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FARMACOPEA
ARGENTINA
SPTIMA EDICIN
VOLUMEN
I
FARMACOPEA
ARGENTINA
SPTIMA EDICIN
ANMAT
Administracin Nacional de Medicamentos, Alimentos y Tecnologa Mdica
INAME
Instituto Nacional de Medicamentos
FARMACOPEA
ARGENTINA
SPTIMA EDICIN
Presidente de la Nacin
Dr. Eduardo Duhalde
SPTIMA EDICIN
VOLUMEN
I
COMISIN PERMANENTE
FARMACOPEA ARGENTINA
VOCALES:
DECRETO N 202
NDICE GENERAL
Prlogo
Presentacin
Objetivos
Historia
Subcomisiones Tcnicas, composicin
Textos legales
Consideraciones Generales
Mtodos Generales de anlisis
Mtodos Generales de Anlisis
<10> - Anlisis estadstico de resultados de ensayos biolgicos
<20> - Anlisis trmico
<30> - Capacidad neutralizante de cido
<40> - Carbono orgnico total
<50> - Colorantes de uso farmacutico
<60> - Combustin en erlenmeyer con oxgeno
<70> - Conductividad
<80> - Conservantes
<90> - Control microbiolgico de productos no obligatoriamente estriles
<100> - Cromatografa
<110> - Determinacin de aflatoxinas
<120> - Determinacin de agua
<130> - Determinacin de alcohol
<140> - Determinacin de aluminio
<150> - Determinacin de cinc
<160> - Determinacin de la densidad relativa
<170> - Determinacin de la rotacin ptica
<180> - Determinacin de la temperatura de solidificacin
<190> - Determinacin de la viscosidad
<200> - Determinacin de nitrgeno
<210> - Determinacin del contenido extrable del envase
<220> - Determinacin del contenido neto del envase
<230> - Determinacin del ndice de refraccin
<240> - Determinacin del intervalo de destilacin
<250> - Determinacin del pH
<260> - Determinacin del punto de fusin
<270> - Determinacin del residuo de ignicin
<280> - Disolucin completa
<290> - Distribucin del tamao de partcula en polvos
<300> - Electroforesis
<310> - Ensayo de disgregacin
<320> - Ensayo de disolucin
<330> - Ensayo de endotoxinas bacterianas
<340> - Ensayo de piretgenos
<350> - Ensayo de sustancias fcilmente carbonizables
<360> - Ensayo de toxicidad anormal
<370> - Ensayos de esterilidad
<380> - Ensayos de reactividad biolgica
<390> - Ensayos farmacotcnicos para aerosoles
<400> - Ensayos farmacotcnicos para supositorios
<410> - Ensayos generales de identificacin
<420> - Envases primarios de plstico
<430> - Envases de vidrio
<440> - Espectrofotometra de absorcin y emisin atmica
<450> - Espectrofotometra de fluorescencia
<460> - Espectrofotometra infrarroja
<470> - Espectrofotometra ultravioleta y visible
<480> - Grasas y aceites fijos
<490> - Identificacin de bases orgnicas nitrogenadas
<500> - Identificacin de tetraciclinas
<510> - Impurezas comunes
<520> - Impurezas orgnicas voltiles
<530> - Liberacin de principios activos
<540> - Lmite de arsnico
<550> - Lmite de calcio, potasio y sodio
<560> - Lmite de cloruro y sulfato
<570> - Lmite de dimetilanilina
<580> - Lmite de hierro
<590> - Lmite de metales pesados
<600> - Lmite de plomo
<610> - Lmite de selenio
<620> - Materiales volumtricos
<630> - Mtodos de farmacognosia
<640> - Osmolalidad y Osmolaridad
<650> - Partculas en inyectables
<660> - Partculas metlicas en ungentos oftlmicos
<670> - Prdida por calcinacin
<680> - Prdida por secado
<690> - Pesas y balanzas
<700> - Polarografa
<710> - Sales de bases orgnicas nitrogenadas
<720> - Termmetros
<730> - Titulacin con nitrito
<740> - Uniformidad de unidades de dosificacin
<750> - Valoracin de esteroides
<760> - Valoracin iodomtrica de antibiticos beta-lactmicos
<770> - Valoracin microbiolgica de antibiticos
<780> - Volumetra
Textos de Informacin General
<1020> - Buenas prcticas de fabricacin y control
<1040> - Estudios de estabilidad
<1050> - Formas farmacuticas
<1060> - Friabilidad y dureza de comprimidos
<1070> - Impurezas en productos oficiales
<1090> - Limpieza de materiales de vidrio
<1110> - Preparaciones radiofarmacuticas
<1120> - Productos biotecnolgicos
<1130> - Validacin de mtodos analtico
Reactivos y Soluciones
Especificaciones de Reactivos
Indicadores, papeles y papeles indicadores
Soluciones
Reguladoras
Colorimtricas
Indicadores de Reactivos
Volumtricas
Tablas
ndice alfabtico
PRLOGO
La presente edicin resuelve una deuda pendiente para con la comunidad cientfica, que requera
imperiosamente el respaldo de un texto de referencia de esta envergadura. Efectivamente, esta Farmacopea
Argentina se materializa luego de casi un cuarto de siglo de esfuerzos inconclusos.
En este trabajo se revisa el material existente y se incorporan los conocimientos cientficos y tcnicos
actualizados a la luz de las innovaciones del sector, constituyndose de esta forma en una herramienta de
referencia permanente y permitiendo as asegurar la calidad de los medicamentos.
Este Volumen constituye el primer paso en pos de un objetivo mayor: la edicin de los cuatro Volmenes
constituirn en su conjunto la Sptima Edicin de la Farmacopea Argentina. La solidez de este proyecto se
sustenta en el compromiso manifiesto de todos y cada uno de los que han contribuido de alguna manera a
concretar este primer tramo.
Un reconocimiento especial merecen los Vocales de la Comisin Permanente, propuestos como mximos
representantes de las Instituciones Acadmicas y Cientficas de mayor renombre de nuestro pas, que han
desarrollado una exhaustiva labor cristalizando as este ejemplar.
Este producto es el resultado del esfuerzo mancomunado y desinteresado de un cuerpo de profesionales
del ms alto prestigio en el orden nacional e internacional, promovido y liderado por el Ministerio de Salud de
la Nacin, a travs de su Agencia Regulatoria, Administracin Nacional de Medicamentos, Alimentos y
Tecnologa Mdica (A.N.M.A.T.).
Es un honor para m haber participado activamente en un emprendimiento de esta relevancia y un
privilegio presentar una obra de la magnitud del Primer Volumen de la Sptima Edicin de la Farmacopea
Argentina, que sin duda ser un referente de consulta para la comunidad internacional de habla hispana.
Una vez ms mi ms profundo agradecimiento a cada uno de los que han hecho posible esta publicacin.
Sin embargo, construir la calidad de los medicamentos ya sea determinando las especificaciones y los
controles de calidad que deben cumplirse, as como los lmites de impurezas y los productos de degradacin,
etc., es una esforzada tarea que slo pueda llevarse adelante en virtud del trabajo mancomunado de distintos
sectores nucleados por una perspectiva sanitaria compartida. Esta edicin de la Farmacopea Argentina resulta
del meticuloso trabajo de equipos conformados por hombres y mujeres de reconocida trayectoria nacional e
internacional. Entre ellos, farmacuticos, qumicos, bioqumicos, ingenieros y mdicos, quienes contribuirn
tambin con las actualizaciones contenidas en los prximos volmenes. Su aporte es indispensable para
armonizar la calidad de los medicamentos en toda la Repblica, armonizacin que es, en verdad, la piedra basal
para el uso seguro de los medicamentos.
Aguas y Soluciones Parenterales Dra. Blanco, Mirta; Dra. Brion, Margarita; Lic.
Coordinador: Farm. Silvetti, Alfredo. Dall, Luis; Lic. Gorisknik, Adriana; Dra.
Farm. Colombari, Daniel; Dr. Dal Bo, Hctor; Lic. Nudelman, Norma; Farm. Pilatti, Carina.
Duda, Guillermo; Farm. Goin, Jos Alberto; Farm.
Montes de Oca, Federico; Lic. Petracca Antonia; Farmacia Hospitalaria
Farm. Ploder, Peter; Farm. Puebla, Ignacio; Farm. Coordinador: Farm. y Bioq. Fernndez, Mara
Stampone, Patricia; Farm. Szyszkowsky, Juiz Cristina.
Rubn; Lic. Vedoya, Gabriela Silvia. Bioq. Bernal Castro, Federico; Lic. Fernndez,
Mara Laura; Dra. Filinger, Ester; Farm. Garca,
Bioequivalencia y Disolucin Anglica; Farm. Hermida, Miguel; Dr.
Coordinador: Farm. Pesce, Graciela. Lagomarsino, Eduardo; Lic. Melero, Marcia; Farm.
Dra. Bignone, Ins; Dr. Bolaos, Ricardo; Dr. Menndez, Ana Mara; Dr. Montemerlo, Hugo;
Bramuglia, Guillermo; Dr. De Leone, Hctor; Farm. Dra. Pita Martin de Portela, Mara Luz; Farm.
Giarcovich, Silvia; Dr. Pesce, Guido; Farm. Rey, Raviolo, Rodolfo; Dra. Slobodianik de Gurevich,
Andrea; Dr. Seoane, Martn; Farm. Steeman, Hayde; Dra. Soifer, Graciela.
Gabriela; Farm. Zubata, Patricia.
Farmacia Oficinal
Biotecnologa Coordinador: Farm. Ruggeri, Jos.
Coordinador: Dra. Dabsys, Susana. Farm. Andiach, Guido; Farm. Callegari, Fernando;
Lic. Garca Franco, Susana; Dra. Giampaolo, Farm. Fitanovich, Nora; Farm. Fridman, Gerardo;
Beatriz; Dr. Giuliani, Hctor; Farm. Goyogana, Farm. Gonzlez, Ana Mara; Farm. Julin, Silvia;
Francisco; Lic. Mammarella, Carlos; Lic. Farm. Maino, Hctor; Farm. Mollardo, Mara
Ostroswski, Hctor; Bioq. Pardo, Vernica; Dr. Teresa; Farm. Paura, Andrea; Farm. Policelli,
Seigelchifer, Mauricio. Gabriela; Farm. Quiroga, Eduardo; Farm. Rencoret,
Mara Mercedes; Farm. Salas, Vivian; Farm.
Colorantes, Excipientes y Aditivos Torres, Hugo; Farm. Valverde, Javier.
Coordinador: Lic. Ciura, Juan M. Emilio.
Dra. Brunet, Noem; Dra. Bustos; Mnica; Dr. Gases Medicinales
Corseti, Hctor; Dra. Dabbene, Viviana; Dr. Coordinador: Dr. Marceca, Ernesto.
Dobrecky, Jos; Dr. Ferrari, Jorge; Dr. Jacobi, Farm. Arcos, Marcelo; Farm. Bernaus, Carlos; Dr.
Carlos; Dra. Rivas, Viviana; Dr. Rubio Garca, Fischer, Alfredo; Farm. Tourville, Antonio; Dra.
Rodolfo; Lic. Taschetti, Mabel; Dra. Valiese, Mara Zavala, Estela.
Cristina.
Materiales de Uso Quirrgico y Dispositivos
Controles Toxicolgicos Biomdicos
Coordinador: Dr. Roses, Otmaro E. Coordinador: Dra. Sager de Agostini, Helga G.
Dr. Araldi, Hctor; Bioq. Bindstein, Edith; Dra. Farm. Carbone, Nora; Ing. De Forteza, Eduardo;
Bulgach, Delia; Dra. Fulginiti, Ana Susana; Dra. Dra. Gonzlez, Mara Celeste; Farm. Graa, Nora;
Lpez, Clara; Dr. Pico, Jos Carlos; Dra. Salseduc, Farm. Iervasi, Liliana; Farm. y Bioq. Olivera de
Marta. OConnell, Luca; Farm. Peralta, Laura; Ing. Saba,
Fernando; Dra. Tarletta, Patricia.
Ensayos Farmacotcnicos y Envases
Coordinador: Lic. Praturlon, Mara L. Medicamentos Fitoterpicos
Ing. Ariosti, Alejandro; Lic. Bava, Adriana; Dra. Coordinador: Dra. Ferraro, Graciela.
Calandri, Daniela; Dr. Ciccioli, Enrique; Dra. Dra. Agnese, Alicia; Dr. Amat, Anbal; Dr. Cabrera,
Lavaselli, Susana; Bioq. Luna Julio; Dr. Nacucchio, Jos Luis; Dra. Debenedetti, Silvia; Dra. Flores,
Marcelo; Dr. Porta, Ral; Lic. Snchez, Eduardo; Mara Lujn; Dra. Gattuso, Martha; Dra. Gattuso,
Lic. Vega, Julio Csar; Lic. Zanetti, Daniel. Susana; Dr. Gurni, Alberto; Farm. Lenni, Mara;
Dra. Nadinic, Elena; Dra. Rizzo, Ins; Dr. Rondina,
Estabilidad Rubn; Dra. Spegazzini, Etile; Dr. Taira, Carlos;
Coordinador: Lic. Spinetto, Marta. Dr. Wagner, Marcelo.
Microbiologa Quatrocchi, Oscar; Farm. Rodrguez, Eduardo; Dr.
Coordinador: Lic. Frade, Horacio. Sproviero, Jorge.
Dra. Albesa de Eraso, Ins; Farm. Arakaki, Regina;
Farm. Balanian, Gladys; Dra. Belixn, Norma; Radiofrmacos
Farm. Calvete, Javier; Lic. Lagomarsino, Mnica; Coordinador: Dr. Caro, Ricardo.
Dra. Montrasi, Gabriela; Farm. Raffo Palma, Bioq. Aprea, Patricia; Dra. Bergoc, Rosa; Dr.
Martha; Farm. Salazar, Germn; Dr. Sordelli, Durn, Adrin; Dra. Fraga de Surez, Amanda;
Daniel; Farm. Valdivia Aguilar, Pamela. Farm. Nicolini, Jorge; Dra. Rutty, Gisela; Farm.
Zubillaga, Marcela.
Productos y Mtodos Biolgicos, y Anlisis
Estadstico Secretara Tcnica
Coordinador: Bioq. Albertengo, Mara Elisa. Secretaria Tcnica: Farm. Karina Andrea Manco.
Farm. Francinelli, Luisa; Dra. Gorzalczany, Susana;
Bioq. Mondelo, Nlida; Dra. Niselman, Ada; Farm. Revisores Tcnicos: Compagnucci, Mara Paula;
Nisenbaum, Isaac. De Angelis, Mara Celeste; Policastro, Andrea
Area de Sangre y hemoderivados. Vernica.
Coordinador: Dra. Rossi Marina. zzz
Bioq. Barrovecchia de Deh, Ana; Dra. Caminos,
Andrea; Bioq. y Farm. Drucarof, Mara Alejandra;
Lic. Oliva, Liliana; Dra. Sobrero, Cecilia; Dr.
Zarzur, Jorge.
Area de Sueros y vacunas.
Coordinador: Dr. Margni, Ricardo.
Dr. Dokmetjian, Jos; Dra. Manghi, Marcela; Dra.
Prez, Anala.
El Senado y Cmara de Diputados de la Nacin peligrosidad del uso indebido de los medicamentos,
Argentina, reunidos en Congreso, etc., sancionan la condicin de su expendio, que podr ser: libre,
con fuerza de ley: bajo receta, bajo receta archivada y bajo receta y
Art. 1 Quedan sometidos a la presente ley y decreto.
a los reglamentos que en su consecuencia se dicten, Art. 6 El Ministerio de Asistencia Social y
la importacin, exportacin, produccin, Salud Pblica podr exigir la utilizacin, en los
elaboracin, fraccionamiento, comercializacin o productos a que se refiere el artculo 5, de envases
depsito en jurisdiccin nacional o con destino al de contenido mximo y mnimo, de acuerdo con la
comercio interprovincial de las drogas, productos naturaleza de los mismos y normas de tratamiento,
qumicos, reactivos, formas farmacuticas, as como procedimientos para su fraccionamiento,
medicamentos, elementos de diagnstico y todo distribucin y expendio, que permitan una
otro producto de uso y aplicacin en la medicina economa en la medicacin, resguardando los
humana y las personas de existencia visible o ideal intereses de la salud pblica.
que intervengan en dichas actividades.
Art. 7 Las autorizaciones para elaborar y
Art. 2 Las actividades mencionadas en el vender los productos mencionados en el artculo 5
artculo 1 slo podrn realizarse, previa se acordarn si, adems de las condiciones
autorizacin y bajo el contralor del Ministerio de establecidas en dicha norma, renen ventajas
Asistencia Social y Salud Pblica, en cientficas, teraputicas, tcnicas o econmicas.
establecimientos habilitados por el mismo y bajo la Dichas autorizaciones y sus reinscripciones tendrn
direccin tcnica del profesional universitario vigencia por el trmino de cinco aos, a contar de la
correspondiente, inscripto en dicho Ministerio. fecha de certificado autorizante.
Todo ello en las condiciones y dentro de las normas El Ministerio de Asistencia Social y Salud
que establezca la reglamentacin, atendiendo a las Pblica proceder a inscribir o reinscribir como
caractersticas particulares de cada actividad y a medicamentos industriales, aquellos productos que,
razonables garantas tcnicas en salvaguarda de la a su juicio, no corresponda autorizar como
salud pblica y de la economa del consumidor. especialidades medicinales. En tal caso, el precio
Art. 3 Los productos comprendidos en la de venta de los productos inscriptos como
presente ley debern reunir las condiciones medicamentos industriales no podr exceder del que
establecidas en la Farmacopea Argentina y, en caso determine dicho Ministerio.
de no figurar en ella; las que surgen de los patrones El interesado deber requerir la reinscripcin
internacionales y de los textos de reconocido valor dentro de los treinta das anteriores a su
cientfico. vencimiento.
El titular de la autorizacin y el director tcnico Art. 8 Las autorizaciones de elaboracin y
del establecimiento sern personal y solidariamente venta sern canceladas:
responsables de la pureza y legitimidad de los
a) A pedido del titular;
productos.
b) Por cualquier modificacin, alteracin o
Art. 4 No podr autorizarse la instalacin de
incumplimiento de las condiciones de la
nuevos laboratorios y se cancelarn los permisos de
autorizacin;
los existentes, cuando no elaboren sus propios
productos y sus actividades se limiten a envasar c) Por vencimiento del lapso establecido
especialidades preparadas por terceros. en el artculo 7; y
Art. 5 Los medicamentos que se expendan d) Cuando el producto no mantenga
al pblico en su envase debern reunir las finalidades teraputicas tiles, acordes
condiciones tcnicas de identificacin u otras que con los adelantos cientficos.
establezca la reglamentacin. sta determinar,
asimismo, teniendo en cuenta la naturaleza o
Art. 9 El Ministerio de Asistencia Social y b) Estudiar y proponer las normas tcnicas
Salud Pblica clasificar los productos generales que deben reunir los productos
comprendidos en el artculo 5 segn la naturaleza, enunciados en el inciso a);
composicin, actividad, accin farmacolgica y c) Determinar para las drogas no incluidas
procedimientos farmacotcnicos de preparacin, en la Farmacopea Argentina, las normas
estableciendo condiciones para su autorizacin, y condiciones que deben reunir y
acordes con los adelantos cientficos reconocidos, proponer a la Comisin Permanente de
los intereses de la salud pblica y la defensa la Farmacopea Argentina,
econmica del consumidor. modificaciones a las normas en vigencia
Art. 10 El Ministerio de Asistencia Social y oficial,
Salud Pblica redactar, publicar y revisar d) Establecer las normas y condiciones a
peridicamente el Formulario Teraputico que deber ajustarse la preparacin y la
Nacional, el que contendr la recopilacin de conservacin de los patrones nacionales
frmulas magistrales de uso frecuente y de accin de drogas y medicamentos;
farmacolgica y utilidad teraputica reconocidas. e) Realizar y promover la investigacin
integral en el campo de la farmacologa
Art. 11 Dependiente del Ministerio de en general y, de manera especial,
Asistencia Social y Salud Pblica, actuar la referida a la indagacin de las riquezas
Comisin Permanente de la Farmacopea Argentina, naturales nacionales;
que la revisar peridicamente, de acuerdo con el f) Realizar los trabajos tcnicos que le
progreso de la ciencia y asesorar a los organismos soliciten personas o instituciones
pblicos en las materias de su competencia. pblicas o privadas, mediante los
Art. 12 El Poder Ejecutivo establecer las recaudos y la percepcin de los derechos
normas reglamentarias para la importacin, arancelarios que fije la reglamentacin.
exportacin y fabricacin; fraccionamiento, Los derechos arancelarios referidos en los
circulacin y expendio de las sustancias incisos a) y f) ingresarn al Fondo Nacional de la
toxicomangenas en concordancia con los Salud, con destino al mencionado Instituto.
convenios internacionales, dictando todas las
medidas aconsejables para la defensa de la salud Art. 15 Facltase al Poder Ejecutivo para
pblica, el contralor de las toxicomanas y del invertir hasta la suma de cien millones de pesos
trfico ilegal y la satisfaccin de las necesidades moneda nacional (m$n 100.000.000). que se
teraputicas, regulando los permisos de cultivo para tomarn de rentas generales con imputacin a esta
la extraccin nacional de drogas, estupefacientes, ley, para organizar y poner en funcionamiento el
acordando los cupos de fabricacin y de Instituto de Farmacologa y de Normalizacin de
importacin cuando esta sea necesaria. Drogas y Medicamentos, como organismo del
Ministerio de Asistencia Social y Salud Pblica,
Art. 13 El Ministerio de Asistencia Social y cuyas funciones se especifican en el artculo
Salud Pblica est facultado para proceder al retiro anterior.
de muestras de los productos mencionados en el
artculo 1 a los efectos de verificar si los mismos Art. 16 Los inspectores o funcionarios
se ajustan a lo autorizado y declarado y si renen autorizados por el Ministerio de Asistencia Social y
las condiciones prescriptas en la presente ley y sus Salud Pblica tendrn la facultad de penetrar en los
normas reglamentarias. locales, habilitados o no, donde se ejerzan
actividades comprendidas en la presente ley.
Art. 14 Crase el Instituto de Farmacologa
y de Normalizacin de Drogas y Medicamentos Art. 17 Los jueces, con habilitacin de da y
destinado a: hora, acordarn de inmediato a los funcionarios
designados por la autoridad de aplicacin, la orden
a) Efectuar el anlisis y contralor de allanamiento y el auxilio de la fuerza pblica
farmacolgico de las drogas, para practicar las inspecciones a que se refiere el
medicamentos, productos artculo anterior.
dietetoterpicos, cosmetolgicos, aguas Tambin con habilitacin de da y hora y con el
minerales y otros productos, cuya auxilio de la fuerza pblica, procedern a adoptar
administracin pueda afectar la salud las medidas preventivas autorizadas por el artculo
humana, percibiendo los derechos 18, emplazando al presunto infractor a comparecer
arancelarios que fije la reglamentacin; a su despacho dentro del trmino de tres das
hbiles, a un comparendo verbal, al que tambin
deber concurrir el funcionario que solicit la d) Suspensin o inhabilitacin en el
medida. El presunto infractor podr concurrir ejercicio de la actividad o profesin
asistido por su letrado. En dicho comparendo se hasta un lapso de tres aos en caso de
oirn las defensas y se recibirn las pruebas extrema gravedad o mltiple reiteracin
ofrecidas. de la o de las infracciones, la
La inasistencia del infractor, sin previa inhabilitacin podr ser definitiva;
justificacin, convertir en firme la medida e) El comiso de los efectos o productos en
decretada. Dentro de las 48 horas de celebrado el infraccin, o de los compuestos en que
comparendo verbal, el juez resolver mantener o intervengan elementos o sustancias
revocar la medida preventiva. Su resolucin es cuestionados;
apelable con efecto devolutivo. f) La cancelacin de la autorizacin para
Art. 18 Si se incurriera en actos u omisiones vender los productos.
que, a juicio del Ministerio de Asistencia Social y El producido de las multas ingresar al Fondo
Salud Pblica, constituyeran un peligro para la Nacional de la Salud.
salud de las personas, podr solicitar a la autoridad Art. 21 Si se considera que existe una
judicial la clausura, total o parcial, de los locales en infraccin de las previstas en el artculo 19, se dar
que los mismos ocurrieron, la suspensin de la vista al interesado, por el trmino de tres das
elaboracin y expendio de los productos hbiles, para que oponga sus defensas y ofrezca
cuestionados y la intervencin tcnica, total o toda su prueba, acompaando la documental.
parcial, de los procesos de elaboracin y produccin Sustanciada la prueba en el plazo de diez das
incriminados. hbiles se dictar resolucin en el trmino de tres
Dichas medidas no podrn tener una duracin das hbiles, la que ser apelable en el trmino de
mayor de 90 das hbiles. tres das hbiles.
Art. 19 Queda prohibido: En la apelacin se expresarn los
a) La elaboracin, la tenencia, correspondientes agravios y con ellos se elevar el
fraccionamiento, circulacin, expediente cuando proceda, a la magistratura
distribucin y entrega al pblico de judicial correspondiente.
productos impuros o ilegtimos; Los plazos a los que se refiere el presente
b) La realizacin de cualquiera de las artculo son perentorios y prorrogables solamente
actividades mencionadas en el artculo por razn de la distancia.
1 en violacin de las normas que Las resoluciones del Ministerio de Asistencia
reglamentan su ejercicio conforme a la Social y Salud Pblica, por las que se impongan
presente ley; apercibimiento y multas de m$n 2.000, harn cosa
c) Inducir en los anuncios de los productos juzgada.
de expendio libre a la automedicacin; Art. 22 El que adulterare alguno de los
d) Toda forma de anuncio al pblico, de los productos comprendidos en la presente ley, en
productos cuyo expendio slo haya sido cualquiera de sus etapas, se har pasible de las
autorizado "bajo receta"; penalidades establecidas en el Captulo IV, Ttulo
e) Vulnerar, en los anuncios, los intereses VII, Delitos Contra la Seguridad Pblica, artculo
de la salud pblica o la moral 200 y sus correlativos del Cdigo Penal.
profesional;
Art. 23 En el caso de que las multas
f) Violar, en los anuncios, cualquier otro
impuestas, una vez consentidas, no fueran
requisito exigido por la reglamentacin.
satisfechas, el Ministerio de Asistencia Social y
Art. 20 Las infracciones a las normas de la Salud Pblica promover por va de apremio la
presente ley y su reglamentacin sern sancionadas: pertinente accin judicial ante los jueces en lo Penal
a) Con apercibimiento; Econmico, en jurisdiccin nacional y en otras
b) Con multas de m$n 2.000 a m$n jurisdicciones ante los jueces federales de seccin.
5.000.000; Art. 24 Las acciones emergentes de esta ley
c) Con la clausura, total o parcial, prescribirn en el trmino de cinco aos. Dicha
temporal o definitiva, segn la gravedad prescripcin quedar interrumpida por la secuela
de la causa o reiteracin de la misma, del proceso, o por la comisin de cualquier otra
del local o establecimiento en que se infraccin a la presente ley o a los reglamentos que
hubiera cometido la infraccin; en su consecuencia se dicten.
Art. 25 Derganse todas las disposiciones Art. 27 Comunquese al Poder Ejecutivo.
que se opongan a la presente ley. Dada en la Sala de Sesiones del Congreso
Argentino, en Buenos Aires, a veintitrs de julio de
Disposiciones transitorias mil novecientos sesenta y cuatro.
Art. 26 Las autorizaciones a que se refiere el Nota: reglamentada por Decreto N 9.763/64,
artculo 7, acordadas con anterioridad a la presente complementada y modificada por Decreto N
ley debern ser renovadas por el trmino de cinco 341/92, Disposicin N 1.680/94, Decreto N
aos, debiendo los interesados solicitarlo dentro de 2.505/75.
los plazos y con las condiciones que establezca la
reglamentacin.
DECRETO N 150/92
(Texto ordenado de acuerdo con las estar sujeta a la autorizacin previa de la autoridad
modificaciones de los Decretos N 1.890/92 y sanitaria nacional. Las especialidades medicinales
177/93) o farmacuticas autorizadas para su expendio en el
CAPTULO I mercado nacional sern las inscriptas en un registro
especial en el Ministerio de Salud y Accin Social,
mbito de aplicacin de acuerdo a las disposiciones del presente decreto
Artculo 1 El presente decreto se aplicar al y su reglamentacin. Prohbese en todo el territorio
registro, elaboracin, fraccionamiento, prescripcin, nacional la comercializacin o entrega a ttulo
expendio, comercializacin, exportacin e gratuito de especialidades medicinales o
importacin de medicamentos. farmacuticas no registradas ante la autoridad
sanitaria, salvo las excepciones que de acuerdo a la
A los fines del presente decreto se adoptan las reglamentacin disponga la autoridad sanitaria.
siguientes definiciones:
Art 3 Las solicitudes de inscripcin al
a) Medicamento: toda preparacin o Registro de especialidades medicinales o
producto farmacutico empleado para la farmacuticas autorizadas, debern incluir la
prevencin, diagnstico y/o tratamiento siguiente informacin, con carcter de declaracin
de una enfermedad o estado patolgico, jurada:
o para modificar sistemas fisiolgicos en
a) Del producto: nombre propuesto para el
beneficio de la persona a quien se le
mismo; frmula definida y verificable;
administra;
forma o formas farmacuticas en que se
b) Principio activo o droga farmacutica:
presentar; clasificacin farmacolgica,
toda sustancia qumica o mezcla de
haciendo referencia al nmero de
sustancias relacionadas, de origen
cdigo, si existiera, de la clasificacin
natural o sinttico, que poseyendo un
internacional de medicamentos de la
efecto farmacolgico especfico, se
Organizacin Mundial de la Salud
emplea en medicina humana;
(OMS); condicin de expendio;
c) Nombre genrico: denominacin de un
b) Informacin tcnica: mtodo de control;
principio activo o droga farmacutica o;
perodo de vida til, mtodo de
cuando corresponda, de una asociacin o
elaboracin en conformidad con las
combinacin de principios activos a
prcticas adecuadas de fabricacin
dosis fijas, adoptada por la autoridad
vigentes, datos sobre biodisponibilidad
sanitaria nacional o, en su defecto, la
del producto;
denominacin comn internacional de
c) Proyectos de rtulos y etiquetas que
un principio activo recomendada por la
debern contener las siguientes
Organizacin Mundial de la Salud;
inscripciones: nombre del laboratorio,
d) Especialidad medicinal o farmacutica:
direccin del mismo, nombre del
todo medicamento, designado por un
Director tcnico, nombre del producto y
nombre convencional, sea o no una
nombre genrico en igual tamao y
marca de fbrica o comercial, o por el
realce; frmula por unidad de forma
nombre genrico que corresponde a su
farmacutica o porcentual, contenido por
composicin y contenido, preparado y
unidad de venta; fecha de vencimiento,
envasado uniformemente para su
forma de conservacin y condicin de
distribucin o expendio, de composicin
venta, nmero de partida y serie de
cuantitativa definida declarada y
fabricacin; y la leyenda Medicamento
verificable, de forma farmacutica
Autorizado por el Ministerio de salud y
estable y de accin teraputica
accin Social certificado N;
comprobable.
d) Proyecto de prospectos que
CAPTULO II reproducirn: las inscripciones no
variables de los rtulos y etiquetas; la
Registro de medicamentos autorizados accin o acciones farmacolgicas y
Art. 2 la comercializacin de especialidades teraputicas que se atribuyen al producto
medicinales o farmacuticas en el mercado local con indicaciones clnicas precisas y con
advertencias, precauciones y, cuando En el caso de las solicitudes de Registro de
corresponda, de antagonismos, importacin de especialidades medicinales
antidotismos e interacciones elaboradas en los Pases incluidos en el Anexo II al
medicamentosas y de los efectos presente, dicho plazo ser considerado a partir de la
adversos que puedan llegar a verificacin de la planta elaboradora. El rgimen
desencadenar, posologa habitual y dosis del presente artculo ser comprensivo para:
mximas y mnimas, forma de I) Las solicitudes de registro de
administracin, presentaciones; especialidades medicinales a elaborarse
e) En el caso de especialidades medicinales en nuestro pas y aquellas a importarse
o farmacuticas importadas de los Pases de Pases incluidos en el Anexo II que
incluidos en el Anexo II que forma parte resulten similares a otras ya inscriptas en
integrante del presente, adems de la el Registro; y
informacin requerida en los incisos II) Las solicitudes de registro de
precedentes, deber acompaarse un especialidades, medicinales a elaborarse
certificado de la autoridad sanitaria del en nuestro pas, autorizadas para su
pas de origen, emitido de conformidad consumo pblico en al menos uno de los
a la Resolucin W.H.A. 41.18.1988 de Pases que integran el Anexo I del
la Asamblea Mundial de la Salud, o la Decreto N 150/92 aun cuando se tratara
que la sustituya. de una novedad dentro del Registro de la
Asimismo la elaboracin de dichas Autoridad Sanitaria.
especialidades medicinales o farmacuticas debern El plazo de vigencia de la autorizacin, de
ser realizadas en laboratorios farmacuticos cuyas acuerdo al artculo 7 de la Ley N 16.463, podr
plantas resulten aprobadas por Entidades ser prorrogado a su trmino, cuando se otorgara la
Gubernamentales de Pases consignados en el reinscripcin del producto, mediando solicitud del
Anexo I del Decreto N 150/92 o por la Secretara interesado a tal efecto.
de Salud del Ministerio de Salud y Accin Social y Art. 4 Las especialidades medicinales
que cumplan los requisitos de normas de autorizadas para su consumo pblico en el mercado
elaboracin y control de calidad, exigidos por la interno en al menos uno de los Pases que se indican
autoridad sanitaria nacional. La verificacin de las en el Anexo I del presente decreto, podrn
plantas elaboradoras ser efectuada por la Secretara inscribirse para su importacin en el Registro de la
de Salud del Ministerio de Salud y Accin Social autoridad sanitaria nacional. Dicha inscripcin
dentro de los sesenta (60) das de presentada la tendr carcter automtico, debiendo el interesado
solicitud de inscripcin respectiva. Los gastos que presentar la certificacin oficial vigente de dicha
insuman las inspecciones de las plantas sern autorizacin, la documentacin indicada en los
sufragados en su totalidad por la citada Secretara incisos c) y d) del artculo precedente y los datos
con el fondo correspondiente a los aranceles del referidos a la biodisponibilidad.
Registro de Especialidades Medicinales. Los
Los registros efectuados bajo el rgimen de este
medicamentos a importarse desde Pases incluidos
artculo, se otorgarn slo para la importacin y
en el Anexo II al presente debern estar autorizados
comercializacin en el pas, de dichas
y comercializndose en los pases de origen, en
especialidades medicinales.
forma previa a su solicitud de registro o
importacin ante la autoridad sanitaria nacional. La El registro de las especialidades medicinales
integracin de los Pases en la nmina de dicho similares o bioequivalentes a las que se importen
Anexo, no habilitar a terceros pases a solicitar su por el presente artculo y que quieran elaborarse
inclusin dentro del mismo, en virtud de la localmente y comercializarse en el pas, deber
existencia de clusulas de Nacin ms favorecida, efectuarse conforme al rgimen establecido en el
instituida por convenios internacionales suscriptos artculo 3 del presente decreto.
por nuestro pas. Art. 5 Tratndose de solicitudes de
A partir de la presentacin de la solicitud de inscripcin de especialidades que se presenten al
inscripcin, de la especialidad medicinal, el Registro para:
Ministerio de Salud y Accin Social tendr un plazo a) Elaborarse por la industria local y que
de ciento veinte (120) das corridos para expedirse, fueran una novedad en nuestro pas,
con excepcin de los casos encuadrados en los salvo la excepcin prevista en el artculo
regmenes de los artculos 4 y 5 del presente 3 para aquellas especialidades
decreto.
autorizadas en algn/os de los Pases del b) Disponer de locales e instalaciones
Decreto N 150/92; adecuados a la naturaleza de los
b) Importarse de un pas del Anexo II al productos a fabricar o fraccionar;
presente y cuando la especialidad, si c) Disponer de equipos y elementos de
bien autorizada y consumida en el pas prueba normalizados para el ensayo,
de origen, no tuviera similares inscriptas contralor y conservacin de los
en el Registro de la autoridad sanitaria productos;
nacional; d) Asegurar condiciones higinico
c) Importarse siendo productos sanitarias de acuerdo con las
manufacturados en pases no incluidos necesidades y requisitos de los procesos
en el Anexo I del Decreto N 150/92 ni de elaboracin o fraccionamiento;
en el Anexo II del presente y no e) Respecto a las drogas que determine la
estuviesen autorizados para ser reglamentacin del presente, llevar los
consumidos en alguno de los pases del libros de fabricacin, control y egreso y
Anexo I del Decreto N 150/92. protocolos por partida, conservando la
Debern acompaar para su tramitacin la documentacin, y suministrar al
informacin requerida por el artculo 3 y la Ministerio de Salud y Accin Social
documentacin que acredite la eficacia e inocuidad informacin sobre existencias y egresos;
del producto para el uso propuesto. f) Entregar nicamente drogas o
Art. 6 El Ministerio de Salud y Accin medicamentos a personas fsicas o
Social, establecer y publicar: ideales habilitadas para su utilizacin,
tenencia, o expendio al pblico,
a) El listado de medicamentos
tomando en todos los casos los recaudos
genricos autorizados, clasificados
necesarios que justifiquen su destino
farmacolgicamente, con indicacin de sus
formas farmacuticas, contenido o asegurado.
composicin dentro de los cuarenta y cinco Art. 8 El o los titulares de los
(45) das de la publicacin del presente establecimientos y el Director tcnico sern igual y
decreto. solidariamente responsables del cumplimiento de
b) El listado de especialidades los requisitos establecidos en el artculo precedente.
medicinales registradas agrupadas segn el Art. 9 El Director tcnico de los
listado de genricos autorizados dentro de
establecimientos indicados en el presente captulo
los sesenta (60) das de la publicacin del
deber:
presente.
En el caso de medicamentos que sean a) Practicar los ensayos y comprobaciones
una asociacin o combinacin de diversos para determinar la pureza de los
componentes o drogas, el Ministerio de productos y continentes que se utilicen
Salud y Accin Social determinar las en los procesos de elaboracin o
correspondencias con la o las fraccionamiento, siendo responsables de
denominaciones por nombre genrico. su calidad y adecuacin, debiendo
proveer a la eliminacin de los que no
CAPITULO III. renan las cualidades exigibles;
Produccin, elaboracin y fraccionamiento de b) Ensayar los productos elaborados,
drogas y medicamentos siendo responsable de que los mismos se
ajusten a las especificaciones de los
Art. 7 Los establecimientos dedicados a la productos autorizados;
produccin o fraccionamiento de medicamentos y c) Proveer a la adecuada conservacin de
de drogas destinadas a ser utilizadas en la las drogas y de los productos elaborados
preparacin de medicamentos debern: o fraccionados.
a) Funcionar bajo la direccin tcnica de CAPITULO IV.
profesionales universitarios
farmacuticos o qumicos u otros Prescripcin y expendio de medicamentos
profesionales con ttulos habilitantes, Art. 10 Declrase obligatorio el uso de los
segn la naturaleza de los productos. nombres genricos:
a) En todos los textos normativos,
inclusive registros y autorizaciones
relativos a la elaboracin, no renan las cualidades exigibles por la autoridad
fraccionamiento, comercializacin e sanitaria.
importacin de medicamentos; El importador y el Director Tcnico sern igual
b) En rtulos, prospectos o cualquier y solidariamente responsables.
documento utilizado por la industria La importacin de especialidades medicinales
farmacutica para informacin mdica o slo podr efectuarse a travs de la delegacin de la
promocin de las especialidades Capital Federal de la Administracin Nacional de
medicinales; Aduanas. La Secretara de Salud del Ministerio de
c) En las adquisiciones que sean Salud y Accin Social podr autorizar, a tal efecto,
realizadas por o para la Administracin a otras delegaciones del referido Organismo.
Pblica Nacional.
Art. 15 Los importadores podrn reenvasar
d) Los profesionales autorizados a
productos a granel para su expendio y venta
prescribir medicamentos, podrn optar
siempre que la unidad mnima de reempaque
libremente por hacerlo por los nombres respete la hermeticidad del continente de origen. El
genricos o la marca comercial del fraccionamiento deber realizarse en laboratorios
producto. [Vide infra Art. 62 del
con arreglo a las normas vigentes.
Decreto N 177/93].
Art. 16 La importacin de medicamentos
Art. 11 Los centros de expendio de clasificados como psicotrpicos o estupefacientes
medicamentos debern ofrecer al pblico las en la modalidad de acondicionados para su venta al
especialidades medicinales que correspondan a cada
pblico deber cumplir con la Disposicin N 38
nombre genrico prescripto, segn el listado
del 8 de noviembre de 1990 de la exSubsecretara
indicado en el inciso b) del artculo 6, el que
de Administracin de Servicios y Programas de
deber estar a disposicin del pblico indicando los Salud y la Resolucin N 3329/91 del Ministerio de
precios de venta, en lugar visible. Salud y Accin Social.
Art. 12 En los rtulos de los medicamentos
Art. 17 Librase la exportacin de
registrados ante el Ministerio de Salud y Accin
especialidades medicinales y otros de la industria
Social se deber, dentro del plazo de ciento ochenta
farmacutica. Dergase el Decreto N 32.128/44.
(180) das corridos de la publicacin del presente,
incorporar, cuando se comercialicen con nombre de Disposiciones generales
fbrica o comerciales, los nombres genricos en
igual tamao y realce. [Vide infra Art. 4 del Art. 18 Las infracciones al presente decreto y a
Decreto 1890/92]. las normas que se dicten en su consecuencia, sern
sancionadas conforme a lo previsto en la Ley N
Art. 13 Autorzase la venta de 16.463.
medicamentos a granel y en envase de tipo
hospitalario a las farmacias que cuenten con Art. 19 Derganse el Decreto N 908/91 y
laboratorio acreditado ante la autoridad sanitaria, y los artculos 3, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15,
el fraccionamiento por parte de stas para su 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26,
expendio comercial. 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 36, y 40 del
Decreto N 9763/64.
CAPITULO V.
Art. 20 La Secretaria de Salud del
Comercio exterior
Ministerio de Salud y Accin Social ser la
Art. 14 Autorzase a laboratorios, autoridad de aplicacin del presente Decreto. En
drogueras, farmacias, obras sociales con farmacias materia de registro, importacin, exportacin y
propias y a organismos pblicos de salud que los comercializacin, ejercer dicha facultad
soliciten, a importar aquellas especialidades conjuntamente con la Secretaria de Industria y
medicinales o farmacuticas inscriptas en el registro Comercio del Ministerio de Economa y Obras y
de la autoridad sanitaria nacional. Servicios Pblicos, sin perjuicio de las atribuciones
El importador deber contar con laboratorios de propias de la Secretara de Salud en materia del
control de calidad propios debidamente equipados y control y fiscalizacin sanitaria comprendidas en
con un Director Tcnico universitario, farmacutico dichas actividades.
con ttulo habilitante, quien asegurar las
Art. 21 El cumplimiento de los requisitos
condiciones higinico sanitarias, de calidad y
exigidos por el presente decreto ser condicin
acondicionamiento, eliminando los productos que
suficiente para realizar las actividades mencionadas
en el artculo 1 de la Ley N 16.463.
Art. 22 El presente decreto entrar en Reino Unido
vigencia a los treinta das corridos de su publicacin Pases Bajos
en el Boletn Oficial. Durante este perodo las Blgica
autoridades de aplicacin debern proceder a la Dinamarca
reglamentacin de sus aspectos ms relevantes para Espaa
el resguardo de salud de la poblacin y el normal Italia
funcionamiento del mercado.
ANEXO II
Art. 23 Comunquese, publquese, dse a la
Direccin Nacional del Registro Oficial y Commonwelth de Australia
archvese. Estados Unidos de Mxico
Repblica Federativa de Brasil
ANEXO I
Repblica de Cuba
Estados Unidos Repblica de Chile
Japn Repblica de Finlandia
Suecia Repblica de Hungra
Confederacin Helvtica Irlanda
Israel Repblica Popular China
Canad Gran Ducado de Luxemburgo
Austria Reino de Noruega
Alemania Nueva Zelandia.
Francia
RESOLUCIN CONJUNTA (ME Y OSP) N988 Y (MS Y AS) N748
Anexo II
Commonwealth de Australia
Estados Unidos de Mxico
Repblica Federativa de Brasil
Repblica de Cuba
Repblica de Chile
Repblica de Finlandia
Repblica de Hungra
Irlanda
Repblica Popular China
Gran Ducado de Luxemburgo
Reino de Noruega
Nueva Zelanda
DECRETO 1490/92
VISTO el Decreto N 197/02, la Resolucin del Secretario Tcnico y 13 Vocales, todos ellos con
ex Ministerio de Salud y Accin Social N 297/96, carcter "ad honorem". Los vocales sern
Disposicin A.N.M.A.T. N 4793/01, la profesionales de reconocida capacidad y
Disposicin A.N.M.A.T. N 146/02; y experiencia tcnico-cientfica.
Art. 2 Desgnase a los siguientes
CONSIDERANDO: profesionales como miembros de la Comisin
Que con el dictado del Decreto N 197/02 se Permanente de la Farmacopea Argentina:
reemplaz la Comisin Interventora designada por PRESIDENTE: Dr. Manuel R. Limeres
Decreto N 847/00 por un Interventor, con el fin de DIRECTOR EJECUTIVO: Dr. Carlos Chiale
efectuar un reordenamiento estratgico que permita COORDINADOR TECNICO: Dra. Hela
aumentar la efectividad y celeridad en la accin de Beltramini
Gobierno en reas que tienen competencia en el SECRETARIO TECNICO: Dra. Karina A.
contralor y fiscalizacin de productos y substancias Manco
en continuo cambio a consecuencia del desarrollo VOCALES:
tecnolgico. Dr. Pablo Mario Bazerque
Dr. Arnaldo Luis Bandoni
Que por Resolucin N 297/96 el entonces Dra. Mara Teresa Pizzorno
Ministerio de Salud y Accin Social encomend a Dra. Mara Guillermina Volont
esta A.N.M.A.T. la integracin y reactivacin de la Dr. Teodoro S. Kaufman
Comisin de la Farmacopea Argentina. Dr. Mario A. Copello
Que en consecuencia se dict la Disposicin Dr. Rubn Manzo
A.N.M.A.T. N 4793/01 por la cual se Dr. Eloy Mandrile
determinaron las condiciones para el Dr. Modesto Rubio
funcionamiento de la Comisin Permanente de la Dr. Edgardo Poskus
Farmacopea Argentina, designando sus integrantes. Dr. Sem M. Albonico
Dr. Juan M. Dellacha
Que por Disposicin A.N.M.A.T. N 146/02 se
Dr. Norberto A. Terragno
integraron las Subcomisiones de la Comisin
Permanente de la Farmacopea Argentina, y se Art. 3 Los miembros de la Comisin
designaron los coordinadores de cada una de ellas. Permanente de la Farmacopea Argentina sern
designados por un perodo de cinco (5) aos,
Que en atencin a la necesidad de continuar y
pudindose renovar o confirmar sus integrantes por
agilizar la tarea emprendida por la Comisin
un nuevo perodo. Las designaciones se harn por
Permanente de la Farmacopea Argentina, resulta
perodos completos, pero por renuncia o muerte de
imprescindible establecer un cronograma de tareas
uno de sus miembros antes del vencimiento del
para la incorporacin gradual a su texto de los
perodo correspondiente, se designar un nuevo
distintos captulos de temticas indispensables.
miembro por el tiempo que faltare para completar
Que a tales fines deviene conveniente la ste.
reestructuracin de su integracin y reorganizacin
de su funcionamiento. Art. 4 La Comisin Permanente de la
Farmacopea Argentina propondr al Interventor de
Que la Direccin de Asuntos Jurdicos ha la A.N.M.A.T. la formacin de Subcomisiones y
tomado la intervencin de su competencia. sus integrantes dentro del plazo de 30 das contados
Que se acta en virtud de las facultades a partir de la 1 convocatoria. Asimismo podr
conferidas por el Decreto N 1.490/02 y el Decreto solicitar al Interventor de la A.N.M.A.T. la
N 197/02. asignacin de los empleados administrativos que
Por ello, el interventos de la Administracin resulten necesarios para el cumplimiento de sus
Nacional de Medicamentos, Alimentos y funciones.
Tecnologa Mdica Art. 5 El Presidente de la Comisin
DISPONE: Permanente de la Farmacopea Argentina podr
conformar con carcter ad honorem un Comit
Art. 1 Intgrese la Comisin Permanente de Consultor Externo, que estar integrado por
la Farmacopea Argentina con los siguientes representantes de instituciones educacionales,
miembros: un Presidente, un Director Ejecutivo, un profesionales, industriales y cientficas cuya
Secretario Ejecutivo, Coordinacin Tcnica, un
participacin se considere relevante por su b) Efectuar, teniendo en cuenta el dictamen
trayectoria cientfico-tcnica en las temticas de las respectivas subcomisiones, la
relacionadas con la farmacopea. Las instituciones propuesta del contenido tcnico de la
convocadas debern designar su representante. Farmacopea y de las publicaciones
autorizadas que de ella dependan.
Art. 6 Sern atribuciones de la Comisin
Permanente de la Farmacopea Argentina: Art. 7 Dergase la Disposicin A.N.M.A.T.
N 4793/01 y la Disposicin A.N.M.A.T.
a) Redactar y someter a la autorizacin de
esta Intervencin su propio Reglamento N 146/02.
Interno, debiendo determinar la Art. 8 Comunquese a quienes corresponda.
periodicidad y el "qurum" necesario Publquese en el Boletn Informativo. Dse a la
para sesionar y el rgimen de mayora Direccin Nacional del Registro Oficial para su
para aprobar sus dictmenes. publicacin. Oportunamente, archvese.
DISPOSICION N 1.892/02
l
* Cabe aclarar que las normas transcriptas en la presente recopilacin de textos legales, constituyen el marco
jurdico general, no agotando la totalidad del plexo normativo vigente en la materia en nuestro pas.
CONSIDERACIONES GENERALES
FARMACOPEA ARGENTINA SPTIMA EDICIN
CONSIDERACIONES
GENERALES
La Farmacopea es el texto oficial que codifica Para evitar repetir instrucciones comunes a un
los principios activos, excipientes y productos ensayo determinado, en las monografas, se
farmacuticos y contiene las especificaciones que establecen los requisitos en forma abreviada,
stos deben cumplir para demostrar su calidad y indicando el nombre del captulo correspondiente
resguardar la salud de la poblacin. con un nmero de orden asignado entre los
smbolos <y>, como por ej. <100>. Cromatografa,
Generalidades que luego es apropiadamente desarrollado en la
La Farmacopea Argentina en su Sptima seccin Mtodos Generales de Anlisis.
Edicin, a diferencia de las anteriores, est Todas las declaraciones contenidas en las
compuesta por cuatro volmenes, cada uno de los monografas, con las excepciones dadas ms
cuales se publicar anualmente, siendo oficial el adelante, constituyen normas para las sustancias
primero a partir del ao 2003. El ttulo de la obra oficiales. Una sustancia es de calidad Farmacopea
puede abreviarse como FA 7 y reemplaza a las Argentina cuando cumple con todos los requisitos
ediciones anteriores. Cuando se emplea la sigla FA, establecidos en la monografa respectiva.
sin ningn otro agregado, la misma se refiere a la Los requisitos establecidos en las monografas
FA 7 durante el tiempo que esta Farmacopea no son suficientes para asegurar la ausencia de
permanezca en vigencia. Estas consideraciones todas las impurezas posibles. Los ensayos elegidos
generales se aplicarn a las monografas, captulos se han ideado para detectar o determinar las
generales u otros textos incluidos en esta impurezas ms significativas y para fijar el
Farmacopea. contenido lmite de aqullas. Queda a criterio del
La expresin Oficial significa de la analista efectuar ensayos Adicionales a los
Farmacopea Argentina y se refiere a cualquier indicados en las respectivas monografas para
ttulo, sustancia, preparacin o ensayo incluido en detectar otras impurezas no consideradas.
las monografas y captulos.
