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Rev. Proteccin Veg. Vol. 30 No. 3 (sep.-dic.

2015): 225-234
ISSN: 2224-4697

ARTCULO RESEA

Pseudomonas fluorescens Migula, control biolgico o patgeno?

Sandra Prez lvarezI, Orlando Coto ArbeloII, Mayra Echemenda PrezIII,


Graciela vila QuezadaIV
I
Productora Agrcola El Encanto, Guillermo Nelson y Cuauhtmoc, Sin nmero altos, Dpto. 3, Colonia Centro,
Guasave, Sinaloa, C.P. 81000. Correo electrnico: innovacion@grupoagrostar.com. IIInstituto de Investigaciones
de Fruticultura Tropical (IIFT), 7ma e/ 30 y 32, No. 3005, Apartado Postal 11 300, Miramar, Playa, La Habana, Cuba.
III
Universidad Agraria de La Habana Fructuoso Rodrguez Prez , Carretera Tapaste, km 22 , San Jos de las Lajas,
Mayabeque, Cuba. IVUniversidad Autnoma de Chihuahua, Facultad de Zootecnia y Ecologa, Chihuahua, CP. 31000,
Mxico.

RESUMEN: El objetivo de esta revisin es presentar algunos aspectos de inters sobre la bacteria Pseudomonas
fluorescens Migula, su funcin como agente de control biolgico y su reciente accin como patgeno de los
cultivos. Su empleo como control biolgico para biorremediacin, y recientemente su capacidad para infectar
tejido vegetal, la han hecho objeto de mltiples estudios en todo el mundo. En la actualidad, la identificacin de
especies del gnero Pseudomonas se realiza a travs de mtodos moleculares, entre los que se encuentran la
comparacin de secuencias del 16S ARNr o hibridacin ARNr-ADN; no obstante, hasta el momento se considera
que el gen rpoB es el ms adecuado para estos fines a nivel de especies y subespecies. Esta bacteria se clasifica
dentro del grupo de Bacterias Promotoras del Crecimiento, debido a que controlan patgenos en las plantas, ya
sea produciendo sustancias inhibitorias o incrementando la resistencia natural de la planta, o como las Bacterias
Biocontroladoras Promotoras del Crecimiento Vegetal (Biocontrol-PGPB), que tienen efectos beneficiosos sobre
los cultivos (contribuye a la fijacin biolgica del nitrgeno, sntesis de fitohormonas, promocin del crecimiento
de las races), se asocian con especies de plantas y se encuentran en diversos ecosistemas. A principios del
siglo XXI esta bacteria comenz a informarse como patognica en diferentes cultivos y pases.
Palabras clave: Pseudomonas, control biolgico, organismos patgenos.

Pseudomonas fluorescens, biological control or pathogen?

ABSTRACT: The aim of this review was to summarize some aspects of interest of the bacterium Pseudomonas
fluorescens Migula, its function as a biological control agent and its recent action as a crop pathogen. Its use as
a biological control agent, for bioremeditation, and its recently known capacity of infecting plant tissues, have
made them an object of several studies around the world. Identification of Pseudomonas species is currently
performed by using molecular methods such as the comparison of 16S rRNA sequences or the rRNA-DNA
hybridization although, until now, the rpoB gene is considered the most suitable for the identification and
phylogenetic discrimination at a species and subspecies level. This bacterium is classified within the Plant Growth
Promoting Bacteria for its capacity for controlling plant pathogens by either producing inhibitory substances or
increasing the natural resistance of the plant, or as the Biocontrol Plant Growth Promoting Bacteria (Biocontrol-
PGPB), which have beneficial effects on crops by contributing to nitrogen fixation, phytohormone synthesis,
and root growth promotion; they associate with plants species and can be found in different ecosystem. At the
beginning of the 21th century, this bacterium started to be reported as pathogenic in different crops and countries.
Key words: Pseudomonas, biological control, pathogenic organisms.
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INTRODUCCIN Generalidades de Pseudomonas fluorescens

