DETERMINACIN DE CARACTERSTICAS ESPECTROSCPICAS PARA ANALIZAR
ESPECIES QUMICAS EN MATRICES AMBIENTALES
Jhon David Cueltan Solarte, Cristian Arlenson Delacruz.
Laboratorio de Qumica analtica III, Departamento de Qumica, Facultad de Ciencias Exactas y
Naturales, Universidad de Nario.
INTRODUCCION
El anlisis colorimtrico forma parte del anlisis
qumico fotomtrico, que se basa en la medicin de la
cantidad de luz absorbida por una solucin coloreada
(espectrofotometra, colorimetra) o por una suspensin
(turbidimetra) o en la cantidad de luz difundida por
una suspensin (nefelometra). En colorimetra,
generalmente se usa luz blanca, y las determinaciones
se efectan con un colormetro. En el caso que el
equipo cuente con una celda fotoelctrica para la
medicin e instrumento ser un fotocolormetro. En las
tcnicas fotomtricas habr una fuente luminosa, un
medio que absorba la luz y un artefacto que sea capaz
de medir la intensidad de la luz transmitida a travs del
medio absorbente. El colormetro es un instrumento
diseado para dirigir un haz de luz paralela
monocromtica a travs de una muestra lquida y medir
la se fundamentan en la capacidad que tiene la luz de
ser absorbida en un determinado medio. En una tcnica
fotomtrica, siempre intensidad del haz luminoso
emergente.
La fraccin de luz incidente absorbida por una solucin
a una longitud de onda est relacionada con el paso
ptico y con la concentracin de la especie absorbente.
Estas dos relaciones estn combinadas en la ley de
Lambert-Beer:
Log (Io/I) = c l,
En donde Io e I son las intensidades de la luz incidente
y emergente respectivamente, l el paso ptico de la
muestra absorbente (cm), c la concentracin de la
especie absorbente (moles/litro) y el coeficiente de
absorcin molar (M-1cm-1). La expresin log (Io/I) se
denomina absorbancia y se designa por A (siendo
adimensional). Fijando el paso ptico (habitualmente 1
cm), resulta que la absorbancia A es directamente
proporcional a la concentracin del soluto absorbente.
El coeficiente de absorcin molar vara con la
naturaleza del compuesto absorbente, el disolvente, la
longitud de onda y tambin con el pH.
En esta prctica se realiz la determinacin de sulfatos
en agua del rio pasto (zona exterior a la Universidad de
Nario). Los sulfatos se encuentran en las aguas
naturales en un amplio intervalo de concentraciones.
Las aguas de minas y los efluentes industriales
contienen grandes cantidades de sulfatos provenientes
de la oxidacin de la pirita y del uso del cido sulfrico
RESULTADOS Y DISCUSIONES.
La necesidad del mejoramiento de las formas y
herramientas de anlisis en la qumica analtica
cuantitativa ha llevado a que se produzca un desarrollo
de la organizacin de las medidas o datos tomados
mediante distintas tcnicas analticas. Esta
organizacin se centra en las caractersticas de los
instrumentos y de los mtodos que el analista usa
Esta prctica se fundamenta en el anlisis
colorimtrico de una matriz ambiental, buscando
principalmente evaluar el instrumento y el mtodo, con
el fin de adquirir habilidades para analizar sustancias
en diferentes tipos de matrices. Despus de discutir las
maneras de identificar sustancias (principal objetivo de
esta prctica), se proceder a hacer un breve anlisis de
los efectos de dichos componentes de una matriz, en
este caso las consecuencias de que exista una
determinada concentracin de sulfatos en el agua del
rio pasto (rea por fuera de la UDENAR).
PARTE 1. Evaluacin del instrumento.
Calibracin del espectrofotmetro:
Se us una serie de concentraciones en orden creciente
de un analito patrn y se midi su absorbancia.
El analito utilizado fue: sulfato de sodio (Na2SO4).
