso de depuracin. De forma similar, se puede modificar el tiempo
de sedimentacin para permitir una sedimentacin completa antes del vertido. En otras
palabras, los procesos SBR, como todos ios procesos discontinuos, son ms flexibles 50 .
Por otra parte, el uso de SBRs para tratar un flujo continuo de aguas residuales requiere
el uso simultneo de mltiples reactores y/o la presencia de instalaciones para el
almacenamiento de las aguas residuales hasta que uno de los SBRs est disponible.
Tambin se han utilizado SBRs en aplicaciones de desnitrificacin 6 .
BIORREACTORES 99
Los lechos bacterianos se han empleado para el tratamiento de aguas residuales desde
su desarrollo por Corbett en la Inglaterra de 1 890 3243 . Se pueden clasificar como
reactores de lecho con relleno; en estos reactores, las aguas residuales escu rren a travs
del relleno y son depuradas mediante la biomasa que crece sobre el propio relleno. En
la Figura 4.15 se muestra un lecho bacteriano, ste generalmen te est formado por un
cilindro grande y abierto, de 1 a 12 m de altura, relleno con un material grueso y
suelto, de 40 a 80 mm de tamao, como por ejemplo: roca de lava, escoria, ladrillos, o
plstico (ndice de huecos, 50 por ciento; superficie espe cfica, 90-100 metros
cuadrados por metro cbico de relleno) 32 . El reactor viene equipado con un sistema de
distribucin de agua; ste consiste en una serie de brazos giratorios colocados sobre el
relleno que distribuyen igualmente las aguas residuales sobre la superficie de la capa
superior del relleno. Las cargas hidruli cas tpicas se encuentran en el rango 1-4 m 3 /
(da m 2 ) para los reactores ms pequeos, y 10-50 m 3 /(da m 2 ) para los ms grandes.
Las cargas orgnicas se sitan entre 0,1 y 5 kg DBO/(m 3 da). 44
Durante la operacin del reactor se forma una biopelcula sobre la superficie de
todo el relleno. Cuando las aguas residuales atraviesan el reactor, se van depu rando
progresivamente mediante la accin de la biomasa. La biomasa que vive directa o
indirectamente de los nutrientes orgnicos contenidos en las aguas resi duales
constituye un ecosistema formado por bacterias, hongos, protozoos e, in cluso, gusanos
y larvas de insectos, adems de poder contener algas en el caso de zonas
suficientemente iluminadas 19 32 . Las bacterias y los hongos son los respon-
Los biodiscos (RBCs) son otro tipo de reactores que, como los lechos bacterianos,
utilizan una biopelcula expuesta a las aguas residuales para depurar los contaminan tes.
En este caso, la biopelcula se forma sobre la superficie de unos grandes dis cos de
plstico (de 1,7 a 3,7 m de dimetro) que giran lentamente a unas 2-5 rpm, estos discos
estn montados sobre un eje horizontal situado justo por encima del lquido tratado (Fig.
4.5). Por lo tanto, aproximadamente el 40 por ciento de la superficie del disco siempre se
encuentra sumergido en las aguas residuales. Debi do a la rotacin, diferentes sectores de
los discos se exponen de forma alterna al lquido y al aire, de esta forma se consigue la
oxigenacin de la biopelcula sin necesidad de una compresin o dispersin del aire. La
biopelcula formada sobre los discos tiene un espesor aproximado de 0,3 a 4 mm, y est
en contacto con las aguas residuales no slo cuando se encuentra sumergida en ellas, sino
tambin cuando est en el are, ya que siempre lleva consigo una fina pelcula de
lquido 44 - 50 .
102 BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S V PE LI G R O S OS
B I OR R E AC T OR ES 101
los slidos vuelvan a las regiones inferiores donde podrn seguir con su activi dad
metablica.
Este tipo de reactor se ha utilizado en aplicaciones industriales con un rendi miento
de eliminacin de unos 4-10 kg DQO/(m 3 da). Sin embargo, se han regis trado tasas
incluso mayores [96 kg DQO/m 3 da)]. Los tiempos de retencin estn en tomo a 3-8 h.
Todos los procesos aerobios de tratamiento de aguas residuales descritos anterior mente
generan una cantidad importante de fangos en exceso que es preciso eva cuar. Una
prctica comn consiste en usar la digestin anaerobia de fangos para reducir su volumen
y contenido en materia orgnica. Como los organismos anae robio, y especialmente los
metangenos, utilizan menos eficazmente la materia orgnica contenida en los fangos,
los fangos digeridos anaerobiamente contienen una menor cantidad de material celular.
Esto da lugar a un fango digerido que normalmente es muy estable, no putrescible, con
un contenido muy bajo en patgenos, y que puede ser vertido en el suelo o incluso
empleado como fertilizante. Adems, la digestin anaerobia se aplica tambin a los
fangos producidos durante el tratamiento primario. Este fango generalmente es menos
homogneo y ms difcil de degradar que los fangos activos.
La digestin de fangos anaerobios se puede realizar de forma continua o dis continua.
En su forma ms simplificada y antigua, el digestor de fangos consiste tan slo en un
depsito cerrado (a veces incluso un foso) al que se transfieren los fangos, stos se dejan
digirindose durante un largo perodo de tiempo. El proceso se puede operar de forma
continua en reactores de varios tamaos (entre 500 y 10.000 m 3 ) 32 . Si el depsito no tiene
un sistema de calentamiento ni de mezcla, el proceso puede emplear entre 30 y 60 das 9 .
Los reactores tecnolgicamente ms avanzados incluyen provisiones para el
precalentamiento del afluente, la mezcla, dispersin e inoculacin de fangos, el control
de la temperatura, control del pH, y recoleccin y separacin del gas procedente de los
fangos. La dispersin de los fangos se puede lograr de varias formas, por ejemplo:
mediante la agitacin mecnica de la mezcla utilizando agitadores (con o sin un tubo de
corriente); mediante la recirculacin del gas desde la parte superior hasta el fondo del
reactor, y su posterior dispersin empleando boquillas o tubos de corriente para
homogeneizar el fango; o mediante el uso de un sistema de recirculacin externa que
consiga bombear el lquido desde la parte superior del reactor hasta el fondo, lugar donde
se expulsa empleando una boquilla de chorro. Algunas de estas configuraciones de
reactor se examinaron anteriormente bajo el epgrafe Configuraciones bsicas de los
reactores.
Una buena mezcla y un buen control de la temperatura pueden acelerar el pro ceso de
forma significativa. Mediante una operacin dentro del rango mesofilico (32-37 C) el
tiempo de retencin puede descender a 15 das, con concentraciones de biomasa en torno
a 1-4 g/1. Adems, como el metano generado durante el pro-
BI O RR E AC T O RE S 109
ceso posee un valor calorfico importante (23.100 kj/m 3 ), se puede utilizar para mantener
una temperatura correcta dentro del reactor.
Sistemas combinados
Los sistemas combinados se definen aqu como aquellos procesos para el trata miento de
aguas residuales que utilizan organismos tanto aerobios como anaero bios con el fin de
obtener un producto residual final que sea estable y ambiental mente aceptable. Cuando se
haya logrado adquirir un conocimiento ms profundo sobre la microbiologa de los dos
tipos de microorganismos, probablemente se emplearn de forma selectiva para
solucionar los problemas de tratamiento ms difciles aprovechando el potencial
degradador especfico de cada grupo. Con el tiempo, esto requerir el diseo de reactores
con unas configuraciones especficas capaces de aportar las condiciones deseadas para
cada actividad microbiana. A continuacin se examinan algunos de los sistemas
combinados.
Lagunas facultativas
La laguna facultativa probablemente es una de las aplicaciones ms antiguas de los
sistemas combinados. Las lagunas facultativas son grandes estanques de agua, sin
agitacin y sin aireacin, en los que se establecen condiciones aerobias en la capa
superior de ia laguna y condiciones anaerobias en las capas inferiores. El establecimiento
de estas condiciones depende de la carga orgnica de la laguna, de su temperatura y de su
profundidad. Este tipo de lagunas suelen tener una profun didad de 1 a 2 m, lo que ms o
menos se sita en un nivel intermedio entre la profundidad de las lagunas aerobias y la
profundidad de las anaerobias. Los terraplenes normalmente se construyen con pendientes
de entre un 15 y un 25 por cien to l4 , y se utilizan materiales capaces de resistir la erosin,
como por ejemplo grava y piedras, adems se toman medidas para tener en cuenta las
posibles fluctuaciones de nivel.
Las lagunas facultativas presentan una rica variedad de poblacin microbiana, desde
algas y bacterias en las capas superiores hasta organismos facultativos y asociaciones de
microorganismos estrictamente anaerobios en las capas inferiores y en los sedimentos. El
espesor de la capa en la que viven los organismos aerobios depender de la profundidad a
la que penetre el oxgeno, o bien de la profundidad a la que se encuentren las algas
capaces de producir oxgeno mediante fotosnte sis. Por lo tanto, el espesor de esta capa
cambiar de forma importante del da a la noche y de una estacin a otra, debido al
cambio de intensidad en la radiacin solar. Por otra parte, unas cargas orgnicas altas
contribuirn a incrementar el espesor de la capa anaerobia. Se ha logrado establecer una
relacin entre estos factores y la profundidad de penetracin del oxgeno 37 . Si las cargas
orgnicas son excesivas [unos 4.000 kg DBO/(km 2 * da) para aguas residuales turbias],
la capa de oxgeno casi desaparecer por completo, y se establecern condiciones
anaerobias en toda la laguna. Esto posiblemente ocasionar problemas de olores.
110 B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
Estas lagunas son similares a las anteriores en el hecho de que aparecen estratifi cadas
en capas anaerobias y aerobias. Sin embargo, estn equipadas con - agitadores
superficiales diseados para mezclar y dar oxgeno tan slo a la capa aerobia superior.
Por lo tanto, la energa consumida por estos agitadores normalmente es menos de
lkW/m 3 , cantidad inferior a) nivel de energa consumido en las lagunas aireadas.
Debido a la profundidad de la laguna (comparable a la de las lagunas aireadas) esta
intensidad de agitacin no es suficiente como para suspender los sedimentos que se
depositan en el fondo de la laguna, por lo cual la capa inferior ser anaerobia.
Estas lagunas facultativas aireadas se pueden utilizar como estanques de trata -
miento primario (por ejemplo, en el tratamiento de aguas residuales altamente co -
loreadas que no permiten que la luz penetre dentro del lquido), o en los sistemas de
lagunas (descritos anteriormente) que reciben aguas residuales ya tratadas en lagunas
aireadas l3 .
Los componentes individuales de estos procesos fueron examinados en las seccio nes
anteriores. Aqu es importante destacar que el tratamiento completo de las aguas
residuales mediante este proceso (el ms utilizado) necesita un paso rpido de oxi -
dacin aerobia, en el cual la carga orgnica se oxida formando dixido de carbono y
convirtindose parcialmente en biomasa (proceso de fangos activos), seguido de una
transformacin reductora anaerobia ms lenta que convierte el producto resi dual de
este proceso de tratamiento (es decir, biomasa) en dixido de carbono y metano
(digestin anaerobia de fangos).
fue demostrada recientemente por Eckenfelder et al. , cuyo anlisis econmico puso de
manifiesto que si las aguas residuales tenan un DBO por encima de 1.000 mg/1, poda
ser beneficioso un proceso combinado anaerobio/aerobio.
Esta aproximacin ha sido utilizada en diversas aplicaciones !0,22 , incluyendo una
reciente en la que se utiliz una combinacin de carbono activo y etapas anae robia
(primera etapa) y aerobia (segunda etapa). Estas aplicaciones se desarrolla ron
principalmente para tratar aguas residuales muy contaminadas. En todos estos casos, los
reactores utilizados en cada etapa fueron del tipo descrito anteriormente para cada clase
de organismos. En la Figura 4.19 se muestra un proceso anaerobio- aerobio.
tratadas
FIGURA 4.19. Proceso anaerobio-aerobio para el tratamiento de efluentes
muy contaminados.
12 B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
Referencias bibliogrficas
46. Suflita, J. M., A. Horowitz, D. R. Shelton, and J. M. Tiedje. 1982. Dehalogenation: A Novel Pathway
for the Anaerobio Biodegradation of Haloaromatic Compounds. Science. 218:1115-1117.
47. Tojo, K., and K. Miyanami. 1982. Oxygen Transfer in Jet Mixers. Chem. Eng. J. 24: 89-97.
48. Verstraete, W. H., and D. Schowanek. 1987: Aerobic versus Anaerobie Wastewater Treatment. In
Proc. 4th Europ. Congress on Biotechnology, vol. 4, pp. 49-63.
49. Weber, A. S., and Matsumoto. 1987. Feasibility of Intermittent Biologica Treatment for Hazardous
Waste. Environ. Progr. 6:166-171.
50. Wentz, C. 1989. Hazardous Waste Management. McGraw-Hill, New York.
51. Wu, A. C., E. D. Smith, and Y. T. Hung. 1980. Modeling of Rotating Biologica Con tactor Systems.
Biotechnol. Bioeng. 22:2055-2064.
52. Young, J. C., and M. F. Dahab. 1982. Operational Characteristics of Anaerobie Pac- ked-Bed
Reactors. pp. 303-316. In E. L. Gaden, Jr. (ed.), Biotechnology and Bioengi- neering Symposium No.
12. Wiley, New York.
53. Zlokarnik, M. 1979. Scale-Up of Surface Aerators for Waste Water Treatment. pp. 157-180. In T. K.
Ghose, A. Fichter, and N. Blackebrough (eds.), Advances in Bioche- mical Engineering, vol. 11.
Springer Verlag, Berlin.
118 BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
Captulo 5
usar los sustratos secundarios. La clave final consiste en tener en cuenta las inte -
racciones directas entre sustratos, como por ejemplo, las limitaciones y los requi sitos de
los cosustratos. Los sustratos secundarios pueden alterar el crecimiento de la biomasa
mediante una limitacin del uso del sustrato primario yde la produc cin celular,
mientras que los sustratos primarios pueden limitar directamente la transformacin de
MODELACIN DE LOS
los sustratos secundarios. Estos efectos limitantes se modelan mediante parmetros
cinticos, cuyos valores varan segn la presencia de otros componentes (limitantes).
PROCESOS BIOLGICOS
Los efectos del cosustrato se producen cuando la enzi ma degradadora requiere un
sustrato especfico u otro cosustrato. Existen varios ejemplos de la cintica de los
IMPLICADOS EN LA
cosustratos. Uno de los ejemplos ilustra la formulacin de modelos y demuestra cmo
las interacciones entre sustratos pueden afectar de forma significativa al rendimiento del
proceso.
DEPURACIN DE LOS
SUSTRATOS ORGNICOS
Introduccin
PELIGROSOS
El eje central de la modelizacin de las aplicaciones de biotratamiento implica la
formulacin y solucin de ecuaciones de balances de masas para las especies bio lgicas
y qumicas ms importantes. Puesto que los sistemas de biotratamiento pueden ser
demasiado complejos como para que se comprendan mediante un co nocimiento
puramente cualitativo, el Bruce modelo matemtico ser la herramienta cru-
E. Rittmann
cialj>ara_desarrollar y_aplic_ar
Profesor de Ingeniera Ambiental eJ_biotratarDenlo.
John Evans
Northwestern
University
El proceso de formulacin Evanston,
de modelosIllinois
proporciona la base intelectual que co necta
los mltiples materiales y fenmenos que actan en un sistema de biotrata miento. La
formulacin identifica los factores Pablo que B.
sonSez
verdaderamente relevantes y los integra. El
marco cuantitativo de un modelo proporciona Universidad
Profesor Asociado de Ingeniera Ambiental un criterio de Pontificia de Chile
im portancia objetiva: los
Santiago, Chile
fenmenos o las especies son importantes cuando su inclu sin afecta al balance de
masas. Por lo tanto, la modelizacin es una herramienta intelectual que permite integrar
Estey captulo
priorizardesarrolla
multitud de losprocesos;
fundamentos tericos y cuantitativos para la modela cin
De estabiolgicos
de los procesos forma, lamediante
solucinlosdecuales
un modelo nos laproporcionar
se produce depuracin biounalgicaherramienta
de
los prctica.
compuestos Las orgnicos
solucionespeligrosos.
se pueden Todos
utilizarlospara diseardeunprocesos
modelos nuevo proceso
biolgicoscapaz de
cumplir
deben los cuenta
tener en objetivos de tratamiento,
el crecimiento o bien, para de
y mantenimiento analizar por quactiva,
una biomasa un proceso
lo queque ya
requiere el uso de sustratos primarios con donantes y receptores de electrones capaceslo hace
funciona cumple o incumple su objetivo. La naturaleza cuantitativa del modelo
til para lasenerga
de conseguir aplicaciones
para lade ingeniera
sntesis y que implican volmenes,
el mantenimiento flujos,
celu lar. Pory lo
tiempos
tanto,reales.
cualquier Lamodelo
mejor debe comenzar
estrategia con un
consiste en balance
construirdeunmasas de lalobiomasa
modelo activa posible.
ms sencillo y de En
los principio,
sustratos slo
primarios.
se debenAunque
incluirlos
los compuestos peligrososLa pueden
factores importantes. adicin ser a vecesque no
de factores
sustratos primarios, acomplica
sean importantes menudo el no modelo,
pueden oscurece
desempear las este pa pel yesenciales
conexiones deben eliminarse
y favorece las
mediante utilizacin
posibilidades secundaria.
de error. Una vez Porelegidos
lo tanto,lossefactores
debe reali zar un balance
correctos, se debendecuantificar
masas de
individual
forma quepararepresenten
cada sustratola secundario.
realidad de Los sustratos
un modo primarios
sencillo y secundarios
pero adecuado. Las estn
expresiones
conectados en cuanto
matemticas a su
sencillas utilizacin,
hacen ya quesea
que un modelo losms
sustratos
fcil deprimarios
comprender soportan el
y de solucionar
crecimiento de la biomasa que posteriormente va a
matemticamente. Sin embargo, hay que destacar que tambin se debe evitar el exceso
de simplificacin o sobresimplifcacin negligencia o tratamiento demasiado
superficial de los fenmenos fundamentales. Un buen modelo mantendr un equilibrio
entre lo completo y la simplicidad.
117
120 BJ O T R MATA
O DE
MLIEAC
N TI N
O DDE LO
E RE SISDU
PROOSCTES
XOISC OS
B I OYL GI C
PEL IGORSOS
. OS 119
Este captulo se centra en los factores que se deben tener en cuenta cuando se
formula un modelo para las aplicaciones de biotratamiento, identifica los fenme nos
que pueden ser importantes, define bajo qu condiciones se deben incluir los
fenmenos en un modelo, indica cmo interactan, y ofrece orientaciones sobre cmo
se pueden cuantificar. Todas estas cuestiones son imprescindibles para aquellas
personas que estn elaborando modelos y para quienes intentan seleccionar mode los
construidos por otros. Lo importante son las situaciones en las que los proce sos
biolgicos se muestran activos respecto a la destoxificacin de los productos
qumicos orgnicos peligrosos. Este captulo da respuestas a las siguientes pre guntas:
Qu factores se deben incluir en los modelos sencillos pero adecuados?, y
Cmo se pueden incluir estos factores?.