El gnero Pseudomonas est compuesto por ms Pseudomonas fluorescens son bacterias


de 100 especies, las cuales fueron divididas por anli- baciliformes, aerobias, poseen varios flagelos polares.
sis de secuencias multilocus (MLSA-multilocus Son conocidas por su capacidad de estimular el creci-
sequence analysis) en nueve grupos mayoritarios: miento de las plantas que viven en contacto con ellas (12).
Pseudomonas fluorescens Migula, Pseudomonas Segn la clasificacin taxonmica (12) se ubican en:
syringae Van Hall, Pseudomonas lutea Peix, Reino: Bacteria
Pseudomonas putida Trevisan, Pseudomonas
Filo: Proteobacteria
anguilliseptica Mlakabayashi y Egusa, Pseudomonas
straminea Iizuka y Komagata, Pseudomonas Clase: Gammaproteobacteria
aeruginosa Schroeter, Pseudomonas oleovorans Lee
Orden: Pseudomonadales
y Chandlery, Pseudomonas stutzeri Lehmannand
Neumann (1). Familia: Pseudomonadaceae
Las bacterias del gnero Pseudomonas presentan Gnero: Pseudomonas
gran capacidad para utilizar diversidad de nutrientes,
Especie: Pseudomonas fluorescens Migula
razn por la que se explica su ubicuidad. Su actividad
enzimtica las convierte en un grupo de Los resultados de estos estudios desencadenaron
microorganismos importante, debido a que son res- cambios en la nomenclatura del gnero durante la lti-
ponsables de la degradacin aerbica de muchos com- ma dcada. Por ejemplo, en un inicio el gnero fue
puestos en diversos ecosistemas (2). asignado basndose en la morfologa y metabolismo
de la bacteria, y en la octava edicin de Bergeys Ma-
La efectividad de cepas de Pseudomonas con acti-
nual of Systematic Bacteriology (13) se listaron alre-
vidad antagonista, frente a fitopatgenos que afectan
dedor de 29 especies bien caracterizadas, junto con
a cultivos de importancia econmica, fue informada con
otras 235 especies menos estudiadas. En los diez aos
anterioridad por otros autores (3, 4). Este gnero
siguientes, este nmero se redujo a slo 112 especies
bacteriano constituye un excelente ejemplo de la com-
formalmente reconocidas (13).
binacin de mltiples mecanismos a travs de los cua-
les ejerce un efectivo control biolgico, incluyendo el El gnero Pseudomonas es reconocido como un
antagonismo directo y la induccin de resistencia en complejo grupo de especies descritas, las cuales fue-
la planta (5). Sin embargo, Pseudomonas no tiene la ron reclasificadas en nuevos gneros. A pesar del re-
capacidad de producir esporas de resistencia, lo que conocimiento de la heterogeneidad filognica en las
limita su formulacin para uso comercial. especies clasificadas, se inici una reevaluacin de
las caractersticas fenotpicas, las actividades
P. fluorescens es una de las especies ms estu-
metablicas, genticas y ecolgicas, con el fin de
diadas, pues produce metabolitos como siderforos,
esclarecer las complejas relaciones filogenticas
antibiticos, compuestos voltiles, enzimas y
intragnicas (12). Estos estudios son importantes por-
fitohormonas (6). Se inform su efectividad en el con-
que, mediante filogenia, se podrn despejar las du-
trol de hongos patgenos como Gaeumannomyces
das sobre la relacin de las especies que son utiliza-
graminis (Sacc.) v. Arx & H. Olivier var. tritici (7),
das como agentes de control biolgico y las especies
Aspergillus sp.(6), Pyricularia oryzae Cav. (8), entre
patgenas (12).
otros.
Estas bacterias son bacilos Gram-negativo, rectos
Por otro lado, existen numerosos investigadores que
o ligeramente curvados y saprofticas. Se pueden en-
informan a esta bacteria como patgeno en cultivos de
contrar en ecosistemas acuticos y en el suelo (12).
importancia econmica, como son: endivia (Cichorium
No forman esporas y el rango de temperatura ms fa-
endivia L.) en Argentina (9), tomate (Solanum
vorable para su desarrollo es de 25 a 30C, aunque
lycopersicum L.) en Arabia Saudita (10), brcoli
puede crecer desde 5 a 42C. Requiere un pH neutro y
(Brassica oleracea L.) en China (11).
no crece en condiciones cidas (pH 4,5). Sus flagelos
El objetivo de este trabajo es realizar un anlisis de polares hacen posible su movimiento activo en lquido.
los resultados de investigacin previos sobre la bacte- Su pigmento fluorescente (fluorescena) la hace reac-
ria P. fluorescens, su uso como control biolgico y su cionar frente a la luz ultravioleta, aunque algunas ve-
reciente aparicin como patgeno en algunos pases ces no fluorece cuando el cultivo es reciente o des-
del mundo. pus de varios cultivos de laboratorio.

