La espectrometra de infrarrojos (espectroscopia IV) es un tipo de espectrometra de absorcin

que utiliza la regin infrarroja del espectro electromagntico. Como las dems tcnicas
espectroscpicas, puede ser utilizada para identificar un compuesto o investigar la composicin de
una muestra.

La espectrometra infrarroja se utiliza ampliamente tanto en la industria como en la investigacin

cientfica, porque es una tcnica rpida y fiable para medidas, control de calidad y anlisis
dinmicos. Los instrumentos actuales son pequeos y pueden ser transportados, incluso para
tomar medidas de campo. Con los avances en tecnologa de filtrado computacional y la
manipulacin de los resultados, se pueden medir con precisin las muestras en una solucin (el
agua produce una banda larga de absorbancia en el rango de inters, lo que dara un espectro
ilegible sin dicho tratamiento computacional). Algunas mquinas incluso dicen automticamente
qu sustancia est siendo analizada a travs de miles de espectros de referencia almacenados en
la memoria.

La tcnica de Espectroscopa de Infrarrojo permite la identificacin de los grupos funcionales de un

compuesto. Esto debido a que cuando una molcula absorbe radiacin infrarroja, la vibracin
intramolecular con frecuencia igual a la de la radiacin, aumenta en intensidad, lo que genera
seales con frecuencias que corresponden a la vibracin de un enlace especfico. La regin
infrarroja se divide en tres regiones denominadas infrarrojo cercano (NIR), infrarrojo medio (MIR) e
infrarrojo lejano (FIR). El espectrmetro de IR con transformada de Fourier permite la obtencin de
espectros de forma rpida, precisa y con relaciones Seal/Ruido (S/N) elevadas.

El ATR (Attenuated Total Reflection) es una tcnica de muestreo utilizada en el IR, la cual se
produce cuando una radiacin infrarroja entra en un cristal ATR transmisor y de alto ndice de
refraccin. El cristal est diseado para permitir una reflexin interna total que crea una onda
evanescente sobre la superficie del cristal. Esta onda se extiende a la muestra que se mantiene en
contacto ntimo con el cristal, registrndose el espectro de infrarrojo del analito.

El Laboratorio cuenta con un Espectrmetro de Infrarrojo por Transformada de Fourier modelo

Tensor 27, Bruker, con una fuente MIR y con el accesorio de ATR modelo Platinum ATR, Bruker
con cristal de diamante. Con el cual se puede obtener espectros en la regin del infrarrojo entre
-1 -1
4000 cm y 400 cm .

La Espectroscopa de Infrarrojo es una de las tcnicas espectroscpicas ms verstiles y de mayor

aplicacin en la caracterizacin e identificacin de materiales, anlisis de productos farmacuticos
y de sntesis, anlisis de contaminantes, ciencia forense, biomedicina, agricultura, alimentos,
adhesivos y polmeros entre otros.

Esta se puede dividir segn el tipo de la radiacin que se analiza, en:

Espectroscopia del Infrarrojo cercano

Espectroscopia del infrarrojo medio
Espectroscopia del infrarrojo lejano

Equipo disponible:

Equipo de Espectroscopa de Infrarrojo Bruker, modelo TENSOR 27

Espectrofotmetro de infrarrojo (FTIR) Marca: SHIMADZU Modelo: FTIR 8400S

Espectroscopia de absorcin molecular Ultravioleta-Visible

La espectrofotometra de absorcin molecular ultravioleta visible, comnmente llamada

espectrofotometra UV-VIS, tiene una larga y continua historia en el campo de la qumica
analtica. Esta tcnica est basada en la medicin de absorcin de radiacin U.V. o visible
por determinadas molculas. La radiacin correspondiente a estas regiones del espectro
electromagntico provoca transiciones electrnicas a longitudes de ondas caractersticas
de la estructura molecular de un compuesto.

La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos grupos funcionales de

molculas, y adems, para determinar el contenido y fuerza de una sustancia.
Se utiliza de manera general en la determinacin cuantitativa de los componentes de
soluciones de iones de metales de transicin y compuestos orgnicos altamente conjugados.

