Ao de la Consolidacin del Mar de Grau

Universidad Nacional de Piura

Escuela de Ingeniera Agroindustrial

Docente:
Mcblogo. Jorge Bermejo Benites
Alumnos:
Castillo Checa Denilson Ivan
Chanduvi Alvarado Gerson Ruben
Meca Moran Stefany
Roa Mejias Jeyson
Asignatura:
Microbiologa General
TEA:
Aislamiento de hongos en alimentos envasados
artesanalmente.

INTRODUCCION

Los hongos son microorganismos de estructura celular eucariota que poseen ncleo bien definido (pudiendo ser
unicelulares o pluricelulares); son hetertopos, aclorfilos y de metabolismo adsortivo. Pueden existir de una
forma unicelular (levadura) o de una forma filamentosa (moho).
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Los mohos se encuentran por todas partes (suelo, agua, plantas...) y son transportados por el aire, materiales,
envases, animales, seres humanos. La mayora de las industrias alimenticias proporcionan las condiciones
ambientales y las materias orgnicas necesarias para su desarrollo. Estos hongos microscpicos tienen gran
capacidad de adaptacin y sntesis bioqumica como as tambin un potencial enzimtico importante pudiendo
ser agentes de la transformacin tanto tiles como perjudiciales.

Los hongos no son plantas ni animales, aunque se parezcan en algunas de sus caractersticas tanto a las unas
como a los otros. A las plantas, por ser organismos sedentarios que se encuentran fijos a un sustrato y,
mientras estn vivos, no cesan de crecer. A los animales, pues, aunque las clulas de los hongos poseen pared
como las de las plantas, las paredes celulares fngicas son ricas en quitina, la misma sustancia que hace duro
el esqueleto externo de los insectos. En realidad, los organismos que conocemos como hongos tienen
diferentes orgenes en el rbol de la vida, razn por la cual se distribuyen en tres distintos reinos. La mayora,
los ms familiares y reconocibles, conforman el reino de los hongos verdaderos (Fung o Eumycota). Otros se
ubican en el mismo reino de las amebas, el llamado Protozoo, como es el caso de los hongos mucilaginosos; y
otros ms, entre los que se cuentan ciertos mohos acuticos que parasitan peces, comparten un tercer reino, el
denominado Chromista, con las diatomeas, esas particulares algas microscpicas de curiosa simetra.

En el presente informe se presentara como se da el crecimiento de hongos en alimentos deshidratados

artesanalmente, para lo cual se est detallando cada procedimiento y se est dando a conocer cada resultado
para tener una idea ms clara de cmo actan. El xito de la prctica est en la observacin de cada detalle en
la morfologa de los tipos de hongos, en seguir en orden correcto los pasos de cada experimento, en la
habilidad en el manejo adecuado de cada material y reactivo .Es por eso que para una correcta realizacin de
trabajo de prctica es necesario familiarizarse con los nombres, funciones, manejo adecuado del material de
laboratorio de microbiologa para la preparacin de aislamientos de hongos.

AISLAMIENTO DE HONGOS EN ALIMENTOS ENVASADOS ARTESANELMENTE 2

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OBJETIVOS

Identificar los distintos tipos de hongos que se pueden encontrar en las muestras de los alimentos
deshidratados (chifle y harina de pltano).

Aislar y sembrar a estos hongos en placas Petri utilizando correctamente sus respectivos agares y caldos de
cultivo, en distintos mtodos de aislamiento.

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MARCO TERICO
CAPITULO I

HONGOS

(Concepto)

Los hongos son un grupo de seres vivos diferentes de las plantas y de los animales, razn por la cual se
clasifican en un reino aparte llamado Fung. La ciencia que los estudia se llama Micologa (Mykes=Hongo y
Logos=Estudio). Poseen gran capacidad de adaptacin y pueden desarrollarse sobre cualquier medio o
superficie, tanto en los bosques como en las ciudades. Se reproducen por medio de esporas, las cuales son
diseminadas principalmente por el viento y por el agua.