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Abundan en la superficie de las races, ya que son En Cuba, se realizaron aislamientos de cepas de
verstiles en su metabolismo y pueden utilizar varios Pseudomonas asociadas al cultivo del arroz (O. sativa)
sustratos producidos por las mismas, interactuando con actividad antagnica y autctonas, con potenciali-
de forma asociativa con la planta (12). dades para el control biolgico frente a Curvularia
pallescens Boejn y Curvularia trifolii Boejn, dos hon-
P. fluorescens tiene una gran capacidad para
gos que afectan a este cultivo. Los resultados demos-
solubilizar fsforo. La bacteria puede realizar esta ac-
traron que los 17 aislamientos tuvieron efecto antag-
tividad a travs de dos vas: la primera es la produc-
nico ante los aislamientos fngicos probados, se mos-
cin de cidos orgnicos (ctrico, oxlico, glucnico)
traron porcentajes de inhibicin desde 49% hasta 83%.
que actan sobre el pH del suelo, favoreciendo la
Del total de aislamientos, solo tres pertenecieron a P.
solubilizacin del fsforo inorgnico y liberando el
fluorescens, segn pruebas fisiolgico - bioqumicas
fosfato al suelo. La otra va es a travs de las
desarrolladas mediante el micromtodo API20NE (21).
fosfatasas, estas son enzimas hidrolasas
(Monoesterasas y diesterasas fosfricas) que actan Tambin se realizaron aislamientos de esta bacte-
sobre las uniones steres, liberando los grupos fosfatos ria a partir de races y tallos de arveja (Pisum sativum
de la materia orgnica. Ambas vas generan una ma- L.). Se tuvo en cuenta, como primer criterio de selec-
yor cantidad de fosfato, disponible para ser absorbido cin, su accin antagnica frente a Fusarium oxysporum
por las races de las plantas (14). Schltdl, y se seleccionaron tres cepas eficientes (PPC,
PPO y PPL). Su aplicacin, en condiciones de inver-
Otro aspecto destacable en P. fluorescens es la
nadero, demostr que PPC se destaca por el control
produccin de sustancias estimuladoras del crecimien-
del 90,31% del patgeno (22).
to. Las principales sustancias de este tipo son hor-
monas (auxinas, giberelinas y citoquininas). Adems, En cuanto a la identificacin del gnero
tambin producen aminocidos y promotores espec- Pseudomonas, las investigaciones iniciales se basa-
ficos del crecimiento vegetal. La produccin de estas ron en el anlisis de la composicin de cidos grasos,
sustancias es posible siempre que sea adecuada la con nfasis en la capa de lipopolisacridos correspon-
concentracin de organismos en el sistema radicular diente (LPS). Esta capa es responsable de una impor-
y que en el suelo haya suficiente cantidad de materia tante fraccin discriminatoria de hidroxi-cidos grasos.