Fundamentos
FIGURA deelectrones
5.1. Flujos de la modelacin de tpicos
y de energa procesos biolgicos
en una clula bacteriana. D =
sustrato primario donante, D ox = sustrato donante oxidado, A = sustrato primario
receptor, A re d = sustrato receptor reducido,
Objetivos
ICH del metabolismo microbiano
2 = cosustrato interno reducido, C = cofactor interno oxidado, e~ = electrn,
O
M O DE L AC I N DE LO S PR O C ES O S B I O L GI C O S .. 121
biodegradar como sustrato secundario, es decir, como un sustrato cuya oxidacin (o, a
veces, reduccin) produce un bajo flujo de electrones y energa que se mues tra
incapaz de mantener la biomasa que lo degrada (Kobayashi y Rittmann, 1982; Stratton
et al., 1983).
Los sustratos secundarios se pueden dividir en dos tipos. El primero, denomi nado
sustrato secundario de baja concentracin , incluye a los sustratos que pueden aportar
flujos de electrnes y energa al metabolismo celular, pero la veloci dad que presentan
estos flujos es menor que el flujo mnimo necesario para mantener la biomasa activa.
Lo que provoca que estos flujos sean muy bajos es que el sus trato secundario est
presente en una baja concentracin. Rittmann y McCarty (1980) derivaron Smi, la
concentracin mnima requerida para mantener una biomasa en estado estacionario.
Los sustratos secundarios de baja concentracin podran so portar la biomasa, pero su
concentracin es menor que Smm.
Otro tipo de sustrato secundario es el denominado cometabolito clsico , trmino
utilizado para describir un compuesto cuya transformacin no puede generar flujos de
energa y electrones (Alexander, 1981; Dalton y Sterling, 1982). Gene ralmente, el
cometabolito se transforma mediante metabolismo incidental, es de cir, mediante una
enzima que normalmente reacciona con un compuesto diferente, pero relacionado, que
cataliza un paso de transformacin sencillo para el cometa bolito. Como no se produce
ningn otro paso de transformacin, la transformacin del cometabolito no genera
flujos de electrones y energa. Por lo tanto, un cometa bolito clsico no puede ser
sustrato primario; incluso aunque su concentracin sea elevada.
El trmino cometabolismo se emplea en ocasiones con demasiada libertad para
hacer referencia a cualquier situacin en la que otro sustrato aumente la biodegra-
dacin de un compuesto especfico. Esta utilizacin del trmino es desafortunada, ya
que oscurece su significado: ser requisito obligado para un sustrato prima rio, ya que
la transformacin del cometabolito no produce flujos de electrones ni energa.
ci 3 hc 2 + ich 2 + o 2 = ci 2 h 2 o 2 c 2 + IC + HC1
Por lo tanto, la concentracin del oxgeno disuelto puede afectar de forma directa a la
velocidad de degradacin del TCE.
La reaccin de la monooxigenasa ilustra tambin el segundo tipo principal de
sustrato: el cosustrato interno reducido , ICH 2 , que proporciona dos electrones. Los
cosustratos internos reducidos son necesarios para las reacciones reductores de
deshalogenacin (Voge! et al., 1987), tal y como se refleja en la reduccin del TCE a
dicloroeteno:
C1 3 HC 2 + ICH 2 = C! 2 H 2 C 2 + IC + HC1
Aunque los electrones transportados por e! ICH 2 finalmente proceden del sustrato
primario donante de electrones, la concentracin interna de ICH 2 controla directamente
la cintica de la reaccin en las reacciones de la monooxigenasa y de desha logenacin
reductora. Por lo tanto, el ICH 2 es un cosustrato interno.
En los dos ejemplos anteriores de cosustratos, el TCE es un ejemplo de come-
tabolito porque las enzimas de la monooxigenasa poseen metano_como sustrato^
normal: Por cosigfent7el metano es~un sustrato primario que requiere dos co -
sustratos (ICH 2 y 0 2 ), pero el TCE es un cometabolito cuya transformacin re quiere
tambin de ambos cosustratos.
Los limitantes de los sustratos disminuyen la velocidad de las reacciones cata lizadas
por las enzimas mediante su reaccin directa con la enzima. Uno de los tipos de
limitacin se denomina competitiva, ya que el limitante compite para ac ceder al lugar de
reaccin (centro activo) de la enzima. Otro tipo de limitacin es no competitiva, ya que
el limitante se une con la enzima en un lugar donde no se produce la reaccin (centro
activo), pero lo hace de tal forma que dificulta la capa cidad de reaccin de la enzima
hacia el sustrato especifico. Los limitantes competitivos normalmente son anlogos al
sustrato especfico; un buen ejemplo es la competencia entre el TCE y el metano,
sustrato normal de la metano monooxigenasa que transformara ahora el TCE (Tsien et
al., 1989).
Esta limitacin puede afectar a la biodegradacin de un sustrato secundario directa
o indirectamente. En el caso directo, el limitante afecta a la enzima que est degradando
el sustrato secundario. En el caso indirecto, el limitante retrasa la utilizacin del
sustrato primario. Esta limitacin del uso del sustrato primario pue de frenar la
transformacin del sustrato secundario mediante la reduccin de la cantidad de biomasa
activa y/o la alteracin de la disponibilidad de cosustratos internos, como por ejemplo
de ICH 2 . La Figura 5.2 ilustra los lugares donde la limitacin afecta a los flujos
primarios de electrones y de energa.
La autolimitacin es un caso especial de limitacin, en este caso, las altas con -
centraciones de un sustrato limitan su propia degradacin (Godrej y Sherrard, 1988;
Sez y Rittmann, 1989). La investigacin de los compuestos autolimitantes, como
M O DE L AC I N DE LO S PR O C ES O S B I O L GI C O S . 123
FIGURA 5.2. Diagrama ilustrativo de cmo los limitantes pueden afectar a los
flujos primarios de electrones y energa.
suspensin voltiles). Gran parte de lo que parece ser biomasa son slidos orgni cos
metablicamente inertes producidos por la descomposicin y muerte de las bacterias
activas. Solamente la biomasa activa es capaz de llevar a cabo reaccio nes de
transformacin.
Parte de la biomasa se encuentra en suspensin libre, mientras otra parte se adhiere a
las superficies slidas formando bopelculas. La distincin clave consiste en que la
biomasa en suspensin se mueve con el flujo de agua, mien tras que en el caso de la
biomasa adherida el agua fluye sobre ella. Adems, los mecanismos de transporte que
ponen en contacto a los substratos con las bacterias a menudo son limitantes en los
sistemas con bopelculas (Rittmann y McCarty,
1980).
Las bacterias activas de los sistemas de biotratamiento normalmente inclu yen muchas
cepas distintas. Aunque existe alguna redundancia ecolgica, es co mn una gran
diversidad ya que distintas cepas utilizan los sustratos primarios presentes en el afluente.
El uso de diferentes sustratos primarios crea nichos eco lgicos. Algunos nichos son muy
diferentes desde un punto de vista funcional, mientras que otros slo presentan diferencias
sutiles. Por ejemplo, las bacterias que utilizan fenol como donante primario de electrones
son completamente distintas a las que utilizan amonaco, pero son relativamente similares
a las que usan benceno.
La idea de que es necesario contar cor^unacepa_porseparado_para_cada-tipo-de
sustrato~es bastante errnea. Por otra parte, ninguna cepa sirve para todos los sus tratos
posibles. Por lo tanto, la realidad se sita entre estos dos extremos. El mode lo de seleccin
ecolgica se debe basar en el uso del sustrato primario porque ste es quien controla la
capacidad de crecer y competir de las diferentes cepas. Se desconoce cmo afecta la
presencia de un sustrato secundario a la seleccin ecol gica, ya que los sustratos
secundarios contribuyen poco o nada al crecimiento celular.
La cuestin final en la diferenciacin de la biomasa es la distribucin de los
plsmidos. Los plsmidos son pequeas hebras de ADN que no son necesarias para el
funcionamiento celular normal, contienen genes degradadores interesan tes, y se pueden
copiar entre bacterias (Rittmann et al., 1990). Como los plsmidos no son esenciales, las
bacterias pueden vivir bastante bien sin ellos. Sin embargo, si una clula adquiere un
plsmido, dicha clula puede ganar en capacidad degra- dadora. Si aumenta la fraccin de
biomasa que contiene el plsmido, entonces la concentracin de biomasa activa en la
reaccin degradadora aumentar proporcionalmente. De modo similar, debera crecer en la
misma proporcin la velocidad de degradacin.
El contenido en plsmidos de la biomasa depende del equilibrio entre la trans ferencia
y prdida de plsmidos. La transferencia de plsmidos aumenta con con centraciones
celulares altas, con la disponibilidad de una fuente de energa (p. ej., sustratos primarios)
para estimular la reaccin conjugativa, y con la entrada de clulas donantes que contengan
plsmidos (Smets et al., 1990; MacDonald et al., 1992). Las tasas de prdidas no se
conocen muy bien, pero probablemente aumentan cuando las bacterias crecen rpidamente.
M O DE L AC I N DE LO S PR O C ES O S B I O L GI C O S .. 125
Balances de masas
Un modelo matemtico es aquel formado por una serie de ecuaciones de balances de
masas que incluyen a las especies qumicas y microbianas ms significativas. Esta
seccin desarrolla los balances de masas que normalmente se requieren para la
elaboracin de un modelo completo. Los trminos de velocidad que se incluyen en las
ecuaciones de balances de masas se discuten en la seccin siguiente. Por lo tanto, esta
seccin se centrar en dnde y cmo se incorporan las expresiones de velocidad en un
modelo.
Ya que la biomasa finalmente debe utilizar los sustratos primarios para su crea cin y
sostenimiento, es esencial realizar un balance de masas sobre uno o ms de los sustratos
primarios: el donante y receptor de electrones. A continuacin se pre sentan las
ecuaciones para el balance de masas de cada sustrato y de un volumen de reactor de
mezcla completa:
* En corchetes se encuentra la dimensin de las unidades para cada parmetro. Las dimensiones
principales son: M = masa, L = longitud y T - tiempo. Los subndices diferencian tipos de masas, como D =
donante, A = receptor y X ~ biomasa. Toda masa se debe expresar en unidades proporcio nales a sus
equivalentes en electrones. La demanda qumica de oxigeno (DQO) es la unidad de masa ms comn que
cumple este requisito. Si se emplean otros sistemas de unidades (p. ej., SSV para biomasa), es necesario
utilizar factores de conversin.
126 B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S V PEL I GR O S O S
Las ecuaciones (5.1) y (5.2) poseen tres caractersticas comunes en todos los
balances de masas.
La parte izquierda expresa el cambio de masa por unidad de tientpo.- Para el caso
comn de estado estacionario, su diferencial es cero.
La parte derecha contiene tres tipos de trminos. El primero es de adveccirt, que
define cunta masa entra en el afluente y sale con el efluente. El segun do es un
trmino para los afluentes (o efluentes cuando R es negativo) que entran (salen)
independiente al flujo liquido. El tercero incluye todas las re acciones que se
producen en el volumen del reactor. En estas ecuaciones, el donante primero se
consume para la sntesis celular ( YDrDV), mientras que el receptor primario se
consume para la sntesis celular [(1 - YD)rDV] y para la oxidacin que apoya el
mantenimiento (asimilacin) celular ( bXaV).
Aunque llevar a cabo una discusin detallada acerca de cmo solucionar las ecua ciones
de balances de masas est fuera del alcance de este captulo, se pueden establecer
varios principios generales.
Las soluciones de ordenador pueden variar desde hojas de clculo hasta com plejos
cdigos informatizados que deben funcionar mediante potentes ordenado res. Es
necesario utilizar un mayor poder de ordenador cuando aumenta el nmero de especies
y los trminos R y r se desvan mucho de la linealidad, el modelo debe calcular los
resultados para periodos de tiempo determinados y distintos lugares. Se puede
encontrar ms informacin sobre las tcnicas de solucin informatizada en Finlayson
(1980), Wang y Anderson (1982), y Smith (1978), entre otros.
Expresiones de cintica
Esta seccin presenta y discute tas expresiones matemticas utilizadas para los
trminos de la tasa bitica (r). El objetivo es representar de forma cuantitativa la
frmula para los fenmenos biolgicos que afectan a los sustratos primarios y se -
cundarios. De una relevancia especial son los enlaces entre los diferentes sustratos y
biomasas activas. Las expresiones para la diferenciacin de la biomasa estn fuera del
alcance de esta seccin.
La tasa neta de crecimiento de las bacterias activas requiere dos trminos. El pri mero
representa la sntesis de la biomasa, que es proporcional a la utilizacin del sustrato
primario, tal y como se muestra en la Figura 5.1. El segundo trmino re presenta la tasa
a la cual se oxida la biomasa para proporcionar energa con el fin de lograr su
mantenimiento, fenmeno denominado metabolismo endgeno (Rois, 1983). Cuando la
tasa de oxidacin de la biomasa se representa mediante
128 B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
(56)
Ko-df+O
donde q tasa especfica mxima efectiva de utilizacin del donante de elec trones
primario [MJrf-'T1]
= concentracin de semisaturacin efectiva del donante de electro nes
primario
r-A- =r
B-~rX-+ f-mKf^a ~ ~ ~ ~ ~ (5.7) _
Los coeficientes efectivos Yef y > cfT dependen del tipo de sustrato primario y del
tipo de interacciones existentes entre los sustratos primario y se cundario. En la Tabla 5.1
se resumen, y a-continuacin se discuten, las posibles relaciones entre los coeficientes
efectivos;
La primera situacin representa a un sistema en el cual el donante primario no es
auto limitante, y no se produce ninguna interaccin entre los sustratos primario y
secundario. En este caso se utiliza la funcin de Monod (1949) para la tasa de
utilizacin del sustrato primario; todos los coeficientes efectivos son constantes y no
dependen de la concentracin del sustrato secundario. La relacin de Mnod tiene un
homlogo en una reaccin catalizada por una enzima en la que la enzima E y el sustrato
primario D se combinan para formar un complejo ED, que poste riormente se disociar
en un producto R y una enzima E libre (no combinada):
D + E = ED
ED R + E
El segundo sistema implica a un sustrato primario autolimitante, sin interac ciones
entre los sustratos primarios y secundarios. En este caso, cuando existe una gran
cantidad de sustrato primario, disminuye la reaccin catalizada por las enzi mas debido
al exceso de sustrato primario. Este fenmeno se conoce como autoli- mitacin o
limitacin por sustrato primario. La forma habitual de expresar la cintica de un sustrato
primario autolimitante es mediante la expresin de Haldane (Andrews, 1968), en la que
qD_efr y KD_ef disminuyen cuando se produce un incremento de la concentracin del
sustrato primario. El sustrato primario parece ser un limitante competitivo cuando est
presente a altas concentraciones, combinndose con el complejo ED para dar el
intermedio no reactivo ED 2 .
D + E = ED D + ED - ED 2 (no reactivo)
ED -> R + E
D + E = ED
S + E - ES (no reactivo) ED * R + E
13
0
BI
OT
RA
TA
MI
EN
TO
DE
RE
SI
DU
OS
T
XIC
OS
Y
PE
LIG
RO
SO
S
Y
fe
5. No autolimitante SS es un desacoplacior Gottschalk (1986) <n (1+-i)
[(1 + (S/K<)]
M OD E L AC I N D E LOS PR OC E S O S BI O L G I C OS . . 131
En este caso, ios enlaces del sustrato primario y del limitante de la enzima se ex cluyen
mutuamente. Como parte de la enzima est enlazada al complejo ES, no toda la enzima
se encuentra disponible para catalizar la conversin del sustrato primario adems, el
sustrato secundario baja la velocidad de reaccin. La reduc cin de velocidad provocada
por el sustrato secundario limitante competitivo se puede compensar completamente
mediante* el aumento adecuado de la concentra cin del sustrato primario; la velocidad
mxima que se puede dar en la reaccin no se ve afectada por el limitante competitivo.
Los limitantes competitivos normalmente son anlogos del sustrato primario, ya que
tienen relaciones estructurales cercanas al sustrato normal.
El cuarto sistema implica un sustrato primario no auto-limitante y un sustrato
secundario que es un limitante no competitivo del sustrato primario. Los limitan tes no
competitivos bajan el coeficiente qD.efr> y no afectan al coeficiente KD_ef. Un sustrato
secundario que sea un limitante no competitivo reaccionar con la enzima
metablica'en un lugar diferente del centro activo. El limitante y el sustrato prima rio se
pueden enlazar de forma simultnea con la enzima, formando el complejo ternario EDS
no reactivo o poco reactivo.
D + E = ED S + E = ES ED + S = EDS ES + D = EDS ED -* R + E
Sustratos secundarios
Los sustratos secundarios pueden ser de tipo de baja concentracin (es decir, por
debajo de la S mm ), o pueden ser cometablicos. En algunos casos se implica a los
cosustratos. Esta seccin describe la cintica para estas tres situaciones.
La relacin funcional para la tasa de transformacin de los sustratos secunda -
rios depende de las interacciones entre los sustratos primarios y secundarios. En el
caso de baja concentracin, cuando los sustratos no interactan entre s, se utiliza el
modelo de Monod para la tasa de transformacin del sustrato secundario (Stratton et
al., 1983; Bouwer y McCarty, 1985).
,= (5.9)
K
,+s
= tasa especfica mxima de transformacin del sustrato secundario
donde qs [A^M/T 1 ]
= concentracin de semisaturacin del sustrato secundario [M^Lr*]
Los coeficientes efectivos, qs^ y Ks^, pueden tener expresiones similares a las que
se muestran en la Tabla 5.1 para los sistemas 3 y 4, pero D es el compuesto que
afecta a los coeficientes para la separacin de S. Cuando el sustrato primario es un
limitante competitivo del sustrato secundario, q^f - qs y K$ef = Ks (1 + DI K' 2 ); por
otra parte, qs,ef = qj{\ + D//Q y = Ks cuando el sustrato primario es un limitante no
competitivo dei sustrato secundario. Los coeficientes K\ y K\ son las constantes de
limitacin [iM^I' 3 ] debido a la presencia de un sustrato primario asociado a Ja
concentracin de semisaturacin del sustrato secundario y a la tasa especfica
mxima de transformacin del sustrato secundario, respectiva mente.
