Tomade Muestras-Glucosa

CURSO DE LABORATORIO CLINICO
Toma de Muestras-Glucosa
Glucosa.
Medicin de glucosa en sangre.
Por glucosa sangunea que se entiende como la concentracin en la sangre de una
substancia qumica especfica: la glucosa.
El azcar en sangre que incluye adems de glucosa, otros azcares como: lactosa, fructosa
y pentosas.
Substancias reductoras en la sangre: es el trmino que se aplica a todos los componentes
de la sangre susceptibles de reducir los iones cpricos en solucin alcalina caliente. Incluye
no solamente azcares, sino tambin glutatn y ergotionina, glucurnidos, compuestos de
ribosa, cido ascrbico y cido rico.
CLASIFICACION
No. De Carbonos Funcin
Triosas Aldosas
Tetrosas
Pentosas Cetosas
No. DE UNIDADES MOLECULARES
Monosacridos Disacridos Oligosacridos Polisacridos
Maltosa Estaquiosa (Alto peso

Simples Compuestos Sacarosa Rafinosa molecular y
(solo tiene (diferentes Fructosa complejas)
oxidrilos) radicales)
Azcares Azcares Azcares Azcares

Aminados Acidos Alcoholes Esteres
(glucosamina) (c. Glucurnico) (glicerol) (glucosa GP)
Glucosaminoglicanos + Protenas
Glicoprotenas
2009Dr. Martin Adrian Ponce Nava.

(Hormonas, Inmunoglobulinas)
Evolucin de los Mtodos Qumicos para Determinacin de Glucosa en Sangre.
Mtodos qumicos de reduccin.
Mtodo de Folin Wu.

Utiliza un filtrado de cido tngstico de sangre total, que se calienta con una
solucin de cobre, con reduccin de los iones cpricos a cuprosos.
Los iones cuprosos son entonces medidos fotomtricamente (colorimtricamente)

por la adicin de un exceso de cido fosfomolbdico para formar azul de molibdeno.
V.N. = de 80 a 120 mg / 100ml
Objeciones al Mtodo.
1. La mayor objecin que se hizo a este mtodo fue su inclusin del 15 al 30% de
sustancias sacaroideas que no son glucosa.
2. La cantidad de xido cuproso formado por cantidades crecientes de azcar no
aumenta con estricta proporcionalidad, adems, este xido cuproso tiende a
reoxidarse cuando est expuesto al aire en suspensin caliente, a eso se debe la
forma de los tubos de Folin-Wu con una estrechez seguida por ensanchamiento
y adems la precaucin de no agitarlos durante la reaccin para evitar la
reoxidacin.
3. Una tercera objecin al resultado, reside en la inestabilidad colorimtrica del
azul de molibdeno.
4. Por lo anterior este mtodo dej de emplearse aproximadamente en los aos
60s.

Mtodo de Nelson Somogyi.

Utiliza un filtrado de sulfato de zinc en hidrxido de bario que est virtualmente
libre de substancias reductoras que no sean glucosa. El ion cuproso formado por el
calentamiento de este filtrado con una solucin alcalina de cobre se mide fotomtricamente
por la adicin de cido arsenomolbdico que forma un complejo coloreado.
V.N. = 60 100 mg / 100ml
Folin - Wu
De reduccin
Mtodos Nelson Somogyi
qumicos
Cromognicos Ortotoluidina
Glucosa-oxidasa
Mtodos Glucosa-oxidasa-
enzimticos peroxidasa
Hexocinasa
Evolucin de los Glucosa
mtodos para deshidrogenasa
determinar
glucosa en sangre Mtodos Mtodo
cromatogrficos micromatogrfico
(memoria a largo plazo) cuantitativo de la
glicosilada
Mtodos
Colorimtricos Frutosamina
Puede considerarse estable y determinante de glucosa verdadera, pero el empleo

de demasiados reactivos, y lo complicado de la marcha, result no prctico para el anlisis
de rutina.

Mtodo qumico cromognico: ortotoluidina.