En la tabla 1, se observan las concentraciones de cada
muestra patrn de analito y su respectiva absorbancia.
El SO42- absorbe a una longitud de onda de 420 nm.
Tabla 1: concentracin de SO42- y su absorbancia instrumento es afirmativa o no. Mediante el clculo de
respectiva la desviacin estndar y posterior mente del lmite de
Absorbanci deteccin (LOD) y lmite de cuantificacin (LQD), se
Concentracin de SO42- (ppm) mencionar una conclusin ms concisa acerca de la
a
16 0,005 fiabilidad de las operaciones del instrumento.
32 0,005
Presicin.
48 0,006 La precisin es el grado de concordancia entre una
64 0,014 medida y otras de la misma magnitud realizadas en
80 0,015 condiciones sensiblemente iguales. Un aparato es
94 0,021 preciso cuando la diferencia entre diferentes medidas
de una misma magnitud sean muy pequeas. La
Las 6 muestras preparadas en el laboratorio slo presicin se expresa mediante la desviacin estandar.
diferan en sus concentraciones (aumentaban de una Los datos que se utilizan en estos calculos son los
forma proporcional), todas contenan agua destilada correspondientes a las absorvancias debidas a una
(solvente) y Na2SO4 (soluto). De acuerdo a esto, se misma muestra de concentracin de 16 ppm (ver tabla
esperaba que las absorbancias que deba medir el 2). La desviacin estandar viene dada por la ecuacin 1.
equipo espectrofotomtrico deban aumentar de una
forma lineal segn la ley de Lambert-Beer. Pero en la Tabla 2: Diferentes absorbancias detectadas por el
tabla 1, se observa que esto no sucede, en la figura 1, equipo a 16 ppm
se puede observar ms claramente este hecho. Concentracin
Absorbancia
(ppm)
Figura 1 0,005
0,007
Relacin de la absorvancia en funcin de la concentracin de SO42-
0,003
16 0,005
0.03
0,01
0.02 0,009
f(x) = 0x - 0
0.02 R = 0.89 0,008
Absorbancia

0.01 XX 0,0067
S 0,0025
0.01
0 Ecuacin 1: Clculo de la desviacin estndar
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
Concentracin (ppm)

Como se puede ver en la figura 1, la curva est muy
lejos de ser lineal. Esto es muy incoherente con el
comportamiento de los instrumentos del tipo
espectrofotomtrico. Estos equipos son capaces de
detectar concentraciones muy bajas (en el orden de las
partes por milln), tambin son sensibles a la variacin
de concentraciones en dicho orden, es decir, el cambio
de 16 a 32 ppm, o de 32 a 48 ppm, o de 48 a 60 ppm,
etc., en una misma matriz necesariamente debe leer
una absorbancia en aumento proporcional y lineal. Lo
que se quiere dar a entender con lo anterior es que
posiblemente sea el instrumento el que tenga fallas.
Un anlisis estadstico de los datos obtenidos ayudarn
a corroborar si la suposicin hecha sobre el
Nota: los valores de x en la ecuacin 1, corresponden a
los valores de las absorvancias en la tabla 2, aqu no se
tiene en cuenta la figura 1.
Remplazando en la ecuacin 1, los valores
correspondientes de absorvancia en la tabla 2, se
obtiene que s es igual a 0,0025. Esto quiere decir que
el equipo es impreciso a concentraciones de
maganitudes similares a las trabajadas en este
experimento. Se puede ver en la tabla 1, que hay
cambios de se seales de absorbancia entre difrentes
concentraciones menores a 0,0025 , por lo tanto esos
datos no son confiables. Tambin se observa que en la
tabla 2, hay valores de absorvancia para 16 ppm
mayores que los expuestos en la tabla 1, para 32 y 48
ppm, esta es otra razn ms que certifica la impresicin
del instrumento.
