Automatizacin del laboratorio de

hematologa
Hemocitmetro
Frotis sanguneo
Anlisis Hematolgico Automatizado
Bioqumica sangunea
Anlisis bioqumico
espectrofotmetro
Nanodrop
PRUEBAS
INMUNODIAGNOSTICAS

Dr. Mblgo. Marco A. Rivera Jacinto

Profesor Asociado D.E. - Laboratorio Clnico
PRUEBAS DE AGLUTINACION

Mtodo rpido y sencillo usado ampliamente para identificar: virus,

bacterias, grupos sanguneos, inmunoprotenas.
Cuando se usan antgenos conocidos se detectan anticuerpos
especficos.
Los antgenos que se utilizan se encuentran en suspensin.
La IgM es la mas eficiente aglutinando.
PRUEBAS DE AGLUTINACION
Los anticuerpos establecen uniones cruzadas con los antgenos, lo que
se visualiza como grumos.
Las partculas de antgeno poseen carga negativa. (Potencial Zeta).
Los anticuerpos poseen carga positiva.
Es necesario que exista una concentracin salina para favorecer la
reaccin.
Fenmeno de Prozona: cuando existe un exceso de anticuerpos, se
inhibe la aglutinacin.
PRUEBAS DE AGLUTINACION

VENTAJAS DESVENTAJAS
Muy utilizadas. Muy sensibles.

Sencillas. Reacciones hetero-especificas.

Rpidas.

Cuali o cuantitativas

Econmicas
AGLUTINACIN EN LTEX
 FUNDAMENTO

Ltex Antgeno Ltex sensibilizado

Ltex sensibilizado Anticuerpos especficos Aglutinacin

 RESULTADOS

AGLUTINACION NO AGLUTINACION
PRUEBA DE AGLUTINACIN EN TUBO
PRUEBA DE AGLUTINACIN EN PLACA
PRUEBAS DE PRECIPITACIN
Se realizan en medios lquidos y en medios semislidos.
Debe existir equivalencia entre ambos reactivos: antgeno y anticuerpo.
En medios lquidos se mezclan ambos componentes, dejando reposar y
se formara un anillo en la interfase de los lquidos.
Prueba de Ascoli para ntrax.
PRUEBAS DE PRECIPITACIN.
Los medios semislidos se usan para inmunodifusin o
inmunoeletroforesis.
Se basa en el hecho de que de que la mayora de las protenas se
difunden a travs de un gel.
Al contactarse antgenos y anticuerpos especficos se forma una banda
de precipitacin en el punto en que ambos alcanzan equivalencia.
PRUEBAS DE PRECIPITACION
VENTAJAS DESVENTAJAS
Existen varias pruebas. Poseen baja sensibilidad.
Se observan fcilmente.
Muy tiles.
No se requiere equipo
costoso.
Pueden ser cuali o cuantitativas
PRUEBAS DE INMUNODIFUSIN
INMUNODIFUSION DOBLE EN GEL

PRINCIPIO:
Ambos componentes migran en el gel.

Formacin de grandes complejos antgeno-anticuerpo (Ag-Ac) que precipitan en

gel.

La formacin de lneas de precipitado ocurre cuando existen concentraciones

aproximadamente equimolares de antgeno y anticuerpo.
INMUNODIFUSION DOBLE EN GEL
POCILLOS:

ANTIGENO ANTICUERPO
Ag Ac
INMUNODIFUSION DOBLE EN GEL
 lnea de precipitacin

Exceso de Ag Equivalencia Exceso de Ac

 C+

Ag

SP +
APLICACIONES

Deteccin de anticuerpos:
Hidatidosis, fasciolosis
Aspergilosis
Histoplasmosis
Tifoidea
Influenza
Otras infecciones virales
INMUNOELECTROFORESIS

PRINCIPIO:
Combina dos tcnicas para la identificin de
antgenos en una muestra:
Electroforesis
Inmunodifusin
ELECTROFORESIS:

Las protenas de una muestra son separadas por su carga

elctrica en un gel:
Protenas cargadas positivamente migran en direccin al ctodo.
Protenas cargadas negativamente migran en direccin al nodo
ELECTROFORESIS VERTICAL
ELECTROFORESIS HORIZONTAL
INMUNODIFUSION:

Despus de la separacin de protenas, los anticuerpos (suero

sanguneo) son colocadas en una hendidura.
Las protenas y los anticuerpos se difunden en el gel.
Se forma una lnea de precipitacin cuando se alcanza la
concentracin ptima de Ag-Ac.
INMUNOELECTROFORESIS
AG

Suero problema
APLICACION

Enfermedades parasitarias: Hidatidosis,

Fasciolosis.
Protenas del complemento
Clases/subclases de inmunoglobulinas
Deteccin de protenas plasmticas
Deteccin de protenas en orina
INMUNOELECTROFORESIS

Deteccin de
protenas sricas
Protenas sricas
elevadas
Exceso de Ig G
INMUNOFLUORESCENCIA
PREGUNTAS?