orgnica (12). En los aos 70, la principal investigacin en el conteni-
do de cidos grasos de los miembros del
Aislamiento e identificacin de Pseudomonas
gnero Pseudomonas sensu lato fue llevada a cabo en
fluorescens de hbitat naturales
los laboratorios de Moss (Centro de Control de Enfer-
Esta bacteria fue aislada a partir de hongos de la medades, Atlanta, USA) (23). Estos investigadores
rizosfera de plantas como arroz (Oryza sativa L.) (15), encontraron que los anlisis repetidos de patrones de
berenjena (Solanum melongena L.), aj (Capsicum Esteres matlicos de cidos grasos (FAME) dieron
annuum L.) (16). Tambin se ha aislado de suelos de patrones similares, por lo que fueron usados rpida-
zonas industriales para utilizarlas en biorremediacin mente para diferenciar especies de Pseudomonas y
de suelos cultivados (17,18) y de agua (19). grupos de especies.
Sajbena et al. (20) lograron secuenciamientos par- Uno de los principales estudios sobre los cidos 3-
ciales del gen rpoB, el cual es importante ya que codi- hidroxi fue informado por Oyaizu y Komagata (24). A
fica para la regin altamente conservada del gen de inicios de los 90', las primeras interpretaciones de los
mantenimiento ARN-Polimerasa subunidad utilizado sistemas de evaluacin comercial, para la identifica-
para la identificacin de bacterias. Los autores encon- cin bacterial basada en FAME, Sherlock MIS (MIDI
traron una alta correlacin entre la secrecin de Inc. Newark, DE, USA), se llevaron a cabo tambin
proteasas y lipasas y el efecto necrtico de esta bac- con especies del gnero Pseudomonas (25). El grupo
teria; se identific la presencia de P. fluorescens, la de Stead se enfoc en las especies de Pseudomonas
cual causa serios daos durante la produccin del hon- fitopatgenas, se analizaron 38 de las 86 especies
go Pleurotus ostreatus Champ. Jura. Vosges. La se- de Pseudomonas vlidamente descritas. Seis grupos
cuencia parcial de este gen se encuentra disponible de cepas fueron discriminadas sobre la base de tres
en el GenBank del NCBI (National Center for tipos de cidos grasos, hidroxi principalmente (tam-
Biotechnology Information-Centro Nacional de Informa- bin corehidroxi cidos grasos: 2-hidroxi, 3-hidroxi e
cin de Biotecnologa) (34), bajo los nmeros de acce- iso-ramificado 3-hidroxi), a pesar de que ellos tuvieron
so GQ351518 - 22, GQ351529 - 39, GQ351544 - 48, menos del 10% del rea total de picos. Diferencias
por citar algunos. Todas estas especies son patgenas cuantitativas en cidos grasos no hidroxi permitieron
del hongo. diferenciar entre taxas dentro de estos grupos y se