Juegan un papel descomponedor, ya que transforman la materia orgnica en sustancias ms simples y

asimilables por otros seres vivos. Pero tambin pueden desarrollarse formando asociaciones de beneficio
mutuo con races de plantas (micorrizas) y con algas dando origen a los lquenes --que son organismos
totalmente diferentes a las plantas y a los mismos hongos--, mientras que algunos crecen sobre otros seres
vivos producindoles enfermedad o incluso la muerte.

Los hongos han jugado y juegan un papel muy importante en la medicina, la industria y la alimentacin. La era
de los antibiticos se inicia con el descubrimiento de la penicilina, obtenida a partir del hongo Penicillium
notatum; asimismo algunos hongos son importantes en la industria de quesos, cerveza, vinos y otros; adems
de la excelente fuente de vitaminas, protenas, fibra y minerales que constituyen los hongos comestibles.

Hongos de suelo Hongos microscpicos

Los hongos constituyen un grupo ciertamente heterogneo, que incluye a seres no emparentados entre s. Los
hongos, en sentido amplio, presentan estas caractersticas:

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Son eucariotas. Al igual que nosotros mismos, sus clulas poseen ncleos verdaderos donde estn
encerrados los cromosomas. En eso se diferencian de los procariotas, como las bacterias, cuyo ADN est
disperso en el citoplasma. Adems, las clulas eucariotas suelen ser mayores y ms complejas.

Normalmente son multinucleados. Existen especies microscpicas, con un solo ncleo, como las
levaduras. Sin embargo, los hongos suelen presentar muchos ncleos en sus cuerpos. En ocasiones, como
en el caso de los animales, el cuerpo est dividido en muchas clulas, cada una con su correspondiente
ncleo. En otras, en cambio, el cuerpo o talo no est dividido en clulas, y los ncleos campan libres por l.

Se reproducen por medio de esporas. En los hongos las esporas son nuy variadas, mviles o inmviles,
sexuales o asexuales. Muchos hongos producen sus esporas en estructuras microscpicas, mientras que
otros forman cuerpos fructferos para liberarlas

Son hetertrofos, sin clorofila, y se alimentan por absorcin. Al no poseer clorofila, los hongos siguen una
estrategia alimentaria muy simple: pudren cosas y absorben los productos resultantes de la
descomposicin. Algunos hongos se alimentan por fagocitosis, como los glbulos blancos de nuestra sangre.

El talo (soma o cuerpo vegetativo) puede ser unicelular, como en las levaduras, o tpicamente filamentoso.
En este ltimo caso recibe el nombre de micelio. De hecho, muchos hongos y mohos tienen aspecto de
pelusa.

El talo est recubierto de una pared de quitina (en los hongos tpicos) o de celulosa. En algunos casos, el
talo no presenta pared (desnudo).

CLASIFICACIN DE HONGOS:

Ascomycota

Es el grupo ms grande. Estos hongos poseen formas muy variadas: de copa, botn, disco, colmena y dedos,
entre otras. Agrupa una gran cantidad de hongos patgenos de plantas y animales y aquellos que crecen sobre

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alimentos, adems algunos que se pueden encontrar sobre cuero,

tela, papel, vidrio, lentes de cmaras, paredes, etc.
La caracterstica principal, adems de su forma, es la presencia
de estructuras reproductoras microscpicas llamadas ascas, que
dan origen a las esporas. Las ascas estn formadas por una
clula especializada con forma de saco en cuyo interior se
forman las esporas. A las esporas producidas por los ascos tambin
se les llama ascosporas.

Basidiomycota

Incluye aquellos hongos con forma de sombrilla, de coral, las

orejas de palo, los gelatinosos, globosos y algunas levaduras,
entre otros. Tambin incluye los que tienen aspecto polvoriento o
como manchas y crecen sobre diversas estructuras de las
plantas (flores, frutos, hojas, tallo o races). Algunos tienen
importancia econmica, como las royas y los carbones. A nivel
microscpico su caracterstica principal es la presencia de
estructuras reproductoras especializadas o basidios, las cuales dan origen a las esporas pero en forma externa,
generalmente en grupos de cuatro, aunque en algunas especies pueden encontrarse dos y seis esporas por
basidio. Las esporas se conocen como basiodiosporas.

