Sunteți pe pagina 1din 5

Synevo Romania

Testarea prenatala neinvaziva pentru aneuploidii fetale


(NIFTY)
2700 Lei

Sinonim: ADN fetal liber n sngele materm


Informaii generale
Testarea prenatal neinvaziv utilizeaz ADN-ul fetal liber din plasma femeilor
gravide pentru screening-ul aneuploidiilor fetale ce implic cromozomii 13, 18,
21, X i Y.
ADN-ul fetal liber circulant ce reprezint aproximativ 3-13% din ADN-ul matern
liber total, deriv probabil n mare parte din placent i dispare n decurs de
cteva ore dup naterea ftului1.
Prezena ADN-ului fetal n plasma matern a fost demonstrat pentru prima dat
de ctre Lo et al. n 1997, utiliznd ca model secvenele ADN ale cromozomului
Y provenite de la un ft de sex masculin 2, fiind ulterior confirmat i de ctre ali
cercettori3;4. Aceast descoperire a artat c ADN-ul matern din plasm
reprezint un amestec himeric de ADN matern i fetal. nainte de demonstrarea
acestui himerism al ADN-ului, probele de plasm matern nu reprezentau o
surs pentru analiza molecular, investigatorii fiiind interesai doar de celulele
fetale nucleate din circulaia matern5.
Tentativele iniiale de detectare a aneupoidiiilor fetale utiliznd ADN-ul fetal liber
circulant au necesitat folosirea unor markeri ADN sau ARN placentari multiplii,
ceea ce a fcut ca screening-ul s fie costisitor i laborios. Recent, cteva
grupuri de cercettori au validat tehnologia de secveniere genomic paralel
masiv ce poate cuantifica milioane de fragmente ADN n probe biologice i
poate depista cu mare acuratee trisomiile 13, 18 i 21. Utilznd probe de snge
arhivate provenite de la paciente cu risc crescut de aneuploidii fetale care au
efectuat diagnostic prenatal invaziv, cteva studii de validare desfurate pe
scar larg au demonstrat c rata de detecie a trisomiilor 13, 18 i 21 este >
98%, cu un procent redus de rezultate fals-pozitive. Dei nu exist studii
prospective bazate pe aceast tehnologie, se pare c analiza ADN-ului fetal liber
circulant constituie cel mai eficient instrument de screening pentru aneuploidii
fetale la femeile cu risc crescut1.
Testul NIFTY (Non-Invasive Fetal Trisomy Test) a fost dezvoltat de BGI, prima
companie care a furnizat diagnostic prenatal neinvaziv i care a acumulat o
experien important bazat pe numrul cel mai mare de teste efectuate. Astfel,
conform unei statistici din Aprilie 2014, BGI Diagnostics a efectuat 292 248 teste
cu o acuratee de >99%.
Testul examineaz sngele periferic matern i utilizeaz tehnologia de
secveniere de ultim generaie (NGS Next Generation Sequencing) pentru
detectarea, dup sptmna a 10-a de sarcin, a celor 3 aneupoidii
cromozomiale fetale majore: trisomie 21, 18 i 13. Testul poate depista i alte
aneuploidii i identifica sexul ftului.
Investigaia fiind neivaziv este evitat riscul de avort i infecie intrauterin
asociat cu testarea prenatal invaziv (prin amniocentez sau prelevarea de
viloziti coriale) iar detectarea aneuploidiilor fetale permite intervenia precoce 6.
Validarea clinic a testului NIFTY a avut loc n dou faze. n prima faz s-a
efectuat un studiu dublu-orb n care au fost analizate 3464 probe cu scopul de a
stabili valoarea predictiv a testului NIFTY pentru trisomiile 21, 18 i 13 ntr-o
populaie cu risc crescut i de a evalua sensibilitatea i specificitatea acestuia n
comparaie cu rezultatul cariotipului din lichid amniotic (considerat drept testul
gold-standard). Au fost demonstrate o sensibilitate i o specificitate de 100% i
respectiv 99.97% pentru trisomiile 21, 18 i 13. n a doua faz Testul NIFTY a
fost validat pe scar larg ntr-un studiu multicentric ce a analizat 11 105 cazuri.
Au fost obinute rezultate pozitive n 190 de cazuri, fiind incluse 143 cazuri cu
trisomie 21 i 47 de cazuri cu trisomie 18. Nu s-au constatat rezultate fals-
negative; au fost raportate 2 rezultate fals-pozitive pentru trisomia 21 i respectiv
trisomia 18. Testul a demonstrat astfel o sensibilitate de 100% i o specificitate
de 99.96% pentru detecia trisomiilor 18 i 21, iar concluzia cercettorilor a fost
c introducerea acestui test screening n practica medical curent ar putea evita
aproximativ 98% dintre procedurile de diagnostic prenatal invaziv 7.
Recomandri pentru efectuarea testului NIFTY
vrsta matern avansat (>35 ani);
semne ecografice sugestive pentru anomalii cromozomiale fetale;
identificarea unui risc crescut de anomalii cromozomiale la natere n urma
screening-ului de prim trimestru, trimestru II sau integrat;
prezena la unul dintre prini a unei translocaii robertsoniene echilibrate care
predispune la aneupoidii fetale;
paciente care au contraindicaie pentru metodele invazive de diagnostic
prenatal: placenta previa, iminen de avort sau infectii HBV/HIV;