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encontraron pocas diferencias cualitativas entre los molecular, ya que se mantenan patrones de similitud
perfiles de taxas incluidas en el mismo subgrupo. In- entre especies relacionadas (31).
cluso, nicos perfiles se encontraron para taxas
Debido a la amplia variedad de especies dentro del
infraespecficas (subespecies, biovares, patovares) (25).
gnero y a la conjuncin de estudios multifacticos
Stead et al. (25) tambin encontraron buenas co- del mismo, se adoptaron mtodos para la identifica-
rrelaciones entre los agrupamientos realizados con los cin de procariotas ms all de los lmites de un solo
datos de los anlisis de cidos grasos, y los basados grupo. Es importante destacar que, aunque la quimio
en los resultados de hibridacin DNA-DNA y DNA- taxonoma o los mtodos inmunolgicos fueron estra-
ARNr. Los cidos grasos predominantes en el tegias para la identificacin de procariontes, en la ac-
gnero Pseudomonas son C16:0, C18:1 y derivados (26), tualidad se conoce que estas herramientas no son
aunque otros autores consideran que son predominan- suficientes para la identificacin precisa de un micro-
tes los cidos grasos hidroxi, C10:0 3-hidroxi, C12:0 3- organismo. Actualmente, la secuenciacin del gen 16S
hidroxi y C12:0 2-hidroxi, (27). ARNr ha confirmado los grupos bsicos definidos por
Palleroni (27).
Estudios de taxonoma molecular del gnero
Pseudomonas Una de las protenas de la membrana externa ms
abundantes de Pseudomonas sensu stricto es Oprf.
El gen ARNr 16S es actualmente la seccin del
El gran polimorfismo de esta protena se encuentra
genoma ms utilizada para fines taxonmicos.
relacionado con el nicho ecolgico. Adems de tener
La comparacin de las secuencias de los ARNr 16S una funcin como poro- protena estructural de mem-
(o de los genes que los codifican) permite establecer brana y adherencia radical- esta protena pleiotrpica
las relaciones filogenticas existentes entre los orga- muestra un gran polimorfismo que se corresponde con
nismos procariotas. Este hecho ha tenido una enorme dos tipos de OprF, denominadas OprF tipo 1 y OprF
repercusin en la taxonoma bacteriana, dando lugar tipo 2. Aunque la proporcin del gen oprF tipo 2 entre
al sistema de clasificacin vigente y permitiendo la iden- muestras de rizosfera fue muy variable, con diferen-
tificacin rpida y precisa de las bacterias (28). cias altamente significativas (P<0.001) en compara-
En la actualidad, la identificacin de Pseudomonas cin con la proporcin del gen oprF tipo 2 del suelo
se realiza con mtodos moleculares, como la compa- adyacente a la planta, donde la gran mayora de los
racin de secuencias del 16S ARNr o hibridacin ARNr- oprF (>95%) corresponde al tipo 1. Los resultados ob-
ADN. De Vos et al. (29) propusieron que el gnero tenidos en este estudio (33) resaltan la funcin poten-
Pseudomonas se limite a las especies relacionadas cial del gen oprF para definir ecotipos en P. fluorescens
con P. aeruginosa y P. fluorescens en el grupo I de especies, y tal vez para mejorar la resolucin de la
homologa ARNr-ADN. A las especies que pertenecen taxonoma de Pseudomonas.
a este grupo se les conoce como las verdaderas Hasta el momento, se considera que el gen rpoB
Pseudomonas o las Pseudomonadales es el ms adecuado para la identificacin y discrimi-
fluorescentes , debido a los pigmentos fluorescentes nacin filogentica a nivel de especies y subespecies,
que producen ambas especies. si se tiene en cuenta el anlisis de la secuencia situa-
En el ao 2000, Yumamoto et al. (30) realizaron un da entre las posiciones 2300-3300 (34).
estudio filogentico de este gnero con el objetivo de Mecanismos de accin de Pseudomonas
establecer un sistema de clasificacin ms fiable. Para fluorescens como estimuladora del crecimiento en
ello usaron secuencias nucleotdicas combinadas de plantas
los genes que codifican para la subunidad B ADN girasa
Existe gran cantidad de bibliografa que describe el
(gyrB) y el gen del factor 70 (rpoD). Ambas protenas uso potencial de bacterias asociadas a las plantas como
son ubicuas en las bacterias y esenciales en el creci- agentes estimulantes del desarrollo y la sanidad de
miento celular. El experimento fue validado con la iden- las mismas (34).
tificacin de 31 especies descritas de Pseudomonas
(un total de 125 aislamientos). En 1998, Bashan y Holguin (35) propusieron dos
nuevos trminos para el uso cientfico general de las
Algunos investigadores sugieren que el estudio del PGPB; estos fueron: Bacterias biocontroladoras
gnero Pseudomonas marc la entrada a una nueva promotoras del crecimiento vegetal como biocontrol en
manera de percibir y trabajar la taxonoma bacteriana; plantas (Biocontrol-PGPB) y Bacterias estimuladoras
un ejemplo de ello fue el establecimiento de las bases del crecimiento en plantas (PGPB).
para utilizar la molcula de ARNr como marcador

