ESCUELA POLITCNICA NACIONAL

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA Y AGROINDUSTRIA

DEPARTAMENTO DE CIENCIA DE ALIMENTOS Y BIOTECNOLOGA

LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
PRCTICA NO. 6
PRODUCCIN DE BIOMASA

INTRODUCCIN
Uno de los productos de inters comercial es la biomasa microbiana, que en el caso de
levaduras, es producida a nivel industrial para ser utilizada en el proceso de panificacin o tambin
como fuente de protena para alimentacin principalmente animal.
El proceso industrial debe ser optimizado de manera de obtener la mxima produccin al
menor costo. El estudio de la cintica de generacin de biomasa contribuir al proceso de
optimizacin y la determinacin de los valores de las variables de operacin y control, permitirn
el eficiente desarrollo del proceso.
La fermentacin industrial se desarrolla por el mtodo de lotes alimentados y se utiliza un
fermentador agitado por el aire o uno llamado air lift, pues el proceso requiere un sistema que
permita una alta transferencia de oxgeno.

OBJETIVO
Obtener la curva que defina la cintica de crecimiento trabajando con una levadura, en
reactor tanque agitado con aproximadamente un litro de medio, en proceso por lotes (batch). Se
debern determinar los diferentes parmetros de control.

MATERIALES

Tubos de ensayo. Embudos estriles.

Erlenmeyers de 250 ml. Termmetro.
Ansas.

EQUIPOS

Microfermentador. ZnSO4
Microscopio. Antiespumante

REACTIVOS

Azcar.
(NH4)2SO4
MgSO4.7H2O
KH2PO4
Extracto de carne
NaCl
CoCl2
CuSO4
MnSO4
METODOLOGA

1. Investigacin bibliogrfica: Grupo control y Grupos cambio de variable.

TRABAJO EXPERIMENTAL

Preparacin del inculo

El inculo se prepara primero en tubos de ensayo y luego se pasa a erlenmeyers.
Los tubos de ensayo se llenan con 10 ml de medio.
Los erlenmeyers se llenan con 100 ml de medio.
Los tubos de ensayo y los erlenmeyers se esterilizan en el autoclave.
Se inocula el microorganismo en el erlenmeyer.
Se dejan los tubos en agitacin durante por lo menos 24 horas.
Pasadas las 24 horas, el contenido de los tubos de ensayo se vierte en los erlenmeyers
(tomando las debidas medidas de asepsia).
Se dejan los erlenmeyers en agitacin durante por lo menos 24 horas.

Fermentacin
El medio de cultivo debe estar previamente preparado y esterilizado.
El arranque del fermentador y siembra del inculo se realiza a las 7h00 del da de la
prctica.
El control de crecimiento del microorganismo se hace por contaje directo al
microscopio.
Las medidas se realizan cada hora hasta las 19h00.

Condiciones de la Fermentacin control

Volumen de medio: 1.5 l

Temperatura: 30C
Aireacin: 1 vol. aire / vol. medio min
Agitacin: 300 r.p.m.
pH: 4.5
Composicin del sustrato:
Sacarosa 4%
(NH4)2SO4 5 g/l
MgSO4.7H2O 0.7 g/l
KH2PO4 1.5 g/l
NaCl 0.3 g/l
CaCl2 0.4 g/l
Extracto de carne 0.6 g/l
Co (como CoCl2) 1 ppm (5 ml de la solucin ya preparada)
Cu (como CuSO4) 3 ppm (5 ml de la solucin ya preparada)
Mn (como MnSO4) 3 ppm (5 ml de la solucin ya preparada)
Zn (como ZnSO4) 3 ppm (5 ml de la solucin ya preparada)

Variables

Se puede variar:

Temperatura
Aireacin
 Agitacin
pH
Composicin del sustrato

Las condiciones a las que se va a trabajar y las variables a manejar por cada grupo, se debern
presentar en la oficina del docente hasta el viernes 23 de junio 2017 hasta las 12:00.

INFORME

Resultados
En los resultados se debe colocar lo siguiente:

Curva de crecimiento microbiano.

Curva ln(X) vs. t.
Velocidad especfica de crecimiento (Para todos los grupos).
Tiempo medio de generacin (Para todos los grupos).
Nmero de generaciones (Para todos los grupos).