Las iniciales FA, acompaando al nombre Definiciones
oficial en el rtulo de un producto, indica que el Medicamento: toda preparacin o producto
mismo cumple con las especificaciones de la farmacutico empleado para la prevencin,
Farmacopea Argentina, aunque esto no constituye diagnstico y/o tratamiento de una enfermedad o
una certificacin por parte de la misma. estado patolgico, o para modificar sistemas
El uso del ttulo de una monografa supone que fisiolgicos en beneficio de la persona a quien se le
la sustancia, preparacin o producto as designado administra.
se ajusta a las especificaciones de la monografa Principio activo o droga farmacutica: toda
correspondiente. Tales referencias en los textos de sustancia qumica o mezcla de sustancias
la Farmacopea se indican mediante el ttulo de la relacionadas, de origen natural o sinttico, que
monografa en letra cursiva. poseyendo un efecto farmacolgico especfico, se
Tanto las monografas como los captulos emplea en medicina humana.
generales pueden contener excepciones a estas Especialidad medicinal o farmacutica: todo
Consideraciones Generales, las mismas sern medicamento, designado por un nombre
sealadas explcitamente, al igual que el convencional, sea o no una marca de fbrica o
procedimiento a seguir en cada caso. Para destacar comercial, o por el nombre genrico que
la existencia de excepciones, se agregar la corresponda a su composicin y contenido,
expresin: A menos que se especifique de otro preparado y envasado uniformemente para su
modo. Asimismo, en caso de ausencia de una distribucin y expendio, de composicin
excepcin explcita, las expresiones debern cuantitativa definida declarada y verificable, de
interpretarse como se indica en este documento. forma farmacutica estable y accin teraputica
Los ensayos y valoraciones descriptos son los comprobable.
mtodos oficiales sobre los cuales se fundamentan Nombre genrico: denominacin de un principio
las especificaciones de la Farmacopea. activo o droga farmacutica o, cuando corresponda,
de una asociacin o combinacin de principios
activos a dosis fijas, adoptada por la Autoridad del valorante corresponde al nmero de cifras
Sanitaria Nacional o, en su defecto, la significativas en el peso de la sustancia analizada.
denominacin comn internacional de un principio Se debern hacer las correcciones con respecto al
activo recomendada por la Organizacin Mundial blanco para todas las valoraciones volumtricas
de la Salud. segn corresponda (ver 780. Volumetra).
Excipiente: es toda sustancia de origen natural o Cuando el resultado deba calcularse con
sinttica presente en una preparacin farmacutica referencia a la sustancia seca, se har uso de las
incorporada sin propsito teraputico. condiciones de secado que se indiquen en el ensayo
Producto farmacutico: es un preparado que Prdida por secado en la monografa. Cuando el
contiene uno o varios principios activos y resultado se calcule con referencia a la sustancia
excipientes, formulados bajo una determinada anhidra, el contenido de agua ser determinado por
forma farmacutica. Suele emplearse preparacin el mtodo descripto en la monografa bajo el
farmacutica como sinnimo de producto subttulo Agua.
farmacutico, para referirse tanto al producto a
granel como al producto terminado. Agua
La expresin agua, empleada sin otra
Interpretacin de los requisitos
calificacin significa Agua purificada y Agua libre
Las normas farmacopeicas definen las
de dixido de carbono, es Agua purificada que ha
caractersticas de un producto y establecen los
sido calentada a ebullicin durante al menos
ensayos que permiten demostrar que el mismo
5 minutos y enfriada en forma tal de evitar la
satisface los requisitos elementales de calidad,
absorcin de dixido de carbono atmosfrico.
exigidos por la Autoridad Sanitaria.
Estas normas se aplican en cualquier momento Agua purificada estril - Es el Agua purificada
de la vida til del producto, desde la elaboracin esterilizada. Se emplea en la preparacin de formas
hasta su fecha de vencimiento. farmacuticas lquidas no parenterales en las que se
No debe entenderse que el cumplimiento de las requiera una forma estril de Agua purificada.
especificaciones establecidas en la monografa a Agua para inyectables - La fuente de agua es
muestras de un lote de produccin asegure el agua potable, previamente purificada y sometida a
cumplimiento de las normas farmacopeicas de todos destilacin u smosis inversa. Debe cumplir con
los componentes del lote. todos los requisitos de Agua purificada y, adems,
Los datos obtenidos a partir de estudios de los requisitos para el ensayo de endotoxinas
validacin del proceso de fabricacin y de controles bacterianas (ver 330. Ensayo de endotoxinas
efectuados durante el proceso pueden dar mayores bacterianas).
garantas del cumplimiento de los requisitos de una
monografa en particular, que la informacin Agua estril para inyectables - Es Agua para
obtenida a partir del examen de un nmero inyectables esterilizada. Se emplea principalmente
determinado de unidades de ese lote. como solvente de productos parenterales.
Las tolerancias y lmites expresados en las Agua bacteriosttica para inyectables - Es Agua
definiciones de las monografas son para compensar estril para inyectables a la cual se le ha agregado
las variaciones inevitables durante la preparacin uno o varios conservantes apropiados. Se utiliza
del producto y el deterioro normal que se produce como solvente de preparados parenterales. Puede
durante la vida til del mismo. envasarse en envases monodosis o multidosis de un
Cuando se expresan lmites en forma numrica, tamao no mayor a 30 ml.
los lmites superior e inferior de un intervalo
incluyen esos dos valores y todos los valores Agua estril para irrigacin - Es Agua para
intermedios. Los lmites expresados en las inyectables esterilizada en envases monodosis de
definiciones de las monografas y en las ms de 1 litro destinados a una rpida descarga del
especificaciones de los ensayos, contenido. No necesita cumplir con el ensayo
independientemente de que stos estn expresados <650>. Particular en inyectables.
en porcentajes o valores absolutos, son valores Agua estril para inhalacin - Es Agua para
significativos hasta el ltimo dgito. inyectables envasada en envases monodosis no
En los procedimientos volumtricos, se mayores a 20 ml y esterilizada. Se emplea en
establece el peso de la sustancia analizada que nebulizadores y en la preparacin de soluciones
equivale a cada mililitro del valorante para nebulizar.
estandarizado. En estos casos, se entiende que el
Solucin fisiolgica
nmero de cifras significativas en la concentracin
Cuando en las monografas o captulos exclusivamente para dar color. Debern satisfacer
generales se indique Solucin fisiolgica emplear las especificaciones establecidas (ver 50.
una solucin de cloruro de sodio al 0,9% en agua Colorantes de uso farmacutico).
purificada. Conservantes: son sustancias auxiliares que se
Solucin fisiolgica estril - Es una solucin de agregan a las preparaciones oficiales para
cloruro de sodio al 0,9% en agua para inyectables protegerlas de la contaminacin microbiana. La
que cumple con los requisitos de <370>. Ensayo de expresin conservante antimicrobiano apropiado
Esterilidad. implica que puede agregarse al preparado una
sustancia auxiliar, siempre que cumplan con las
Solucin fisiolgica para nebulizar - Es una especificaciones establecidas (ver 80.
solucin de cloruro de sodio al 0,90 % en agua Conservantes).
purificada preparada sin el agregado de
conservantes, conservada en envases monodosis de Reactivos
hasta 20 ml, con ausencia de grmenes La realizacin correcta de ensayos y
revivificables en un mililitro y en cuyo rtulo se valoraciones de esta Farmacopea, as como la
indica "Solucin fisiolgica para nebulizar. No obtencin de resultados reproducibles y confiables,
inyectable". depende de la calidad de los reactivos empleados.
Expresin de concentraciones Todos los reactivos requeridos para los ensayos
Los porcentajes de concentracin se expresan de y valoraciones se definen en Reactivos y
la siguiente manera: Soluciones.
Porcentaje peso en peso (% p/p): expresa el
nmero de gramos de un soluto en 100 g de Abreviaturas
solucin o mezcla. La sigla SR-FA corresponde a Sustancia de
Porcentaje peso en volumen (% p/v): expresa el referencia de la FA.
nmero de gramos de un soluto en 100 ml de Las siglas (SC) y (SR) corresponden a Solucin
solucin, y se utiliza prescindiendo de que el Colorimtrica y Solucin de Reactivo,
diluyente en cuestin sea agua u otro lquido. respectivamente indicadas en Reactivos y
Porcentaje volumen en volumen (% v/v): ex- Soluciones.
presa el nmero de mililitros de un soluto en 100 ml La sigla (SV) corresponde a Solucin
de solucin. Volumtrica e indica que tal solucin est
La expresin porcentaje empleada sin otro estandarizada de acuerdo con las instrucciones
calificativo significa: porcentaje peso en peso para dadas en la monografa respectiva o bajo el ttulo
mezclas de slidos y semislidos, porcentaje peso Soluciones volumtricas en Reactivos y Soluciones.
en volumen para soluciones o suspensiones de
slidos en lquidos, porcentaje volumen en volumen MONOGRAFAS
para soluciones de lquidos en lquidos y porcentaje Frmula Qumica
peso en volumen para soluciones de gases en Cuando se conoce la composicin qumica de
lquidos. una sustancia oficial, se especifica a ttulo
informativo la frmula molecular y desarrollada, el
Sustancias auxiliares peso molecular y el nmero CAS (Chemical
Se denomina Sustancia auxiliar a cualquier Abstracts Service). Esta informacin se refiere a la
sustancia incorporada a las preparaciones oficiales, sustancia qumicamente pura y no se considera un
tales como colorantes, conservantes saborizantes. indicador de la pureza del material oficial.
La misma deber ser inocua o agregada en una Cuando se especifica la configuracin
proporcin que garantice la inocuidad, no tener estereoqumica absoluta, se emplean los sistemas de
influencia adversa sobre la seguridad y eficacia designacin propuestos por la Unin Internacional
teraputica de los principios activos y no interferir de Qumica Pura y Aplicada (IUPAC) R/S y E/Z.
en los ensayos y valoraciones. El nombre qumico ser otorgado segn las
Sustancia oficial es aquella que no contiene reglas propuestas por la Unin Internacional de
sustancias auxiliares agregadas salvo que se permita Qumica Pura y Aplicada (IUPAC).
especficamente en la monografa correspondiente.
En este caso, el rtulo deber indicar los nombres y Caracteres Generales
las cantidades de las sustancias auxiliares Las afirmaciones comprendidas bajo el subttulo
agregadas. Caracteres generales referidas a trminos como
Colorantes: son sustancias auxiliares inodoro, prcticamente inodoro, con un dbil olor
incorporadas a las preparaciones oficiales caracterstico o expresiones semejantes, se aplican
al examen despus de la exposicin al aire durante Solubilidad
15 minutos de un envase recientemente abierto del El trmino parcialmente soluble se emplea en el
producto (envases que contengan no ms de 25 g) o caso de una mezcla en la que slo una parte de sus
de una porcin de aproximadamente 25 g del componentes se disuelve. El trmino miscible se
producto (en caso de envases ms grandes) que emplea para describir un lquido que es miscible en
haya sido trasladada de su envase a un cristalizador, todas las proporciones con el solvente indicado.
con una capacidad de aproximadamente 100 ml. Las indicaciones de solubilidad que figuran bajo
el epgrafe Caracteres generales se expresan en
trminos cuyo significado, referido a una
temperatura entre 15 y 30 qC, es el siguiente:
Cantidad Unidad
Nombre Smbolo Nombre Smbolo
Longitud l metro M
Masa m kilogramo Kg
Tiempo t segundo S
Corriente elctrica I amperio A
Temperatura termodinmica T kelvin K
Cantidad de sustancia n mol Mol
Intensidad luminosa Iv candela Cd
Unidades utilizadas con el SI
Cantidad Unidad Valor en unidades SI
Nombre Smbolo
Minuto min 1 min = 60 s
Tiempo Hora h 1 h = 60 min = 3.600 s
Da d 1d = 24 h = 86.400 s
ngulo plano Grado 1 = (S/180) rad
Volumen Litro l 1 l = 1 dm3 = 10-3 m3
Masa Tonelada t 1 t = 103 kg
Frecuencia de giro revolucin por minuto rpm 1 rpm = (1/60) s-1
Tabla 1.
Tcnica Propiedad medida
CTB flujo de calor, cambio de energa
ATD diferencia de temperaturas
ATG masa, peso
ATM deformacin
La informacin dada por las diferentes tcnicas se resume en la Tabla 2, excepto para el Anlisis Trmico
Diferencial, cuyas aplicaciones varan segn las caractersticas de los aparatos.
Tabla 2.
Informacin CDB ATG ATM
Capacidad calorfica especfica SI
Coeficiente lineal de expansin SI
Comportamiento viscoelstico SI
Temperatura de fusin SI
Calor de fusin, cristalinidad SI SI
Evolucin de la fusin, fraccin lquida SI
Identificacin y pureza de cristales (material no
SI SI
polimrico)
Evaporacin, sublimacin, desorcin SI SI
Polimorfismo SI SI
Pseudopolimorfismo SI SI
Mesofases en cristales lquidos SI
Transiciones vtreas, suavizado SI
Descomposicin trmica, pirlisis,
SI SI SI
despolimerizacin, estabilidad trmica
Estabilidad/descomposicin oxidativa SI SI SI
Compatibilidad de sustancias entre s y de
SI
sustancias con el material de empaque
Polimerizacin, curado SI SI
Cintica de reaccin SI SI
Es necesario incluir en cada registro trmico del gas empleado, presin del sistema, programa
una descripcin completa de las condiciones de temperaturas y sensibilidad de las
empleadas, entre las que se encuentran: marca y determinaciones.
modelo del aparato, registro de la ltima
Calorimetra diferencial de Barrido (CDB)
calibracin, tamao e identificacin de la muestra,
Este anlisis mide la absorcin o
material, capacidad y estado del crisol empleado desprendimiento de calor producida durante el
para contener la muestra, composicin y caudal calentamiento o enfriamiento de una muestra
(procesos dinmicos), o durante el mantenimiento en la cual T f la temperatura de la muestra en el
de la misma a una temperatura fija (proceso proceso de fusin, en K, durante el equilibrio
isotrmico), detectando cualquier fenmeno entre los cristales slidos del componente
(transiciones fsicas o reacciones qumicas) principal y la fase lquida, T 0 es la temperatura de
acompaado por una entalpa. El calentamiento fusin, en K, del componente principal puro, x 2 es
se produce en un horno provisto de un sensor la fraccin molar del componente minoritario
altamente sensible, que permite medir la (impureza) en la fase lquida, durante el proceso
diferencia entre los flujos de calor de la muestra y de fusin, 'H f es el calor molar de fusin del
un crisol de referencia. componente principal y R es la constante de los
Anlisis de impurezas eutcticas - gases (R = 8,134 J/K mol).
La fusin de un compuesto cristalino puro Analizando el proceso de calentamiento de
debe producirse dentro de un intervalo de una muestra con impurezas eutcticas, a travs de
temperatura muy reducido. La presencia de un diagrama de fases, se observa que el total de la
impurezas eutcticas produce una expansin del impureza funde a la temperatura eutctica, por
intervalo de fusin de las mismas. Este fenmeno arriba de la cual la fase slida consiste slo en el
puede verificarse a travs de los registros trmicos componente principal puro. En tanto la
de muestras con diferentes porcentajes de temperatura se aproxima al punto de fusin T f , la
impurezas, en los cuales el intervalo de fusin se fraccin molar de la impureza en la fase lquida x 2
ampla a medida que aumenta la concentracin de disminuye constantemente ya que el componente
stas, disminuyendo a su vez la temperatura del principal puro se disuelve en la solucin eutctica
pico de fusin. Un material con 99% de pureza durante este intervalo, verificndose la ecuacin
funde aproximadamente en un 20% a una (2):
temperatura 3C por debajo del punto de fusin
del material puro. El fundamento de la 1
determinacin de pureza de una sustancia se basa
x2 x0
(2)
F
en el mencionado fenmeno, que relaciona la
disminucin del punto de fusin con la cantidad en la cual x 2 es la fraccin molar de la impureza
de impurezas presentes en la misma. en la fase lquida en cualquier punto de equilibrio
Las caractersticas de las impurezas eutcticas durante el proceso de fusin, x 2 * es la fraccin
es que son solubles en la fase lquida formada molar de la impureza en la fase lquida de la
durante la fusin, pero no lo son en la fase slida sustancia completamente fundida o en la sustancia
del componente principal. Son necesarias original y F es la fraccin fundida.
semejanzas qumicas para que se produzca la En la ecuacin (2) se observa que la
solubilidad en el material fundido. Las impurezas concentracin de la impureza en la fase lquida, a
de sntesis generalmente son similares al producto cualquier temperatura de equilibrio durante la
final y no presentan problemas de solubilidad en fusin, es inversamente proporcional a la fraccin
el material fundido. fundida a esa temperatura.
La evaluacin de la curva de fusin por En la temperatura de fusin, T f , F es igual a 1,
Calorimetra Diferencial de Barrido, a travs de la y x 2 es iguala x 2 .*.
ley de Vant Hoff sobre la depresin del punto de La combinacin de las ecuaciones (1) y (2) da
fusin de sistemas eutcticos, en su forma origen a la ecuacin (3):
simplificada [ver ecuacin (1)], permite obtener
los parmetros de fusin (temperatura, intervalo y
calor de fusin, y clculo de la pureza eutctica) x2
RT02 1
Tf T0 (3)
con muestras del orden del miligramo. La 'H f F
simplificacin es apropiada, considerando que la
expansin del intervalo de fusin es pequea
cuando la concentracin de impurezas es baja. Segn esta funcin, el grfico de las
Se obtiene as la siguiente relacin entre la temperaturas de equilibrio T f de la muestra
fraccin molar de la impureza y la disminucin durante la fusin, en funcin de la inversa de la
del punto de fusin: fraccin fundida 1/F, es una lnea recta cuya
pendiente es igual a la disminucin del punto de
fusin. El punto de fusin terico de la sustancia
RT02
Tf T0 x2 (1) pura se obtiene mediante la extrapolacin a 1/F
'H f igual a cero. Las desviaciones de la linealidad de
esta recta son corregidas a travs de factores que agua est presente no slo en su superficie como
modifican los valores de 'H f obtenidos. humedad, sino tambin en el cristal. Esta
En esta expresin se observa que la propiedad, conocida como pseudopolimorfismo,
disminucin del punto de fusin es directamente puede conducir a complejos procesos de fusin.
proporcional a la fraccin molar de la impureza. Generalmente, la prdida de solvente
Estas evaluaciones se aplican con exactitud adsorbido en la superficie puede distinguirse de la
cuando las impurezas no exceden el 2% en moles. prdida de solvente ocluido en el cristal y de las
Las impurezas no eutcticas no son evaluables prdidas de masa producidas por descomposicin
a travs de CDB. Consisten en molculas que de la sustancia.
presentan la misma forma, tamao y carcter que Las mediciones se llevan a cabo bajo reflujo
el componente principal y se acomodan en la programado de un gas apropiado. El contenido
matriz del cristal del componente principal sin porcentual de prdida, G, se calcula por la frmula
modificacin de su estructura, situacin. siguiente:
favorecida en cristales menos ordenados, cuyos
valores de fusin son ms bajos. En tales casos, G (% de prdida) = 100 'm/m 0
las estimaciones de pureza arrojan valores ms
altos que los reales. Su efecto puede ser incluso el en la cual 'm es la prdida de masa y m 0 es el
de aumentar el punto de fusin. Ejemplos de peso inicial de la muestra.
impurezas no eutcticas son los cristales mixtos y Dado que el Anlisis Termogravimtrico no
las soluciones slidas. identifica especficamente los productos de
A las sustancias que presentan estados reaccin, pueden analizarse los gases
polimrficos no se les determina la pureza, a desprendidos con metodologas apropiadas.
menos que se conviertan completamente en una Tambin se emplea para la caracterizacin de
de las modificaciones estables durante la fusin. sustancias la combinacin de CDB y ATG.
Por otro lado, la CDB y el ATD son Aparato - Consta de una microbalanza
intrnsecamente tiles para detectar y controlar el asociada a una fuente de calor programable. Los
polimorfismo. aparatos difieren, principalmente, en el intervalo
El anlisis de pureza no debe aplicarse a de masas aceptable para las muestras a analizar y
muestras que funden presentando la forma de deteccin de la temperatura de la
simultneamente fenmenos de evaporacin y/o muestra. Deben realizarse calibraciones
descomposicin. peridicas de las determinaciones de masa,
Anlisis Trmico Diferencial (ATD) mediante el empleo de pesas patrn y de la escala
de temperatura, empleando Sustancias de
Este anlisis mide la diferencia de temperatura referencia apropiadas.
entre la muestra en ensayo y una referencia inerte,
ambas calentadas bajo las mismas condiciones, Anlisis Termomecnico (ATM)
mientras que la CDB permite cuantificar las Este anlisis mide los cambios dimensionales
absorciones y desprendimiento de calor. de una muestra bajo la accin de pequeas cargas
Actualmente, de los anlisis de ATD tambin (modo dilatomtrico), en funcin de la
pueden obtenerse resultados calorimtricos temperatura o el tiempo. Adems de la deteccin
cuantificables. de las transiciones vtreas, es importante el clculo
Anlisis termogravimtrico (ATG) de los parmetros Coeficiente local de expansin,
Conversin y Coeficiente medio de expansin.
Este anlisis registra el peso de la muestra en
funcin de la temperatura o del tiempo de
calentamiento, mediante el empleo de una
termobalanza. Incluye programas de
calentamiento dinmico o de temperatura fija
(proceso isotrmico). Suministra ms
informacin que la prdida por secado a una
temperatura determinada, ya que detecta las
temperaturas a las que se desprenden las
sustancias voltiles retenidas, adems de
cuantificar los respectivos desprendimientos.
Muchas sustancias tienen la capacidad de
formar hidratos y/o solvatos. En los primeros, el
30. CAPACIDAD NEUTRALIZANTE DE CIDO
Este ensayo se emplea para la determinacin de un volumen total de aproximadamente 70 ml y
la capacidad neutralizante de cido de aquellos mezclar en el Agitador magntico durante 1 minuto.
medicamentos destinados a controlar los efectos de Comprimidos - Pesar no menos de veinte
la acidez gstrica. [NOTA: todos los ensayos se comprimidos y determinar el peso promedio. Moler
realizan a 37 3 C]. los comprimidos a polvo fino, mezclar hasta
Calibracin del medidor de pH - Calibrar un obtener una mezcla uniforme y transferir una
medidor de pH empleando solucin reguladora para cantidad exactamente pesada del polvo, equivalente
calibracin de biftalato de potasio 0,05 M y a la dosis mnima indicada en el rtulo, a un vaso de
solucin reguladora para calibracin de tetraoxalato precipitados de 250 ml. Si se desea, se puede
de potasio 0,05 M segn se indica en humedecer el polvo agregando no ms de 5 ml de
<250>. Determinacin del pH. alcohol (neutralizado a un pH aparente de 3,5) y
mezclar hasta humectar completamente. Agregar
Agitador magntico - Transferir 100 ml de 70 ml de agua y mezclar en el Agitador magntico
agua a un vaso de precipitados de 250 ml que durante 1 minuto.
contiene una barra de agitacin magntica de Cpsulas - Pesar exactamente no menos de
40 mm u 10 mm, recubierta con perfluorocarbono veinte cpsulas. Retirar completamente el
slido y que tiene un anillo en su centro. Ajustar la contenido de cada cpsula, con la ayuda de un
velocidad de agitacin a 300 30 rpm cuando la hisopo de algodn si fuera necesario. Pesar
barra se centra en el vaso, empleando un tacmetro exactamente las cpsulas vacas y determinar el
ptico apropiado. peso promedio del contenido. Mezclar el polvo
Preparacin muestra - extrado de las cpsulas hasta obtener una mezcla
Polvos - Transferir una porcin exactamente uniforme y proceder segn se indica en
pesada de la muestra, especificada en la monografa Comprimidos, comenzando donde dice "transferir
correspondiente, a un vaso de precipitados de una cantidad exactamente pesada...".
250 ml, agregar 70 ml de agua y mezclar en el Procedimiento - Transferir 30,0 ml de cido
Agitador magntico durante 1 minuto. clorhdrico 1,0 N (SV) a la Preparacin muestra
Slidos efervescentes - Transferir una cantidad correspondiente mientras se agita continuamente
exactamente pesada, equivalente a la dosis mnima con un Agitador magntico. [NOTA: cuando la
indicada en el rtulo, a un vaso de precipitados de capacidad neutralizante de cido de la muestra
250 ml, agregar 10 ml de agua y agitar rotando ensayada es mayor de 25 mEq, emplear 60,0 ml de
suavemente el vaso de precipitados hasta que la cido clorhdrico 1,0 N (SV)]. Agitar durante
efervescencia termine. Agregar otros 10 ml de agua 15 minutos exactamente medidos luego de la
y agitar por rotacin. Lavar las paredes del vaso adicin del cido, y en un perodo que no exceda
con 50 ml de agua y mezclar en el Agitador los 5 minutos adicionales, titular el cido
magntico durante 1 minuto. clorhdrico en exceso con hidrxido de sodio
Suspensiones y otras formas lquidas - 0,5 N (SV) hasta obtener un pH estable de 3,5
Homogeneizar el contenido del envase y determinar (durante 10 a 15 segundos). Calcular el nmero de
la densidad. Transferir una cantidad exactamente mEq de cido consumido y expresar el resultado en
pesada de la mezcla Homognea, equivalente a la trminos de miliequivalentes de cido consumido
dosis mnima indicada en el rtulo, a un vaso de por gramos de la sustancia ensayada. Cada mililitro
precipitados de 250 ml, agregar agua hasta obtener de cido clorhdrico 1,0 N equivale a 1 mEq de
cido consumido.
40. CARBONO ORGNICO TOTAL
Este ensayo se emplea para determinar la es de 0,806 mg por litro). El sistema de separacin
cantidad de carbono que forma parte de los de dixido de carbono elimina el agua formada en
compuestos orgnicos presentes en el agua. el proceso de descomposicin o separa dixido de
Normalmente, el carbono orgnico es oxidado a carbono de los productos de descomposicin y
dixido de carbono por combustin, por radiacin dems componentes de la muestra. Para detectar
ultravioleta o por la adicin de agentes oxidantes. dixido de carbono se emplea un analizador
La cantidad de dixido de carbono generada en el infrarrojo de gases y un medidor de conductividad o
proceso de descomposicin es medida empleando de resistencia elctrica, los cuales son capaces de
un mtodo apropiado, como por ej., por medio de convertir la concentracin de dixido de carbono en
un analizador infrarrojo de gases, por medicin de una seal elctrica cuantificable. El procesador de
la conductividad elctrica o de la resistividad. La datos calcula la concentracin de carbono orgnico
cantidad de carbono orgnico presente en el agua total en la muestra, basndose en la seal elctrica
puede calcularse a partir de la cantidad de dixido originada por el detector.
de carbono medida por los mtodos mencionados
Reactivos y soluciones estndar - [NOTA:
anteriormente.
alternativamente a los reactivos y soluciones
El carbono presente en el agua puede tener dos
descriptos a continuacin, pueden emplearse
orgenes: carbono orgnico y carbono inorgnico.
aquellos suministrados o recomendados por el
La cantidad de carbono orgnico se mide por dos
fabricante del aparato].
mtodos: uno se basa en medir la cantidad de
Agua para realizar mediciones - Se emplea
carbono total en el agua, a la cual finalmente se le
para preparar las soluciones estndar, las soluciones
resta la cantidad de carbono inorgnico; el otro se
del reactivo oxidante o para lavar el equipo. La
basa en extraer el carbono inorgnico del agua a
cantidad de carbono orgnico, cuando se recolecta
ensayar, quedando finalmente una cantidad
dentro del envase de muestra, no debe ser mayor de
remanente de carbono que representa el carbono
0,250 mg por litro.
orgnico.
Solucin estndar de biftalato de potasio - La
Aparato - Consta de un inyector para la concentracin de esta solucin es determinada
muestra, un dispositivo de descomposicin, un segn las especificaciones del fabricante del
sistema de separacin del dixido de carbono, un aparato. Secar el biftalato de potasio a 105 C
detector y un procesador de datos o un registrador. durante 4 horas y dejar enfriar en un desecador con
Debe calibrarse segn las instrucciones del gel de slice. Pesar exactamente la cantidad
fabricante y debe ser capaz de medir cantidades de especificada de biftalato de potsio seco y disolver
carbono orgnico por debajo de 0,050 mg por litro. en Agua para realizar mediciones.
El inyector est destinado a permitir la Solucin estndar para medir carbono
inyeccin de una cantidad especfica de muestra por inorgnico - La concentracin de esta solucin es
medio de una microjeringa u otro dispositivo de determinada segn las indicaciones del fabricante
muestreo. El dispositivo de descomposicin, del aparato. Secar bicarbonato de sodio en un
empleado para la combustin, consta de un tubo de desecador con cido sulfrico durante no menos de
combustin y un horno elctrico para calentar la 18 horas. Secar, separadamente, carbonato de sodio
muestra. Ambos dispositivos se ajustan para operar entre 500 y 600 C durante 30 minutos y dejarlo
a temperaturas especficas. El dispositivo de enfriar en un desecador con gel de slice. Pesar
descomposicin para radiacin ultravioleta o para la exactamente las cantidades especificadas de los
adicin de agentes oxidantes puede constar, tanto de compuestos de modo que la relacin de su
un compartimiento para la reaccin de oxidacin y contenido de carbono sea (1:1) y disolver en Agua
una lmpara de rayos ultravioleta, o bien de la para realizar mediciones.
combinacin de una lmpara ultravioleta con un Reactivo oxidante - Disolver la cantidad
inyector para el reactivo oxidante o de la especificada de persulfato de potasio u otra
combinacin de un sistema de calentamiento con un sustancia que se pueda emplear con el mismo
inyector para el reactivo oxidante. El dispositivo de propsito, en Agua para realizar mediciones, para
descomposicin para ambos mtodos, cuando se lograr la concentracin sugerida para el aparato.
emplea una solucin de dodecilbencenosulfonato de Gas para eliminar el carbono inorgnico o gas
sodio como muestra, debe generar no menos de transportador - Si fuera necesario, emplear para
0,450 mg por litro de carbono orgnico (el valor dicho propsito nitrgeno, oxgeno u otros gases.
terico del carbono orgnico total en esta solucin
Acido para eliminar el carbono inorgnico - ensayo establecidos por el fabricante del aparato,
Acido clorhdrico diluido, cido fosfrico o inyectar en el dispositivo de inyeccin un volumen
cualquier otro cido que se pueda emplear para de muestra apropiado en relacin con la cantidad de
dicho propsito, en suficiente cantidad de Agua carbono a determinar y descomponer la muestra.
para realizar mediciones, para obtener la Detectar el dixido de carbono generado por medio
concentracin especificada por el fabricante del del detector y calcular la cantidad de carbono
aparato. orgnico, empleando un procesador de datos o un
Procedimiento - Emplear el mtodo, analtico registrador.
apropiado segn el aparato. Sumergir el recipiente Para el caso de los aparatos que directamente
para la muestra, antes de ser empleado en una extraen el carbono inorgnico, inyectar primero en
mezcla de perxido de hidrgeno al 30 % y cido el dispositivo de inyeccin un volumen de muestra
ntrico diluido (1:1), lavando finalmente con Agua apropiado en relacin con la cantidad de carbono a
para realizar mediciones. Lavar la microjeringa determinar, de acuerdo con los procedimientos del
con una mezcla constituida por una solucin de ensayo establecidos por el fabricante del aparato.
hidrxido de sodio (1 en 20) y etanol anhidro (1:1) Extraer de la muestra el carbono inorgnico por
o cido clorhdrico diluido (1 en 4), lavando adicin de cido para eliminar el carbono
finalmente con Agua para realizar mediciones. inorgnico en el dispositivo de descomposicin y
Calibrar el aparato con la Solucin estndar de burbujear con Gas transportador para eliminar el
biftalato de potasio o la recomendada por el carbono inorgnico.
fabricante del aparato, emplear el procedimiento Descomponer el carbono orgnico, detectar el
sugerido por el fabricante. dixido de carbono generado y calcular la cantidad
Es recomendable que el aparato se instale en la de carbono orgnico, empleando un procesador de
lnea de produccin del agua a ensayar. De no ser datos o un registrador.
as, llevar a cabo este ensayo en un rea libre de
solventes orgnico u otras sustancias que afecten el
resultado del ensayo. Realizar las mediciones
inmediatamente despus de la recoleccin de la
muestra.
MEDICIN DEL CARBONO ORGNICO
POR SUSTRACCIN DEL CARBONO
INORGNICO DEL CARBONO TOTAL
De acuerdo con los procedimientos del ensayo
establecidos por el fabricante del aparato, inyectar
en el dispositivo de inyeccin un volumen de
muestra apropiado en relacin con la cantidad de
carbono a determinar y descomponer el carbono
orgnico e inorgnico presentes en la muestra.
Detectar el dixido de carbono generado y calcular
la cantidad de carbono total, emplear para ello un
procesador de datos o un registrador. Determinar
exclusivamente la cantidad de carbono inorgnico
del mismo modo en que se realiz la determinacin
de carbono total, modificando la configuracin del
aparato si fuera necesario. La cantidad de carbono
orgnico se obtiene restando la cantidad de carbono
inorgnico de la cantidad de carbono total.
MEDICIN DEL CARBONO ORGNICO
DESPUS DE LA EXTRACCIN DEL
CARBONO INORGNICO
Extraer el carbono inorgnico de la muestra por
adicin de cido para eliminar el carbono
inorgnico seguido por el burbujeo del Gas
transportador (como por ej., nitrgeno) si fuera
necesario. De acuerdo con los procedimientos del
50. COLORANTES DE USO FARMACUTICO
En el presente captulo se describen los mtodos cromatogramas en una cmara sin revestimiento
de anlisis y los requisitos especficos para los interno y saturada durante 20 minutos. Desarrollar
colorantes sintticos utilizados en la formulacin de la placa al menos dos veces.
medicamentos. Adems de los colorantes descritos Procedimiento - Preparar una Solucin muestra
en este captulo, pueden emplearse aquellos y una Solucin estndar que contengan
colorantes naturales autorizados por el Cdigo aproximadamente 1 mg por ml en metanol. Aplicar
Alimentario Nacional. por separado 10 Pl de cada una de las soluciones y
Se pueden emplear sustancias agregadas desarrollar los cromatograrnas.
exclusivamente para dar color a las preparaciones
Identificacin espectrofotomtrica - (ver 470.
oficiales, excepto en aquellas destinadas a la
Espectrofotometra ultravioleta y visible).
administracin parenteral u oftlmica. Cabe aclarar
[NOTA: proteger las soluciones de la luz.
que las sustancias incorporadas a la formulacin
Realizar rpidamente los procedimientos bajo luz
deben ser apropiadas en todos los otros aspectos
tenue, o empleando materiales de vidrio inactnico.]
(ver Consideraciones generales), como por ej., no
Todos los ensayos se realizan en solucin de acetato
tener influencia adversa sobre la eficacia teraputica
de amonio 0,04 M (3,083 g por litro). Efectuar un
de los principios activos y no interferir con los
barrido espectral entre 210 y 750 nm con un
ensayos y valoraciones, entre otros. Es
espectrofotmetro apropiado y empleando una
recomendable no agregar colorantes a las
solucin de acetato de amonio 0,04 M como blanco.
preparaciones indicadas para tratamientos
prolongados. Los medicamentos de uso oral que Prdida por secado <680> - Transferir
contengan tartrazina o eritrosina deben incluir en su aproximadamente 2,0 g de muestra, exactamente
prospecto una leyenda con el siguiente texto: "Este pesados, a un recipiente apropiado. Secar a 135 C
medicamento contiene tartrazina como colorante" o hasta peso constante. Calcular la prdida de peso,
"Este medicamento contiene eritrosina como en porcentaje, respecto del peso de la muestra.
colorante", respectivamente. Determinacin de cloruro - Transferir
METODOS GENERALES DE ANALISIS aproximadamente 1,0 g de colorante, exactamente
pesado, a un recipiente apropiado. Disolver en
Identificacin cromatogrfica - (ver 100. 100 ml de agua y acidificar con 5 ml de cido
Cromatografa).
ntrico 1,5 N. Determinar el contenido de cloruro
[NOTA: proteger las soluciones de la luz.
de la solucin por titulacin, calcular el punto final
Proceder rpidamente empleando luz tenue o
potenciomtricamente empleando un electrodo de
materiales de vidrio inactnico.]
plata-cloruro de plata y un electrodo de referencia
Sistema A - Emplear una fase mvil constituida de vidrio (ver 780. Volumetra). Cada mililitro de
por una mezcla de n-butanol, etanol, agua y nitrato de plata 0,1 N (SV) equivale a 0,00585 g de
amonaco (50:25:25:10). Sembrar las soluciones
cloruro de sodio.
sobre una placa para cromatografa en capa delgada
recubierta con celulosa de 0,1 mm de espesor. Determinacin de sulfato - Transferir
Desarrollar los cromatogramas en una cmara sin aproximadamente 5,0 g del colorante, exactamente
revestimiento interno y sin saturar. pesados, a un erlenmeyer de 250 ml y disolver en
Sistema B - Emplear una fase mvil constituida 100 ml de agua calentando en un bao de agua.
por una mezcla de metiletilcetona, acetona, agua y Agregar 35 g de cloruro de sodio libre de sulfato,
amonaco (140:60:60:1). Sembrar las soluciones tapar el erlenmeyer y agitar por rotacin a
sobre una placa para cromatografa en capa delgada intervalos frecuentes durante 1 hora. Enfriar,
recubierta con gel de slice 60 de 0,2 mm de transferir con solucin saturada de cloruro de sodio
espesor. Desarrollar los cromatogramas en una a un matraz aforado de 250 ml y llevar a volumen
cmara revestida internamente con papel de filtro y con solucin saturada de cloruro de sodio. Agitar el
saturada durante 2 horas. matraz y filtrar la solucin a travs de un papel de
Sistema C - Emplear una fase mvil constituida filtro seco. Transferir cuantitativamente 100 ml del
por una mezcla de acetonitrilo, alcohol isoamlico, filtrado a un vaso de precipitados de 500 ml, diluir a
agua, amonaco y metiletilcetona (50:50:15:10:5). 300 ml con agua y acidificar con cido clorhdrico
Sembrar las soluciones sobre una placa para agregando 1 ml de exceso. Calentar la solucin a
cromatografa en capa delgada recubierta con gel de ebullicin y agregar, gota a gota y con agitacin, un
slice 60 de 0,2 mm de espesor. Desarrollar los exceso de cloruro de bario 0,125 M. Dejar la
mezcla en reposo durante 4 horas sobre una placa
calefactora o durante toda la noche a temperatura requiere un exceso de tricloruro de titanio (no ms
ambiente y luego calentar a 80 C. Dejar de 0,3 ml de solucin 0,1 N) y se debe emplear una
sedimentar el precipitado y filtrar. Lavar el solucin patrn conveniente de algn otro
precipitado con agua caliente hasta que los lavados colorante, haciendo una titulacin por retorno (en
den negativa la reaccin para Cloruro (ver 410. general se emplea el azul de metileno). En otros
Ensayos generales de identificacin). Colocar el casos es mejor emplear un indicador que se reduzca
precipitado en un crisol, previamente pesado, y luego que el colorante haya reaccionado con el
someter a calcinacin hasta peso constante. tricloruro de titanio. Se obtienen buenos resultados
Realizar una determinacin con un blanco y hacer empleando una cantidad conocida de verde brillante
las correcciones necesarias. Expresar el resultado como indicador en la titulacin de tartrazina].
como porcentaje en peso de sulfato de sodio. Valoracin espectrofotomtrica - [NOTA:
Materia insoluble en agua - Transferir proteger las soluciones de la luz. Proceder
aproximadamente 4,0 g de muestra, exactamente rpidamente empleando luz tenue o materiales de
pesados a un recipiente apropiado. Disolver con vidrio inactnico]. Preparar la Solucin muestra y
agitacin en 200 ml de agua caliente (entre 80 y una Solucin estndar en acetato de amonio
90 C) y dejar enfriar a temperatura ambiente. 0,04 M, de modo que la concentracin sea la
Filtrar a travs de un filtro de vidrio sinterizado de indicada para cada colorante. Determinar la
porosidad fina; previamente pesado, lavar con agua absorbancia de ambas soluciones a la longitud de
fra hasta que las aguas de lavado sean incoloras. onda especificada, con un espectrofotmetro
Secar a 135 C hasta peso constante. Calcular el apropiado, empleando una solucin de acetato de
porcentaje de materia insoluble en agua. amonio 0,04 M como blanco. El porcentaje de
colorante total calculado sobre la muestra no debe
Extracto etreo - Emplear un aparato de ser inferior al porcentaje especificado para cada
extraccin tipo soxhlet. Colocar un pequeo trozo colorante.
de alambre de cobre suspendido en el refrigerante y
aproximadamente 0,5 g del mismo alambre en el ESPECIFICACIONES DE COLORANTES
baln. Transferir aproximadamente 2,0 g del AMARANTO (CI 16185)
colorante, exactamente pesados, al aparato de
C 20 H 11 N 2 Na 3 O 10 S 3 PM:
extraccin y extraer 150 ml de ter etlico o ter 604,49
isoproplico durante 5 horas. Concentrar el extracto Definicin - El Amaranto es esencialmente la
sobre un bao de vapor hasta aproximadamente sal trisdica del cido 1-(4-sulfo-1,1-naftilazo)-2
5 ml. Transferir a un cristalizador previamente naftol-3,6-disulfnico y colorantes subsidiarios,
pesado, evaporar en un bao de agua y luego secar junto con cloruro de sodio y/o sulfato de sodio
a 105 C hasta peso constante. El aumento de peso como principales componentes incoloros.
expresado como porcentaje con respecto a la
muestra tomada corresponde al extracto etreo. Caracteres generales - Polvo homogneo o
grnulos de color pardo rojizo a pardo rojizo
Contenido de colorante - oscuro. Expuesto a la luz ultravioleta no presenta
Titulacin con tricloruro de titanio - fluorescencia apreciable. Soluble en agua.
METODO I - Preparar una solucin al 1,0 % de
la muestra en agua y colocar un volumen Identificacin cromatogrfica - (ver
equivalente a 20 ml de tricloruro de titanio en un Identificacin cromatogrfica en Mtodos
erlenmeyer de boca ancha de 500 ml. Agregar 15 g generales de anlisis).
de citrato de sodio y agua hasta obtener un volumen Sistema A: R f aproximadamente 0,39.
entre 150 y 200 ml. Calentar a ebullicin y titular Sistema B: R f aproximadanente 0,24.
con tricloruro de titanio 0,1 N (SV). Identificacin espectrofotomtrica - (ver
METODO II - Preparar una solucin al 0,5 % Identificacin espectrofotomtrica en Mtodos
de la muestra en alcohol. Proceder segn se indica generales de anlisis). Una solucin de 0,02 mg
en Mtodo I pero sustituyendo el agua por alcohol por ml en el visible presenta un mximo a 522 nm y
al 50 %. en el ultravioleta presenta mximos a 218 y 331 nm,
METODO III - Proceder segn se indica en un mnimo a 311 nm y otro mnimo entre 359 y
Mtodo I pero sustituyendo el citrato de sodio por 389 nm.
15 g de tartrato cido de sodio.
[NOTA: para muchos colorantes el punto final Prdida por secado, cloruro y sulfato - La
de la titulacin con tricloruro de titanio est suma de Prdida por secado, Cloruro y Sulfato
indicado por una marcada decoloracin. Para otros, (calculados como sales sdicas) no es mayor de
sin embargo, el cambio es tan gradual que se 15 %.
Materia insoluble en agua - No ms de 0,2 %. Identificacin cromatogrfica - (ver
Extracto etreo - No ms de 0,2 %. Identificacin cromatogrfica en Mtodos
generales de anlisis).
Plomo <600> - No ms de 10 ppm. Sistema A: R f aproximadamente 0,44.
Arsnico <540> - No ms de 3 ppm. Sistema B: R f aproximadamente 0,37.
Este ensayo se realiza como etapa preliminar captulo general correspondiente; humedecer con
para la determinacin de bromo, cloro, iodo, agua la junta esmerilada del erlenmeyer y
selenio y azufre en productos farmacopeicos. La desplazar el aire del mismo con una corriente de
combustin del material a ensayar, generalmente oxgeno, tapar provisoriamente el erlenmeyer con
orgnico, produce compuestos inorgnicos un tapn apropiado hasta que se encienda la
solubles en agua, en los que se analizan los mecha. Agitar por rotacin el lquido para
elementos especificados en la monografa o el favorecer la absorcin del oxgeno. [NOTA: la
captulo general correspondiente. saturacin del lquido con oxgeno es esencial
Aparato (ver Figura) - Consta de un para el xito del procedimiento de combustin].
erlenmeyer de 500 ml (a menos que se especifique Encender la tira de papel y sumergir de inmediato
uno de mayor volumen) de paredes gruesas, cuyo el soporte de la muestra en el erlenmeyer.
borde se eleva formando un reservorio alrededor Mantener firmemente ajustado el tapn durante
del tapn. El tapn de vidrio esmerilado lleva todo el proceso de combustin e invertir el
soldado un soporte para la muestra que consiste en erlenmeyer para que la solucin de absorcin
un alambre de platino y una pieza formada por forme un cierre hermtico alrededor del mismo.
una malla de platino soldada que mide Evitar que caiga en el lquido cualquier sustancia
que no se haya quemado completamente. Una vez
aproximadamente 1,5 cm u 2 cm.
finalizada la combustin, agitar el erlenmeyer
Procedimiento - vigorosamente y dejar reposar durante no menos
Precaucin - Se debe trabajar con anteojos de 10 minutos con agitacin intermitente. Luego
protectores y extremando las medidas de proceder segn se especifique en la monografa o
seguridad. El analista debe asegurarse que el el captulo general correspondiente.
erlenmeyer est perfectamente limpio.
Pesar la sustancia, si es un slido, en un
cuadrado de papel de filtro libre de haluros, de
aproximadamente 4 cm de lado; plegar el papel
envolviendo la muestra. Las sustancias lquidas
se pesan en cpsulas previamente pesadas para
volmenes menores de 200 l se emplean
cpsulas de acetato de celulosa y para volmenes
mayores de 200 l son tiles las cpsulas de
gelatina. [NOTA: las cpsulas de gelatina pueden
contener cantidades significativas de haluros o
azufre. Si se emplean tales cpsulas, se debe
realizar una titulacin empleando un blanco y
hacer las correcciones necesarias]. Asegurar la
muestra en la malla de platino junto con una tira
de papel de filtro que, a modo de mecha, est
destinada a provocar la combustin cuando se la
enciende. Agregar en el erlenmeyer el lquido Figura. Aparato para combustin en erlenmeyer
absorbente, especificado en la monografa o el con oxgeno.
70. CONDUCTIVIDAD
La conductividad , de una solucin es por El aparato se provee con corriente alterna para
definicin la funcin inversa de la resistividad . evitar los efectos de polarizacin del electrodo y
La resistencia R, de un conductor de seccin est equipado con un dispositivo de compensacin
transversal A, y longitud L, est dada por la de temperatura o un termmetro de precisin.
siguiente expresin: La celda conductimtrica contiene dos
L electrodos paralelos de platino, recubiertos con
R U negro de platino, cada uno con un rea A, y
A separados uno de otro por una distancia L. Ambos
o sea, estn generalmente protegidos por un tubo de vidrio
1 L 1 L que permite un buen intercambio entre la solucin y
R N
N A RA los electrodos.
Tabla.
Concentracin en g por cada Conductividad Resistividad
1 kg de solucin S cm-1 m
0,7455 1.330 752
0,0746 133 7.519
0,0149 26,6 37.549
Tabla 7. Asignacin de contenido lmite de microorganismos para productos terminados no estriles, segn su
va de administracin.
Recuento de
Vas de aerobios viables Hongos y
Categora Enterobacteriaceae Ausencia de 1 g o ml
administracin totales por ufc/g levaduras
o ml
1.1 Escaras,
I ulceraciones o Grmenes revivificables
quemaduras graves
Inhalatoria y Enterobacteriaceae
cavidades exentas de 10 Pseudomonas aeruginosa
grmenes Staphylococcus aureus
Enterobacteriaceae
Nasal, tica, rectal,
II 100 10 Pseudomonas aeruginosa
tpica y vaginal
Staphylococcus aureus
Pseudomonas
aeruginosa
III Oral 1.000 100 100 Staphylococcus aureus.
Escherichia coli y
Salmonella
Anaerobios sulfito reductores para productos cuyas materias primas se consideren fuentes de contaminacin.
Pseudomonas aeuruginosa solamente para formas farmacuticas lquidas.
100. CROMATOGRAFA
La cromatografa es un mtodo por el cual las activos con carga negativa y se emplean para
sustancias se separan mediante un proceso de separar compuestos bsicos, como por ej., las
migracin diferencial en un sistema que consta de aminas. Las resinas de intercambio aninico tienen
dos fases. Una fase que fluye continuamente en una sitios activos con carga positiva para la separacin
direccin dada (fase mvil) y otra que permanece de compuestos cidos, como por ej., fosfatos,
fija (fase estacionaria). En estos sistemas los sulfonatos o carboxilatos. Los compuestos inicos
componentes de una mezcla pueden presentar o ionizables, solubles en agua, son atrados a las
diferentes movilidades debido a diferencias en la resinas y las diferencias en la afinidad producen la
capacidad de adsorcin, particin, solubilidad, separacin cromatogrfica. El pH de la fase mvil,
presin de vapor, tamao molecular o carga. Los la temperatura, el tipo de ion, la concentracin
mecanismos de separacin son: adsorcin, inica y los modificadores orgnicos afectan el
disolucin y particin, filtracin y permeacin o equilibrio; estas variables pueden ajustarse para
tamices moleculares, intercambio inico. obtener el grado de separacin deseado.
Las tcnicas aplicadas mediante los distintos La Cromatografa por tamices moleculares se
mecanismos-mencionados empleados en esta basa en el intercambio repetido de los compuestos
Farmacopea son: Cromatografa en columna, con la fase mvil y con la fase lquida estacionaria
Cromatografa en papel, Cromatografa en capa que se encuentra dentro de los poros del material de
delgada, Cromatografa de gases, Cromatografa relleno.
lquida de alta eficacia y Cromatografa de Empleo de Sustancias de referencia en ensayos
exclusin. de identificacin - En Cromatografa en papel y en
La Cromatografa de adsorcin se basa en la Cromatografa en capa delgada, la relacin entre la
separacin de un soluto entre la fase estacionaria distancia recorrida por una sustancia y la distancia
constituida por un adsorbente, como por ej., recorrida por el frente de la fase mvil, se denomina
almina activada, slica gel y resinas de intercambio relacin de frente, R f , de la sustancia. La relacin
inico y la fase mvil constituida por el solvente de entre la distancia recorrida por una sustancia y la
elusin. distancia recorrida por una Sustancia de referencia,
La Cromatografa de particin se basa en la se denomina R E de la sustancia.
distribucin selectiva del soluto entre la fase En el caso de la Cromatografa en papel se han
estacionaria y la fase mvil. Se clasifica en observado diferencias en el valor de R f cuando los
cromatografa de particin en fase normal y cromatogramas se desarrollan en direccin paralela
cromatografa de particin en fase reversa. En la a las fibras de papel en comparacin con los
cromatografa de particin en fase normal las desarrollados en forma perpendicular a dicha
sustancias a separar se distribuyen entre dos direccin. En consecuencia, la orientacin de las
lquidos inmiscibles uno de los cuales es ms polar, fibras del papel en lo que se refiere al flujo de la
acta como fase estacionaria y se encuentra fase mvil debe ser la misma para una serie de
adsorbido sobre un soporte slido, brindando una cromatogramas. [NOTA: por lo general, el
gran superficie de contacto a la fase mvil menos fabricante indica el sentido de las fibras en los
polar. En la cromatografa de particin en fase envases de papel para Cromatografa].
reversa la fase estacionaria es menos polar que la Los valores absolutos de R f , son difciles de
fase mvil. establecer, ya que varan con las condiciones
El grado de particin de un compuesto dado experimentales por lo tanto se logra una mejor
entre las dos fases lquidas se expresa por su identificacin cuando se emplea una muestra de la
coeficiente de particin o de distribucin y puede sustancia a ensayar como Sustancia de referencia.
modificarse variando la composicin de la fase Para este fin se preparan soluciones de la muestra,
mvil. En el caso de compuestos que se disocian, la la Sustancia de referencia y una mezcla de partes
distribucin se puede controlar modificando, entre iguales de ambas y se aplican sobre una lnea
otras propiedades, el pH, la constante dielctrica y paralela a uno de los bordes de la placa
la fuerza inica. cromatogrfica u hoja de papel. Cada aplicacin
La Cromatografa de intercambio inico se contiene aproximadamente la misma cantidad, en
emplea para separar compuestos ionizables y peso, de la muestra y la Sustancia de referencia. Si
solubles en agua. Las fases estacionarias empleadas la misma y la Sustancia de referencia son idnticas,
son generalmente resinas orgnicas sintticas. Las todos los cromatogramas deben
resinas de intercambio catinico contienen sitios
coincidir en color y valor de R f , y el empleado para rellenar la columna, sin necesidad de
cromatograma de la mezcla debe mostrar una nica separarlo de su excipiente y se agrega esta mezcla
mancha. al extremo superior de la columna. El paso
En Cromatografa en columna, Cromatografa posterior de solvente hace progresar la sustancia a
en papel y Cromatografa en capa delgada, las travs de la columna.
sustancias pueden ser localizadas por: (a) La separacin y aislamiento puede mejorarse
observacin directa con luz visible o luz haciendo circular mayores cantidades de fase mvil
ultravioleta, si las sustancias poseen color o o un solvente de mayor poder eluyente, a travs de
producen fluorescencia; (b) observacin con luz la columna y recolectando distintas fracciones del
visible o ultravioleta, despus de agregar un eluato que contienen los componentes de la
reactivo que reaccione con las sustancias separadas; muestra.