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Los autores proponen que el trmino Rizobacterias del microorganismo de inters con un fitopatgeno,
estimuladoras del crecimiento en plantas, propuesto provocando la disminucin de los efectos dainos de
por Kloepper (36), se actualice con los nuevos conoci- este ltimo sobre la planta. Los mecanismos de con-
mientos dentro de este campo. Segn los investigado- trol biolgico ms ampliamente reconocidos son: la
res, este trmino describe mejor la naturaleza de mu- competencia por un nicho ecolgico o sustrato, la
chas bacterias beneficiosas y es ampliamente acep- produccin de inhibidores aleloqumicos y la induc-
tado por los miembros de la comunidad cientfica. De- cin de resistencia sistmica en las plantas
bido a que muchas bacterias beneficiosas no son bac- hospedantes ante un amplio espectro de patgenos
terias rizosfricas, proponen sustituir la palabra y/o estrs abiticos (41).
rizobacteria por bacteria, creando el trmino modifica-
Muchos suelos agrcolas pierden una cantidad su-
do Bacterias biocontroladoras promotoras del creci-
ficiente de uno o ms de estos compuestos, por lo
miento vegetal (biocontrol-PGPB-Plant Growth
que el desarrollo de la planta no es ptimo. Para mi-
Promoting Bacteria). Este vocablo se emplear para
tigar este problema y obtener una alta produccin,
describir bacterias que controlan patgenos en las
los agricultores se convirtieron en dependientes de
plantas (ya sea produciendo sustancias inhibitorias o
fuentes qumicas de nitrgeno y fsforo, y estos, ade-
incrementando la resistencia natural de la planta), la
ms de ser costosos, daan el medio ambiente. Se-
palabra Biocontrol se combinar para formar el nuevo
ra muy ventajoso si un significado biolgico eficiente
trmino Biocontrol PGPB. El trmino PGPB se apli-
de proveer nitrgeno y fsforo a las plantas, pudiera
car cuando la bacteria favorece a la planta a travs
utilizarse para sustituir, al menos, una porcin los
de su propio metabolismo (solubilizacin de fosfatos,
qumicos nitrogenados y fosforados que actualmente
produccin de hormonas, fijacin de nitrgeno), favo-
se utilizan (38).
reciendo lo que beneficia el metabolismo de la planta
(aumenta la toma de agua y minerales, mejora el de- Algunos de los mecanismos directos que estn aso-
sarrollo de las races, aumenta la actividad enzimtica ciados con P. fluorescens como PGPB son (24):
de las plantas). Estas palabras pueden utilizarse sin - Secuestro del hierro: Este elemento no es asimilado
tener en cuenta el gnero o la especie de la bacteria. ni por bacterias ni por plantas, debido a que el ion
Sin embargo, en algunos casos, diferentes razas de frrico Fe3+ es la forma predominante en la naturale-
la misma especie podran ser biocontrol PGPB o za, por lo que la cantidad de hierro disponible para
PGPB (35). ser asimilado por organismos vivos es extremada-
Segn una revisin realizada por Glick (37), algu- mente baja. Para sobrevivir con esta limitada canti-
nas de estas PGPB pueden penetrar tambin al inte- dad de hierro, algunas bacterias sintetizan siderforos
rior de las races y establecerse como una poblacin de baja masa molecular (~4001500 Da), molculas
endfitica. con una elevada afinidad por el Fe3+, as como re-
ceptores de membrana capaces de unirse a com-
La propagacin de la colonizacin endfitica de los
plejos de Fe-siderforos, facilitando de esta forma la
rganos y tejidos de las plantas hospedantes reflejan
toma de hierro. Actualmente se conocen casi 500
la capacidad de la bacteria de adaptarse selectivamente
siderforos.
a estos nichos ecolgicos especficos (38). Consecuen-
temente, una asociacin ntima entre la bacteria y la Los beneficios directos de las bacterias con
planta hospedante puede establecerse sin daar a la siderforos en el desarrollo de las plantas se demos-
planta. Aunque es generalmente aceptado que muchas traron en diferentes tipos de experimentos. Por ejem-
comunidades endfiticas de bacterias son producto del plo, se realizaron estudios utilizando siderforos-frricos
proceso de colonizacin en la zona de las races, ellas marcados radiactivamente, como fuente de hierro, don-
pueden tambin originarse de otras fuentes adems de se mostr que las plantas son capaces de tomar el
de la rizosfera, por ejemplo, la filosfera, la antosfera, o hierro marcado. Las plantas de frijol (Phaseolus vulgaris
la espermosfera (38). L.) que crecan bajo condiciones limitadas de hierro,
mostraron leves sntomas clorticos. Posteriormente,
Las PGPB pueden promover, de forma directa, el
cuando fueron inoculadas con la raza de Pseudomonas
crecimiento de las plantas mediante diferentes meca-
productora de siderforos GRP3, aumentaron los ni-
nismos de accin. Los efectos directos se evidencian
veles de clorofila, comparadas con plantas no inocula-
en ausencia de otros microorganismos, e incluyen la
das. Las plantas de Arabidopsis thaliana L. asimilaron
Fijacin Biolgica del Nitrgeno (FBN) (39) y la snte-
un complejo de Fe sintetizado por P. fluorescens, in-
sis de fitohormonas (40). Los mecanismos indirectos
duciendo un incremento de Fe en el interior de la plan-
se ponen de manifiesto cuando ocurre la interaccin
ta y mejorando el desarrollo de la misma.