M O DE L AC I N DE LO S PR O C ES O S B I O L GI C O S .. 133
La ltima situacin plantea cmo describir las cinticas del sustrato secunda rio
cuando se necesita un cosustrato. La transformacin del sustrato secundario requiere
contribuciones que no se relacionan directamente con su transformacin. Por lo tanto,
la velocidad de transformacin del sustrato secundario debe relacio narse con la
concentracin del cosustrato o su tasa de utilizacin. En algunos ca sos, tales como la
utilizacin directa de 0 2 en una reaccin de la monooxigenasa o la dioxigenasa (Little
et al., 1988), el cosustrato (en esta ocasin 0 2 ) puede tener su propia funcin de Monod
que controla de forma efectiva a qs<fr ,
/j-eff qs
(5.11)
Kc+C
La ecuacin (5.12) representa aquellos casos en los que las oxidaciones del sustra to
primario y/o la biomasa proporcionan los electrones necesarios para la transfor macin
del sustrato secundario. En presencia de un sustrato primario, la genera cin de
electrones va oxidacin del sustrato primario normalmente es mucho ms importante
que la generacin va oxidacin de biomasa; se puede llegar a una sim plificacin
utilizando j3 = 0 en la Ec. (5.12).
Un ejemplo
------------------------------------------------ ----
------------------------------------------------(5.18)
En este ejemplo, el sustrato secundario no es un desenlazador ya que no afecta a los
coeficientes Ye y bc{ el sustrato secundario es un limitante no competitivo del
sustrato primario porque incrementa KD_cff mientras mantiene constante qD^f y P = 0,
lo que significa que el suministro de electrones endgenos es escaso.
La concentracin del sustrato secundario en el efluente se obtiene combinando
las Ecs. (5.14), (5.15), y (5.18):
S = S0-a(D 0~D) (5.19)
KD[\ + S0/K2-aP0/K2\
(5.21)
Coeficiente Valor*
* SS = Slidos en suspensin (una medida de biomasa); DBO^ = Demanda bioqumica de oxige no para el
sustrato donante primario; DBO ( = Demanda bioqumica de oxgeno para el sustrato se cundario.
3 6 B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
O fl (mg/l)
Oo(mgfl
)
FIGURA 5.3. Efecto de la concentracin del sustrato primario sobre las con -
centraciones en el afluente de (a) sustrato primario donante y (b) sustrato secundario.
Las constantes son S0 = 500 mg BOD s /l y 0, = 1 da.
S0 (mg/l)
para 50 mg/l < S0 < 27.700 mg/l. Finalmente, el sistema se encuentra completa mente
limitado sin ninguna eliminacin de sustrato para SQ 27.715 mg/l. Estos resultados
muestran cmo un sustrato secundario inhibidor reduce la eliminacin del sustrato
primario, lo que reduce la biomasa activa y hace decrecer el flujo de electrones para
la funcin como cosustrato del sustrato primario.
138 B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
La Figura 5.5 muestra los efectos del tiempo de retencin de la biomasa x sobre las
concentraciones efluentes de D y S para Z> 0 = 500 mg DBO^/1 y S0 = 500 mg DBOA
Para 0 < 0,17 das, el sistema est completamente limitado, y no se elimina ningn
sustrato. El grado de limitacin desciende cuando 0 X es superior a 0,17 das. Debido a los
valores de las constantes cinticas y a las concentraciones de afluente consideradas, en
este caso, la eliminacin del sustrato secundario es baja. Sin embargo, cuando aumenta lo
suficiente, D se acerca a cero, aunque S todava sea grande, debido a la acumulacin de
biomasa mediante retencin celular.
En resumen, la modelacin muestra que el sistema se vuelve menos limitante y ofrece
mejores rendimientos de limitacin cuando aumenta la concentracin del sustrato
primario en el afluente, disminuye la concentracin en el afluente del sus trato secundario,
y aumenta el tiempo de retencin de la biomasa. Estas caracters ticas son consecuencia
directa de las interacciones entre sustratos: 1. una mayor eliminacin del sustrato
primario da lugar a una mayor acumulacin de biomasa y un mayor flujo de electrones
para la eliminacin del sustrato secundario; 2. las concentraciones reducidas del sustrato
secundario provocan una limitacin menor, y 3. un tiempo de retencin de biomasa mayor
incrementa la acumulacin de biomasa. Una vez reconocidas mediante la modelizacin,
estas interacciones se pueden tener en cuenta en el diseo y operacin de un proceso.
Conclusin __________________________________________________________
Este captulo ha proporcionado los fundamentos conceptuales y cuantitativos para la
modelacin de un proceso biolgico. Las caractersticas bsicas de un mo delo son:
ex (das)
Referencias bibliogrficas
Sez, P. B., and B. E. Rittmann. 1989. Discussion of kinetics and stoichiometry of activa-
ted sludge treatment of a toxic organic wastewater. J. Water Pollut. Contr. Fed., 61:
357-358.
Sez, P. B., and B. E. Rittmann. 1991. Biodegradation kinetics of 4-chIorophenol, an inhi-
bitory co-metabolite. J. Water Pollut. Contr. Fed., 63:838-847.
Smets, B., B. E. Rittmann, and D. A. Stahl. 1990. Genetic capabilities of bicslogical proces-
ses. Part II. Environ. Sci. Technol 24:162-169.
Smith, G. D. 1978. Numerical Solution of Partial Differential Equations: Finite Difference
Methods. Clarendon Press, Oxford, United Kingdom.
Stratton, R. G., E. Namkung, and B. E. Rittmann. 1983. Secondary utilization of trace or-
ganics by biofilms on porous meda. J. Am. Water Works Assoc., 75:463-469.
Tsien, H, C., G. A. Brusseau, R. S. Hanson, and L. P. Wackett. 1989. Biodegradation of
TCE by Methylosinus trichosporium OB3b. Appl. Environ. Microbiol., 55:3155-3161.
Vogel, T. M., C. S. Criddle, and P. L. McCarty. 1987. Transformations of halogenated
aliphatic compounds. Environ. Sci. Technol., 21:722-736.
Wang,~ H. E., and M. P. Anderson. 1982. Introduction to Groundwater Modeling, W. H.
Freeman, San Francisco.
Captulo 6
LIMITACIONES DE LA
LEGISLACIN Y POLTICA
VIGENTE: REGULACIN DE LA
BIORRECUPERACIN DE
RESIDUOS PELIGROSOS
David E. Giamporcaro
Jefe de Seccin, Programa de Biotecnologa Oficina de Prevencin de ta
Contaminacin y Txicos Agencia de Proteccin Ambiental U.S.A. 1 Washington,
DC
Vamos a comenzar por una prediccin: la dcada de los 90 ser testigo de una
importante expansin del uso de la biorrecuperacin para degradar los residuos
peligrosos, incluyendo las primeras aplicaciones comerciales de microorganismos
sometidos a ingeniera gentica 2 . Este pronstico optimista no se basa solamente en el
estado actual de la ciencia de biorrecuperacin. El progreso en este frente contina a
una velocidad impresionante; casi cada semana se anuncian logros im
1
Las opiniones expresadas son del autor, y no de la Agencia de Proteccin Ambiental de Estados
Unidos.
7
Biorrecuperacin es el proceso natural mediante el cual las bacterias u otros microorganis mos
alteran y rompen las molculas orgnicas dando lugar a los componentes constituyentes. La
biorrecuperacin est relacionada con la biodegradacin ( l t ) . Existen dos mtodos principales de
biorrecuperacin: la bioestimulacin, mtodo de recuperacin predominante, y el bioaumento (6). La
bioestimulacin implica la adicin de materiales, como oxgeno, nitrgeno, fsforo, y oligoele- mentos, en
una zona contaminada para acelerar los procesos naturales de biodegradacin (20). El bioaumento implica
la introduccin de microorganismos en una zona para aumentar la poblacin autctona o incrementar la
velocidad degradadora (6).
141
142 B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
La promesa de biorrecuperacin
3
42 U.S.C. 6901, y ss. En 1976 se aprob el RCRA.
4
42 U.S.C. 9601, y ss. En 1980 se aprob el CERCLA, y generalmente se denomina Superfondo.
5
15 U.S.C. 2601, y ss. En 1976 se aprob el TSCA.
6
7 U.S.C. 150aa, y ss. En 1957 se aprob el FPPA, administrado por el Departamento de Agri -
cultura de los Estados Unidos (USDA).
L IM I TAC I O N E S DE L A L EG I S L AC I N Y PO L TI C A V IG E N TE 143
peligrosos. Los costes de incineracin, por ejemplo, varan entre 300 $ y 1.000 $ por
tonelada de suelo, mientras la evacuacin terrestre supone entre 200 $ y 300 $ por
tonelada. Frente a estas cifras, la biorrecuperacin del suelo cuesta entre 50 $ y 150
$ por tonelada (Glass, 1991). Otra ventaja importante es que la biorrecupe racin se
puede realizar provocando un menor impacto ambiental negativo sobre el lugar
afectado y, posiblemente, sobre el 'ambiente en general. Por ejemplo, la
biorrecuperacin in situ normalmente implicara una perturbacin mnima del sue lo
superficial. Adems, la biorrecuperacin evita algunos de los inconvenientes
ambientales asociados a las principales tecnologas de tratamiento 7 .
Sin embargo, la mayor ventaja de la biorrecuperacin quizs todava no se haya
aprovechado. Se trata del uso de las tecnologas de biorrecuperacin como
instrumento en la prevencin de la contaminacin. Varios expertos en el tema han
citado la biorrecuperacin para la minimizacin de los residuos como una de las
aplicaciones futuras ms prometedoras de la tecnologa (Bakst, 1991; Glass, 1991).
EPA conoce bien este potencial. El Administrador de EPA, William Reilly, en una
reunin celebrada en junio de 1991 entre representantes de la industria de la bio -
rrecuperacin y la Agencia, dijo acerca de las diversas aplicaciones de esta biotec -
nologa: deben llegar a formar parte de nuestras futuras discusiones y acciones en
la prevencin de la contaminacin (U.S. EPA, 1991a).
No es sorprendente, entonces, que EPA haya mostrado tanto inters durante los
ltimos dos aos y medio en relacin a valorar los obstculos cientficos, ins -
titucionales y reglamentarios que existen en contra de la aplicacin de esta tecno -
loga. Reilly ha expresado claramente el compromiso de la Agencia respecto a
aprovechar el potencial de la biorrecuperacin:
Los dos estatutos con mayores implicaciones para la biorrecuperacin, tanto a lar go
como a corto plazo, son el RCRA y el CERCLA.
El RCRA ha sido descrito como el programa reglamentario ambiental ms com -
plejo. El RCRA establece un sistema global para gestionar el almacenamiento,
tratamiento, y evacuacin de los residuos slidos y peligrosos, incluyendo su iden -
tificacin, y el establecimiento de las normas de tratamiento, almacenamiento y
evacuacin que son aplicables a los generadores y transportistas de residuos peli
7
Por ejemplo, las incineradoras plantean inquietudes en relacin a las emisiones atmosfricas y
problemas con la evacuacin de las cenizas (Glass, 1991; Thayer, 1991).
144 BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
8
42 U.S.C. 6903 <27). Vase tambin 40 C.F.R. 261.2.
Los permisos del NPDES son emitidos por EPA y establecen los lmites permisibles para el vertido de
contaminantes en las aguas navegables de Estados Unidos. Vase 33 U.S.C 1342.
10
40 C.F.R. 261.4(a).
" 40 C.F.R. 261,21 (inflamabilidad); 261.22 (corrosividad); 261.23 (reactividad).
LI M I TAC I O NE S D E L A LE GI S L AC I N Y PO L T IC A VI G EN T E .. 145
12
40 C.F.R. 261.24.
13
40 C.F.R. 261.31.
14
40 C.F.R. 261.32.
15
40 C.F.R. 261.33(e).
16
40 C.F.R. 261.33(0.
17
40 C.F.R. 261.3(a)(2)(iii), (d)(l).
18
40 C.F.R. 261.3(a)(2)(iv).
146 B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
no puede cambiar su estado a residuo reglamentario mediante este tipo de trata miento
l9
.
La poltica contenido de EPA establece que cualquier medio ambiental (es decir,
suelo o aguas subterrneas) que contenga un residuo peligroso listado ser
considerado como residuo peligroso, y se deber tratar, almacenar, o evacuar como tal
(Bakst, 1991) 20 . Adems, la norma derivado de de EPA establece que cual quier
producto secundario generado por el tratamiento, almacenamiento, o eva cuacin de un
residuo peligroso listado ser considerado de la misma forma que el residuo listado
(Bakst, 1991; Hill, 1991) 21 .
El efecto prctico de estas normas es que el suelo o el agua subterrnea conta -
minada con residuos peligrosos listados, o el rechazo de cualquier proceso de tra -
tamiento empleado para degradar un residuo peligroso listado por ejemplo, las
cenizas de una incineradora o la biomasa de un reactor debe ser tratado,_en s_
mismo, como residuo peligroso.
El 6 de diciembre de 1991 el Tribunal de Apelacin de Estados Unidos para el
Distrito de Columbia invalid y devolvi las normas derivado de y mezclas a
EPA basndose en que la agencia no haba notificado y comentado las normas lo
suficiente antes de su promulgacin en 1980 22 . Para evitar una discontinuidad en la
regulacin de los residuos peligrosos, el tribunal recomend a EPA volver a
promulgar normas con carcter provisional 23 .
EPA reinstaur las normas en marzo de 1992 publicando una norma final pro -
visional 24 . El objetivo de la norma final provisional es asegurar que no exista un
agujero legal en la administracin del programa de residuos peligrosos. Esta nor ma
provisional caduc el 28 de abril de 1993. Durante el perodo intermedio, EPA volver
a proponer las normas sobre mezcla y derivado de con el fin de soli citar
comentarios de la opinin pblica acerca de las alternativas de gestin para los
residuos mezclados y subproductos de tratamiento 25 .
Cuando se determina que un residuo es peligroso, se desenlazan una serie de
requisitos reglamentarios en relacin a su almacenamiento, tratamiento 26 , y eva-
19
40 C.F.R. 261.3(c)(I). Para que un residuo peligroso listado, o el material como suelo o aguas
subterrneas que contiene un residuo peligroso listado, no sea considerado peligroso, debe ser excluido
de la lista. 40 C.F.R. 261.3(d)(2).
20
40 C.F.R. 261.3(b)(2).
21
40 C.F.R. 261.3(c)(2)(i).
22
Shell OH Company contra EPA, 950 F. 2d 741 (D.C. Cir. 1991).
23
Ibid., Slip Op. en 20-21.
24
Sistema de Gestin de Residuos Peligrosos; Definicin de Residuo Peligroso; Normas sobre
Mezclas y Derivado de; Norma Final Provisional, 57 Registro Federal 7628 (3 de marzo, 1992).
25
Vase Sistema de Gestin de los Residuos Peligrosos; Definicin de Residuos Peligrosos; Normas
sobre Mezclas y Derivado de; Normativa Propuesta, 57 Registro Federal 7636 (3 de marzo, 1992).
26
Tratamiento se define como cualquier mtodo, tcnica, o proceso, diseado para cambiar la
naturaleza o composicin fsica, qumica o biolgica de cualquier residuo peligroso con el fin de
convertir dicho residuo en un residuo no peligroso... 42 U.S.C. 6903(34); 40 C.F.R. 260.10.
L IM I TAC I O N E S DE L A L EG I S L AC I N Y PO L TI C A V IG E N TE . 147
cuacin. Cualquier instalacin que trate, almacene o evace los residuos peligro sos del
RCRA debe contar con un permiso de EPA, o estar operando bajo lo que se denomina
estado provisional pendiente del permiso final. Mediante los permisos RCRA, o las
normas aplicables a las instalaciones con estado provisional, EPA impone los requisitos
que controlan la limpieza de los residuos peligrosos para la accin correctora. A
continuacin se discuten dichos requisitos.
Existen algunas excepciones importantes al requerimiento de un permiso o al
cumplimiento de las normas provisionales antes de poder tratar o evacuar un resi duo
peligroso. Los generadores que originen menos de 100 kg de residuos peligro sos al mes
(generadores en pequeas cantidades) estn exentos del RCRA 27 . Los que generen ms de
100 kg pero menos de 1.000 kg al mes pueden acumular y tratar los residuos peligrosos
en la propia instalacin durante un perodo lmite de 180 das, en depsitos o
contenedores que pueden cumplir los requisitos regla mentarios mnimos sin necesidad de
obtener un permiso RCRA o cumplir las nor mas de estado provisional 28 . De igual forma,
los generadores de ms de 1.000 kg de residuos peligrosos al mes pueden acumular y
tratar los residuos in situ durante un perodo lmite de 90 das sin el requisito de obtener
un permiso 29 .
Adems, los propietarios u operadores de instalaciones de tratamiento comple -
tamente cerradas no estn sujetos al permiso RCRA o a los requisitos de estado
provisional 30 . Una instalacin de tratamiento completamente cerrada se define como una
instalacin que est directamente conectada a un proceso de produc cin industrial y que
est construida y operada de forma que evite la emisin de cualquier residuo peligroso, o
de cualquier constituyente del mismo, al ambiente durante su tratamiento 31 .
Estas excepciones son importantes, ya que permitirn el uso de la biorrecupe- racin
o de cualquier otra forma de tratamiento de residuos peligrosos sin necesi dad de obtener
primero la aprobacin del mtodo de tratamiento bajo el programa RCRA. EPA ha
adoptado de forma expresa que los residuos peligrosos se puedan tratar mientras se
almacenan en los depsitos o contenedores durante los perodos de acumulacin de 90 o
180 das 32 .
La excepcin que se aplica a las instalaciones de tratamiento completamente cerradas
tambin puede tener consecuencias importantes sobre el uso de la biorre- cuperacin
como forma de tratar flujos de residuos. Los biorreactores instalados como sistemas de
tratamiento final de tubera para los efluentes industriales se pueden clasificar bajo el
RCRA como instalaciones de tratamiento completamente cerradas. Adems de que
reducen las inquietudes reglamentarias debido a su natu raleza cerrada, los biorreactores
se pueden disear tambin para tratar flujos residuales industriales especficos. La
integracin de los biorreactores en los procesos
27
40 C.F.R. 261.5(a).
28
40 C.F.R. 262.34(d).
29
40 C.F.R. 262.34(a).
30
40 C.F.R. 264.1(g)(5).
31
40 C.F.R. 260.10.
32
51 Registro Federal 10146, 10168 (24 de marzo, 1986).
148 BI O T RAT A M IE N T O D E RE SI DU O S T X I C OS Y PEL I G R OS O S
33
La poltica contenido en y las normas derivado de y mezcla discutidas anteriormente quizs
no sean aplicables a los biorreactores integrados en procesos industriales para la minimiza- cin de
residuos. Los requisitos del RCRA para el tratamiento, almacenamiento, y evacuacin de residuos
peligrosos solamente se aplican despus de que se genere un residuo peligroso (Day, 1990). Por lo tanto,
los biorreactores utilizados para el tratamiento de los flujos de procesos industriales con el fin de evitar la
generacin de un residuo peligroso, no entrarn en los requisitos del RCRA. Sin embargo, otras normas de
EPA (p. ej., los permisos NPDES bajo el Acta de! Agua Limpia) pueden ser aplicables para los efluentes de
estos biorreactores, segn el medio al que finalmente se vierta el efluente.