paciente supuse ferilizrii in vitro sau care au suferit anterior avort habitual;
testul reprezint o opiune pentru orice gravid >10 sptmni care dorete s
efectueze un test neivaziv pentru depistarea aneupoidiilor fetale 1;6.
Pregtire pacient:
Se recomand ca medicul trimitor s efectueze o consiliere corespunztoare
pretestare.
naintea recoltrii probei pacientele vor completa obligatoriu 3 formulare: de
cerere, de consimmnt i de asigurare (ce includ informaii despre utilitatea
testrii neinvazive prenatale precum i limitele acesteia).
Laboratorul Synevo ofer consiliere genetic n centrul de recoltare Grozovici
(Dr. Grozovici, nr. 6, sector 2, Bucureti) de luni joi ntre orele 8.30 10.30.
n vederea recoltrii probei nu este necesar o pregtire special. Datorit
particularitilor sistemului de recoltare aceasta se va efectua ns numai la
sediile Synevo.
Pacienta trebuie sa prezinte ecografie care sa faca dovada varstei
gestationale (>10 saptamani).
Pentru Bucuresti recoltarile si programarile pentru consiliere se efectueaza in
Call Center (021 208 28 28).
Pentru laboratoarele din tara: programarile pentru recoltare se efectueaza la
sediile fiecarui laborator Synevo.
Zilele de recoltare sunt: luni joi pentru centrele din Bucureti i luni miercuri
pentru centrele din ar.
Testul poate fi efectuat dup sptmna 10 de sarcin. Se recomand ca
medicul trimitor s furnizeze informaii ecografice detaliate care estimeaz
sptmnile de sarcin, n special pentru sarcina incipient. De asemenea, se
recomand consult genetic nainte i dup efectuarea testului NIFTY dac
sarcina este > 18 sptmni 6;8.
Specimen recoltat snge venos8.
Recipient de recoltare vacutainer Streck-Cell-Free BCT8.
Prelucrare necesar dup recoltare pentru a asigura optima omogenizare a
sngelui efectuai 10 micri uoare de inversiune a tubului 8.
Volum prob minim 10 mL8.
Stabilitate prob n vederea asigurrii stabilitii probei pn la sosirea n
laboratorul unde se efectueaza testarea, proba va fi meninut la temperaturi de
6 24C, n cutia original.
Dac proba se recolteaz la centrele din ar aceasta trebuie s ajung n 24h la
Laboratorul Central8.
Metode secveniere de ultim generaie (NGS) i analiz bioinformatic 8.
Interpretarea rezultatelor
Prin acest test se evalueaz trisomiile 13, 18, 21, dar este, de asemenea, posibil
s se raporteze i alte aneuploidii cromozomiale sau sindroame de microdeleie
(5p, 1p36, 2q33.1). Rata de detecie a acestor anomalii este apropiat, dar nu
egal cu 100%.
Un rezultat risc nalt (pozitiv) indic faptul c exista o mare probabilitate
(>99.9%) ca ftul s prezinte o trisomie a cromozomilor 21, 18, 13. Deoarece
NIFTY nu este un test diagnostic, un rezultat pozitiv trebuie confirmat prin
examen citogenetic (cariotip) din lichid amniotic sau viloziti coriale.
Dei rata de detecie este foarte mare un rezultat risc sczut (negativ) nu poate
exclude total posibilitatea unei trisomii fetale 6;8.
n ceea ce privete detecia aneuploidiilor cromozomilor sexuali sensibilitatea
testului este de 75% pentru sindromul Turner (XO) i apropiat de 100% pentru
anomaliile XXY sau XYY9.
Testul este capabil s identifice informaii despre sexul ftului cu o acuratee de
98%. Trebuie menionat ns c testul nu poate depista maladii sex-linkate 6;8.
Limite i interferente
Datele menionate mai sus cu privire la sensibilitate i specificitate se bazeaz
pe studii efectuate la femei nsrcinate cu ft unic, iar datele clinice similare
pentru sarcini gemelare sunt limitate.
Pe baza studiilor raportate pn n prezent, performana de testare NIFTY n
sarcini gemelare este probabil similar cu cea a sarcinilor unice. Dac rezultatul
este risc inalt, se sugereaz c cel puin unul dintre fetuii gemeni are un risc
crescut i este nevoie de investigare suplimentar a ambilor fetui. Dac
rezultatul este risc sczut, exist o probabilitate de 99% ca ambii fetui s
prezinte risc sczut pentru trisomiile 21, 18, i 13, deoarece se presupune c
ambii fetui ntr-o sarcin gemelar, au o contribuie egal la suma total de ADN
fetal din plasma matern.
n cazul n care gravidei i s-au efectuat transfuzii cu snge, transplant sau terapie
cu celule stem, exist posibilitatea obinerii unui rezultat fals din cauza ADN-ului
exogen.
Deoarece NIFTY detecteaz doar anomalii cromozomiale numerice nu pot fi
evideniate:
translocaii cromozomiale echilibratei alteanomalii cromozomiale
structurale
poliploidii
mozaicisme cromozomiale fetale i/sau placentare n procent mic (adic
prezena a dou linii celulare cu un set diferit de cromozomi, cu o linie celular
slab reprezentat),
mutaii punctiforme
defecte de metilare a ADN-ului6;8.
Descarcati formularele necesare: formular de cerere, de consimmnt
formular de asigurare
Bibliografie