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- Citoquininas y giberelinas: Algunos estudios demues- para restringir el crecimiento de fitopatgenos se ha


tran que, en particular las PGPB, pueden producir convertido en una opcin viable.
tanto giberelinas como citoquininas. Las citoquininas
Existe un grupo importante de hongos y bacterias
se han detectado en medios de clulas libres de
que presentan efectos antagnicos frente a otros
Azotobacter, Rhizobium, Pantoea agglomerans,
microorganismos, y esta accin puede ser aprovecha-
Rhodospirillum rubrum, Pseudomonas fluorescens,
da como una forma de control biolgico de fitopatgenos
Bacillus subtilis y Paenibacillus polymyxa. El est-
(45); entre estos se encuentran las bacterias de los
mulo en el desarrollo de las plantas por algunas
gneros Pseudomonas y Bacillus y hongos de los g-
citoquininas o giberelinas producidas por PGPB, ha
neros Fusarium, Gliocladium y Trichoderma (45).
sido documentado (26), pero an se desconocen mu-
chos aspectos sobre la funcin de las bacterias En la naturaleza existe una interaccin continua
sintetizadoras de hormonas y la forma de produc- entre los patgenos potenciales y sus antagonistas,
cin de estas por las bacterias. Algunos de forma tal que estos ltimos contribuyen a que en
fitopatgenos pueden tambin sintetizar citoquininas. muchos casos no se desarrolle la enfermedad (45).
Sin embargo, se ha encontrado que las PGPB pro- Las bacterias Pseudomonas del grupo fluorescen-
ducen bajos niveles de citoquininas comparadas con te se consideran una opcin prometedora en el control
los fitopatgenos, por lo que el efecto de las PGPB biolgico de fitopatgenos. Este grupo bacteriano es
en el desarrollo de las plantas es estimulante, mien- un importante colonizador de la rizosfera de plantas.
tras que es inhibitorio el efecto de las citoquininas Actualmente existen diversas cepas de P. fluorescens
producidas por patgenos (37). que han sido registradas, y algunas de ellas patentadas
Pseudomonas [P. putida, P. spp., (42)] se conside- (46) para su uso en los cultivos agrcolas como agen-
ran tambin bacterias diazotrficas, las que como tes de control biolgico. Por ejemplo, la cepa ZUM80
inoculantes microbianos constituyen una gran alterna- suprime significativamente el crecimiento del patge-
tiva en el uso de fertilizantes nitrogenados. Estas bac- no de frijol Colletotrichum lindemuthianum Briosi &
terias tienen la capacidad de reducir el nitrgeno at- Cavaray, y de los patgenos de aguacate Colletotrichum
mosfrico, donde se encuentra como nitrgeno ele- gloeosporioides Penz y Phytophthora cinnamomi
mental de forma ilimitada, y hacerlo disponible para Rands (46).
los cultivos. Los fijadores de nitrgeno pueden El gnero Pseudomonas produce compuestos
interactuar de forma simbitica con la planta, como en extracelulares conocidos como biosurfactantes, debi-
el caso de rizobio-leguminosa, o comportarse como do a la capacidad que tienen de crecer en presencia
diaztrofos asociativos. de hidrocarburos, lo cual estimula la produccin de
Las investigaciones relacionadas con los mecanis- estas molculas. Investigaciones realizadas por Tran
mos de promocin, en el desarrollo de las plantas por et al. (47), demostraron que los biosurfactantes produ-
las PGPB, proveen de una gran comprensin sobre cidos por especies de Pseudomonas tienen actividad
las mltiples facetas en la supresin de enfermedades ltica sobre zoosporas de los gneros Phytophthora y
por estos agentes biocontroladores. La mayora de los Pythium.
estudios se relaciona con rizobacterias de vida libre, No es fcil determinar con precisin los mecanis-
especialmente Pseudomonas y Bacillus; sin embar- mos que intervienen en las interacciones entre los an-
go, mucho queda por aprender de las bacterias tagonistas y los patgenos sobre la planta o en las
endfiticas no simbiticas que tienen una asociacin heridas. En general, los antagonistas no tienen un ni-
nica y aparentemente un efecto ms pronunciado en co modo de accin y la multiplicidad de modos de
el aumento del desarrollo de las plantas (43). accin es una caracterstica para seleccionarlos.
Pseudomonas fluorescens como agente de con- Pseudomonas fluorescens como patgeno
trol biolgico
Algunas especies de Pseudomonas son patgenos
El mtodo ms comn para controlar las enferme-
importantes de animales, insectos y plantas (48).
dades en los cultivos es el uso de compuestos qumi-
cos; sin embargo, se ha comprobado que estos tienen Pseudomonas como patgenos oportunistas, se
consecuencias negativas en el ambiente y en la salud encuentran ampliamente distribuidas en ambientes
humana (44). Por lo tanto, se han buscado nuevas al- naturales y pueden encontrarse en la rizosfera de las
ternativas para manejar las enfermedades en los culti- plantas. Bajo condiciones medioambientales especfi-
vos. As, el uso de microorganismos con capacidades cas (elevada humedad relativa, cambios de temperatu-