34
Enmiendas de 1984 sobre Residuos Slidos y Peligrosos, Pub. L. No. 98-616.42 U.S.C. 6901 y ss.
35
Vase 40 C.E.R. 264.92-264.100.
36
La definicin unidad de gestin de residuos slidos ha puesto a un gran nmero de estructuras
al alcance de los requisitos de accin correctora. EPA estima que existen 5.700 instalaciones de
tratamiento, almacenamiento y evacuacin en Estados Unidos, lo que engloba a unas 80-000 unida- des de
gestin de residuos slidos. Esto no incluye a las instalaciones federales que se cuentan por centenas y que
tambin estn sujetas a estos requisitos (Bakst, 1991). El programa de accin correctora del RCRA se
espera que supere en nmero, con mucho, al programa Superfondo (Bakst, 1991).
.17
40 C'.F.R. 264.101.
'8
42 u.s.c.
6924(d).
W
40 C.F.R. 268.30.
4 11
40 C.F.R. 268.31.
41
40 C.F.R. 268.32.
42
40 C.F.R. 268.33
43
40 C.F.R. 268.34.
150 BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
cer Tercio 44 . Las normas de evacuacin terrestre (NETs) se han convertido en uno
de los elementos ms controvertidos del programa RCRA, e influyen directa mente
sobre el uso de la biorrecuperacin en las acciones correctoras de las insta laciones
RCRA.
La prohibicin de evacuacin terrestre no es aplicable si se puede demostrar que
no se producir ninguna migracin de los constituyentes peligrosos fuera de la
unidad de evacuacin mientras ios residuos sean peligrosos 45 . En este caso, es
posible lograr una excepcin a las NETs solicitando una peticin de no migra cin
a EPA 46 .
Sin embargo, en ausencia de tal solicitud, las NETs requieren que, antes de la
evacuacin terrestre, los residuos peligrosos sean pretratados mediante un mtodo
especifico (p. ej., incineracin), o que el nivel de concentracin de residuo cum pla
un nivel establecido, lo que se denomina normas de tratamiento. En la norma Tercer
Tercio, por ejemplo, la biorrecuperacin ha sido identificada como un m todo
permisible de tratamiento para 16 residuos diferentes. Incluso cuando se ha yan
establecido determinados mtodos de tratamiento, existe un mecanismo regla -
mentario que permite el uso de mtodos alternativos equivalentes a los mtodos de
tratamiento que se hayan especificado 47 . Cuando se han establecido unas normas de
tratamiento, se puede utilizar cualquier mtodo incluyendo la biorrecupera cin
capaz de conseguir el valor lmite de la norma de tratamiento antes deja.
evacuacin ai terreno de los residuos._________________________
... EL problema radica en Tos niveles de concentracin que se hayan fijado en las
normas de tratamiento. Cuando se implantaron las restricciones de evacuacin te -
rrestre en las enmiendas al RCRA de 1984, EPA exigi que las normas de trata -
miento se fijasen segn la reduccin de residuos que se pudiese conseguir utili zando
la mejor tecnologa disponible contrastada (MTDD). Los sectores ms crticos han
denunciado que, como consecuencia de este requisito, las normas de tratamiento se
suelen basar en los niveles de descontaminacin que se pueden lo grar mediante
tecnologas convencionales, como por ejemplo la incineracin, y, por lo tanto, en
objetivos de descontaminacin artificialmente altos, difciles de conseguir
biolgicamente (Bakst, 1991; Day, 1990; Glass, 1991). Los sectores crticos tambin
han cuestionado el requisito MTDD por dar lugar a unas normas de tratamiento
basadas en la tecnologa y no en la salud (Day, 1990; Thayer, 1991).
Otra inquietud es que las NETs pueden restringir los casos en los que se puede
utilizar la tecnologa de biorrecuperacin. Las NETs consideran que ciertos resi duos
peligrosos no se pueden localizar en o sobre el suelo 48 si previamente no se tratan
con una tecnologa especfica, o cumplen las normas de tratamiento aplica-
44
Recientemente, algunas partes de la norma tercera se han devuelto a !a agencia. Vase Ges-
tin de Productos Qumicos Residuales contra EPA, 976 F. 2d 2 (D. C. Cir. 992) 40 C.F.R.
268.35.
45
42 U.S.C. 6924(d)( 1).
* 40 C.F.R. 268.6.
41
40 C.F.R. 268.42(b).
48
Evacuacin terrestre se define como la disposicin de un residuo peligroso en o sobre... el
suelo. 40 C.F.R. 268.2{c).
LI M I TAC I O NE S D E L A LE GI S L AC I N Y PO L T IC A VI G EN T E .. 151
bles. Por lo tanto, cualquier disposicin del material suelo o aguas subterr neas
contaminado con residuos peligrosos listados en las NETs puede disparar el requisito
de pretratamiento. Los sectores crticos han sealado que esto puede restringir el uso
de la biorrecuperacin como mtodo primario o secundario de tratamiento (Day, 1990).
Recientemente, EPA ha adoptado una serie de medidas para plantear estos pro -
blemas. Las enmiendas al RCRA de 1984 establecieron una excepcin de cuatro aos a
la aplicabilidad de las NETs al suelo y a los escombros contaminados que recibiesen
una accin de respuesta mediante el programa Superfondo o una acccin correctora
RCRA 49 . Esta excepcin estatutaria expiraba el 8 de noviembre de 1988. EPA ha
completado la excepcin mediante una serie de exenciones nacionales que consisten en
un perodo de dos aos antes de la aplicacin de los requisitos NETs al suelo y a los
escombros contaminados con una serie de residuos especficos 50 . Por ejemplo, en la
norma Tercer Tercio recientemente promulgada, EPA estable ci una exencin nacional
para el suelo y los escombros contaminados con diver sas categoras de residuos,
incluyendo aquellos con las normas de tratamiento ba sadas en la incineracin,
vitrificacin, y tratamiento del mercurio 51 .
EPA ha reconocido que los requisitos MTDD de las NETs quizs no sean apli cables
a las acciones correctoras RCRA o CERCLA hasta que se establezcan las normas
MTDD para el suelo y los escombros contaminados 52 . Las normas MTDD se
establecieron paia los flujos residuales de procesos o para los residuos puros, no para
materiales, como suelo y escombros, contaminados con residuos peligro sos (Thayer,
1991).
Sin embargo, cuando caduquen las exenciones nacionales, el suelo y los es combros
contaminados con residuos sujetos a las NETs no se podrn evacuar de
49
42 U.S.C. 6924(d)(3).
30
Las exenciones nacionales para el suelo y los escombros contaminados con residuos especfi cos
sujetos a las NETs estn codificadas en 40 C.F.R. 268.30 (c) (exencin para el suelo y los escombros
contaminados con residuos F001-F005); 40 C.F.R. 268.31 (a)( 1) (exencin para el suelo y los escombros
contaminados con residuos F020-F023 o F026-F028); 40 C.F.R. 268.32(d)(l) y (d)(2) (exencin para el
suelo y los escombros contaminados con los residuos de la lista de Califor- nia); 40 C.F.R. 268.33(c)
(exencin para el suelo y los escombros contaminados con los residuos Primer Tercio con un estndar de
tratamiento basado en la incineracin); 40 C.F.R. 268.43 (d) (exencin para el suelo y los escombros
contaminados con los residuos Segundo Tercio con una norma de tratamiento basada en la incineracin); 40
C.F.R. 268.35(c), (d) y (e) (exencin para diversas categoras de residuos del Tercer Tercio).
51
Registro Federal 22.520, 22.634-22.635 (1 de junio, 1990). La exencin nacional para suelos y
escombros contaminados con los residuos peligrosos listados en la norma Tercer Tercio ha sido prorrogada
hasta el 8 de mayo de 1993. Las restricciones globales de evacuacin terrestre para los residuos Tercer Tercio
entraron en vigor el 8 de agosto de 1990.
52
EPA est desarrollando estndares MTDD por separado para los suelos y escombros contami nados con
residuos listados en las NETs. Los estndares MTDD para los escombros se promulgaron en agosto de 1992:
Restricciones de Evacuacin Terrestre para Residuos Listados Nuevos y Es combros Peligrosos, 57 Registro
Federal 37194 (18 de agosto, 1992). La norma recoge 17 tecnolo gas diferentes de tratamiento MTDD
incluyendo la biorrecuperacin que se pueden utilizar para tratar los escombros peligrosos.
152 BI O T RATA M IE N T O DE R ES ID U O S T X I C O S Y PE LI G R O S OS
forma terrestre sin un pre-tratamiento. Mientras tanto, las normas de tratamiento para el
suelo y los escombros contaminados se establecen mediante la emisin de exenciones
genricas o lugar-especficas 53 . Las exenciones se pueden otorgar si el residuo no se
puede tratar para conseguir un nivel especfico, o bien, cuando la tecnologa de
tratamiento no es apropiada para el residuo. El. solicitante debe demostrar que, debido
a que las propiedades fsicas y qumicas de residuo difie ren significativamente de las
que presentaban los residuos analizados durante el desarrollo de la norma de tratamiento,
el residuo no se puede tratar a los niveles especificados o mediante los mtodos
propuestos 54 .
EPA ha propuesto tambin otras posibles soluciones a los problemas plantea dos por
las NETs. En julio de 1990, EPA propuso una serie de reglamentos para llevar a cabo la
accin correctora en las instalaciones de tratamiento, almacena miento y evacuacin
RCRA 55 . Las normas propuestas incorporan varios concep tos importantes. Por ejemplo,
las normas de accin correctora tienen en cuenta un proceso ms flexible de evaluacin
del lugar. EPA espera que la flexibilidad en el proceso de evaluacin de la accin
correctora permita que los lugares RCRA lle guen al estado de limpieza ms rpidamente
de lo que ha sucedido con los lugares Superfondo (Thayer, 1991).
La norma propuesta adopta tambin un estndar basado en la salud para elegir el
nivel apropiado de limpieza en las instalaciones RCRA. Respecto a los residuos
cancergenos, las normas de limpieza para los constituyentes en aguas subterr neas,
aguas superficiales, suelos y aire se basaran en los estndares especficos
medioambientales que existen en la actualidad, como por ejemplo, los niveles mximos
de contaminantes establecidos en el Acta de Agua Potable. Cuando no existan tales
estndares, los estndares de limpieza se estableceran de acuerdo con el rango de
seguridad para riesgos, I * 10' 4 - 1 * 10 6 56 . Se emplearan factores lugar-especficos
para establecer dnde fijar el nivel de limpieza dentro de este rango 57 .
La norma propuesta tambin creara unidades de gestin de accin correctora, o
UGACs, que posibilitaran el tratamiento de los residuos peligrosos dentro de una zona
especfica sin disparar las normas de tratamiento NET (Thayer, 1991). Si se implantasen,
las UGACs representaran una excepcin importante a la aplicabi- lidad de las NETs.
Este concepto hara posible que varias unidades diferentes de gestin de residuos slidos
en una instalacin RCRA fuesen consideradas como una sola unidad a efectos de las
NETs. Los residuos se podran recolectar y verter sobre el suelo dentro de los lmites de
una UGAC sin disparar las normas de trata
53
40 C.F.R. 268.44.
54
40 C.F.R. 268.44(a).
55
Accin Correctora para Unidades de Gestin de Residuos Slidos en las Instalaciones de Residuos
peligrosos, 55 Registro Federal 30798 (27 de julio, 1990). Estas normas propuestas sus tituirn a las normas
generales de accin correctora que se encuentran ahora en 40 C.F.R. 264.101.
56
55 Registro Federal 30798, 30826 (27 de julio, 1990).
57
Ihdem.
LI M I TAC I O NE S D E L A LE GI S L AC I N Y PO L T IC A VI G EN T E . 153
miento NETs; de esta forma se lograra una mayor flexibilidad en la seleccin de los
mtodos de tratamiento (Bakst, 1991) 5X .
Adems, EPA ha propuesto recientemente el establecimiento de una unidad de
almacenamiento y tratamiento denominada edificio de contencin sy . Dentro de esta
unidad se podran tratar y almacenar ciertos residuos peligrosos, incluyendo es -
combros contaminados, sin disparar los requisitos NETs 60 . Es importante que EPA
haya reconocido que los proyectos de biorrecuperacin in situ a menudo tienen lugar
dentro de estructuras temporales, y haya solicitado sugerencias sobre qu niveles se
deben aplicar en estos edificios de tratamiento con biorrecuperacin . 6I EPA ha
reconocido tambin que se realizan diversos tipos de tratamientos, inclu yendo la
biorrecuperacin, en depsitos y contenedores, y ha propuesto qu se permitan estas
tcnicas de tratamiento dentro de los edificios de contencin 62 .
,l
Los reglamentos que implantan el concepto UGAC se promulgaron en febrero de 1993. 58 Registro
Federal 8658 (16 de febrero, 1993).
5<>
Vase Restricciones de Evacuacin Terrestre para Residuos Listados Nuevos y Escombros
Contaminados, 57 Registro Federal 958, 978 (9 de enero, 1992).
M
Bajo el programa NET actual, el tratamiento y almacenamiento de residuos peligrosos dentro de una
estructura es considerado como una pila externa de residuos, lo que a su vez es considerado como un tipo de
evacuacin terrestre prohibida. 57 Registro Federal 958, 978. (9 de enero, 1992).
(,
57 Registro Federal, 958, 981 (9 de enero, 1992).
62
Ibidem.
M
42 U.S.C. 6991-6991 i.
M
40 C.F.R. 280.66(a).
65
40 C.F.R. 280.70(a), 280.72.
154 B I O T RATA M I E N T O D E RE SI DU O S T X IC O S Y PEL I GR O S O S
46
40 C.F.R. 270.65{a).
67
40 C.F.R. 261.4{e),(f).
1,6
Vase definicin de estudio de tratabilidad en 40 C.F.R. 260.10.
6
' Las oficinas regionales de EPA, o los oficiales estatales en los estados autorizados, pueden aprobar
cantidades adicionales.
70
De C.F.R. 261.4(f)(l) a (f)(H)-
71
CERCLA Seccin 121(d)(2)(A), 42 U.S.C. 9621 (d)(2)(A).
L IM I TAC I O N E S DE L A L EG I S L AC I N Y PO L TI C A V IG E N TE . 155
72
Las partes potencialmente responsables son aquellas personas que tengan o puedan tener la
responsabilidad de parte o de todo el coste de limpieza en una zona Superfondo. Las PPRs pueden incluir a
las personas propietarias de una instalacin de evacuacin de residuos, a las que organiza ron la evacuacin
de sustancias peligrosas en tal instalacin, o a aquellas que transportaron sustan cias peligrosas a dicha
instalacin. 42 U.S.C. 9607(a).
73
Plan Nacional de Contingencia para la Contaminacin con Petrleo y Sustancias Peligrosas;
Dictamen Final, 55 Registro Federal 8666, 8760 (8 de marzo, 1990).
74
40 C.F.R. 268.44.
75
55 Registro Federal 8666, 8761 (8 de marzo, 1990).
156 BJOTRATAMIENTO DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
76
Acta de Enmiendas y Reautorizacin del Supcrfondo, 1986 (SARA), Pub. L, No. 99-499.
7 7
42 U.S.C. 962Hb).
7
42 U.S.C. 966(b).
LIMITACIONES DE LA LEGISLACIN Y POLTICA VIGENTE... 157
Las seis zonas corresponden a la zona Superfondo de Libby, Libby, Montana; el Derrame del Oleoducto
de Park City, Park City, Kansas; la zona Superfondo de Allied Signal, St. Joseph, Michi gan; la Base Area de
Eielson, Alaska; la Base Area de ill en Utah; y la zona Superfondo de Brookhaven, en Brookhaven,
Massaehusetts (U.S. I-PA. 199l<).
158 BIOTRATAMIENTO DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
to de los productos disponibles (Barron, 1991). Este sistema permitir a las agen cias
reguladoras federales y estatales evaluar rpidamente los productos alternati vos cuando
tengan que seleccionar medidas correctoras para la limpieza de derra mes de petrleo.
ha caracterizado los logros conseguidos hasta la fecha cuando afirm: Creo que el
progreso realizado es ...un progreso de colaboracin entre la industria, el go bierno y la
comunidad investigadora e indica lo que se puede conseguir cuando todos los sectores
implicados cooperan (U.S. EPA, i 99la).
80
15 U.S.C 2601 y ss. El TSCA fue aprobado en 1976.
81
TSCA Seccin 5, 15 U.S.C 2604.
82
TSCA Seccin 5{e), 15 U.S.C. 2604(e); TSCA Seccin 6, 15 U.S.C. 2605.
81
TSCA Seccin 4, 15 U.S.C. 2603.
84
TSCA Seccin 8, 15 U.S.C. 2607.
85
TSCA Seccin 3(2), 15 U.S.C. 2602(2).
86
El perodo de revisin se puede ampliar a 90 das ms. TSCA Seccin 5(c), 1 5 U.S.C. 2604(c).
87
TSCA Seccin 5<e), 15 U.S.C. 2604(e).
88
TSCA Seccin 5(a)(2), 15 U.S.C. 2604(a)(2).
160 BIOTRATAMIENTO DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS.
89
TSCA Seccin 5(i), 15 U.S.C. 2604(i).
90
Sin embargo, conforme a la Seccin 5(h)(3) del TSCA, las sustancias qumicas fabricadas o procesadas
solamente en pequeas cantidades (como determina EPA por norma), y tan slo para l&D, estn exentas de los
requisitos de notificacin de la Seccin 5.15 U.S.C. 2604(h)(3).
91
15 U.S.C. 2607(b).
92
El amianto seria un ejemplo de sustancia qumica listada de forma implcita en ei inventario del TSCA.
93
Propuesta de Poltica Sobre Algunos Productos Microbianos, 49 Registro Federal 50886 (31 de
diciembre, 1984). La Declaracin de Poltica de EPA se public dentro de un documento ms amplio titulado
Propuesta para un Marco Reglamentario de Biotecnologa, 49 Registro Federal 50856 (31 de diciembre,
1984).