(c) mediante un contador Geiger-Mller o con La eficiencia de la separacin suele controlarse
tcnica autorradiogrfica, cuando se trabaja con realizando un cromatograma en capa delgada de las
sustancias radiactivas o (d) por estimulacin o fracciones individuales.
inhibicin del desarrollo microbiano, colocando
Cromatografa de particin
trozos de papel que contienen las sustancias
separadas en medios de cultivo apropiados. Preparacin de la columna - Emplear un tubo
cromatogrfico de aproximadamente 22 mm de
CROMATOGRAFA EN COLUMNA dimetro interno y 200 a 300 mm de largo, sin disco
La Cromatografa en columna se emplea para la de vidrio poroso en su extremo, al que se ajusta un
separacin de sustancias en escala preparativa. tubo de salida, sin robinete, de aproximadamente
4 mm de dimetro interno y 50 mm de largo, a
Cromatografa de adsorcin
menos que se especifique de otro modo en la
Preparacin de la columna - Emplear un tubo monografa correspondiente. Adaptar un trozo de
cromatogrfico, cilndrico, de vidrio o del material lana de vidrio en la base del tubo. Transferir el
especificado en la monografa correspondiente, volumen de fase estacionaria y la cantidad de
generalmente de 10 a 30 mm de dimetro interno y soporte slido especificados en la monografa
de 150 a 400 mm de largo. En su extremo inferior, correspondiente a un vaso de precipitados de 100 a
el tubo se angosta formando un tubo de salida que 250 ml y mezclar hasta obtener una mezcla
generalmente posee un dimetro interno de 3 a homognea y espesa. Transferir esta mezcla al tubo
6 mm, pudiendo incluir un robinete para el control cromatogrfico y apisonar presionando suavemente,
exacto del caudal. Generalmente se emplea una hasta obtener una masa uniforme. Si la cantidad de
varilla de vidrio u otro material para colocar un soporte slido especificada es mayor de 3 g,
trozo de lana de vidrio o algodn, en la base del transferir la mezcla al tubo en porciones de
tubo, y si fuera necesario, compactar el adsorbente aproximadamente 2 g y apisonar cada porcin.
o una suspensin del mismo uniformemente dentro
del tubo. En algunos casos, en la base del tubo se Procedimiento - La muestra se puede agregar a
encuentra soldado un disco de vidrio poroso que la parte superior de la columna disuelta en un
acta como soporte del contenido del tubo. Colocar volumen apropiado de fase mvil o empleando una
el adsorbente especificado en la monografa solucin de la muestra en un volumen apropiado de
correspondiente de manera que se forme una fase estacionaria mezclada con una parte adicional
columna compacta, homognea y sin fisuras. del soporte slido y transferida a la parte superior
Los adsorbentes ms empleados son almina, de la columna como una capa extra de soporte. La
gel de slice activado y tierra de diatomeas. muestra puede tambin ser incorporada en la fase
estacionaria, completando la transferencia
Procedimiento - Disolver la muestra en una cuantitativa al tubo cromatogrfico, lavando el vaso
cantidad apropiada de solvente y agregarla por el de precipitados, empleado para la preparacin de la
extremo superior de la columna. Dejar que esta muestra, y agregando una mezcla de
solucin se adsorba y luego agregar nuevas aproximadamente 1 g de soporte slido y varias
porciones de solvente, de manera que fluya a travs gotas del solvente empleado para preparar la
de la columna espontneamente, por aplicacin de solucin muestra. Colocar un trozo de lana de
vaco en la base o ejerciendo presin en el extremo vidrio fina por encima del soporte de la fase
superior. En algunos casos, puede modificarse el estacionaria para completar la columna. Dejar que
procedimiento de carga de la muestra en la se adsorba completamente en la fase estacionaria y
columna. Si el producto es slido (como por ej., luego agregar fase mvil en varias porciones,
comprimidos pulverizados) se lo mezcla permitiendo que cada una penetre en la columna
ntimamente con una porcin del adsorbente completamente, antes de comenzar la elusin.
Como fase mvil emplear el solvente o la solucin porciones sucesivas dejando secar luego de cada
especificada en la monografa correspondiente. aplicacin.
Equilibrar la fase mvil con agua si la fase Sujetar el papel por el extremo donde se aplic
estacionaria es una solucin acuosa o si la fase la muestra dentro de la cubeta. El papel debe pasar
estacionaria es un lquido orgnico polar, equilibrar por encima de la varilla colocada en el borde de la
con ese lquido. cubeta y debe colgar libremente en la cmara, sin
Cuando la valoracin o el ensayo requieren el tocar su fondo o sus paredes.
empleo de varias columnas cromatogrficas Colocar una cantidad apropiada de fase mvil en
colocadas en serie, cuando se especifique el el fondo de la cmara y cerrarla hermticamente.
agregado de la fase mvil en porciones o el cambio Dejar la cmara en estas condiciones durante un
en la composicin de la misma, dejar que cada perodo que permita que el ambiente se sature y el
porcin drene completamente a travs de la papel se equilibre con el vapor de la fase mvil. La
columna y lavar el vstago con fase mvil antes del saturacin de la cmara puede favorecerse mediante
agregado de cada porcin. el revestimiento de las paredes internas con un
CROMATOGRAFA EN PAPEL papel humedecido en fase mvil.
Colocar la fase mvil en la cubeta y cerrar la
El mecanismo predominante en Cromatografa cmara hermticamente. Dejar descender la fase
en papel es la particin, sto se debe a que el papel mvil por el papel, hasta que haya recorrido la
posee un contenido natural de agua que puede ser distancia deseada. Retirar el papel de la cmara,
considerada como fase estacionaria. Sin embargo, marcar rpidamente el frente del solvente y dejar
en la prctica, las separaciones frecuentemente son secar.
el resultado de la combinacin de efectos de Observar los cromatogramas directamente o
adsorcin y particin. revelar la posicin de las manchas empleando
Cromatografa descendente reactivos apropiados. Comparar los cromatogramas
obtenidos a partir de la muestra y la Sustancia de
Aparato - Consta de: referencia.
- Una cmara con cierre hermtico para La seccin del papel que contiene la sustancia o
permitir la saturacin con los vapores de la fase sustancias aisladas puede cortarse y eluirse con un
mvil, generalmente construida de vidrio, acero solvente apropiado. La solucin resultante puede
inoxidable o porcelana y diseada de manera que ser valorada mediante tcnicas qumicas o
permita seguir el proceso sin necesidad de abrirla. instrumentales apropiadas empleando Sustancias de
- Un bastidor de material resistente a la referencia, tratadas de la misma manera que la
corrosin, aproximadamente 5 cm ms corto que la muestra, en un intervalo apropiado d
altura interior de la cmara. El bastidor sirve de concentraciones para realizar una curva de
soporte a las cubetas que contienen la fase mvil y calibracin.
de las cuales se suspenden las hojas de papel.
- Una o ms cubetas de vidrio o de material Cromatografa ascendente
inatacable por la fase mvil. Aparato - Emplear el aparato descrito en
- Varillas de vidrio, colocadas en forma paralela Cromatografa descendente.
al borde de cada cubeta para mantener suspendidas
la hoja de papel. Procedimiento - Aplicar la muestra y la
- Hojas de papel cromatogrfico de textura y Sustancia de referencia segn se indica para el
espesor apropiados. Procedimiento en Cromatografa descendente.
Transferir una cantidad apropiada de fase mvil
Procedimiento - Trazar una lnea transversal, para cubrir el fondo de la cmara. Colocar la
cerca de uno de los extremos del papel, de modo cubeta vaca en el fondo de la cmara. Colocar el
que cuando se sumerja en la fase mvil quede a papel empleando un soporte apropiado dentro de la
unos pocos centmetros por debajo de la varilla de cubeta vaca, procurando que no toque las paredes
vidrio. Disolver la muestra en un solvente de la cmara. Cerrarla hermticamente y dejarla en
apropiado. Aplicar un volumen de la solucin as estas condiciones durante un perodo que permita
obtenida que contenga aproximadamente entre 1 y que el ambiente se sature y el papel se equilibre con
20 mg de la sustancia a ensayar sobre la lnea el vapor de la fase mvil. Colocar la fase mvil en
anteriormente trazada y un volumen similar de la la cubeta y cerrar la cmara hermticamente. Dejar
Sustancia de referencia dejando no menos de 3 cm que el solvente ascienda por el papel hasta que haya
entre cada aplicacin. Las aplicaciones no deben recorrido la distancia deseada. Retirar el papel de la
formar una mancha mayor de 6 a 10 mm de cmara, marcar el frente del solvente y dejar secar.
dimetro, para ello aplicar las soluciones en
[NOTA: pueden emplearse cmaras cilndricas, placa permita aplicar en toda su superficie una capa
de vidrio, que no requieren el empleo de cubetas y uniforme con el espesor deseado.
en las que la fase mvil se coloca directamente - Una cmara de vidrio cilndrica o rectangular
sobre el fondo de la cmara. El papel se suspende de aproximadamente 30 cm de altura por 30 cm de
de la tapa que cierra la cmara. Durante la etapa de ancho y 16 cm de fondo, provista de una tapa del
equilibrio, el extremo inferior del papel no debe mismo material que permita el cierre hermtico
tocar la fase mvil. La cromatografa comienza para saturarla con los vapores de la fase mvil.
haciendo descender la hoja de papel de modo que - Fase mvil constituida por mezclas de
toque la fase mvil]. solventes orgnicos o soluciones acuosas segn se
indique en la monografa correspondiente.
CROMATOGRAFA EN CAPA DELGADA
- Reactivos reveladores especficos indicados
La Cromatografa en capa delgada es en las monografas correspondientes.
comnmente empleada para la identificacin de - Un pulverizador que permita aplicar el
sustancias. El mecanismo de separacin reactivo revelador, resistente al ataque del mismo.
predominante es la adsorcin pero dependiendo del [NOTA: pueden emplearse placas comerciales
adsorbente empleado pueden observarse tambin preparadas o bien prepararlas en el laboratorio].
fenmenos de particin.
En cromatografa en capa delgada el adsorbente Preparacin de la placa - Limpiar
est constitudo por una capa uniforme y perfectamente las placas por inmersin en mezcla
relativamente delgada de un material finamente sulfocrmica (ver 1090. Limpieza de materiales de
pulverizado que se aplica sobre una placa rgida de vidrio) y luego lavarlas con abundante agua hasta
vidrio, plstico o metal. Esta tcnica presenta que el lquido que escurre no deje en la superficie
varias ventajas sobre la cromatografa en papel, se de las placas manchas visibles. Secarlas
pueden emplear mayores cantidades de muestra; el perfectamente.
tiempo requerido es menor por lo tanto los riesgos Suspender el adsorbente, con el agregado o no
de alteracin de la muestra por oxidacin o por de reactivos, como por ej., soluciones reguladoras,
accin de los solventes disminuyen y permite el uso sustancias fluorescentes, etc., en agua o en
de adsorbentes minerales que hacen posible el solventes orgnicos voltiles, agitar durante
empleo de reveladores agresivos, como por ej., 30 segundos, hasta formar una suspensin
cido sulfrico. homognea. Extender la suspensin sobre una o
varias placas, manualmente o con ayuda del
Aparato - Consta de: aplicador, hasta lograr una capa uniforme de 0,25 a
- Placas de material inerte: las ms empleadas 1 mm de espesor. Dejar en reposo durante
son de vidrio de 20 cm u 20 cm. 5 minutos. Secar a 105 C durante 30 minutos y
- Un bastidor o soporte de material resistente a dejar enfriar en un desecador. Generalmente 30 g
la corrosin y aproximadamente 5 cm ms corto de adsorbente y 60 ml de agua son suficientes para
que la altura interna de la cmara destinado a cinco placas de 20 cm u 20 cm. Cuando se emplea
sostener una o ms placas que se disponen emplasto de pars como aglutinante completar la
enfrentadas por su cara no cubierta por el aplicacin de los adsorbentes dentro de los
adsorbente. 2 minutos de haber agregado el agua, ya que
- Materiales adsorbentes finamente divididos posteriormente la mezcla empieza a endurecer.
que pueden ser de origen mineral (gel de slice, Cuando las placas estn secas y a temperatura
almina, etc.) u orgnico (celulosa, poliamidas, ambiente, verificar la uniformidad de la distribucin
etc.), normalmente de 5 a 40 mm de dimetro. y la textura de la capa adsorbente; la luz transmitida
Pueden aplicarse directamente sobre la placa de muestra uniformidad en la distribucin y la luz
vidrio o adherirse a la placa a travs de emplasto de reflejada muestra uniformidad en la textura.
pars (sulfato de calcio hidratado) en una relacin Conservar las placas cromatogrficas en un
de 5 a 15 % o con pasta de almidn u otros desecador. Deben emplearse dentro de los tres das
aglutinantes. El primero no produce superficies posteriores a su preparacin.
duras como el almidn, pero no es afectado por Procedimiento - Colocar en la cmara una
reactivos reveladores fuertemente oxidantes. El cantidad suficiente de fase mvil hasta obtener una
adsorbente puede contener materiales que ayuden a capa de 1,5 cm. Adherir hojas de papel de filtro
la visualizacin de las manchas que absorben la luz embebidas en la fase mvil a las paredes de la
ultravioleta. cmara, para facilitar la saturacin de la misma con
- Un aparato apropiado para esparcir el el vapor del lquido, a menos que se especifique de
adsorbente de modo que al desplazarlo sobre la otro modo, en la monografa correspondiente.
Cerrar la cmara hermticamente. Trazar una lnea Cromatografa gas-lquido: la fase estacionaria
a 2,5 cm del borde inferior y lateral de la placa. puede estar contenida en columnas rellenas o
Aplicar por separado sobre la lnea trazada capilares. En las columnas rellenas, la fase lquida
anteriormente y a no menos de 2 cm entre cada se deposita sobre un soporte slido finamente
aplicacin la solucin muestra y la solucin dividido e inerte en una columna de 1 a 3 m de
estndar empleando una micropipeta para obtener longitud u 2 a 4 mm de dimetro interno. Los
una mancha lo ms pequea posible soportes ms comnmente empleados son tierra de
(preferentemente con un dimetro mayor de 5 mm o diatomeas, polmeros porosos o carbono grafito. En
bien en una banda perpendicular al sentido del las columnas capilares, que no contienen soporte, la
desarrollo del cromatograma, de 10 a 20 mm de fase lquida se deposita en la superficie interna de la
largo y 2 a 6 mm de ancho). La aplicacin puede columna o puede unirse qumicamente a ella.
realizarse en porciones sucesivas que permitan Cromatografa gas-slido: se emplea como fase
acumular la cantidad de material requerido, dejando estacionaria almina, slice, carbono o resinas
secar cada vez, antes de efectuar la siguiente porosas poliaromticas.
aplicacin.
Aparato - Consta de:
Dejar secar las aplicaciones, ubicar la placa en
- Un reservorio de gas transportador constituido
el soporte y colocarla dentro de la cmara, de modo
por un gas comprimido, como por ej.: helio,
que la fase mvil llegue al borde inferior de la
nitrgeno, hidrgeno, argn o mezclas (como por
placa. Cerrar la cmara y desarrollar los
ej., 95 % de argn y 5 % de metano) segn el tipo
cromatogramas hasta que el frente del solvente haya
de detector y columna empleados.
recorrido aproximadamente tres cuartos de la
- Un sistema de inyeccin constituido por una
longitud de la placa, o la distancia indicada en la
jeringa o un inyector automtico.
monografa correspondiente. Los cromatogramas
Los inyectores pueden ser:
requieren para su desarrollo aproximadamente de
Inyectores de flujo dividido: son inyectores
15 minutos a 1 hora. Retirar la placa de la cmara,
capaces de dividir la muestra en dos fracciones, una
marcar el frente del solvente y dejar secar.
pequea que se introduce en la columna y una
En el caso de que se especifique una
grande que se desecha. Tambin pueden emplearse
cromatografa en capa delgada bidimensional, la
en modo normal sin desechar ninguna porcin de la
placa cromatogrfica se somete a una cromatografa
muestra para el anlisis de trazas o componentes
en una direccin, se seca y luego se somete a una
minoritarios.
segunda cromatografa en ngulo recto respecto de
Inyectores de purga y trampa: estn equipados
la direccin original, generalmente en otra cmara
con un dispositivo por el cual las sustancias
equilibrada con un sistema de solventes diferente.
voltiles de la solucin se capturan en una trampa
Examinar la placa empleando el mtodo
de baja temperatura. Una vez que se completa el
especificado en la monografa correspondiente.
atrapado de las sustancias, se liberan en el gas
La seccin de la placa que contiene la sustancia
transportador mediante la calefaccin rpida de la
o sustancias aisladas tambin pueden separarse
trampa, la cual posee un dispositivo programable de
empleando una esptula, eluirse con un solvente
temperatura.
apropiado y cuantificarse empleando
Inyectores de espacio libre superior: poseen un
espectrofotometra o fluorescencia.
sistema de temperatura programable. Las muestras
Existen adems instrumentos de lectura, los
lquidas o slidas se colocan en envases
densitmetros, que miden la concentracin de la
perfectamente cerrados y se calientan durante un
sustancia sobre la placa como reflectancia o
perodo de tiempo fijo, lo que permite que los
transmitancia, por absorcin de luz o fluorescencia,
componentes voltiles de la muestra alcancen un
empleando longitudes de onda entre 190 y 800 nm
equilibrio entre las fases no gaseosa y gaseosa
seleccionadas con filtros o sistemas de difraccin.
(espacio libre superior del envase). Una vez
La seal generada puede ser enviada a un
establecido el equilibrio, el inyector introduce
registrador grfico, integrador o una computadora
automticamente una cantidad determinada del
provista de programas apropiados.
espacio libre superior del envase en el cromatgrafo
CROMATOGRAFA DE GASES de gases.
La Cromatografa de gases se emplea para la - Las columnas pueden ser capilares o rellenas.
separacin de sustancias o mezcla de sustancias Las columnas capilares, generalmente fabricadas
voltiles. Pueden emplearse los siguientes con slice fundida, poseen un dimetro interno de
sistemas: 0,20 a 0,53 mm (estas ltimas tambin llamadas
macrocapilares) y 5 a 60 m de longitud. El espesor
de la fase estacionaria, que a veces se une Este detector responde en forma uniforme a las
qumicamente a la superficie interna, es de 0,1 a sustancias voltiles cualquiera sea su estructura, sin
1,0 mm, aunque para las fases estacionarias no embargo, es considerablemente menos sensible que
polares puede ser hasta 5 mm. el detector de ionizacin a la llama.
Las columnas rellenas, de vidrio o metal, poseen Detector de ionizacin a la llama alcalino: a
un dimetro interno de 2 a 4 mm y 1 a 3 m de largo. veces llamado NP o detector de nitrgeno-fsforo,
Generalmente contienen un polmero poroso sobre contiene una fuente termoinica, constituida por
soporte slido o solo soporte slido. una sal de un metal alcalino o un elemento de vidrio
El tiempo de retencin y la eficiencia dependen que contiene rubidio u otro metal, que produce la
de la temperatura, del caudal del gas transportador. ionizacin de compuestos con nitrgeno y fsforo
El tiempo de retencin es tambin directamente orgnicos. Es un detector selectivo que muestra
proporcional a la longitud de la columna, mientras poca respuesta a los hidrocarburos.
que la resolucin es proporcional a la raz cuadrada Detector de captura electrnica: contiene una
de la longitud de la columna. Para las columnas fuente de radiacin ionizante. Presenta una
rellenas, el caudal del gas transportador se expresa respuesta sumamente alta con sustancias que
generalmente en ml por minuto a presin contienen halgenos y grupos nitro pero pequea
atmosfrica y temperatura ambiente y se mide a la con hidrocarburos. La sensibilidad aumenta con el
salida del detector con un caudalmetro mientras la nmero y peso atmico de los tomos de halgeno.
columna est a la temperatura de trabajo. Para un - Un registrador que recibe la seal del detector
caudal determinado, la velocidad lineal a travs de y calcula las respuestas de los picos e imprime el
una columna rellena es inversamente proporcional cromatograma con los parmetros del
al cuadrado del dimetro de la columna. Para las cromatograma y los picos. Los datos obtenidos
columnas capilares habitualmente se emplea pueden almacenarse y reprocesarse, con cambios en
velocidad lineal en lugar de caudal. la integracin y otras variables de clculo segn sea
- Un detector seleccionado de acuerdo a las necesario.
caractersticas de la muestra. El detector debe Los datos tambin pueden recolectarse para ser
mantenerse a una temperatura superior a la de la medidos manualmente en registradores sencillos o
columna para impedir la condensacin de las en integradores que pueden calcular respuestas de
sustancias eluidas. Para los anlisis cuantitativos picos o que producen cromatogramas con
los detectores deben brindar una respuesta que debe respuestas y alturas de los picos y permiten el
ser directamente proporcional a la cantidad de la almacenado de datos para un posible reprocesado.
sustancia presente en el detector para un intervalo
Procedimiento - Acondicionar la columna, el
amplio de concentraciones. El detector ms
inyector y el detector. Preparar las soluciones
comnmente empleado es el de ionizacin a la
estndar y muestra segn se especifica en la
llama pero tambin son empleados el de
monografa correspondiente.
conductividad trmica, captura electrnica,
Calibrar el aparato con las soluciones estndar y
nitrgeno-fsforo y espectrometra de masa.
determinar las cantidades a inyectar para obtener
Detector de ionizacin a la llama: poseen un
una respuesta apropiada.
intervalo lineal, amplio y es sensible a la mayora
Inyectar por separado las soluciones estndar y
de los compuestos orgnicos. La respuesta de los
muestra, registrar los cromatogramas y medir las
detectores depende de la estructura y la
respuestas de los picos segn se especifica en la
concentracin del compuesto y del caudal del gas
monografa correspondiente.
de combustin, del aire, del gas de compensacin y
Una fuente importante de error es la de
del gas transportador. Cuando se emplean
irreproducibilidad en la cantidad de muestra
columnas rellenas el gas transportador puede ser
inyectada, en particular cuando se hacen
helio o nitrgeno y cuando se emplean columnas
inyecciones manuales con una jeringa. Para reducir
capilares el gas transportador puede ser helio o
esta variabilidad, se agrega un estndar interno,
hidrgeno, a menos que se especifique de otro
compuesto que no interfiere en el cromatograma, en
modo en la monografa correspondiente.
la misma concentracin en las soluciones muestra y
Detector de conductividad trmica: posee un
estndar. El cociente entre la respuesta de la
alambre a una temperatura determinada, colocado
sustancia ensayada y la respuesta del estndar
en la corriente del gas transportador. Mide la
interno se compara de un cromatograma a otro. El
diferencia de conductividad trmica entre el gas
estndar interno debe ser sometido a todo el proceso
transportador junto con la muestra y el gas
de preparacin de la muestra, para controlar adems
transportador slo cuando atraviesan el detector.
otros aspectos del anlisis cuantitativo. Los
inyectores automticos mejoran la reproducibilidad Las fases estacionarias para la cromatografa de
de las inyecciones y reducen la necesidad del lquidos en fase reversa constan de una fase
estndar interno. orgnica qumicamente unida a slice u otros
A partir de los resultados obtenidos calcular el materiales. Las partculas son generalmente de 3 a
contenido de la o las sustancias a ensayar. 10 mm de dimetro pero los tamaos pueden llegar
hasta 50 mm o ms para las columnas preparativas.
CROMATOGRAFA DE LQUIDOS DE
Las partculas recubiertas con una capa delgada de
ALTA EFICACIA
fase orgnica tienen una baja resistencia a la
La Cromatografa de lquidos de alta eficacia, transferencia de masa y, por lo tanto, se obtiene una
CLAE, (comnmente llamada HPLC en ingls), es transferencia rpida de las sustancias entre la fase
denominada tambin Cromatografa lquida de alta estacionaria y la fase mvil. La polaridad de la fase
resolucin o rendimiento. La Cromatografa lquida estacionaria depende de la polaridad de sus grupos
de alta eficacia tiene la ventaja de que las funcionales que van desde el octadecilsilano
separaciones pueden tener lugar a temperatura relativamente no polar a grupos nitrilo muy polares.
ambiente para muchas sustancias. Por lo tanto, las Por lo general, las columnas empleadas para las
sustancias no voltiles o trmicamente inestables, separaciones analticas tienen dimetros internos de
pueden cromatografiarse sin descomposicin o 2 a 5 mm; para la cromatografa preparativa se
necesidad de hacer derivados voltiles. emplean columnas de dimetro mayor. En algunos
La afinidad de una sustancia por la fase casos las columnas pueden calentarse para mejorar
estacionaria y, por consiguiente, su tiempo de la eficiencia durante la separacin, pero rara vez se
retencin en la columna, se controla variando la las emplea a temperaturas por encima de los 60 C,
polaridad de la fase mvil mediante el agregado de debido a la potencial degradacin de la fase
un segundo y, a veces, un tercer o hasta un cuarto estacionaria o a la volatilidad de la fase mvil. Las
componente. columnas se emplean a temperatura ambiente, a
Aparato - Consta de: menos que se especifique de otro modo en la
- Un reservorio de fase mvil. monografa correspondiente.
- Un sistema de bombeo que impulsa - Un detector. Se emplean generalmente:
cantidades exactas de fase mvil desde el Detector espectrofotomtrico: consta de una
Reservorio de fase mvil a la columna mediante celda de flujo colocada a la salida de la columna.
tuberas y uniones aptas para soportar altas Un haz de radiacin ultravioleta pasa a travs de la
presiones. Los sistemas modernos constan de una o celda de flujo en forma perpendicular a la direccin
varias bombas dosificadoras, controladas por del flujo de la fase mvil e incide en el fotodetector.
computadora, que pueden programarse para variar A medida que las sustancias eluyen de la columna,
la composicin de la fase mvil cuando se trabaja pasan a travs de la celda y absorben la radiacin,
con gradiente o para mezclar los componentes de la lo que da lugar a cambios cuantificables en el nivel
fase mvil cuando se trabaja en condiciones de energa. Este detector es el ms empleado.
isocrticas. Generalmente se trabaja con gradiente Existen detectores de longitud de onda fija,
cuando la muestra es muy compleja o contiene variable y mltiple. Los detectores de longitud de
sustancias que difieren mucho en su factor de onda fija operan a una sola longitud de onda, en
capacidad. general 254 nm, emitida por una lmpara de
Las bombas pueden dar origen a caudales de mercurio de baja presin. Los detectores de
hasta 10 ml por minuto y generar presiones de hasta longitud de onda variable contienen una frente
6.000 psi. Sin embargo, los caudales tpicos son de continua, como una lmpara de deuterio o de xenn
1 a 2 ml por minuto, con presiones no mayores a de alta presin y un monocromador o un filtro de
2.000 2.500 psi. Las bombas empleadas para el interferencia que generan una radiacin
anlisis cuantitativo son de material resistente tanto monocromtica a una longitud de onda seleccionada
al ataque qumico como al ataque mecnico y son por el analista. Los detectores de longitud de onda
capaces de entregar la fase mvil a una velocidad variable pueden programarse para variar la longitud
constante, con fluctuaciones mnimas, durante de onda durante el anlisis. Los detectores de
perodos prolongados. longitud de onda mltiple miden la absorbancia a
- Un sistema de inyeccin empleado para dos o ms longitudes de onda simultneamente.
introducir la muestra. Detectores por arreglo de diodos: el haz de luz
- Una columna donde se produce la separacin continua atraviesa la celda. Luego la radiacin es
efectiva de los componentes de la muestra resuelta en sus longitudes de onda constitutivas que
inyectada. son detectadas individualmente mediante el arreglo
de diodos. Estos detectores adquieren los datos de
absorbancia sobre el intervalo total UV-visible y, emplearse solventes de grado HPLC y reactivos de
por lo tanto, proveen al analista varias longitudes de alta pureza].
onda seleccionadas y espectros de los picos eluidos. Equilibrar la columna con la fase mvil y
Los arreglos de diodos tienen, por lo general, menor preparar las soluciones estndar y muestra segn se
relacin seal-ruido que los detectores de longitud especifique en la monografa correspondiente. Las
de onda fija o variable y, por lo tanto, son menos soluciones deben ser filtradas.
apropiados para el anlisis de sustancias presentes Adecuar el sistema cromatogrfico segn se
en bajas concentraciones. especifica en la monografa correspondiente.
Detectores de ndice de refraccin: miden la Inyectar por separado las soluciones estndar y
diferencia entre el ndice de refraccin de la fase muestra, registrar los cromatogramas y medir las
mvil sola y el de la fase mvil que contiene las respuestas de los picos segn se especifique en la
sustancias cromatografiadas segn eluyan de la monografa correspondiente.
columna. Se emplean para detectar sustancias que A partir de los valores obtenidos calcular el
no absorben radiacin ultravioleta, pero son menos contenido de la o las sustancias a ensayar.
sensibles que los detectores ultravioleta. Son Los mtodos generalmente empleados son los
sensibles a pequeos cambios en la composicin del de estndar externo y estndar interno. En general
solvente, el caudal y la temperatura, por ello se se obtienen resultados confiables por los sistemas
emplea una celda de referencia que contiene la fase de estndar externo, especialmente cuando se
mvil para obtener una lnea de base satisfactoria. emplean inyectores automticos. Este mtodo
Detectores fluoromtricos: son sensibles a las compara directamente la respuesta obtenida
sustancias fluorescentes o que puedan convertirse cromatografiando separadamente soluciones
en derivados fluorescentes, ya sea mediante la estndar y muestra. En otros casos se obtienen
transformacin qumica de la sustancia o acoplando mejores resultados empleando el sistema de
reactivos fluorescentes en grupos funcionales estndar interno. En este caso se agrega una
especficos. cantidad conocida de una sustancia no interferente,
Detectores electroqumicos, potenciomtricos, el estndar interno, a las soluciones muestra y
voltamtricos o polarogrficos: son tiles para la estndar. Luego se compara la relacin de
cuantificacin de sustancias que pueden oxidarse o respuesta estndar/estndar interno y
reducirse en un electrodo de trabajo. Estos muestra/estndar interno.
detectores son selectivos, sensibles y confiables
CROMATOGRAFA DE EXCLUSIN
pero las fases mviles deben estar libres de oxgeno
disuelto o iones metlicos oxidantes. Debe En la Cromatografa de exclusin las sustancias
emplearse una bomba sin pulso y el pH, la fuerza presentes en la muestra se separan de acuerdo a su
inica y la temperatura de la fase mvil deben tamao. Los compuestos cuyas dimensiones sean
permanecer constantes. Los electrodos de trabajo mayores que el tamao de poro de la fase
son propensos a la contaminacin por los productos estacionaria atraviesan la columna sin ser retenidos
de reaccin con las consiguientes variaciones en las y eluyen al volumen de exclusin V O (volumen
respuestas. Los detectores electroqumicos con muerto). Los compuestos cuyas dimensiones sean
electrodos de pasta de carbono pueden emplearse menores que el tamao de poro de la fase
ventajosamente para medir cantidades muy estacionaria se introducen en los poros, quedan
pequeas, del orden de los ng de sustancias retenidos por ms tiempo y eluyen al volumen total
fcilmente oxidables en particular fenoles y de permeacin V T (cuanto menor sea dicho tamao
catecoles. ms tiempo quedan retenidos en los poros y
-Un registrador que recibe la informacin del viceversa).
detector y realiza la impresin del cromatograrna. La Cromatografa de exclusin se puede dividir
Los dispositivos modernos almacenan la seal de en Cromatografa de permeacin de geles que
salida del detector permitiendo reprocesar el emplea fases mviles orgnicas no polares y
cromatograma luego de cambiar las variables de rellenos hidroflicos y Cromatografa por filtracin
integracin. Tambin pueden emplearse para de geles que emplea fases mviles acuosas y
programar el cromatgrafo controlando la mayora rellenos hidrofbicos.
de las variables y automatizando el proceso. Aparato - Emplear el cromatgrafo descrito en
Cromatografa de lquidos de alta eficacia.
Procedimiento - La composicin de la fase - Columna. [NOTA: si fuera necesario,
mvil influye significativamente en la resolucin de controlar la temperatura de la columna].
las sustancias en la muestra. [NOTA: deben El material de relleno puede ser un soporte
blando, como por ej., un gel o un soporte rgido,
como por ej., vidrio, slica o un polmero orgnico INTERPRETACIN DE LOS
entrecruzado compatible con la fase mvil. CROMATOGRAMAS
- Detector. Generalmente los detectores se
En la Figura 1 se representa una separacin
basan en propiedades luminiscentes, refractarias o
cromatogrfica tpica de dos sustancias; 1 y 2,
fotomtricas (ver Detectores en Cromatografa de
donde t 1 y t 2 son los tiempos de retencin,
lquidos de alta eficacia). [NOTA: si fuera
respectivamente; h, h/2 y W h/2 son la altura, la
necesario, se puede conectar a un colector
mitad de la altura y el ancho a la mitad de la altura,
automtico de fracciones]. respectivamente, para el pico 1; W 1 y W 2 son los
Procedimiento - Rellenar la columna segn se anchos de los picos 1 y 2 en la lnea de base,
especifica en la monografa correspondiente. Las respectivamente.
caractersticas de elusin de un compuesto en un La coincidencia de los tiempos de retencin de
sistema cromatogrfico determinado se puede una muestra y una Sustancia de referencia en un
describir por el coeficiente de distribucin, K D , el nico sistema cromatogrfico puede emplearse
cual se calcula por la frmula siguiente: como una caracterstica en la construccin de un
perfil de identidad, pero es insuficiente para
( V I - V O )/( V T - V O )
establecer la identidad. Los tiempos de retencin
en la cual V O es el volumen de retencin para la absolutos de un compuesto dado varan de un
sustancia no retenida, V T es el volumen de cromatograma al prximo.
retencin para la sustancia que tiene acceso total a [NOTA: en las siguientes frmulas, tanto los
todos los poros del material de relleno y V I es el volmenes de retencin como las separaciones
volumen de retencin para la sustancia a ensayar. lineales son directamente proporcionales al tiempo
Medir cada volumen de retencin desde el de retencin y pueden sustituirse en las frmulas].
momento de la aplicacin hasta el momento de cada Normalmente las comparaciones se hacen en
pico mximo en particular. funcin de la retencin relativa, a, que se calcula
Determinacin de la composicin relativa de por la frmula siguiente:
cada componente en la mezcla - Proceder para la
separacin segn se especifica en la monografa D
t 2 t 0
correspondiente. Medir las respuestas de los picos t1 t 0
principales. Si todos los componentes de la muestra
poseen propiedades fisicoqumicas equivalentes, en la cual t 2 y t 1 son los tiempos de retencin de la
como por ej., la absortividad, calcular la cantidad muestra y del estndar respectivamente, medidos
relativa de cada componente dividiendo la respuesta desde el punto de inyeccin, en condiciones
del pico respectivo por la suma de las respuestas de experimentales idnticas en la misma columna y t O
los picos de todas las sustancias de ensayo. Si los es el tiempo de retencin de una sustancia no
componentes de la muestra no poseen propiedades retenida, como por ej., metano en el caso de la
fisicoqumicas equivalentes calcular el contenido cromatografa de gases.
empleando curvas de calibracin obtenidas segn se El nmero de platos tericos N, es una medida
especifica en la monografa correspondiente. de la eficiencia de la columna. Para los picos
Determinacin de pesos moleculares - gaussianos, se calcula por la frmula siguiente:
Determinar los pesos moleculares de los
2
componentes de la muestra comparando con los t
estndar de calibracin especificados en las N 16
monografas correspondientes. Graficar los W
volmenes de retencin de los estndar de
calibracin en funcin del logaritmo de sus pesos 2
t
moleculares. Trazar la lnea recta que mejor se N 5,54
ajuste a los puntos graficados dentro de los lmites W1 / 2
de exclusin total y de permeacin total. Los pesos
moleculares de los componentes de la muestra se en la cual t es el tiempo de retencin de la sustancia,
estiman a partir de la curva de calibracin. W es el ancho del pico en su base, obtenido al
Determinacin de la distribucin de pesos extrapolar los lados del pico con la lnea de base y
moleculares en polmeros - Proceder segn se t es la diferencia entre el tiempo de retencin de la
especifica en las monografas correspondientes. sustancia y el tiempo de elusin de una sustancia
que no es retenida (tiempo muerto). El ancho
mximo a media altura, W 1/2 , es obtenido respuesta del pico de la sustancia. Es preferible, sin
directamente por integradores electrnicos. embargo, comparar los picos de impurezas con el
El valor de N depende de la sustancia cromatograma de un estndar a una concentracin
cromatografiada, as como de las condiciones similar. El estndar puede ser la misma sustancia a
operativas, como por ej., la fase mvil, el caudal del un nivel que corresponde, como por ej., 0,5% de
gas transportador, la temperatura, la calidad y impureza, o en el caso de las impurezas txicas o de
uniformidad de la fase estacionaria y, para las impurezas indicadoras, un estndar de la impureza
columnas capilares, el espesor de la pelcula de fase misma.
estacionaria, el dimetro y la longitud de la El factor de capacidad k, est relacionado con
columna. el coeficiente de distribucin de la sustancia a
Para la separacin de dos sustancias en una ensayar entre ambas fases. El factor de capacidad
mezcla, la resolucin, R, es determinada por la depende de la naturaleza qumica de la sustancia;
frmula siguiente: del rea, naturaleza y cantidad de fase estacionaria;
de la temperatura de la columna y del caudal de la
t 2 t1 fase mvil. Cada sustancia tiene un factor de
R
1 / 2W2 W1
capacidad caracterstico para un conjunto especfico
de condiciones experimentales. La separacin
cromatogrfica slo se produce si las sustancias
en la cual t 2 y t 1 son los tiempos de retencin de los involucradas poseen diferentes factores de
dos componentes y W 2 y W 1 son los anchos de la capacidad. El factor de capacidad se calcula por la
base de los picos correspondientes, obtenidos al frmula siguiente:
extrapolar los lados con la lnea de base.
La respuesta y la altura del pico son
k
t n t 0
generalmente proporcionales a la cantidad de
sustancia eluida. En general se miden las t0
respuestas de los picos, sin embargo, la medicin de
las alturas pueden ser ms exactas que la respuesta en la cual t n es el tiempo requerido para que la
cuando se consideran picos parcialmente sustancia a ensayar eluya a travs de la columna
superpuestos. (tiempo de retencin) y t o es el tiempo de elusin
El ensayo de pureza cromatogrfica de una de una sustancia que no es retenida (tiempo
materia prima se basa en la determinacin de picos muerto).
de impurezas y se expresa como un porcentaje de la
APTITUD DEL SISTEMA aptas para realizar el ensayo. Para estos ensayos se
considera que el equipo, las operaciones analticas y
Los ensayos de aptitud del sistema forman parte
de los mtodos cromatogrficos lquido y de gases. las muestras a ensayar constituyen un sistema nico
Se emplean para comprobar que la resolucin y la que puede evaluarse corno tal.
Los parmetros de aptitud del sistema se
reproducibilidad del sistema cromatogrfico son
determinan para el pico de la sustancia, a menos
que se especifique de otro modo en la monografa requisito de la desviacin estndar relativa es mayor
correspondiente. de 2,0 %. La desviacin estndar relativa S R , se
Si es necesario, pueden realizarse ajustes en las calcula segn la frmula siguiente:
x
condiciones operativas para cumplir con los 2
requisitos de aptitud del sistema, entre ellos, las 100 i X
proporciones de los componentes de la fase mvil y SR
X n 1
el caudal.
La resolucin R, es una funcin de la eficiencia
El factor de asimetra F, una medida de la
de la columna N, y se especifica para asegurar que
las sustancias que eluyan muy cercanas se resuelvan simetra del pico, es 1 para los picos perfectamente
entre s y para asegurar que los estndares internos simtricos y su valor aumenta a medida que la
asimetra es ms pronunciada (ver Figura 2). En
se resuelvan de las sustancias a ensayar. La
algunos casos, pueden observarse valores menores
eficiencia de la columna puede especificarse
de la unidad. Como consecuencia de la asimetra
tambin como un requisito de aptitud del sistema,
del pico, la integracin y la precisin se tornan
especialmente si hay un solo pico de inters en el
cromatograma, sin embargo, el valor aislado de menos confiables.
eficiencia no puede asegurar la resolucin para el EI factor de asimetra se calcula por la frmula
siguiente:
sistema en estudio. La eficiencia de la columna es
una medida de la agudeza de los picos, importante W0, 05
para detectar componentes en baja concentracin. F
2f
Para evaluar si se cumplen los requisitos de
aptitud del sistema se realizan inyecciones repetidas
de la Preparacin estndar empleada en la en la cual W 0,05 es el ancho del pico al 5 % de altura
Valoracin u otra Solucin estndar. A menos que y f es la distancia entre el borde simtrico del pico y
se especifique de otro modo en la monografa el centro del mismo medida al 5 % de la altura.
correspondiente, para calcular la desviacin Estos datos se obtienen a partir de inyecciones
estndar relativa, S R , se emplean los datos de cinco repetidas del estndar u otras soluciones segn se
inyecciones repetidas del estndar si el requisito es especifique en la monografa correspondiente.
2,0 % o menor, y seis inyecciones repetidas si el
Existen dos mtodos diferentes basados en la agua. En el otro, el iodo es producido por la
reaccin con el iodo: uno es la titulacin electrlisis de un reactivo de Karl Fischer que
volumtrica y el otro es un mtodo de titulacin contiene al ion ioduro. El contenido de agua en
culombimtrica. En el primero, el iodo se una muestra puede ser determinado midiendo la
disuelve en el reactivo y el contenido de agua es cantidad de electricidad que se requiere para la
determinado midiendo la cantidad de iodo produccin de iodo durante la titulacin.
consumido como resultado de la reaccin con el
2I- o I 2 + 2e-
Procedimiento - Transferir al baln de un color azul claro y las paredes del baln queden
digestin A, una cantidad de sustancia en ensayo, libres de residuo carbonoso. Agregar al producto
exactamente pesada o medida, de tal manera que de la digestin, 70 ml de agua, enfriar y conectar el
contenga entre 2 y 3 mg de nitrgeno. Agregar 1 g baln de digestin al aparato de destilacin.
de una mezcla pulverizada de sulfato de potasio y Agregar a travs del embudo E, 30 ml de hidrxido
sulfato de cprico (10:1) y arrastrar hacia el interior de sodio al 40 %, lavar el embudo con 10 ml de
las partculas de sustancia que se hayan adherido al agua, cerrar perfectamente el robinete G y
cuello del baln, con ayuda de agua. Agregar 7 ml comenzar inmediatamente la destilacin con vapor.
de cido sulfrico, dejndolos resbalar por las Recolectar el destilado sobre 15 ml de una solucin
paredes del baln, y luego, mientras se agita el acuosa de cido brico al 4 %, a la cual se han
baln con movimiento circular, agregar agregado tres gotas de solucin de rojo metilo (SR)
cuidadosamente 1 ml de perxido de hidrgeno al como indicador y cantidad suficiente de agua, hasta
30 % a lo largo de las paredes del baln. [NOTA: cubrir el extremo abierto del tubo del refrigerante.
no debe agregarse el perxido de hidrgeno durante Continuar la destilacin hasta obtener entre 80 y
el proceso de digestin]. Calentar el baln 100 ml de destilado. Retirar el recipiente de
directamente sobre la llama del mechero o sobre un absorcin, lavar el extremo del tubo del refrigerante
calentador elctrico hasta que la solucin adquiera con una pequea porcin de agua y valorar el
destilado con cido sulfrico 0,01 N (SV). Realizar 0,1 N, eligindose la concentracin de cido
una determinacin con un blanco y hacer las apropiada de modo que se consuman por lo menos
correcciones necesarias. Cada mililitro de cido 15 ml en la titulacin. Si el peso total de la materia
sulfrico 0,01 N (SV) equivale a 0,1401 mg de seca empleada es mayor a 0,1 g, aumentar
nitrgeno. Si la cantidad de sustancia en ensayo proporcionalmente las cantidades de cido sulfrico
contiene ms de 2 a 3 mg de nitrgeno, se debe y de hidrxido de sodio.
emplear para la titulacin cido sulfrico 0,02 o
210. DETERMINACIN DEL CONTENIDO EXTRABLE DEL
ENVASE
Los siguientes ensayos estn diseados para en la Tabla son generalmente suficientes para
garantizar que las soluciones y suspensiones orales permitir la extraccin y administracin de los
contenidas en envases multidosis, dispensadas volmenes declarados en el rtulo.
como preparaciones lquidas o para reconstituir, y Procedimiento - Seleccionar uno o ms envases
las soluciones inyectables en envases monodosis o si el volumen es mayor o igual a 10 ml, tres o ms
multidosis, cuando se extraen de su envase original, envases si es mayor a 3 ml y menor a 10 ml, y cinco
proporcionen el volumen declarado en el rtulo del o ms envases si es menor o igual a 3 ml. Extraer
producto. individualmente el contenido de cada uno de los
Para determinar el volumen extrable del envase, envases seleccionados con una jeringa hipodrmica
seleccionar no menos de treinta envases y proceder seca cuya capacidad no exceda tres veces el
segn se indica para la forma farmacutica volumen a ser medido, provista de una aguja de
correspondiente. 0,8 mm de dimetro interno y de no menos de
2,5 cm de largo. Eliminar las burbujas de aire de la
SOLUCIONES Y SUSPENSIONES ORALES, jeringa y de la aguja, verter el contenido de la
JARABES Y POLVOS EN ENVASES jeringa sin vaciar la aguja en una probeta graduada
MULTIDOSIS, O SUSPENSIONES ORALES y de capacidad tal que el volumen a medir ocupe
PARA RECONSTITUIR por lo menos el 40 % de su volumen.
Procedimiento - Seleccionar diez envases y Alternativamente, el contenido de la jeringa
proceder segn se indica en el rtulo. Transferir el puede ser transferido a un vaso de precipitados
contenido de cada envase a sendas probetas seco, previamente pesado. Calcular el volumen
graduadas y de capacidad tal que no exceda dos extrado, en mililitros, como el peso, en gramos, de
veces y media el volumen a medir, evitando la inyectable dividido por su densidad, previamente
formacin de burbujas y permitiendo que drenen determinada.
durante un perodo no mayor de 30 minutos. El contenido de dos, tres o cuatro envases de 1
Cuando el lquido quede libre de burbujas de aire, 2 ml puede combinarse para la medicin,
medir el volumen de cada uno. empleando una jeringa seca para cada envase. Para
determinar el contenido de los envases de 10 ml o
Interpretacin - El volumen promedio de la mayores, abrir los mismos y vaciar sus contenidos
solucin, suspensin o jarabe obtenido a partir de directamente en una probeta o en un vaso de
los diez envases no debe ser menor de 100% del precipitados previamente pesado.
volumen declarado en el rtulo y el volumen de El volumen no debe ser menor que el declarado
ningn envase debe ser menor de 95 %. Debe en el rtulo; en el caso de envases examinados
repetirse el ensayo con veinte envases adicionales individualmente o en el caso de envases de 1
cuando: 2 ml, no debe ser menor que la suma de los
a) El volumen promedio es menor de 100 % del volmenes declarados de los envases seleccionados.
declarado en el rtulo, pero el volumen de ningn Para los inyectables en envases multidosis cuyo
envase es menor de 95 % de la cantidad declarada; rtulo declare que se puede extraer un nmero
b) El volumen de no ms de un envase es menor especfico de dosis de un determinado volumen,
de 95 %; pero no menor de 90 % de volumen proceder segn se indic anteriormente empleando
declarado en el rtulo. un nmero de jeringas igual al nmero de dosis
El volumen promedio obtenido a partir de los especificadas. El volumen suministrado por cada
treinta envases no debe ser menor de 100 % del jeringa no debe ser menor al de la dosis
volumen declarado en el rtulo y el volumen de no especificada.
ms de uno de los treinta envases puede ser menor Para los inyectables oleosos, calentar los
de 95 %, pero no debe ser menor de 90 % del envases a una temperatura no mayor a 37 C y
volumen declarado en el rtulo. agitarlos cuidadosamente antes de extraer el
contenido. Enfriar a 25 C antes de medir el
SOLUCIONES Y SUSPENSIONES
volumen extrado.
INYECTABLES
Para inyectables en jeringas prellenadas, armar
Los envases de soluciones y suspensiones el envase con los accesorios necesarios, como por
inyectables deben llenarse con un ligero exceso de ej., aguja o mbolo. Siguiendo el procedimiento
volumen. Los excesos de volmenes recomendados descrito anteriormente y sin vaciar la aguja,
presionar el mbolo lenta y constantemente para Para soluciones parenterales de gran volumen,
transferir el contenido de cada envase a un vaso de seleccionar un envase y transferir el contenido en
precipitados seco. Pesar y calcular el volumen una probeta graduada y de capacidad tal que el
extrable. El volumen de cada envase no es menor volumen a medir ocupe por lo menos el 40 % de su
que el declarado en el rtulo. volumen. El volumen no debe ser menor que el
declarado en el rtulo.
Tabla.
Volumen declarado Exceso de volumen recomendado
(ml) Lquidos mviles Lquidos viscosos
0,5 0,10 ml 0,12 ml
1,0 0,10 ml 0,15 ml
2,0 0,15 ml 0,25 ml
5,0 0,30 ml 0,50 ml
10,0 0,50 ml 0,70 ml
20,0 0,60 ml 0,90 ml
30,0 0,80 ml 1,20 ml
50,0 o ms 2% 3%
220. DETERMINACIN DEL CONTENIDO NETO DEL ENVASE
Los siguientes ensayos y especificaciones se Eliminar cualquier residuo con solventes
aplican a productos tales como: cremas, geles, apropiados y lavar con porciones de metanol.
jaleas, lociones, ungentos, pastas, polvos y Calentar a 100 C durante 5 minutos el envase, la
aerosoles, incluidos los de vlvula continua y los vlvula y todas las partes asociadas. Enfriar y pesar
dosificadores, presurizados y no presurizados. nuevamente cada envase completo. La diferencia
entre el peso original y el peso del envase vaco es
Procedimiento para formas farmacuticas
el peso del contenido neto del envase. Determinar
con excepcin de aerosoles
el peso del contenido neto para cada envase
Para envases rotulados por peso. ensayado. Los requisitos se cumplen si el
Seleccionar diez envases llenos y quitar todas contenido neto de cada uno de los diez envases no
las etiquetas que puedan afectar la determinacin es menor que la cantidad declarada en el rtulo.
del contenido neto del envase. Limpiar y secar
exteriormente los envases y pesar cada envase
individualmente. Cortar cada envase y extraer
cuantitativamente su contenido lavndolo con un
solvente apropiado, si fuera necesario. Secar y
pesar nuevamente cada uno de los envases vacos
junto con sus partes correspondientes. La
diferencia entre el peso original y el peso del envase
vaco es el peso del contenido neto del envase.
Para envases rotulados por volumen.
Verter el contenido de diez envases en sendas
probetas y dejar que drenen completamente.
Determinar el volumen de cada uno de los diez
envases.
Interpretacin - El contenido neto promedio de
los diez envases no debe ser menor que el declarado
y el contenido neto de cualquier envase individual
no debe ser menor de 90 % de la cantidad declarada
cuando la cantidad declarada es menor o igual a
60 g 60 ml; o no menor de 95 % de la cantidad
declarada cuando la cantidad declarada es mayor a
60 g 60 ml.
Si no se cumple este requisito, determinar el
contenido de veinte envases adicionales. El
contenido promedio de los treinta envases no debe
ser menor de la cantidad declarada y el contenido
neto de no ms de uno de los treinta envases puede
ser menor de 90 % de la cantidad declarada cuando
la cantidad declarada es menor o igual a 60 g
60 ml; o menor de 95 % de la cantidad declarada
cuando la cantidad declarada es mayor a 60 g
60 ml.