Lmite de deteccin (LOD).
Es la concentracin de analito que proporciona una
seal en el instrumento (YLOD) significativamente
diferente de la seal del blanco o ruido de fondo. Se
puede definir como la concentracin de analito que
proporciona una seal igual a la seal del blanco, YB,
ms tres veces la desviacin estndar del blanco, SB.
Ecuacin 2: Clculo del lmite de deteccin
Segn la estadstica de las medidas analticas YB es
igual a a, que es el intercepto de la pendiente y SB
igual a Sy/x que estima los errores aleatorios en
direccin y; el valor de Sy/x se haya mediante la
ecuacin 3.
Ecuacin 3: Clculo de la desviacin estndar para
el blanco
Remplazando los valores correspondientes de la figura
1 para cada uno de los trminos de la ecuacin 3, y
posteriormente remplazando en la ecuacin 2, se tiene
que el LOD es igual a 0,00716. El valor expuesto en la
figura 1, para a es -0,0009; es decir, que la absorbancia
del blanco segn la regresin lineal hecha con los datos
de la tabla 1, es negativa, algo que es incoherente
porque no existen absorbancias negativas debido a que
toda la materia absorbe radiacin. Entonces el valor
hallado para LOD no es confiable porque proviene de
un dato muy incorrecto (seal negativa del blanco).
Ahora bien, si 0,00716 fuera un dato correcto
significara que la mnima seal que el equipo podra
detectar sera mayor que tres de las seales detectadas
en la experimentacin (ver tabla 1), algo rotundamente
absurdo.
Lmite de cuantificacin (LQD).
Es el lmite inferior para medidas cuantitativas
precisas, como opuesto a la deteccin cualitativa. Se
puede definir como la concentracin de analito que
proporciona una seal (YLOQ) igual a YB, ms diez
veces SB.
El valor calculado para LQD es 0,0260. Lo que se ha
dicho hasta ahora es que en este experimento no se han
hecho medidas precisas, por lo tanto, es de esperar que
el valor de LQD tambin sea incoherente, y
efectivamente se puede observar en la tabla 1, que
todas las seales detectadas por el instrumento son de
un valor menor que 0,0260.
La afirmacin de partida acerca de que si el
instrumento estaba operando adecuadamente o no,
podra ser apresurada, pero un anlisis metdico
minucioso lleva a pensar que el instrumento tiene
fallas. Errores determinados que existieron (para esta
prctica de laboratorio, errores metdicos y/o
personales) fueron: pesar los 0,037 g de analito patrn
en un beaker de aproximadamente 400 g en una
balanza de 3 cifras significativas. En el pesaje de los
reactivos existen errores y en este caso sin duda alguna
hay errores (ver estos tipos de errores en bibliografa,
es las referencias 4 y 5), a causa de la ansiedad a la hora
la de aforar no se consigui una posicin adecuada del
menisco, otro posible error en la prctica se le atribuye
al agua destilada la cual pudo estar en malas
condiciones, etc. Lo nico que se llega a concluir con
lo anterior es que no se conoca a la perfeccin la
concentracin de las muestras. Aqu se puede asegurar
que se prepararon disoluciones con diferentes
concentraciones, y aunque no conocidas
perfectamente, las absorbancias correspondientes
deban aumentar de una forma lineal, en la linealidad
no influa el agua destilada puesto que todas las 6
muestras contenan el mismo volumen de sta (25 mL)
y todas las disoluciones estaban en las mismas
condiciones.
Finalmente, es importante tener en cuenta que aunque
los anterior explica de una posible falla del equipo, no
necesariamente debe haberla. Simplemente puede ser
que el instrumento es limitado y que no responde bien
a concentraciones menores a 100 ppm.
- Una ltima interrogacin!
- Si el equipo se limita a concentraciones menores de
100 ppm y si est en buenas condiciones, qu pudo
haber causado lo anterior?