Mtodo de la ortotoluidina.
Al suero o plasma se aade ortotoluidina disuelta en cido actico glacial y se
calienta en bao de agua hirviendo. El color verde estable que forma se mide por medio del
espectrofotmetro.
V.N. = 60 100 mg / 100ml
Objeciones al Mtodo.
1. Mtodo que data de 1959.
2. Se han demostrado sus efectos cancergenos.
3. Durante el calentamiento se eliminan vapores txicos por lo que es necesario
usar campana de extraccin.
4. Los reactivos al contacto con la piel producen quemaduras, ya que contienen
cido actico a concentracin elevada, y por lo tanto son corrosivos.
5. Interfieren la galactosa y manosa y en sus resultados elevados la solucin final
exhibe turbidez con lo cual pierde linealidad mtodo.
6. Por todo lo anterior este mtodo tambin se considera obsoleto.
Mtodos enzimticos.
Estos mtodos sufren influencias inhibitorias de:

1. Acido rico.
2. Acido ascrbico.
3. Bilirrubina.
Son los que en trabajo rutinario dan el mximo grado de especificidad en la

estimacin de la glucosa verdadera en la sangre.
Definiciones Importantes.
Gluconeognesis.
Formacin de glucosa o de glucgeno a partir de fuentes que no son
carbohidratos.
Glucogenlisis.
Degradacin de glucgeno a glucosa.
Glucognesis.
Sntesis de glucgeno a partir de glucosa.

Tubos para Pruebas de Glucosa.
Tubos SST.
Estos tubos contienen un gel de peso especfico mayor que el suero pero menor
que el cogulo; durante el proceso de la centrifugacin el gel se lica y se mueve entre los
dos; una vez terminada la centrifugacin se solidifica formando una barrera para acelerar el
proceso de coagulacin.
Una vez que se ha llenado el tubo conveniente habr que invertirlo de 5 a 6 veces
para asegurar el efecto ptimo del activado. Esto reduce el tiempo de coagulacin a
aproximadamente la mitad.
Tubo con tapn gris claro.
Contiene aditivos para conservar la glucosa.
Tubo con fluoruro de sodio.
Tapn gris claro.

Anticoagulante: oxalato de potasio (o con menos frecuencia EDTA) para
preservar muestras del plasma.
Conserva la glucosa hasta por cinco das.
Tubos con yodo acetato.
Dado que el yodo acetato no es un anticoagulante, la sangre se coagular, dando

lugar a la presencia de suero.
Tapn gris claro.

Produce suero.
Disponible con heparina (para plasma).
Proporciona cifras precisas de glucosa hasta por 24 horas.
Fructosamina.
Valores de referencia.
1.9 2.7 mmol / l Intervalo normal

2.7 3.2 mmol / l Ajuste satisfactorio
3.2 3.7 mmol / l Ajuste regular
Superior a 3.7 mmol / l Mal

Frutosamina y Hemoglobina Glicosilada.
Memoria a Protenas
corto plazo Plasma + Glucosa Fructosamina
2 a 3 semanas plasmticas
Memoria a
largo plazo GR Hb + Glucosa Hemoglobina
3 a 4 meses glicosilada
Interpretacin Clnica de la Hemoglobina Glicosilada.

Niveles de control % de Hb glicosilada
Psimo control de la diabetes Superior al 18%

Zona de peligro Entre 14 y 18%
Falla de control de la diabetes Entre 12 y 14%
Buen control de la diabetes Entre 10 y 12%
Excelente control de la diabetes Entre 8 y 10%
Nivel normal Entre 5 y 8%
Nivel de hipoglucemia Menor del 6%
Curva de Tolerancia a la Glucosa
500
450 Normal
400
mmol / l
350
300
250 Diabetes moderada
200
150
100
50 Diabetes severa
0
1 2 3 4
La tolerancia a la glucosa se indica por la naturaleza de la curva de glucosa en sangre

despus de la administracin de una dosis de prueba de este azcar.
El criterio de normalidad es que la curva regrese a su valor inicial en dos horas

Examen General de Orina.
Caractersticas a Determinar en el E.G.O.
cantidad
Examen Fsico color y olor
PH
Densidad
albmina
glucosa
Examen Qumico acetona
hemoglobina
bilirrubina
leucocitos
eritrocitos
granulosos
creos
cilindro hialinos
de glbulos blancos
de glbulos rojos
cilindroides
clulas escamosas
Examen Microscpico bacterias
tricomonas
espermatozoides
hongos
parsitos
oxalato de calcio
fosfato
cristales de fosfatos triples amonio
Magnesio
fosfatos y uratos amorfos