FOTOTUBOS.- Un fototubo consiste de:

un cilindro al alto vaco (con una ventana de cuarzo para UV),

un ctodo semicilndrico, el cual tiene en su superficie un compuesto, con propiedades
tales que los electrones de sa substancia se pueden desprender con relativa facilidad.
Este compuesto generalmente es un xido de un metal alcalino (litio, sodio, potasio, etc.)
o alcalinotrreos (calcio, bario, estroncio, etc.)
un nodo que es un alambre metlico. A este sistema se le aplica una diferencia de
potencial de aproximadamente 90 volts.
TUBO FOTOMULTIPLICADOR.
FOTOCELDAS
INSTRUMENTOS DE DOBLE HAZ Y DE HAZ SENCILLO

Tipos de instrumentos: En general se pueden clasificar en instrumentos solo o doble haz. Los
fotmetros de filtros o fotocolormetros permiten realizar determinaciones con mayor
frecuencia en el visible, sin embargo, tambin pueden ser utilizados en el UV. Los
espectrofotmetros se han diseado tanto para la regin VISIBLE, as como para el UV.

Aplicaciones
 Anlisis de contaminantes en pelculas delgadas
Medida de la composicin qumica
Cuantificacin de los perfiles de concentracin de compuestos en superficies
Identificacin del estado qumico de la superficie en peliculas delgadas

La espectroscopia de fluorescencia, tambin llamada fluorimetra; es un tipo de

espectroscopia basada en la emisin fluorescente de una muestra. Esto involucra el uso
de un haz de luz, comnmente de luz ultravioleta, que excita a los electrones en ciertas
molculas o tomos y causa la emisin de, tpica pero no necesariamente, luz visible. El
equipamiento que mide la fluorescencia es llamado fluormetro o fluormetro.

Existen dos tipos generales de instrumentos:

Fluormetro de filtro: El uso de estos filtros sirve para aislar la incidencia de luz y la
fluorescencia de la luz.
Espectrofluormetros: Utiliza una red de difraccin de monocromador es para
aislar la incidencia de la luz y la fluorescencia de la luz.

Existen distintos tipos de equipos que utilizan los aspectos bsicos de la fluorescencia,

entre ellos:
Espectrofluormetro y detectores de microplacas: miden el promedio de la
fluorescencia de la muestra (el volumen de muestra que mide ronda entre los L a
mL).
Microscopio de Fluorescencia: determina la fluorescencia como una funcin de las
coordenadas espaciales en dos o tres dimensiones para objetos microscpicos
(por debajo de ~ 0,1 mm de dimetro).
Scanner de Fluorescencia: determina la fluorescencia en funcin de coordenadas
en dos dimensiones de objetos macroscpicos como ser geles de electroforesis,
blotting y cromatografas.
Citometra de Flujo: incorpora un detector de fluorescencia para determinar la
fluorescencia de clulas, en un flujo a travs de un capilar. Permite identificar y
cuantificar subpoblaciones de clulas en una muestra compleja.
Otros tipos de instrumentos que usan la deteccin por fluorescencia son los
sistemas de electroforesis capilar, de HPLC y los equipos de secuenciacin de
DNA.

La espectroscopia de fluorescencia es usada en los campos de investigacin como el

bioqumico, mdico y qumico, entre otros, para el anlisis de compuestos orgnicos. Su uso
tambin ha sido reportado en la diferenciacin de tumores malignos y benignos en la piel. Las
tcnicas de espectroscopia atmica de fluorescencia son practicadas en otros tipos de
anlisis, y medicin de un compuesto presente en el aire, en el agua o en otro medio, como
CVAFS que es usado para la deteccin de metales pesados, como el mercurio. Tambin
puede ser usado para re direccionar fotones.
FOSFORESCENCIA La fosforescencia es un fenmeno similar al de fluorescencia

20. DEFINICIN Es el fenmeno en el cual el fotn es absorbido, excitando un electrn

hacia un nivel de energa mayor, y luego, al volver el electrn al nivel de energa que le
corresponde, libera el fotn. En el caso de la fosforescencia, la energa aportada por el fotn
trasladara al electrn a un estado de excitacin de energa metaestable, en el cual
permanece por un cierto tiempo, ya que no puede regresar inmediatamente a su estado de
reposo. Cuando una determinada cantidad de tiempo pasa, el electrn vuelve a su estado
original, emitiendo luz en el proceso.