- Lo nico que se puede pensar para responder esta
pregunta es que seguramente el manejo del
instrumento el da de la prctica de laboratorio fue
inadecuado.
PARTE 2. Evaluacin del mtodo.
Recoleccin de la muestra.
Se busc identificar la cantidad de SO42- en el tramo
del rio pasto del rea exterior a la Universidad de
Nario, para eso se escogi dos puntos que dividan en
tres fracciones la longitud del rio del rea elegida. De
cada punto se extrajo una muestra de aproximadamente
1,5 litros y despus de 5 minutos se tom otra, en total
se sustrajeron 4 muestras, aproximadamente 6 litros.
La recoleccin, el mantenimiento y el transporte no
requeran de mucha exigencia puesto que la
concentracin de in sulfato no se altera en el contacto
con aire, ni tampoco en cambios sensibles de
temperatura, aunque es probable que existan cambios
en la matriz, esto no afectara, porque lo nico que se
requiere conservar es la concentracin de SO 42-. La
recoleccin se hizo en una palangana y se transport en
contacto con el ambiente, se llev la muestra desde el
rio al laboratorio en un intervalo de tiempo de
aproximadamente 10 minutos, y en cuanto lleg,
inmediatamente se procedi a trabajarla.
Se trabaj mediante el mtodo de adicin estndar. Como ya se ha mencionado, la linealidad de la curva
La matriz fue agua del rio Pasto. En cada baln
aforado de 25 mL se agregaron unas cantidades
constantes de matriz y solucin acondicionadora, la
cual proporciona la turbidez a las muestras, se adicion
disoluciones de analito patrn en orden creciente y
finalmente se aforaron los balones.
Las muestras con analito patrn y analito en la matriz,
se llevaron a lectura al espectrofotmetro dando como
resultado las absorbancias que aparecen en la tabla 3.
Tabla 3: Absorbancias detectadas por el mtodo de
adicin estndar
Concentracin de Absorbancia de analito
analito patrn patrn y analito matriz
0 0,221
12 0,240
36 0,300
48 0,342
Para este caso se puede ver que las absorbancias
aumentan de una manera no muy desproporcionada a
medida que incrementa la concentracin (ver tabla 3).
En la evaluacin del instrumento se planteaba que el
equipo tena fallas o limitaciones, en la continuacin
de este informe se va a suponer que eran limitaciones;
Entonces para que los datos de absorbancias
planteados en la tabla 3, sean tiles para este anlisis
deben depender de concentraciones de analito mayores
a 100 ppm. El grfico de los valores de la tabla 3, se
expresa en la figura 2.
Figura 2
Relacin de la absorbancia en funcin de la concentracin de analito en la matriz
0.4
0.35
0.3 f(x) = 0x + 0.22
R = 0.99
0.25
0.2
Absorbancia
0.15
0.1
0.05
0
0 10 20 30 40 50 60
Concentracin (ppm)
de la figura 2, es mucho ms pronunciada que la curva
de la figura 1, lo cual significa que el equipo respondi
mejor. Para comprobar si de verdad se trabaj con
concentraciones superiores a 100 ppm, se hizo una
regresin lineal en la pendiente de la figura 2, lo que se
busca es la concentracin de SO42- en la muestra de
agua del rio Pasto.
Despus de hacer los clculos utilizando la ecuacin de
la pendiente de la figura 2, se encontr que la
concentracin de sulfatos en las muestras del agua del
rio Pasto es 86,16 ppm.
86,16 ppm fue la concentracin de SO42- encontrada,
ahora, para evaluar si este dato es correcto se usarn
los siguientes anlisis estadsticos.
Primero que todo se comprueba mediante el dato
anterior hallado que las concentraciones trabajadas en
la evaluacin del mtodo efectivamente fueron
mayores que 100 ppm. De esto se identifica que el
mtodo hasta ahora se cataloga como adecuado, ya que
permite trabajar con concentraciones por encima del
lmite propuesto en la parte 1 de este informe.