Volumen.
La mayora de los adultos eliminan entre 1,000 y 1,500ml de orina en 24 horas en

climas templados, cantidad que disminuye en verano y aumenta en invierno; salvo los
ancianos que pueden orinar una vez durante la noche, los adultos sanos no tienen nicturia, a
menos que hayan ingerido lquidos inmediatamente antes de acostarse.
Durante el da los adultos generalmente orinan entre 5 y 9 veces y el volumen por

cada miccin es de 100 a 300ml.
Para el examen rutinario el volumen solo se mide si la orina es de 24 horas, ya

que esta variar entre el volumen de lquido ingerido y con la cantidad de agua eliminada a
travs de la piel, los pulmones e intestino.
Densidad.
La manera ms conveniente de medir la funcin de concentracin y dilucin del

rin es medir la densidad de la orina.
La densidad la da la concentracin de substancias disueltas en la orina;

normalmente vara de 1,015 a 1,025gr / ml. El grado de densidad de la orina en pacientes
con riones sanos proporciona informacin acerca del estado de hidratacin del paciente,
por ejemplo, en el postoperatorio o durante una enfermedad febril, una orina muy
concentrada indica deshidratacin.
La densidad est disminuida en:
Nefrosis crnica.
Diabetes inspida.
La densidad est elevada en:
Nefritis degenerativa.
Fiebre.
Tcnica.
En una probeta de 25ml poner 20ml de orina e introducir el densmetro

imprimiendo un movimiento rpido de rotacin sin que toque las paredes del recipiente. Se
lee la densidad en el menisco inferior.

pH.
Los riones normales pueden producir orinas con una gran variedad de pH (de 4.6
a 8). Ingestin de diferentes alimentos, varias dietas y substancias qumicas (como
bicarbonato de sodio) tambin afecta el pH urinario. Para que el pH urinario tenga un
significado clnico debe hacerse la medicin en orinas recin emitidas.
Las orinas altamente concentradas como las que se forman en ambientes clidos y
secos son generalmente fuertemente cidas y pueden ser irritantes.
En el tratamiento de ciertos clculos renales que se desarrolla en orinas cidas,

debe mantenerse la orina alcalina.
Una orina persistentemente alcalina o cida sugiere la presencia de una

enfermedad orgnica o del aparato urinario, o puede presentarse despus de la ingestin de
ciertas drogas.
Orinas persistentemente cidas se encuentran en:
Acidosis metablica (debida a cetosis diabtica, inanicin y diarrea severa)

Acidosis respiratoria.
Fiebre.
Intoxicacin por alcohol metlico.
Tuberculosis renal.
Insuficiencia renal aguda.
Pielonefritis.
Orinas persistentemente alcalinas encontramos en:
Infecciones genitourinarias por Proteus.

En estados de alcalosis (respiratoria o metablica).
Al ingerir diurticos.
Sndrome de Cushing.
Carcinoma bronquial.
Tcnica.
Empapar un pedazo de papel pH en la orina y compara con la escala de valores

segn el color del pH.
Albmina.
La orina normal generalmente contiene trazas de albmina que son tan pequeas
que no pueden ser detectadas con las pruebas de rutina.

Proteinuria o albuminuria.
Se le llama al aumento de las protenas urinarias. Normalmente puede aparecer la

llamada albuminuria transitoria de causa extra renal, como por ejemplo exceso de ingestin
proteica, exposicin prolongada al fro, estados emocionales intensos y despus de
actividades fsicas excesivas.
Las tiras reactivas son ms sensibles a la albmina que a otras protenas, mientras
que las pruebas con calor y con cidos son sensibles a todas las protenas.
Falsos positivos de albmina pueden deberse a la contaminacin con secrecin

vaginal, semen, moco, pus o sangre.
Protenas de Bence Jones.
Es la nica protena que presenta coagulacin reversible, precipita al calentarse la

