I.

INTRODUCCION

Los nematodos son un grupo diverso de animales con apariencia de

gusano. Se encuentran virtualmente en todos los ambientes, tanto como parsitos
como organismos de vida libre. Generalmente, son de tamao diminuto pero
algunas especies pueden alcanzar varios metros de longitud.

Dado que es difcil o imposible observar a simple vista los nematodos en

el campo, y a que los sntomas que producen son a menudo inespecficos, el dao
que ocasionan frecuentemente se atribuye a otras causas ms evidentes. Los
agricultores y los tcnicos a menudo subestiman su efecto. Una apreciacin general
es que los nematodos parsitos de plantas reducen la produccin agrcola en
aproximadamente un 11% globalmente (Agrios, 2005), reduciendo la produccin en
millones de toneladas anualmente.

El nivel de dao que causan los nematodos depende de una amplia

gama de factores tales como su densidad poblacional, la virulencia de las especies
o aislados, y la resistencia (habilidad de la planta de reducir la poblacin del
nematodo) o tolerancia (habilidad de la planta de rendir una cosecha a pesar del
ataque del nematodo) de la planta husped. Otros factores que tambin
contribuyen, aunque en menor medida, son el clima, disponibilidad de agua,
condiciones edficas, fertilidad del suelo, y la presencia de otras enfermedades y
plagas.

Una vez comprobado que los nematodos son los principales

responsables del dao observado en un cultivo, se puede decidir cules sern las
opciones de control. Estas dependern de los nematodos implicados, del cultivo,
del sistema productivo y de las condiciones locales.

Objetivos:

Determinar la cantidad de nematodos por m 2 en una hectrea de

terreno.
Aprender la tcnica de anlisis para nematodos.
Conocer los daos causados por los nematodos.
 II. REVISION LITERARIA

2.1. Nematodos fitoparsitos

2.1.1. Apariencia y estructura

Los nematodos fitoparsitos son vermiformes (forma de gusano)

semejantes a hilos con un tamao que oscila entre 0,25 mm a >1,0 mm de longitud,
si bien algunos alcanzan hasta 4,0 mm. Aunque el cuerpo de los nematodos suele
estrecharse hacia la cabeza y cola, en la mayora de los casos existe una gran
variedad de formas y tamaos. Las hembras de algunas especies pierden su forma
de verme conforme maduran, se ensanchan y adoptan forma de pera, limn, rin
o esfrica cuando alcanzan el estadio adulto.

2.1.2. Ciclo de vida

El ciclo de vida de los nematodos se divide tpicamente en seis estadios:

el huevo, cuatro estadios juveniles y el adulto. La duracin de cada uno de estos
estadios del ciclo de vida difiere para cada especie y tambin depende de otros
factores como la temperatura, la humedad y la planta husped. En condiciones
favorables en los trpicos, muchas especies tienen un ciclo de vida corto y
completan varias generaciones en una estacin del ao. Esto puede llevar a un
incremento rpido de la poblacin a partir de un solo individuo (si se auto-fertilizan)
o de dos individuos del nematodo.

Figura 1. Ciclo de vida de los nematodos.

 2.1.3. Tipos de nematodos

Los nematodos fitoparsitos se pueden separar en dos grupos: parsitos

areos- aquellos que se alimentan de las partea areas de las plantas- y los
parsitos de races y tubrculos- aquellos que se alimentan de las partes
subterrneas. Tambin se pueden agrupar por su hbito y movilidad en tres grupos
principales:

Endoparsitos migratorios nematodos mviles que se alimentan

dentro del tejido radical.
Endoparsitos sedentarios nematodos que, una vez alcanzado el
sitio de alimentacin dentro de la planta, cesan de ser mviles y se
alimentan desde un sitio fijo.
Ectoparsitos nematodos que se alimentan de la planta desde el
exterior sin invadir la misma

2.2. Sntomas de dao causado por nematodos

Uno de los mayores retos en la identificacin de los nematodos como los

agentes causales de dao a los cultivos es el hecho de que la mayora de ellos no
producen sntomas de diagnstico especfico y por tanto fcil de identificar. El dao
causado por los nematodos es generalmente inespecfico y se confunde fcilmente
con otros sntomas atribuibles a estrss de origen bitico o abitico. Por ejemplo,
la clorosis puede deberse a una deficiencia en nitrgeno o puede ser debida a los
nematodos; el crecimiento pobre puede deberse a la baja fertilidad del suelo, a
estrs hdrico o puede deberse a los nematodos.