94
Sustancia qumica se define segn el TSCA como cualquier sustancia orgnica o inorgnica con
identidad molecular particular, incluyendo: (i) cualquier combinacin de tales sustancias pro vocada totalmente
o en parte como consecuencia de una reaccin qumica provocada por el hombre o la naturaleza... TSCA
Seccin 3(2), 15 U.S.C. 2602(2).
LIMITACIONES DE LA LEGISLACIN Y POLTICA VIGENTE... 161
En respuesta a los sectores crticos que argumentaban que la aproximacin pro puesta
por EPA a la hora de controlar los microorganismos nuevos se basaba en los procesos
mediante los cuales se crearon dichos organismos, en vez de basarse en el riesgo que
pudiesen suponer, EPA cambi su aproximacin a la definicin de microorganismos
nuevos segn la Seccin 5 del TSCA. En 1986, como parte del Marco Coordinado para
la Regulacin de la Biotecnologa, EPA emiti una De claracin de Poltica anunciando
que los microorganismos intergenncos (los que implican la combinacin del material
gentico procedente de organismos de diferentes gneros) se consideraran sustancias
qumicas nuevas bajo la Seccin 5 del TSCA 95 . Quienes intentasen fabricar estos
microorganismos con fines comerciales tendran que entregar una NPM a EPA. La
agencia tambin solicit una entrega voluntaria de NPMs a quienes intentasen introducir
en el medio ambiente microorganismos intergenricos con fines de investigacin, y a
quienes trabajasen con microorganismos patgenos o que contuviesen material gentico
procedente de patgenos 96 .
Por lo tanto, segn el programa actual TSCA de biotecnologa, quienes tengan la
intencin de utilizar microorganismos intergenricos para la biodegradacin comercial
de residuos peligrosos tendrn que entregar un NPM a EPA. Quienes tengan intencin de
introducir en el ambiente microorganismos intergenricos para investigar la
biorrecuperacin, sern animados a que entreguen a EPA un NPM de forma voluntaria.
EPA no ha recibido ningn NPM hasta la fecha en relacin a microorganismos
intergenricos utilizados con fines de biorrecuperacin. Los proyectos de biorre -
cuperacin se suelen centrar en la bioestimulacin o el bioaumento de los micro -
organismos, ya presentes en una zona, que son capaces de descomponer los cons -
tituyentes peligrosos en los suelos o aguas subterrneas (Glass, 1991). Sin embargo, la
industria de biorrecuperacin muestra cada vez un mayor inters hacia el uso de
microorganismos modificados genticamente. Muchos expertos creen que se utili zarn
microorganismos modificados genticamente para la biorrecuperacin en biorreactores, y
quizs en demostraciones de campo, durante los prximos cinco- diez aos (Garg y
Garg, 1990; Glass, 1991; Roy, 1991). Como sealan Sayler y Day (1991), La prxima
generacin de productos y procesos de biorrecuperacin incorporar de forma rutinaria
la ingeniera gentica para mejorar las cepas y con seguir un mayor control del proceso,
garantizar un alto rendimiento, y controlar la actividad ambiental.
Se cree que los microorganismos modificados genticamente ofrecern varias
ventajas para la biorrecuperacin. Muchos expertos creen que los microorganis mos
modificados genticamente permitirn ejercer un mayor control sobre las ru tas
degradadoras enzimticas, incluyendo la direccin del flujo metablico para
1.5
Marco Coordinado para la Regulacin de la Biotecnologa, 51 Registro Federal 23.302
(26 de junio, 1986). La declaracin de poltica de EPA aparece en 51 Registro Federal 23.313.
1.6
EPA cree que los investigadores que tengan intencin de introducir al ambiente microorga nismos
intergenricos normalmente entregarn una NPM voluntaria. La agencia no ha recibido nin guna NPM
bajo las provisiones de patgenos de la declaracin de poltica de 1986.
162 BIOTRATAMIENTO DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
9 7
15 U.S.C. 2607(e).
98
Biotecnologa; Solicitud de Comentarios Respecto a la Aproximacin Reglamentaria, Registro
Federal 7.027 (15 de febrero, 1989).
LIMITACIONES DE LA LEGISLACIN Y POLTICA VIGENTE. 163
para un uso no listado, habra requerido la entrega de una notificacin de uso nuevo.
En julio de 1991, EPA reuni a un subcomit del Comit Consejero para la Ciencia
Biotecnolgica (BSAC) con el fin de plantear las cuestiones cientficas surgidas en el
borrador de una propuesta normativa TSCA de biotecnologa, ac tualmente en fase de
desarrollo por parte de la agencia". Las normas del borrador no proponen continuar con
la aproximacin delineada en el documento de 1988; es decir, establecer una lista con
todos los usos comerciales de los microorganis mos que se producen de forma natural, y
exigir la entrega de notificaciones de uso nuevo para los microorganismos no incluidos
en la lista.
En las normas propuestas en el borrador de julio de 1991, EPA expres su idea de
cambiar la definicin de microorganismos nuevos adoptada en la Declara cin Poltica
de 1986. La nueva norma probablemente presentar varias alternati vas para definir qu
microorganismos estaran sujetos a notificacin bajo la Seccin 5 del TSCA. La
aproximacin preferida por EPA es definir microorganismos nuevos como aquellos con
tendencias hereditarias deliberadamente modificadas, exceptuando los microorganismos
que entran dentro de algunas categoras de ex clusin. Bajo el programa actual, los
microorganismos que se producen de forma natural no se consideraran nuevos. Adems,
segn la aproximacin preferida por EPA, los microorganismos utilizados para la
biorrecuperacin que entran en una de las categoras de exclusin, de modo similar, no
estaran sujetos a^xamen bajo la Seccin 5~del TSCA.
En resumen, la [bjiorrecuperacin probablemente no se ver afectada de for ma
significativa por el TSCA si no se emplean microorganismos modificados ge -
nticamente (Bakst, 1991).
Biorrecuperacin de PCBs
Los bifenilos policlorados (PCBs) se encuentran dentro de una posicin reglamen taria
nica. Cuando el Congreso aprob el TSCA en 1976, destac expresamente a los PCBs
para su regulacin. Mediante la Seccin 6(e) del TSCA l<w . el Congreso prohibi la
fabricacin, procesamiento o distribucin de PCBs a partir del 1 de enero de 1978,
excepto si se fabricaban para uso completamente interno, y orden a EPA promulgar
normas que controlasen la evacuacin de los PCBs l0t .
Las normas de EPA para la evacuacin de PCBs son aplicables a los PCBs y
artculos con PCB que contengan concentraciones de PCB de 50 ppm o ms 102 . Los
PCBs, tal y como se definen en las normas, incluyen: fluido dielctrico de aceite mineral
y otros lquidos que contienen concentraciones de PCB de 50 ppm
o ms, pero menores a 500 ppm; suelos y otros materiales slidos contaminados
** El BASC es un comit cientfico que aconseja sobre cuestiones de biotecnologa; forma parte de la
Oficina de Prevencin, Pesticidas y Sustancias Txicas de EPA (OPPTS).
100
15 U.S.C. 2605{e).
101
Ibd.
102
40 C.F.R. 761,60.
164 BiOTRATAMIENTO DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
con PCBs, y los materiales dragados y fangos del tratamiento de aguas residuales
municipales I03 . Los artculos con PCB incluyen: transformadores, condensadores, y otros
artculos fabricados que contienen PCBs l04 .
Permisos de operacin comercial. Las normas sobre PCBs plantean dos tipos de permisos
de evacuacin; permisos comerciales y permisos I&D (Giamporcaro, 1991). Los
permisos comerciales pueden ser concedidos por la oficina central de EPA o por las
oficinas regionales. Las normas PCB normalmente consideran que los PCBs y los
artculos PCB se pueden evacuar en una incineradora, un vertedero de residuos qumicos,
o en una caldera de alto rendimiento ,05 .
Las normas tambin contienen provisiones que permiten el uso de mtodos
alternativos para la destruccin de estos materiales 106 . Los mtodos alternativos tienen
que lograr un nivel de rendimiento equivalente al que se consigue mediante incineracin
o el uso de las calderas de alto rendimiento. Para que se consideren equivalentes, los
mtodos alternativos, como por ejemplo la biorrecuperacin, deben reducir las
concentraciones de PCBs por debajo de 2 ppm por cada cong nere de PCB, tal y como se
mide con la cromatografa de gases !07 . El efecto prctico de esta norma es que la
concentracin real de PCBs en una muestra contami nada que se considera evacuada
variar en funcin del nmero de congneres de PCBs presentes en la muestra. Por
ejemplo, si la muestra contaminada contienen solamente un congnere de PCB, la
concentracin final de PCBs tendra que ser de-2 ppm o menos. Sm embargo, si 1a
muestra - contuviese seis congneres diferentes, la concentracin final de PCBs en la
muestra podra ser de 12 ppm o menos. Esta flexibilidad posibilita el uso de mtodos de
evacuacin alternativos.
EPA ha concedido 38 permisos comerciales para la evacuacin de PCBs. Vein ticuatro
de estos permisos han sido para mtodos de evacuacin alternativos, aun que solamente
uno implicaba la descomposicin biolgica de los PCBs.
Permisos l&D. Las normas sobre PCBs tambin tienen en cuenta los permisos I&D para su
evacuacin l08 . Los permisos que implican el uso de menos de 500 Ib de material con
PCBs se revisan a nivel regional, mientras que los que implican 500 Ib o ms son
revisados por la oficina central de EPA.
Hasta la fecha, EPA ha aprobado 15 permisos I&D que implicaban mtodos de
descomposicin biolgica para los PCBs. Seis de estos permisos se han aprobado a nivel
central, y nueve a nivel regional. Toda la investigacin se ha centrado en el uso de
microorganismos producidos de forma natural, y en diversos mtodos de descomposicin
biolgica. Cada ao sube el nmero de solicitudes I&D. Por ejem-
1 0 3
4 0 C . F. R . 7 6 1 . 3 .
'* Ibid.
m
4 0 C . F. R . 7 6 1 . 6 0 ( a ) , ( b ) .
1 0 6
4 0 C . F. R . 7 6 1 . 6 0 ( e ) .
lu7
Desde un punto de vista qumico, los PCBs estn formados por 209 estructuras qumicas diferentes,
denominadas congneres.
I 0
* 4 0 C . F. R . 7 6 1 . 6 0 ( i ) ( 2 ) .
LIMITACIONES DE LA LEGISLACIN Y POLTICA VIGENTE.. 165
po, de los seis permisos expedidos por la oficina central de EPA, el primero se concedi
en 1988 para el uso del hongo de carne de gallina con el que se tratara suelo
contaminado con PCBs. En 1990, se entregaron dos permisos I&D. Uno era para un
estudio in situ de los factores que incluyen sobre la biorrecuperacin anae robia de los
sedimentos de un estanque contaminados con PCBs. El otro era para el tratamiento de
suelos y sedimentos contaminados con PCBs en un biorreactor a escala piloto. En 1991
se concedieron tres permisos I&D. Dos fueron para el trata miento in situ de suelos y
sedimentos de ro contaminados, y el tercer proyecto consista en un estudio sobre la
eficacia al combinar fotolisis y biorrecuperacin en el tratamiento de suelos
contaminados.
para degradar los PCBs a gran escala. Es de esperar que durante la prxima dca da,
cuando la investigacin avance, se puedan conceder ms permisos comerciales para la
biorrecuperacin de los PCBs.
Conclusin
Durante los ltimos aos se ha avanzado mucho a la hora de plantear las reas
problemticas en la aplicacin de la biorrecuperacin; queda an mucho por ha cer.
Quizs el logro ms importante haya sido el establecimiento de una infraes tructura
para la recopilacin y diseminacin de datos e informacin sobre biorre cuperacin.
Estos esfuerzos deben continuar.
1,1
7 U.S.C. 150aa(c).
112
Vase 7 C.F.R. Parte 330, 7 C.F.R. Parte 340.
m
Vase 7 C.F.R. 340.2 para la lista de microorganismos que son o contienen pestes agrcolas.
114
7 C.F.R. Parte 340.
LIMITACIONES DE LA LEGISLACIN Y POLTICA VIGENTE.. 167
El rea que puede necesitar de una atencin especial quizs sean los obstcu los o
los desincentivos reglamentarios respecto al uso de esta tecnologa. En parti cular, las
exenciones nacionales recogidas en las NETs del RCRA pueden obsta culizar, al menos
a corto plazo, la aplicacin de esta tecnologa. Adems, cuando se desarrollen las
normas MTDD para los suelos y escombros contaminados, se debe enfocar
cuidadosamente el impacto potencial sobre la biorrecuperacin.
Por ltimo, la promulgacin de las normas finales sobre biorrecuperacin del
TSCA puede ayudar a acelerar el desarrollo de la siguiente etapa en la biorrecupe racin
el uso de microorganismos genticamente modificados. Estas normas clarificarn
la naturaleza y alcance de la aplicabilidad del TSCA para el uso de microorganismos en
la biorrecuperacin, y, por otra parte, ayudar a las empresas de biorrecuperacin a
evaluar mejor los costes de inversin asociados al desarro llo de los microorganismos
genticamente modificados para este propsito.
Referencias bibliogrficas
Bakst, J. S. 1991. Impact of present and future regulations on bioremediation. J. Ind. Mi-
crobiol. 8:13-22.
Barron, T. 1991. EPA closing in on standards for oil spil) bioremediation. Environ. Today
2:1,59.
Day, S. M. 1990. Federal regulations and policies hold the veto power over commercia-
lization of biotreatmentan industry perspectiva. Hazardous Materials Management,
HAZMACON 90, Anaheim, CA.
Garg, S., and D. P. Garg. 1990. Genetic engineering and pollution control. Chent. Eng. Progr.
86:46-51.
Giamporcaro, D. E. 1991. Bioremediation waste control more promising. Reprint. BioWorld. lo
Publishing, San Mateo, CA.
Glass, D. J. 1991. The promising hazardous waste bioremediation market in the United States.
Reprint. Decisin Resources, Burlington, MA.
Hill, R. L. 1991. An overview of RCRA: The mind-numbing provisions ofthe most com-
plicated environmental statute. Environ. Law Rep. 21:10254-10276.
National Govemors Association. 1991. States Use of Bioremediation: Advantages, Cons-
traints and Strategies. National GovernorsAssociation, Washington, D.C.
Nicholas, R. B, and D. E. Giamporcaro. 1989. Natures prescription. Hazmat World , pp. 30-36,
June.
OTA. 1991. Bioremediation for Oil Spills. Office of Technology Assessment, OTA-BP-O-
70, U.S. Government Printing Office, Washington, D.C., May.
Roy, K. A. 1991. Ecovas hopes for success hitched to bioremediations rising star. Hazmat
World, pp. 40-43, May.
Sayler, G. S., and S. M. Day. 1991. Special Report: BioremediationExperts explore va- rious
biological approaches to cleanup. Hazmat World, pp. 51-53 (January).
Spann, J. J. 1991. EPA workshop on irnovative technologies. Water Environ. Technol., p. 18
(sidebar).
Thayer, A. M. 1991. Bioremediation: Innovative technology for cleaning up hazardous waste.
Chem. Eng. News 69:23-25, 28, 32-37, 41-44.
168 BiOTRATAMIENTO DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
U.S. EPA. 1988. ROD (Record of Decisin) Annual Report. U.S. Environmental Protection
Agency, Washington, D.C., July.
U.S. EPA. 1990. Summary Report on the EPAIndustry Meeting on Environmental Appli -
cations of Biotechnology. U.S. Environmental Protection Agency, Washington, D.C.,
February 22.
U.S. EPA. 1991a. Summary of the Second EPA/Industry Meeting on Environmental Appli -
cations of Biotechnology. U.S. Environmental Protection Agency, Washington, D,C.,
June 14.
U.S. EPA. 1991 b. Furthering the Use of Innovative Technologies in OSWER Programs.
U.S. Environmental Protection Agency, Washington, D.C., August, Doc. No. 9380.0-17FS.
U.S. EPA. 1991c. Bioremediation in the Fietd. U.S. Environmental Protection Agency,
Washington, D.C., December.
U.S. EPA, 199W. Bioremediation Research Program Strategy. U.S. Environmental Protec -
tion Agency, Washington, D.C., December.
Captulo 7
BIORRECUPERACIN IN SITU:
FUNDAMENTOS Y PRCTICAS
Carol D. Litchfield
Chester Environmentaf
MonroeviHe,
Pennsylvania
169
170 BIOTRATAMIENTO DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
Pozo Pozos
de de Posible sjsiema
control recuperacin de
tratamiento
Caractersticas de la zona
geotcnicos deben determinar una serie de factores: la naturaleza exacta y exten sin
horizontal y vertical de la contaminacin; si impacta en el agua subterrnea o tan slo en
los suelos de la zona vadosa; la profundidad hasta el agua subterrnea; la conductividad
hidrulica y/o la permeabilidad de los suelos (es decir, si se pue de llevar el agua y los
nutrientes a travs de las zonas saturada y vadosa, y con qu rapidez); la productividad
especfica y el coeficiente de almacenamiento del acu- fero; la zona de influencia de los
pozos de recuperacin o reinyeccin; la direc cin del flujo de las aguas subterrneas; la
capacidad del acufero para recibir el agua reciclada; la capacidad de intercambio de
cationes en los suelos para estimar la adsorcin de nutrientes por parte de las partculas
de suelo; y la composicin aninica y catinica de los suelos y aguas subterrneas.
Se han desarrollado mtodos estndar para algunos de estos ensayos geotcni cos 5
(vase Tabla 7.1), y se deben utilizar si se est proyectando la biorrecupera- cin in situ
o una estrategia correctora ms tradicional. Para otros tipos de ensa yos, las Refs, 30 y 80
contienen detalles sobre los procedimientos aceptados. En muchos estados se exige que
un hidrogelogo/gelogo cualificado sea quien reali ce los ensayos. Los requisitos de los
permisos estatales estn cambiando constan temente, por lo tanto, s existen dudas acerca
de la situacin en un estado en particular, lo mejor es consultar con el departamento de
medio ambiente de dicho estado.
Adems, es imprescindible conocer los mtodos de perforacin e instalacin de los
pozos de control para asegurarse de que se utiliza el diseo correcto con el fin de
controlar de forma ptima la BIS l > .