Procedimiento para aerosoles
Seleccionar diez envases llenos y quitar todas
las etiquetas que puedan afectar la determinacin
del contenido neto del envase. Limpiar y secar
exteriormente los envases y pesar cada envase
individualmente. Retirar el contenido de cada
envase empleando una tcnica apropiada, como por
ej., enfriar para reducir la presin interna, retirar la
vlvula y verter.
230. DETERMINACIN DEL NDICE DE REFRACCIN
El ndice de refraccin, n, de una sustancia
lquida es el cociente entre el seno del ngulo de
incidencia, i, de un rayo de luz en el aire, con
respecto al seno del ngulo de refraccin, r, en el
lquido y se expresa por:
seni
n
senr
El ndice de refraccin es una constante fsica
que se emplea a menudo como criterio de pureza.
Muchas de las especificaciones de ndice de
refraccin en esta Farmacopea se definen a
temperaturas distintas de 25 C a pesar de ser esta
la temperatura para las mediciones farmacopeicas.
La temperatura debe ajustarse cuidadosamente y
mantenerse constante a 0,2 C, ya que el ndice de
refraccin vara significativamente con la
temperatura.
Los valores de ndice de refraccin dados en
esta Farmacopea son para la lnea D del sodio
(doblete a 589,0 y 589,6 nm). La mayora de los
aparatos disponibles estn diseados para ser
empleados con luz blanca pero se calibran para dar
el ndice de refraccin en funcin de la lnea D del
sodio.
Como no es sencillo medir directamente los
ngulos de incidencia y de refraccin, se han
desarrollado sistemas pticos especiales que se
basan en la medida del ngulo lmite de reflexin
total.
Un aparato universalmente difundido que opera
bajo este principio es el refractmetro de Abbe.
El ndice de refraccin (comnmente entre
1,3000 y 1,7000) puede ser ledo directamente al
tercer decimal y estimado al cuarto decimal.
Para lograr la exactitud terica de 0,0001, es
necesario calibrar el aparato contra un estndar
provisto por el fabricante, verificar con frecuencia
el control de temperatura y la limpieza del aparato
determinando el ndice de refraccin del agua, que
corresponde a 1,3330 a 20 C y 1,3325 a 25 C.
240. DETERMINACIN DEL INTERVALO DE DESTILACIN
Para determinar el intervalo de temperaturas sobre ella, la porcin del baln que queda por
dentro del cual un lquido destila o el porcentaje debajo de la superficie superior del material
de lquido que destila entre dos temperaturas aislante tenga una capacidad de 3 a 4 ml.
especificadas, emplear el Mtodo I o el Mtodo II Receptor - Una probeta de 100 ml graduada
segn se especifique en la monografa en divisiones de 1 ml.
correspondiente. El lmite inferior del intervalo es Termmetro - Para evitar la necesidad de
la temperatura indicada por el termmetro cuando correccin por columna emergente, se recomienda
la primera gota del condensado cae del extremo un termmetro calibrado, de inmersin parcial con
del refrigerante y el lmite superior es el punto subdivisiones no mayores de 0,2 C (ver 720.
seco, es decir, la temperatura a la cual la ltima Termmetros). Cuando se coloca en posicin, la
gota de lquido se evapora del fondo del matraz de columna queda ubicada en el centro del cuello y la
destilacin, sin tener en cuenta el lquido que parte superior del bulbo est a la altura del borde
pueda quedar en las paredes del matraz, o la inferior de la salida lateral.
temperatura observada al recolectarse la Fuente de calor - Un mechero de Bunsen, un
proporcin especificada en la monografa calentador o un manto elctrico con una capacidad
correspondiente. de ajuste comparable a un mechero de Bunsen.
[NOTA: enfriar todos los lquidos que destilan
Procedimiento - Armar el aparato y transferir
por debajo de 80 C, entre 10 y 15 C antes de
al baln 25 ml del lquido a destilar, evitando que
medir la muestra a destilar].
el lquido penetre por la salida lateral. Insertar el
Mtodo I termmetro, proteger el mechero y el baln de
corrientes de aire externas y aplicar calor,
Aparato - Consta de: regulndolo para que transcurran entre 5 y
Baln de destilacin - De vidrio resistente al 10 minutos hasta que la primera gota del destilado
calor, de 50 a 60 ml, con una longitud total de 10 caiga del refrigerante. Continuar la destilacin
a 12 cm y un cuello de 14 a 16 mm de dimetro con un flujo de 4 a 5 ml de destilado por minuto,
interno. A media distancia del cuello, recolectando el destilado en el receptor. Aplicar
aproximadamente a 12 cm del fondo del baln, la correccin por columna emergente, si fuera
posee una salida lateral de 10 a 12 cm de largo y necesario y corregir la temperatura observada si la
5 mm de dimetro interno, que forma un ngulo presin baromtrica no fuera la normal (760 mm
de 70 a 75 con la parte inferior del cuello. Hg), empleando la frmula siguiente:
Refrigerante - De vidrio recto, de 55 a 60 cm
de longitud con una camisa de enfriamiento de t1 t 2 K 760 b
aproximadamente 40 cm de longitud o un
refrigerante de otro diseo pero con una capacidad en la cual t 1 es la temperatura corregida, t 2 es la
de intercambio equivalente. El extremo inferior temperatura observada, b es la presin
del refrigerante puede ser curvo para que acte baromtrica, en mm Hg, durante la destilacin y K
como tubo colector o puede conectarse a un es el factor de correccin indicado en la Tabla, a
adaptador curvo que cumple con el mismo menos que se especifique de otro modo en la
propsito. monografa correspondiente.
Placas aislantes - Dos placas aislantes
cuadradas, de 14 a 16 cm de lado, de 5 a 7 mm de Mtodo II
espesor, apropiadas para concentrar el calor en la Aparato - Emplear un aparato similar al
parte inferior del matraz. Cada placa tiene un especificado para el Mtodo I, excepto que el
orificio en su centro y las dos placas difieren slo baln de destilacin es de 200 ml, con un cuello
en los dimetros de los orificios, que son de 4 y de 17 a 19 cm de largo y 20 a 22 mm de dimetro
10 cm, respectivamente. Cuando se emplean, las interno.
placas se colocan una sobre la otra en un trpode u
Procedimiento - Proceder segn se indica en
otro soporte apropiado, con la placa que tiene el
Mtodo I, pero colocaren el baln 100 ml del
orificio ms grande en la parte superior. La
lquido a destilar.
perforacin de la placa aislante superior, si sta se
emplea, debe ser tal que cuando el baln se fija
Tabla. Variacin del factor de correccin con la temperatura.
pH x pH r
E x E r obtener 1 litro.
Tetraborato de sodio 0,01 M - Disolver 3,80 g
k de Na 2 B 4 O 7 . 10H 2 O en agua hasta obtener 1 litro.
en la cual pH x es el pH de la Solucin muestra, pH r Proteger de la absorcin de dixido de carbono.
es el pH de la Solucin de calibracin, E x y E r son Hidrxido de calcio saturado a 25 C - Agitar
los potenciales medidos cuando la celda contiene la un exceso de hidrxido de calcio con agua y
Solucin muestra y la Solucin de calibracin, decantar a 25 C antes de emplear. Proteger de la
respectivamente. El valor k es el cambio en el absorcin de dixido de carbono.
potencial por cada unidad de pH y es tericamente
[0,05916 + 0,000198(t 25 C)] voltios a la Debido a las variaciones en la naturaleza y
temperatura t. operacin de los medidores del pH disponibles, no
Los valores de pH medidos de esta manera no es prctico dar instrucciones universalmente
corresponden exactamente a los obtenidos mediante aplicables para las determinaciones
potenciomtricas del pH. Los principios generales
la definicin clsica pH log a H . Cuanto dados a continuacin s deben ajustar a las
mayor es la similitud entre la composicin de la indicaciones provistas para cada aparato por su
Solucin muestra y la composicin de la Solucin fabricante. Antes de su empleo, examinar los
de calibracin, el pH operativo se acerca ms al pH electrodos y verificar si est presente el puente
terico. salino.
Conviene destacar que cuando se calibra un Para calibrar el medidor del pH seleccionar dos
medidor del pH empleando una Solucin de Soluciones de calibracin cuya diferencia de pH no
calibracin (solucin reguladora acuosa) y luego se exceda 4 unidades, de manera tal que el pH a
lo emplea para medir el pH de una solucin no determinar est comprendido entre ambos valores.
acuosa o una suspensin, se modifican la constante Llenar un recipiente con una de las Soluciones de
de ionizacin del cido o la base, la constante calibracin a la temperatura a la cual se medir la
dielctrica del medio, el potencial de contacto de Solucin muestra. Fijar el control de temperatura a
los lquidos de la pila (que puede ocasionar errores la temperatura de la solucin a medir y ajustar el
de aproximadamente 1 unidad de pH), as como la control de calibracin de manera que el valor del
respuesta a los iones hidrgeno del electrodo pH observado sea idntico al tabulado. Lavar los
empleado. Por estas razones, los valores obtenidos electrodos y el recipiente con varias porciones de la
con estas soluciones de carcter parcialmente segunda Solucin de calibracin, llenar el
acuoso, pueden considerarse solamente como recipiente con esa solucin a la misma temperatura
valores aparentes de pH. que se debe medir la Solucin muestra. El pH de la
Soluciones de calibracin - Se preparan segn segunda Solucin de calibracin debe estar dentro
se indica en la Tabla. Estas soluciones se deben de 0,07 unidades de pH del valor tabulado. Si se
almacenar en envases qumicamente resistentes, de observa una desviacin mayor, examinar los
cierre perfecto, como por ej., botellas de vidrio electrodos y reemplazarlos si presentan defectos.
Ajustar la pendiente o control de temperatura de Solucin muestra. Posteriormente, llenar el
manera que el valor de pH observado sea idntico al recipiente con esta solucin y efectuar la medicin
tabulado. Repetir la calibracin hasta que ambas del pH. Emplear agua para solubilizar o diluir la
Soluciones de calibracin den valores de pH dentro muestra para las determinaciones del pH.
de las 0,02 unidades del valor tabulado, sin ajuste Cuando sea suficiente un valor aproximado de
adicional de los controles. Cuando el sistema est pH, se pueden emplear indicadores y/o papeles
funcionando en forma apropiada, lavar los indicadores (ver Indicadores, Papeles y Papeles
electrodos y el recipiente varias veces con la indicadores).
1
Se pueden emplear Soluciones de calibracin de medidores del pH disponibles comercialmente,
estandarizadas por mtodos reconocidos, rotuladas con un valor de pH exacto a 0,01 unidad de pH y que estn
acompaadas de una tabla con los valores de pH a distintas temperaturas.
260. DETERMINACIN DEL PUNTO DE FUSIN
Los puntos o intervalos de fusin que figuran vstago del termmetro principal en un punto
en esta Farmacopea se definen como las equidistante de la superficie del bao y de la
temperaturas o intervalos de temperaturas dentro divisin correspondiente al punto de fusin
de las cuales se observa la aglomeracin y luego esperado.
la fusin completa de los slidos cuando se Calentar el bao con la llama del mechero
procede segn los mtodos indicados a hasta alcanzar una temperatura de 30 C debajo
continuacin. del punto de fusin esperado. Introducir el
termmetro con el capilar adherido y continuar el
Mtodo I
calentamiento de manera tal que la temperatura se
Para muestras que se reducen fcilmente a eleve a una velocidad de unos 3 C por minuto,
polvo. hasta alcanzar una temperatura de 3 C por debajo
Aparato - Consta de un tubo de vidrio de del punto de fusin esperado. A partir de ese
fondo semiesfrico de 30 a 40 mm de dimetro instante, se debe elevar la temperatura a razn de
interno y de 12 cm de longitud, el espesor de las 1 C por minuto aproximadamente, hasta que
paredes no es mayor a 1,5 mm y el vidrio debe ser finalice la fusin. La temperatura a la cual se
apto para exponerse directamente a la llama del observa que la columna de la muestra comienza a
mechero de Bunsen. Para homogeneizar la contraerse de manera franca contra las paredes del
temperatura a este recipiente, se le adapta un tubo, en un punto cualquiera, se define como el
agitador construido con una varilla de vidrio de comienzo de la fusin; y la temperatura a la cual
2 mm de dimetro externo. Ambos termmetros, la sustancia se vuelve completamente lquida, se
el principal que abarca la escala deseada de define como trmino de la fusin. Agitar
temperatura y el auxiliar para correccin de la continuamente el bao durante el calentamiento.
columna, deben responder a las consideraciones Para establecer exactamente el resultado
generales (ver 720. Termmetros). Consta, obtenido como intervalo de fusin conviene
adems, de un tubo capilar de vidrio, cerrado en repetir la determinacin. Para ello, dejar enfriar el
uno de sus extremos, de aproximadamente 9 cm bao hasta 10 C por debajo del punto de fusin o
de longitud y de 0,8 a 1,2 mm de dimetro hasta una temperatura ms baja y repetir el
interno, cuyas paredes tienen un espesor de 0,2 a mtodo descrito empleando nuevos tubos
0,3 mm. capilares y nuevas porciones de muestra. Anotar
Procedimiento - Reducir la muestra a polvo la temperatura registrada por el termmetro
fino y secarla en un desecador al vaco sobre un auxiliar al terminar la fusin de la muestra, si
desecante apropiado durante 24 horas o en las fuera necesario, aplicar la correccin por columna
condiciones especificadas en la monografa emergente (ver 720. Termmetros) empleando la
correspondiente. frmula siguiente:
Elegir un bao apropiado para la temperatura
de fusin que va a determinarse y llenar el tc 0,00016 u N T t
recipiente destinado al bao de calefaccin hasta
en la cual t c , representa la correccin que debe
un nivel que permita sumergir el termmetro, de
agregarse al punto de fusin observado, N el
modo que la porcin superior del bulbo quede 2 a
nmero de grados de la columna del termmetro
3 cm debajo de la superficie del bao y el extremo
principal emergente del bao, T la temperatura al
inferior a una distancia aproximadamente igual
terminar la fusin y t la temperatura registrada por
del fondo del recipiente.
el termmetro auxiliar. La correccin se agrega a
Cargar el tubo capilar seco con suficiente
la lectura del termmetro principal.
cantidad de polvo hasta formar una columna de
Cuando se trata de muestras que funden a
2,5 a 3,5 mm de altura, luego de haberlo
temperatura elevada, la determinacin es ms
comprimido golpendolo moderadamente sobre
exacta si el capilar no se introduce en el bao de
una superficie slida. Unir el tubo capilar al
calefaccin hasta que ste se encuentre a una
termmetro, ambos humedecidos con el lquido
temperatura de 10 C por debajo del punto de
del bao. Ajustar su altura, de modo que la
fusin esperado. Esto es necesario cuando la
muestra contenida en el capilar quede junto al
sustancia pueda descomponerse al calentarla largo
bulbo del termmetro.
tiempo.
Adaptar el termmetro auxiliar de modo que el
Los lquidos empleados como baos de
centro del bulbo quede lo ms cercano posible al
calefaccin apropiados son la vaselina lquida o
un aceite de silicona, debindose considerar para
su eleccin la temperatura a determinar.
Mtodo II
Este mtodo se emplea para muestras que no
se reducen fcilmente a polvo.
Procedimiento - Fundir cuidadosamente la
muestra a la temperatura ms baja posible e
introducir el material fundido en un capilar abierto
en ambos extremos, hasta formar una columna de
unos 10 mm de altura. Enfriar el capilar cargado
a una temperatura menor o igual a 10 C durante
aproximadamente 24 horas o a 0 C durante al
menos 2 horas. Unir el capilar al termmetro y
cuidar que la muestra en el capilar quede junto al
bulbo del termmetro. Introducir en un bao de
agua y calentar, segn se indica en el Mtodo I,
excepto que al llegar la temperatura a
aproximadamente 5 C debajo del punto de fusin
esperado, se aumenta la temperatura a razn de
medio grado por minuto. Se toma como punto de
fusin la temperatura a la cual la muestra
comienza a ascender dentro del tubo capilar.
Mtodo III
Este mtodo se emplea para el ensayo de
vaselina.
Procedimiento - Fundir la muestra, agitando
hasta alcanzar una temperatura de 90 a 92 C y
luego dejar enfriar la sustancia fundida hasta una
temperatura de 8 a 10 C sobre el punto de fusin
calculado. Enfriar hasta 5 C el bulbo de un
termmetro, secar y, mientras est an fro,
sumergirlo en la muestra fundida hasta la mitad
del bulbo aproximadamente. Retirar
inmediatamente y sostener en posicin vertical,
hasta que la superficie de la muestra depositada
sobre el bulbo solidifique, introducir
aproximadamente 5 minutos en un bao de agua a
una temperatura que no exceda los 16 C.
Adaptar el termmetro dentro de un tubo de
ensayo, por medio de un corcho, de modo que su
extremo inferior quede 15 mm por encima del
fondo del tubo de ensayo. Suspender el tubo de
ensayo en un bao de agua a una temperatura de
16 C y elevar la temperatura del bao hasta
30 C, a razn de 2 C por minuto y luego a razn
de 1 C por minuto, hasta que la primera gota se
desprenda del termmetro. La temperatura a la
cual esto sucede representa el punto de fusin.
Para cada determinacin emplear una porcin
recin fundida de la muestra. Si la variacin de
tres determinaciones es menor de 1 C, tomar el
promedio. Si la variacin es mayor de 1 C
realizar dos determinaciones ms y promediar las
cinco.
270. DETERMINACIN DEL RESIDUO DE IGNICIN
Pesar exactamente entre 1 y 2 g de muestra o je del residuo. Continuar la ignicin hasta peso
la cantidad especificada en la monografa corres- constante, a menos que se especifique de otro
pondiente en un crisol apropiado, previamente modo en la monografa correspondiente.
sometido a ignicin, enfriado y pesado. Realizar la ignicin bajo una campana extrac-
Calentar con un mechero, suavemente al prin- tora bien ventilada, pero protegida de las corrien-
cipio y luego con mayor intensidad, hasta que la tes de aire y a la menor temperatura necesaria
muestra se carbonice totalmente, evitando pro- para lograr la combustin completa del residuo
yecciones y enfriar. Humedecer el residuo con carbonoso. Puede emplearse una mufla, si se
1 ml de cido sulfrico, a menos que se especifi- desea, y su uso se recomienda para la ignicin
que de otro modo en la monografa correspon- final a 800 r 50 C.
diente. Calentar suavemente hasta que no se Comprobar la exactitud de la medicin y el
desprendan ms vapores blancos y someter a sistema de circuitos de la mufla mediante el con-
ignicin a 800 r 50 C a menos que se especifi- trol de la temperatura en diferentes puntos del
que otra temperatura en la monografa correspon- horno. Colocar la muestra en la posicin ms
diente, hasta que el residuo carbonoso se consu- apropiada de acuerdo con las condiciones del
ma. Enfriar en un desecador, pesar y calcular el mtodo a aplicar. La variacin de temperatura
porcentaje del residuo. Si la cantidad de residuo tolerada es de r 25 C para cada punto evaluado.
obtenido es mayor al lmite especificado en la La calibracin de la mufla debe llevarse a ca-
monografa correspondiente, humedecer nueva- bo mediante el empleo de un medidor de tempera-
mente el residuo con 1 ml de cido sulfrico, tura digital y una termocupla validada.
calentar y someter a ignicin como se indic
anteriormente y nuevamente calcular el porcenta-
280. DISOLUCION COMPLETA
Colocar la cantidad de sustancia especificada en producto, llenar la probeta. Agitar suavemente para
la monografa correspondiente en una probeta de favorecer la disolucin: la solucin no debe ser
vidrio de 10 ml, con tapa, perfectamente limpia. menos transparente que un volumen igual del
Empleando el solvente especificado en la mismo solvente contenido en una probeta similar
monografa correspondiente o en el rtulo del examinada de la misma manera.
290. DISTRIBUCIN DEL TAMAO DE PARTCULA EN
POLVOS
El tamizado es el mtodo generalmente empleado se emplea la denominacin recomendada por la
para determinar la granulometra de los polvos de uso norma ISO 3310-1990.
farmacutico. Es particularmente til cuando la
mayora de las partculas son mayores de 100 m. Mtodo de tamizado
Los tamices se fabrican preferentemente de acero El mtodo analtico consiste en colocar los
inoxidable, bronce u otro material inerte. Constan de tamices, indicados en la Tabla, uno sobre otro en
una malla de alambre tejido, con hilos simples y de orden creciente de abertura y luego transferir la
aberturas cuadradas o casi cuadradas, la cual se fija a muestra al tamiz superior. El conjunto de tamices se
la base de un cilindro abierto. agita mediante un dispositivo mecnico que pueda
impartir a los tamices ya sea un movimiento rotatorio
La granulometra de los polvos se caracteriza en
con golpes de asentamiento (de 200 a
trminos descriptivos, segn la abertura nominal del
300 revoluciones horizontales y con 150 a 200 golpes
tamiz por donde pasa dicho polvo. De esta manera se
de asentamiento por minuto) o un movimiento
reconocen los siguientes tipos de polvos:
vibratorio (1 a 2 mm de amplitud), a menos que se
Polvo grueso - No menos de 100 % pasa a travs
especifique de otro modo en la monografa
de un tamiz N 1,7 y no ms de 40 % pasa a travs de
correspondiente. Luego se determina el peso del
un tamiz N 355.
material retenido en cada tamiz. Los resultados se
Polvo moderadamente grueso - No menos de expresan en porcentaje de peso de polvo en cada uno
100 % pasa a travs de un tamiz N 710 y no ms de de los intervalos determinados por el tamao de
40 % pasa a travs de un tamiz N 250. abertura de los tamices.
Polvo moderadamente fino - No menos de 95 % Polvos gruesos y moderadamente gruesos:
pasa a travs de un tamiz N 355 y no ms de 40 % colocar de 25 a 100 g de muestra sobre un tamiz,
pasa a travs de un tamiz N 180. normatizado. Agitar durante no menos de 20 minutos
Polvo fino - No menos de 95 % pasa a travs de o hasta completar el pasaje del polvo. Determinar el
un tamiz N 180 y no ms de 40 % pasa a travs de peso de la muestra que atraves la malla y el peso de
un tamiz N 125. la muestra remanente en el tamiz.
Polvo muy fino - No menos de 95 % pasa a Polvos moderadamente finos, finos o muy finos:
travs de un tamiz N 125 y no ms de 40 % pasa a proceder segn se indica en Polvos gruesos y
travs de un tamiz N 90. moderadamente gruesos empleando cantidades que
no excedan los 25 g y agitando no menos de
Las denominaciones empleadas para los tamices 30 minutos.
se detallan en la Tabla junto con la abertura nominal
de cada uno. Como regla general en esta Farmacopea Para los polvos que tiendan a obturar las aberturas
del tamiz cepillar cuidadosamente las mismas
peridicamente durante el ensayo.
*ASTM E 11 US: American Society for Testing and Materials Specification E 11 U.S. Standard Sieve Series.
300. ELECTROFORESIS
Las partculas cargadas, disueltas o dispersas en b) algunos soportes no son elctricamente
una solucin electroltica migran hacia el electrodo neutros; esto provoca, en muchas ocasiones, un
de polaridad opuesta, bajo la accin de un campo flujo electroendosmtico importante;
elctrico. c) efectos de calentamiento debidos al efecto
En la electroforesis en gel, el desplazamiento de joule pueden provocar evaporacin del solvente
las partculas se retarda por las interacciones con la desde el soporte y por capilaridad, ocurriendo un
matriz de gel que constituye el medio de migracin movimiento de la solucin desde los extremos hacia
y se comporta como un tamiz molecular. Las el centro. Por lo tanto, la fuerza inica, tiende a
interacciones entre las fuerzas elctricas y la aumentar progresivamente.
tamizacin molecular dan lugar a una velocidad de La velocidad de migracin depende
migracin diferencial segn el tamao, la forma y la fundamentalmente de cuatro factores: movilidad de
carga de las partculas. Las diferentes la partcula cargada, flujo electroendosmtico, flujo
macromolculas presentes en una mezcla migran a de evaporacin y campo elctrico. Por lo tanto, es
diferentes velocidades durante el proceso necesario trabajar en condiciones experimentales
electrofortico, debido a sus propiedades claramente definidas y emplear, siempre que sea
fisicoqumicas, separndose en fracciones posible, Sustancias de referencia.
concretas.
Aparato - Consta de:
Las separaciones electroforticas se pueden
realizar sin soporte, como por ej., en la - Generador de corriente contnua, cuyo voltaje
electroforesis capilar en solucin libre o en medios se pueda controlar y estabilizar.
estabilizantes como placas de capa delgada, - Cubeta electrofortica. Generalmente son
pelculas y geles. rectangulares, de vidrio o plstico rgido, con dos
compartimentos separados, el andico y el catdico,
ELECTROFORESIS DE LIBRE MIGRACIN
que contienen la solucin de electrolito. En cada
O FRONTAL
compartimento se introduce un electrodo de, por ej.,
Este mtodo se emplea fundamentalmente para platino o grafito; los cuales se conectan por medio
determinar movilidades electroforticas de un circuito convenientemente aislado a los
experimentalmente y se caracteriza por brindar correspondientes terminales del Generador de
medidas directas y reproducibles. Se aplica corriente contnua para constituir el nodo y el
principalmente a sustancias de alto peso molecular ctodo. El nivel de lquido en ambos
y poco difundibles. Las bandas se localizan en compartimentos se debe mantener igualado para
principio mediante un mtodo fsico como prevenir efecto sifn.
refractometra o conductimetra. Luego de la La cubeta electrofortica se cierra
aplicacin de un campo elctrico definido durante hermticamente para mantener un ambiente
un tiempo exactamente medido, se observa la saturado de humedad durante todo el proceso y
ubicacin de las nuevas bandas obtenidas. Las reducir la evaporacin de solvente. Se puede
condiciones operativas deben ser tales que permitan emplear un dispositivo de seguridad que corte el
obtener tantas bandas como componentes haya en la paso de corriente elctrica cuando se levanta la
muestra. tapa. Si la potencia elctrica que pasa a travs del
ELECTROFORESIS SOBRE UN SOPORTE O soporte excede los 10 W, es recomendable
ELECTROFORESIS DE ZONA refrigerar el soporte.
- Dispositivo portasoportes:
Este mtodo requiere el empleo de cantidades de Para electroforesis en tiras. La tira soporte,
muestra reducidas. previamente humedecida con la solucin
Existen diferentes tipos de soportes, como conductora y con los extremos sumergidos en los
papel, gel de agar, acetato de celulosa, almidn, correspondientes compartimentos electrdicos, se
agarosa, metacrilamida y gel mixto. La naturaleza fija y se tensa sobre un portasoporte apropiado,
del soporte introduce numerosos factores que diseado para prevenir la difusin del electrolito
modifican la movilidad: conductor de la corriente elctrica, como un
a) debido a las sinuosidades de los canalculos bastidor horizontal, un caballete en V invertida o
del soporte, la distancia recorrida aparentemente es una superficie uniforme con puntos de contacto a
menor que la real; intervalos apropiados.
Para electroforesis en gel. El dispositivo consta reposar para que ocurra la gelificacin. Por lo
esencialmente de una placa de vidrio (por ej., un general, la formacin del gel requiere
portaobjetos de microscopio) sobre la que se aproximadamente 30 minutos y se completa cuando
deposita, en la totalidad de su superficie, una capa se produce una interfase ntida entre el gel y la capa
firmemente adherida de gel de espesor uniforme. de agua. Eliminar la capa de agua, rellenar el
La conexin entre el gel y la solucin conductora se compartimento inferior con la solucin reguladora
realiza de varios modos, dependiendo del tipo de indicada en la monografa correspondiente y
aparato empleado. Se deben tomar precauciones destapar los tubos. Introducir los tubos en los
para evitar la condensacin de humedad o el dispositivos del compartimento superior y ajustarlos
desecado de la capa slida. de modo que la parte inferior de los tubos se
- Dispositivo de medida o medio de deteccin. encuentre inmersa en la solucin reguladora del
Procedimiento - Transferir la solucin del compartimento inferior. Rellenar los tubos
electrolito a los compartimentos electrdicos. cuidadosamente con la solucin reguladora
Colocar el soporte apropiadamente impregnado con especificada. Preparar la solucin muestra y la
el electrolito en la cubeta segn las condiciones solucin de referencia con el identificador
indicadas para el tipo de aparato empleado. especificado y aumentar la densidad de estas
Localizar la zona de aplicacin y aplicar la muestra. soluciones mediante el agregado de sacarosa.
Aplicar la corriente elctrica durante el tiempo Aplicar ambas soluciones en la superficie del gel,
especificado. Luego de desconectar la corriente, empleando un tubo diferente para cada solucin.
retirar el soporte de la cubeta electrofortica, secar Agregar la misma solucin reguladora en el
y revelar. compartimento superior. Conectar los electrodos al
generador de corriente y desarrollar la electroforesis
ELECTROFORESIS SOBRE GEL a la temperatura y el voltaje o intensidad de
CILNDRICO DE POLIACRILAMIDA corriente constantes especificados en la monografa
En la electroforesis sobre gel cilndrico de correspondiente.
poliacrilamida, la fase estacionaria est constituida ELECTROFORESIS EN GEL DE
por un gel preparado con una mezcla de acrilamida POLIACRILAMIDA CON DODECIL SULFATO
y N, N-metilenobisacrilamida; los geles se DE SODIO (SDS-PAGE)
preparan en tubos, generalmente de 0,5 cm de
dimetro interno y 7,5 cm de longitud; en cada tubo La electroforesis en gel de poliacrilamida se
se aplica una sola muestra. emplea con fines de caracterizacin cualitativa de
protenas en preparaciones biolgicas, control de
Aparato - Consta de dos compartimentos pureza y determinaciones cuantitativas.
destinados a las soluciones reguladoras, fabricados La electroforesis analtica en gel es un mtodo
con un material apropiado como polimetacrilato de apropiado para identificar y controlar la
metilo, dispuestos en posicin vertical uno arriba homogeneidad de las protenas en productos
del otro. Cada compartimento est provisto de un farmacuticos. Tambin se emplea para estimar los
electrodo de platino que se conecta con un pesos moleculares de subunidades proteicas y para
generador de corriente continua que permite determinar las subunidades que componen las
trabajar a intensidad constante o voltaje constante. protenas purificadas.
Para los geles cilndricos, el compartimento
superior est provisto en su base de varios Caractersticas de los geles de poliacrilamida
dispositivos para los tubos situados equidistantes al Las propiedades de tamizacin de los geles de
electrodo. poliacrilamida se deben a su particular estructura,
Procedimiento - [NOTA: se recomienda una red tridimensional de fibras y poros obtenida
desgasificar las soluciones antes de la mediante enlaces cruzados de unidades de
polimerizacin y emplear el gel inmediatamente bisacrilamida bifuncionales con cadenas adyacentes
despus de su preparacin]. Preparar la mezcla de de poliacrilamida. La polimerizacin se cataliza a
geles segn se especifica en la monografa travs de un generador de radicales libres
correspondiente. Verter la mezcla de gel en tubos constituido por persulfato de amonio y
apropiados, tapados en la parte inferior, igualar el tetrametiletilendiamina.
nivel de gel en cada uno de los tubos y rellenar Si se aumenta la concentracin de acrilamida del
hasta 1 cm del borde superior. Evitar que queden gel, disminuye su tamao de poro efectivo. Este se
burbujas de aire atrapadas en el interior de los define, desde el punto de vista operativo, por sus
tubos. Cubrir la mezcla de gel con una capa de propiedades de tamizacin molecular; es decir, la
agua para evitar el contacto con el aire y dejar resistencia con la que se opone a la migracin de
macromolculas. Las concentraciones de moleculares. La migracin de los complejos
acrilamida que se pueden emplear se encuentran SDS-polipptido se efecta hacia el nodo, a una
dentro de ciertos lmites ya que a altas velocidad superior para los complejos de peso
concentraciones los geles se rompen con mayor molecular ms bajo que para aqullos con peso
facilidad y su manejo es ms dificultoso. molecular alto. De este modo, es posible estimar el
Cuando el tamao de poro disminuye, la peso molecular de una protena a partir de su
velocidad de migracin de la molcula a travs del movilidad relativa en un mtodo SDS-PAGE
gel decrece. La resolucin para un producto calibrado, siendo la presencia de una nica banda
determinado se puede optimizar ajustando el en dicho gel un criterio de pureza.
tamao de poro del gel o modificando la Las eventuales modificaciones del esqueleto
concentracin de acrilamida. Por lo tanto, las polipptidico, como por ej., una
caractersticas fsicas de un gel determinado O- o N-glicosilacin, tiene un impacto significativo
dependen de su contenido de acrilamida y de sobre el peso molecular aparente de la protena ya
bisacrilamida. que el SDS no se une del mismo modo a los grupos
Adems de la composicin del gel, el estado de glucdicos que a los grupos polipptidicos, por lo
la molcula constituye un factor importante que que en este caso no se mantiene constante la
afecta la movilidad electrofortica. Para las relacin carga/masa.
protenas, la movilidad electrofortica depende del Condiciones reductoras - La asociacin de las
pK de los grupos cargados y del tamao de la subunidades polipptidicas y la estructura
molcula; siendo afectada tambin por la tridimensional de las protenas se mantiene
naturaleza, concentracin y pH de la solucin fundamentalmente por la existencia de enlaces
reguladora, la temperatura, la intensidad del campo disulfuro. Uno de los objetivos de la separacin
elctrico aplicado y la naturaleza del material del SDS-PAGE en condiciones reductoras es la ruptura
soporte. de esta estructura por reduccin de los enlaces
Electroforsis en gel de poliacrilamida con disulfuro. La desnaturalizacin y disociacin
desnaturalizacin completa de las protenas por tratamiento con
2-mercaptoetanol o ditiotreitol (DTT) da lugar a un
Este mtodo se emplea para el anlisis de desdoblamiento de la cadena polipptidica, seguido
monmeros polipeptdicos de peso molecular de la formacin de un complejo con el SDS. En
comprendido entre 14.000 y 100.000. estas condiciones, el peso molecular de las
La electroforesis en gel de poliacrilamida con subunidades polipptidicas se puede calcular por
desnaturalizacin, empleando dodecilsulfato de regresin lineal en presencia de patrones con pesos
sodio (SDS-PAGE), es la tcnica electrofortica moleculares apropiados.
ms empleada para la evaluacin de la calidad de Condiciones no reductoras - Para algunos
productos proteicos. De modo general, la anlisis no es aconsejable la disociacin completa
electroforesis analtica de protenas se realiza en de la protena en subunidades peptdicas. Si no se
geles de poliacrilamida en condiciones en las que se emplean agentes reductores como el
asegure la disociacin de las protenas en sus 2-mercaptoetanol o DTT, los enlaces covalentes
subunidades polipeptdicas individuales, disulfuro permanecen intactos mantenindose la
limitndose los procesos de agregacin. Se emplea forma oligomrica de la protena. Los complejos
frecuentemente para disociar las protenas antes de SDS-protena oligomrica migran ms lentamente
la aplicacin en el gel, el dodecilsulfato de sodio que sus subunidades SDS-polipptido. Adems, las
(SDS), un detergente aninico fuerte, en protenas no reducidas no se pueden saturar
combinacin con calor. Los polipptidos completamente con SDS y por lo tanto, no pueden
desnaturalizados se unen al SDS, adquieren carga unirse al detergente en una proporcin de masa
negativa y presentan una relacin carga/masa constante. Esto hace que la determinacin del peso
constante, independientemente del tipo de protena molecular de estas molculas por SDS-PAGE sea
considerada. La cantidad de SDS es casi siempre ms difcil que los anlisis de los polipptidos
proporcional al peso molecular del polipptido y es totalmente desnaturalizados, ya que es necesario
independiente de su secuencia ya que los complejos que tanto las protenas patrn como las protenas de
SDS-polipptido migran a travs de los geles de la muestra presenten configuraciones similares para
poliacrilamida con movilidades que dependen del que se puedan comparar. Sin embargo, la obtencin
tamao del polipptido. en el gel de una sola banda coloreada es un criterio
Las movilidades electroforticas de los de pureza.
complejos SDS-polipptido resultantes presentan
siempre la misma relacin funcional con los pesos
CARACTERSTICAS DE LA En un gel de poliacrilamida con sistema
ELECTROFORESIS EN GEL CON SISTEMA regulador discontinuo, se recomienda verter el gel
REGULADOR DISCONTINUO de resolucin, dejar polimerizar y a continuacin
El mtodo electrofortico ms usado para la verter el gel de apilamiento ya que la constitucin
caracterizacin de mezclas complejas de protenas de los dos geles de archilamida-bisacrilamida es
se basa en el empleo de un sistema regulador diferente.
discontinuo consistente en dos geles contiguos pero Preparacin del gel de resolucin - En un
distintos: un gel inferior, llamado gel de separacin erlenmeyer, preparar el volumen apropiado de la
o de resolucin, y otro superior, gel de apilamiento. solucin de acrilamida que contenga la
Estos dos geles presentan porosidad, pH y fuerzas concentracin deseada para el gel de resolucin,
inicas diferentes. Adems se emplean iones con empleando los valores indicados en la Tabla 1.
diferentes movilidades inicas en el gel y en la Mezclar los componentes en el orden indicado.
solucin reguladora. La discontinuidad del sistema Antes del agregado de la solucin de persulfato de
provoca una concentracin de las muestras de amonio y del tetrametiletilendiamina (TEMED),
mayor tamao en el gel de apilamiento y por lo filtrar la solucin, si fuera necesario, empleando
tanto se mejora la resolucin. Cuando se aplica la vaco, a travs de una membrana de acetato de
corriente elctrica, se desarrolla un gradiente de celulosa (de 0,45 mm de dimetro); mantener la
potencial negativo a travs de la solucin muestra solucin bajo vaco por rotacin de la unidad de
que conduce a las protenas hacia el gel de filtracin hasta que no se formen ms burbujas.
apilamiento. Los iones glicinato contenidos en la Agregar las cantidades apropiadas de solucin de
solucin reguladora empujan a las protenas hacia el persulfato de amonio y de TEMED indicadas en la
gel de apilamiento. Se forma rpidamente una zona Tabla 1, agitar y verter rpidamente en el espacio
de frente mvil cuya cabecera est constituida por de separacin entre las dos placas de vidrio del
iones cloruro de alta movilidad, seguidos de iones molde. Dejar espacio suficiente para el gel de
glicinato ms lentos en la cola. Se produce un apilamiento (la longitud de un diente del peine ms
gradiente de alto voltaje localizado entre los frentes 1 cm). Empleando una pipeta de vidrio de punta
inicos de cabeza y cola, provocando que los larga, recubrir la solucin con isobutanol saturado
complejos SDS-protena se concentren en una zona con agua. Dejar el gel en posicin vertical a
muy estrecha (apilamiento) y migren entre las fases temperatura ambiente para que se produzca la
de cloruro y glicinato. Independientemente del polimerizacin.
volumen de muestra aplicado, el conjunto de Preparacin del gel de apilamiento Luego de
complejos SDS-protena se condensa en una regin la polimerizacin completa del gel de resolucin
muy estrecha y penetran en el gel de separacin en (aproximadamente 30 minutos), retirar la capa
forma de banda estrecha, bien definida y de alta superior de isobutanol y lavar varias veces con agua
densidad proteica. El gel de apilamiento, de tamao la parte superior del gel para eliminar la capa de
de poro, grande, no retarda la migracin de la isobutanol y la posible acrilamida no polimerizada.
mayora de las protenas y acta principalmente Eliminar la mayor cantidad posible de lquido de la
como medio anticonvectivo. En la interfase de superficie del gel eliminando el resto de agua con la
ambos geles, las protenas experimentan un ayuda de un papel de filtro.
incremento brusco de retardo electrofortico debido En un erlenmeyer, preparar un volumen
al menor tamao de poro del gel de resolucin. apropiado de solucin que contenga la
Una vez que se encuentran en este gel, las protenas concentracin requerida para el gel de resolucin,
continan avanzando lentamente por el efecto de segn se indica en la Tabla 2. Mezclar los
tamizacin molecular que ejerce la matriz. Los componentes en el orden indicado. Antes del
iones glicinato migran por delante de las protenas, agregado de la solucin de persulfato de amonio y
por lo que stas se mueven en un medio de pH del tetrametiletilendiamina, filtrar la solucin, si
uniforme formado por el tris(hidroximetil)amino- fuera necesario, empleando vaco, a travs de una
metano y la glicina. La tamizacin molecular hace membrana de acetato de celulosa (de 0,45 mm de
que la separacin de los complejos SDS-polipptido dimetro); mantener la solucin bajo vaco por
se base en sus correspondientes pesos moleculares. rotacin de la unidad de filtracin hasta que no se
formen ms burbujas. Agregar las cantidades
PREPARACIN DE GELES DE apropiadas de solucin de persulfato de amonio y
POLIACRILAMIDA SDS VERTICALES CON de TEMED, indicadas en la Tabla 2, agitar y verter
SISTEMA REGULADOR DISCONTINUO rpidamente en el espacio de separacin entre las
Preparacin de los geles dos placas de vidrio del molde, directamente sobre
la superficie del gel de resolucin polimerizado. De
inmediato, insertar un peine limpio de espaciadores, cortar y tirar el gel de apilamiento y
politetrafluoroetileno en la solucin del gel de proceder inmediatamente a la tincin.
apilamiento, evitando la formacin de burbujas de
DETECCIN DE PROTENAS EN GELES
aire. Agregar ms solucin del gel de apilamiento
hasta rellenar completamente los espacios del peine. Todas las etapas de tincin de geles se realizan a
Colocar el gel en posicin vertical y dejar temperatura ambiente con agitacin suave (por ej.,
polimerizar a temperatura ambiente. en una placa de movimiento giratorio) en un
recipiente apropiado.
Montaje del gel en el equipo de electroforesis
y separacin electrofortica Tincin con Coomassie - Es el mtodo de
tincin de protenas ms empleado, con un nivel de
Solucin reguladora de desarrollo SDS-
deteccin del orden de 1 a 10 Pg de protena por
PAGE - Disolver en agua 151,4 g de
banda.
tris(hidroximetil)aminoetano, 721,0 g de glicina y
Solucin colorante de Coomassie - Disolver
50,0 g de lauril sulfato de sodio, y completar a
1,25 g de Azul brillante de Coomassie R-250 en
5 litros con agua. Inmediatamente antes del uso,
1 litro de una mezcla de agua, metanol y cido
diluir 10 veces su volumen con agua y mezclar. El
actico glacial (5:4:1).
pH de esta solucin debe estar comprendido entre
Solucin de decoloracin - Emplear una mezcla
8,1 y 8,8.
de agua, metanol y cido actico glacial (5:4:1).
Procedimiento - Una vez completada la
Procedimiento - Sumergir el gel en un exceso
polimerizacin (aproximadamente 30 minutos),
de Solucin colorante de Coomassie y dejar en
retirar cuidadosamente el peine de
contacto por lo menos durante 1 hora. Eliminar la
politetrafluoroetileno y lavar los pocitos, de
Solucin colorante de Coomassie. Decolorar el gel
inmediato, con agua o Solucin reguladora de
con un exceso de Solucin de decoloracin.
desarrollo SDS-PAGE para eliminar la posible
Cambiar la Solucin de decoloracin varias veces
acrilainida no polimerizada. Recortar los dientes
hasta que las bandas de protenas teidas se
del gel de apilamiento, si fuera necesario, con una
distingan ntidamente sobre un fondo claro. Cuanto
aguja hipodrmica roma fijada a una jeringa.
ms se lave, menor ser la cantidad de protena que
Quitar las pinzas de uno de los lados cortos, retirar
se pueda detectar. La decoloracin se puede
el tubo con precaucin y volver a colocarlas.
acelerar agregando en la Solucin de decoloracin
Proceder del mismo modo en el otro. Retirar el
algunos gramos de resina de intercambio aninico.
tubo de la parte inferior del gel, montar el gel en el
[NOTA: las soluciones cido-alcohlicas
aparato de electroforesis y agregar las soluciones
empleadas en este procedimiento no fijan por
reguladoras en los compartimentos superior e
completo las protenas en el gel. Esto puede
inferior. Eliminar las burbujas que se formen en la
conducir a la prdida de algunas protenas de bajo
parte inferior del gel, entre las dos placas de vidrio;
peso molecular durante el proceso de tincin y
preferiblemente efectuar este procedimiento con
decoloracin de geles finos. La fijacin permanente
una aguja hipodrmica doblada fijada a una jeringa.
se obtiene introduciendo el gel en una mezcla de
[NOTA: nunca realizar un predesarrollo sin
agua, metanol y cido tricloroactico (5:4:1)
muestras ya que se destruye la discontinuidad de los
durante 1 hora antes de introducirlo en la Solucin
sistemas reguladores]. Antes de aplicar las
colorante de Coomassie.]
muestras, lavar cuidadosamente la ranura con
Solucin reguladora de desarrollo SDS-PAGE. Tincin con plata - Es el mtodo ms sensible
Preparar la solucin muestra y la solucin de para protenas teidas en geles y permite detectar
referencia en el medio recomendado y proceder bandas que contengan 10 a 100 ng de protena.
segn se especifica en la monografa Reactivo de nitrato de plata - A una mezcla de
correspondiente. Aplicar el volumen apropiado de 3 ml de amonaco concentrado y 40 ml de hidrxido
cada solucin en los pocitos del gel de apilamiento de sodio 1 M, agregar 8 ml de una solucin al 20 %
y desarrollar la electroforesis. En ocasiones resulta de nitrato de plata, gota a gota, y con agitacin.
necesario modificar el tiempo y la relacin Diluir con agua a 200 ml.
intensidad/voltaje, para obtener una separacin Solucin de fijacin. - A 250 ml de metanol,
ptima. Comprobar que el frente del indicador se agregar 0,27 ml de solucin de formaldehdo al
desplace en el gel de resolucin. Cuando el 35 % y diluir con agua a 500 ml.
indicador alcance la parte inferior del gel, detener la Solucin de desarrollo - Diluir 2,5 ml de una
electroforesis. Retirar el montaje del gel del solucin al 2 % de cido ctrico y 0,27 ml de
aparato y separar las placas de vidrio. Retirar los solucin de formaldehdo al 35 % con agua a
500 ml.
Solucin de bloqueo - Emplear una solucin al concentradas de protenas de peso molecular
10 % v/v de cido actico. conocido preparadas en la solucin reguladora de
Procedimiento - Introducir el gel en exceso en muestra se aplican en el mismo gel contiene la
Solucin de fijacin durante 1 hora. Eliminar la muestra de la protena a analizar.
Solucin de fijacin, agregarla de nuevo e incubar Inmediatamente despus del desarrollo
otra vez durante por lo menos 1 hora o durante toda electrofortico, sealar la posicin del indicador,
la noche, si es conveniente. Eliminar la Solucin de azul de bromofenol, para identificar el frente de
fijacin y lavar el gel con abundante agua durante migracin de los iones. Despus de la tincin,
1 hora. Embeber el gel durante 15 minutos en una medir las distancias de migracin de cada banda
solucin de glutaraldehdo al 1 % v/v. Lavar el gel proteica (marcadores y muestras). Dividir la
dos veces durante 15 minutos con abundante agua. distancia de migracin de cada protena por la
Embeber el gel en Reactivo de nitrato de plata distancia de migracin del indicador. Las distancias
recientemente preparado, durante 15 minutos, en la de migracin normalizadas as obtenidas se
oscuridad. Lavar el gel tres veces durante denominan movilidades relativas de las protenas
5 minutos con abundante agua, sumergirlo durante (relativas al frente del indicador) y, por convencin,
aproximadamente 1 minuto en Solucin de se expresan como R f . Graficar el logaritmo de los
desarrollo hasta que se obtenga una tincin pesos moleculares relativos (M r ) de las protenas
satisfactoria. Detener el desarrollo por incubacin patrn en funcin de los valores de R f . Los pesos
en Solucin de bloqueo durante 15 minutos y lavar moleculares desconocidos se pueden determinar por
el gel con agua. regresin lineal o por interpolacin a partir de las
curvas obtenidas; los valores obtenidos para las
DESECADO DE GELES DE
muestras se deben encontrar contenidos en la parte
POLIACRILAMIDA SDS TEIDOS
lineal del grfico.
Los geles se someten a diferentes tratamientos,
VALIDACIN DEL ENSAYO
dependiendo del mtodo empleado para teirlos.
Cuando se emplea Tincin con Coomassie, luego de El ensayo slo es vlido si las protenas
la etapa de decoloracin, colocar el gel en una empleadas como marcadores de pesos moleculares
solucin al 10 % de glicerol durante por lo menos se distribuyen a lo largo del 80 % de la longitud del
2 horas, siendo posible una incubacin durante toda gel y adems si, en el intervalo de separacin
la noche. Cuando se emplea Tincin con plata, al requerido, la separacin obtenida para las bandas de
finalizar el proceso de lavado, sumergir los geles en protenas relevantes, presenta una relacin lineal
una solucin al 2 % de glicerol, durante 5 minutos. entre el logaritmo de peso molecular y el R f . En la
Sumergir dos hojas de celulosa porosa en agua monografa correspondiente se especifican los
durante 5 a 10 minutos, colocar una de las hojas en requisitos de validacin adicionales referentes a la
el cuadro de secado, levantar el gel cuidadosamente solucin muestra.
y colocarlo sobre la hoja de celulosa. Eliminar las CUANTIFICACIN DE IMPUREZAS
burbujas de aire que eventualmente puedan haber
sido retenidas y algunos ml de agua a lo largo de los Cuando en la monografa se especifica el lmite
bordes del gel. Recubrir con la segunda hoja de de impurezas, se debe preparar una solucin de
papel y eliminar nuevamente las posibles burbujas referencia correspondiente al nivel de impureza
de aire retenidas. Colocar en estufa para completar especificado, por dilucin de la solucin muestra.
el secado o dejar secar a temperatura ambiente. En el electroforegrama obtenido a partir de la
solucin muestra, ninguna impureza (ni ninguna
DETERMINACIN DE PESO MOLECULAR banda, a excepcin de la principal) puede ser ms
El peso molecular de las protenas se determina intensa que la banda principal obtenida a partir de la
mediante comparacin de sus respectivas solucin de referencia.
movilidades con las de varios marcadores de peso Cuando se trabaja en las condiciones validadas,
molecular conocido. Para la calibracin de los es posible cuantificar las impurezas por
geles se dispone de mezclas de protenas de peso normalizacin con relacin a la banda principal,
molecular conocido, que permiten obtener una empleando un densitmetro. En estos casos, se
tincin uniforme. Las soluciones madre debe comprobar la linealidad de las repuestas.
Tabla 1. Preparacin del gel de resolucin.
Componentes de la Volumen de cada componente por volumen de gel de moldeado
solucin de acrilamida (ml)
5 10 15 20 25 30 40 50
6%
Tris pH 8,8 (1,5 M) (2) 1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
SDS 10 % (3) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
PSA 10 % (4) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
TEMED (5) 0,004 0,008 0,012 0,016 0,02 0,024 0,032 0,04
8%
Tris pH 8,8 (1,5 M) (2) 1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
SDS 10 % (3) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
PSA 10 % (4)- 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
TEMED (5) 0,003 0,006 0,009 0,012 0,015 0,018 0,024 0,03
10 %
Tris pH 8,8 (1,5 M) (2) 1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
SDS 10 % (3) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
PSA 10 % (4) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(5)
TEMED 0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,016 0,02
12 %
Tris pH 8,8 (1,5 M) (2) 1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
(3)
SDS 10 % 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
PSA 10 % (4)- 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
TEMED (5) 0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,016 0,02
Tabla 1 - continuacin. Preparacin del gel de resolucin.