Por tanto, se recomienda determinar la existencia de nematodos cuando el

cultivo est sufriendo prdidas de produccin y mostrando alguno de los sntomas
que se describen a continuacin. Informacin adicional sobre el cultivo, el historial
del mismo, y las prcticas de manejo, junto con la informacin contenida en esta
gua tambin puede indicar que los nematodos estn implicados en el problema
observado.
 2.2.1. Sntomas areos

Los sntomas en la parte area se clasifican en dos categoras: aquellos

causados por nematodos parsitos de la parte area de las plantas que atacan al
follaje y aquellos causados por nematodos parsitos de las races que atacan las
races de las plantas. Estos sntomas son generalmente especficos y estn
asociados al nematodo que los ocasiona, y por tanto, pueden tener carcter de
diagnstico. Estos incluyen:

La formacin de agallas, o hinchamiento anormal de las semillas (p.e.

Anguina) o de las hojas (p.e. Cynipanguina)
Estras en las hojas, decoloracin de las hojas (especialmente en climas
templados) (p.e. Aphelenchoides)
Hinchamiento, crecimiento arrugado o desorganizado del tejido (p.e.
Ditylenchus)
Necrosis interna del tallo puesta de manifiesto por un anillo rojo
(Bursaphelenchus cocophilus)
Necrosis de las inflorescencias
Clorosis/pardeado to de las hojas (agujas de los pinos) y muerte eventual de
los rboles (Bursaphelenchus xylophilus).

Figura 2. Sntomas generados por nematodos.

 2.2.2. Sntomas causados por nematodos parsitos de las races

Los nematodos parsitos de las races siempre causan crecimiento

anormal de la parte area en mayor o menor grado, pero estos sntomas por si
solos, generalmente, son insuficientes para diagnosticar un problema causado por
nematodos de las races. La mayora de los sntomas reflejan o pueden confundirse
con otros problemas como disminucin en la absorcin de agua o alteracin en la
absorcin de nutrientes.

Estos sntomas incluyen:

Clorosis (amarilleo) o coloracin anormal del follaje.

Crecimiento deprimido en rodales, manchas o parches, follaje fino o escaso.
Sntomas de estrs de agua como marchitez o abarquillado de las hojas.
Muerte descendente de las ramas de plantas leosas o perennes con poco
o muy poco follaje nuevo.
Reduccin en el tamao de los frutos y semillas.
Bajo rendimiento del cultivo (poca cosecha).

2.2.3. Sntomas subterrneos

Las agallas en las races estn causadas principalmente por el nematodo

agallador (Meloidogyne spp.), aunque otros nematodos como Nacobbus aberrans
tambin puede cuasar agallado en las races- Algunos nematodos, como
Xiphinema spp., al alimentarse de las races pueden dar lugar a hinchamientos o
agallas menos definidas que se localizan en las puntas de las races. Las agallas
pueden variar considerablemente dependiendo de las especies de Meloidogyne, el
cultivo y cultivar, y si estas tienen lugar en las races o en los tubrculos (Fig. 11).
La apariencia tpica de las agallas es la siguiente:

Hinchamientos pequeos de forma redondeada.

Abultamientos masivos de tejido indiferenciado que confluyen entre s.
Puntas de la raz hinchadas.
Abultamientos irregulares a lo largo de la raz.
Puntas de raz curvadas en forma de gancho.
 Figura 3. Sntomas de agallas en algunas plantas.

2.3. Muestreo

Una vez se haya observado sntomas que indican una posible o probable
infestacin con nematodos, el paso siguiente es tomar muestras de las plantas
afectadas y del suelo alrededor de las races de las mismas. Posteriormente, stas
se llevan a analizar al laboratorio para determinar que nematodos se encuentran
presentes, y si es posible, determinar tambin sus densidades poblacionales.

2.3.1. Numero de sub muestras

El procedimiento de muestreo y el nmero de muestras tomadas debe tener en

cuenta la variacin o agregacin del nematodo. De un rea de 0,5 hectreas, tomar
un mnimo de 10 sub-muestras y como mximo de 50. Combinar las sub-muestras
para conseguir una muestra compuesta que represente el rea del campo
muestreada. Al combinar las muestras de esta forma se facilita su conservacin ya
que se mantiene la temperatura y humedad de las mismas.
 2.3.2. Diseo de la muestra

Los nematodos raramente estn distribuidos de forma uniforme en el

campo, y por tanto las muestras deben tomarse de varias zonas del campo.
Recoger muestras por separado de zonas con crecimiento pobre y de zonas con
crecimiento relativamente bueno donde estas diferencias sean obvias para poder
compararlas. Seguir siempre el mismo procedimiento y modelo en la recogida de
muestras durante los muestreos y experimentos para que las comparaciones entre
campos, parcela, tratamientos, etc. tengan significado.