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ra, elevada fertilizacin nitrogenada), P. fluorescens En este mismo pas, en la provincia de Jiangsu, se
puede causar considerables daos en la agricultura observ una enfermedad no identificada en campos
(10). comerciales de ajo (Allium sativum L.). Los sntomas
iniciaron con lesiones hmedas desarrolladas en la
En Argentina, se observ una enfermedad
base de las hojas. Posteriormente, se presentaron en
bacteriana postcosecha en endivias (Cichorum
el tallo y en los tejidos internos, seguidos de un
endivia L.). Las plantas afectadas mostraron oscu-
amarillamiento y necrosis a lo largo de los bordes de
recimiento y podredumbre blanda de las hojas inte-
las hojas. El organismo causal aislado de plantas en-
riores, as como una necrosis marginal. Las prue-
fermas se identific como P. fluorescens, basado en
bas bioqumicas y fisiolgicas permitieron identifi-
pruebas bioqumicas y fisiolgicas, lo cual fue confir-
car al patgeno como P. fluorescens bv. III, P.
mado por la composicin celular de cidos grasos y el
fluorescens bv. V, y Pseudomonas cichorii. La identi-
anlisis de la secuencia del ARNr 16S. Este constitu-
ficacin de los aislamientos bacterianos se realiz a
y el primer informe de la enfermedad bacteriana en
travs de los RFLP (del ingls Restriction Fragment
ajo, causada por P. fluorescens en la Repblica Po-
Length Polymorphism o Polimorfismo de la Longitud
pular China (11).
de los Fragmentos de Restriccion). Estos resultados
generaron el primer informe de estas dos bacterias afec- Todas estas publicaciones muestran la
tando endivias en Argentina (9). patogenicidad de una bacteria que ha sido
mayoritariamente conocida como agente de control
Del ao 2002 al 2004, en el Departamento de Pro-
biolgico o promotora del crecimiento en las plantas.
teccin de Plantas en Riyadh (Abha, Arabia Saudita)
Aunque la mayora de los autores an no depositan
se analizaron plantas de tomate (Solanum
sus secuencias de referencia en alguna base de da-
lycopersicum L.) con sntomas de lesiones en los ta-
tos, como el NCBI en Estados Unidos, The European
llos, necrosis y races adventicias. La bacteria que
Molecular Biology Laboratory (EMBL), y el DNA Data
se aisl del tallo de las plantas infectadas, se identi-
Bank of Japan (DDBJ), se infiere que se trata de la
fic como P. fluorescens (biotipo I). Esta identifica-
misma especie.
cin fue confirmada mediante anlisis biolgicos (fuen-
te de carbono a 37C) y constituy la primera publica-
cin de la etiologa de la necrosis de la mdula en CONCLUSIONES
tomate en Arabia Saudita (10).
La utilizacin de bacterias endofticas, como con-
En Ningbo (Provincia de Zhejiang, Repblica Po- trol biolgico de diversos patgenos, tiene una gran
pular China), durante los periodos clidos y hmedos relevancia en la agricultura actual por la creciente ne-
en el verano de los aos 2005 a 2008, se observaron cesidad de disminuir el uso de plaguicidas en los sis-
sntomas de pudricin en frutos de brcoli (Brassica temas de produccin agrcola.
oleracea L. var italica Planch). Los sntomas caracte-
rsticos eran lesiones hmedas, desarrolladas en las P. fluorescens como PGPR son muy utilizadas en
yemas, que se transforman en una pudricin blanda diversos cultivos, pues colonizan las races de los mis-
marrn-negro. Secciones longitudinales de las mos, promueven el crecimiento y previenen el estable-
inflorescencias sintomticas mostraron decoloracin cimiento de patgenos. Tambin favorecen la capaci-
parda y pudricin de los tejidos internos. La produc- dad de absorcin de agua y nutrimentos, lo que permi-
cin de brcoli merm debido a la enfermedad, la cual te que las plantas sean ms vigorosas, productivas y
present una incidencia del 65 al 81%. Se caracteriza- tolerantes a condiciones climticas adversas.
ron cinco aislamientos representativos con el Sistema Recientemente, se ha encontrado a esta bacteria
de identificacin Biolog G2, versin 4.2 (Biolog Inc., como patognica de diversas plantas, por lo que debe
Hayward, CA) y por cromatografa de gas de los ci- continuar el estudio del genoma de estos tres tipos de
dos grasos steres de metilo (FAME) utilizando el Sis- bacterias (patgenas, agentes de control biolgico y
tema de Identificacin Microbiolgico (MIDI Inc., PGPR).
Newark, DE). Los cinco aislamientos fueron identifica-
dos como P. fluorescens. Adems, se seleccion la REFERENCIAS
cepa PFB-01 a la cual se le amplific y secuenci el
gen ARNr 16S. Por este mtodo, se corrobor la iden- 1. Lalucat MJ, Garcia-Valdes E. DNA sequence-based
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