Componentes de la Volumen de cada componente por volumen de gel de moldeado
solucin de acrilamida (ml)
5 10 15 20 25 30 40 50
14 %
15 %
SDS 10 % (3) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
PSA 10 % (4)- 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
TEMED (5) 0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,016 0,02
Medio - El medio de disolucin es preferentemente Colocar en cada uno de seis vasos el volumen de
agua desgasificada. Pueden emplearse, segn las Medio especificado, colocar los vasos en el equipo,
caractersticas de solubilidad del principio activo o equilibrar el Medio a 37,0 0,5 C y retirar los
de la formulacin, soluciones reguladoras de pH 4 a termmetros. Colocar un comprimido o una
8 o cido clorhdrico 0,001 a 0,1 N. El volumen cpsula en cada vaso, teniendo cuidado de excluir
empleado es 900 ml pudiendo variar entre 500 y las burbujas de aire de la superficie de la unidad de
900 ml. Si el medio es una solucin reguladora, dosificacin y de inmediato, iniciar la rotacin del
ajustar el pH a 0,05 unidades del pH especificado elemento de agitacin a la velocidad especificada
en la misma. Los gases disueltos pueden producir en la monografa correspondiente. Cumplido el
burbujas que pueden modificar los resultados del tiempo especificado, o a cada uno de los tiempos
ensayo. En esos casos los mismos deben eliminarse establecidos, retirar una alcuota de una zona a una
antes del ensayo. Para ello puede emplearse el distancia media entre la superficie del Medio y la
siguiente mtodo: calentar el medio a 45 C parte superior del canastillo o de la paleta rotatoria
aproximadamente, agitando suavemente, filtrar y a no menos de 10 mm de la pared del vaso.
inmediatamente aplicando vaco empleando un [NOTA: reemplazar las alcuotas retiradas para el
filtro de 0,45 Pm o porosidad menor, agitando anlisis con volmenes iguales de Medio calentado
vigorosamente y continuar la agitacin aplicando a 37 C o, cuando se demuestra que la reposicin de
vaco aproximadamente durante 5 minutos. Pueden medio no es necesaria, aplicar en los clculos una
emplearse otras tcnicas de desgasificacin correccin por el cambio de volumen]. Mantener el
validadas. vaso cubierto durante el tiempo que dure el ensayo
Tiempo - Si se especifican dos o ms tiempos, y verificar la temperatura dentro de cada vaso a
las muestras se retirarn slo en los tiempos intervalos apropiados. Filtrar y analizar las
especificados con una tolerancia de 2 %. alcuotas extradas segn se especifica en la
Muestreo individual - monografa correspondiente. [NOTA: emplear un
Procedimiento - Este procedimiento se realiza filtro inerte que no produzca adsorcin del principio
sobre seis unidades de la forma farmacutica. activo o contenga sustancias extrables que
interfieran el anlisis. Si se emplea un equipo con individual pero combinar volmenes iguales de las
toma de muestra automtica; cada vez que se alcuotas filtradas, extradas de cada uno de los
introduzcan modificaciones en el equipo, es vasos y emplear la muestra unificada como solucin
necesaria la validacin del mismo para demostrar muestra. Determinar la cantidad promedio de
que no hay cambios durante el desarrollo del principio activo disuelto en la muestra unificada.
ensayo]. Interpretacin -
Cuando la cubierta de la cpsula interfiere con Muestreo individual - A menos que se
el anlisis, extraer el contenido de no menos de seis especifique de otro modo en la monografa
cpsulas y disolver las cubiertas de las cpsulas en correspondiente, los requisitos se cumplen si la
el volumen especificado de Medio. Realizar el cantidad de principio activo disuelto se ajusta a la
anlisis segn se especifica en la monografa Tabla 1. En caso que los resultados no se ajusten al
correspondiente, empleando la solucin anterior lmite especificado en E 1 continuar el ensayo con
como blanco y hacer las correcciones necesarias. E 2 y si no cumple con la exigencia de E 2 proseguir
El factor de correccin no debe ser mayor de 25 % hasta E 3 .. La cantidad, Q, es la cantidad de
del contenido declarado. principio activo disuelto, especificada en la
Muestreo unificado - monografa correspondiente, expresada como un
Procedimiento - Emplear este procedimiento porcentaje del contenido declarado. Los valores de
cuando en la monografa correspondiente se 5, 15 y 25 % en la Tabla 1 corresponden a
especifique un Procedimiento para muestreo porcentajes del contenido declarado de modo que
unificado. Proceder segn se indica en Muestreo estos valores y Q estn en los mismos trminos.
.
Tabla.
(1) Como alternativa a Staphylococcus aureus (ATCC N 6538), puede emplearse Bacillus subtilis
(ATCC N 6633).
(2) Como alternativa a Pseudomonas aeruginosa (ATCC N 9027), puede emplearse Micrococcus luteus
(ATCC N 9341).
(3) Como alternativa a Clostridium sporogenes (ATCC N 11437) y en caso de no ser requerido un
esporoformador, puede emplearse Bacteroides vulgatus (ATCC N 8482).
(4) Emplear para el ensayo de esterilidad de dispositivos mdicos que contengan tubos de pequeo
dimetro.
Tiras de
Lminas 0,5 mm 120 cm2 de superficie total (ambas caras)
5 u 0,3 cm
Dimensiones
Cdigo Elemento Descripcin
(mm)
Adaptador de caucho modelado para la unin con el
A Adaptador para disparador
disparador
B Garganta Baln modificado 50 ml
Entrada: junta cnica esmerilada hembra 29/32
Salida: junta cnica esmerilada macho 24/29
C Cuello Adaptador de vidrio modificado
Entrada: junta cnica esmerilada hembra 24/29
Salida: junta cnica esmerilada macho 24/29
Parte inferior: tubo de vidrio calibrado: dimetro interno 14
Tubo de vidrio de paredes delgadas: dimetro externo 17
D Cmara de impacto superior Baln modificado 100 ml
Entrada: junta cnica esmerilada hembra 24/29
Salida: junta cnica esmerilada hembra 14/23
Tubo de vidrio de pared media: unin cnica esmerilada
E Tubo de conexin 14/23
macho
Codo y parte recta superior: dimetro exterior 13
Parte recta inferior: dimetro exterior 8
Adaptador con tubuladura
F Capuchn roscado de plstico 28/13
lateral y capuchn roscado
Junta de silicona 28/11
Dimensiones
Cdigo Elemento Descripcin
(mm)*
Arandela de politetrafluoroetileno 28/11
Rosca de vidrio: paso de rosca 28
Salida lateral (salida hacia la bomba de vaco): dimetro
11
interior mnimo
Porta-filtros modificados, de polipropileno, unido al extremo
G Difusor Figura 2
del tubo mediante un tubo de politetrafluoroetileno
Disco circular de acetal con 4 orificios dispuestos en un
G crculo de 5,3 mm de dimetro y una clavija para separacin 10
del chorro en el centro
Dimetro de la clavija 2
Altura de resalte de la clavija 2
H Cmara de impacto inferior Erlenmeyer 250 ml
Junta cnica esmerilada hembra 24/29
Las medidas de las juntas esmeriladas corresponden a las designadas por ISO (internacional Organization for
Standarization).
400. ENSAYOS FARMACOTCNICOS PARA SUPOSITORIOS
Los supositorios deben cumplir con los alambre de metal en determinados perodos de
siguientes ensayos: tiempo. En todos los casos, el supositorio debe
Peso promedio - El peso promedio debe fundirse o disgregarse a una temperatura no menor
cumplir con las especificaciones de la Tabla. de 34 C ni mayor de 37 C.
Tabla.
Peso promedio Lmite de desviacin
de los supositorios del peso promedio
(g) (%)
< 1,5 10
t 1,5 y d 2,5 7,5
> 2,5 5
LMITES DE ADITIVOS
ADITIVOS LMITES (%)
ftalato de bis(2-etilhexilo) 40
octanoato de cinc (2-etilhexanoato de cinc) 1
estearato de calcio o estearato de cinc o una mezcla de ambos 1
N,N-diaciletilendiaminas (acil significa en particular palmitil y estearil) 1
no ms de uno de los siguientes aceites epoxidados o una mezcla de ambos: 10
x aceite de soja epoxidado en el cual el contenido de oxgeno oxirnico es 6
a 8 % y el ndice de iodo no es mayor a 6.
x aceite de semilla de lino epoxidado en el cual el contenido de oxgeno
oxirnico no es mayor de 10 % y el ndice de yodo no es mayor de 7
Ningn aditivo antioxidante debe agregarse al ningn colorante al poli(cloruro de vinilo) destinado
polmero. Cuando se agregan colorantes, slo se a la fabricacin de envases para sangre y hemoderi-
puede agregar azul ultramarino. No se debe agregar vados.
CARACTERSTICAS 254 nm. El valor de R f e intensidad de la mancha
Polvo, perlas, grnulos o lminas translcidas de obtenida a partir de la Solucin muestra debe ser
espesor variable, incoloras o de color amarillo pli- similar a la obtenida a partir de la Solucin estn-
do. dar.
C - Absorcin infrarroja <460> - Examinar el
IDENTIFICACIN - [NOTA: si es necesario,
residuo obtenido en el ensayo para Ftalato de bis(2-
cortar el material a ensayar en trozos de tamao
etilhexilo) comparando con el espectro obtenido con
apropiado.]
A 2,0 g del material a ensayar agregar 200 ml de Ftalato de bis(2-etilhexil) SR-FA.
ter libre de perxidos y calentar a reflujo durante ENSAYOS
8 horas. Separar el residuo (B) y la solucin (Solu- Solucin indicadora - Disolver en alcohol
cin A) por filtracin. 100 mg de azul de bromotimol, 20 mg de rojo de
Evaporar la Solucin A a sequedad bajo presin metilo y 200 mg de fenolftalena. Diluir a 100 ml
reducida en un bao de agua a 30 C. Disolver el con el mismo solvente y filtrar.
residuo en 10 ml de tolueno (Solucin A 1 ). Disol-
Solucin S 1 - Transferir 5,0 g del material a en-
ver el residuo B en 60 ml de dicloruro de etileno,
sayar a una cpsula. Agregar 30 ml de cido sulf-
calentando en un bao de agua a reflujo y filtrar.
rico y calentar hasta obtener una masa viscosa ne-
Agregar la solucin gota a gota y con agitacin
gra. Enfriar y agregar con precaucin 10 ml de
enrgica a 600 ml de heptano calentando a una solucin de perxido de hidrgeno al 30 % y calen-
temperatura menor a la temperatura de ebullicin. tar suavemente. Dejar enfriar y agregar 1 ml de
Filtrar la mezcla en caliente a travs de un filtro
solucin de perxido de hidrgeno al 30 %, repetir
caliente para separar el material insolubilizado (B 1 )
el agregado y evaporacin de la solucin de perxi-
de la solucin orgnica. Dejar enfriar, separar el
do de hidrgeno al 30 % hasta obtener un lquido
precipitado (B 2 ) formado y filtrar a travs de un incoloro. Reducir el volumen hasta 10 ml. Enfriar
filtro de vidrio sinterizado de porosidad media, y diluir a 50,0 ml con agua.
previamente pesado.
A - Absorcin infrarroja <460>. Disolver el Solucin S 2 - Transferir 25 g del material a en-
material insolubilizado B 1 en 30 ml de tetrahidrofu- sayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato.
rano y agregar, en pequeas porciones con agita- Agregar 500 ml de Agua para Inyectables y cubrir
cin, 40 ml de etanol. Separar el precipitado (B 3 ) la boca del erlenmeyer con un vaso de precipitados
por filtracin y secar al vaco a una temperatura no de vidrio al borosilicato. Calentar en autoclave a
mayor de 50 C sobre pentxido de fsforo o cloru- 121 2 C durante 20 minutos. Dejar enfriar y
ro de calcio anhidro. Disolver unos pocos mg del decantar la solucin. Diluir la solucin a 500 ml.
precipitado B 3 en 1 ml de tetrahidrofurano. Colocar Aspecto de la solucin S 2 - Debe ser transpa-
algunas gotas de la solucin obtenida sobre una rente e incolora.
placa de cloruro de sodio y evaporar a sequedad
entre 100 y 105 C. Registrar el espectro de absor- Acidez o alcalinidad - A 100 ml de Solu-
cin infrarroja y comparar con el espectro obtenido cin S 2 , agregar 0,15 ml de Solucin indicadora.
con poli(cloruro de vinilo) SR-FA. No se deben requerir ms de 1,5 ml de hidrxido de
B - Aplicar la siguiente tcnica cromatogrfica. sodio 0,01 N para cambiar el color del indicador a
Fase estacionaria - Emplear una placa para azul. A 100 ml de Solucin S 2 , agregar 0,2 ml de
cromatografa en capa delgada (ver 100. Cromato- naranja de metilo (SR). No se debe requerir ms de
grafa) recubierta con gel de slice para cromato- 1,0 ml de cido clorhdrico 0,01 N para iniciar el
grafa de 0,25 mm de espesor. cambio de color del indicador de amarillo a anaran-
Fase mvil - Tolueno. jado.
Solucin estndar - Disolver 0,8 g de ftalato de Absorbancia - Evaporar 100 ml de Solucin S 2
bis(2-etilhexilo) SR-FA en tolueno y diluir a 10 ml a sequedad. Disolver el residuo en 5 ml de hexano.
con el mismo solvente. Entre 250 y 310 nm la absorbancia no debe ser
Solucin muestra - Solucin A 1 . mayor de 0,25.
Procedimiento - Aplicar por separado sobre la
placa 5 l de cada solucin. Dejar secar las aplica- Sustancias reductoras - Efectuar el ensayo
ciones y desarrollar los cromatogramas hasta que el dentro de las 4 horas de preparada la Solucin S 2 .
frente del solvente haya recorrido aproximadamente A 20,0 ml de Solucin S 2 agregar 1 ml de cido
tres cuartos de la longitud de la placa. Retirar la sulfrico diluido y 20,0 ml de permanganato de
placa de la cmara, marcar el frente del solvente y potasio 0,002 M. Calentar a reflujo durante
dejarla secar. Examinar bajo luz ultravioleta a 3 minutos y enfriar inmediatamente. Agregar 1 g
de ioduro de potasio y titular inmediatamente con
tiosulfato de sodio 0,01 N, empleando 0,25 ml de slice para preparar un blanco. Separadamente
almidn (SR) como indicador. Realizar una agitar ambas muestras durante 15 minutos con
determinacin con un blanco empleando 20 ml de 40 ml de metanol. Filtrar y evaporar a sequedad.
Agua para Inyectables y hacer las correcciones Pesar los dos residuos. La diferencia entre los pe-
necesarias. La diferencia entre los volmenes sos no debe ser mayor de 10 mg.
consumidos no debe ser mayor de 2,0 ml.
Ftalato de bis(2-etilhexilo) - Examinar el cro-
Aminas aromticas primarias matograma obtenido en el ensayo para Aceites
Solucin muestra - A 2,5 ml de Solucin A 1 ob- epoxidados bajo luz ultravioleta a 254 nm y locali-
tenida en la Identificacin, agregar 6 ml de agua y zar la zona que corresponde a ftalato de
4 ml de cido clorhdrico 0,1 M. Agitar vigorosa- bis(2-etilhexilo). Remover el rea del gel de slice
mente y descartar la fase orgnica. A la fase acuosa que corresponde a esta zona y agitarla con 40 ml de
agregar 0,4 ml de una solucin de nitrito de sodio al ter. Filtrar sin prdidas y evaporar a sequedad. El
1 % recientemente preparada. Mezclar y dejar en residuo obtenido no debe pesar ms de 40 mg.
reposo durante 1 minuto. Agregar 0,8 ml de una
Cloruro de vinilo -
solucin de sulfamato de amonio al 2,5 %, dejar en
Sistema cromatogrfico (ver 100. Cromatograf-
reposo durante 1 minuto y agregar 2 ml de una
a) - Emplear un cromatgrafo de gases equipado
solucin de diclorhidrato de
con un detector de ionizacin a la llama y una co-
N-(1-Naftil)etilendiamina al 0,5 %. [NOTA: reali- lumna de 3 m x 3 mm rellena con tierra de diatomea
zar el ensayo a bajas temperaturas.] silanizada para cromatografa, impregnada con
Solucin estndar - Proceder segn se indica
5 % p/p de dimetil estearilamida y 5 % p/p de polie-
para la Solucin muestra, reemplazando la fase
tilenglicol 400. Mantener la columna, el inyector y
acuosa por una mezcla de 1 ml de una solucin de
el detector a aproximadamente 45, 100 y 150 C,
naftilamina 0,001 % en cido clorhdrico 0,1 M,
respectivamente. Se emplea nitrgeno como gas
5 ml de agua y 4 ml de cido clorhdrico 0,1 M
transportador con un caudal de aproximadamente
(20 ppm).
30 ml por minuto.
Despus de 30 minutos, el color de la Solucin
Solucin del estndar interno - Empleando una
muestra no debe ser ms intenso que el de la Solu-
microjeringa, transferir 10 l de ter en 20,0 ml de
cin estndar preparada al mismo tiempo.
N,N-Dimetilacetamida, sumergiendo la punta de la
N,N-diaciletilendiaminas - Lavar con etanol aguja en el solvente. Inmediatamente antes de usar,
el precipitado B 2 obtenido en la Identificacin y diluir la solucin 1 en 1.000 con
contenido en el filtro de vidrio sinterizado previa- N,N-Dimetilacetamida.
mente pesado. Secar hasta peso constante sobre Solucin madre del estndar de cloruro de vini-
pentxido de fsforo y pesar el filtro. El precipita- lo - Preparar bajo una campana extractora.
do no debe pesar ms de 20 mg. Transferir 50,0 ml de N,N-Dimetilacetamida a
un recipiente de 50 ml, tapar el recipiente y pesar a
Aceites epoxidados
la dcima de mg. Llenar una jeringa de 50 ml de
Fase estacionaria - Emplear una placa para
polietileno o polipropileno con cloruro de vinilo
cromatografa en capa delgada (ver 100. Cromato-
gaseoso, dejar que el gas este en contacto con la
grafa) recubierta con gel de slice para cromato-
grafa de 1 mm de espesor. jeringa aproximadamente 3 minutos, vaciar la jerin-
Fase mvil - Tolueno. ga y llenar nuevamente con 50 ml de cloruro de
vinilo gaseoso. Adaptar una aguja hipodrmica a la
Procedimiento - Aplicar sobre la placa, en for-
jeringa y reducir el volumen de gas en la jeringa
ma de banda de 30 mm por 3 mm, 0,5 ml de Solu-
hasta 25 ml. Inyectar estos 25 ml de cloruro de
cin A 1 obtenida en la Identificacin. Dejar secar la
aplicacin y desarrollar el cromatograma hasta que vinilo lentamente en el recipiente y agitarlo suave-
el frente del solvente haya recorrido aproximada- mente evitando el contacto entre el lquido y la
aguja. Pesar el recipiente nuevamente: el aumento
mente tres cuartos de la longitud de la placa. Reti-
de peso debe ser de aproximadamente 60 mg (1 l
rar la placa de la cmara, marcar el frente del sol-
de la solucin as obtenida contiene aproximada-
vente. Secar la placa cuidadosamente. Exponer la
mente 1,2 g de cloruro de vinilo).
placa a vapores de iodo durante 5 minutos. Exami-
nar el cromatograma y localizar la banda con un R f Solucin estndar de cloruro de vinilo - A
de 0 y, si estuviera presente, la banda secundaria 1 volumen de Solucin madre del estndar de clo-
ruro de vinilo agregar 3 volmenes de
con un R f de aproximadamente 0,7, ambas corres-
N,N-Dimetilacetamida.
pondientes a aceites epoxidados. Remover el rea
Soluciones estndar - Transferir 10,0 ml de So-
del gel de slice que corresponde a la banda o ban-
lucin del estndar interno a cada uno de seis reci-
das. En forma similar remover un rea de gel de
pientes de 50 ml. Cerrar los recipientes. Inyectar 1; El ensayo es vlido si la opalescencia de la So-
2; 3; 5 y 10 l, respectivamente, de Solucin estn- lucin muestra no es ms intensa que la de la Solu-
dar de cloruro de vinilo en cinco de los recipientes. cin estndar.
Las seis soluciones as obtenidas contienen respec-
Cadmio - (ver 440. Espectrofotometra de ab-
tivamente, 0 g; aproximadamente 0,3; 0,6; 0,9; 1,5
sorcin y emisin atmica).
y 3 g de cloruro de vinilo. Agitar, evitando el
Solucin madre del estndar - Disolver 100 mg
contacto entre el tapn y el lquido. Colocar los
de cadmio en el menor volumen posible de una
recipientes en un bao de agua a 60 1 C durante
mezcla de cido clorhdrico y agua (50:50). Diluir
2 horas.
a 100,0 ml con cido clorhdrico al 1 % v/v para
Solucin muestra - Transferir 1,0 g del material
obtener una solucin de concentracin conocida de
a ensayar a un recipiente de 50 ml y agregar 10,0 ml
0,1 % de Cd.
de Solucin del estndar interno. Cerrar el reci-
Soluciones estndar - Preparar las soluciones
piente. Agitar evitando el contacto entre el tapn y
estndar empleando la Solucin madre del estndar
el lquido. Colocar el recipiente en un bao de agua
diluida con cido clorhdrico al 1 % v/v.
a 60 1 C durante 2 horas.
Solucin muestra - Evaporar 10 ml de la Solu-
Procedimiento - Inyectar por separado en el
cin S 1 a sequedad. Tomar el residuo con 5 ml de
cromatgrafo 1 ml del espacio libre superior de
cido clorhdrico al 1 % v/v, filtrar y diluir el filtra-
cada recipiente, registrar los cromatogramas y me-
do a 10,0 ml con el mismo cido.
dir las respuestas de los picos principales. Calcular Procedimiento - Medir la absorbancia a
el contenido de cloruro de vinilo. No debe estar 228,8 nm empleando una lmpara de cadmio de
presente ms de 1 ppm de cloruro de vinilo. ctodo hueco como fuente de radiacin y una llama
Fsforo total de aire-acetileno. No debe estar presente ms de
Solucin estndar - Mezclar 0,5 ml de una so- 0,6 ppm de Cd.
lucin de fosfato monobsico de potasio que con- Calcio - (ver 440. Espectrofotometra de ab-
tiene 0,219 g por litro, 10 ml de agua y 25 ml de sorcin y emisin atmica).
molibdovandico (SR) y diluir a 50,0 ml con agua Solucin madre del estndar - Inmediatamente
(100 ppm). antes de usar, diluir 1 en 10 con agua una solucin
Solucin muestra - Calcinar 0,25 g del material preparada con 1,000 g de carbonato de calcio y
a ensayar en un crisol de platino con 0,2 g de car- 23 ml de cido clorhdrico 1 M y diluida a 100,0 ml
bonato de sodio anhidro y 50 mg de nitrato de pota- con agua. (400 ppm de Ca).
sio. Despus de enfriar tomar el residuo con agua, Soluciones estndar - Preparar las soluciones
y transferir a un matraz aforado de 50 ml. Lavar el estndar empleando la Solucin madre del estn-
crisol con agua, agregar los lavados al matraz, aci- dar, diluida con agua.
dificar con cido sulfrico al 60 % p/p hasta que Solucin muestra - Calcinar 2,0 g del material a
cese la efervescencia. Agregar 25 ml de molibdo- ensayar en un crisol de slice. Mezclar el residuo
vandico (SR) y diluir a 50,0 ml con agua. con 10 ml de cido clorhdrico y evaporar a seque-
El ensayo es vlido si la coloracin amarilla dad en un bao de agua. Tomar este residuo con
producida en la Solucin muestra no es ms intensa 5 ml de agua, filtrar y diluir a 25,0 ml con el mismo
que la de la Solucin estndar. solvente.
Bario Procedimiento - Medir la absorbancia a
Solucin estndar - Mezclar 1,2 ml de una so- 422,7 nm empleando una lmpara de calcio de
lucin preparada disolviendo 0,178 g de cloruro de ctodo hueco como fuente de radiacin y una llama
bario dihidratado en 100,0 ml y diluida 1 en 20 de aire-acetileno. No debe estar presente ms de
(50 ppm de Ba); 0,8 ml de agua y 3 ml de solucin 0,07 % de Ca.
de sulfato de calcio, preparada agitando 5 g de Metales pesados
sulfato de calcio con 100 ml de agua durante 1 hora, Solucin reguladora de acetato pH 3,5 - Disol-
y filtrar. ver 25,0 g de acetato de amonio en 25,0 ml de agua
Solucin muestra - Calcinar 2,0 g del material a y agregar 38,0 ml de cido clorhdrico al 25 %.
ensayar en un crisol de slice. Mezclar el residuo Ajustar a pH 3,5 si fuera necesario, con cido
con 10 ml de cido clorhdrico y evaporar a seque- clorhdrico 2 M o con amonaco diluido y diluir a
dad en un bao de agua. Tomar este residuo con 100 ml con agua.
dos porciones de 1 ml de agua. Filtrar y agregar Solucin estndar - Proceder segn se indica
3 ml de solucin de sulfato de calcio preparada para la Solucin muestra empleando una mezcla de
agitando 5 g de sulfato de calcio con 100 ml de 10 ml de Solucin estndar de plomo diluida 1:5
agua durante 1 hora y filtrar.
(ver 590. Lmite de metales pesados) y 2 ml de la actico y diluir a 100 ml con agua. Diluir 1 ml de
Solucin muestra. esta solucin a 10 ml con agua. Antes de usar diluir
Solucin muestra - A 10 ml de Solucin S 1 1 ml de esta solucin a 10 ml con agua (10 ppm de
agregar 0,5 ml de fenolftalena (SR) y luego solu- Zn).
cin concentrada de hidrxido de sodio al 42 % Solucin estndar - Proceder segn se indica
hasta obtener un color rosa plido. Diluir a 25 ml para la Solucin muestra, empleando una mezcla de
con agua. A 12 ml de la solucin as obtenida agre- 2 ml de una Solucin madre del estndar y 8 ml de
gar 2 ml de Solucin reguladora de acetato pH 3,5 agua (0,2 %).
y mezclar. A continuacin agregar 1,2 ml de tioa- Despus de 2 minutos, el color violeta de la fase
cetamida-glicerina bsica (SR) y mezclar inmedia- inferior de la Solucin muestra no debe ser ms
tamente. intenso que el de la fase inferior de la Solucin
Solucin blanco - Proceder segn se indica para estndar.
la Solucin muestra empleando una mezcla de
Residuo de evaporacin - Evaporar a seque-
10 ml de agua y 2 ml de la Solucin muestra. dad 50 ml de Solucin S 2 en un bao de agua y
Despus de 2 minutos, la coloracin parda de la secar entre 100 y 150 C. El residuo no debe pesar
Solucin muestra no debe ser ms intensa que la de
ms de 7,5 mg (0,3 %).
la Solucin estndar.
VALORACIN
Estao Llevar a cabo el mtodo de combustin (ver 60.
Solucin muestra - A 10 ml de Solucin S 1 Combustin en erlenmeyer con oxgeno), emplean-
agregar 0,3 ml de cido tiogliclico y 30 ml de
do 50,0 mg del material a ensayar. Absorber los
agua. Mezclar y agregar 2 ml de una solucin de
productos de combustin en 20 ml de hidrxido de
lauril sulfato de sodio al 1 % y 1 ml de una solucin
sodio 1 N. A la solucin obtenida agregar 2,5 ml de
de ditiol, recientemente preparada, que contiene cido ntrico, 10,0 ml de nitrato de plata 0,1 N, 5 ml
5 g/l en etanol y diluir a 50 ml con agua. de sulfato frrico amnico (SR) y 1 ml de ftalato de
Solucin madre del estndar - Disolver 0,500 g
dibutilo. Titular con tiocianato de amonio 0,05 N
de estao en una mezcla de 5 ml de agua y 25 ml de
hasta obtener un color amarillo-rojizo. Realizar una
cido clorhdrico, y diluir a 1 litro. Inmediatamente
determinacin con un blanco y hacer las correccio-
antes de usar transferir 1 ml de esta solucin a una
nes necesarias. Cada mililitro de nitrato de plata
matraz aforado de 100 ml y diluir a volumen con 0,1 N equivale a 6,25 mg de poli(cloruro de vinilo).
cido clorhdrico al 2,5 %v/v (5 ppm de Sn).
Solucin estndar - Proceder segn se indica Poliolefinas
para la Solucin muestra, empleando 10 ml de ci- Las poliolefinas se obtienen por polimerizacin
do sulfrico al 20 % v/v y 6 ml de Solucin madre de etileno o propileno o por copolimerizacin de
del estndar. estas sustancias con no ms de 25 % de homlogos
Despus de 15 minutos, el color de la Solucin mayores (C 4 a C 10 ) o de cidos carboxlicos o ste-
muestra no debe ser ms intenso que el de la Solu- res. Ciertos materiales pueden ser mezclas de po-
cin estndar. liolefinas.
Cinc - [NOTA: preparar un blanco empleando Pueden contener hasta tres antioxidantes, uno o
10 ml de agua. El ensayo no es vlido a menos que varios lubricantes o antibloqueantes. Cuando el
la fase inferior obtenida con el blanco sea de color material debe proveer proteccin de la luz se le
verde.] agregan agentes opacantes como el dixido de tita-
Solucin reguladora de acetato de pH 4,4 - Di- nio.
solver 136 g de acetato de sodio y 77 g de acetato Este texto es aplicable a todas las poliolefinas
de amonio en agua y diluir a 100 ml con el mismo empleadas para propsitos mdico-farmacuticos
solvente. Agregar 250,0 ml de cido actico glacial con la excepcin de los otros materiales poliolefni-
y mezclar. cos descriptos en este captulo.
Solucin muestra - Diluir 1 ml de Solucin S 1 a CARACTERSTICAS
100 ml con agua. A 10 ml de la solucin resultante Polvo, perlas, grnulos o, despus de su trans-
agregar 5 ml de Solucin reguladora de acetato de formacin, lminas de espesor variable o envases.
pH 4,4; 1 ml de tiosulfato de sodio 0,1 M y 5,0 ml Prcticamente insolubles en agua, etanol, hexano y
de una solucin de ditizona en cloroformo que metanol; solubles en hidrocarburos aromticos
contiene 0,01 g/1 y agitar. calientes. Se ablandan a temperaturas entre 65 y
Solucin madre del estndar - Disolver una 165 C. Se queman con una llama azul.
cantidad de sulfato de cinc, equivalente a 0,440 g de
ZnSO 4 . 7H 2 O, en agua. Agregar 1 ml de cido IDENTIFICACIN
A - Absorcin infrarroja <460> A 0,25 g del Solucin indicadora - Disolver en alcohol
material a ensayar agregar 10 ml de tolueno y ca- 0,1 g de azul de bromotimol, 20 mg de rojo de meti-
lentar a reflujo durante 15 minutos. Colocar algu- lo y 0,2 g de fenolftalena. Diluir a 100 ml con el
nas gotas de la solucin obtenida sobre una placa de mismo solvente y filtrar.
cloruro de sodio y evaporar el solvente en una estu-
Aspecto de la solucin S 1 - La Solucin S 1 de-
fa a 80 C. El espectro del material presenta mxi-
be ser transparente e incolora.
mos de absorcin a 2.920; 2.850; 1.475; 1.465;
1.380; 1.170; 735 y 720 cm1, el espectro obtenido Acidez o alcalinidad - A 100 ml de la Solu-
debe ser idntico al espectro obtenido con el mate- cin S 1 agregar 0,15 ml de Solucin indicadora.
rial seleccionado como referencia. [NOTA: si el No se deben requerir ms de 1,5 ml de hidrxido de
material a ensayar se presenta en forma de lminas, sodio 0,01 N para cambiar el color del indicador a
el espectro puede determinarse directamente sobre azul. A 100 ml de Solucin S 1 agregar 0,2 ml de
un trozo de tamao apropiado.] naranja de metilo (SR). No se debe requerir ms de
B - Debe cumplir con los Ensayos suplementa- 1 ml de cido clorhdrico 0,01 N para iniciar el
rios para los aditivos presentes. cambio de color del indicador de amarillo a anaran-
C - En un crisol de platino, mezclar aproxima- jado.
damente 20 mg del material a ensayar con 1 g de Absorbancia - Entre 220 y 340 nm, la absor-
sulfato cido de potasio y calentar hasta fundir bancia de la Solucin S 1 no debe ser mayor de 0,2.
completamente. Dejar enfriar y agregar 20 ml de
cido sulfrico diluido. Calentar suavemente y Sustancias reductoras - A 20 ml de la Solu-
filtrar la solucin resultante. Al filtrado agregar cin S 1 agregar 1 ml de cido sulfrico diluido y
1 ml de cido fosfrico y 1 ml de solucin de 20 ml de permanganato de potasio 0,002 M. Calen-
perxido de hidrgeno al 30 %. Si la sustancia tar a reflujo durante 3 minutos y enfriar inmediata-
contiene dixido de titanio como opacante, se desa- mente. Agregar 1 g de ioduro de potasio y titular
rrolla un color anaranjado-amarillento. inmediatamente con tiosulfato de sodio 0,01 N,
empleando 0,25 ml de almidn (SR) como indica-
ENSAYOS - [NOTA: si es necesario, cortar las dor. Realizar una determinacin con un blanco y
muestras del material a ensayar en trozos de tamao hacer las correcciones necesarias. La diferencia
apropiado.] entre los volmenes no debe ser mayor de 3,0 ml.
Solucin S 1 - Transferir 25 g del material a en-
sayar a un erlenmeyer de vidrio de borosilicato de Metales pesados extrables
boca esmerilada. Agregar 500 ml de Agua para Solucin reguladora de acetato pH 3,5 - Disol-
Inyectables y calentar a reflujo durante 5 horas. ver 25,0 g de acetato de amonio en 25,0 ml de agua
Dejar enfriar y decantar. Reservar una porcin de y agregar 38,0 ml de cido clorhdrico al 25 %.
la solucin para el ensayo de Aspecto de la solu- Ajustar a pH 3,5 si fuera necesario, con cido
cin S 1 y filtrar el resto a travs de un filtro de clorhdrico 2 M o con amonaco diluido y diluir a
vidrio sinterizado de porosidad media. Emplear la 100 ml con agua.
Solucin S 1 dentro de las 4 horas de su preparacin. Solucin muestra - Concentrar 50 ml de Solu-
Solucin S 2 - Transferir 2,0 g del material a en- cin S 3 hasta aproximadamente 5 ml en bao de
sayar a un erlenmeyer de vidrio de borosilicato de agua y diluir a 20 ml con agua. A 12 ml de la solu-
boca esmerilada. Agregar 80 ml de tolueno y calen- cin as obtenida agregar 2 ml de Solucin regula-
tar a reflujo con agitacin constante durante dora de acetato pH 3,5 y mezclar. A continuacin
90 minutos. Enfriar a 60 C y agregar, con agita- agregar 1,2 ml de tioacetamida-glicerina bsi-
cin constante, 120 ml de metanol. Filtrar la solu- ca (SR) y mezclar inmediatamente.
cin a travs de un filtro de vidrio sinterizado de Solucin estndar - Proceder segn se indica
porosidad media. Lavar el erlenmeyer y el filtro para la Solucin muestra empleando una mezcla de
con 25 ml de una mezcla de 40 ml de tolueno y 2,5 ml de Solucin estndar de plomo (ver 590.
60 ml de metanol, agregar el lavado al filtrado y Lmite de metales pesados) y 2 ml de la Solucin
diluir a 250 ml con la misma mezcla. Preparar un muestra.
blanco. Solucin blanco - Proceder segn se indica para
Solucin S 3 - Transferir 100 g del material a la Solucin muestra empleando una mezcla de
ensayar a un erlenmeyer de vidrio de borosilicato de 10 ml de agua y 2 ml de la Solucin muestra.
boca esmerilada. Agregar 250 ml de cido clorh- Despus de 2 minutos, la coloracin parda de la
drico 0,1 M y calentar a reflujo con agitacin cons- Solucin muestra no debe ser ms intensa que la de
tante durante 1 hora. Dejar enfriar y decantar la la Solucin estndar. No deben encontrarse ms de
solucin. 2,5 ppm.
Residuo de ignicin <270> - No ms de 1,0 %, trilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de esta
determinado sobre 5,0 g. Este lmite no se aplica a solucin a 50 ml con el mismo solvente.
los materiales que contienen dixido de titanio Solucin estndar E - Disolver 60 mg de
como opacante. 3,3-bis(3-ter-butil-4-hidroxifenil)butirato de etileno
ENSAYOS SUPLEMENTARIOS - [NOTA: en 10 ml de una mezcla de acetonitrilo y tetrahidro-
estos ensayos se realizan totalmente o en parte slo furano (50:50). Diluir 2 ml de esta solucin a 50 ml
si son requeridos de acuerdo a la composicin o el con el mismo solvente.
uso del material.] Solucin estndar F - Disolver 60 mg de
1,3,5-tris[3,5di-ter-butil-4-hidroxibencil]-s-triazina-
Antioxidantes fenlicos 2,4,6(1H,3H,5H)-triona en 10 ml de una mezcla de
Sistema cromatogrfico - Emplear un equipo acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml
para cromatografa de lquidos con un detector de esta solucin a 50 ml con el mismo solvente.
ultravioleta ajustado a 280 nm y una columna de Solucin estndar G - Disolver 60 mg de tetra-
25 cm u 4,6mm con fase estacionaria constituida kis [3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)pro-pionato]
por octadecilsilano qumicamente unido a partculas de pentaeritritilo en 10 ml de una mezcla de aceto-
de slice porosa de 5 m de dimetro. nitrilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de
Fase mvil - Se puede emplear una de las cua- esta solucin a 50 ml con el mismo solvente.
tro mezclas siguientes: Solucin estndar H - Disolver 60 mg de
Fase mvil 1 - Acetonitrilo y agua (70:30) 2,2',2",6,6',6"-hexa-ter-butil-4,4',4"-[(2,4,6-trimetil-
con un caudal de aproximadamente 2 ml por 1,3,5-bencenotriil)trismetileno]trifenol en 10 ml de
minuto. una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano
Fase mvil 2 - Acetonitrilo, tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de esta solucin a 50 ml con el
y agua (60:30:10) con un caudal de aproxi- mismo solvente.
madamente 1,5 ml por minuto. Solucin estndar 1 - Disolver 60 mg de 3-(3,5-
Fase mvil 3 - Metanol, 2-propanol y agua di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de octadecilo
(50:45:5) con un caudal de aproximadamente en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir 2 ml de
1,5 ml por minuto. esta solucin a 50 ml con el mismo solvente.
Fase mvil 4 - Acetonitrilo y tetrahidrofura- Solucin estndar J - Disolver 60 mg de fosfito
no (80:20) con un caudal de aproximadamen- de tris (2,4-di-ter-butilfenilo) en 10 ml de cloruro
te 1,5 ml por minuto. de metileno. Diluir 2 ml de esta solucin a 50 ml
[NOTA: de las siguientes Soluciones estndar, con el mismo solvente.
preparar nicamente las necesarias para el ensayo Solucin estndar K - Disolver 20 mg de
de los antioxidantes fenlicos declarados en la P-EPQ en 10 ml de una mezcla de volmenes igua-
composicin del material a ensayar.] les de acetonitrilo y una solucin de hidroperxido
Solucin estndar A - Disolver 25 mg de butil- de terbutilo en tetrahidrofurano con una concentra-
hidroxitolueno y 60 mg de 3,3-bis(3-ter-butil-4- cin de 10 g/1. Dejar reposar en un recipiente ce-
hidroxifenil)butirato de etileno en 10 ml de una rrado durante 1 hora. Diluir 2 ml de esta solucin a
mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50). 50 ml con una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofu-
Diluir 2 ml de esta solucin a 50 ml con el mismo rano (50:50).
solvente. Solucin muestra S 21 - Evaporar 50 ml de la
Solucin estndar B - Disolver 60 mg de tetra- Solucin S 2 a sequedad al vaco a 45 C. Disolver
kis [3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)-propionato] el residuo en 5 ml de acetonitrilo y tetrahidrofurano
de pentaeritritilo y 60 mg de (50:50). Preparar una solucin blanco a partir del
2,2',2",6,6',6"-hexa-ter-butil-4,4',4"-[(2,4,6-trimetil- blanco correspondiente a la Solucin S 2 .
1,3,5-bencenotriil)trismetileno]trifenol en 10 ml de Solucin muestra S 22 - Evaporar 50 ml de la
una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano Solucin S 2 a sequedad al vaco a 45 C. Disolver
(50:50). Diluir 2 ml de esta solucin a 50 ml con el el residuo con 5 ml de cloruro de metileno. Prepa-
mismo solvente. rar una solucin blanco a partir de la solucin blan-
Solucin estndar C - Disolver 60 mg de co que corresponde a la Solucin S 2 .
3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de Solucin muestra S 23 - Evaporar 50 ml de la
octadecilo y 60 mg de fosfito tris(2,4-di-ter- Solucin S 2 a sequedad al vaco a 45 C. Disolver
butilfenilo) en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir el residuo con 5 ml de una mezcla de volmenes
2 ml de esta solucin a 50 ml con el mismo solven- iguales de acetonitrilo y una solucin de hidro-
te. perxido de terbutilo en tetrahidrofurano con una
Solucin estndar D - Disolver 25 mg de butil- concentracin de 10 g/1. Cerrar el matraz y dejar
hidroxitolueno en 10 ml de una mezcla de acetoni- reposar durante 1 hora. Preparar una solucin blan-
co a partir de la solucin blanco que corresponde a estndar de antioxidantes de la lista anterior que
la Solucin S 2 . son declarados en la composicin.
Aptitud del sistema - (ver 100. Cromatografa) Emplear Fase mvil 3 si el material a ensayar
- Cromatografiar la Solucin estndar A, emplean- contiene 3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil) propio-
do Fase mvil 1, registrar los cromatogramas y nato de octadecilo y/o fosfito de tris(2,4-di-
medir las respuestas de los picos segn se indica en ter-butilfenilo). Inyectar por separado en el cro-
Procedimiento: la resolucin, R, entre los picos de matgrafo volmenes iguales (aproximadamente
butilhidroxitolueno y 3,3-bis(3- 20 l) de la Solucin muestra S 22 , el blanco corres-
ter-butil-4-hidroxifenil)butirato de etileno no debe pondiente, la Solucin estndar C, y la Solucin
ser menor de 8. Cromatografiar la Solucin estn- estndar I o J o 20 l de las Soluciones estndar I y
dar B, empleando Fase mvil 2, registrar los croma- J.
togramas y medir las respuestas de los picos segn Emplear Fase mvil 4 si la sustancia a ensayar
se indica en Procedimiento: la resolucin R entre contiene P-EPQ. Inyectar por separado en el cro-
los picos de tetrakis [3-(3,5-ter-butil-4- matgrafo volmenes iguales (aproximadamente
hidroxi-fenil)propionato] de pentaeritritilo y 20 l) de la Solucin muestra S 23 , el blanco corres-
2,2',2",6,6',6"-hexa-ter-butil-4,4',4"-[(2,4,6-tri- pondiente y la Solucin, estndar K.
metil-1,3,5-bencenotriil)tris-metileno]trifenol no En todos los casos registrar los cromatogramas
debe ser menor de 2. Cromatografiar la Solucin durante 30 minutos. Los cromatogramas corres-
estndar C, empleando Fase mvil 3, registrar los pondientes a las Soluciones muestra S 21 , S 22 y S 23
cromatogramas y medir las respuestas de los picos deben presentar nicamente picos debidos a los
segn se indica en Procedimiento: la resolucin R antioxidantes declarados en la composicin y otros
entre los picos de 3-(3,5-di-ter-butil-4- picos menores que tambin aparecen en los croma-
hidroxifenil)propionato de octadecilo y fosfito de togramas correspondientes a los blancos. Las res-
tris(2,4-di-ter-butilfenilo) no debe ser menor de 2. puestas de los picos de las Soluciones muestra S 21 ,
Cromatografiar la Solucin estndar E, empleando S 22 y S 23 deben ser menores que las respuestas
Fase mvil 4, registrar los cromatogramas y medir correspondientes a los picos obtenidos a partir de
las respuestas de los picos segn se indica en Pro- las Soluciones estndar D a K.
cedimiento: la resolucin R entre los picos principa- Antioxidantes no-fenlicos
les (con tiempos de retencin de aproximadamente Fase estacionaria - Emplear una placa para
3,5 y 5,8) no debe ser menor de 6. cromatografa en capa delgada (ver 100. Cromato-
Procedimiento grafa) recubierta con gel de slice para cromato-
Emplear Fase mvil 1 si el material a ensayar grafa con indicador de fluorescencia de 0,25 mm
contiene butilhidroxitolueno y/o 3,3-bis(3-ter-butil- de espesor.
4-hidroxifenil)-butirato de etileno. Inyectar por Fase mvil 1 - Hexano.
separado en el cromatgrafo volmenes iguales Fase mvil 2 - Cloruro de metileno.
(aproximadamente 20 l) de la Solucin muestra Solucin estndar L - Disolver 60 mg de 2,2'-
S 21 , el blanco correspondiente, la Solucin estndar bis(octadeciloxi)-5,5'-espirobi [1,3,2-dioxa-
A, y las Soluciones estndar D o E o 20 Pl de las fosforinano] en 10 ml de cloruro de metileno. Di-
Soluciones estndar D y E. luir 2 ml de esta solucin a 10 ml con cloruro de
Emplear Fase mvil 2 si el material a ensayar metileno acidificado (SR).
contiene uno o varios de los siguientes antioxidan- Solucin estndar M - Disolver 60 mg de disul-
tes: furo de dioctadecilo en 10 ml de cloruro de metile-
- 1,3,5-tris(3,5-di-ter-butil-4-hidroxibencil)-s- no. Diluir 2 ml de esta solucin a 10 ml con cloruro
triazina-2,4,6(1H,3H,5H)-triona, de metileno acidificado (SR).
- tetrakis [3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxi- Solucin estndar N - Disolver 60 mg de 3,3'-
fenil)propionato] de pentaeritritilo, tiodipropionato de didodecilo en 10 ml de cloruro
- 2,2',2",6,6',6"-hexa-ter-butil-4,4',4"-[(2,4,6- de metileno. Diluir 2 ml de esta solucin a 10 ml
trimetil-1,3,5-bencenotriil) trismetileno] trilfenol, con cloruro de metileno acidificado (SR).
- 3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de Solucin estndar O - Disolver 60 mg de 3,3'-
octadecilo, tiodipropionato de dioctadecilo en 10 ml de cloruro
- fosfito de tris(2,4-di-ter-butilfenilo), de metileno. Diluir 2 ml de esta solucin a 10 ml
Inyectar por separado en el cromatgrafo vol- con cloruro de metileno acidificado (SR).
menes iguales (aproximadamente 20 l) de la Solu- Solucin estndar P - Disolver 60 mg de 3,3'-
cin muestra S 21 , el blanco correspondiente, la tiodipropionato de didodecilo y 60 mg de 3,3'-
Solucin estndar B y cada una de las Soluciones tiodipropionato de dioctadeciIo en 10 ml de cloruro
de metileno. Diluir 2 ml de esta solucin a 10 ml Procedimiento - Aplicar sobre dos placas 10 l
con cloruro de metileno acidificado (SR). de la Solucin S 24 . Aplicar sobre la primera placa
Solucin muestra S 24 - Evaporar 100 ml de la 10 l de la Solucin estndar Q y aplicar sobre la
Solucin S 2 a sequedad en vaco a 45 C. Disolver segunda placa 10 l de las Soluciones estndar R y
el residuo en 2 ml de cloruro de metileno acidifica- S. Dejar secar las aplicaciones. Desarrollar la pri-
do (SR). mera placa, hasta que el frente del solvente haya
Revelador - Preparar una solucin de iodo al recorrido aproximadamente 10 cm empleando Fase
1 % en etanol. mvil 1. Retirar la placa de la cmara, marcar el
Procedimiento - Aplicar por separado sobre la frente del solvente y dejarla secar al aire. Pulveri-
placa 20 l de la Solucin muestra S 24 , 20 l de la zar sobre la placa con Revelador 1. Calentar en una
Solucin estndar P y 20 l de cada una de las estufa a 120 C durante unos minutos para intensi-
Soluciones estndar que corresponden a todos los ficar las manchas. Cualquier mancha que corres-
antioxidantes fenlicos y no-fenlicos presentes en ponda a cido esterico en el cromatograma de la
la composicin del material a ensayar. Dejar secar Solucin muestra S 24 debe ser idntica en posicin
las aplicaciones y desarrollar los cromatogramas (R f aproximadamente de 0,5) pero no ms intensa
hasta que el frente del solvente haya recorrido que la mancha obtenida a partir de la Solucin
aproximadamente 18 cm empleando Fase mvil 1. estndar Q.
Retirar la placa de la cmara y dejar secar. Des- Desarrollar la segunda placa hasta que el frente
arrollar nuevamente los cromatogramas hasta que el del solvente haya recorrido aproximadamente
frente del solvente haya recorrido aproximadamente 13 cm empleando Fase mvil 2. Retirar la placa de
17 cm empleando Fase mvil 2. Retirar la placa de la cmara y dejar secar al aire. Desarrollar nueva-
la cmara, marcar el frente del solvente y dejar mente hasta que el frente del solvente haya recorri-
secar. Examinar bajo luz ultravioleta a 254 nm. do aproximadamente 10 cm empleando Fase
Pulverizar sobre la placa con Revelador, dejar secar mvil 3. Retirar la placa de la cmara y marcar el
durante 10 a 15 minutos y examinar bajo luz ultra- frente del solvente. Dejar secar la placa. Pulverizar
violeta a 254 nm. Cualquier mancha en el cromato- sobre la placa con Revelador 2. Calentar en una
grama de la Solucin muestra S 24 no debe ser ms estufa a 120 C hasta que aparezcan las manchas.
intensa que las manchas correspondientes obtenidas Las manchas que corresponden a erucamida u
a partir de las Soluciones estndar. El ensayo no es oleamida en el cromatograma de la Solucin mues-
vlido a menos que el cromatograma de la Solucin tra S 24 deben ser idnticas en posicin (R f aproxi-
estndar P presente dos manchas claramente sepa- madamente de 0,2) pero no ms intensas que las
radas. manchas obtenidas a partir de las Soluciones estn-
Amidas y estearatos dar R y S.
Fase estacionaria - Emplear una placa para Sustancias solubles en hexano - Transferir
cromatografa en capa delgada (ver 100. Cromato- 10 g del material a ensayar a un erlenmeyer de
grafa) recubierta con gel de slice para cromato- vidrio de borosilicato de 250 ml con boca esmerila-
grafa con indicador de fluorescencia de 0,25 mm da. Agregar 100 ml de hexano y calentar a reflujo
de espesor. durante 4 horas, agitando constantemente. Enfriar
Fase mvil 1 - 2,2,4-Trimetilpentano y etanol en un bao de hielo y filtrar rpidamente (el tiempo
(75:25). de filtracin debe ser menor de 5 minutos, si es
Fase mvil 2 - Hexano. necesario la filtracin puede ser acelerada aplicando
Fase mvil 3 - Cloruro de metileno y metanol presin sobre la solucin) a travs de un filtro de
(95:5). vidrio sinterizado de porosidad media manteniendo
Solucin estndar Q - Disolver 20 mg de cido la solucin a aproximadamente 0 C. Evaporar
esterico en 10 ml de cloruro de metileno. 20 ml del filtrado en un cristalizador previamente
Solucin estndar R - Disolver 40 mg de olea- pesado en un bao de agua. Secar el residuo en una
mida en 20 ml de cloruro de metileno. estufa entre 100 y 105 C durante 1 hora. El peso
Solucin estndar S - Disolver 40 mg de eru- del residuo obtenido debe ser igual al del residuo
camida en 20 ml de cloruro de metileno. obtenido a partir del material de referencia, con una
Solucin muestra - Solucin S 24 preparada en desviacin mxima de 10 % y dicho peso no debe
Antioxidantes no fenlicos. ser mayor de 5 %.
Revelador 1 - Solucin de 2,6-Dicloro-fenol-
Aluminio extrable - (ver 440. Espectrofoto-
indofenol sdico al 0,2 % en etanol.
metra de absorcin y emisin atmica).
Revelador 2 - Solucin de cido fosfomolbdico
Solucin madre del estndar - Disolver en agua
al 4 % en etanol.
una cantidad de sulfato de potasio y aluminio, equi-
valente a 352 mg de AlK(SO 4 ) 2 . 12H 2 O. Agregar Soluciones estndar - Preparar las soluciones
10 ml de cido sulfrico diluido y diluir a 100 ml estndar empleando la Solucin madre del estndar
con agua (200 ppm de Al). diluida con cido clorhdrico 0,1 M.
Soluciones estndar - Preparar las soluciones Procedimiento - Medir la absorbancia a
estndar empleando la Solucin madre del estndar 364,3 nm empleando una lmpara de titanio de
diluida con cido clorhdrico 0,1 M. ctodo hueco como fuente de radiacin y una llama
Solucin muestra - Evaporar a sequedad 100 ml de xido nitroso-acetileno. No debe contener ms
de Solucin S 3 en un bao de agua. Disolver el de 1 ppm de Ti extrable.
residuo en 2 ml de cido clorhdrico y diluir a 10 ml Cinc extrable - (ver 440. Espectrofotometra
con cido clorhdrico 0,1 M.
de absorcin y emisin atmica).