Chytridiomycota

Grupo formado principalmente por hongos acuticos

microscpicos, aunque algunos pueden crecer tambin sobre materia
orgnica en descomposicin u organismos vivos como gusanos,
insectos, plantas y otros hongos. En este caso, las esporas, llamadas
"zoosporas", poseen flagelos que les permiten moverse en medios
lquidos.

Zygomycota

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Compuesto por hongos microscpicos que pueden desarrollarse

sobre materia orgnica en descomposicin, aunque tambin se
pueden encontrar en el tracto digestivo de algunas especies de
artrpodos, como los insectos. Este grupo no ha sido tomado en
cuenta hasta el momento en el presente Inventario de Hongos
de Costa Rica.

CAPITULO II

RECONOCIMIENTO DE HONGOS ENCONTRADOS EN LAS MUESTRAS DE

ALIMENTOS ENVASADOS ARTESANALMENTE

Los hongos a que cultivados en los alimentos como chifle y harina de pltano son tres y
han sido observados por microscopio y segn su forma son el siguiente tipo de hongos:

1.-Aspergillus spp. .- nico hongo encontrado en Harina de pltano.

Caractersticas

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Aspergillus spp. es un hongo filamentoso hialino, saprofito, perteneciente al filo Ascomycota. Se encuentra
formado por hifas hialinas septadas y puede tener reproduccin sexual (con formacin de ascosporas en el
interior de ascas) y asexual (con formacin de conidios). Las diferentes especies se diferencian en tamao, tasa
de crecimiento, textura (aterciopelada, granular, algodonosa) y color de la colonia: verde-amarillento (A. flavus),
negro (A. niger), marrn (A. terreus). La coloracin aparece casi siempre en todas las estructuras areas, tanto
en el micelio como en las cabezas conidiales. Aspergillus es uno de los principales hongos productores de
micotoxinas.

Mecanismo de propagacin y transmisin

La transmisin se produce principalmente por medio de las esporas o conidios que se encuentran presentes en
el ambiente de trabajo en forma de bioaerosoles y penetran en el organismo por va respiratoria. Tambin es
posible la transmisin por contaminacin de heridas o mucosas y la aparicin de efectos txicos por ingestin de
alimentos contaminados. Son responsables de casos de enfermedad nosocomial. No se produce transmisin de
persona a persona. Vas de entrada Respiratoria. Mucosa. Parenteral. Digestiva.

Efectos txicos

Los efectos txicos estn relacionados principalmente con intoxicaciones alimentarias, como consecuencia de la
ingesta de alimentos contaminados con micotoxinas y metabolitos extracelulares

2.- Rhizopus spp. .- Es uno de los dos hongos encontrados en el chifle.

Caractersticas:

Rhizopus spp es un gnero

de mohos que incluyen
especies cosmopolitas de
hongos filamentosos
hallados en el suelo, degradando frutos y vegetales, heces animales, y residuos

Presenta un micelio macrosifonado (entre 5 10m), hialino, cenoctico, en los puntos en donde se conectan los
esporangiforos y los estolones que presentan, se forman rizoides (esta es una diferencia del gnero Absidia, en
el cual se desarrollan internodales). Los esporangiforos son largos y no se ramifican (a diferencia de Mucor

Mecanismo de propagacin y transmisin

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spp.), y culminan en esporangios de gran tamao (40 275m), con esorangiosporas hialinas o ligeramente
cafs

Es un Zygomiceto, comnmente encontrado en el polvo de las casas, suelo, frutas, nueces y semillas, tambin se
presenta en alimentos en proceso de descomposicin. La exposicin prolongada a las esporas, ha provocado
reportes de problemas respiratorios (principalmente en personas inmunocomprometidas). Las especies de
Rhizopus producen esporas asexuales y sexuales. Zigosporas negras se producen despus de dos fusiones
compatibles de micelios durante la reproduccin sexual. Y hacen colonias que pueden ser genticamente
diferentes de sus padres. Caractersticas Macroscpicas: Son colonias de rpido crecimiento, las especies
patgenas tienden a crecer mejor a 37C, su crecimiento se inhibe con Cycloheximidas. Son de tamao ilimitado
(llegan a cubrir todo el medio de cultivo), Son colonias blancas, al alcanzar la madurez (cuarto da) comienzan a
adquirir una tonalidad gris oscura (la tonalidad se debe al desarrollo de las estructuras de reproduccin asexual
las Endosporas), Son vellosas algodonosas y secas.