21. APLICACIONES Este fenmeno es aprovechado en aplicaciones tales como la pintura

de las manecillas de los relojes, o en determinados juguetes que se iluminan en la oscuridad.
La fosforimetra se ha utilizado para determinar una gran variedad de especies orgnicas y
bioqumicas que incluyen sustancias como cidos nucleicos, aminocidos, pirina y
pirimidina, enzimas, hidrocarburos del petrleo y pesticidas Cientficos en el Reino Unido,
estn probando una nueva tcnica para operar tumores cerebrales, en la que los pacientes
que lo padezcan reciben una dosis de cido 5- aminolevulnico (5-ALA), sustancia que
provoca que en el tumor se generen agentes qumicos fosforescentes o luminiscencia,
marcando el tumor y el cerebro de color rosado

22. Variables que afectan a la fosforescencia Tanto la estructura molecular como el entorno
qumico van a influir en que una sustancia sea o no luminiscente; estos factores tambin
determinan la intensidad de emisin cuando tiene lugar la fotoluminiscencia.

23. instrumentacin

24. Fosformetros . Los instrumentos que se utilizan para estudios de fosforescencia tienen
diseos similares a los fluormetros y a los espectrofluormetros antes considerados, slo
difieren en que requieren dos componentes adicionales. El primero es un dispositivo que
irradia alternativamente la muestra y, despus de un retraso en el tiempo adecuado, mide la
intensidad de fosforescencia. El retraso en el tiempo es necesario para diferenciar la emisin
fosforescente de larga vida de la emisin fluorescente de corta vida que podran originarse en
la misma muestra. Se utilizan dispositivos mecnicos y electrnicos y muchos instrumentos de
fluorescencia comerciales tienen accesorios para medidas de fosforescencia

La espectroscopia de absorcin atmica (a menudo llamada espectroscopia AA o AAS, por

atomic absorption spectroscopy) es un mtodo instrumental de la qumica analtica que
permite medir las concentraciones especficas de un material en una mezcla y determinar una
gran variedad de elementos. Esta tcnica se utiliza para determinar la concentracin de un
elemento particular (el analito) en una muestra y puede determinar ms de 70 elementos
diferentes en solucin o directamente en muestras slidas utilizadas en farmacologa, biofsica
o investigacin toxicolgica.

El mtodo del horno de grafito tambin puede analizar algunas muestras slidas o
semislidas. Debido a su buena sensibilidad y selectividad, sigue siendo un mtodo de
anlisis comnmente usado para ciertos elementos traza en muestras acuosas (y otros
lquidos). Otro mtodo alternativo de atomizacin es el generador de hidruros.
INSTRUMENTOS

Para analizar los constituyentes atmicos de una muestra es necesario atomizarla. La muestra
debe ser iluminada por la luz. Finalmente, la luz es transmitida y medida por un detector. Con
el fin de reducir el efecto de emisin del atomizador (por ejemplo, la radiacin de cuerpo
negro) o del ambiente, normalmente se usa un espectrmetro entre el atomizador y el
detector.

Tipos de atomizadores

Para atomizar la muestra normalmente se usa una llama, pero tambin pueden usarse otros
atomizadores como el horno de grafito o los plasmas, principalmente los plasmas de
acoplamiento inductivo.

Cuando se usa una llama, se dispone de tal modo que pase a lo largo lateralmente (10 cm) y
no en profundidad. La altura de la llama sobre la cabeza del quemador se puede controlar
mediante un ajuste del flujo de mezcla de combustible. Un haz de luz pasa a travs de esta
llama en el lado ms largo del eje (el eje lateral) e impacta en un detector.

Anlisis de los lquidos

Una muestra de lquido normalmente se convierte en gas atmico en tres pasos:

Desolvacin. El lquido disolvente se evapora, y la muestra permanece seca.

Vaporizacin. La muestra slida se evapora a gas.
Atomizacin. Los compuestos que componen la muestra se dividen en tomos libres.

Fuentes de luz

La fuente de luz elegida tiene una anchura espectral ms estrecha que la de las transiciones
atmicas.