Procedimiento - Medir la absorbancia a
Solucin madre del estndar - Disolver una
309,3 nm empleando una lmpara de aluminio de
cantidad de sulfato de cinc, equivalente a 440 mg de
ctodo hueco como fuente de radiacin y una llama
ZnSO 4 . 7H 2 O, en agua. Agregar 1 ml de cido
de xido nitroso-acetileno. No debe contener ms actico y diluir a 100 ml con agua. Diluir 1 ml de
de 1 ppm de Al extrable. esta solucin a 10 ml con agua. Antes de usar,
Titanio extrable - (ver 440. Espectrofoto- diluir 1 ml de esta solucin a 10 ml con agua
metra de absorcin y emisin atmica). (10 ppm de Zn).
Solucin muestra - Evaporar a sequedad 100 ml Soluciones estndar - Preparar las soluciones
de Solucin S 3 en un bao de agua. Disolver el estndar empleando una Solucin madre del estn-
residuo en 2 ml de cido clorhdrico y diluir a dar diluida con cido clorhdrico 0,1 M.
10,0 ml con cido clorhdrico 0,1 M. Solucin muestra - Solucin S 3 .
Solucin madre del estndar - Disolver Procedimiento - Medir la absorbancia a
100,0 mg de titanio en 100 ml de cido clorhdrico 213,9 nm empleando una lmpara de cinc de ctodo
diluido hasta 150 ml con agua, calentando si fuera hueco como fuente de radiacin y una llama de
necesario. Dejar enfriar y diluir a 1 litro con agua acetileno-aire. No debe contener ms de
(100 ppm de Ti). 1 ppm de Zn extrable.
LMITES DE ADITIVOS
ADITIVOS LMITES (%)
Aditivos antioxidantes
butilhidroxitolueno 0,125
tetrakis [3-(3,5-di-ter-butil-4 hidoxifenil)propionato] de pentaeritritilo 0,3
1,3,5-tris(3,5-di-ter-butil-4-hidroxibencil)-s-triazina-2,4,6-(1H,3H,5H)triona 0,3
3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de octadecilo 0,3
3,3-bis(3-ter- butil-4-hidroxifenil)butirato de etileno 0,3
disulfuro de dioctadecilo 0,3
2,2c,2s,6,6c,6s-hexa-ter-butil-4,4c,4s-[(2,4,6-trimetil-1,3,5-bencenotriil)trismetileno]trifenol 0,3
2,2-bis(octadeciloxi)-5,5-espirobi(1,3,2-dioxafosforinano) 0,3
3,3-tiodopropionato de didodecilo 0,3
3,3- tiodipropionato de dioctadecilo 0,3
fosfito de tris(2,4-di-ter-butilfenilo) 0,3
P-EPQ 0,1
copolmero de succinato de dimetilo y (4-hidroxi-2,2,6,6-tetrametilpiperidin-1-il)etanol 0,3
El total de aditivos antioxidante enumerados anteriormente 0,3
Otros aditivos -
hidrocalcita 0,5
alcanoamidas 0,5
alquenoamidas 0,5
silicio-aluminato de sodio 0,5
slice 0,5
benzoato de sodio 0,5
steres o sales de cidos grasos 0,5
LMITES DE ADITIVOS continuacin
ADITIVOS LMITES (%)
fosfato trisdico 0,5
vaselina lquida 0,5
xido de cinc 0,5
talco 0,5
estearato de calcio o cinc o una mezcla de ambos 0,5
dixido de titanio 4
xido de magnesio 0,2
Polietileno de baja densidad para envases tar a reflujo durante 5 horas. Dejar enfriar y decan-
destinados a preparaciones para uso parenteral tar.
y para preparaciones oftlmicas Aspecto de la solucin - La Solucin S debe
El polietileno de baja densidad que cumple con ser transparente, incolora y prcticamente inodora.
los siguientes requisitos se emplea en la fabricacin
Acidez o alcalinidad - A 100 ml de Solucin S
de envases para preparaciones de uso parenteral y
agregar 0,15 ml de Solucin indicadora. No se
oftlmico.
deben requerir ms de 1,5 ml de hidrxido de sodio
El polietileno de baja densidad se obtiene por
0,01 N para cambiar el color del indicador a azul.
polimerizacin de etileno a altas presiones en pre-
A 100 ml de la Solucin S agregar 0,2 ml de naranja
sencia de oxgeno o catalizadores. El material no
de metilo (SR). No se debe requerir ms de 1,0 ml
debe poseer aditivos.
de cido clorhdrico 0,01 N para iniciar el cambio
CARACTERISTICAS de color del indicador de amarillo a anaranjado.
Perlas, grnulos, lminas translcidas de espesor
Sustancias solubles en hexano - Transferir 5 g
variable, prcticamente insoluble en agua, etanol y
del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio de
metanol. Se ablanda por encima de los 80 C. Se
borosilicato de boca esmerilada. Agregar 50 ml de
quema con una llama azul.
hexano, adaptar un refrigerante y calentar en un
IDENTIFICACION bao de agua con agitacin constante durante
A - Absorcin infrarroja <460>. A 250 mg del 4 horas. Enfriar en un bao de hielo, se puede for-
material a ensayar, agregar 10 ml de tolueno y ca- mar un gel. Adaptar una camisa de enfriamiento,
lentar a reflujo durante 15 minutos. Colocar unas llena de agua helada, a un filtro de vidrio sinteriza-
gotas de la solucin sobre un disco de cloruro de do de porosidad media adaptado con un dispositivo
sodio y evaporar el solvente a 80 C. El espectro que permite aplicar presin durante la filtracin.
del material a ensayar debe presentar mximos en Dejar enfriar el filtro durante 15 minutos. Fil-
particular a 2.920; 2.850; 1.465; 731 y; 722 cm-1; y trar la solucin de hexano aplicando una presin de
el espectro debe ser idntico al obtenido con el 27 kPa sin lavar el residuo; el tiempo de filtracin
material seleccionado como referencia. [NOTA: si no debe exceder 5 minutos. Evaporar 20 ml de la
el material a ensayar se presenta en forma de lmi- solucin hasta sequedad. Secar el residuo a 100 C
nas, el espectro puede determinarse directamente durante 1 hora. El residuo no debe pesar ms de
sobre un trozo de tamao apropiado.] 60 mg (3 %).
B - A 2 g de material a ensayar agregar 100 ml
Sustancias reductoras - A 20 ml de Solucin S
de agua y calentar a reflujo durante 2 horas. Dejar
agregar 1 ml de cido sulfrico diluido y 20 ml de
enfriar. La densidad relativa del material (ver 160.
permanganato de potasio 0,002 M. Calentar a reflu-
Determinacin de la densidad relativa) debe estar
jo durante 3 minutos y enfriar inmediatamente.
entre 0,910 y 0,935.
Agregar 1 g de ioduro de potasio y titular inmedia-
ENSAYOS - [NOTA: si es necesario, cortar el tamente con tiosulfato de sodio 0,01 N, empleando
material en trozos de tamao apropiado.] 0,25 ml de almidn (SR) como indicador. Realizar
Solucin indicadora - Disolver en alcohol una determinacin con un blanco y hacer las co-
100 mg de azul de bromotimol, 20 mg de rojo de rrecciones necesarias. La diferencia entre los
metilo y 0,2 g de fenolftalena. Diluir a 100 ml con volmenes no debe ser mayor de 0,5 ml.
el mismo solvente y filtrar.
Aditivos
Solucin S - Transferir 25 g del material a en- Fase estacionaria - Emplear una placa para
sayar a un erlenmeyer de vidrio de borosilicato de cromatografa en capa delgada (ver 100. Cromato-
boca esmerilada. Agregar 500 ml de agua y calen-
grafa) recubierta con gel de slice para cromato- frente del solvente haya recorrido aproximadamente
grafa de 0,25 mm de espesor. 10 cm empleando Fase mvil 2. Retirar la placa de
Fase mvil 1 - Hexano. la cmara y dejarla secar al aire. Pulverizar sobre la
Fase mvil 2 - Cloruro de metileno y metanol placa con Revelador y calentar a 120 C hasta que
(95:5). las manchas aparezcan en el cromatograma de la
Solucin muestra - Transferir 2,0 g del material Solucin estndar. No debe aparecer ninguna man-
a ensayar y 5 ml de cloroformo a un recipiente de cha en el cromatograma de la Solucin muestra, a
10 ml de paredes gruesas de vidrio tipo I II (ver excepcin de una mancha que puede estar en el
430. Envases de vidrio). Cerrar el mismo con un frente del solvente del primer desarrollo y que co-
tapn de goma recubierto con politetrafluoretileno. rresponde a oligmeros. El cromatograma de la
Colocar el recipiente en un bao de agua a 85 C Solucin estndar debe presentar dos manchas
durante 2 horas. Retirar, invertir y dejar enfriar. separadas.
Decantar la solucin clorofrmica transparente.
Residuo de ignicin - <270>. No debe ser ma-
Solucin estndar - Disolver 20 mg de disulfu-
yor de 200 ppm, determinado sobre 10 g.
ro de dioctadecilo y 20 mg de bis[3,3-bis(3-
ter-butil-4-hidroxifenil)butirato] de etileno en cloro- Polietileno de alta densidad para envases des-
formo y diluir a 10 ml con el mismo solvente. tinados a preparaciones de uso parenteral
Revelador - Solucin de cido fosfomolbdico El polietileno de alta densidad que cumple con
al 4 % en alcohol. los siguientes requisitos es apropiado para la fabri-
Procedimiento - Aplicar por separado sobre la cacin de envases y tapones destinados a prepara-
placa 10 l de cada solucin. Dejar secar las apli- ciones de uso parenteral.
caciones y desarrollar los cromatogramas hasta que El polietileno de alta densidad (tambin llamado
el frente del solvente haya recorrido aproximada- de "baja presin") es obtenido por polimerizacin
mente 13 cm empleando Fase mvil 1. Retirar la de etileno a baja presin en presencia de catalizado-
placa de la cmara y dejarla secar al aire. Desarro- res.
llar nuevamente los cromatogramas hasta que el
VALORACION CARACTERSTICAS
Transferir de 250 mg a 1 g del material a ensa- El envase debe ser suficientemente transparente
yar, segn el contenido de acetato de vinilo del para permitir un examen visual apropiado de su
copolmero en ensayo, a un erlenmeyer de vidrio al contenido antes y despus de ser llenado con sangre
borosilicato de boca esmerilada de 300 ml. Agregar y debe ser suficientemente flexible para ofrecer una
40 ml de xileno. Calentar a reflujo con agitacin mnima resistencia durante el llenado y vaciado
durante 4 horas. Dejar enfriar, con agitacin conti- bajo condiciones normales de uso. El envase no
nua, hasta que comience la precipitacin. Agregar debe contener ms de 5 ml de aire.
lentamente 25,0 m1 de una solucin de hidrxido ENSAYOS
de potasio alcohlico preparada disolviendo 6,6 g Solucin S 1 .- Llenar el envase con 100 ml de
de hidrxido de potasio en 50 ml de agua y dilu- Solucin fisiolgica libre de piretgenos (SR) est-
yendo a 1 litro con etanol. Calentar a reflujo con ril. Cerrar el envase y calentarlo en autoclave,
agitacin durante 3 horas. Dejar enfriar con agita- manteniendo la temperatura a 110 C durante
cin continua, lavar el refrigerante con 50 ml de 30 minutos.
agua y agregar al erlenmeyer 30,0 ml de cido Si el envase a ensayar contiene una solucin an-
sulfrico 0,1 N. Transferir el contenido del erlen- ticoagulante, vaciarlo previamente, y lavarlo con
meyer a un vaso de precipitados de 400 ml. Lavar 250 ml de Agua para Inyectables a 20 1 C en
el erlenmeyer con dos porciones de 50 ml de una varias porciones, descartando los lavados.
solucin de sulfato de sodio anhidro al 20 % y tres Solucin S 2 - Introducir en el envase un volu-
porciones de 20 ml de agua. Agregar todos los men de Agua para Inyectables igual al volumen de
lavados al vaso de precipitados que contiene la solucin de anticoagulante. Cerrar el envase y
solucin inicial. Titular el exceso de cido sulfri- calentarlo en autoclave manteniendo la temperatura
co con hidrxido de sodio 0,1 N, determinando el a 110 C durante 30 minutos. Enfriar, agregar sufi-
punto final potenciomtricarnente (ver 780. Volu- ciente cantidad de Agua para Inyectables como
metra). Realizar una determinacin con un blanco para llenar el envase hasta su capacidad nominal.
y hacer las correcciones necesarias. Cada mililitro Si el envase a ensayar contiene una solucin an-
de cido sulfrico 0,1 N es equivalente a 8,609 mg ticoagulante, vaciarlo previamente y lavarlo segn
de acetato de vinilo. se indic anteriormente para la Solucin S 1 .
ENVASES PRIMARIOS PLSTICOS Resistencia a variaciones de temperatura -
Envases plsticos estriles para sangre Colocar el envase en una cmara apropiada la cual
humana o hemoderivados posee una temperatura inicial entre 20 y 23 C.
Los envases plsticos para la recoleccin, alma- Enfriarlo rpidamente a una temperatura de 80 C
cenamiento, procesamiento y administracin de y mantenerlo a esa temperatura durante 24 horas.
sangre humana y hemoderivados se fabrican de uno Elevar la temperatura a 50 C y mantenerla durante
o ms polmeros y, si el caso as lo requiere, con 12 horas. Dejar enfriar a temperatura ambiente. El
aditivos permitidos. En condiciones normales de envase deber cumplir con los ensayos para la Re-
uso, los materiales no deben liberar monmeros u sistencia a la centrifugacin, Resistencia al estira-
miento, Fuga, Permeabilidad al vapor de agua,
Vaciado bajo presin y Velocidad de llenado, si- Comprimir el envase de manera tal que durante el
guiendo las tcnicas descriptas en este captulo. vaciado se mantenga una presin interna de 40 kPa.
Resistencia a la centrifugacin - El envase se debe vaciar en menos de 2 minutos.
Solucin indicadora - Disolver, con calenta- Velocidad de llenado - Conectar el envase, por
miento suave, 50 mg de azul de bromofenol en intermedio del tubo de transferencia con su corres-
3,73 ml de hidrxido de sodio 0,02 M y diluir a pondiente aguja a un depsito que contiene una
100 ml con agua. cantidad apropiada de una solucin con una visco-
Procedimiento - Introducir en el envase un vo- sidad similar a la de la sangre, como por ej., una
lumen de agua acidificada, por el agregado de 1 ml solucin de sacarosa con una concentracin de
de solucin de cido clorhdrico diluido, en canti- 335 g/1 a 37 C. Mantener la presin interna del
dad suficiente para alcanzar su capacidad nominal. depsito a 9,3 kPa, estando al mismo nivel la base
Envolver el envase con un papel absorbente im- del mismo y la parte superior del envase. El volu-
pregnado con Solucin indicadora diluida 1 en 5. men de lquido que fluye dentro del envase en
Secar y centrifugar durante 10 minutos a 5.000 g. 8 minutos no debe ser menor que la capacidad no-
No se debe producir ninguna fuga, revelada por el minal del envase.
papel indicador, ni ninguna distorsin permanente.
Transparencia -
Resistencia al estiramiento - Introducir en el Solucin de sulfato de hidracina - Disolver
envase un volumen de agua acidificada por el agre- 1,0 g de sulfato de hidracina en agua y diluir a
gado de 1 ml de solucin de cido clorhdrico dilui- 100 ml con el mismo solvente. Dejar reposar du-
do, en suficiente cantidad para alcanzar su capaci- rante 4 a 6 horas.
dad nominal. Suspender el envase por el dispositi- Solucin de hexametilentetramina - Transferir
vo de sujecin desde el extremo opuesto al tubo de 2,5 g de hexametilentetramina a un matraz de
salida, aplicar a lo largo del eje del tubo una fuerza 100 ml con tapn esmerilado. Agregar 25 ml de
de 20 N (2,05 kgf). Mantener la traccin durante agua y disolver.
5 segundos. Repetir el ensayo aplicando la fuerza a Suspensin opalescente primaria - Agregar a la
cada una de las partes que se emplean para llenar y Solucin de hexametilentetramina contenida en el
vaciar el envase. No deber producirse rotura o matraz, 25 ml de Solucin de sulfato de hidracina.
deterioro apreciable. Mezclar y dejar reposar durante 24 horas. Esta
Ensayo de fuga - Colocar el envase, previa- suspensin es estable durante 2 meses cuando se la
mente sometido al ensayo de Resistencia al estira- almacena en envases de una superficie interna per-
miento, entre dos placas recubiertas con papel ab- fectamente lisa. La suspensin no debe adherirse y
sorbente impregnado con Solucin indicadora di- debe agitarse cuidadosamente antes de ser emplea-
luida 1 en 5, empleada en el ensayo de Resistencia da.
a la centrifugacin y secar. Aplicar, progresiva- Procedimiento - Introducir al envase vaco un
mente, una fuerza a las placas de forma que la pre- volumen, equivalente a su capacidad nominal, de la
sin interna del envase alcance 67 kPa en el trmino Suspensin opalescente primaria diluida de manera
de 1 minuto. Mantener la presin durante de obtener una absorbancia entre 0,37 y 0,43 a
10 minutos. No se debe percibir ninguna seal de 640 nm (el factor de dilucin es de 1 en 16). La
fuga sobre el papel indicador. turbidez de la suspensin debe ser perceptible
cuando se observa a travs del envase, en compara-
Permeabilidad al vapor de agua - Para enva- cin con un envase de similares caractersticas lleno
ses que contienen solucin anticoagulante, llenar de agua en las mismas condiciones.
con un volumen de Solucin fisiolgica (SR) simi-
lar a la cantidad de sangre a contener. Efectos hemolticos en sistemas de pH regu-
Para el caso de los envases vacos, llenar con la lado - (ver 470. Espectrofotometra ultravioleta y
mezcla de solucin de anticoagulante indicada y visible).
Solucin fisiolgica (SR). Cerrar el envase, pesarlo Solucin reguladora madre - Disolver 90,0 g
y almacenarlo a 5 1 C en una atmsfera con una de cloruro de sodio, 34,6 g de fosfato dibsico de
humedad relativa de 50 5 % durante 21 das. Al sodio y 2,43 g de fosfato monobsico de sodio en
final de este perodo la prdida de peso no deber ser agua y diluir a 1 litro con el mismo solvente.
Solucin reguladora A 0 - A 30,0 ml de la Solu-
mayor de 1 %.
cin reguladora madre agregar 10,0 ml de agua.
Vaciado bajo presin - Llenar el envase con Solucin reguladora B 0 - A 30,0 ml de la Solu-
un volumen de agua a 5 1 C, equivalente a su cin reguladora madre agregar 20,0 ml de agua.
capacidad nominal. Adosar a uno de los conectores Solucin reguladora C 0 - A 15,0 ml de la Solu-
un equipo de transfusin sin cnula intravenosa. cin reguladora madre agregar 85,0 ml de agua.
Solucin A 1 - Mezclar 3,0 ml de Solucin regu- Toxicidad anormal <360> - Inyectar 0,5 ml de
ladora A 0 y 12,0 ml de agua. la Solucin S 1 a cada ratn. La Solucin S 1 debe
Solucin B 1 - Mezclar 4,0 ml de Solucin regu- cumplir con los requisitos establecidos.
ladora B 0 y 11,0 ml de agua.
Acondicionamiento
Solucin C 1 - Mezclar 4,75 ml de Solucin re-
Los envases estn contenidos en sobres protec-
guladora C 0 y 10,25 ml de agua.
tores. Al separarse el envase de su sobre protector,
Procedimiento - Transferir 1,4 ml de la Solu-
el mismo no debe evidenciar fugas ni crecimiento
cin S 2 a cada uno de tres tubos de centrfuga. Al de microorganismos. El sobre protector debe ser
tubo I agregarle 0,1 ml de Solucin reguladora A 0 , suficientemente resistente para soportar la manipu-
al tubo II agregarle 0,1 ml de Solucin reguladora
lacin normal.
B 0 y al tubo III agregarle 0,1 ml de Solucin regu-
El sobre protector debe estar sellado de tal ma-
ladora C 0 . Agregar a cada tubo 0,02 ml de sangre
nera que no pueda abrirse y cerrarse nuevamente sin
humana fresca heparinizada, mezclar bien y calen-
evidenciar la rotura del mismo.
tar en un bao de agua a 30 1 C durante
40 minutos. Emplear sangre recolectada 3 horas Rotulado - Debe cumplir con las normas vi-
antes como mximo o sangre recolectada con solu- gentes.
cin anticoagulante de citrato-fosfato-dextrosa Envases plsticos vacos estriles de po-
24 horas antes como mximo. li(cloruro de vinilo) plastificado para sangre
A los tubos I, II y III agregar 1,5 ml de Solucin humana o hemoderivados
A 1 , Solucin B 1 y Solucin C 1 , respectivamente.
Al mismo tiempo y de la misma manera, preparar ENSAYOS
otros tres tubos, reemplazando Solucin S 2 por Debern cumplir con los ensayos para Envases
agua, estos tubos servirn como control. Centrifu- plsticos estriles para sangre humana o hemoderi-
gar simultneamente los tubos a ensayar y los de vados y con los siguientes ensayos para detectar
control a exactamente 2.500 g en la misma centr- materia extrable.
fuga horizontal durante 5 minutos. Determinar las Solucin de referencia - Transferir Agua para
absorbancias, con un espectrofotmetro apropiado, Inyectables a un erlenmeyer de vidrio al borosilica-
en celdas de 1 cm, a la longitud de onda de 540 nm, to y calentar en autoclave a 110 C durante
empleando la Solucin reguladora madre como 30 minutos.
blanco. Calcular el porcentaje de hemlisis por la
frmula siguiente: Sustancias reductoras - Inmediatamente des-
pus de la preparacin de la Solucin S 2 , transferir
Aexp al erlenmeyer al borosilicato una cantidad corres-
100 pondiente al 8 % de la capacidad nominal del enva-
A100 se. Simultneamente preparar un blanco empleando
en la cul A 100 , es la absorbancia del tubo III y A exp un volumen igual de la Solucin de referencia re-
son las absorbancias de los tubo I II, o las corres- cientemente preparada en otro erlenmeyer de vidrio
pondientes a los tubos controles. al borosilicato. A cada solucin agregar 20,0 ml de
La solucin en el tubo I debe dar un porcentaje permanganato de potasio 0,002 M y 1 ml de cido
de hemlisis no mayor a 10 % y el porcentaje de sulfrico diluido. Dejar reposar durante 15 minutos
hemlisis de la solucin en el tubo II no debe diferir protegido de la luz.
en ms de 10 % al del tubo control correspondiente. A cada solucin agregar 0,1 g de ioduro de po-
tasio. Dejar reposar durante 5 minutos protegido de
Esterilidad <370> - Introducir aspticamente la luz y titular inmediatamente con tiosulfato de
en el envase 100 ml de Solucin fisiolgica (SR) sodio 0,01 N, empleando 0,25 ml de almidn (SR)
estril y agitar el envase para asegurar que la super- como indicador. La diferencia entre las dos titula-
ficie interna se moje completamente. Filtrar el ciones no debe ser mayor de 2,0 ml.
contenido del envase a travs de un filtro de mem-
brana y colocar la membrana en un medio de culti- Acidez o alcalinidad - A un volumen de Solu-
vo apropiado. Los envases deben cumplir con el cin S 2 , equivalente al 4 % de la capacidad nominal
ensayo de esterilidad. del envase, agregarle 0,1 ml de fenoftalena (SR).
La solucin debe permanecer incolora. Agregar
Piretgenos <340> - Inyectar 10 ml de la Solu- 0,4 ml de una solucin de hidrxido de sodio
cin S 1 por cada kg de peso del conejo. La Solu- 0,01 M. La solucin debe tomar color rosado.
cin S 1 debe cumplir con los requisitos estableci- Agregar 0,8 ml de cido clorhdrico 0,01 M y
dos. 0,1 ml de rojo de metilo (SR1). La solucin debe
tornarse de color anaranjado rojizo o rojo.
Cloruro - la absorbancia no debe ser mayor de 0,30. A longi-
Solucin de cloruro de sodio - Disolver en agua tudes de onda entre 251 y 360 mn, la absorbancia
una cantidad de cloruro de sodio, equivalente a no debe ser mayor de 0,10.
0,824 g de CINa, y diluir a 1 litro con el mismo
Ftalato de bis(2-etilhexilo) extrable -
solvente. Diluir 1 ml de esta solucin a 100 con
Solvente de extraccin - Emplear alcohol dilui-
agua inmediatamente antes de usar (5 ppm de Cl).
do con agua con una densidad relativa entre 0,9389
Procedimiento - A 15 ml de Solucin S 2 agre-
y 0,9395 (ver 160. Determinacin de la densidad
gar 1 ml de cido ntrico diluido y volcar la mezcla relativa).
de una sola vez en un tubo de Nessler que contenga Solucin madre del estndar - Disolver 100 mg
1 ml de nitrato de plata (SR). Luego de dejar esta
de ftalato de bis(2-etilhexilo) en Solvente de extrac-
solucin en reposo durante 5 minutos protegido de
cin y diluir a 100,0 ml con el mismo solvente.
la luz, no debe presentar una turbidez mayor que la
Soluciones estndar - Transferir 20,0; 10,0; 5,0;
de una solucin preparada simultneamente, mez-
2,0 y 1,0 ml de Solucin madre del estndar a sen-
clando 1,2 ml de Solucin de cloruro de sodio con dos matraces aforados de 100 ml y diluir a volumen
13,8 ml de agua (0,4 ppm). con Solvente de extraccin para obtener las Solu-
Amonio - ciones estndar A, B, C, D y E, respectivamente.
Solucin alcalina de tetraiodomercurato de po- Determinar las absorbancias de las Soluciones
tasio - Disolver 11 g de ioduro de potasio y 15 g de estndar, con un espectrofotmetro apropiado, a la
ioduro de mercurio (II) en agua y diluir a 100 ml longitud de 272 nm, empleando Solvente de extrac-
con el mismo solvente. Mezclar extemporneamen- cin como blanco. Trazar una recta de absorbancia
te 1 volumen de esta solucin y 1 volumen de solu- en funcin de la concentracin de ftalato de
cin de hidrxido de sodio de 250 gl. bis(2-etilhexilo).
Solucin de amonio - Disolver en agua una can- Procedimiento de extraccin - Mediante el em-
tidad de cloruro de amonio, equivalente a 741 mg pleo del adaptador correspondiente, llenar el envase
de NH 4 Cl, y diluir a 1 litro con el mismo solvente. vaco con un volumen de Solvente de extraccin
Diluir 1 ml de esta solucin a 100 con agua. Tomar previamente calentado a 37 C, igual a la mitad del
2 volmenes de la solucin anterior y diluir a volumen nominal. Expulsar el aire completamente
5 volmenes con agua inmediatamente antes de del envase y sellar el tubo de salida. Sumergir el
usar (1 ppm de NH 4 ). envase lleno en posicin horizontal en un bao de
Solucin diluida de hidrxido de sodio - Disol- agua a 37 1 C durante 60 1 minuto sin agitar.
ver 8,5 g de hidrxido de sodio en agua y diluir a Retirar el envase del bao de agua, invertirlo sua-
100 ml con agua. vemente 10 veces y transferir el contenido a un
Procedimiento - Diluir 5 ml de Solucin S 2 a matraz. Inmediatamente medir la absorbancia a
14 ml con agua, alcalinizar si es necesario con So- 272 nm, empleando Solvente de extraccin como
lucin diluida de hidrxido de sodio y diluir a 15 ml blanco.
con agua. Agregar 0,3 ml de Solucin alcalina de Determinar la concentracin de ftalato de
tetraiodomercurato de potasio. Despus de bis(2-etilhexilo), en mg por cada 100 ml de extrac-
5 minutos, el color amarillo no debe ser ms intenso to, a partir de la recta de calibracin.
que el producido por una solucin obtenida mez- La concentracin no debe exceder:
clando 10 ml de Solucin de amonio con 5 ml de - 10 mg por cada 100 ml, para envases cuyo vo-
agua y 0,3 ml de Solucin alcalina de tetraiodo- lumen nominal sea mayor o igual de 300 ml, pero
mercurato de potasio. (2 ppm). menor de 500 ml;
- 13 mg por cada 100 ml, para envases cuyo vo-
Residuo por evaporacin - Evaporar a seque-
lumen nominal sea mayor de 150 ml, pero menor de
dad 100 ml de Solucin S 2 en un vaso de precipita-
300 ml;
dos de vidrio al borosilicato, previamente calentada
- 14 mg por cada 100 ml, para envases cuyo vo-
a 105 C. Evaporar a sequedad, en las mismas
lumen nominal sea menor o igual 150 ml.
condiciones, 100 ml de la Solucin de referencia.
Secar hasta peso constante entre 100 y 105 C. El Acondicionamiento y rotulado - Ver Envases
residuo de la Solucin S 2 no debe pesar ms de plsticos estriles para sangre humana o hemoderi-
3 mg, comparado con la Solucin de referencia. vados.
Absorbancia - Determinar la absorbancia de la Envases plsticos estriles de poli(cloruro de
Solucin S 2 a longitudes de onda entre 230 y vinilo) plastificado para sangre humana que
360 nm, empleando la Solucin de referencia como contienen solucin anticoagulante
blanco. A longitudes de onda entre 230 y 250 nm,
Los envases plsticos estriles de poli(cloruro Los envases plsticos destinados a soluciones
de vinilo) para sangre humana que contienen una acuosas para perfusin intravenosa deben cumplir
solucin anticoagulante o soluciones conservadoras con los siguientes ensayos.
debern cumplir con las monografas correspon-
ENSAYOS
dientes. Estos envases se emplean para la recolec-
Solucin S - Llenar un envase hasta su capaci-
cin, almacenamiento y administracin de sangre.
dad nominal con agua y taparlo. Colocar el envase
Antes de ser llenados debern cumplir con la des-
en un autoclave a una temperatura de 121 C, du-
cripcin y caractersticas dadas en Envases plsti-
rante 30 minutos. Si el calentamiento a 121 C
cos vacos estriles de poli(cloruro de vinilo) plasti-
produce el deterioro del envase, calentar a 100 C
ficado para sangre humana o hemoderivados.
durante 2 horas. Emplear la solucin, dentro de las
A menos que se especifique de otro modo en
4 horas de preparada.
Envases plsticos estriles para sangre humana o
Blanco - Preparar un blanco calentando agua en
hemoderivados, la naturaleza y composicin de los
un erlenmeyer de vidrio al borosilicato tapado, a la
materiales de los envases deben cumplir con los
temperatura y por el tiempo empleado para la pre-
requisitos para Poli(cloruro de vinilo) plastificado
paracin de la Solucin S.
para envases destinados a sangre humana o hemo-
derivados y para envases destinados a soluciones Aspecto de la solucin S - Debe ser transpa-
acuosas para perfusin intravenosa. rente e incolora.
ENSAYOS Acidez o alcalinidad - A un volumen de Solu-
Los envases deben cumplir con los ensayos para cin S correspondiente al 4 % de la capacidad no-
Envases plsticos estriles para sangre humana o minal del envase agregar 0,1 ml de fenolftale-
hemoderivados y con los siguientes ensayos para na (SR). La solucin debe ser incolora. Agregar
medir el volumen de solucin anticoagulante y para 0,4 ml de hidrxido de sodio 0,01 M. La solucin
detectar materia extrable. debe tomar una coloracin rosa. Agregar 0,8 ml de
cido clorhdrico 0,01 M y 0,1 ml de rojo de meti-
Volumen de solucin anticoagulante -
lo (SR 1). La solucin debe ser de color anaranjado
Transferir completamente el contenido del envase a
rojizo o rojo.
una probeta. El volumen no debe diferir en ms de
10 % del volumen declarado. Absorbancia - Determinar la absorbancia de la
Solucin S entre 230 y 360 nm, no debe ser mayor
Absorbancia - Determinar la absorbancia de la
de 0,20.
solucin anticoagulante, extrada del envase, entre
250 y 350 nm, empleando como blanco una solu- Sustancias reductoras - A 20,0 ml de Solu-
cin anticoagulante de la misma composicin que cin S agregar 1 ml de cido sulfrico diluido y
no ha estado en contacto con el material plstico. 20,0 ml de solucin de permanganato de potasio
La absorbancia, a la longitud de 280 nm, no debe 0,002 M. Calentar a ebullicin durante 3 minutos y
ser mayor de 0,5. enfriar inmediatamente. Agregar 1 g de ioduro de
potasio y titular inmediatamente con tiosulfato de
Ftalato de bis(2-etilhexilo) extrable - Retirar
sodio 0,01 N, empleando 0,25 ml de almidn (SR)
cuidadosamente la solucin anticoagulante por
como indicador. Realizar una determinacin con un
medio del tubo de transferencia empleando un em-
blanco y hacer las correcciones necesarias. La
budo adaptado a dicho tubo, llenar completamente
diferencia entre los volmenes de titulacin no debe
el envase con agua, dejar en contacto durante
ser mayor de 1,5 ml.
1 minuto, y presionar suavemente el envase. Des-
pus vaciarlo completamente y repetir el lavado. El Transparencia -
envase vaco y lavado debe cumplir con el ensayo Solucin de sulfato de hidracina - Disolver
Ftalato de bis(2-etilhexilo) extrable descripto en 1,0 g de sulfato de hidracina en agua y diluir a
Envases plsticos vacos estriles de poli(cloruro 100 ml con el mismo solvente. Dejar reposar du-
de vinilo) para sangre humana o hemoderivados. rante 4 a 6 horas.
Solucin de hexametilentetramina - Transferir
Acondicionamiento y rotulado - Ver Envases
2,5 g de hexanetilentetramina a un matraz de
plsticos estriles para sangre humana o hemoderi-
100 ml con tapn esmerilado. Agregar 25 ml de
vados.
agua y disolver.
Envases plsticos para soluciones acuosas pa- Suspensin opalescente primaria - Agregar a la
ra perfusin intravenosa Solucin de hexametilentetramina contenida en el
matraz, 25 ml de Solucin de sulfato de hidracina.
Mezclar y dejar reposar durante 24 horas. Esta
suspensin es estable durante 2 meses cuando se la
almacena en envases de vidrio de superficies inter-
nas lisas. La suspensin no debe adherirse y debe
mezclarse cuidadosamente antes de ser empleada.
Procedimiento - Llenar el envase empleado an-
teriormente para la preparacin de la Solucin S,
con un volumen de Suspensin opalescente prima-
ria, igual a la capacidad nominal del envase, diluida
1 en 200 para un envase de polietileno o polipropi-
leno y 1 en 400 para otros tipos de envases. La
opalescencia de la suspensin debe ser perceptible
cuando se observa a travs del envase, en compara-
cin con un envase de similares caractersticas lleno
en las mismas condiciones pero con agua.
Acondicionamiento - El envase deber ser
acondicionado en un sobre protector.
Rotulado - Debe cumplir con las normas vi-
gentes.
430. ENVASES DE VIDRIO
A continuacin se describen los ensayos para la acuosas, polvos para uso parenteral y preparaciones
caracterizacin de la calidad de los envases no parenterales.
primarios de vidrio destinados para uso
-Tipo IV: son envases de vidrio sodico-clcico
farmacutico.
de baja resistencia hidroltica; en general son
Existen diversos tipos de envases:
apropiados para preparaciones slidas, lquidas o
Ampollas: son envases de vidrio de paredes
semislidas que no son para uso parenteral.
finas en los que el cerrado, despus del llenado, se
realiza por fusin del vidrio. El contenido se extrae En todos los casos, la eleccin de un envase
en una sola vez, previa apertura de las mismas. primario debe ser el resultado de un estudio de
Frascos, viales, jeringas y carpules: son estabilidad llevado a cabo en condiciones
envases cilndricos, de paredes de grosor apropiado, apropiadas. El elaborador de un producto
cuyos cierres son de vidrio o de otro material, como farmacutico es el responsable de garantizar la
por ej., materiales plsticos o elastomricos. El compatibilidad del envase elegido con la
contenido se extrae en una o varias dosis. preparacin que contiene.
Envases para contener sangre y RESISTENCIA HIDROLTICA
hemoderivados: son envases cilndricos, de Materiales y reactivos
paredes ms o menos gruesas, de vidrio neutro,
incoloro y de capacidad variable. Para este ensayo es necesario emplear un
La estabilidad qumica de los envases de vidrio autoclave; tamices N 710, 425 y 250 (llamados a, b
para uso farmacutico es expresada por la y c, respectivamente); dos erlenmeyers de vidrio
resistencia hidroltica, es decir, la resistencia para resistente de 250 ml; un martillo de 900 g; un imn
liberar sustancias minerales solubles en agua bajo permanente; un desecador y un mortero con piln,
condiciones especficas de contacto entre la ambos de acero y construidos segn las
superficie interna del envase o el polvo del vidrio y especificaciones dadas en la Figura.
el agua. La resistencia hidroltica es evaluada por Solucin indicadora de rojo de metilo -
titulacin de la alcalinidad liberada. Disolver 50 mg de rojo de metilo en una mezcla
El vidrio neutro es un vidrio al borosilicato que preparada con 50 ml de alcohol y 1,86 ml de
contiene cantidades importantes de piroborato de hidrxido de sodio 0,1 M. Diluir a 100 ml con
sodio, xidos de aluminio o alcalino trreos. agua. El cambio de color se produce a pH entre 4,4
Debido a su composicin, tiene una alta resistencia y 6,0.
a los cambios trmicos y una alta resistencia
hidroltica. Resistencia hidroltica del vidrio
El vidrio sdico-clcico es un vidrio de slice pulverizado
que contiene xidos de metales alcalinos y alcalino La magnitud del ataque se determina por la
trreos principalmente xido de sodio y xido de cantidad de lcali liberado por el vidrio, bajo
calcio, respectivamente. Debido a su composicin, condiciones especficas.
este tipo de vidrio posee moderada resistencia
Solucin muestra - Lavar perfectamente con
hidroltica.
agua los envases destinados al ensayo y secarlos en
Clasificacin de los envases de vidrio segn su
estufa. Triturar aproximadamente 100 g de vidrio
resistencia hidroltica:
procedentes de tres envases como mnimo, de modo
-Tipo I: son envases de vidrio neutro de alta que la dimensin de los fragmentos obtenidos no
resistencia hidroltica; en general son apropiados sobrepase los 25 mm. Transferir una parte de la
para todas las preparaciones, sean o no para uso muestra al mortero, insertar el piln y golpear
parenteral, para sangre y hemoderivados. fuertemente una sola vez. Transferir el contenido
-Tipo II: son envases de vidrio sdico-clcico de del mortero al tamiz superior (a). Repetir la
alta resistencia hidroltica; en general son operacin con el resto de la muestra. Pasar
apropiados para las preparaciones parenterales rpidamente por los tamices y recolectar los
acuosas neutras o cidas. fragmentos que quedan sobre los tamices (a) y (b).
Someter estos fragmentos a una nueva trituracin.
-Tipo III: son envases de vidrio sodico-clcico Repetir la operacin hasta que slo queden sobre el
de moderada resistencia hidroltica; en general son tamiz (a) 20 g de vidrio aproximadamente.
apropiados para preparaciones parenterales no Rechazar esta fraccin, as como la que ha pasado a
travs del tamiz (c). Seguidamente, someter los
tamices a agitacin manual o mecnica, durante Transferir 20 g del polvo de vidrio a un
5 minutos. erlenmeyer de 250 ml. Agregar 100 ml de agua y
Conservar para el ensayo la fraccin de polvo de pesar. En un erlenmeyer similar al anterior,
vidrio que ha pasado a travs del tamiz (b) y que es transferir 100 ml de agua, que se emplearn como
retenida por el tamiz (c). Eliminar mediante un blanco y pesar. Cubrir los envases con
imn las partculas metlicas que pueda contener el cristalizadores de vidrio neutro o con hojas de
polvo. A continuacin, transferir aproximadamente aluminio lavada con agua. Asegurar la distribucin
22 g del polvo de vidrio a un erlenmeyer y lavarlo uniforme del polvo de vidrio sobre el fondo del
con 60 ml de acetona, agitar y decantar el lquido erlenmeyer. Colocar los erlenmeyers en el
sobrenadante. Repetir esta operacin 5 veces. autoclave y mantenerlos a 121 C durante
Extender el polvo sobre un cristalizador, dejar que 30 minutos. Enfriar los erlenmeyers, destaparlos,
la acetona se evapore, secar en estufa a 110 C secarlos cuidadosamente y llevarlos a sus pesos
durante 20 minutos y dejar enfriar. originales mediante el agregado de agua.
Tabla 1.
Cantidad mxima de
Tipo de
cido clorhdrico
vidrio
0,01 N (ml)
I 2
II-III 17
IV 30
Resistencia hidroltica de la superficie del vidrio envases a emplear segn su capacidad y el volumen
Procedimiento - La Tabla 2 indica la cantidad de de solucin empleado en la titulacin.
Tabla 2.
Volumen de solucin
Capacidad
N de envases empleado para la
nominal (ml)
titulacin (ml)
d3 no menor de 10 25
! 3 d 30 no menor de 5 50
! 30 No menor de 3 100
Inmediatamente antes del ensayo, lavar por lo los lquidos de los envases, mezclarlos y medir con
menos 3 veces cada envase con agua, a temperatura una probeta el volumen especificado en la Tabla 2
ambiente. Llenar los envases en su totalidad con para cada caso, transfirindolo a un erlenmeyer.
agua, vaciarlos y calcular el volumen de derrame Agregar el mismo volumen de agua en un
promedio. erlenmeyer idntico, que ser empleado como
Llenar las ampollas con agua hasta alcanzar el blanco. Agregar a cada erlenmeyer 0,05 ml de
nivel del hombro y sellarlas. En el caso de los Solucin indicadora de rojo de metilo cada 25 ml
frascos, llenarlos al 90 % de su volumen de derrame de lquido y titular el blanco con cido clorhdrico
y taparlos con vasos de precipitados de vidrio al 0,01 N. Titular la Solucin muestra tomando como
borosilicato lavados con agua. Colocar los envases punto final el color obtenido en la titulacin del
en el autoclave y calentar a 121 1 C durante blanco y hacer las correcciones necesarias. La
60 minutos, reducir el calor de modo que el diferencia entre ambas titulaciones representa el
autoclave se enfre y la presin se normalice en un volumen de cido clorhdrico 0,01 N requerido para
tiempo entre 38 y 46 minutos, evitando la el volumen empleado de la Solucin muestra.
formacin de vaco. Calcular el volumen necesario para 100 ml y
En un tiempo no mayor de 1 hora despus de referir los resultados a los lmites de la Tabla 3.
haber sacado los envases del autoclave, combinar
Tabla 3.
Capacidad del envase correspondiente al 90 %
Cantidad mxima en ml de cido clorhdrico 0,01 N por
del volumen de derrame promedio
100 ml de Solucin muestra
(ml)
Tipo I y II Tipo III
d1 2 20
!1yd2 1,8 17,6
Tabla 3. Continuacin
Capacidad del envase correspondiente al 90 % Cantidad mxima en ml de cido clorhdrico 0,01 N por
del volumen de derrame promedio 100 ml de Solucin muestra
(ml)
Tipo I y II Tipo III
! 2 y d5 1,3 13,2
! 5 y d10 1 10,2
! 10 y d 20 0,8 8,1
! 20 y d50 0,6 6,1
! 50 y d 100 0,5 4,8
! 100 y d 200 0,4 3,8
! 200 y d500 0,3 2,9
! 500 0,2 2,2
[NOTA: cualquier envase de tamao intermedio a los mencionados anteriormente debe tener una transmisin
igual o menor que la del envase de tamao inmediato superior en la Tabla 4.]
440. ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION Y EMISION
ATOMICA
Estas tcnicas se emplean para la determinacin determinados reduciendo qumicamente el elemento
de la concentracin de un elemento metlico en una y luego arrastrando el producto con un gas inerte
muestra. La determinacin se efecta mediante la hasta la celda de absorcin, donde se lo disocia por
medida de la intensidad de absorcin o emisin de calentamiento, colocando los tomos as generados
luz, producida por el vapor atmico del elemento en el paso ptico.
generado a partir de la muestra en solucin,
Emisin atmica
realizada a una longitud de onda especfica para
cada elemento. Los tomos en el estado excitado generalmente
son inestables y vuelven rpidamente al estado
Absorcin atmica
basal, perdiendo la energa adquirida en el proceso
Aparato - Consta de una fuente de radiacin, un de absorcin, dando lugar as a lneas de emisin a
generador de tomos del elemento a analizar (llama, la misma longitud de onda a la cual ocurri la
horno, generador de vapor, etc.) que permite absorcin.
introducir el analito en el paso ptico, un Aparato - Consta esencialmente de los mismos
monocromador y un detector. componentes que el aparato empleado para
Generacin de vapores atmicos - absorcin atmica, excepto que no requiere una
fuente de radiacin. La excitacin se efecta
Llama - Este sistema emplea un nebulizador empleando llamas de aire-acetileno y xido nitroso-
para generar una niebla a partir de la solucin del acetileno, como las indicadas en Llama.
analito. Por evaporacin del solvente cerca de la La espectrofotometra de emisin atmica
base de la llama, se obtienen pequeas partculas acoplada a plasma inductivo (ICP-AES) es una
slidas, las que son fundidas y vaporizadas, metodologa relacionada, donde mediante
disocindose sus molculas constituyentes para temperaturas muy elevadas se logra la completa
producir tomos libres en estado basal. ionizacin de los elementos, minimizando las
El tipo de llama se debe seleccionar de acuerdo interferencias qumicas.
con la clase de elemento a analizar:
a) Para elementos fcilmente atomizables como Procedimiento general
cobre, plomo, potasio y sodio se debe emplear Para operar el espectrofotmetro deben seguirse
llama de aire-acetileno. las instrucciones del fabricante y realizar el ensayo
b) Para elementos que forman compuestos a la longitud de onda especificada en la monografa
refractarios y que no se descomponen en la llama correspondiente. Emplear el Mtodo I a menos que
aire-acetileno como aluminio, silicio y tungsteno se se especifique de algn modo en la monografa
debe emplear llama de xido nitroso-acetileno. correspondiente.
c) Para determinar elementos tales como El espectrofotmetro debe calibrarse segn se
arsnico, calcio, cromo, magnesio, molibdeno, indica a continuacin:
osmio, selenio o estroncio, pueden ser empleados Para las medidas de absorcin - Introducir
indistintamente ambos tipos de llama. agua o la solucin blanco especificada en la
Horno de grafito - En ste sistema, la solucin monografa correspondiente en el generador de
del analito es atomizada de una sola vez en un tubo vapor atmico y ajustar la lectura de forma que
de grafito, donde se seca y luego se calcina por indique el 100 % de transmitancia. Introducir la
incremento de la temperatura permitiendo eliminar, solucin estndar ms concentrada en el generador
tanto como sea posible, el material de la matriz sin y ajustar la sensibilidad para obtener una lectura
prdida del analito. La posterior vaporizacin de apropiada.
los residuos provenientes del perodo de calcinado Para las medidas de emisin - Introducir agua o
genera tomos libres, los cuales permanecen en el la solucin blanco especificada en la monografa
paso ptico por un perodo de tiempo mayor que en correspondiente en el generador de vapor atmico y
el caso de la generacin mediante llama. ajustar la lectura del aparato a cero. Introducir la
Vapor fro - Este sistema es extremadamente solucin estndar ms concentrada en el generador
sensible para determinar mercurio y ciertos y ajustar la sensibilidad para obtener una lectura
elementos formadores de hidruros metlicos apropiada.
estables, tales como arsnico, selenio, antimonio,
bismuto, telurio y estao. Estos pueden ser Mtodo I
Calibracin directa
Preparar no menos de tres soluciones estndar Extrapolar la recta hasta su interseccin con el eje
que contengan el elemento a determinar, abarcando de las abcisas; la distancia entre este punto y el
el intervalo de concentracin recomendado por el punto de interseccin de los ejes representa la
fabricante del aparato y para el elemento. Todo concentracin del elemento en la solucin muestra.
reactivo empleado en la preparacin de la solucin
muestra se debe agregar a las soluciones estndar en
la misma concentracin. Luego de calibrar el
aparato, introducir cada solucin estndar en el
generador por lo menos tres veces y registrar la
lectura en cada caso cuando sta sea constante.
[NOTA: si el generador es una llama, lavar con
agua o solucin blanco luego de cada introduccin;
si se emplea un horno, quemar luego de cada
introduccin.] Realizar una curva de calibracin,
representando el promedio de cada grupo de tres
lecturas en funcin de la concentracin. Preparar
una solucin muestra segn se especifica en la
monografa correspondiente, ajustando la
concentracin para que la lectura obtenida est
comprendida dentro del intervalo de
concentraciones de las soluciones estndar.
Introducir la solucin muestra en el generador y
registrar la lectura. Repetir este procedimiento dos
veces ms y, empleando el promedio de las tres
lecturas, determinar la concentracin del elemento a
partir de la curva de calibracin.
Mtodo II
Adicin de estndar
Transferir volmenes iguales de la solucin
muestra preparada segn se especifica en la
monografa correspondiente a tres matraces
aforados. Agregar a dos de ellos una cantidad
conocida de la solucin estndar especificada para
producir una serie de soluciones con cantidades
crecientes del elemento a determinar. Diluir el
contenido de cada matraz al volumen requerido con
agua o el solvente especificado en la monografa
correspondiente y homogeneizar. Las
concentraciones de las muestras deben estar
incluidas en la regin donde la respuesta del aparato
es directamente proporcional a la concentracin.
Luego de calibrar el aparato como se indic
anteriormente, introducir cada solucin en el
generador no menos de tres veces y registrar la
lectura cuando se estabilice. [NOTA: si el
generador es una llama, lavar con agua o la solucin
blanco luego de cada introduccin; si se emplea un
horno, quemar luego de cada introduccin, tomando
la precaucin de asegurar que la lectura vuelva al
valor inicial del blanco luego de cada
determinacin.] Representar grficamente los
promedios de las lecturas obtenidas en funcin de la
cantidad de elemento agregada, trazando la lnea
recta que mejor se ajuste a los puntos marcados.
450. ESPECTROFOTOMETRIA DE FLUORESCENCIA
La espectrofotometra de fluorescencia es una en la cual C E es la concentracin de la solucin
tcnica empleada para determinar la concentracin estndar, I M es la intensidad de luz emitida por la
de una sustancia comparando la intensidad de luz solucin muestra e I E es la intensidad de luz emitida
fluorescente emitida por la misma con la emitida por la solucin estndar.
por la Sustancia de referencia correspondiente, en Realizar el ensayo dentro del intervalo de
las mismas condiciones. concentraciones en el cual la respuesta es lineal.
Aparato - Se pueden emplear dos tipos de
aparatos, fluormetro de filtro y espectro-
fluormetro. El primero consta de los siguientes
componentes:
Una fuente de radiacin, generalmente una
lmpara de mercurio o tungsteno.
Un filtro primario colocado entre la fuente de
radiacin y la celda, para seleccionar la longitud de
onda de excitacin.
Una celda para contener la muestra.
Un filtro secundario colocado entre la celda y
el detector, que acta como un filtro interruptor fino
que permite transmitir la radiacin fluorescente,
bloqueando en cambio la radiacin dispersa.
Un detector de fluorescencia colocado de
manera que forme un ngulo de 90 con respecto a
la direccin del haz de luz incidente, con el objeto
de minimizar la interferencia de la luz transmitida.
El espectrofluormetro presenta los mismos
componentes que el fluormetro de filtro, slo que
los filtros se han reemplazado por sistemas
monocromadores como prismas o redes de
difraccin, siendo frecuentemente empleada una
lmpara de arco de xenn a alta presin como
fuente de radiacin.
Procedimiento - Ajustar la lectura del aparato a
cero empleando el solvente o mezcla de solventes
indicados para disolver la muestra, a la longitud de
onda especificada en la monografa
correspondiente. Transferir a la celda un volumen
apropiado de una solucin estndar preparada a
partir de la Sustancia de referencia correspondiente
y regular la sensibilidad del aparato de modo que la
lectura sea mayor a 50. Si el segundo ajuste se
realiza modificando la apertura de las rendijas,
ajustar nuevamente a cero el aparato y medir
nuevamente la intensidad de fluorescencia de la
solucin estndar. Disolver la muestra en el
solvente o mezcla de solventes especificados en la
monografa correspondiente. Transferir un
volumen apropiado de esta solucin a la celda y
medir la intensidad de la luz emitida en las mismas
condiciones. Calcular la concentracin de la
sustancia en la solucin muestra, por la frmula
siguiente:
cE I M / I E
460. ESPECTROFOTOMETRIA INFRARROJA
INFRARROJO MEDIO de material transparente a la radiacin infrarroja.