Discusin de resultados.
Analizar los resultados obtenidos por su grupo y despus comparar con los resultados de todos
los grupos. Discutir los mejores y los peores valores obtenidos.

Anexos
En los anexos recordar colocar un ejemplo de clculo completo.
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LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
PRCTICA NO. 6
PRODUCCIN DE BIOMASA - PREINFORME

Investigacin BIBLIOGRFICA

GRUPO CONTROL (Solo grupo Control-Grupo 2A)

1. En qu consiste el mtodo de contaje directo al microscopio? Cules son sus

limitaciones?

2. Cmo se obtiene la velocidad especfica de crecimiento, tiempo medio de

generacin y nmero de generaciones (valores cinticos) en la produccin de
biomasa?

3. Tecnologa de produccin de levadura de panificacin

GRUPOS DE CAMBIO DE VARIABLE

1. Importancia de cada variable (temperatura, aireacin, agitacin, pH, composicin

del sustrato) en la produccin de biomasa de levadura de panificacin.

2. Cambiar una condicin de los parmetros definidos en la fermentacin control, con

el objeto de mejorar el rendimiento de la produccin de biomasa. En el caso de
cambiar la composicin de sustrato, solamente se puede aadir un componente o
cambiar la concentracin de alguno de los definidos como parmetros en la
fermentacin control. Este cambio en una variable debe estar sustentado y defendido
por bibliografa.
 CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES PRCTICA PRODUCCIN DE BIOMASA

Mircoles 14 de junio de 2017: introduccin a la prctica de produccin de biomasa.

Viernes 23 de junio de 2017: presentacin preliminar de la investigacin bibliogrfica

(preinforme) para su aprobacin. Oficina del docente de 10h00 a 12h00.

Lunes 26 de junio de 2017: preparacin de medios de fermentacin en el laboratorio,

grupo 1A y 2A. Definir horario de preparacin de los medios (debe ser entre las 10:00 y las
15:00).

Mircoles 28 de junio de 2017: arranque de la fermentacin grupo 1A y 2A a las 7:00 am.

Lunes 3 de julio de 2017: preparacin de medios de fermentacin en el laboratorio, grupo

3A y 4A. Definir horario de preparacin de los medios (debe ser entre las 10:00 y las
15:00).

Mircoles 05 de julio de 2017: arranque de la fermentacin grupo 3A y 4A a las 7:00 am.

Lunes 10 de julio de 2017: preparacin de medios de fermentacin en el laboratorio,

grupo 1B y 2B. Definir horario de preparacin de los medios (debe ser entre las 10:00 y las
15:00).

Mircoles 12 de julio de 2017: arranque de la fermentacin grupo 1B y 2B a las 7:00 am.

Lunes 17 de julio de 2017: preparacin de medios de fermentacin en el laboratorio,

grupo 3B y 4B. Definir horario de preparacin de los medios (debe ser entre las 10:00 y las
15:00).

Mircoles 19 de julio de 2017: arranque de la fermentacin grupo 3B y 4B a las 7:00 am.

Mircoles 26 de julio de 2017: Entrega de informe y presentacin de la defensa oral todos

los grupos.

NOTA: AL FINALIZAR LA PRCTICA ENTREGAR LA HOJA DE DATOS. (Tiempo estimado de

duracin de la prctica: 12 horas)

Defensa Oral: es una exposicin que ser presentada a todos los grupos, en la exposicin
debern constar los siguientes datos:

Breve Introduccin de Produccin de Biomasa

Justificacin del cambio de Variables
Resultados del grupo
Anlisis de resultados del grupo
Resultados de todos los grupos, en tablas o grficos
Anlisis y discusin de los mejores y peores resultados

La exposicin debe durar mximo 10 minutos.

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PRCTICA NO. 6
PRODUCCIN DE BIOMASA- HOJA DE DATOS
GRUPO:
FECHA:

HORA CONTAJE DE MICROORGANISMOS DILUCIN

Inculo. 1 2 3 4 5 PROMEDIO

CONDICIONES DE LA FERMENTACIN:

Concentracin de azcar: _________4%

Temperatura: _________30 C
pH: _________4.5
Aireacin: _________1 vol. aire / vol Medio minuto
Agitacin: _________300 r.p.m.