orina a 50C y al continuar aumentando la temperatura, se disuelve aproximadamente a los
80C. Su peso molecular es muy bajo (35,000 u.m.a.). Est presente principalmente en
mieloma mltiple.
Patologa de la albmina.
La proteinuria se presenta generalmente en la patologa renal que cursa con un

aumento de permeabilidad del glomrulo, como por ejemplo, gomerulonefritis, sndrome
nefrtico, pielonefritis, hipertensin arterial, carcinomas, proteinuria ortosttica,
tuberculosis renal, toxemia del embarazo, diabetes mellitus, gota, estados febriles agudos,
quemaduras por corrientes elctricas, etc.
Tcnica.
En tubos de 13x100, centrifugar la orina durante 10 minutos a 5,000 r.p.m.

Colocar en un tubo de 15x150, 2ml de orina centrifugada y estratificar 1ml de HNO3
concentrado o reactivo de Robert. La aparicin de un anillo blanco (anillo de Heller) indica
la presencia de albmina.
Fundamento.
Todos los procedimientos se basan en precipitar irreversiblemente las protenas

con reactivos qumicos como el cido sulfosaliclico, cido ntrico concentrado, el reactivo
de Robert y el tricloroactico o coagularlas por medio de calor.
Determinacin de Glucosa.
La orina normal contiene cantidades pequeas de azcares dentro de las cuales

encontramos fructosa, levulosa, pentosa, galactosa, glucosa, maltosa,
etc., que no son detectados por esas pruebas rutinarias del laboratorio. En el rin sano,
despus de que la glucosa ha sido filtrada a travs del glomrulo, la mayor parte es
absorbida por el tbulo proximal.
La glucosuria se presenta cuando es sobrepasado el umbral renal, el cual es

variable de persona a persona, sin embargo, est situado generalmente al nivel de glucosa
en sangre de 150 a 180mg / 100ml.
La causa ms importante de una glucosuria es la diabetes mellitus; existen otros

padecimientos en los cuales tambin se presenta glucosuria, por ejemplo, pancreatitis,
trombosis coronaria, glucosuria alimenticia, cncer pancretico, embarazo, dolor,
excitacin, hipertiroidismo, traumatismo crneo enceflico.
Mtodo de Benedict.
Tcnica.
Colocar un tubo de 13x100mm, 1ml de reactivo de Benedict, aadir 5 gotas de

orina y mezclar; posteriormente, colocar el tubo a bao de agua hirviendo durante 5
minutos, dejar enfriar y observar. La aparicin de precipitado de color que va del amarillo
caf rojo ladrillo, indica la presencia de glucosa.
Fundamento.
Estos procedimientos se basan en la propiedad de los azcares de reducir con

rapidez el cobre de la solucin alcalina del reactivo de Benedict, hacindolo pasar de ion
cprico a oxido cuproso con formacin del precipitado del color antes indicado.
Otros mtodos para la determinacin de glucosa en orina.
Fehling.
Nylander.
Tiras reactivas.
Determinacin de acetonas.
La presencia de cuerpos cetnicos en la orina es conocida como cetonuria. Los

llamados cuerpos cetnicos de la orina son el cido acetoactico, la acetona, el cido
betahidroxibutrico. Este ltimo constituye del 40 al 70% del total de los cuerpos cetnicos.
Puede haber cetonuria en personas normales que consumen dietas deficientes en

carbohidratos, durante la exposicin al fro y despus de ejercicios intensos y prolongados.

Patologa.
La cetonuria puede observarse en diabetes mellitus descompensada; la deteccin

de cuerpos cetnicos en el diabtico proporciona la clave para el diagnstico temprano de la
cetoacidosis y como diabtico. En la diabtica embarazada es importante la investigacin
de cetonas, por que la cetoacidosis es un factor importante que contribuye a la muerte fetal.
Tambin se encuentra cetonuria en vmitos, deshidratacin, diarreas, fiebres,

desnutricin, eclampsia, anestesia con cloroformo o ter, dietas bajas en carbohidratos,
hipertiroidismo, etc.
Tcnica.
Poner en una placa con excavaciones de 0.2g de reactivo de Rothera y aadir 5

gotas de orina problema. Una coloracin violeta indica la presencia de acetona.
Los cuerpos cetnicos se forman durante el catabolismo de los cidos grasos. El