Figura 4. Mtodos de muestreo.

2.3.3. Recoleccin de muestras de suelo

Como regla general, evitar muestrear el suelo cuando est muy hmedo
o muy seco. Sin embargo, cuando los cultivos crecen normalmente, por ejemplo,
en terrenos inundados (p.e. arroz) o condiciones ridas (p.e. sisal), stos deben
muestrearse en estas condiciones para que las muestras sean representativas de
las condiciones habituales de cultivo.

Dividir los campos mayores de 1 hectrea en parcelas de 1 hectrea (10

000 m2) y muestrear estas parcelas por separado. Tomar de 10 a 50 sub-muestras
(barrenos) y combinarlas para hacer una muestra compuesta que pese 12 kg.
Tomar la sub-muestra de suelo de la zona de las races con una pala, azada,
barreno o herramienta similar que sea adecuada para el cultivo que se est
muestreando. Colocarla la muestra compuesta con cuidado en una bolsa,
etiquetarla y cerrar las bolsas con las muestras
2.4. Extraccin de nematodos

El paso siguiente en el proceso es extraer los nematodos de las muestras. Las

extracciones deben realizarse tan pronto como sea posible despus de haber
recolectado las muestras dado que stas se deterioran con el paso del tiempo.
Existen cuatro tcnicas bsicas de extraccin las cuales se describen en esta gua:

Bandejas de extraccin.
Maceracin de las races y hojas.
Tamizado.
Incubacin.

Otros tres mtodos - elutriador, el embudo de Fenwick y la centrifugacin flotacin

requieren un equipamiento especial y no se describen en esta gua. Sin embargo,
se puede obtener informacin sobre estos mtodos consultando las referencias
bibliogrficas incluidas en la seccin de Referencias y Lecturas recomendadas. En
algunos casos tambin es posible examinar directamente los nematodos en el tejido
vegetal.

2.4.1. Seleccin del mtodo de extraccin

La seleccin del mtodo a utilizar depende de las condiciones y

materiales disponibles, el tipo de muestra, y tambin de los tipos de nematodos
presentes en la misma. Algunos mtodos de extraccin son ms tiles para un tipo
especial de nematodos mientras que otros son ms generales. Esta gua describe
en detalle los mtodos ms sencillos incluyendo el de las bandejas de extraccin
que es til en la mayora de las condiciones y proporciona una evaluacin razonable
de los nematodos en suelo, races, semillas o tejido vegetal y se puede replicar
fcilmente.
 2.4.2. Preparacin de las muestras

Las muestras de suelo hmedo (capacidad de campo) se deben mezclar

muy bien antes de tomar sub muestras para la extraccin de los nematodos.
Romper los terrones o grumos de suelo y eliminar las piedras, races y restos
vegetales. Pasar el suelo hmedo por un tamiz con malla gruesa con orificios entre
12 mm (Fig. 26, paso 1) que se colocar sobre un recipiente adecuado y mezclar
muy bien. Tomar una sub-muestra de la mezcla con un vaso o recipiente de
volumen conocido (Fig. 26, paso 2); normalmente se utiliza 100 ml de suelo. De
cada muestra compuesta de suelo tomada en el campo se deben procesar dos sub-
muestras de 100 ml y despus realizar la media de los resultados obtenidos.

En el caso de suelo mojado, como el procedente de parcelas inundadas

de arroz, es preciso tomar pequeas bolitas o grumos de varias partes de la
muestra de campo o de la base de las races y medir la sub-muestra a procesar
mediante el desplazamiento del agua para obtener muestras del mismo tamao
(Fig. 29, pasos 1 y 2). Llenar un vaso hasta un volumen determinado marcado
previamente (p.e. 200 ml) y aadir los grumos de suelo para aumentar el volumen
hasta la cantidad requerida, por ejemplo, un aumento de volumen de 200 a 300 ml
es equivalente a una medida de 100 ml de suelo. Posteriormente, utilizar el mtodo
de tamizado para extraer los nematodos.

2.5 Mtodo de las bandejas de extraccin

Este mtodo (y sus variantes) tambin es conocido como la tcnica de Baermann

modificada, el mtodo del cuenco o el mtodo de la bandeja de Whitehead.

Ventajas:

No se necesita equipo especial.