Si se desea tener xito en el tratamiento de cualquier zona contaminada, es necesario
tener un conocimiento lo ms amplio posible sobre geologa, geoqumi ca, e hidrologa,
ya que un aspecto importante de la BIS es el reciclaje o introduc cin del agua en los
suelos cerca de la superficie o subsuperfcie. Es crucial, en tonces, que se establezca un
control hidrogeolgico para que el agua no entre en zonas no deseadas y, de esta forma,
se extienda an ms la contaminacin. Tam-
Tamao de partcula D
Contenido de humedad -
Densidad relativa 4
mnima Densidad in situ 2
Gravedad especfica 2
Limites Atterberg
Densidad bruta D
D-1587 o D-2937
Descripcin de suelos D-2488
Conductividad hidrulica en la zona vadosa,
comparacin de mtodos, una gua D-5126
BIORRECUPERACIN IN SITU: FUNDAMENTOS Y PRCTICAS 173
Caractersticas microbianas
La premisa bsica para una BIS es que los microorganismos estn presentes en la zona
subsuperfcial, que se adapten a los contaminantes, y que estn presentes todos los
nutrientes necesarios o se puedan aadir para lograr una biodegradacin ptima de los
contaminantes.
Esto parece algo obvio y fundamental, pero, en fechas tan recientes como los aos
70, se podan encontrar datos en la literatura especializada en relacin a las bajas cifras
de microorganismos que existan en las aguas subterrneas. Se lleg a la hiptesis de
que el agua que se filtraba a travs del suelo perda todos los micro organismos y, a
consecuencia de ello, las aguas subterrneas se mostraban esen cialmente estriles. En
1973, McNabb y Dunlap 59 revisaron la literatura existente y afirmaron, al contrario de
las creencias prevalentes, que los microorganismos estaban muy extendidos en la
subsuperficie. Por lo tanto, postularon que exista la posibilidad de una degradacin
microbiana de los materiales orgnicos en las aguas subterrneas. Ghiorse y Balkwill,
durante un estudio realizado en las zonas primitivas de Oklahoma y Louisiana 1 ,
demostraron tambin que exista una poblacin microbiana muy diversa en la
subsuperficie.
Sin embargo, muchos cientficos crean que los microorganismos obtenidos en la
subsuperficie, de hecho, eran contaminantes derivados de los suelos superficia les. Esta
cuestin no se resolvi hasta que McNabb y Mallard 60 , y Wilson y colaboradores 1 ' 4 ,
describieron una tcnica para recuperar suelos subsuperficiales no contaminados. La
tcnica depende de un dispositivo de recorte acoplado a un ex- trusor utilizado para
empujar el suelo del portatestigos w>95 . Se utiliz una modificacin de esta tcnica
durante el programa de perforaciones profundas llevado a
174 BIOTRATAMtENTO DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
al. demostraron tambin que los plsmidos catablicos que se producen de forma
natural se podan mantener sin la introduccin de cepas autctonas 42 . Ms recien-
temente, se constat la presencia de plsmidos en gran nmero de bacterias aisla das
procedentes de las perforaciones profundas realizadas en el Savannah River 29 . Por lo
tanto, se puede producir un intercambio gentico y modificaciones genti cas naturales
en respuesta a los compuestos orgnicos introducidos.
Tambin hay que sealar que se han encontrado mltiples poblaciones de bac terias
coexistiendo en los suelos 47 - 77 . Azam y Hodson han llegado a resultados similares
estudiando conjuntos microbianos martimos; en este caso, observaron ci nticas no
lineales durante la mineralizacin de los compuestos orgnicos en un rango de
concentracin de sustrato de tres rdenes de magnitud. Los autores atri buyeron esto a
la existencia de diversas poblaciones con distintas constantes de afinidad que
respondan a las diferentes concentraciones de los sustratos 6 . Estas poblaciones
mltiples provocan cinticas multifsicas para la biodegradacin. El grado en el que
se produce esto durante una BIS real an no se ha investigado. Si las cinticas
multifsicas fuesen operativas en aguas subterrneas contaminadas, esta informacin
servira para responder a los sectores crticos que consideran la BIS no aplicable en
una zona determinada porque las concentraciones son demasiado altas o bajas.
Finalmente, para que los microorganismos degraden activamente a los conta -
minantes, deben contar con suficientes nutrientes. Normalmente, la subsuperficie es
deficiente en uno o ms nutrientes o micronutrientes, por lo tanto, para lograr una
degradacin ptima es crucial llevar a cabo ensayos de tratabilidad con el fin de
establecer qu componentes son necesarios y en qu concentraciones. Esto im plica el
ensayo de los suelos y de las aguas subterrneas para conseguir fuentes de nitrgeno,
como amonaco o nitratos; para obtener fosfatos y otros micronutrien tes. Swindoll et
al. 85 y Lewis et al. 50 demostraron la importancia de estos nutrientes en la degradacin
microbiana. Lewis et al. descubrieron que la duracin del perodo de retardo era
mayor en las poblaciones microbianas con ambientes limi tados en nitrgeno o fsforo,
y que la duracin era menor con la adicin de nitr geno o fsforo 50 . Tambin es
importante saber si el sistema es anxico u oxidado, ya que esto afectar al estado de
oxidacin-reduccin de muchos elementos y, por lo tanto, a su biodisponibilidad. En
1987, Barker et al. demostraron que unos niveles bajos de oxgeno limitaban la
biodegradacin del benceno, tolueno y xileno (BTX). En general, los ensayos de
tratabilidad suelen consistir en la adicin de oxgeno u otro receptor de electrones a
los materiales en el acufero, junto con una fuente de nitrgeno y/o fosfatos, y quizs
tambin oligoelementos o potasio.
Limitaciones a la BIS
Existen cuatro factores importantes que pueden limitar la aplicacin de una BIS:
Tiempo.
Metabolitos secundarios o recalcitrantes.
176 BIOTRATAMIENTO DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
Geoqumica e hidrologa.
Factores ambientales.
El grado en el que estos factores limitan la aplicacin de una BIS a menudo es ms una
cuestin poltica y econmica que cientfica. Sin embargo, hay situaciones,
especialmente en lo que respecta a los productos de degradacin y al control hi-
drogeolgico, que podran limitar la aplicacin de esta tecnologa.
Tiempo
Hay que ser extremadamente cuidadosos, sin embargo, a la hora de extrapolar los
datos de laboratorio a situaciones reales. Recientemente se dio una situacin
potencialmente limitante en el laboratorio para una zona que contena clorobence- no.
Uno de los intermediarios en la biodegradacin del clorobenceno es el 3-cloro -
catecol 73 . Cuando se observaron las bacterias degradadoras del clorobenceno, se
descubri que algunas colonias aparecan-de color prpura. Esta coloracin era
resultado de la acumulacin de 3-clorocatecol. Afortunadamente, las bacterias ais ladas
de las colonias no purpreas podan utilizar el 3-clorocatecol y el cloroben ceno. De
esta forma, se pudo demostrar que el consorcio microbiano natural no permitira la
acumulacin de este intermediario durante la BIS, y la agencia estatal aprob la
biorrecuperacin in situ en esta zona 68 . Por lo tanto, hay que tener en cuenta que el
consorcio bacteriano natural quizs consiga mineralizar mejor las mezclas complejas
de lo que indican los cultivos puros o incluso los estudios de laboratorio y, de este
modo, se evite la acumulacin de productos secundarios me- tablicos.
Existen compuestos, mezclas, y sustancias que son recalcitrantes, o para las cuales
no se ha desarrollado todava ningn tratamiento in situ que sea prctico. Entre estos
compuestos estn: algunos de los bifenilos policlorados (PCBs), espe cialmente los
PCBs congneres mayores del 1.248; los hidrocarburos policclicos aromticos (HPAs)
con anillos de seis miembros o ms; los residuos mezclados con radioistopos; el
amianto; y algunos metales, como cadmio, mercurio o cro mo. Si existen metales en
una zona durante los estudios de tratabilidad, se deber demostrar que no se produce
una movilizacin de los complejos metlicos que anteriormente permanecan
inmviles. Algunos cambios sutiles en el pH o en el contenido orgnico pueden alterar
la afinidad o estado de oxidacin de un metal y hacerle ms mvil, con lo que se crea
un problema donde anteriormente no exista. De modo similar, el metabolismo
microbiano puede provocar la precipitacin de metales en forma de sulfuros en
condiciones anaerobias. Esto puede ser ventajoso o provocar un atascamiento en el
acufero. La utilidad de la precipitacin selectiva in situ de los metales an tiene que
ser investigada en este campo.
Geoqumica e hidrologa
podr implantar la BIS. Una formacin poco permeable tardar ms en alcanzar los
niveles de limpieza, pero si el tiempo no es un factor crtico, la BIS es posible en las
formaciones de arcilla arenosa o arcillosas. Si se dan estas circunstancias, cualquier
tecnologa de tratamiento emplear ms tiempo del. qu necesitara en una formacin
ms permeable (>10 5 cm/s).
Factores ambientales
Los factores ambientales que se citan con ms frecuencia como influyentes en la BIS
son: temperatura, pH, y potencial redox. Ninguno de estos factores es necesa riamente
una limitacin para la BIS. La temperatura de las aguas subterrneas no cambia con
las estaciones. Puede que haya un ligero incremento de 3 a 4 C en Jas aguas
subterrneas poco profundas sureas durante el verano, y una cada similar en las
aguas subterrneas norteas durante el invierno, pero estas fluctuaciones no estn
fuera de los lmites del crecimiento microbiano. De hecho, el consorcio mi crobiano
presente en el acufero se ha adaptado a estas condiciones, y es capaz de
metabolizarse y reproducirse a temperatura ambiente.
El pH del acufero normalmente es de 6-9. En algunos casos los contaminantes
han bajado el pH a 4, pero incluso en esta situacin se ha podido demostrar la
biodegradacin en el laboratorio, lo que indica que el consorcio microbiano es capaz
de adaptarse a las condiciones ambientales locales. El peligro potencialvie-, ne
cuando se produce un cambio .drstico en el-pH debido al cido generado du rante 1a
biodegradacin. Si el acufero no est bien tamponado, existe el potencial,
especialmente con los compuestos altamente clorados, de que se produzcan altas
cantidades del ion de cloruro, lo que puede causar una cada importante del pH. Esto
podra conducir a una inhibicin de la actividad microbiana, y, tal y como se
mencion anteriormente, a movilizar compuestos que antes estaban inmoviliza dos.
Sin embargo, con unos estudios de tratabilidad cuidadosamente diseados, se puede
prever este problema, y disear mtodos para evitarlo.
Lo mismo se puede decir para el potencial redox y para los cambios que pue dan
ser necesarios en la disponibilidad de oxgeno del acufero. La mayora de los
acuferos no contaminados y poco profundos (menos de 60 m) contienen algo de
oxgeno, mientras que los acuferos ms profundos a menudo contienen sulfato o
nitrato. Sin embargo, donde existe contaminacin no es raro encontrar niveles muy
bajos de oxgeno disuelto. Esto se puede deber a la BIS natural. De hecho, Rifai y
Bedent, utilizando el modelo de ordenador Bioplume , confirmaron que los ni veles
de oxgeno suban al mismo tiempo que bajaban los de nitrgeno 4 . Chang et al. 1617
llegaron a conclusiones similares constatando que los pozos que contenan <0,9 ppm
de BTX tenan unos niveles de oxgeno disuelto mucho ms altos que los pozos que
contenan > 1,0 ppm de BTX. Por lo tanto, para conseguir una biode gradacin ptima,
el oxgeno puede llegar a ser el factor limitante ms crtico. Se puede solventar esta
deficiencia mediante la adicin de aire a la subsuperficie, de oxgeno puro, de
perxido de hidrgeno, o de otro receptor de electrones, como nitratos. La desventaja
ai aadir oxgeno, obviamente, es que tambin se van a oxidar el hierro y el
manganeso, que posteriormente se pueden precipitar y provo-
BIORRECUPERACIN !N SITU: FUNDAMENTOS Y PRCTICAS 179
car el atascamiento del acufero. Pero si se han realizado los estudios necesarios,
descritos anteriormente, la precipitacin se puede evitar y se puede lograr la oxi -
genacin del acufero de forma segura.
Ventajas de la BIS
Introduccin histrica
La primera BIS documentada fue descrita por Jamison et al. en 1975 43 . Estos autores
describieron el derrame de un oleoducto, en el este de Pennsylvania, que con tamin
una formacin dolomtica con gasolina. Despus de la recuperacin del producto
libre, y de la adicin de 58 toneladas de sulfato de amonaco, 29 tonela das de fosfatos
mono- y dibsicos, y aire, estimaron que se haban biodegradado aproximadamente
172 m 3 (1.080 barriles) de gasolina. Esto representaba un tercio del derrame original,
509 m 3 (3.200 barriles) 43 . El nmero de bacterias fue originalmente de 1 x 10 3 a 1 x
O 4 unidades formadoras de colonias/ml, y alcanzaron
180 BIOTRATAMIENTO DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
un mximo de 4,2 * 10 1 ' unidades formadoras de colonias/ml antes de que dismi nuyese
la poblacin cuando desapareci la fuente de carbono de la gasolina. 71
Desde los estudios iniciales de Raymond 71 , tanto l como sus colaboradores han
realizado otras biorrecuperaciones in situ en acuferos arenosos en Millville, New
Jersey 7 -; Long Island, Nueva York 4 *; y Watsonville, California 51 . En cada caso se
realizaron descripciones de la geologa/hidrologa, se hicieron ensayos de tratabilidad y
se determinaron las necesidades de aditivos, nutrientes y oxgeno, adems de informar
sobre el nivel de recuperacin logrado.
temperatura, el nivel del agua, y las cifras microbianas utilizando los procedimientos
estndares publicados. Los testigos se recogieron aspticamente antes de que se
iniciase el proyecto, despus de 3 meses de operacin, y aproximadamente 5 me ses
despus.
Los resultados, despus de aproximadamente 9 meses de operacin, mostraron que
mientras se consuman el oxgeno y los riutrientes, descenda a cantidad de BTEX, lo
que serva como indicativo del consumo microbiano. Adems, haba un incremento de
hasta un orden de magnitud en las cifras de las bacterias degradado- ras de
hidrocarburos, especialmente en los niveles ms profundos. El incremento dependa de
la proximidad al oxgeno, de los nutrientes y de la presencia de BTEX. Se observ que
el oxgeno se consuma primero en los niveles menos profundos y que no pasaba al
siguiente nivel hasta que el nivel de BTEX era indetectable o <10 ppb. Tal y como se
poda esperar en un acufero arenoso, la permeabilidad no se vio afectada por la
adicin de perxido de hidrgeno 88 - 89 .
Se han dado varios casos en los que aadiendo perxido de hidrgeno a sistemas de
BIS han surgido problemas de descomposicin rpida 2,3881 o precipitacin 91 , Esto ha
propiciado el desarrollo de ensayos con nitrato como receptor de electro nes alternativo.
Una de las primeras zonas en las que se emple nitrato para la degradacin anaerobia
de los hidrocarburos del petrleo fue el Valle del Rhin, en Saarbrcken, Alemania 90 . En
la Tabla 7.2 se muestra informacin bsica sobre la geologa y contaminacin en esta
zona. Se eligi la BIS debido al tamao de la zona y a la presencia de edificios sobre la
zona contaminada. El hierro y el metano fueron algunos de los problemas a plantear. Al
agua filtrante se le aadi cloruro de amonaco, fosfatos y nitrato, este ltimo en
cantidades de aproximadamente 4 mg/mg de hidrocarburo. El agua de lavado tambin
se satur con oxgeno mediante un sistema de aireacin. Con el tiempo aumentaron
tanto el C0 2 como el gas nitrgeno. Los hidrocarburos alifticos descendieron desde un
nivel inicial de 2 mg/1 hasta 0,1 mg/I despus de dos aos. Originalmente presentes en
torno a 5,5 mg/1, los xilenos descendieron hasta 0,08 mg/1 durante los 24 meses de
operacin. Los investigadores constataron que la cantidad de oxgeno que se calculaba
que estaba presente no poda justificar el grado de biodegradacin, y llegaron a la con -
clusin de que en este sistema el principal receptor de electrones haba sido el
nitrato 9 .
En la Estacin del Guardacostas estadounidense de Traverse City, Michigan, se
realiz otro estudio importante sobre la BIS en condiciones desnitrificantes. Las
caractersticas generales de esta zona se han descrito anteriormente 4 88 .
Para el ensayo piloto de desnitrificacin se trat con nitrato de sodio y nutrien tes
(fosfatos y cloruro amnico), aadidos mediante una galera de infiltracin uti lizando
agua recirculada, una parcela de 10 m por 10 m, pendiente arriba de la zona del ensayo
aerobio. La desaparicin del benceno y del tolueno coincidi con el suministro de
oxgeno al acufero, suministro realizado mediante el agua airea da recirculada. Sin
embargo, el incremento repentino de nitratos en las aguas sub-
TABLA 7.2 Seleccin de es udios de casos publicados sobre la biorrecuperacin in situ de derrames de
hidrocarburos del petrleo
182
L OCALIZACIN T IPOY E NSAYO G EOLOGA * REA A DICIN R ECEPTOR D URACIN R ENDIMIENTO P ROBLEMAS E MPRESA ** R EFERENCIA
ro
CANTIDAD DE COMPLETO DE DE DEL
CONTAMINANTE (C) O NUTRIENTES ELECTRONES TRATAMIENTO
ENSAYO
PILOTO (P)
_j
W ATSONVILLE , G ASOLINA , 3.785 C CL, ML, SC, ND*** NH ;, H,O 2 13 MESES >90% ND DERS 53 3>
C ALIFORNIA FOSFATOS
1 OCAS . SW >
45 * 90 *
>
i
L ONG ISLAND , G ASOLINA , c GP, CL 2,2 M NH 4 *. HA 64 MESES >99% ND DERS 48 M
Con frecuencia, no es posible elevar el agua desde la zona saturada hasta la zona vadosa
para efectuar la BIS. Esto es especialmente cierto cuando existe una pobre permeabilidad
o capacidad de retencin del agua, o cuando la profundidad del agua subterrnea es
mayor de 3-6 m. Algunos avances recientes en los diseos de ingenie ra han dado lugar
al desarrollo de tratamientos in situ para la zona vadosa, forzando aire en dicha zona y
aadiendo humedad y nutrientes a los suelos (Fig. 7.2). Una de las primeras
descripciones de esta tcnica fue la realizada por Staps para una operacin a escala
piloto en Holanda 83 . Como describi Staps, el tratamiento de la zona vadosa mediante la
adicin de aire, humedad, y nutrientes es una combinacin de procesos fsicos y
qumicos. Para el ensayo piloto, se aadieron 125 kg de gaso lina a un suelo arenoso
limpio que se ventil mediante un sistema al vaco conecta do a drenes. Se aplicaron
nutrientes para mantener una relacin C:N:P de 100:10:2. Se construyeron drenes
adicionales para recuperar el agua aadida. Durante 250 das de ensayo, la concentracin
de gasolina en la arena descendi desde 17.000 ppm hasta <100 ppm. Los investigadores
calcularon que el 58 por ciento de la gasolina se separ mediante la evaporacin
originada por la ventilacin, el 27 por ciento desapareci por la degradacin microbiana,
el 7,5 por ciento se incorpor al agua recuperada, y el 6,8 por ciento se perdi debido a
la evaporacin incontrolada S3 .
