Medios de Cultivo e Inoculación

2/08/2017
microbiota
normal
Susana Ramrez Castrilln

2017
Elaborado por: SUSANA RAMREZ CASTRILLN
Microbiota asociada a la materia prima como su Deterioro y

hbitat natural: prdida de
Levaduras sobre las frutas atributos
Estafilococos en la piel de los mamferos
Pseudomonas en la piel de los pescados
Corinebacterias en leche de vaca, etc.
Elaborado por SUSANA RAMREZ CASTRILLN Elaborado por: SUSANA RAMREZ CASTRILLN
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Dado el tamao de las poblaciones

microbianas que pueden estar
presentes en un alimento, que van
Contaminacin desde algunos miles hasta varios
Cruzada
millones de clulas por gramo, su
determinacin cuantitativa requiere
E.T.A
la preparacin de diluciones
Incumplimiento conocidas de la muestra.
normatividad
Sanitaria
Elaborado por: SUSANA RAMREZ CASTRILLN Elaborado por: SUSANA RAMREZ CASTRILLN
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El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes

indispensables para el crecimiento de los microorganismos.
Contener sustancias nutritivas necesarias para el

desarrollo de los microorganismos (tales como
aminocidos, carbohidratos, polialcoholes,
La composicin precisa depender de la especie que se vitaminas, minerales).
quiera cultivar, porque las necesidades nutricionales varan
considerablemente. Tener un pH que permita un desarrollo ptimo, por
lo general las bacterias patgenos necesitan un pH
Todos los microorganismos requieren agua, carbono, neutro o ligeramente alcalino (7,0 7,4), en cambio
nitrgeno, hidrgeno, calcio, fsforo y hierro como
elementos vitales. Los microorganismos exigentes requieren las levaduras y hongos requieren
adems factores de crecimiento como aminocidos, un pH cido (5,0).
vitaminas, purinas y otras sustancias que no son capaces de
sintetizar. Elaborado por: SUSANA RAMREZ CASTRILLN Elaborado por: SUSANA RAMREZ CASTRILLN
Estar previamente esterilizados o preparados en Aislamiento de microorganismos: bacterias,

condiciones aspticas. hongos y/o levaduras, desde una muestra o
material patgeno (secrecin purulenta, orina,
Estar protegidos de la contaminacin ambiental rgano, heces fecales, etc.) o de un alimento
por tapones de algodn, tapones de goma, tapas (leche, carne, etc.)
metlicas o roscas.
Estudio morfolgico de las colonias.
Conservacin de cepas identificadas (coleccin de

cepas microbianas o cepario).
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El material alimenticio en el que crecen los

microorganismos es el Medio de Cultivo y el
crecimiento de los microorganismos es el
Clasificacin y tipificacin de microorganismos por
Cultivo Microbiano.
estudio de sus propiedades bioqumicas en medios
diferenciales.
CULTIVO: Hongos
Obtencin de toxinas o investigacin de sus
caractersticas.
Cultivo y cosecha de microorganismos para la MEDIO DE

elaboracin de productos biolgicos (vacunas, CULTIVO: Agar
antgenos, bacterinas, toxoides, etc.). Rosa de Bengala
ESTADO FSICO Slidos : AGAR

O Lquidos: CALDO
CONSISTENCIA Semislidos
Enriquecidos
COMPOSICIN Diferenciales
Selectivos
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El crecimiento de microorganismos se
evidencia en la superficie del medio
permitiendo describir caractersticas
macroscpicas como la morfologa de las
colonias, el color, tamao y aspecto de stas,
entre otras.
Permite realizar recuentos de UFC.

Penicillium spp. Agar Sabouraud
Tiene una sustancia de sostn: agar-agar.

El crecimiento de los
microorganismos se
evidencia mediante turbidez
del medio, en algunos casos
se favorecen las lecturas por
cambios de color o
generacin de CO2.
Agar Citrato de Simmons
Caldo Lactosado Bilis Verde Brillante 2%

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Agares de menor concentracin.
Permite evidenciar la movilidad e algunos

microorganismos que cuentan con
estructuras que le permiten esta
caracterstica.
Elaborado por: SUSANA RAMREZ CASTRILLN L. monocytogenes.SIM Elaborado por: SUSANA RAMREZ CASTRILLN
ENRIQUECIDOS: Facilitan el crecimiento

primario de diferentes microorganismos,
aportando sustancias como leche, sangre,
suero, etc.
SELECTIVOS: Facilitan la inhibicin entre

microorganismos, cuando se requiere la
identificacin de uno especfico; contienen
sustancias inhibitorias como antibiticos,
MotilityTest
Enterobacter aerogenes (+) izquierda. colorantes, entre otros.
Micrococcus luteus (-) - derecha
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DIFERENCIALES: Facilitan la diferenciacin