La absorcin debido al solvente puede compensarse
Aparato - Los espectrofotmetros para
colocando el solvente puro en la celda de
registrar espectros en la regin infrarroja estn
referencia; sin embargo, aquellas regiones del
constituidos por un sistema ptico capaz de proveer
luz monocromtica en la regin de 4.000 a 600 cm-1 espectro en las que el solvente presenta una fuerte
(2,5 a 15 m), o en algunos casos por debajo de absorcin no deben tenerse en cuenta. La
concentracin apropiada del soluto vara segn la
200 cm-1 (50 m), y por elementos que permiten
sustancia, pero en general se emplean
medir el cociente entre las intensidades de luz
concentraciones entre 1 y 10 % para un paso ptico
transmitida e incidente.
de 0,5 a 0,1 mm.
Calibracin del aparato - Los aparatos
empleados para registrar los espectros infrarrojos En fase slida - A menos que se especifique de
especificados en esta Farmacopea deben cumplir otro modo en la monografa correspondiente,
con los siguientes ensayos de calibracin: triturar en un mortero aproximadamente 1 a 2 mg
de la sustancia a analizar con 200 a 300 mg de
Resolucin - Registrar el espectro de una bromuro de potasio o cloruro de potasio seco y
pelcula de poliestireno de 0,05 mm de espesor. La finamente pulverizado. Estas cantidades son en
distancia entre el mximo de absorcin a 2.851 cm-1 general apropiadas para un disco de 13 mm de
(3,51 m) y el mnimo a 2.870 cm-1 (3,48 m) debe dimetro y un espectro de intensidad apropiada.
ser equivalente a no menos de 18 % de Moler la mezcla con cuidado, esparcir
transmitancia y la distancia entre el mximo a uniformemente en un molde apropiado y comprimir
1.583 cm-1 (6,32 m) y el mnimo a 1.589 cm-1 a una presin de aproximadamente 10.000 kg/cm2,
(6,29 m) debe ser equivalente a no menos de 12 % aplicando vaco. El disco obtenido se coloca en el
de transmitancia. espectrofotmetro con un soporte apropiado.
Verificacin de la escala de longitud de onda - Varios factores, tales como una molienda
La escala de longitud de onda puede verificarse inadecuada, humedad e impurezas en el haluro
empleando una pelcula de poliestireno que presente pueden dar origen a discos no aptos para el anlisis.
mximos de absorcin a los siguientes nmeros de El disco debe desecharse si no es uniforme cuando
onda (en cm-1): se lo examina visualmente o si la transmitancia a
2.000 cm-1 en ausencia de una banda de absorcin
3.027,1 (0,3) 1.583,1 (0,3) especfica, es menor de 75 % sin emplear
2.924,0 (2,0) 1.181,4 (0,3) compensacin en el haz de referencia.
2.850,7 (0,3) 1.154,3 (0,3) En suspensin - Triturar 5 a 10 mg de la
1.944,0 (1,0) 1.069, 1 (0,3) sustancia a analizar con 2 gotas de vaselina lquida
1.871,0 (0,3) 1.028,0 (0,3) apropiada hasta obtener una mezcla cremosa
homognea. Colocar una porcin de la mezcla as
1.801,6 (0,3) 906,7 (0,3) obtenida entre dos placas de cloruro de sodio u otro
1.601,4 (0,3) 698,9 (0,5) material transparente a la radiacin infrarroja y
[NOTA: los valores entre parntesis indican las presionar suavemente las placas para formar una
tolerancias permitidas.] pelcula fina.
Preparacin de la muestra - Las muestras se Gases - Emplear una celda para gases con un
preparan de acuerdo con su naturaleza, de la paso ptico de aproximadamente 100 mm.
siguiente manera: Evacuarla y llenarla a la presin deseada mediante
un robinete o vlvula de aguja empleando una lnea
En pelcula fina - Colocar 1 2 gotas entre dos
de transferencia apropiada para gases entre la celda
placas de cloruro de sodio u otro material
y el recipiente de la sustancia a analizar. Si fuera
transparente a la radiacin Infrarroja y presionar
necesario, ajustar la presin con un gas transparente
suavemente las placas para formar una fina pelcula. a la radiacin infrarroja, como por ej. nitrgeno o
Tambin puede emplearse una celda del mismo argn. Para evitar interferencias de absorcin
material y de paso ptico apropiado.
debido al vapor de agua, dixido de carbono u otros
En solucin - Preparar una solucin en el gases atomosfricos, colocar en el haz de referencia
solvente y a la concentracin especificada en la una celda idntica evacuada o llenada con un gas
monografa correspondiente y transferir a una celda transparente a la radiacin infrarroja.
Reflectancia mltiple - Cuando se especifica
este mtodo en una monografa, preparar la muestra
por uno de los siguientes mtodos:
Soluciones - Disolver la muestra en el solvente
apropiado bajo las condiciones especificadas en la
monografa correspondiente. Evaporar la solucin
sobre una placa de bromuro de talio-ioduro de talio
o sobre otra placa apropiada.
Slidos - Colocar la muestra sobre una placa de
bromuro de talio-ioduro de talio o sobre otra placa
apropiada, de manera de lograr un contacto
uniforme.
Identificacin por medio de espectros de
referencia - Preparar la muestra en condiciones
similares a las indicadas para la obtencin del
espectro de referencia y registrar el espectro de la
sustancia a analizar. Sobre ste, registrar las bandas
de poliestireno a 2.851 cm-1 (3,51 m), 1.601 cm-1
(6,25 m) y 1.028 cm-1 (9,73 m). Comparar los
espectros y los mximos del poliestireno indicados
en Verificacin de la escala de longitud de onda.
Las zonas correspondientes a la impresin digital
(entre 1.400 a 600 cm-1) de ambas sustancias deben
ser en un todo concordantes.
Identificacin por medio de sustancias de
referencia - Preparar la muestra segn se
especifica en la monografa correspondiente
teniendo en cuenta la metodologa indicada en
Preparacin de la muestra. Tratar la Sustancia de
referencia de la misma manera. Registrar los
espectros entre 4.000 y 600 cm-1 (2,5 a 15 m) bajo
las mismas condiciones. Los mximos de
absorcin, correspondientes a la zona de impresin
digital (entre 1.400 a 600 cm-1), en el espectro
obtenido con la muestra deben corresponder en
posicin e intensidad relativa a los del obtenido con
la Sustancia de referencia.
470. ESPECTROFOTOMETRIA ULTRAVIOLETA Y VISIBLE
La espectrofotometra en el ultravioleta y visible Los valores de a, E (1 %, 1 cm) y , a una
consiste en la medida de la absorcin de las longitud de onda especfica y en un solvente
radiaciones electromagnticas comprendidas en un determinado son caractersticos del analito.
intervalo espectral de 200 a 400 nm para la regin
Aparato - Consta de un sistema ptico capaz
ultravioleta y de 400 a 700 nm para la regin
de producir luz monocromtica en la regin de 200
visible.
a 800 nm, un dispositivo para seleccionar una banda
El grado en que la radiacin es absorbida al
angosta de longitudes de onda, una celda para
pasar a travs de un medio homogneo se expresa
contener la muestra y un detector apropiado para
en trminos de absorbancia, A. La absorbancia de
determinar la absorbancia.
una solucin es el logaritmo decimal de la inversa
Cuando se emplean aparatos de doble haz, la
de la transmitancia, T, siendo esta ltima definida:
celda que contiene el blanco se coloca en el haz de
como la fraccin de radicacin incidente que logra
referencia. Las celdas empleadas para la solucin
atravesar la muestra. Para una radiacin
muestra y el blanco deben tener las mismas
monocromtica, A se calcula mediante la siguiente
caractersticas espectrales.
expresin:
Calibracin del aparato - Los aparatos
A log1 / T logI 0 / I empleados para registrar los espectros ultravioleta y
visible indicados en esta Farmacopea deben cumplir
donde I o es la intensidad de radiacin incidente e I
con los siguientes ensayos:
es la intensidad de radiacin transmitida.
Verificacin de la escala de longitud de onda -
De acuerdo con la ley de Lambert-Beer, la
La escala de longitud de onda puede verificarse
absorbancia es proporcional al paso ptico, d, de la
midiendo los mximos de absorbancia de una
capa absorbente atravesada por la radiacin y a la
solucin estndar de perclorato de holmio a 241,15;
concentracin, c, del analito:
287,15; 361,50 y 536,30 nm, los mximos de
A kdc absorbancia correspondientes a las lneas de
emisin de una lmpara de hidrgeno a 486,10 nm
La constante de proporcionalidad, k, asume o deuterio a 486,00 nm, o las lneas de un arco de
distintas denominaciones segn las unidades en que vapor de mercurio a 253,70; 302,25; 313,16;
d y c son expresadas: 334,15; 365,48; 404,66; 435,83; 546,07; 576,96 y
Absortividad (a): es la absorbancia de una 579,07 nm. La tolerancia permitida es de 1 nm
solucin cuya concentracin, c, es de 1 g por litro, para el ultravioleta y 3 nm para el visible.
medida en una celda de paso ptico, d, de 1 cm. Control de absorbancias - Controlar la
a A / cd absorbancia con una solucin de dicromato de
potasio preparada segn se indica a continuacin:
Coeficiente de extincin especfica [E(1 %, Solucin de dicromato de potasio - Transferir a
1 cm)]: es la absorbancia de una solucin cuya un matraz aforado de 1 litro aproximadamente
concentracin, c, es de 1 %, medida en una celda de 60 mg de dicromato de potasio, exactamente
paso ptico, d, de 1 cm, pesados y previamente secados a 130 C hasta peso
E 1%, 1cm A / cd 10 a constante. Disolver y diluir a volumen con cido
sulfrico 0,005 M.
Absortividad molar (): es la absorbancia de Registrar el espectro de la Solucin de
una solucin cuya concentracin es 1 mol por litro, dicromato de potasio y determinar las absorbancias
medida en una celda de paso ptico, d, de 1 cm. a las longitudes de onda especificadas en la Tabla.
Puede calcularse como el producto de la Los valores de E (1 %, 1 cm) deben estar dentro de
absortividad por el peso molecular, PM, del analito. las tolerancia especificadas.
= aPM
Tabla.
Longitud de onda (nm) E (1 %, 1 cm) Tolerancia mxima
235 124,5 122,9 a 126,2
257 144,0 142,4 a 145,7
313 48,6 47,0 a 50,3
350 106,6 104,9 a 108,2
Lmite de luz espuria - La absorbancia de una deban efectuar con referencia a una mezcla de
solucin de cloruro de potasio al 1,2 %, medida a reactivos, los detalles se describen en las
200 nm con un paso ptico de 1 cm, empleando monografas correspondientes.
agua como blanco, debe ser mayor de 2. Cuando en una monografa se especifica la
longitud de onda a la cual se presenta un mximo de
Resolucin (para anlisis cualitativo) -
absorcin, implica que dicho mximo presenta una
Registrar el espectro de una solucin de tolueno al
0,02 % en hexano. La relacin entre el mximo de tolerancia de 2 nm.
absorbancia a 269 nm, y el mnimo a 266 nm no Cuando un ensayo indica el empleo de una
Sustancia de referencia, se deben realizar las
debe ser menor de 1,5.
medidas espectrofotomtricas con la solucin
Asimismo, debern tenerse las siguientes
preparada a partir de la Sustancia de referencia y
precauciones:
luego con la solucin correspondiente preparada a
Ancho de rendija (para anlisis cuantitativo) -
Cuando se mide la absorbancia a un mximo de partir de la muestra. Efectuar las medidas en
absorcin y cuando se emplea un aparato con ancho sucesin inmediata, empleando la misma celda y las
mismas condiciones experimentales.
de rendija variable a la longitud de onda
seleccionada, el ancho de rendija debe ser pequeo Identificacin por medio de Sustancias de
comparado con la mitad del ancho de la banda de referencia - Cuando en una monografa se
absorcin. Sin embargo, debe ser lo ms grande especifica un ensayo de identificacin por
posible para obtener un valor alto de I o y debe ser espectrofometra ultravioleta, la solucin muestra y
tal que una reduccin adicional no resulte en un la solucin estndar deben medirse en celdas de
aumento de la lectura de absorbancia. 1 cm de paso ptico, en el intervalo espectral
Celdas - Las absorbancias de las celdas de comprendido entre 200 y 400 mm, a menos que se
lectura, cuando se llenan con el mismo solvente, especifique de otro modo en la monografa
deben ser iguales. Si este no es el caso, debe correspondiente.
aplicarse una correccin apropiada. Disolver una porcin de la muestra en el
La tolerancia en el paso ptico de las celdas Solvente especificado para obtener una solucin con
empleadas es 0,005 cm. Las celdas deben una concentracin conocida aproximadamente igual
limpiarse y manipularse con cuidado. a la especificada en Concentracin en la
Solventes - Cuando se mide la absorbancia de monografa correspondiente. En forma similar,
una solucin a una longitud de onda determinada, la preparar una Solucin estndar que contenga la
absorbancia de la celda de referencia y su contenido Sustancia de referencia correspondiente.
no debe ser mayor de 0,4 y es conveniente que sea Registrar en sucesin inmediata los espectros de
menor de 0,2 cuando se mide en referencia al aire a la Solucin muestra y la Solucin estndar.
la misma longitud de onda. El solvente en la celda Calcular los coeficientes de extincin especfica y/o
de referencia debe ser del mismo lote que el la relacin de absorbancias segn se especifica en la
empleado para preparar la solucin muestra. monografa correspondiente. Los requisitos se
Determinacin de la absorbancia - A menos cumplen si los espectros de absorcin ultravioleta
que se especifique de otro modo en la monografa de la Solucin muestra y la Solucin estndar
correspondiente, medir la absorbancia a la longitud presentan mximos y mnimos a las mismas
de onda especificada empleando celdas de 1 cm de longitudes de onda, y los coeficientes de extincin
paso ptico y efectuar las medidas con referencia al especfica y/o la relacin de absorbancias estn
solvente o solventes empleados para preparar la dentro de los lmites especificados en dicha
solucin muestra. En caso de que las medidas se monografa
480. GRASAS Y ACEITES FIJOS
Definiciones generales - agua prxima a hervir en un segundo vaso de
Indice de acidez - Es la cantidad, en mg, de precipitados o en una cpsula de 800 ml. Agregar
hidrxido de potasio necesaria para neutralizar los lentamente 50 ml de cido sulfrico diluido,
cidos libres presentes en 1,0 g de muestra. preparado mezclando 3 partes de agua con 1 parte
Indice de esterificacin - Es la cantidad, en de cido sulfrico, y calentar la solucin, con
mg,, de hidrxido de potasio necesaria para agitacin frecuente, hasta que los cidos grasos se
saponificar los steres presentes en 1,0 g de separen como una capa transparente. Lavarlos con
muestra. agua hirviendo hasta que estn exentos de cido
Indice de hidroxilo - Es la cantidad, en mg, de sulfrico y recolectarlos en un vaso de precipitados.
hidrxido de potasio equivalente al contenido de Calentar en un bao de vapor hasta que el agua se
hidroxilo de 1,0 g de muestra. separe y los cidos grasos formen una capa clara;
Indice de iodo - Es la cantidad, en g, de iodo filtrar en un vaso de precipitados seco mientras se
capaz de ser fijado, bajo las condiciones indicadas, calienta y secar a 105 C durante 20 minutos.
por 100 g de muestra. Transferir los cidos grasos an calientes a un
Indice de saponificacin - Es la cantidad, en recipiente apropiado y enfriar en un bao de hielo
mg, de hidrxido de potasio necesaria para hasta que se produzca la solidificacin.
neutralizar los cidos libres y saponificar los steres Ensayo de saponificacin completa - Transferir
presentes en 1,0 g de muestra. 3 ml de los cidos grasos aislados a un erlenmeyer y
Preparacin muestra - agregar 15 ml de alcohol. Calentar la solucin a
Si la muestra se presenta turbia debido a la ebullicin y agregar un volumen igual de hidrxido
presencia de estearina, calentar el envase en un de amonio 6 N. La solucin deber permanecer
bao de agua a 50 C hasta que quede lmpida; si el lmpida.
aceite no se clarifica por calentamiento, filtrarlo a Procedimiento - Proceder segn se Indica para
travs de un papel de filtro seco en un embudo que el Procedimiento en <180>. Determinacin de la
se pueda mantener caliente. Mezclar y pesar, de temperatura de solidificacin. El promedio de no
una vez, tantas porciones como se necesiten para las menos de cuatro lecturas consecutivas de la mayor
distintas determinaciones. Mantener la muestra temperatura observada, es la temperatura de
fundida hasta que se hayan tomado las porciones solidificacin de los cidos grasos.
necesarias. Determinacin del ndice de acidez
Densidad relativa - (cidos grasos libres)
Determinar la densidad relativa de una grasa o A menos que se especifique de otro modo en la
aceite segn se indica en <160>. Determinacin de monografa correspondiente, disolver
la densidad relativa. aproximadamente 10,0 g de muestra, exactamente
pesados y previamente neutralizados frente a la
Temperatura de fusin fenolftalena con hidrxido de sodio 0,1 N, en
Determinar la temperatura de fusin segn se 50 ml de una mezcla de volmenes iguales de
indica para el Mtodo II en <260>. Determinacin alcohol y ter, contenida en un erlenmeyer. Si la
del punto difusin. muestra no se disuelve en el solvente fro, adaptar al
Temperatura de solidificacin erlenmeyer un condensador apropiado y calentar
de cidos grasos suavemente, agitando hasta disolucin. Agregar
Aislamiento de los cidos grasos - Calentar en 1 ml de fenolftalena (SR). Titular con hidrxido de
un vaso de precipitados de 800 ml a 150 C, 75 ml sodio 0,1 N (SV) hasta coloracin rosada
de solucin de hidrxido de potasio-glicerina, persistente durante 30 segundos. Realizar una
preparada disolviendo 25 g de hidrxido de potasio determinacin con un blanco y hacer las
en 100 ml de glicerina, y agregar 50 ml de la grasa correcciones necesarias. Calcular el Indice de
clarificada. Calentar la mezcla durante 15 minutos acidez o el volumen de lcali 0,1 N requerido para
con agitacin frecuente, evitando que la neutralizar 10,0 g de muestra (cidos grasos libres),
temperatura sobrepase los 150 C. La segn corresponda.
saponificacin se considera completa cuando la Si el volumen de hidrxido de sodio 0,1 N (SV)
mezcla se presenta homognea, sin partculas requerido para la titulacin es menor de 2 ml, puede
adheridas al vaso en el menisco. Verter el emplearse un titulante ms diluido o ajustarse
contenido del vaso de precipitados en 500 ml de convenientemente el tamao de la muestra. Los
resultados pueden expresarse en funcin del
volumen de titulante empleado o en funcin del por 28,05 y dividido por el peso, en g, de la muestra
volumen equivalente de hidrxido de sodio 0,1 N. tomada, es el Indice de esterificacin.
Si el aceite ha sido saturado con dixido de
Determinacin del ndice
carbono para su conservacin, calentar a reflujo
de hidroxilo
suavemente la solucin de alcohol-ter durante
Reactivo piridina-anhdrido actico - Antes de
10 minutos antes de la titulacin. El dixido de
comenzar el ensayo, mezclar 3 volmenes de
carbono presente en el aceite puede eliminarse
piridina recientemente destilada con 1 volumen de
tambin colocndolo en un cristalizador dentro de
anhdrido actico recientemente destilado.
un desecador al vaco durante 24 horas antes de
Procedimiento - Transferir una cantidad de
pesar la muestra.
muestra (determinada segn la Tabla 1),
Determinacin del ndice exactamente pesada, a un erlenmeyer de 250 ml con
de saponificacin tapn de vidrio y agregar 5,0 ml de Reactivo
Transferir 1,5 a 2 g de muestra, exactamente piridina-anhdrido actico. Transferir 5,0 ml de
pesados, a un erlenmeyer de 250 ml, previamente Reactivo piridina-anhdrido actico a un segundo
pesado, y agregar 25,0 mI de hidrxido de potasio erlenmeyer de 250 ml con tapn de vidrio, que ser
alcohlico 0,5 N (SV). Calentar en un bao de empleado como blanco. Acoplar a ambos
vapor, con un refrigerante apropiado para mantener erlenmeyers refrigerantes apropiados con juntas
el reflujo durante 30 minutos, agitando por rotacin esmeriladas. Calentar en un bao de vapor durante
frecuentemente. Agregar 1 ml de fenolftalena (SR) 1 hora, agregar 10 ml de agua a travs de cada
y titular el hidrxido de potasio en exceso con cido refrigerante y calentar en el bao de vapor durante
clorhdrico 0,5 N (SV). Realizar una determinacin 10 minutos adicionales. Enfriar y agregar, a cada
con un blanco (ver Titulaciones residuales en 780. erlenmeyer, 25 ml de alcohol butlico previamente
Volumetra). La diferencia entre los volmenes, en neutralizado frente a fenolftalena (SR) con
ml, de cido clorhdrico 0,5 N consumido por la hidrxido de potasio alcohlico 0,5 N; vertiendo los
muestra y el blanco, multiplicado por 28,05 y primeros 15 ml a travs de cada refrigerante y,
dividido por el peso, en g, de la muestra, es el luego de retirar los refrigerantes, lavar las paredes
ndice de saponificacin. de ambos erlenmeyers con la porcin restante de
Si el aceite ha sido saturado con dixido de 10 ml. A cada erlenmeyer agregar 1 ml de
carbono para su conservacin, colocarlo en un fenolftalena (SR) y titular con hidrxido de potasio
cristalizador dentro de un desecador al vaco alcohlico 0,5 N (SV). Registrar el volumen
durante 24 horas antes de pesar la muestra para el consumido por el cido residual en la solucin
ensayo. muestra como T y el consumido por el blanco como
B. Transferir aproximadamente 10 g de muestra,
Determinacin del ndice
exactamente pesados, a un erlenmeyer de 125 ml y
de esterificacin
[NOTA: si se han determinado el ndice de mezclar con 10 ml de piridina recientemente
saponificacin y el ndice de acidez, por diferencia destilada, neutralizada previamente frente a
entre estos se obtiene el ndice de esterificacin.] fenolftalena (SR). Agregar 1 ml de
Transferir entre 1,5 y 2 g de muestra, fenoltalena (SR) y titular con hidrxido de potasio
exactamente pesados, a un erlenmeyer de 250 ml, alcohlico 0,5 N (SV). Registrar el volumen
previamente pesado. Agregar entre 20 y 30 ml de constituido por los cidos grasos libres presentes en
alcohol neutralizado, agitar y agregar 1 ml de la muestra como A, o emplear el ndice de acidez
fenolftalena (SR). Titular con hidrxido de potasio para obtener A. Calcular el ndice de hidroxilo por
alcohlico 0,5 N (SV) hasta neutralizar totalmente la frmula siguiente:
los cidos grasos, libres. Agregar 25,0 ml de
hidrxido de potasio alcohlico 0,5 N (SV) y 56,11 N / P >B PA / C T @
proceder segn se indica en ndice de en la cual P y C son los pesos de la muestra, en g,
saponificacin, comenzando donde dice "Calentar tomados para la acetilacin y para la determinacin
en un bao de vapor..." pero omitiendo el agregado de cidos libres, respectivamente, N es la
adicional de fenolftalena (SR). Realizar una normalidad exacta del hidrxido de potasio
determinacin con un blanco. La diferencia entre alcohlico, 56,11 es el peso molecular del hidrxido
los volmenes, en mI, de cido clorhdrico 0,5 N de potasio y los otros trminos son los definidos
consumido por la muestra y el blanco, multiplicado anteriormente.
Tabla 1.
Intervalo de ndice Peso de muestra
de hidrolxilo (g)
0 a 20 10
20 a 50 5
50 a 100 3
100 a 150 2
150 a 200 1,5
200 a 250 1,25
250 a 300 1
300 a 350 0,75
Tabla 2.
ndice de iodo Peso de muestra
esperado (g r 0,001)
<5 3
5-20 1
21-50 0,4
51-100 0,2
101-150 0,13
151-200 0,1
Tabla 3.
Volumen Divisin de la
(ml) escala (ml)
0a3 0,1
3a5 0,5
5 a 10 1
10 a 25 5
25 a 50 25
50 a 100 50
490. IDENTIFICACIN DE BASES ORGNICAS
NITROGENADAS
El siguiente ensayo se emplea para identificar ampolla de decantacin y disolver en 25 ml de
sustancias que posean grupos amino terciarios. cido clorhdrico 0,01 N.
Solucin muestra - Para realizar el ensayo sobre Procedimiento - Para cada solucin, proceder
materia prima, disolver 50 mg de la sustancia en de la siguiente manera: agregar 2 ml de hidrxido
de sodio 1 N y 4 ml de disulfuro de carbono. Agitar
ensayo en 25 ml de cido clorhdrico 0,01 N. Para
durante 2 minutos y, si fuera necesario, centrifugar
realizar el ensayo sobre comprimidos, reducirlos a
la solucin para clarificar la fase inferior. Filtrar a
polvo fino y disolver con agitacin una cantidad,
travs de un filtro seco, recolectando el filtrado en
equivalente a 50 mg de la sustancia en ensayo, con
25 ml de cido clorhdrico 0,01 N. Si el producto un matraz apropiado con tapn de vidrio.
se presenta en cpsulas, proceder del mismo modo Determinar el espectro de absorcin infrarroja
de la Solucin estndar y la Solucin muestra, en
con una cantidad de polvo extrada de las mismas.
celdas de 1 mm, a una longitud de onda entre 7 y
Transferir la solucin obtenida a una ampolla de
decantacin, filtrar y lavar con agua el residuo y el 15 Pm, con un espectrofotmetro apropiado,
filtro, si fuera necesario. empleando disulfuro de carbono como blanco. El
Solucin estndar - Transferir 50 mg de la espectro de absorcin infrarroja de la Solucin
Sustancia de referencia correspondiente a una muestra debe presentar las mismas bandas de
absorcin que el de la Solucin estndar
500. IDENTIFICACION DE TETRACICLINAS
El siguiente ensayo se emplea para identificar e inmediatamente examinar bajo luz ultravioleta a
sustancias pertenecientes al grupo de las 366 mm: el cromatograma de la Solucin de
tetraciclinas. A menos que se especifique de otro resolucin debe presentar manchas separadas y la
modo en la monografa correspondiente, emplear mancha principal obtenida a partir de la Solucin
el Mtodo I. muestra debe ser similar en intensidad, apariencia
Solucin estndar - A menos que se y valor de R f a la obtenida a partir de la Solucin
especifique de otro modo en la monografa estndar.
correspondiente, disolver y diluir la Sustancia de
referencia correspondiente a la sustancia a Mtodo II
identificar con el mismo solvente especificado Solucin reguladora de pH 3,5 - Disolver
para la Solucin muestra, para obtener una 13,4 g de cido ctrico anhidro y 16,3 g de fsfato
solucin con una concentracin similar a la dibsico de sodio en 1 litro de agua y mezclar.
obtenida para la Solucin muestra. Fase estacionaria - Emplear un papel para
Solucin muestra - Proceder segn se cromatografa de 20 cm x 20 cm (Whatman N 1
especifica en la monografa correspondiente. o equivalente). Impregnar la hoja con Solucin
reguladora de pH 3,5 y eliminar el exceso del
Mtodo I solvente presionando firmemente la hoja entre dos
Fase estacionaria - Emplear una placa para papeles secantes no fluorescentes.
cromatografa en capa delgada (ver 100. Fase mvil - Nitrometano, cloroformo y
Cromatografa) recubierta con gel de slice piridina (20:10:3). Emplear esta mezcla el mismo
octilsilanizado con indicador de fluorescencia de da de preparada.
0,25 mm de espesor. Activar la placa por Solucin mezcla - Solucin estndar y
calentamiento a 130 C durante 20 minutos, dejar Solucin muestra (50:50).
enfriar y emplearla mientras est tibia. Procedimiento - En una cmara para
Fase mvil - Acido oxlico 0,5 M, cromatografa ascendente (ver 100.
previamente ajustado a pH 2,0 con hidrxido de Cromatografa), colocar la Fase mvil hasta una
amonio, acetonitrilo y metanol (80:20:20). altura de 0,6 cm. Sobre la lnea de siembra en la
Solucin de resolucin - A menos que se hoja de papel y con una separacin de 1,5 cm,
especifique de otro modo en la monografa aplicar 2 l de la Solucin estndar, Solucin
correspondiente, preparar una solucin en metanol muestra y Solucin mezcla. Antes de que las
que contenga 0,5 mg de Clorhidrato de aplicaciones se sequen completamente, colocar el
Clortetraciclina SR-FA, Hiclato de papel en la cmara cromatogrfica de manera que
Doxiciclina SR-FA, Oxitetraciclina SR-FA y el borde inferior se introduzca en la Fase mvil.
Clorhidrato de Tetraciclina SR-FA por ml. Desarrollar los cromatogramas hasta que el frente
Procedimiento - Aplicar por separado sobre la del solvente haya recorrido aproximadamente
placa 1 l de la Solucin estndar, Solucin 10 cm, retirar la hoja de la cmara, marcar el
muestra y Solucin de resolucin. Dejar secar las frente del solvente y exponerla a vapores de
aplicaciones y desarrollar los cromatogramas amonaco. Examinar bajo luz ultravioleta a
hasta que el frente del solvente haya recorrido 366 nm y visualizar la posicin de las manchas
aproximadamente tres cuartos de la longitud de la amarillas principales: el valor del Rf de la mancha
placa. Retirar la placa de la cmara, marcar el principal obtenida a partir de la Solucin muestra
frente del solvente y dejarla secar al aire. Exponer y la Solucin mezcla debe ser similar al obtenido a
la placa a vapores de amonaco durante 5 minutos partir de la Solucin estndar.
510. IMPUREZAS COMUNES
El perfil de impurezas de un producto se 3. Solucin A - Mezclar 850 mg de subnitrato
determina mediante la realizacin de este ensayo. de bismutocon 40 ml de agua y 10 ml de cido
La informacin general necesaria sobre actico glacial.
cromatografa en placa delgada esta contenida en Solucin B - Disolver 8 g de ioduro de
<100>. Cromatografa. A menos que se potasio en 20 ml de agua.
especifique de otro modo en la monografa Mezclar la Solucin A y la Solucin B para
correspondiente emplear el siguiente ensayo. obtener una solucin que pueda ser almacenada
Fase estacionaria - Emplear una placa para durante varios meses en envases de vidrio
cromatografa en capa delgada (ver 100. inactnico. Mezclar 10 ml de esta solucin con
Cromalografa) recubierta con gel de slice para 20 ml de cido actco glacial y diluir con agua
cromatografa con indicador de fluorescencia de para obtener 100 ml.
0,25 mm de espesor. 4. Solucin de ninhidrina para pulverizado -
Fase mvil - Emplear la fase mvil Disolver 200 mg de ninhidrina en 100 ml de
especificada en la monografa correspondiente. alcohol. Calentar la placa luego de pulverizar
Soluciones estndar - Preparar, empleando el sobre sta.
solvente especificado en la monografa 5. Solucin cida para pulverizado - A 90 ml
correspondiente, soluciones de la Sustancia de de alcohol, en un bao de hielo, agregar
referencia o de la sustancia indicada, de lentamente y con cuidado, agitando
concentraciones exactamente conocidas, iguales a constantemente, 10 ml de cido sulfrico.
0,01; 0,05; 0,1 y 0,2 mg por ml. [NOTA: puede Pulverizar sobre la placa y calentar hasta
emplearse calentamiento o sonicacin para carbonizar.
favorecer la disolucin cuando esto no afecte a la 6. Solucin de dicromato cido para
Sustancia de referencia.] pulverizado - A 100 ml de cido sulfrico,
Solucin muestra - Preparar, empleando el agregar dicromato de potasio, en cantidad
solvente especificado en la monografa suficiente, para obtener una solucin saturada.
correspondiente, una solucin que contenga una Pulverizar sobre la placa y calentar hasta
concentracin final de aproximadamente 10 mg carbonizar.
por ml. [NOTA: se puede emplear calentamiento 7. Vainillina - Disolver 1 g de vainillina en
o sonicacin para favorecer la disolucin cuando 100 ml de cido sulfrico.
esto no afecte a los componentes de la muestra.] 8. Cloramina T-Acido tricloroactico -
Procedimiento - Aplicar por separado sobre la Mezclar 10 ml de una solucin acuosa de
placa volmenes iguales (aproximadamente 20 l) cloramina T al 3 % con 40 ml de una solucin
de la Solucin muestra y las Soluciones estndar. alcohlica de cido tricloroactico al 25 %.
Secar las aplicaciones bajo una corriente de Preparar inmediatamente antes de usar.
nitrgeno y desarrollar los cromatogramas hasta 9. Folin C - A 70 ml de agua agregar 10 g de
que el frente del solvente haya recorrido tungstato de sodio y 2,5 g de molibdato de sodio.
aproximadamente tres cuartos de la longitud de la Agregar 5 ml de cido fosfrico al 85 % y 10 ml
placa. Retirar la placa de la cmara, marcar el de cido clorhdrico al 36 %, calentar a reflujo
frente del solvente y dejar secar al aire. Examinar esta solucin durante 10 horas.
la placa empleando el Revelador especificado. 10. Permanganato de potasio (KMnO 4 ) -
Localizar las manchas, con excepcin de la Disolver 100 mg de permanganato de potasio en
mancha principal en el cromatograma de la 100 ml de agua.
Solucin muestra, y determinar sus intensidades 11. DAB - Mezclar 1 g de p-
relativas comparando con los cromatogramas de dimetilaminobenzaldehdo en 100 ml de cido
las Soluciones estndar correspondientes. El total clorhdrico 0,6 N.
de impurezas comunes no debe ser mayor de 12. DAC - Mezclar 100 mg de p-
2,0 %, a menos que se especifique de otro modo dimetilaminocinamaldehdo en 100 ml de cido
en la monografa correspondiente. clorhdrico 1 N.
13. Ferricianuro - Mezclar cloruro frrico al
Reveladores - 1 % y ferricianuro de potasio al 1 % (50:50).
1. Luz ultravioleta de 254 y 366 nm. Emplear inmediatamente.
2. Iodoplatinato (SR). 14. Fast Blue B -
Reactivo A - Disolver 500 mg de Sal de Fast
Blue B en 100 ml de agua.
Reactivo B - Hidrxido de sodio 0,1 N.
Pulverizar sobre la placa primero con activo A y
luego con reactivo B.
15. Cianuro frrico alcalino - Diluir 1,5 ml de
una solucin de ferricianuro de potasio al 1% con
agua a 20 ml y agregar 10 ml de solucin de
hidrxido de sodio al 15 %.
16. Solucin de iodo para pulverizado -
Preparar una solucin de iodo al 0,5 % en
cloroformo.
17. Exponer la placa durante 10 minutos a
vapores de iodo en una cmara cerrada que en el
fondo contiene cristales de iodo.
Solucin A - Disolver 0,5 g de ioduro de
potasio en 50 ml de agua.
Solucin B - Preparar una solucin de 0,5 g
de almidn soluble en 50 ml de agua caliente.
Pulverizar sobre la placa con una mezcla de
volmenes iguales de Solucin A y Solucin B.
19. PTS - Disolver 20 g de cido p-
toluensulfnico en 100 ml de alcohol. Pulverizar
sobre la placa, secar durante 15 minutos a 110 C
y examinar bajo luz ultravioleta a 366 nm.
20. Solucin de o-toluidina para pulverizado -
Disolver 160 mg de o-toluidina en 30 ml de cido
actico glacial, diluir con agua a 500 ml. Agregar
1 g de ioduro de potasio y mezclar hasta
disolucin completa.
21. Mezclar 3 ml de solucin de cido
cloroplatnico (1 en 10) con 97 ml de agua.
Agregar 100 ml de solucin de ioduro de potasio
(6 en 100).
22. Solucin de iodo-metanol para pulverizado
- Mezclar yodo (SR) y metanol (1:1).
23. Solucin A: mezclar cuidadosamente
100 ml de solucin de oxido de mercurio al 5 %
con 20 ml de cido sulfrico. Diluir a 250 ml con
agua.
Solucin B: solucin de difenil carbazona al
0,1 %. Esta solucin se debe preparar en el da de
su uso o debe ser mantenida bajo refrigeracin por
no ms de 20 das. Pulverizar en forma sucesiva,
sobre la placa, primero con Solucin A y luego
con Solucin B.
520. IMPUREZAS ORGNICAS VOLTILES
Los siguientes mtodos se emplean para la [NOTA: se recomienda nitrgeno, cuando se
determinacin de impurezas orgnicas voltiles en emplea un gas de compensacin adicional para
productos farmacuticos. El mtodo a emplear, aumentar el caudal en el detector.]
los detalles y variaciones del mismo se Solucin estndar - Preparar una solucin, en
especifican en las monografas correspondientes. agua libre de sustancias orgnicas o en el solvente
Este ensayo puede evitarse cuando el especificado en la monografa correspondiente,
elaborador tiene la seguridad, en base a su que contenga, por cada ml, 12,0 g de cloruro de
conocimiento sobre el proceso de elaboracin, metileno; 1,2 g de cloroformo; 7,6 g de 1,4-
distribucin y almacenamiento de un producto, dioxano y 1,6 g de tricloroetileno. [NOTA: la
que no hay presencia potencial de solventes solucin se debe preparar en el da de uso.]
txicos y que el material, si se ensaya, cumplir Solucin muestra - Disolver una porcin de la
con las normas establecidas (ver Interpretacin de muestra, exactamente pesada, en agua libre de
los requisitos en Consideraciones generales). sustancias orgnicas o en el solvente especificado
[NOTA: el agua libre de sustancias orgnicas en la monografa correspondiente, para obtener
especificada en los siguientes mtodos no produce una solucin con una concentracin conocida de
picos interferentes cuando se inyecta en el Sistema aproximadamente 20 mg por ml.
cromatogrfico establecido.] Aptitud del sistema - (ver 100.
XIDO DE ETILENO - Este ensayo se Cromatografa) - Cromatografiar la Solucin
realiza slo cuando se especifica en la monografa estndar, registrar los cromatogramas y medir las
correspondiente. Los parmetros de la Solucin respuestas de los picos segn se indica en
estndar y el mtodo de determinacin se Procedimiento: la resolucin, R, no debe ser
describen en la monografa correspondiente. El menor de 1,0 y la desviacin estndar relativa
lmite es 10 ppm. para inyecciones repetidas no es mayor de 15 %.
Procedimiento - Inyectar por separado en el
Mtodo I cromatgrafo volmenes iguales
Sistema cromatogrfico - Emplear un equipo (aproximadamente 1 l) de la Solucin estndar y
para cromatografa de gases con un detector de la Solucin muestra, registrar los cromatogramas
ionizacin a la llama, una precolumna de y medir las respuestas de los picos principales.
5 m x 0,53 mm de slice desactivada con Identificar todos los picos presentes en los
fenilmetilsiloxano y una columna de cromatogramas de la Solucin muestra. La
30 m x 0,53 mm de slice fundida recubierta con presencia e identidad de cualquiera de las
una fase estacionaria, qumicamente unida, impurezas voltiles enumeradas en la Tabla o la
constituida por 5 % de fenilpolisiloxano y 95 % presencia e identidad de cualquier otra impureza
de metilpolisiloxano de 5 m. Mantener el orgnica voltil que eluya con un tiempo de
inyector y el detector a aproximadamente 70 y retencin comparable, se podr establecer
260 C, respectivamente. Programar la empleando un detector de espectrometra de masa
temperatura de la columna del siguiente modo: o mediante el empleo de una segunda columna
mantener a 35 C durante 5 minutos, aumentar validada que contenga una fase estacionaria
hasta 175 C a razn de 8 C por minuto y luego diferente.
aumentar hasta 260 C a razn de 35 C por A menos que se especifique de otro modo en
minuto. Mantener a esta temperatura, por lo la monografa correspondiente, la cantidad de
menos, durante 16 minutos. Se emplea helio cada impureza orgnica voltil presente en el
como gas transportador con una velocidad lineal material no debe ser mayor al lmite especificado
de aproximadamente 35 cm por segundo. en la Tabla.
Tabla.
Lmite de impurezas orgnicas voltiles
Lmite
(ppm)
Benceno 2
Cloroformo 60
1,4-Dioxano 380
Cloruro de metileno 600
Tricloroetileno 80
Tabla de aceptacin 1.
Nivel Unidades ensayadas Criterios
Ningn valor individual debe encontrarse fuera de los
N1 6 correspondientes intervalos establecidos y ningn valor
individual es menor al establecido para el tiempo final.
El promedio de las 12 unidades (N 1 +N 2 ) debe encontrarse
dentro de cada uno de los intervalos establecidos y el
promedio para el tiempo final no debe ser menor que el
valor establecido para dicho tiempo. Ningn valor
N2 6 individual debe ser diferente en ms de un 10 %, del
contenido declarado, de los intervalos establecidos; y
ningn valor individual debe ser menor en ms de un
10 %, del contenido declarado, del lmite establecido para
el tiempo final.
El promedio de las 24 unidades (N 1 +N 2 +N 3 ) debe
encontrarse dentro de cada uno de los intervalos
establecidos y el promedio para el tiempo final no debe
ser menor que el valor establecido para dicho tiempo. No
ms de 2 de los 24 valores individuales podrn ser
diferentes en ms de un 10 % del contenido declarado de
N3 12
los intervalos establecidos; no ms de 2 de los 24 valores
individuales podrn ser menores en ms de un 10 % del
contenido declarado del lmite establecido para el tiempo
final; y ningn valor individual es diferente en ms de un
20 % del contenido declarado por debajo del lmite
establecido para el tiempo final.
Tabla de aceptacin 2.
Nivel Unidades ensayadas Criterios
En ninguna unidad individual la cantidad disuelta debe ser
Na 1 6
mayor de 10 %.
El promedio de la cantidad disuelta para las 12 unidades
(Na 1 + Na 2 ) no debe ser mayor de 10 % y en ninguna
Na 2 6
unidad individual la cantidad disuelta debe ser mayores de
25.
El promedio de la cantidad disuelta para las 24 unidades
(Na 1 + Na 2 + Na 3 ) no debe ser mayor de 10 % y en
Na 3 12
ninguna unidad individual la cantidad la cantidad disuelta
debe ser mayor de 25 %.
Tabla de aceptacin 3.
Nivel Unidades ensayadas Criterios
Nb 1 6 Cada unidad individual no debe ser menor de Q + 5 %.
El promedio de la cantidad disuelta para las 12 unidades
Nb 2 6 (Nb 1 + Nb 2 ) debe ser igual o mayor que Q y ninguna
unidad individual debe ser menor de Q 15 %.
El promedio de las 24 unidades (Nb 1 + Nb 2 + Nb 3 ) debe
ser igual o mayor que Q, no ms de 2 unidades deben ser
Nb 3 12
menores de Q 15 % y ninguna unidad individual debe
ser menor de Q 25 %.
540. LIMITE DE ARSENICO
Precaucin - La arsina generada es sumamente de la sustancia en ensayo calculada por la frmula
txica. siguiente:
Este procedimiento se dise para determinar la 3,0/L
presencia de trazas de arsnico transformndolo en
en la cual L es el lmite de arsnico en ppm. Disol-
arsina, la cual forma un complejo de color rojo al
ver en agua hasta obtener un volumen de 35 ml.
pasar a travs de una solucin de dietilditiocarba-
Procedimiento - Agregar a la Solucin muestra
mato de plata. El color rojo producido se compara,
y a la Solucin estndar 20 ml de cido sulfrico
visual o espectrofotomtricamente, contra un con-
7 N, 2 ml de ioduro de potasio (SR), 0,5 ml de clo-
trol que tiene una cantidad de arsnico equivalente
ruro estaoso concentrado (SR) y 1 ml de alcohol
al lmite especificado en la monografa correspon-
isoproplico. Mezclar y dejar reposar a temperatura
diente. Los lmites se establecen en trminos de
ambiente durante 30 minutos. Colocar en la unidad
arsnico. El contenido de arsnico no debe exceder
depuradora dos trozos de algodn previamente
el lmite especificado en la monografa correspon-
impregnados con solucin saturada de acetato de
diente.
plomo, exprimidos para eliminar el exceso de solu-
Existen dos mtodos que difieren en el trata-
cin y secados al vaco a temperatura ambiente,
miento preliminar de la muestra a ensayar y del
dejando un pequeo espacio de 2 mm entre las dos
estndar. El Mtodo I se emplea generalmente para
porciones de algodn. Lubricar las juntas esmerila-
sustancias inorgnicas y el Mtodo II para sustan-
das con grasa apta para emplearse con solventes
cias orgnicas.
orgnicos y conectar la unidad depuradora al tubo
Aparato (ver Figura) - Consta de un generador de absorcin. Transferir 3,0 ml de dietilditiocarba-
de arsina A, al que se le adapta una unidad depura- mato de plata (SR) al tubo de absorcin. Agregar
dora C, y un tubo de absorcin E, con juntas estn- 3,0 g de cinc granulado (malla N 20) a la mezcla
dar o esfricas B y D, colocadas entre las unidades. contenida en el, generador de arsina e inmediata-
Se puede emplear cualquier otro aparato que tenga mente conectar la unidad depuradora al mismo.
caractersticas similares. Colocar el sistema en un bao de agua a 25 3 C y
Solucin madre de trixido de arsnico - Trans- permitir la formacin de hidrgeno y el desarrollo
ferir 132,0 mg de trixido de arsnico, exactamente de color durante 45 minutos agitando el sistema
pesados y previamente secados a 105 C durante suavemente a intervalos de 10 minutos. Desconec-
1 hora, a un matraz aforado de 1 litro. Agregar 5 ml tar el tubo de absorcin y la unidad depuradora del
de solucin de hidrxido de sodio (1 en 5) y disol- generador de arsina y transferir la solucin a celdas
ver. Neutralizar la solucin con cido sulfrico de absorcin de 1 cm.
2 N, agregar 10 ml adicionales de cido sulfrico El color rojo producido por la Solucin muestra
2 N, completar a volumen y mezclar con agua re- no debe ser mayor que el producido por la Solucin
cientemente hervida y enfriada. estndar. Si fuera necesario, determinar la absor-
bancia a la longitud de onda de mxima absorcin,
Solucin estndar de arsnico - Transferir entre 535 y 540 nm, en un espectrofotmetro o
10,0 ml de la Solucin madre de trixido de arsni- colormetro apropiado, empleando dietilditiocarba-
co a un matraz aforado de 1 litro y agregar 10 ml de mato de plata (SR) como blanco.
cido sulfrico 2 N. Completar a volumen y mez-
clar con agua recientemente hervida y enfriada. Mtodo II
Cada ml de la solucin estndar de arsnico contie- Precaucin - Se deben tomar medidas de segu-
ne el equivalente a 1 g de arsnico. Conservar ridad en todo momento ya que algunas sustancias
esta solucin en un recipiente de vidrio y emplearla pueden reaccionar en forma explosiva cuando se
dentro de los tres das de preparada. oxidan con perxido de hidrgeno.
Mtodo I [NOTA 1: si se trabaja con compuestos que con-
tienen halgenos, calentar las muestras con cido
Solucin estndar - Transferir 3,0 ml de la So-
sulfrico a menor temperatura, evitando que la
lucin estndar de arsnico al generador de arsina y
mezcla entre en ebullicin y agregar, con mucho
diluir con agua hasta obtener un volumen de 35 ml.
cuidado, el perxido de hidrgeno antes de efectuar
Solucin muestra - A menos que se especifique
la carbonizacin, para prevenir la prdida de arsni-
de otro modo en la monografa correspondiente,
co trivalente.]
transferir al generador de arsina la cantidad, en g,
[NOTA 2: si la sustancia en ensayo reacciona adicin. Agregar las primeras gotas muy lentamen-
rpidamente y comienza a carbonizarse con 5 ml de te con agitacin constante para evitar una reaccin
cido sulfrico antes de calentarse, emplear en su violenta. Interrumpir el calentamiento si el des-
lugar 10 ml de cido sulfrico diluido (1 en 2) y prendimiento de gases es excesivo. Cuando la
fro, y agregar unas pocas gotas de perxido de reaccin ha terminado, calentar cuidadosamente,
hidrgeno antes de calentar.] rotando el generador de arsina ocasionalmente, para
Solucin estndar - Transferir 3,0 ml de Solu- evitar que algunas porciones de la muestra queden
cin estndar de arsnico al generador de arsina; adheridas a las paredes del generador de arsina.
agregar 2 ml de cido sulfrico y mezclar. Agregar Mantener las condiciones de oxidacin durante la
el volumen de perxido de hidrgeno al 30 % em- digestin agregando pequeas cantidades de solu-
pleado en la Solucin muestra. Calentar la mezcla cin de perxido de hidrgeno al 30 %, cada vez
hasta que se desprendan vapores fuertes. Dejar que la mezcla se tome de color marrn o se oscu-
enfriar y agregar con cuidado 10 ml de agua y nue- rezca. Continuar la digestin hasta que la materia
vamente calentar hasta que se produzcan vapores orgnica se destruya y se desprendan abundantes
fuertes. Se debe repetir este procedimiento con vapores de trixido de azufre y que la solucin sea
otros 10 ml de agua para eliminar cualquier traza incolora o presente solamente un color amarillo
del perxido de hidrgeno. Enfriar y diluir con plido. Enfriar y agregar cuidadosamente 10 ml de
agua hasta 35 ml. agua, mezclar y evaporar nuevamente hasta que
aparezcan vapores fuertes. Si fuera necesario, repe-
Solucin muestra - A menos que se especifique tir el procedimiento para eliminar cualquier traza de
de otro modo en la monografa correspondiente, perxido de hidrgeno. Enfriar, lavar las paredes
transferir al generador de arsina la cantidad, en g, del generador de arsina con 10 ml de agua y diluir
de la sustancia en ensayo calculada por la frmula con agua a 35 ml.
siguiente: Procedimiento - Proceder segn se indica en
3,0/L Procedimiento para el Mtodo I.
en la cual L es el lmite de arsnico en ppm.
Interferencias qumicas - Los metales o las sa-
Agregar a la muestra 5 ml de cido sulfrico,
les de metales como el cromo, cobalto, cobre, mer-
algunas perlas de vidrio y digerir calentando prefe-
curio, molibdeno, nquel, paladio y plata, pueden
riblemente sobre una placa calefactora, debajo de
interferir con la formacin de arsina. El antimonio
una campana de ventilacin a una temperatura no
que forma estibina produce una interferencia positi-
mayor de 120 C, hasta que se inicie la carboniza-
va en el desarrollo del color con dietilditiocarbama-
cin. Agregar ms cido sulfrico, si fuera necesa-
to de plata (SR). Cuando se sospecha la presencia
rio, para humedecer completamente la muestra pero
de antimonio, el color rojo que se produce en las
se debe tener en cuenta que el volumen total agre-
dos soluciones de dietilditiocarbamato de plata,
gado no puede ser mayor de 10 ml. Agregar cuida-
puede ser comparado a la longitud de onda de
dosamente, gota a gota, la solucin de perxido de
mxima absorcin entre 535 y 540 nm con un co-
hidrgeno al 30 %, esperando entre gota y gota a
lormetro apropiado ya que a esta longitud de onda
que la reaccin cese antes de efectuar la siguiente
la interferencia debida a la estibina es despreciable.
Figura. Aparato para el ensayo lmite de arsnico.
550. LMITE DE CALCIO, POTASIO Y SODIO
Para la determinacin de estos elementos, centrifugar para obtener una solucin transparente
emplear un fotmetro de llama. o ligeramente turbia.
Solucin estndar de calcio - Transferir Solucin estndar - Transferir 50 ml de la
249,7 mg de carbonato de calcio, previamente Solucin muestra a un matraz aforado de 100 ml,
secado durante 3 horas a 300 C y enfriado en un agregar los volmenes de Soluciones estndar de
desecador durante 2 horas, a un matraz aforado de calcio, potasio o sodio indicados en la monografa
100 ml. Agregar 20 ml de agua y 5 ml de correspondiente, completar a volumen con agua y
solucin de cido clorhdrico 3 N, agitar hasta mezclar. Diluir alcuotas de esta solucin con
disolucin, completar a volumen con agua y agua hasta obtener una concentracin apropiada
mezclar. Cada ml contiene 1,00 mg de calcio. del elemento en ensayo.