Es fcil de adaptar a circunstancias bsicas utilizando el material
disponible localmente.
Extrae una amplia variedad de nematodos mviles.
Es una tcnica simple.
Desventajas:

Los nematodos de gran tamao y aquellos que tienen movimiento lento

no se extraen bien.
Las extracciones a veces pueden estar bastante sucias (especialmente
si el contenido en arcilla del suelo es alto) lo cual dificulta el recuento de
los nematodos.
La proporcin de nematodos que se extraen puede variar dependiendo
de la temperatura ambiente dando lugar a posibles variaciones en los
resultados entre las muestras extradas en diferentes momentos o
pocas del ao.
Se tarda 3 o 4 das en conseguir la mxima recuperacin de los
nematodos.
 III. MATERIALES Y METODOS

3.1. Materiales

Una cesta (o cedazo domstico) hecho con malla gruesa.

Un plato/bandeja/cuenco, ligeramente ms grande que el cedazo.
Papel absorbente (papel de secar las manos, cocina, servilletas de papel).
Vasos o recipientes para recoger la extraccin.
Frascos lavadores.
Balanza.

3.2. Mtodo

Es muy importante asegurarse de que durante todo el proceso, todos los

recipientes utilizados para cada muestra estn etiquetados de forma correcta y
consistente durante todo el proceso ya que es muy fcil cometer equivocaciones.

1. Muestreo de suelo. ( no exponer la muestra al sol)

Lugar de muestreo: FUNDO UNAS.

2. Extraer 1Kg de sub muestra para la evaluacin.

3. Tamizar la muestra por un tamiz grueso para eliminar restos vegetales y
grumos.
4. Medir 3 sub muestra de suelo.
5. Cubrir el cesto con papel absorbente y colocar sobre un plato o bandeja de
plstico.
6. Colocar el suelo sobre el papel procurando que este quede depositado sobre
el papel y no caiga ningn suelo sobre o fuera de los bordes.

7. Aadir con cuidado el agua a las bandeja y asegurndose que se vierte en

el hueco entre la bandeja y el tamiz
8. Dejar reposar las extracciones de las muestras durante 1 da, revisando el
nivel de agua para asegurarse que las muestras permanecen hmedas y
que no se secan debido a la evaporacin.
9. Levantar el tamiz de la bandeja con cuidado, dejar que escurra el agua y tirar
el papel y el suelo a la basura.
10. Verter el agua que contiene los nematodos sobre un vaso previamente
etiquetado.
11. Lavar muy bien la bandeja sobre el mismo vaso con la ayuda de un frasco
lavador.
12. extraer una sub muestra y diluir a 10 ml.
13. llevar las muestras al microscopio de luz transmitida.
14. realizar el conteo de nematodos para la disolucin.
15. realizar 3 evaluaciones para llevar al clculo con la masa de capa arable.
 IV. RESULTADOS

EVALUACIONES

MUESTRA SUB1 SUB2 SUB3 PROMEDIO

01 2 1 1 1.33

02 0 2 1 1

03 0 0 1 0.33

PROMEDIO TOTAL ( 10 ml) 0.88

Interpretacin:

Existen un promedio de 0.88 nematodos en 10 ml (0.01 kg.)

Se observaron los siguientes gneros:

Helicotylenchus.
Meloydogine.
Otros.

Clculos:

Tomando encuenta la densidad aparente del suelo: 1.42 gr/cm3 (mtodo del tacto).

Profundidad = 0.2 m

Tenemos que la masa de capa arable en 1ha = 2840 kg.

Hallamos el total de nematodos por hectrea = 2840kg * 0.88 / 0.01 kg = 249920

nematodos/ha.
 V. CONCLUSIONES

Se determin la existencia de 249920, nematodos (Helicotylenchus

Meloydogine y Otros), por hectrea.
La tcnica de la bandejita, es un mtodo fcil y aceptable en la cuantificacin
de nematodos.
Los suelos de la selva, debido a las condiciones de humedad existentes todo
el ao, es un factor que favorece a la propagacin, diseminacin de los
nematodos, siendo esto muy perjudiciales para la mayora de nuestros
cultivos, ya que forman hipertrofias o lesiones en la raz de la planta,
haciendo que la planta muestra un sntomas de marchitez, debido a que se
est afectando la buena absorcin de nutrientes.

VI. BIBLIOGRAFA

file:///C:/Users/robinbrau/Downloads/Trabajo.pdf

http://www.uark.edu/ua/onta/info/2010%20Nematodes%20Manual%20SPANISH.pdf

http://tarwi.lamolina.edu.pe/~fonz/fitonematologia/practicas/pract2.htm
VII. ANEXO