Desde ese experimento, se han llevado a cabo varios estudios piloto en rela cin a los
hidrocarburos del petrleo. Ely y Heffner obtuvieron una patente para usar un sistema al
vaco en la zona vadosa que aumentaba la biodegradacin natu
BIORRECUPERACIN IN SITU: FUNDAMENTOS Y PRCTICAS 185
ral 25 , por otro lado, Hinchee et al. presentaron un modelo conceptual para aumen tar la
biodegradacin mediante la ventilacin del suelo 2 ' 39 . Todos estos autores han
reconocido la importancia de diferenciar entre las prdidas por evaporacin y por
biodegradacin, y sugieren la necesidad de controlar los gases de ventilacin, el C0 2 y
O r La ventaja que ofrecen estos sistemas es que se pueden extraer o empujar a travs
de la zona vadosa gran.des cantidades de aire, lo que permite introducir oxgeno en
cantidades proporcionalmente mayores por ejemplo, 1,7 Nm 3 /h (1 scfm) introducir
23 lb/dia de oxgeno en los suelos 58 . Otra ventaja es que los gases pueden penetrar
ms fcilmente que los lquidos, con lo que se incre menta la transferencia en masa del
oxgeno y se distribuye a ms organismos el oxgeno necesario para la biodegradacin.
Esta tecnologa de ventilacin del suelo se adapta bien a la situacin descrita por
Brown y Crosbie En este caso, la mayor parte de la contaminacin con ga solina residual
estaba presente a una profundidad de 3-4 m por debajo de la super ficie terrestre, en una
regin de fluctuaciones estacionales en el agua subterrnea. Se construyeron seis pozos
para la extraccin del vapor del suelo. Los vapores recogidos del suelo pasaron por
columnas de carbn vegetal para tratarlos antes de su emisin a la atmsfera. Se
control el gas efluente y la cantidad de C0 2 , inicialmente del 11 por ciento, descendi
hasta el 1,4 por ciento cuando baj la concentracin media de hidrocarburos l2 .
En la Base Area de Hill, Utah, se produjo un derrame de JP-4 en enero de 1985
provocando la emisin de 102,2 m 3 (27.000 galones) de combustible. 22 Aproxi-
madamente 7,6 m 3 (2.000 galones) se recuperaron como producto libre, y el com bustible
restante se retuvo en los suelos no saturados de un rea de aproximada mente 4.050 m 2
(1 acre) y 17 m de profundidad. El nivel fretico estaba a 200 m de la superficie
terrestre. Se emple una ventilacin del suelo de alto volumen duran te unos 9 meses y
se control la respiracin ese tiempo. Los autores calcularon que se degrad entre el 15
y 25 por ciento de los hidrocarburos, y el resto de los pro ductos voltiles se recogieron
medante el procedimiento de ventilacin de suelos de alto volumen. Despus, se instal
un sistema de bioventilacin que operaba a una velocidad igual a la tercera parte o la
mitad de la tasa de alto volumen y se controlaron los efectos provocados por la adicin
de humedad y humedad ms nutrientes. En base al control de los gases in situ y en las
chimeneas de ventilacin, los autores llegaron a la conclusin de que el 80-90 por
ciento de la disminucin producida en los hidrocarburos del petrleo se poda atribuir a
la biodegradacin con adicin de humedad, el parmetro ms importante. La
combinacin de bioventilacin de alto y bajo volumen redujo el nivel de contaminantes
en los suelos desde una media de 410 mg/kg, antes de la ventilacin, hasta una media de
2,8 mg/kg, despus de 21 meses de tiempo total de tratamiento 22 .
Estos resultados que muestran los efectos beneficiosos de la adicin de nu trientes no
han sido confirmados por Miller et al. para un derrame de combustible de reactor en la
Base Area de Tyndall, Florida 62 . En este lugar, un ensayo piloto de 7 meses mostr que
solamente el 55 por ciento de los hidrocarburos se biode- gradaban, pero ajustando tan
slo el flujo de aire, en base a un consumo de oxge no del 2 al 4 por ciento, el resultado
se poda haber incrementado hasta el 85 %.
186 BIOTRATAMIENTO DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
de ningn resultado.
Recientemente, la empresa Chester Environmental ha
completado en el laboratorio un estudio de viabilidad sobre los
suelos procedentes de una zona de trata miento de madera en el
Sureste de Estados Unidos. Utilizando la respirometra, las
cuentas de placas y los anlisis qumicos, se demostraba que,
con el aumento de nutrientes, los microorganismos eran capaces
d e d e g r a d a r e n t r e e l 4 0 y e l 9 0 p o r c i e n t o d e l o s H PA s
i n d i v i d u a l e s , i n c l u y e n d o l o s H PA s p o t e n c i a l m e n t e c a n c e r g e n o s y
el pentaclorofenol. El estudio de matraz dur 6 semanas y se
lleg a una situacin nutriente-limitante bajo estas condiciones
de ensayo98. Se est planificando una demostracin piloto en una
prueba de campo para el verano de 1993.
Mueller et al. tambin han demostrado la biodegradacin
m i c r o b i a n a n a t u r a l d e l o s H PA s e n l o s s u e l o s d e l a z o n a
S u p e r f o n d o d e l A m e r i c a n C r e o s o t e Wo r k s e n P e n s a c o l a , F l o r i d a
M
. En sus condiciones de ensayo, el grado de eliminacin vara
d e s d e e l 5 3 p o r c i e n t o d e l o s H PA s q u e c o n t i e n e n c u a t r o o m s
anillos fusionados, hasta >80 por ciento de los compuestos
O t r o s t r a b a j o s h a n d e m o s t r a d o q u e m u c h o s d e l o s H PA s s e
pueden degradar bajo condiciones anaerobias. Esta idea surgi
observando la produccin de metano en una zona contaminada
con creosota en St. Louis Park, Minnesota 23Se comprob que el
naftaleno y los compuestos fenlicos desaparecan ms rpida -
mente de lo que se esperaba, y que el metano se formaba
solamente en la mancha de contaminante. Por lo tanto, se estaba
produciendo una biorrecuperacin anaerobia natural24. Despus
se aislaron diversos grupos metablicos, incluyendo agru -
paciones de metanognicos (obligatoriamente anaerobias) y
Pseudomonas stutzeri ( r e s p i r a d o r a s d e n i t r a t o ) , e s t o s d o s l t i m o s
8I0RRECUPERACIN IN SITU: FUNDAMENTOS Y PRCTICAS 189
implicacin del trptofano en problemas de tipo mdico, y actualmente ha sido sustituido por
otros inductores de la dioxigenasa. Despus de una demostracin de campo que logr una
reduccin del TCE de 700 ppb a 90 ppb en 25 das mediante el uso de P. vepacia G4, se ha
planificado, para 1992, una recuperacin a escala real utilizando un nuevo inductor
(pendiente de patente) l00 .
En la base area de Moffit Field, en California, se realiz un ensayo ms am plio sobre un
sistema inductor de monooxigenasa. Este trabajo lo realizaron Mc- Carty y sus colaboradores
75 79
. Los estudios de campo se basaron en los resultados obtenidos por Higgins 37 en el Reino
Unido y por Wilson y Wilson; segn estos autores, la monooxigenasa del metano no es
especfica y declorar los disolventes aliftieos. Roberts et al 75 , describieron el diseo del
ensayo de campo. Por debajo de una capa de arcilla superficial con un espesor de unos 4 m,
el acufero poco profundo estaba contaminado con un disolvente aliftico clorado, el 1,1,1
-triclo- roetano (TCA). Los ensayos con trazador y los estudios de laboratorio mostraron que
se podan inducir metanotrofos aerobios en el sistema mediante el suministro de oxgeno y
metano. Estos gases se alteraron para evitar un exceso de crecimien to microbiano en los
pozos de inyeccin 75 . Se aadi TCE, cis- y trans- DCE, y VC al agua inyectada, y se sigui
su progreso a travs del acufero medante pozos de muestreo localizados aproximadamente a
1 m. Se calcularon los factores de retardo y se puls el sistema con metano y oxgeno. El
estudio continu durante 3 aos y se constat la degradacin de alrededor del 30 por ciento
del c/s-DCE, y de ms del 95 por ciento del VC durante el tercer ensayo <le 200 das. Sin
embargo, slo se transform entre el 10 y el 20 por ciento del TCE durante esta tercera etapa
de ensayo 79 . Los porcentajes de TCE y de m-DCE biotransformados haban sido mayores
durante la segunda etapa del ensayo, 10-30 por ciento y 30-58 por ciento, respectivamente 75 .
Las velocidades de flujo utilizadas para este estudio fueron bas tante rpidas (2 m/da), para
que la biodegradacin procediese con rapidez durante el corto intervalo del estudio. Estos
autores demostraron tambin que la monooxi genasa del metano era necesaria para las
biotransformaciones en este sistema, y que la induccin de la enzima slo se poda conseguir
mediante el suministro con tinuo de metano a los metanotrofos 79 .
Para la BIS anaerobia, Suflita y sus colaboradores demostraron que se poda degradar el
benzoato y el fenol de los lixiviados de vertederos bajo condiciones metanognicas o sulfato-
reductoras, pero la deshalogenacin reductora quedaba limitada al sistema metanognico s4 .
Ms tarde demostraron que la inhibicin del sulfato de la deshalogenacin del cido 2,4,5-
triclorofenoxiactico a veces se po da aliviar mediante la adicin de molibdato al
microcosmos del ensayo 3 '. Hasta el momento, no se ha informado sobre otros intentos de
modificar la deshalogena cin anaerobia natural con enmiendas de nutrientes que incluyan
molibdato.
Otros investigadores han constatado la degradacin del 2,4,6-trinitrotolueno (TNT)
mediante Phanerochaee chrysosporium y han sugerido la aplicacin de este hongo a los
suelos contaminados con TNT 26 . Tambin se ha comprobado que este mismo hongo degrada
los insecticidas alquihaluros que contaminan los suelos de acuferos y las aguas
subterrneas 4fi , pero, de nuevo, no se han llevado a cabo aplicaciones en sistemas de BIS ni a
escala piloto ni real.
BIOR RECU PE RACIN IN SITU: FUNDAMENTOS Y PRCTICAS 191
Existe un informe sobre la biorrecuperacin in situ en una planta de herbici das"' donde
el acuifero se encuentra 11 m por debajo de un depsito glacial, (este depsito est formado
por 8,5 m de arena cenagosa y arcilla situada encima de 3 m de arena gruesa y grava), y sobre
un lecho de esquisto. El contaminante era el 4- cloro-2-metilfenol, compuesto muy
biodegradable cuando se airea el agua subte rrnea. Se modificaron los sistemas existerites-de
bombeo y tratamiento incremen tando el nmero de pozos de inyeccin y recuperacin, y
aadiendo bombas de transporte por aire a los pozos de recuperacin. Despus de seis meses
de opera cin, se produjo una reduccin del 50 por ciento en el tamao de la mancha de
contaminante l .
Conclusiones
Reconocimientos
Para proporcionar una informacin resumida sobre las aplicaciones reales en los trabajos de
campo, adems de utilizar la literatura publicada, se ha contactado con numerosos expertos
en BIS, quienes han compartido generosamente sus experien cias e informes con la autora.
Agradezco tambin a G. Gromicko y S. F. Nishino su revisin del manuscrito, y a S. Snchez
su ayuda con la bibliografa.
Referencias bibliogrficas
1. Aelion, C. M., C. M. Swindoll, and F, K. Pfaender. 1987. Adaptation to and Biodegra-
dation of Xenobiotic Compounds by Microbial Communities from a Pristinc Aquifer.
Appt. Environ. Microbiol. 53:2212-2217.
2. Anonymous. N. D. In Situ Bioreclamation Case Study A. Gasoline Contamination in
Southern California. International Technology Corporalion. Torrance, CA, 4 pp.
192 BIOTRATAMIENTO DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
States of America as representad by the United States Department of Energy, Was hington,
D.C.
19. Davis, H. E., J. Jehn, and S. Smith. 1991. Monitoring Well Drilling, Soil Sampling, Rock
Coring, and Borehole Logging. pp. 195-237. In D. M. Nielsen (ed.), Practical Handbook of
Ground-Water Monitoring. Lewis Publishers, Chelsea, MI.
20. Downs, W. C., S. R. Hutchins, J. T. Wilson, R. H. Douglass, and D. J. Hendrix. 1989. Pilot
Project on Biorestoration of Fuel-Contaminated Aquifer Using Nitrate: Part I- Field
Design and Ground Water Modeling. pp. 219-233. NWWA/A-P1. Proceedings of the
Conference on Petroleum Hydrocarbons and Organic Chemicals in Ground Water:
Prevention, Detection and Restoration, Nov. 15-17, 1989. National Water Well Asso*
ciation, Dublin, OH.
21. Downey, D. C., R. E. Hinchee, M. S. Westray, and J. K. Slaughter. 1988. Combined
Biological and Physical Treatment of a Jet Fuel-Contaminated Aquifer. pp. 627-645.
NWWA/A-P1. Proceedings of Petroleum Hydrocarbons and Organic Chemicals in Ground
Water: Prevention, Detection and Restoration, Nov. 9-1 1, 1988. National Water Well
Association, Dublin, OH.
22. Dupont, R. R., W. J. Doucette, and R. E. Hinchee. 1991. Assessment of n Situ Biore-
mediation Potential and the Application of Bioventing at a Fuel-Contaminated Site, pp.
262-282. In R. E. Hinchee and R. F. Olfenbuttel (eds.), In Situ Bioreclamation.
Applications and lnvestigations for Hydrocarbon and Contaminated Site Remediation.
Butterworth-Heinemann, Boston, MA.
23. Ehrlich, G. G., E. M. Godsy, D. F. Goerlitz, and M. F. Hult. 1982. Microbial Ecology of a
Creosote-Contaminated Aquifer at St. Louis Park, Minnesota. Dev. Ind. Microbio!. 24:235-
245.
24. Ehrlich, G. G., D. F. Goerlitz, E. M, Godsy, and M. F. Hult. 1982. Degradation of Phenolic
Contaminants in Ground Water by Anaerobic Bacteria: St. Louis Park, Min nesota. Ground
Water 20:703-710.
25. Ely, D. L., and D. A. Heffner. 1988. Process for In Situ Biodegradation of Hydrocar bon
Contaminated Soil. U.S. Patent 4,765,902. Chevron Research Company, San Fran cisco,
CA.
26. Fernando, T., J. A. Bumpus, and S. D. Aust. 1990. Biodegradation of TNT (2,4,6-
Trinitrotoluene) by Phanerochaete chrysosporium. Appl. Environ. Microbio!. 56: 1666-
1671.
27. Flyvbjerg, J., E. Arvin, B. K. Jensen, and S. K.. Olsen. 1991. Biodegradation of Oiland
Creosote-Related Aromatic Compounds under Nitrate-Reducing Conditions. pp. 471 479. In
R. E. Hinchee and R. F. Olfenbuttel (eds.), In Situ Bioreclamation: Applica tions and
lnvestigations for Hydrocarbon and Contaminated Site Remediation. Butterworth-
Heinemann, Boston, MA.
28. Fogel, S., M. Findlay, and A. Moore. 1991. Enhanced Bioremediation Techniques for In
Situ and Onsite Treatment of Petroleum Contaminated Soils and Groundwater. pp. 201-
209. In E. J. Calabrese and Paul T. Kostecki (eds.), Petroleum Contaminated Soils, Vol. 2.
Lewis Publishers, Chelsea, MI.
29. Fredrickson, J. K., R. J. Hicks, S. W. Li, and F. J. Brockman. 1988. Plasmid Incidence in
Bacteria from Deep Subsurface Sediments. Appl. Environ. Microbio!. 54:2916-2923.
30. Freeze, R. A., and J. A. Cherry. 1979. Groundwater. Prentice-Hall, Engtewood Cliffs, NJ.
31. Ghiorse, W. C., and D. L. Balkwill. 1983. Enumeration and Morphological Characteriza-
tion of Bacteria Indigenous to Subsurface Environments. Dev. nd. Microbio!. 24:213-224,
194 BIOTRATAMIENTO DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
32. Ghorse, W. C., and J. T. Wilson. 1988. Microbial Ecology of the Terrestrial Subsur- face.
In A. I. Laskin (ed.), Advances in Applied Microbiology. 33:107-172. Acadcmc Press,
New York, NY.
33. Gibson, S. A., and J. M. Suflita. 1990. Anaerobio Biodegradation of 2,4,5-Trichloro-
phenoxyacetic Acid in Samples from a Methanogenic Aquifer: Stimulation by Short-
Chain Organic Acids and Alcohols. Appl. Environ. Microbiol. 56:1825*1832.
34. Godsy, E. M., D. F. Goerlitz, and G. G. Ehrlich. 1983, Methanognesis of Pbenolic
Compounds by a Bacterial Consortium from a Contaminated Aquifer in St. Louis Park,
Minnesota. Bull. Environ. Contam. Toxicol. 30:261-268.
35. Hayman, J. W., R. B. Adams, and J. J. McNally. 1988. Anaerobic Biodegradation of
Hydrocarbon n Confned Soils beneath Busy Places: A Unique Problem of Methane
Control, pp, 383-396. NWWA/APl. Proceedings of Petroleum Hydrocarbons and Or ganic
Chemicals n Ground Water: Prevention, Detection and Restoration, Nov. 9-11,
1988. National Water Well Association, Dublin, OH.
36. Hegeman, G. D., and D. G. Nckens. 1991. Aerobic bacterial remediation of aliphatic
chlorinated hydrocarbon contamination. U.S. Patent 5,024,949. BioTrol, Inc., Chas- ka,
MN.
37. Higgins, 1. J. Apr. 6, 1982. Biotransformations Using Methane-litilizing Bacteria. U.S.
Patent 4,323,649. imperial Chemical Industries, Ltd. London,
38. Hinchee, R. E., and D. C. Downey. 1988. The Role ofHydrogen Peroxide in Enhanced
Bioreclamation. pp. 715-722. NWWA/API. Proceedings of Petroleum Hydrocarbons and
Organic Chemicals in Ground Water: Prevention, Detection and Restoration, Nov. 9-11,
1988. National Water Well Association, Dublin, OH.
39. Hinchee, R. E^, D. C. Downey, andT^ Beard-1989. Enhancing"Biodegradation of Pe- ~
troleum Hydrocarbon Fuels through Soil Venting. pp. 235-248. NW WA/APl. Procee dings of
the Conference on Petroleum Hydrocarbons and Organic Chemicals in Ground Water:
Prevention, Detection and Restoration, Nov. 15-17, 1989. National Water Well Association,
Dublin, OH.