Exophiala dermatitidis.- Segundo hongo encontrado en el chifle.

Exophiala
dermatitidis es un
termfilo levadura
negro, y un miembro
de la

Herpotrichiellaceae .Mientras que la especie slo se encuentra en baja abundancia en la naturaleza,

metablicamente activas cepas estn comnmente aislados en saunas, baos de vapor y lavavajillas. Exophiala
dermatitidis slo en raras ocasiones causa la infeccin en los seres humanos, sin embargo se han reportado
casos en todo el mundo.

Caractersticas

Exophiala dermatitidis formas de crecimiento lento, de color marrn o negro colonias. Como es comn entre las
levaduras negras,

Este Hongo metablicamente activo es muy abundante en los baos de vapor turcos que alcanzan
habitualmente temperaturas superiores a 60 C (140 F), pero por lo general no se encuentra en la sauna ms
calientes y secas, o en ambientes fros que rodean baos de vapor.
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Dermatitidis Exophiala se ha aislado de todo el mundo en baja abundancia de una variedad de fuentes
ambientales, incluyendo el suelo, madera en descomposicin, y los nidos de avispas. La tolerancia
thermophilicity y cido de E. dermatitidis sugiere paso a travs de los animales de sangre caliente, y es la
hiptesis de que su nicho ecolgico podra estar asociado con tropicales, frugvoros especies de aves y
murcilagos.

Mecanismo de propagacin, transmisin y efectos txicos

Exophiala dermatitidis formas Phaeohyphomycosis cutnea y subcutnea, que afectan ms comnmente la cara
y el cuello. En efecto, el hongo se aisl originalmente de la piel de un paciente con lesiones en su mejilla, el
cuello y la oreja. Las clulas aisladas de infecciones cutneas son a menudo esfrico, y pueden formar toruloid o
cadenas moniliformes. dermatitidis Exophiala se ha implicado diversas infecciones superficiales, incluyendo la
onicomicosis , otitis externa , e infecciones oculares que causan queratitis.

Exophiala dermatitidis formas infecciones neurotrficos, y es la levadura negro que con mayor frecuencia
provoca Phaeohyphomycosis que amenaza la vida. Las condiciones que podran predisponer a las personas
hacia una infeccin oportunista invasivas incluyen la diabetes mellitus , leucemia linfoctica , bronquiectasias , la
artritis reumatoide , y cateterismo . Las infecciones sistmicas a menudo se informaron de que sin la
participacin cutnea o subcutnea. Sistmico E. dermatitidis infecciones pueden incluir metstasis cerebrales.

AISLAMIENTO DE HONGOS EN ALIMENTOS ENVASADOS ARTESANALMENTE

Muestras: 10 gr de Papa Dextrosa

Solucin Salina
Chifle
Matraz Erlenmeyer
Harina de Pltano
Agua Destilada
Materiales:
Placa Petri

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Cuchara Haz de siembra

Pera de goma para pipetas Tubos de ensayo

Pipetas Gradilla

Procedimiento:

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PREPARACION DEL AGAR PAPA DEXTROXA.-
La infusin de patata se puede preparar hirviendo 200 g de
patatas cortadas en rodajas sin pelar en 1 litro de agua destilada
durante 30 minutos y luego decantar o filtrar el caldo a travs de
una gasa. Se aade agua destilada de manera que el
volumen total de la suspensin es 1 litro. Se aaden 20 g de
dextrosa y agar en polvo (20 g), el medio se esteriliza en
un autoclave a 15 psi (121 C) durante 15 minutos.
Para evitar el crecimiento bacteriano le agregamos una
capsula del antibitico Tetracilina, 0,2 ml al agar papa dextrosa.

CHIFLE.-
Disolucin.- Trituramos el chifle y agregamos 10 gr dentro del
matraz que ya contena 90 ml de agua salina, que agitamos durante
cierto tiempo finalmente lo dejamos reposar. Luego con la pipeta y
la pera tomamos 1 ml del tubo y la agregamos al tubo de ensayo (-1), volvemos a tomar 1 ml de pero esta vez
del primer tubo de en sayo y lo agregamos en otro (-2).