olor a acetona (manzana), puede detectarse en el aliento de pacientes con altos niveles de
cetonas en la sangre.
Fundamento.
Este procedimiento se basa en que el cido acetoactico y la acetona reaccionan en

medio alcalino con nitroprusiato de sodio (principal componente del reactivo de Rothera)
formando un complejo de color violeta.
Determinacin de hemoglobina.
En trminos generales la sangre se manifiesta en la orina bajo tres formas:
Hematuria. Presencia de glbulos rojos intactos en la orina y puede ser

microhematuria o macrohematuria (visible o no visible).
Hemoglobinuria. Presencia de hemoglobina libre en la orina.
Mioglobinuria. Presencia de mioglobina en la orina.
Existe la llamada hematuria falsa que es una contaminacin de la orina por la

sangre del tubo digestivo bajo o sangre genital.
Patologa.
Puede observarse hematuria en los siguientes padecimiento:

Clculos renales.
Carcinoma renal.
Sndrome nefrtico.
Rin poliqustico.

Nefritis aguda.
Cirrosis.
Puede observarse hemoglobinuria en:

Quemaduras graves.
Anemias hemolticas.
Enfriamientos repentinos.
Reacciones alrgicas.
Mieloma mltiple.
Reacciones postransfuncionales.
Tcnica.
Al sedimento de la orina problema, agregar unas 3 gotas de cido actico al 5%, 3

gotas de solucin alcohlica de piramidn, y 3 gotas de perxido de hidrgeno al 3%.
Agitar. Una coloracin azul indica la presencia de hemoglobima.
Fundamento.
Todos los procedimientos se basan en la propiedad qumica de la Hb. De catalizar

la rpida oxidacin de ciertas diaminas cromticas por perxido de hidrgeno.
Determinacin de bilirrubina.
Es el resultado de la degradacin de Hb en el sistema reticuloendotelial.

Normalmente en un individuo sano, no debe aparecer bilirrubina en la orina, ya que la
presencia de esta sugiere destruccin parcial o total del sistema biliar intra o extraheptico y
dao hepatocelular.
En los microsomas de hepatocitos se conjuga la bilirrubina de la orina con el cido

glucurnico, formando el glucoronato de bilirrubina (bilirrubina directa, el cual se excreta
junto con la bilis del intestino en donde se transforma en estercobilingeno).
La bilirrubina conjugada o directa es susceptible de eliminarse por la orina, en

tanto que la bilirrubina directa no lo es.
A partir de 2 a 4 miligramos de bilirrubina en suero se origina la ictericia.
Patologa.
La eliminacin de bilirrubina puede apreciarse en las diversas formas de ictericia

obstructiva intra y extraheptica, as como en la parenquimatosa.
Hepatitis infecciosa.
Es un hallazgo temprano y puede aparecer antes que un aumento demostrativo de

la bilirrubina srica. En casos muy leves durante una epidemia. El nico hallazgo positivo
puede ser una reaccin positiva de la bilirrubina en la orina. Tambin se encuentra
bilirrubina en la orina en hepatitis aguda o crnica, hepatitis viral, cirrosis, carcinoma de la
cabeza o pncreas y en algunas intoxicaciones.
Tcnica.
A 20ml de orina, agregar 10ml de cloruro de bario, filtrado y sobre el precipitado

agregar unas gotas de reactivo de Fouchet. Una coloracin verde azulada indicar la
presencia de bilirrubina.
Fundamento.
Casi todas las pruebas habituales para la determinacin de bilirrubinas se basan en

su oxidacin a biliverdina al contacto con el reactivo de Fouchet.
Valores normales del examen general de orina.
Volumen 800 1,500 en 24 horas

Densidad 1015 1020 g/l
pH 67
Albmina No hay
Glucosa No hay
Acetona No hay
Hemoglobina No hay
Bilirrubina No hay
Sedimento Observacin microscpica en seco fuerte
Leucocitos: menos de 10 por campo
Eritrocitos: de 0 a 1 por campo
Cilindros: no hay
Informacin Va Proyeccin (Diapositivas)

Tema: Carbohidratos
1. Factores que desencadenan una diabetes.
Emociones.
Infecciones severas.
Intervenciones quirrgicas.
Embarazo.
2. Sntomas de la diabetes.
Poliuria.
Polidipsia.
Polifagia.