40. Hutchins, S. R., W. C. Downs, D. H. Kampbell, G. B. Smith, J. T. Wilson, D. A. Kovacs,
R. H. Douglass, and D. J. Hendrix. 1989. Pilot Project on Biorestoration of Fuel-
Contaminated Aquifer Using Nitrate: Part IILaboratory Microeosm Studies and Field
Performance, pp. 589-604. NWWA/API. Proceedings of the Confe rence on Petroleum
Hydrocarbons and Organic Chemicals in Ground Water: Preven tion, Detection and
Restoration, Nov. 15-17, 1989, National Water Well Association, Dublin, OH.
41. Hutchins, S. R., W. C. Downs, J. T. Wilson, G. B. Smith, D. A. Kovacs, D. D. Fine, R.
H. Douglass, and D. J. Hendrix. 1991. Effect of Nitrate Addition en Biorestoration of
Fuel-Contaminated Aquifer: Field Demonstraron. Ground Water. 29:571-579.
42. Jain, R. K., G. S. Sayler, J. T. Wilson, L. Houston, and D. Pacia. 1987. Mantenance and
Stability of Introduced Genotypes in Groundwater Aquifer Material. Appl. Environ.
Microhiol. 53:996-1002.
43. Jamison, V. W., R. L. Raymond, and J. O. Hudson, Jr. 1975. Biodegradation of Hgh-
Octane Gasoline in Groundwater. Dev. nd. Microbioi. 16:305-312.
44. Jhaveri, V. W., and A. J. Mazzacca. 1983. Bioreclamation of Ground and Ground water.
Presented at the 4th National Conference on Management of ControUed Hazardous Waste
Sites. Groundwater Decontamination Systems, Inc., Paramus, NJ. 19 pp.
45. Jhaveri, V., and A. J. Mazzacca. 1985. Bioreclamation of Ground and Ground Water by
In-Situ Biodegradation. Case History. Presented at the 6th National Conference on
BIOR RECUPE RACIN IN SITU: FUNDAMENTOS Y PRACTICAS
micals in Ground Water Prevention, Detection, and Restoration, Nov. 20-22, 1991.
National Water Well Association, Dublin, OH.
59. McNabb, J. F,, and W. J. Dunlap. 1973. Subsurface Biological Activity in Relation to
Ground Water Pollution. Ground Water 13:33-44.
60. McNabb, J. F., and G. E. Mallard. 1984. Microbiological Sampling in the Assessment
of Groundwater Pollution. pp. 235-260. In G. Bitton and C. P. Gerba (eds ), Ground -
water Pollution Microbiology. Wiley, NY.
61. McKee, J. E,, F. B. Laverty, and R. N. Hertel. 1972. Gasoline in Groundwater. J,
Water Potlul. Conlr. Fcd. 44:293-302.
62. Miller, R. N., C. C. Vogel, and R. E. Hinchee. 1991. A Field-Scale Investigation of
Petroleum Hydrocarbon Biodegradation in the Vadose Zone Enhanced by Soil Venting
at Tyndall AFB, Florida, pp. 283-302. In R, E. Hinchee and R. F. Ofenbuttel (eds ), In
Situ Bioreclamation: Applications and lnvestigations for Hydrocarbon and Contami-
nated Site Remediation. Butterworth-Heinemann, Boston, MA.
63. Mote, P. A., D. F. Leland, and D. R, Smallbeck. 1990. Accelerated Site Remediation
Using Enhanced In Situ Biodegradation. Harding Lawson Associates, Novato, CA, 15
pp.
64. Mueller, J. G., D. P. Middaugh, S. E. Lantz, and P. J. Chapman. 1991, Biodegradation
of Creosote and Pentachlorophenol in Contaminated Groundwater: Chemical and Bio -
logical Assessment. Appl Environ. Microbinl. 57:1277-1285.
65. Nelson, M. J. K.., S. O. Montgomery, W. R. Mahaffey, and P. H. Pritchard. 1987.
Biodegradation of Trichloroethylene and Involvement of an Aromatic Biodegradative
Pathway. Appl. Environ. Microbiol. 53:949-954.
66. Nelson, M. J. K.., J. V. Kinsella, and T. Montoya. 1990. in Situ Biodegradation ofTCE
Contaminated Groundwater. Environ. Progr. 9:190-196.
67. Nelson, M. J. K., and A. W. Bourquin. 1990. U. S. Patent 4,925,802. Ecova Corpora -
tion, Redmond, WA.
68. Nishino, S. F., J. C. Spain, L. A. Belcher, and C. D. Litchfield. 1992. Chlorobenzene
Degradation by Bacteria Isolated from Contaminated Groundwater. Appl. Environ.
Microbiol. 58:1719-1726.
69. Ogunseitan, O. A., E. T. Tedford, D. Pacia, K, M. Sirotkin, and G. S. Sayler. 1987.
Distribution of Plasmids in Groundwater Bacteria. J. Ind. Microbiol. 1:311-317.
70. Parsons, F., G. B. Lage, and R. Rice. 1985. Biotransformation of Chlorinated Organic
Solvents in Static Microcosms. Environ. Toxicol. Chem. 4:739-742.
71. Raymond, R. L., V. W. Jamison, and J. O. Hudson. 1976. Beneficia! Stimulation of
Bacterial Activity in Groundwaters Containing Petroleum Products in I. Physical, Che -
mical Wastewater Treatmenl, A-fChE Symp. Ser. 73:390-404.
72. Raymond, R. L.,. V. W. Jamison, J. O. Hudson, R. E. Mitchell, and V. E. Farmer. 1978.
Field Application of Subsurface Biodegradation of Gasoline in Sand Formation. Final
report submitted to American Petroleum Institute, Washington, D.C. 137 pp.
73. Reineke, W., and H.-J. Knackmuss. 1984, Microbial Metabolism of Haloaromatics:
Isolation and Properties of a Chlorobenzene-Degrading Bacterium. Appl. Environ. Mi-
crobiol. 47:395-402.
74. Rifai, H. S., and P. B. Bedient. 1987. Bioplum IITwo Dimensional Modeling for
Hydrocarbon Biodegradation and7 Situ Restoration. pp. 431-450. NWWA/API. Pro -
ceedings of Petroleum Hydrocarbons and Organic Chemicals in Groundwater:
Prevention, Detection and Restoration, Nov. 17-19, 1987. National Water Well
Association, Dublin, OH.
75. Roberts, P., L. Semprini, G. Hopkins, and P. McCarty. 1989. Biostimulation of Me-
BIORRECUPE RACIN IN SITU: FUNDAMENTOS Y PRCTICAS 197
Treatmcnt: Biosystems for Pollution Control. Air and Waste Management Asso-
ciation. Pittsburgh. PA.
90. Werner, P. I985. A New Way for the Decontaminaron of Polluted Aquifers by Bio-
dcgradation. Water Suppiv 3:41-47.
91. Wetzel, R. $., D. H. Davidson, and C. M. Durst. N. D. Effectiveness of In Situ
Bio- logical Treatment of Contaminated Groundwater and Soils at Kelly Air Forc
Base, Texas. Science Applications International Corporation, McLean, VA. 18 pp.
92. Wilson, B. H., and M. V. White. 1986. A Fixed-Film Bioreactor to Treat Trichlo-
roethylene-Laden Waters from Interdiction Wells, pp. 425-436. In Proceedings of
the Sixth National Symposium and Exposition on Aquifer Restoration and Ground
Water Monitoring, May 19-22,1986. National Water Well Association, Dublin, OH.
93. Wilson, J. T., and B. H. Wilson. 1985. Biotransformation of Trichloroethylene in
Soil. Appl. Environ. Microhiol. 49:242-243.
USO DE MICROORGANISMOS
MODIFICADOS PARA LA
BIODEGRADACIN DE
MATERIALES PELIGROSOS EN
TRABAJOS DE CAMPO
Michael A. Gealt
Departamento de Biociencia y Biotecnologa Universidad de Drexel Philadelphia,
Pennsylvania
Morris A. Levin
instituto de Biotecnologa de Maryiand Universidad de Maryiand Coilege Park,
Maryiand
Malcolm Shields
Centro de Diagnstico Ambiental Universidad de West Florida Pensacola, Florida
La gran cantidad de residuos peligrosos que se generan y evacan han dado lugar a una
serie de condiciones ambientales que necesitan un tratamiento corrector. Tradicionalmente,
el uso de vertederos ha sido una forma rentable de evacuar los residuos. Sin embargo, los
costes incrementados del transporte y el reducido n mero de lugares para la instalacin de
vertederos obligan ahora a examinar los procesos de tratamiento que se pueden realizar en
el propio lugar contaminado (tratamiento por aplicacin al terreno, compostaje), y,
preferiblemente, in situ. Por lo tanto, son los factores econmicos los que empujan a la
exploracin de las tc nicas de biorrecuperacin como mtodos alternativos, rentables, y
ambientalmen te aceptables.
200 BIOTRATAMIENTOS DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
Es difcil comprender por qu muchas personas piensan que la biorrecupera- cin es una
aproximacin nueva para la reduccin de residuos. El hecho de que no estemos todos
enterrados en materia orgnica confirma la eficacia del ciclo micro- biolgico del carbono.
Ahora hemos elegido centrarnos en algunos de los aspectos de este ciclo que pueden ayudar a
reducir los niveles de contaminacin ambiental. Aunque la primera aplicacin comercial de la
biorrecuperacin tuvo lugar hace ya ms de cuarenta aos, nuestro conocimiento sobre estos
procesos llega hasta los tiempos de hombre primitivo. El uso actual de los procesos de
tratamiento biolgi co (biotecnologia) est ms extendido de lo que es evidente para el
pblico. Las plantas de tratamiento de aguas residuales son ejemplos a gran escala fciles de
identificar, y las fosas spticas ofrecen un ejemplo an ms comn. El mayor cam bio que se
ha producido en nuestra mentalidad es la idea de que quizs los micro organismos implicados
se puedan trasladar a, o reclutarse en, el lugar contamina do, en vez de enviar los residuos
hasta donde estn los microorganismos.
Aunque se haya considerado el uso de microorganismos alterados gentica mente, hasta
ahora, la mayor parte de la biorrecuperacin se ha conseguido me diante una mejora del
crecimiento de los microorganismos autctonos, o aumen tando la poblacin microbiana con
organismos exgenos aislados en el propio lugar, o mediante procedimientos similares (Fox,
1992). Estos microorganismos pueden ser mejores degradadores porque los procedimientos de
seleccin o mutagnesis han mejorado su capacidad de degradacin respecto a un material en
particular. Por ejemplo, los estudios de casos han demostrado que la contaminacin con pe -
trleo crudo del suelo se puede reducir, hasta unos niveles aceptables para las agen cias
reglamentarias, en menos de 20 semanas y con unos costes totales de 45-155 dlares por
metro cbico utilizando solamente microorganismos autctonos. Esto supone bastante menos
tiempo y dinero que las alternativas no biolgicas (Hilde- brandt y Wilson, 1991; Levin,
Manual de Biotecnologa UNIDO, en fase de im presin). Desgraciadamente, como informaron
Fox et al. (1990), existen suelos que, cuando se han analizado en ensayos de viabilidad, han
mostrado una falta de organismos autctonos capaces de llevar a cabo la mineralizacin.
Evidentemen te, la adicin de bacterias u hongos extraos est indicado cuando se ha
producido una extincin de los microorganismos autctonos. Sin embargo, la nueva adicin de
microorganismos degradadores conocidos en una zona contaminada est muy lejos de
garantizar una mejora en la biodegradacin [vase Compeau et al., 1991, ejemplo en el que
los organismos adicionales no mejoraron la degradacin del pentaclorofenol (PCP)].
Si las capacidades o la viabilidad ambiental de los organismos exgenos se pudiese
mejorar, su adicin a un ambiente contaminado podra mejorar a su vez el proceso de
degradacin, bien cinticamente o bien ampliando el espectro de los compuestos degradados.
En algunos casos han surgido espontneamente organis mos con capacidades mejoradas. Por
otra parte, los procedimientos empleados en la actualidad para conseguir cepas modificadas
incluyen tanto mtodos conven cionales como de ingeniera gentica. Los mtodos
convencionales para obtener bacterias alteradas, es decir, la seleccin y la mutagnesis, son
fiables poseen una eficacia probada a la hora de producir fenotipos alterados pero lentos
y te
USO DE MICROORGANISMOS MODIFICADOS PARA LA BIODEGRADACIN... 201
diosos. Adems, nunca se est seguro de que el protocolo de seleccin vaya a dar lugar
solamente al fenotipo deseado. Los protocolos de seleccin se deben disear
cuidadosamente para identificar y aislar los fenotipos deseados.
Aunque los mayores xitos con la biotecnologa se han producido en los cam pos de la
medicina y farmacologa, es fcil imaginar xitos futuros en la biotecno loga ambiental. Con
los avances realizados en-ingeniera gentica ya existen tc nicas que permiten optimizar
bacterias especficas para su uso en los trabajos de campo. El primer organismo diseado para
el uso en trabajos de campo fue una bacteria degradadora del petrleo desarrollada por
Chakrabarty. Sin embargo, la tcnica que utiliz este investigador (reproduccin asistida por
plsmidos) no se considera ingeniera gentica segn las definiciones reglamentarias actuales,
y el organismo nunca lleg a ser usado en los trabajos de campo (Levin, 1983). La cepa
Pseudomonas, degradadora del petrleo, fue creada mediante la introduccin de diversos
plsmidos degradadores para lograr la mineralizacin del xileno, to lueno, naftaleno, octano,
salicilato, y de otros aromticos y alifticos sencillos. Esto representa un rea atractiva para
la biorrecuperacin; es decir, un contami nante fcil de degradar en un lugar bastante
inaccesible que hace muy caro el tra tamiento fsico (vitrificacin, incineracin, etc.). Algunos
ejemplos podran incluir: los escapes de depsitos subterrneos, derrames de petrleo y flujos
de residuos industriales. Hay poca necesidad de utilizar una tecnologa recombinante si los
contaminantes son fciles de atacar.
La aplicacin principal de la tecnologa ADN recombinante (ADNr) en biorre cuperacin
ser el tratamiento de los residuos recalcitrantes: residuos difciles de degradar debido a la
escasez de rutas microbianas capaces de reconocerlos o trans formarlos, especialmente a altas
velocidades. Desgraciadamente, este tipo de con taminantes es muy amplio, incluye muchos
pesticidas, compuestos heterocclicos, aromticos sustituidos y halogenados, y alifticos
(metanos, etanos y etenos). La seleccin directa no es til en estos casos porque, o no est
disponible la enzima, o la ruta, o slo es posible inducirla mediante el compuesto
recalcitrante.
Actualmente, existen varios organismos que han sido modificados con xito en el
laboratorio para mejorar sus capacidades degradadoras (Rojo et al., 1987; Don et al., 1985;
Kukor y Osen, 1990; Zylstra et al., 1989). Pero estas cepas no se han probado en los trabajos
de campo, ni tampoco otras que han surgido por muta cin espontnea o mediante mutagnesis
y procesos tradicionales de seleccin (Rojo et al., 1987; Knackmuss, 1976; Taeger et al.,
1988). Se ha ensayado en los traba jos de campo con una cepa, la Pseudomonas B13, pero
slo en relacin a su super vivencia, no para la finalidad para la cual fue diseada, la
degradacin de los com puestos cloroaromticos (Krumme et al., 1991).
El bioaumento, tal y como se practica actualmente, utiliza organismos que se generan de
forma natural. Los organismos aadidos, o proporcionan una asocia cin, o, an ms
importante, incrementan de forma significativa el ttulo de los degradadores. El retraso en el
uso de microorganismos cultivados en el laboratorio se debe en parte a los reglamentos poco
claros promulgados por las agencias fede rales, estatales y locales en relacin a cules son los
organismos modificados que merecen ser considerados como organismos nuevos. En un
folleto publicitario apa
202 BIOTRATAMIENTOS DE RESIDUOS TXICOS Y PELIGROSOS
recido en The Biorremediation Report (publicado por COGNIS, INC., Santa Rosa, CA 95407),
se sealaba que ...la biorrecuperacin es un enigma. Aunque se trate de un enigma muy
estudiado. El enigma se clarificar dentro de los prximos aos. Este capitulo examinar las
ventajas e inconvenientes que presenta la utili zacin de organismos naturales y modificados
desde el punto de vista cientfico y reglamentario. '
Ventajas
Las ventajas del uso de microorganismos seleccionados para la biorrecuperacin junto con
tcnicas de ingeniera tradicionales han sido ampliamente demostradas durante muchos aos.
En algunos casos, una prctica tradicional de ingeniera, p. ej., la ventilacin del suelo, se ha
combinado con el uso de organismos autcto nos para degradar materiales orgnicos, dando
lugar a la bioventilacin. Se ha uti lizado este proceso con xito en los trabajos de campo para
tratar hidrocarburos del petrleo (Hoeppcl et al., 1991). El compostaje se ha empleado con
xito para
degradar municin (Williams y Myler, 1990).
Las zonas contaminadas, normalmente, son excelentes fuentes para el aisla miento de
estos organismos. Los principios tanto de adaptacin como de enrique cimiento contribuyen a
esto. La adaptacin es el proceso natural que permite que los organismos sobrevivan en
presencia de abundantes sustancias txicas. Esta adaptacin puede ser el resultado de
modificaciones fisiolgicas naturales, que dan lugar a una mayor concentracin de los
componentes celulares capaces de enlazar el material txico; de la alteracin de las molculas
superficiales de enla ce, lo que provoca una mayor exclusin de los materiales txicos; o de un
trans porte ms eficaz del material txico al ambiente.
Por otra parte, los materiales que entran en la clula dan al proceso metabolico el
potencial de elaborar nuevos sustratos para la produccin de energa (provocan do un
enriquecimiento), aunque en algunos casos las enzimas acten sobre el ma terial txico sin
produccin de energa, en lo que se ha denominado cometabohs- mo. Cuando no se obtenga
energa alguna del componente que se est transformando, la energa procedente de la
utilizacin de otros sustratos mejorar sustancialmente las tasas de mineralizacin, pero es
posible que afecte de forma adversa *1 tiempo que las clulas utilizan para realizar la
transformacin (Alvarez-Cohen y McCar- ty. 1991a, 19916).
El enriquecimiento es un mecanismo primario que altera la estructura de la comunidad
microbiana autctona para incrementar la proporcin de organismos degradadores. La
existencia de un mayor nmero de organismos resistentes se debe a la capacidad de utilizar
los compuestos orgnicos txicos como fuente de ener ga alternativa (destoxicndolos), y a la
reduccin en el nmero de competidores n relacin a los nutrientes presentes en el ambiente
(cuando desciende el numero
USO DE MICROORGANISMOS MODIFICADOS PARA LA BIODEGRADACIN... 203