1. The American College of Obstetricians and Gynecologists. The Society for Maternal-Fetal
Medicin. Commitee Opinion: Noninvasive Prenatal Screening for Fetal Aneuploidy. Number
545, December 2012. www.acog.org.
2. Lo YMD, Corbetta N, Chamberlain PF, Rai V, Sargent IL, Redman CWG, Wainscoat JS.
Presence of fetal DNA in maternal plasma and serum. Lancet 1997;350:485-487
3. SmidM, Lagona F, de Benassuti L, Ferrari A, Ferrari M, Cremonesi L. Evaluation of different
approaches for fetal DNA analysis from maternal plasma and nucleated blood cells. Clin
Chem1999;45:1570-1572.
4. Houfflin-DebargeV, ODonnell H, Overton T, Bennett PR, Fisk NM. High sensitivity of fetal
DNA in plasma compared to serum and nucleated cells using unnested PCR in maternal
blood. Fetal Diagn Ther 2000;15:102-107.
5. Lo YMD. Fetal DNA in Maternal Plasma: Biology and Diagnostic Applications. Clin Chem.
2000 Dec;46(12):1903-6.
6. NIFTY. Non-Invasive Fetal Trisomy Test. www.niftytest.com.
7. Dan S, Wang W, Ren J, Li Y, Hu H, Xu Z, Lau TK, Xie J, Zhao W, Huang H, Xie J, Sun L,
Zhang X, Wang W, Liao S, Qiang R, Cao J, Zhang Q, Zhou Y, Zhu H, Zhong M, Guo Y, Lin
L, Gao Z, Yao H, Zhang H, Zhao L, Jiang F, Chen F, Jiang H, Li S, Li Y, Wang J, Wang J,
Duan T, Su Y, Zhang X. Clinical application of massively parallel sequencing-based prenatal
noninvasive fetal trisomy test for trisomies 21 and 18 in 11,105 pregnancies with mixed risk
factors. Prenat Diagn. 2012 Dec;32(13):1225-32.
8. Laborator Synevo. Referinele specifice tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type:
Catalog.
9. Jiang F, Ren J, Chen F, Zhou Y, Xie J, Dan S, Su Y, Xie J, Yin B, Su W, Zhang H, Wang W,
Chai X, Lin L, Guo H, Li Q, Li P, Yuan Y, Pan X, Li Y, Liu L, Chen H, Xuan Z, Chen S,
Zhang C, Zhang H, Tian Z, Zhang Z, Jiang H, Zhao L, Zheng W, Li S, Li Y, Wang J, Wang J,
Zhang X. Noninvasive Fetal Trisomy (NIFTY) test: an advanced noninvasive prenatal
diagnosis methodology for fetal autosomal and sex chromosomal aneuploidies.BMC Med
Genomics.2012 Dec 1;5:57.