Prdida de peso.
3. La diabetes puede ocasionar.
Infarto al miocardio.
Retinopata diabtica.
Insuficiencia renal.
Gangrena.
4. Sntomas del coma hipoglicmico.
Hambre.
Debilidad.
Mareos.
Palpitaciones.
Cefalea.
Palidez.
Sudoracin.
Sueo.
Prdida de la conciencia.

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No. De Carbonos Funcin

Monosacridos Disacridos Oligosacridos Polisacridos

Maltosa Estaquiosa (Alto peso

Azcares Azcares Azcares Azcares

2009Dr. Martin Adrian Ponce Nava.

Mtodos qumicos de reduccin.

Mtodo de Folin Wu.

Los iones cuprosos son entonces medidos fotomtricamente (colorimtricamente)

V.N. = de 80 a 120 mg / 100ml

2009Dr. Martin Adrian Ponce Nava.

Mtodo de Nelson Somogyi.

Puede considerarse estable y determinante de glucosa verdadera, pero el empleo

2009Dr. Martin Adrian Ponce Nava.

Mtodo qumico cromognico: ortotoluidina.

V.N. = 60 100 mg / 100ml

Estos mtodos sufren influencias inhibitorias de:

Son los que en trabajo rutinario dan el mximo grado de especificidad en la

2009Dr. Martin Adrian Ponce Nava.

Tubos para Pruebas de Glucosa.

Tubo con tapn gris claro.

Contiene aditivos para conservar la glucosa.

Tubo con fluoruro de sodio.

Tapn gris claro.

Tubos con yodo acetato.

Dado que el yodo acetato no es un anticoagulante, la sangre se coagular, dando

Tapn gris claro.

1.9 2.7 mmol / l Intervalo normal

2009Dr. Martin Adrian Ponce Nava.

Frutosamina y Hemoglobina Glicosilada.

Interpretacin Clnica de la Hemoglobina Glicosilada.

Psimo control de la diabetes Superior al 18%

Curva de Tolerancia a la Glucosa

La tolerancia a la glucosa se indica por la naturaleza de la curva de glucosa en sangre

2009Dr. Martin Adrian Ponce Nava.

Examen General de Orina.

Caractersticas a Determinar en el E.G.O.

2009Dr. Martin Adrian Ponce Nava.

La mayora de los adultos eliminan entre 1,000 y 1,500ml de orina en 24 horas en

Durante el da los adultos generalmente orinan entre 5 y 9 veces y el volumen por

Para el examen rutinario el volumen solo se mide si la orina es de 24 horas, ya

La manera ms conveniente de medir la funcin de concentracin y dilucin del

La densidad la da la concentracin de substancias disueltas en la orina;

La densidad est disminuida en:

La densidad est elevada en:

En una probeta de 25ml poner 20ml de orina e introducir el densmetro

2009Dr. Martin Adrian Ponce Nava.

En el tratamiento de ciertos clculos renales que se desarrolla en orinas cidas,

Una orina persistentemente alcalina o cida sugiere la presencia de una

Acidosis metablica (debida a cetosis diabtica, inanicin y diarrea severa)

Orinas persistentemente alcalinas encontramos en:

Infecciones genitourinarias por Proteus.

Empapar un pedazo de papel pH en la orina y compara con la escala de valores

2009Dr. Martin Adrian Ponce Nava.

Se le llama al aumento de las protenas urinarias. Normalmente puede aparecer la

Falsos positivos de albmina pueden deberse a la contaminacin con secrecin

Protenas de Bence Jones.

Es la nica protena que presenta coagulacin reversible, precipita al calentarse la

La proteinuria se presenta generalmente en la patologa renal que cursa con un

En tubos de 13x100, centrifugar la orina durante 10 minutos a 5,000 r.p.m.

Todos los procedimientos se basan en precipitar irreversiblemente las protenas

La orina normal contiene cantidades pequeas de azcares dentro de las cuales

La glucosuria se presenta cuando es sobrepasado el umbral renal, el cual es

La causa ms importante de una glucosuria es la diabetes mellitus; existen otros