Siembra: Agregamos
Agar Papa Dextrosa en la
placa Petri en estado
lquido. Luego tomamos
1 ml de la muestra de la
disolucin del primer
tubo de ensayo y lo
agregamos tambin en la misma placa Petri, con el marcador
sealamos que la muestra es del tubo de ensayo -1. Repetimos el mismo procedimiento para el segundo tubo
de ensayo con otra placa Petri, y con el marcador sealamos -2.
Cultivamos estas muestras durante 5 das a temperatura ambiente.
Aislamiento: Pasados los 5 das observamos que haba crecimiento fngico distinto en las placas, a continuacin
con los haces de siembra tomamos muestra de estos hongos y los observamos al microscopio, esta muestra nos
dio como resultados dos hongos, que los aislamos con el mtodo de siembra por picadura. En este aislamiento
reconocimos dos hongos: Exophiala dermatitidis y Rhizopus spp.

HARINA DE PLATANO.-
Disolucin.- Agregamos 5 gr de la harina de pltano dentro del matraz que ya contena 90 ml de agua salina, que
agitamos durante cierto tiempo finalmente lo dejamos reposar. Luego con la pipeta y la pera tomamos 1 ml del
tubo y la agregamos al tubo de ensayo (-1), volvemos a tomar 1 ml de pero esta vez del primer tubo de en sayo y
lo agregamos en otro (-2).
 Siembra:
Agregamos Agar
Papa Dextrosa en la
placa Petri en

estado lquido. Luego tomamos 1 ml de la muestra de la disolucin del primer tubo de ensayo y lo agregamos
tambin en la misma placa Petri, con el marcador sealamos que la muestra es del tubo de ensayo -1.
Repetimos el mismo procedimiento para el segundo tubo de ensayo con otra placa Petri, y con el marcador
sealamos -2. Cultivamos estas muestras durante 5 das a temperatura ambiente.

Aislamiento: Pasados los 5 das observamos que haba crecimiento fngico en las placas de un una sola especie
de hongo, a continuacin con los haces de siembra tomamos muestra de este hongo y lo observamos al
microscopio. Esta muestra nos dio como resultados un hongo, que lo aislamos con el mtodo de siembra por
picadura. Este aislamiento reconocimos al hongo Aspergillus spp.

CONCLUSIONES

Logramos identificar algunos hongos como son los trichosporon asahii, rhizopus spp,
aspergillus spp, segn su habitad.
 Aplicamos diferentes mtodos de cultivo, siembra y aislamiento de estos microorganismos.

El hongo se clasific dentro de los deuteromycetos por tener una reproduccin asexual llevada
a cabo por intermedio de la esporulacin (conidios).

El estudio de los hongos, tiene una gran importancia; ya que desempean un papel en la
descomposicin de materia vegetal de origen terrestre que cae al agua, influyendo de manera
decisiva en el transporte de materiales entre el medio terrestre y el acutico.

El estudio de los hongos en el aire ha sido muy importante para la industria debido al papel que
desempean.

Se pudo establecer que el aire no tiene una microflora definida, una de las razones es que el
aire es portador de polvo, material particulado, etctera, los cuales pueden estar cargados de
microbios.

Se utiliz el mtodo de sedimentacin, ya que permite que por la fuerza de gravedad los
microorganismos queden adheridos a la placa Petri con Agar nutritivo.

BIBLIOGRAFIA.-
C.J. Alexopoulus Introduccin a la Microbiologa (Wiley,Nueva York, 1962).

M. Ulloa, Diccionario Ilustrado de Micologa (UNAM,1991).

S. Bartnicki, en un siglo de Micologa (Cambridge Univ. Press, Cambridge, 1996).

Tefilo Herrera El reino de los hongos: micologa bsica y aplicada

(1 de enero de 1990).
Mariano Garca Rolln Manual para buscar setas 2001

Mara Teresa Tellera Los hongos 2011

Jordi Vidal y Xavier Llimona Hongos de Espaa y de Europa 2000