Apelmazamiento de los medios de cultivo
de microorganismos evidenciando la
deshidratados.
tolerancia o no a sustancias bsicas como
azcares, aminocidos, enzimas, etc.
EMB
Mac Conkey Desviacin del valor de pH.
Punto de solidificacin demasiado elevado.
Colonias inconcretas o desledas.
Turbidez.
Escasa estabilidad del gel.
Medios de cultivo contaminados.
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Las muestras Para poder identificar las caractersticas morfolgicas y
habitualmente fisiolgicas, los microorganismos deben ser separados de otras
contienen poblaciones especies .
mixtas. El CULTIVO PURO O AXNICO es aquel que contiene un slo
Es muy difcil encontrar tipo de microorganismo.
muestras contaminadas
con un solo tipo de
microorganismos.
Los dos mtodos Usar medios de cultivo adecuados y esterilizados.

ms frecuentes de
inoculacin para Emplear instrumentos aspticos.
obtener un cultivo No contaminar ni destruir el inculo.
puro son : Depositar el inculo aspticamente en el medio de cultivo.
Aislamiento por
Esterilizar los instrumentos usados antes y despus de cada
agotamiento por
estriacin. procedimiento.
LA TCNICA DE LA SIEMBRA VARA CON EL ESTADO FSICO DEL
Aislamiento por MEDIO
dilucin en placa
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Por dilucin en caldo
SLIDAS
SEMISLIDAS
LQUIDAS
Se inocula Se siembra
Pueden
con asa recta,
sembrarse con:
Asa
con asa recta
o pipeta argolla o Por estriado en tubo inclinado
Drigalsky.
microbiolgica -
Argolla
Ideal para la o pico de flauta
Previamente obtencin de
Hisopo se calienta el colonias
Pipeta medio aisladas
Por puncin o picadura Estriado y agotamiento en placa.
Vertido y extensin en placa
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Los estudios que implican cultivos microbianos a

menudo requieren la identificacin de los Zig-zag
organismos presentes en un cultivo. Cuando una
pequea porcin de ese cultivo se inserta en un Estra cruzada
medio nutriente que contiene agar, es posible
separar una masa de bacterias individuales en
unidades que forman colonias. Cada una de
estas unidades se desarrolla en colonias
discretas que muestran caractersticas que
ayudan a identificar el organismo.
Cuadrantes
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En ambos mtodos, las

suspensiones de clulas
microbianas se diluyen
antes de su siembra en
la caja Petri.
Para muestras
altamente
contaminadas.
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Este mtodo se
utiliza para
microorganismos
anaerobios
facultativos y
microaerfilos.
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Microbiota asociada a la materia prima como su Deterioro y

Dado el tamao de las poblaciones

El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes

Contener sustancias nutritivas necesarias para el

Estar previamente esterilizados o preparados en Aislamiento de microorganismos: bacterias,

Conservacin de cepas identificadas (coleccin de

El material alimenticio en el que crecen los

Cultivo y cosecha de microorganismos para la MEDIO DE

ESTADO FSICO Slidos : AGAR

Permite realizar recuentos de UFC.

Tiene una sustancia de sostn: agar-agar.

Caldo Lactosado Bilis Verde Brillante 2%

Agares de menor concentracin.

Permite evidenciar la movilidad e algunos

ENRIQUECIDOS: Facilitan el crecimiento

SELECTIVOS: Facilitan la inhibicin entre

DIFERENCIALES: Facilitan la diferenciacin

Punto de solidificacin demasiado elevado.

Colonias inconcretas o desledas.

Escasa estabilidad del gel.

Medios de cultivo contaminados.

Las muestras Para poder identificar las caractersticas morfolgicas y

habitualmente fisiolgicas, los microorganismos deben ser separados de otras

contienen poblaciones especies .

mixtas. El CULTIVO PURO O AXNICO es aquel que contiene un slo

Es muy difcil encontrar tipo de microorganismo.

Los dos mtodos Usar medios de cultivo adecuados y esterilizados.

Por dilucin en caldo

Por puncin o picadura Estriado y agotamiento en placa.

Vertido y extensin en placa

Los estudios que implican cultivos microbianos a

En ambos mtodos, las

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