En la tabla 4, se observa el lmite de deteccin, el
lmite de cuantificacin y la precisin del mtodo, la
ltima calculada con las absorbancias dadas al
introducir 4 veces en el equipo la muestra de 36 ppm
de analito en la matriz, donde las seales de
absorbancia detectadas por el instrumento fueron:
0,300; 0,303; 0,299; 0,304.
Tabla 4: Datos estadsticos para el anlisis del
mtodo
xx 0,3015
S (Precision) 0,0024
LOD 0,3968
LQD 0,8200
En la tabla 4, se observa que la precisin es 0,0024;
similar a la calculada en la parte 1 (S = 0,0025), a pesar
de esta similitud se puede afirmar que el mtodo si es
preciso, porque a valores de absorbancia de 0,2 o 0,3;
una variabilidad de 0.0024 no es muy significativa.
Ahora viene nuevamente lo negativo, a pesar de que es
un mtodo preciso el LOD y el LQD son muy altos
comparados con las absorbancias representadas en la
tabla 3, en donde todos los datos estn por debajo del
LOD y del LQD. Entonces, el dato obtenido de la
concentracin de ion sulfato en el agua del rio Pasto
pierde garantas y no sera un valor que sirve para
evaluar en qu condiciones benficas o malficas se
encuentra el agua del rio de la zona exterior de la
UDENAR.
Si 86,16 ppm fuera un dato que con seguridad se lo
tomara como la concentracin de SO42- en el rea
escogida, se podra decir que los niveles de este
reactivo en el tramo del rio elegido no son
perjudiciales, debido a que las cantidades mximas
permitidas en agua son 200 ppm.
Por ltimo es necesario tener en cuenta que muy
posiblemente el mtodo sea inadecuado, y por lo tanto
se debe obtener una nueva forma de estructurar el
mtodo y entonces repetir el procedimiento para
encontrar concentraciones ms razonables de sulfato en
el agua del rio Pasto.
4. Tanto el anlisis instrumental como el anlisis
metdico en este experimento brindaron resultados
negativos. Lo cual abre la brecha para investigar
y/o buscar un nuevo mtodo y para plantear una
posible mejora del instrumento, y si es necesario
usar otro equipo.
5. Se identific que el mtodo fue preciso, pero a
pesar de eso, tienen ms valides los datos de LOD
y LOQ con los cuales se califica al mtodo como
irregular, es por esta razn que el valor encontrado
para la concentracin de SO 42- en el agua del rio
pasto en la zona exterior a la universidad de Nario
no tiene validez.
6. El mtodo result ser ineficaz para la
determinacin de sulfatos, pero esto no quiere
decir que tambin lo sea para otro tipo de anlisis.
BIBLIOGRAFIA.
1. http://www.lenntech.es/sulfatos.htm
2. http://trabajoanalisisquimico.blogspot.com/2010/0
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3. http://ocw.usal.es/ciencias-experimentales/analisis-
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4. http://www.ub.edu/oblq/oblq
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5. http://www.uv.es/gammmm/Subsitio
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%20Basicas.htm
6. http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/scan2/031275/0
31275.pdf

CONCLUSIONES.

1. A raz de los datos obtenidos se observ en la

figura 1, que la curva est muy lejos de ser lineal,
esto se le atribuye a una limitacin que puede tener
el instrumento que es deficiente en la evaluacin
de concentraciones de SO42- menores a 100 ppm.
2. Aunque la curva de la figura 2, tiene una
linealidad ms pronunciada que la curva de la
figura 1, no es lo suficiente como para brindar
datos correctos para el anlisis de sulfatos en aguas
del rio Pasto.
3. En ninguna de las dos curvas de las figuras 1 y 2,
existe la opcin de calcular un rango lineal, ya que
en ninguna hay una linealidad adecuada.