* Lmparas de ctodo hueco. En su modo de funcionamiento convencional, la luz es

producida por una lmpara de ctodo hueco. En el interior de la lmpara hay un ctodo
cilndrico de metal que contiene el metal de excitacin, y un nodo. Cuando un alto voltaje se
aplica a travs del nodo y el ctodo, los tomos de metal en el ctodo se excitan y producen
luz con una determinada longitud de onda. El tipo de tubo catdico hueco depende del metal
que se analiza. Para analizar la concentracin de cobre en un mineral, se utiliza un tubo
catdico de cobre, y as para cualquier otro metal que se analice.

* Lsers de diodo. La espectrometra de absorcin atmica tambin puede ser llevada a cabo
mediante lser, principalmente un lser de diodo, ya que sus propiedades son apropiadas
para la espectrometra de absorcin lser. La tcnica se denomina espectrometra de
absorcin atmica por lser de diodo (DLAAS o DLAS), o bien, espectrometra de absorcin
por modulacin de longitud de onda.

La Espectroscopa de emisin atmica es un mtodo de anlisis qumico que utiliza la

intensidad de la luz emitida desde una llama, plasma, arco o chispa en una longitud de onda
particular para determinar la cantidad de un elemento en una muestra. La longitud de onda de
la lnea espectral atmica da la identidad del elemento, mientras que la intensidad de la luz
emitida es proporcional a la cantidad de tomos del elemento.}

Se reportan una serie de ventajas para este mtodo (Delahay, 1970), entre ellas:

Excelente mtodo para el anlisis de trazas (contenidos <1 mgl-1)

Empleado la determinacin de metales, metaloides y otros elementos.
Es suficiente para la determinacin una pequea cantidad de muestra (un nanogramo
es suficiente).
Determinacin simultneamente varios elementos, sin necesidad de separaciones
previas.
Es un mtodo rpido y fcilmente automatizado.
La exactitud y la precisin suele ser del 2 %

Espectroscopa de emisin de llama

Ensayo a la llama para la deteccin de calcio

Una muestra de un material (analito) se pone en la llama, ya sea como gas, solucin
pulverizada o directamente insertado en la llama por el uso de un pequeo bucle de alambre,
normalmente de platino. El calor de la llama evapora el disolvente y se rompen los enlaces
qumicos para crear tomos libres. La energa trmica tambin excita los electrones a estados
electrnicos de mayor energa que posteriormente emiten luz cuando vuelven al estado
fundamental. Cada elemento emite luz a una longitud de onda caracterstica, que se dispersa
por una rejilla o un prisma y se detecta en el espectrmetro.

Una aplicacin frecuente de la medicin de las emisiones con la llama es la regulacin de los
metales alcalinos para anlisis farmacuticos1

Espectrometra de emisin atmica de plasma acoplado inductivamente

La espectrometra de emisin atmica de plasma acoplado inductivamente (ICP-AES) utiliza

plasma acoplado inductivamente para producir electrones excitados e iones que emiten
radiacin electromagntica en longitudes de onda caracterstica de un elemento particular,
elemento.23

Ventajas de ICP-AES: presenta excelentes lmites de deteccin y rango dinmico lineal,

capacidad multi-elemento, interferencia qumica baja y una seal estable y reproducible. Las
desventajas son las interferencias espectrales (muchas lneas de emisin), los gastos y costos
de operacin y el hecho de que las muestras normalmente deben estar en solucin.

Espectroscopa de emisin atmica de Spark y arco

[La espectroscopa de emisin atmica de descarga electrosttica Spark o arco elctrico se

utiliza para el anlisis de elementos metlicos en muestras slidas. Para los materiales no
conductores, la muestra se muele con grafito en polvo para que sea conductor. En los
mtodos de espectroscopa de arco tradicionales, una muestra del slido comnmente se
pulveriza y destruye durante el anlisis. Un arco elctrico o chispa se pasa a travs de la
muestra, calentndola a una temperatura alta para excitar los electrones dentro de ella. Los
electrones del analito excitados emiten luz en longitudes de onda caractersticas que se
pueden dispersar con un monocromador y se detecta. En el pasado, las condiciones de chispa
o arco no fueron bien controlados, el anlisis de los elementos de la muestra eran cualitativos.
Sin embargo, fuentes de chispas modernas con descargas controladas pueden ser
considerados cuantitativos. Tanto el anlisis cualitativo como el cuantitativo de chispa son
ampliamente utilizados para el control de calidad de la produccin en las fundiciones y
aceras.