Solucin estndar de potasio - Transferir Procedimiento - Ajustar el fotmetro de llama
190,7 mg de cloruro de potasio, previamente para obtener una lectura con la Solucin estndar
secado durante 2 horas a 105 C, a un matraz lo ms cercana posible al 100 % de transmitancia,
aforado de 100 ml. Disolver con agua, completar a la longitud de onda de mxima emisin, segn
a volumen y mezclar. Cada ml contiene 1,00 mg se indica en la Tabla. Emplear como ancho de
de potasio. rendija de salida un valor lo ms cercano posible
Solucin estndar de sodio Transferir al ancho de banda designado Registrar la lectura
254,2 mg de cloruro de sodio, previamente secado de transmitancia y designarla con la letra S. Diluir
durante 2 horas a 105 C, a un matraz aforado de las alcuotas de la Solucin muestra con agua para
100 ml. Disolver con agua, completar a volumen obtener una solucin con una concentracin
y mezclar. Cada ml contiene 1,00 mg de sodio. similar a la de la Solucin estndar. Sin cambiar
Solucin muestra - A menos que se ninguno de los ajustes realizados en el fotmetro
especifique de otro modo en la monografa de llama, registrar la lectura de transmitancia de la
correspondiente, transferir 2,00 g de muestra a un Solucin muestra y designarla con la letra T.
matraz aforado de 100 ml, enfriar en un bao de Reajustar solamente el monocromador a la
hielo y agregar 5 ml de cido ntrico concentrado. longitud de onda asignada como correccin de
Agitar hasta disolucin y dejar reposar a fondo. Registrar la lectura de transmitancia de la
temperatura ambiente. Si la solucin resultante Solucin muestra a esta longitud de onda y
presenta turbidez, calentar suavemente hasta designarla con la letra B. El ensayo es vlido si el
obtener una solucin transparente. Dejar reposar valor de T menos B es menor o igual que el valor
a temperatura ambiente, completar a volumen con de S menos T.
agua y mezclar. Si fuera necesario, filtrar o
Tabla.
Figura 1. Aparato para la determinacin de aceites esenciales en drogas vegetales (las dimensiones son mm).
Procedimiento - Llevar a cabo el ensayo de por minuto, a menos que se especifique de otro
acuerdo con la naturaleza de la droga a ser modo en la monografa correspondiente.
examinada. Transferir al baln el volumen de Para determinar la velocidad de extraccin,
lquido indicado en la monografa correspondiente, disminuir el nivel de agua por medio de la vlvula
agregar algunos trozos de plato poroso y colocar el de tres vas hasta que el menisco se encuentre en la
condensador. Introducir agua a travs del tubo de marca inferior a (ver Figura 2). Cerrar la vlvula y
llenado N hasta el nivel B. Quitar el tapn K y medir el tiempo que toma el lquido en alcanzar la
transferir la cantidad indicada de xileno empleando marca superior b. Abrir la vlvula y continuar con
una pipeta con su extremo en la parte inferior del la extraccin, modificando el calentamiento para
tubo K. Colocar el tapn K asegurndose que los regular la velocidad de extraccin. Extraer durante
orificios de K y K coincidan entre s. Calentar el 30 minutos. Detener el calentamiento y leer el
lquido en el baln hasta ebullicin y ajustar la volumen de xileno en el tubo graduado despus de
velocidad de extraccin a aproximadamente 2 ml por lo menos 10 minutos.
Figura 2.
Tabla 1.
Pesticida Lmite
Alaclor 0,02
Aldrin y dieldrin, suma de 0,05
Azinfos, metil 1
Bromopropilato 3
Cipermetrina (e ismeros) 1
Clordano (suma de cis-, trans- y oxiclordano) 0,05
Clorfenvinfos 0,5
Clorpirifos 0,2
Clorpirifos, metil 0,1
DDT (suma de p,p-DDT, o, p-DDE y p,p-TDE) 1
Deltametrina 0,5
Diazinon 0,5
Diclorvos 1
Ditiocarbamatos (expresado como CS 2 ) 2
Endosulfan (suma de ismeros y sulfato de endosulfano) 3
Endrin 0,05
Etion 2
Fenitrotion 0,5
Fenvalerato 1,5
Fonofos 0,05
Fosalono 0,1
Heptacloro (suma de heptacloro y heptacloro epxido) 0,05
Hexaclorobenceno 0,1
Hexaclorociclohexano, ismeros (distintos de J) 0,3
Lindano (J-hexaclorociclohexano) 0,6
Malation 1
Metidation 0,2
Paration 0,5
Paration, metil 0,2
Permetrina 1
Piperonil, butxido 3
Piretrinas, suma de 3
Pirimifos, metil 4
Quintozeno, suma de quintozeno, pentacloroanilina y metil 1
pentaclorofenil sulfuro)
Figura.
Micrmetro - Emplear un micrmetro de 1,2 m o porosidad menor en un intervalo de
platina certificado, con graduaciones de 10 m. presiones de 10 a 80 psi y membranas filtrantes
Aparatos de filtracin - Emplear un embudo (de 25 47 mm, reticuladas o no, de color negro o
filtrante apropiado para el volumen a ensayar, con gris oscuro, de un material apropiado compatible
un dimetro mnimo de aproximadamente 21 mm. con el producto, de 1,0 m o porosidad menor).
El embudo debe ser de plstico, vidrio acero Emplear pinzas de punta roma para manipular los
inoxidable. Colocar el filtro sobre una criba de filtros de membrana.
acero inoxidable o una placa de vidrio sinterizado
Ambiente para el ensayo -
para que acte como difusor del filtrado. El
Una campana de flujo laminar u otro recinto -
aparato de filtracin est equipado con una fuente
con flujo de aire laminar, con una capacidad
de vaco, un dispensador de solvente capaz de
suficiente para separar el rea donde se lleva a
entregar solvente filtrado a travs de un filtro
cabo el anlisis, con aire filtrado a travs de un Operacin del retculo para la medicin del
filtro HEPA no habiendo ms de 3.500 partculas dimetro de partculas -
(mayores o iguales a 0,5 m) por metro cbico. El error relativo del retculo empleado debe
Para la determinacin del blanco, medir con el medirse inicialmente con un micrmetro de
dispensador un volumen de 50 ml de agua platina certificado. Para realizar esto, alinear la
destilada o desionizada y filtrada. Aplicar vaco y escala micromtrica del retculo con la del
pasar el volumen total de agua a travs del filtro micrmetro de la platina para que queden
de membrana. Retirar la membrana de la base del paralelas. [NOTA: comparar las escalas,
embudo y colocarla sobre una cinta con adhesivo empleando el mayor nmero posible de
en ambas caras, en un portaobjetos o una placa de graduaciones]. Leer el nmero de divisiones de la
Petri. Dejar secar la membrana, examinarla escala del ocular reticulado, DEOR, comparado
microscpicamente a una magnificacin de 100x. con las divisiones del micrmetro de la platina,
Si no ms de 20 partculas mayores o iguales a DMP. Calcular el error relativo por la frmula
10 m y 5 partculas mayores o iguales a 25 m siguiente:
estn presentes dentro del rea de filtracin, el
nivel de partculas es apropiado para llevar a cabo DEOR DMP
100
el ensayo. DMP
Durante todo este procedimiento, se deben
emplear guantes apropiados libres de polvo, Un error relativo de 2 % es aceptable. La
materiales de vidrio y equipos completamente tcnica bsica de medicin aplicada con el empleo
limpios. Antes de realizar el ensayo limpiar todas del retculo para la medicin del tamao de
las superficies del rea de flujo laminar con un partculas consiste en transformar mentalmente la
solvente apropiado. El material de vidrio y los imagen de cada partcula en un crculo y luego
equipos deben haber sido enjuagados compararlo con los crculos de referencia del
sucesivamente con una solucin de detergente retculo de 10 y 25 m. El proceso de medicin
libre de residuos a aproximadamente a 100 C, por tamao se lleva a cabo sin superponer la
agua caliente, agua destilada o desionizada y partcula en los crculos de referencia; las
alcohol isoproplico. [NOTA: el agua destilada o partculas no deben moverse de sus localizaciones
desionizada y el alcohol isoproplico se deben dentro del campo del retculo (el crculo grande)
filtrar empleando filtros de 1,2 m o porosidad para compararlas con los crculos de referencia.
menor]. Hacer los enjuagues bajo un flujo Emplear el dimetro interno de los crculos claros
laminar equipado con filtros HEPA. Dejar secar de referencia del retculo para clasificar por
los materiales de vidrio y los aparatos de filtracin tamao a las partculas blancas y transparentes.
bajo la campana. Preferentemente, la campana Emplear el dimetro exterior de los crculos de
debe estar ubicada en una habitacin separada, referencia de color negro del retculo para
provista con aire filtrado y acondicionado, clasificar por tamao a las partculas oscuras.
mantenida bajo presin positiva. Rotar el retculo en el ocular derecho del
microscopio para que la escala lineal quede
Preparacin del microscopio ubicada en la parte inferior del campo; enfocando
Colocar el iluminador auxiliar cerca de la rpida y definidamente el retculo mediante el
platina, enfocar el iluminador para dar un rea ajuste del anillo derecho de la dioptra del ocular
concentrada de iluminacin sobre una membrana mientras se observa la muestra fuera de foco.
filtrante colocada en la platina. Ajustar la altura Enfocar el microscopio sobre la muestra, mirando
del iluminador para que el ngulo de incidencia de solamente a travs del ocular derecho. Luego,
la luz sea 10 20 con respecto a la horizontal. mirando a travs del ocular izquierdo, ajustar la
Empleando el iluminador episcpico interno, abrir dioptra del ocular izquierdo para enfocar con
totalmente el campo y la abertura de los definicin.
diafragmas. Centrar el filamento de la lmpara y
enfocar el microscopio en un filtro que contenga Preparacin del aparato de filtracin
partculas. Ajustar la intensidad de iluminacin Lavar preferentemente todos los componentes
reflejada hasta que las partculas sean claramente del aparato de filtracin en una solucin de
visibles y muestren sombras pronunciadas. detergente lquido y agua caliente. Enjuagar con
Ajustar la intensidad de iluminacin episcpica al agua caliente. Aplicar un segundo enjuague con
grado ms bajo y luego aumentar la hasta que las agua destilada o desionizada y filtrada, empleando
sombras producidas por las partculas muestren la agua a presin sobre todas las superficies
disminucin menos perceptible de contraste. exteriores e interiores del aparato de filtracin.
Repetir el procedimiento del enjuague a presin
empleando alcohol isoproplico filtrado. todo el lquido. Retirar el embudo filtrante de la
Finalmente, empleando el dispositivo de enjuague base mientras se mantiene el vaco, cerrar el vaco
a presin, enjuagar el aparato con agua destilada o y retirar la membrana con una pinza de punta
desionizada y filtrada. roma. Colocar la membrana sobre una placa de
Retirar una membrana filtrante de su envase Petri u otro envase similar, fijarla con una cinta
empleando una pinza limpia de punta roma. con adhesivo en ambas caras e identificar la
Emplear agua destilada o desionizada y filtrada muestra. Dejar que el filtro se seque al aire en el
para lavar ambos lados del filtro. Armar el recinto de flujo laminar dejando la tapa del envase
aparato de filtracin con el difusor en la base y semiabierta.
colocar el filtro sobre el difusor. Colocar el Polvos y liofilizados - Proceder segn se
embudo en la parte superior de la base y fijarlo en indica en Preparacin muestra en Recuento de
su lugar. partculas por bloqueo de luz. Empleando una
Preparacin muestra solucin combinada de diez unidades o ms o el
Proceder segn se indica en Preparacin nmero requerido de unidades individuales,
muestra en Recuento de partculas por bloqueo de proceder segn se indica en Preparaciones
luz. lquidas.
Preparaciones lquidas - Para inyectables de Inyectables en envases multidosis - Proceder
pequeo volumen con un volumen mayor o igual segn se indica en Preparaciones lquidas,
a 25 ml, ensayados individualmente, y para filtrando el volumen total de la unidad. Calcular
inyectables de gran volumen, se debe realizar el el resultado del ensayo referido al volumen de una
ensayo sobre todo el volumen de la unidad. Para porcin equivalente a la dosis mxima declarada
inyectables de gran volumen o inyectables de en el rtulo. Considerar que esta porcin es el
pequeo volumen donde el volumen de cada equivalente al contenido del envase total. Por
unidad es mayor o igual a 25 ml se deben ensayar ejemplo, si el volumen total del envase es 50 ml y
menos de diez unidades seleccionadas en base a la el volumen de la dosis mxima es 10 ml, el
definicin de un plan de muestreo estadstico. resultado del ensayo de recuento del volumen
Mezclar y suspender las partculas en cada unidad total se multiplicar por 0,1 para obtener el
invirtiendo veinte veces su contenido. Abrir las resultado del ensayo en base a la dosis mxima de
unidades de manera de generar el menor nmero 10 ml. [NOTA: para los clculos, considerar que
posible de partculas. Para productos con un esta porcin es el equivalente al contenido de un
volumen menor a 25 ml, abrir y combinar el envase lleno].
contenido de diez o ms unidades en un envase Recuento de partculas -
limpio. Filtrar las unidades de gran volumen en El ensayo microscpico descrito en esta
forma individual. Se pueden filtrar seccin es flexible con respecto al modo de
individualmente las unidades de pequeo volumen recuento, ya que permite contar partculas por ml,
mayor o igual a 25 ml. en muestras que contengan 1 partcula por ml as
Mediante el empleo del embudo de filtracin como en muestras que contengan un nmero
transferir el volumen total de una solucin significativamente mayor de partculas por ml.
combinada o una unidad individual y aplicar Este mtodo puede emplearse cuando se cuentan
vaco. Si se va a emplear el procedimiento de todas las partculas en la superficie de la
recuento parcial (ver Procedimiento de recuento membrana de anlisis o cuando solamente se
parcial en Recuento de Partculas), no dejar que cuentan aquellas partculas en un rea fraccionada
el volumen del lquido en el embudo filtrante se de la superficie de la membrana.
encuentre por debajo de la mitad del volumen del
Procedimiento de recuento total -
embudo entre cada uno de los llenados. [NOTA:
En un recuento total, se ignora el campo
emplear un embudo filtrante apropiado al
reticular (CR) definido por el crculo grande del
volumen de la solucin si se va emplear el
retculo y se emplea el filamento vertical. Barrer
procedimiento de recuento parcial. Esto es
la membrana totalmente de derecha a izquierda en
necesario para asegurar la distribucin pareja de
un camino que colinda, pero no se superponga,
las partculas sobre la membrana]. Despus de
con el primer camino de barrido. Repetir este
agregar la ltima porcin de la solucin, comenzar
procedimiento, movindose de izquierda a
a lavar las paredes del embudo filtrante aplicando
derecha, y nuevamente a la izquierda, hasta que
en forma circular agua destilada o desionizada y
todas las partculas de la membrana hayan sido
filtrada y dejar de lavar antes que el volumen
contadas. Registrar el nmero total de partculas
llegue por debajo de un cuarto del nivel de
mayores o iguales a 10 m y mayores o iguales a
llenado. Mantener el vaco hasta haber filtrado
25 m. Para inyectables de gran volumen, borde izquierdo del rea de filtracin, mover a un
calcular el nmero de partculas, por ml, para la CR hacia la parte superior del filtro y continuar
unidad ensayada, por la frmula siguiente: contando los CR avanzando en la direccin
opuesta. El movimiento de un CR al prximo
P puede ser realizado por dos mtodos. Un mtodo
V es definir un punto de referencia (partcula o
irregularidad de la superficie del filtro) y mover
en la cual P es el nmero total de partculas
un CR en relacin al punto. Un segundo mtodo
contadas y V es el volumen de la solucin, en ml.
es emplear el vernier de la platina del microscopio
Para inyectables de pequeo volumen, calcular el
para mover 1 mm entre los CR. Para facilitar esto
nmero de partculas, por unidad, por la frmula
ltimo, ajustar la posicin de los controles x e y en
siguiente:
la platina del microscopio a un nmero entero en
P la posicin inicial en el centro del borde derecho
del rea d filtracin; luego cada CR ser una
n divisin entera de movimiento del control x de la
en la cual P es el nmero total de partculas posicin de la platina. Si se llega a la parte
contadas y n es el nmero de unidades superior del rea de filtracin antes de obtener el
combinadas. nmero deseado de CR se empieza nuevamente en
el centro del borde derecho del rea de filtracin
Procedimiento de recuento parcial -
un CR por debajo del empleado la primera vez.
Si se realizara un recuento parcial de partculas
Esta vez moverse hacia abajo en la membrana
sobre una membrana, el operador debe, en primer
cuando se llega al final de una fila de los CR.
lugar, asegurarse de que se realice una
Continuar como antes hasta completar el nmero
distribucin homognea de partculas en la
de CR.
membrana. Esto es evaluado barriendo
Para inyectables de gran volumen, si se emplea un
rpidamente para buscar agregados de partculas.
procedimiento de recuento parcial para los
No debe observarse ningn agregado. Contar las
intervalos de tamao 10 y 25 m, calcular las
partculas mayores o iguales a 10 m en el CR en
partculas por ml, por la frmula siguiente:
el borde del rea de filtracin as como en el
centro de la membrana. El nmero de partculas PAt
mayores o iguales a 10 m en el CR con el
recuento total ms alto de partculas no es ms del
ApV
doble del CR con el recuento ms bajo de en la cual P es el nmero de partculas contadas,
partculas. Rechazar un filtro que no cumpla estos A t es el rea de filtracin de la membrana en mm2,
criterios y preparar otro si se emplea un A p es el rea parcial contada en mm2, en base al
procedimiento de recuento parcial, o analizar esta nmero de campos reticulares contados y V es el
membrana por el mtodo de recuento total. Volumen de solucin filtrada, en ml. Para una
El nmero normal de CR contados para un solucin combinada (para unidades de inyectables
recuento parcial es 20. Si se desea un intervalo de de pequeo volumen que contengan menos de
confianza ms pequeo con respecto al resultado, 25 ml) o para una sola unidad de un inyectable de
puede contarse un nmero de campos y partculas pequeo volumen, calcular el nmero de
mayor. Contar todas las partculas que tengan un partculas por unidad, por la frmula siguiente:
dimetro mayor o igual a 10 m y mayor o igual a
25 m dentro del CR y aqullas que estn en PAt
contacto con el lado derecho del crculo del CR.
Ap n
No contar las partculas fuera del CR. Ignorar
aqullas que tocan el lado izquierdo del crculo de en la cual n es el nmero de unidades contadas y
CR. La lnea divisoria entre el lado derecho y el los otros trminos son los definidos anteriormente.
izquierdo del crculo del CR es el filamento Para todos los tipos de productos, si el material
vertical. [NOTA: determinar el tamao de la ensayado ha sido diluido para que disminuya la
partcula sin cambiar el aumento o la iluminacin viscosidad, el factor de dilucin debe tomarse en
del microscopio]. cuenta al calcular el resultado final del ensayo.
Para realizar un recuento parcial de partculas
sobre una membrana, comenzar en el borde Interpretacin
derecho del centro del rea de filtracin y empezar El inyectable cumple con los requisitos del ensayo
a contar los CR adyacentes. Cuando se llega al si el nmero de partculas promedio presente en
las unidades ensayadas no excede los valores enumerados en la Tabla 2.
Clase E 2 Clase F 1
Valor nominal
Tolerancia en r mg Tolerancia en r mg
1 mg 0,006 0,020
2 mg 0,006 0,020
5 mg 0,006 0,020
10 mg 0,008 0,025
20 mg 0,010 0,030
50 mg 0,012 0,040
100 mg 0,015 0,050
200 mg 0,020 0,060
500 mg 0,025 0,080
1g 0,030 0,10
2g 0,040 0,12
5g 0,050 0,15
10 g 0,060 0,20
20 g 0,080 0,25
50 g 0,10 0,30
100 g 0,15 0,5
200 g 0,30 1,0
500 g 0,75 2,5
1 kg 1,5 5
2 kg 3,0 10
Tabla continuacin.
Calse E 2 Clase F 2
Valor nominal
Tolerancia en r mg Tolerancia en r mg
5 kg 7,5 25
Estas pesas deben recalibrarse peridicamente La calibracin de las balanzas mediante pesas
por comparacin con pesas patrones trazables al patrones externas debe realizarse por lo menos
kilogramo Patrn del Bureau International des una vez al ao, incluyendo ensayos de
Poids et Mesures (BIPM) de Svres, Pars. Este excentricidad (no aplicable a balanzas de platillo
Patrn consiste en un cilindro de platino/iridio suspendido) y repetitividad, esta ltima con no
(90/10) de 39 mm de dimetro y 39 mm de altura, menos de diez valores.
con una densidad de 21,5 g/cm3. La recalibracin Las pesas patrones a emplear dependern de la
se debe realizar con una periodicidad de 2 a 7 sensibilidad de la balanza y la cantidad no ser
aos dependiendo del manipuleo, las condiciones menor de siete, debiendo abarcar necesariamente
de conservacin y la frecuencia de uso. los valores de pesada que se realicen en dicha
balanza.
[NOTA: Las balanzas deber ser instaladas de manera tal de evitar las vibraciones y/o oscilaciones].
700. POLAROGRAFIA
La polarografa es un mtodo electroqumico la superficie del microelectrodo, para que esto
que proporciona informacin cualitativa y ocurra es necesaria la presencia de una elevada
cuantitativa de sustancias electro-reducibles y concentracin de electrolito soporte, inerte dentro
electro-oxidables, basado en la medicin del flujo del intervalo de potencial empleado para el ensayo.
de corriente resultante de la electrlisis de una La reaccin del electrolito soporte por aumento del
solucin en un microelectrodo polarizable, en potencial causa el incremento final de la corriente,
funcin del voltaje aplicado. El intervalo de observada en los polarogramas.
concentraciones para las sustancias que se analizan En el caso del EGM, la superficie del electrodo
es de 10-2 a 10-5 M. se renueva constantemente en forma cclica, por lo
Esta medicin puede realizarse por polarografa que la corriente aumenta de un valor pequeo
de corriente directa o de pulsos. A menos que se cuando la gota comienza a formarse hasta alcanzar
especifique de otro modo, emplear la tcnica de un valor mximo cuando la gota cae. Mediante el
corriente directa: empleo de un registrador apropiado para medir la
POLAROGRAFIA DE CORRIENTE corriente, se obtiene el registro polarogrfico
DIRECTA caracterstico con perfil de diente de sierra. La
corriente limitante es la suma de la corriente
En la polarografa de corriente directa residual y de difusin. La corriente residual se resta
convencional, la corriente se mide continuamente a la corriente limitante para obtener la altura de la
mientras se aplica un potencial variable en forma onda. Los cambios en las corrientes de difusin y
lineal. Esta corriente se compone de dos elementos: capacitiva, segn la variacin del tamao de la gota,
el primero es la corriente de difusin, producida por producen las oscilaciones en los polarogramas
la sustancia que experimenta la reduccin u tpicos.
oxidacin en el electrodo de trabajo y que es La relacin lineal entre la corriente de difusin,
directamente proporcional a la concentracin de i d , y la concentracin de especies electro-activas
esta sustancia; y el segundo es la corriente est dada por la ecuacin de Ilkovic:
capacitiva, relacionada con la carga de la doble
capa electroqumica. id 708nD1 2 m 2 3t 1 6 c
Un polargrafo emplea un electrodo de goteo de
mercurio (EGM) capaz de proporcionar un flujo en la cual i d es la corriente mxima en
constante de pequeas gotas de mercurio, de microamperios, n es el nmero de electrones
tamao reproducible, que fluyen del orificio de un requeridos por molcula de sustancia electroactiva,
tubo capilar conectado a un reservorio de mercurio, D es el coeficiente de difusin en cm2 por segundo,
y un electrodo de referencia, generalmente de m es la velocidad de flujo de mercurio del EGM en
calomel saturado (ECS), el cual debe ser de mg por segundo, t es el tiempo de cada de la gota
superficie grande. en segundos y c es la concentracin del analito en
Al aplicar el voltaje inicial, se observa el flujo milimoles por litro.
de una muy pequea corriente residual; a medida Los polargrafos modernos, capaces de efectuar
que el voltaje aplicado vara; dicho flujo presenta polarografa por muestreo, estn equipados con
mnimas variaciones, hasta que la sustancia bajo registradores para determinar la corriente durante la
valoracin experimenta la reduccin u oxidacin. ltima porcin de la vida de la gota, registrando
Al principio la corriente aumenta gradualmente y slo las corrientes mximas y evitando las
luego lo hace de manera casi lineal con el voltaje oscilaciones debidas al crecimiento de la gota.
hasta alcanzar un valor limitante. En la porcin Para aparatos en los que la corriente se mide con
ascendente inicial de la onda polarogrfica, el galvanmetros, las ondas con perfil de diente de
aumento del flujo de corriente se corresponde con sierra corresponden a oscilaciones cercanas a la
una disminucin de la concentracin de las especies corriente promedio, mientras que si se emplean
electroactivas en la superficie del electrodo. A registradores que operan en modo amortiguado, la
medida que el voltaje y la corriente crecen, la medida de la corriente es el promedio de las
concentracin de las especies reactivas disminuye oscilaciones. Para los polarogramas obtenidos de
an ms hasta alcanzar un valor mnimo en la esta manera, la i d , dada por la ecuacin de Ilkovic
superficie del electrodo. La corriente est limitada es la corriente promedio en microamperios
por la velocidad a la cual las especies reaccionantes observada durante la vida de la gota, cuando el
pueden difundir desde el seno de la solucin hasta coeficiente 708 es reemplazado por 607.
Potencial de media-onda - El potencial de Comenzar el goteo de mercurio desde el capilar,
media-onda (E 1/2 ) corresponde, en el polarograma, insertar el capilar en la solucin muestra y ajustar la
al punto medio de la distancia entre la corriente altura del reservorio de mercurio. Modificar el
residual y la meseta de la corriente limitante. Este flujo de nitrgeno de modo que pase sobre la
potencial es por lo general independiente de la superficie de la solucin, a fin de que la misma est
concentracin del analito o del capilar empleado libre de vibraciones durante el tiempo en que se
para obtener la onda, siendo caracterstico de las registra la onda. Registrar el polarograma en el
especies electroactivas, por lo que sirve como intervalo de potencial indicado en la monografa
criterio de identificacin de una sustancia. El E 1/2 correspondiente, empleando un registrador o un
depende de la composicin de la solucin y puede galvanmetro de sensibilidad apropiada para
cambiar con variaciones en el pH o en el sistema de obtener una onda apropiada. Medir la altura de la
solventes, o con el agregado de agentes onda y, a menos que se especifique de otro modo en
complejantes. la monografa correspondiente, comparar sta con
A menos que se especifique de otro modo, el la altura de la onda obtenida con la Sustancia de
potencial del EGM es igual al voltaje aplicado referencia correspondiente, medida bajo las mismas
frente al ECS, luego de realizar la correccin por la condiciones.
cada hmica, iR (el potencial necesario para pasar
POLAROGRAFA DE PULSOS
la corriente, i, a travs de una solucin con una
resistencia R). Es especialmente importante hacer En la polarografia de pulso normal, se aplica un
esta correccin para soluciones no acuosas que pulso de potencial al electrodo de mercurio cerca
poseen alta resistencia. del final de la vida de la gota. A cada gota
siguiente se le aplica un pulso ligeramente mayor,
Medicin de la altura de la onda (ver Figura)
con una velocidad de incremento-determinada por
- Para fines cuantitativos, es necesario determinar la velocidad de barrido seleccionada. La corriente
la altura de la onda polarogrfica. Ya que sta es un se mide al trmino del pulso, representando
ndice de la magnitud de la corriente de difusin i d ,
principalmente la corriente de difusin, ya que en
se mide verticalmente, compensado la corriente
esas condiciones la corriente capacitiva es casi nula.
residual, por extrapolacin del segmento de la curva
La aplicacin de pulsos cortos permite una
que precede a la onda hasta ms all del ascenso en
sensibilidad aproximadamente diez veces mayor
la misma. Para una onda bien formada donde esta que la polarografa de corriente directa y la
extrapolacin es paralela a la meseta de la corriente corriente limitante se mide con mayor facilidad, ya
limitante, la medicin no es ambigua. Para ondas
que las ondas estn exentas de oscilaciones.
no muy bien definidas, puede emplearse el siguiente
procedimiento a menos que se especifique de otro La polarografa de pulso diferencial es una
modo en la monografa correspondiente. Tanto la tcnica mediante la cual un pulso de altura fija
corriente residual como la corriente limitante se aplicado al final de la vida de cada gota se
extrapolan con lneas rectas. La altura de la onda se superpone a una rampa de incremento lineal de
toma como la distancia vertical entre estas lneas corriente directa. El flujo de corriente se mide justo
medidas a nivel del potencial de media-onda. antes de la aplicacin del pulso. La diferencia entre
estas dos corrientes se mide y se representa en el
Precaucin - El mercurio metlico tiene una registrador; dicha seal diferencial proporciona una
presin de vapor importante a temperatura curva que se aproxima a la derivada de la onda
ambiente; por lo tanto, el rea de trabajo debe
polarogrfica, con pico cuyo potencial mximo es
construirse de modo que cualquier salpicadura o
equivalente a:
gota derramada puedan recuperarse
completamente con relativa facilidad. Limpiar el (1 2 '( 2
mercurio despus de cada empleo del aparato.
donde 'E es la altura del pulso. La altura del pico
Procedimiento - Transferir una porcin de la es directamente proporcional a la concentracin a
dilucin final de la muestra a una celda velocidades de barrido y alturas de pulso constante.
polarogrfica apropiada, inmersa en un bao de Esta tcnica es muy sensible (pueden determinarse
agua regulado a 25,0 0,5 C. Pasar una corriente concentraciones del orden de 10-7 M) y proporciona
de nitrgeno a travs de la solucin durante 10 a mejor resolucin entre ondas poco espaciadas.
15 minutos para eliminar el oxgeno disuelto.
Figura. Medicin de la altura de la onda.
710. SALES DE BASES ORGNICAS NITROGENADAS
Solucin estndar - A menos que se tercera ampolla de decantacin cuidadosamente y
especifique de otro modo en la monografa descartar la fase acuosa. La fase etrea se
correspondiente, preparar una solucin en cido identifica como E2. Lavar la fase etrea E1 con
sulfrico diluido (1 en 70) que contenga en cada 20 ml de agua, separar la fase acuosa y emplear
ml, aproximadamente 500 g de la Sustancia de esta ltima para lavar la fase etrea E2. Separar y
referencia especificada, calculada sobre la descartar el agua. Extraer cada una de las dos
sustancia anhidra y exactamente pesada. fases etreas, E1 y E2, con porciones de 20; 20 y
Solucin muestra - Si la forma farmacutica 5 ml de cido sulfrico diluido (1 en 70) en ese
es un comprimido, pesar y reducir a polvo fino no orden, pero extrayendo cada vez primero la fase
menos de veinte unidades. Pesar exactamente una etrea E2 de la tercera ampolla de decantacin y
porcin del polvo, equivalente a 25 mg del despus la fase etrea E1 de la segunda ampolla
principio activo, y transferirla a una ampolla de de decantacin. Combinar los extractos cidos en
decantacin de 125 ml. Si la forma farmacutica un matraz aforado de 50 ml, diluir volumen con
es lquida, transferir un volumen de la misma cido y mezclar. Esta fraccin constituye la
exactamente medido, equivalente a 25 mg del Solucin muestra. [NOTA: el ter puede
principio activo, a una ampolla de decantacin de sustituirse por hexano o heptano si esto mejora la
125 ml. extraccin].
Agregar 20 ml de cido sulfrico diluido Procedimiento - A menos que se especifique
(1 en 350) a la ampolla de decantacin y agitar de otro modo en la monografa correspondiente,
durante 5 minutos. Agregar 20 ml de ter, agitar transferir 5,0 ml de la Solucin estndar y 5,0 ml
cuidadosamente, filtrar la fase cida y transferirla de la Solucin muestra a sendos matraces
a una segunda ampolla de decantacin de 125 ml. aforados de 100 ml y completar a volumen con
Agitar la fase etrea con dos porciones de 10 ml cido sulfrico diluido (1 en 70). Determinar la
de cido sulfrico diluido (1 en 350), filtrar cada absorbancia de cada solucin en celdas de 1 cm, a
porcin de cido en la segunda ampolla de la longitud de onda especificada con un
decantacin que contiene la fase cida y descartar espectrofotmetro apropiado, empleando cido
el ter. Agregar al extracto cido 10 ml de sulfrico diluido (1 en 70) como blanco. Designar
hidrxido de sodio (SR) y 50 ml de ter, agitar la absorbancia de la solucin obtenida a partir de
cuidadosamente y separar ambas fases. La fase la Solucin estndar como A E y la obtenida a
etrea se identifica como E1. Transferir la fase partir de la Solucin muestra como A M . Calcular
acuosa a una tercera ampolla de decantacin de el resultado de la valoracin segn se especifica
125 ml que contenga 50 ml de ter. Agitar la en la monografa correspondiente.
720. TERMOMETROS
Para seleccionar un termmetro, deben considerarse Los lmites inferior y superior del intervalo de
las condiciones bajo las cuales habr de emplearse. temperatura especificado en las Tablas deben
En la Tabla 1, Tabla 2 y Tabla 3 se especifican las considerarse incluidos en el intervalo.
caractersticas de algunos termmetros tiles para
los ensayos farmacopeicos.
100 ! 10
menos de nueve de las diez unidades de
A P dosificacin determinada empleando el mtodo de
Si, Uniformidad de peso o Uniformidad de contenido
A se encuentra dentro del intervalo de 85,0 a 115,0 %
el empleo de un factor de correccin no es vlido. del valor declarado, ninguna unidad est fuera del
(5) Una correccin vlida puede aplicarse slo si intervalo de 75,0 a 125,0 % del valor declarado y la
F no es menor de 1,030 ni mayor de 1,100 o no desviacin estndar relativa es menor o igual a
menor de 0,900 ni mayor de 0,970. Si F est 6,0 %.
comprendido entre 0,970 y 1,030 no se requiere Si dos o tres unidades de dosificacin estn
ninguna correccin. fuera del intervalo de 85,0 a 115,0 % del valor
(6) Si F se encuentra entre 1,030 y 1,100 o entre declarado, pero no fuera del intervalo de 75,0 a
0,900 y 0,970; calcular el peso de principio activo 125,0 % del valor declarado, si la desviacin
en cada unidad de dosificacin, multiplicando cada estndar relativa es mayor a 6,0 % o si ambas
uno de los pesos hallados empleando el condiciones prevalecen, ensayar veinte unidades
Procedimiento especial para uniformidad de adicionales. Los requisitos se cumplen si no ms de
contenido especificado en la monografa tres unidades de las treinta unidades de dosificacin
correspondiente por el factor F. estn fuera del intervalo de, 85,0 a 115,0 % del
valor declarado, ninguna unidad est fuera del
Criterios
intervalo de 75,0 a 125,0 % del valor declarado y la
Aplicar los siguientes criterios, a menos que se desviacin estndar relativa no es mayor a 7,8 %.
especifique de otro modo en la monografa AEROSOLES DOSIFICADORES - [NOTA: una
correspondiente. unidad de dosificacin se define como el lquido
obtenido accionando la vlvula, tantas veces como (B) Si el promedio de los lmites especificados
se indique en el rtulo, para obtener la dosis en la definicin de concentracin o potencia de
recomendada. Seguir las indicaciones de uso cada producto en la monografa correspondiente es
indicadas en el rtulo. Para la obtencin de la mayor de 100,0 %.
unidad de dosificacin del inhalador, proceder (1) Si el valor del promedio de las unidades de
segn se indica en el ensayo para Uniformidad de dosificacin ensayadas es mayor o igual al
contenido de la dosis en 390. Ensayos promedio de los lmites especificados en la
farmacuticos para aerosoles.] A menos que se definicin de potencia en la monografa
especifique de otro modo en la monografa correspondiente, los requisitos son los descriptos en
correspondiente, los requisitos para la uniformidad (A), excepto que las palabras valor declarado se
se cumplen si la cantidad de principio activo reemplazan por las palabras "valor declarado
liberado en no ms de una de las diez unidades de multiplicado por el promedio de los lmites
dosificacin, determinada segn el mtodo de especificados en la definicin de potencia en la
Uniformidad de contenido cae fuera del intervalo de monografa correspondiente dividido 100".
75,0 a 125,0 % del valor declarado y ninguna (2) Si el valor promedi de las unidades de
unidad est fuera del intervalo de 65,0 a 135,0 % dosificacin ensayadas est entre 100 % y el
del valor declarado. Si dos o tres unidades de promedio de los lmites especificados en la
dosificacin se encuentran fuera del intervalo de definicin de potencia en la monografa
75,0 a 125,0 % del valor declarado, pero no fuera correspondiente, los requisitos son los descriptos en
del intervalo de 65,0 a 135,0 % del valor declarado, (A), excepto que las palabras valor declarado se
ensayar veinte unidades adicionales. Los requisitos reemplazan por las palabras "valor declarado
se cumplen si no ms de tres unidades de las treinta multiplicador por el valor promedio de las unidades
unidades de dosificacin estn fuera del intervalo de dosificacin ensayadas (expresado como
de 75,0 a 125,0 % del valor declarado y ninguna porcentaje del valor declarado) dividido 100".
unidad est fuera del intervalo de 65,0 a 135,0 %
del valor declarado.
750. VALORACIN DE ESTEROIDES
Los siguientes procedimientos se aplican a la sustancia fluorescente apropiada con 65 ml de una
determinacin de esteroides codificados en la mezcla de agua y alcohol (5:2). Extender la mezcla
Farmacopea que poseen grupos funcionales a una placa, de 20 cm u 20 cm hasta obtener una
reductores, como por ejemplo -cetoles. A menos capa uniforme de 0,25 mm de espesor y dejar secar
que se especifique de otro modo en la monografa a temperatura ambiente durante 15 minutos.
correspondiente, emplear el mtodo de Valoracin Activar la placa a 105 C durante 1 hora y
directa. almacenar en un desecador.
VALORACIN DIRECTA Fase mvil A - Cloruro de metileno y metanol
(45:4).
Solucin estndar - Disolver en alcohol una Fase mvil B - Cloroformo y acetona (4:1).
cantidad apropiada de la Sustancia de referencia Solucin estndar - Disolver una cantidad
especificada en la monografa correspondiente, apropiada de la Sustancia de referencia
previamente secada bajo las condiciones especificada en la monografa correspondiente,
especificadas y exactamente pesada. Diluir previamente secada y exactamente pesada, en una
cuantitativamente y en etapas con alcohol hasta mezcla de cloroformo y alcohol (50:50), hasta
obtener una solucin con una concentracin obtener una solucin con una concentracin
conocida de aproximadamente 10 g por ml. conocida de aproximadamente 2 mg por ml.
Transferir 20 ml de esta solucin a un erlenmeyer Solucin muestra - Proceder segn se
de 50 ml con tapn de vidrio. especifique en la monografa correspondiente.
Solucin muestra - Proceder segn se Procedimiento - Dividir la placa cromatogrfica
especifique en la monografa correspondiente. en tres secciones iguales; las secciones laterales se
Procedimiento - Agregar a cada uno de los dos emplearn para aplicar la Solucin muestra y la
erlenmeyer que contienen la Solucin muestra y la Solucin estndar, respectivamente. En la seccin
Solucin estndar y a un erlenmeyer similar que central se aplicar el blanco. Aplicar 200 1 de la
contiene 20,0 ml de alcohol que se emplear como Solucin muestra y 200 1 de Solucin estndar en
blanco, 2,0 ml de una solucin preparada bandas, a una distancia de 2,5 cm del borde de la
disolviendo 50 mg de azul de tetrazolio en 10 ml de placa, en la seccin correspondiente. Secar con la
metanol, y mezclar. Agregar 2,0 ml de una mezcla ayuda de una corriente de aire, sin calentar.
de alcohol e hidrxido de tetrametilamonio (SR) Empleando la Fase mvil especificada en la
(9:1) a cada erlenmeyer, mezclar y dejar reposar en monografa correspondiente, desarrollar la placa
la oscuridad durante exactamente 90 minutos. hasta que el frente del solvente haya corrido
Determinar las absorbancias de las soluciones aproximadamente 15 cm por encima de la zona de
obtenidas partir de la Solucin muestra y la siembra. Retirar la placa de la cmara, marcar el
Solucin estndar en celdas de 1 cm, a 525 nm, con frente del solvente y dejar evaporar. Examinar la
un espectrofotmetro apropiado, contra el blanco. placa bajo luz ultravioleta y marcar la banda
Calcular la cantidad de sustancia valorada principal en la seccin de la placa correspondiente a
empleando la frmula indicada en la monografa la Solucin estndar. Marcar tambin las bandas
correspondiente, en la cual C es la concentracin; correspondientes en las secciones de la Solucin
en g por ml, de la Solucin estndar y A M y A E muestra y del blanco de la placa. Retirar el gel de
son las absorbancias de las soluciones obtenidas a slice de cada banda por separado y transferirlo a
partir de la Solucin muestra y la Solucin sendos tubos de centrfuga de 50 ml con tapa de
estndar, respectivamente. vidrio. A cada tubo agregar 25,0 ml de alcohol y
VALORACIN DE UN ESTEROIDE agitar durante 2 minutos. Centrifugar durante
AISLADO PREVIAMENTE 5 minutos, transferir 20 ml de la solucin
sobrenadante de cada tubo a un erlenmeyer de
En el siguiente procedimiento, el esteroide a 50 ml con tapa de vidrio, agregar 2,0 ml de una
valorar es separado de los esteroides relacionados y solucin preparada disolviendo 50 mg de azul de
excipientes por cromatografa en capa delgada y tetrazolio en 10 ml de metanol y mezclar. Proceder
valorado luego empleando el mtodo descrito segn se indica en el Procedimiento en Valoracin
anteriormente. Emplear este mtodo cuando se directa, comenzando donde dice: "Agregar 2,0 ml
especifique en la monografa correspondiente. de una mezcla... ".
Preparacin de la placa - Preparar una mezcla
de 30 g de gel de slice para cromatografa y una
760. VALORACIN IODOMTRICA DE ANTIBITICOS
BETALACTMICOS
Solucin estndar - Disolver una cantidad de la 0,01 N (SV). Agregar antes del punto final 1 gota
Sustancia de referencia especificada en la de ioduro-almidn (SR) y continuar la titulacin
monografa correspondiente, previamente secada y hasta que el color azul desaparezca.
exactamente pesada, en el solvente especificado en Titulacin del blanco - Agregar 10,0 ml de iodo
la Tabla. Diluir cuantitativamente y en etapas con 0,01 N (SV) a un erlenmeyer que contenga 2,0 ml
el mismo solvente hasta obtener una solucin con de la Solucin estndar. Si la Solucin estndar
una concentracin conocida aproximada a la contiene amoxicilina o ampicilina, agregar de
especificada en la Tabla. Transferir 2,0 ml de esta inmediato 0,1 ml de cido clorhdrico 1,2 N.
solucin a cada uno de dos erlenmeyers con tapn Seguidamente, titular con tiosulfato de sodio
de vidrio de 125 ml. 0,01 N (SV). Agregar antes del punto final 1 gota
Solucin muestra - A menos que se especifique de ioduro-almidn (SR) y continuar la titulacin
de otro modo en la monografa correspondiente, hasta que el color azul desaparezca. Proceder de
disolver una cantidad de muestra, exactamente forma similar con 2,0 ml de la Solucin muestra.
pesada, en el solvente especificado en la Tabla. Clculos - Determinar los g o unidades, F,
Diluir cuantitativamente con el mismo solvente equivalentes a cada ml de tiosulfato de sodio 0,01 N
hasta obtener una solucin con una concentracin empleados para titular la Solucin estndar, por la
final conocida aproximada a la especificada en la frmula siguiente:
Tabla. Transferir 2,0 ml de esta solucin a cada
uno de dos erlenmeyers con tapn de vidrio de 2CM / B 1
125 ml. en la cual C es la concentracin, en mg por ml, de
Procedimiento - Sustancia de referencia en la Solucin estndar, M
Inactivacin y titulacin - Agregar a 2,0 ml de es la potencia, en g por mg o unidades, de la
la Solucin estndar y a 2,0 ml de la Solucin Sustancia de referencia, B es el volumen, en ml, de
muestra, 2,0 ml de hidrxido de sodio 1,0 N, tiosulfato de sodio 0,01 N empleado en la
mezclar por rotacin y dejar en reposo durante Titulacin del blanco e I es el volumen, en ml, de
15 minutos. Agregar a cada erlenmeyer 2,0 ml de tiosulfato de sodio 0,01 N empleado en la
cido clorhdrico 1,2 N y 10,0 ml de iodo Inactivacin y titulacin. Calcular la potencia de la
0,01 N (SV). Tapar de inmediato y dejar reposar muestra por la frmula dada en la monografa
durante 15 minutos. Titular con tiosulfato de sodio correspondiente.
Donde P 1 P 2 P 3 y M 1 M 2 M 3
Frmulas para efectuar el ANOVA para el modelo de rectas paralelas con d dosis de cada preparacin.
nPS PT ...
2
n 12n
Hp HL K
d d3 d hd
Frmulas para clculo de Suma de Cuadrados y grados de libertad.
Grados de libertad Suma de cuadrados
Fuentes de variacin
(g) (SC)
Preparaciones h1 SC prep =H P (P S 2 P T 2) K
TOTAL h d 2 SCtot . y y
2
(*) No se calcula para el diseo completamente aleatorizado. R es la media de respuestas para cada bloque o fila.
(**) Solo se calcula para el diseo cuadrado latino.
El cuadrado medio de cada una de las fuentes de variacin se calcula como el cociente entre la Suma de Cuadrados (SC) y
sus correspondientes grados de libertad.
P SC reg
I Log 2 LogP2 LogP1 V
P1 b 2 dn
H L LS LT ... SC reg .
b C
Inh SC reg . s 2 u t 2
PT PS
M 'T c
M Sup C u M Tc C 1C u M Tc 2uV
db
c
M Inf C u M Tc C 1C u M Tc 2uV
R anti log M 'T Rinf anti log M 'inf
ANOVA
Modelo de Rectas Paralelas
Desv. Paralelismo= SI
Signif.
NO
Regresin = NO
Signif.
SI
Desv. Linealidad = SI
Signif.
NO
NO
SI
Descartar placa SI Dif. e/ Bloques =
anmala Signif.
NO
Aceptar el ensayo y el Repetir el ensayo y Rechazar
clculo de potencia ajustar la Pot. supuesta el ensayo
Curva Dosis-Respuesta:
Donde P 1 P 2 P d
Total d n 1 SCtotal Y 2
G2 / N
S xy
X T n x T
i i i i i
n x n x
2 2
i i i i
S xx
N
Glosario
A-B--N: Rplicas o bloques segn corresponda al diseo estadstico.
b : Pendiente de la regresin lineal en los logaritmos de las dosis.
C: Estadstico empleado para el clculo de los Intervalos de Confianza
CM: Cuadrado medio: cociente entre la Suma de Cuadrados de la fuente de variacin y sus grados de libertad.
d: Nmero de niveles de dosis para cada preparacin.
dh: Nmero total de tratamientos en la valoracin.
F: Estadstico a comparar con el valor tabulado en tablas de distribucin F de Ficher para los grados de libertad
correspondientes al numerador y denominador del estadstico F calculado.
s s2
S 1 ,,S n : Respuesta media para cada preparacin de Estndar.
s2: Estimador de la varianza por el Cuadrado Medio del Error en el ANOVA.
t: Estadstico de Student.
T 1 ,,T n : Respuesta media para cada preparacin muestra.
T i : Sumatoria de respuestas para la dosis i en curva dosis-respuesta.
V: Coeficiente de la Varianza para el clculo de los lmites de confianza.
x: Logaritmo de la dosis.
y: Respuesta individual o su transformacin.
Tabla 1. Preparacin de soluciones madre y diluciones de ensayo de Sustancias de referencia
Antibitico y tipo de
Solvente inicial (y concentracin Dosis intermedia
valoracin [Difusin Concentracin Perodo de
inicial en donde se especifique); Diluyente final (Pg de actividad o
en placa (DP) final por ml uso
diluyente adicional, si es diferente Unidades por ml)
o Turbidimtrico (T)]
Amikacina (T) Agua 1 mg 14 das Agua 10 Pg
Anfotericina B (DP) Dimetilsulfxido 1 mg Mismo da B. 10 1,0 Pg
Bacitracina cinc (DP) cido clorhdrico 0,01 N 100 U Mismo da B. 1 1,0 U
Bleomicina (DP) B. 16 2U 14 das B. 16 0,04 U
Candicidina (T) Dimetilsulfxido 1 mg Mismo da Agua 0,06 Pg
Capreomicina (T) Agua 1 mg 7 das Agua 100 Pg
Carbenicilina (DP) B. 1 1 mg 14 das B. 1 20 Pg
Cefalotina (DP) B. 1 1 mg 5 das B. 1 1,0 Pg
Cicloserina (T) Agua 1 mg 30 das Agua 50 Pg
Cloranfenicol (T) Alcohol (10 mg/ml); [Agua] 1 mg 30 das Agua 2,5 Pg
Clortetraciclina (T) cido clorhdrico 0,01 N 1 mg 4 das Agua 0,06 Pg
Cloxacilina (DP) B. 1 1 mg 7 das B. 1 5,0 Pg
Colistimetato sdico (DP) Agua (10 mg/ml); [B. 6] 1 mg Mismo da B. 6 1,0 Pg
Colistina (DP) Agua (10 mg/ml); [B. 6] 1 mg 14 das B. 6 1,0 Pg
Democlociclina (T) cido clorhdrico 0,1 N 1 mg 4 das Agua 0,1 Pg
Dihidroestreptomicina (DP) B. 3 1 mg 30 das B. 3 1,0 Pg
Dihidroestreptomicina (T) Agua 1 mg 30 das Agua 30 Pg
Doxiciclina (T) cido clorhdrico 0,1 N 1 mg 5 das Agua 0,1 Pg
Eritromicina (DP) Metanol (10 mg/ml); [B. 3] 1 mg 14 das B. 3 1,0 Pg
Estreptomicina (T) agua 1 mg 30 das Agua 30 Pg
Tabla 1. - continuacin. Preparacin de soluciones madre y diluciones de ensayo de Sustancias de referencia.
Antibitico y tipo de
Solvente inicial (y concentracin Dosis intermedia
valoracin [Difusin Concentracin Perodo de
inicial en donde se especifique); Diluyente final (Pg de actividad o
en placa (DP) final por ml uso
diluyente adicional, si es diferente Unidades por ml)
o Turbidimtrico (T)]
Gentamicina (DP) B. 3 1 mg 30 da B. 3 0,1 Pg
Gramicidina (T) Alcohol al 95 % 1 mg 30 das Alcohol al 95 % 0,04 Pg
Kanamicina (T) Agua 1 mg 30 das Agua 10,0 Pg
Metaciclina (T) Agua 1 mg 7 das Agua 0,06 Pg
Nafcilina(DP) B. 1 1 mg 2 das B. 1 2,0 Pg
Natamicina (DP) Dimetilsulfxido 1 mg Mismo da B. 10 5,00 Pg
Neomicina (DP) B. 3 1 mg 14 das B. 3 1,0 Pg
Neomicina (T) B. 3 100 Pg 14 das B. 3 1,0 Pg
Netilmicina (DP) B. 3 1 mg 7 das B. 3 0,1 Pg
Nistatina (DP) Dimetilformamida 1.000 U Mismo da B. 6 20 U
Novobiocina (DP) Alcohol (10 mg/ml); [B. 3] 1 mg 5 das B. 6 0,5 Pg
Oxitetraciclina (T) cido clorhdrico 0,1 N 1 mg 4 das Agua 0,24 Pg
Paromomicina (DP) B. 3 1 mg 21 das B. 3 1,0 Pg
Penicilina G (DP) [B. 1] 1.000 U 4 das B. 1 1,0 Ug
Polimixina B (DP) Agua; B. 6 10.000 U 14 das B. 6 10 Ug
Rolitetraciclina (T) Agua 1 mg 1 da Agua 0,24 Pg
Sisomicina (DP) B. 3 1 mg 14 das B. 3 0,1 Pg
Tetraciclina (T) cido clorhdrico 0,1 N 1 mg 1 da Agua 0,24 Pg
Ticarcilina (DP) B. 1 1 mg 1 da B. 1 5,0 Pg
Tobramicina (T) Agua 1 mg 14 das Agua 2,5 Pg
Solucin madre Solucin muestra
Antibitico y tipo de
Solvente inicial (y concentracin Dosis intermedia
valoracin [Difusin Concentracin Perodo de
inicial en donde se especifique); Diluyente final (Pg de actividad o
en placa (DP) final por ml uso
diluyente adicional, si es diferente Unidades por ml)
o Turbidimtrico (T)]
Troleandomicina (T) Alcohol isoproplico-agua (4:1) 1 mg Mismo da Agua 25 Pg
Vancomicina (DP) Agua 1 mg 7 das B. 4 10 Pg
NOTAS -
B indica solucin reguladora y el nmero siguiente se refiere a las soluciones reguladoras de fosfato de potasio definidas en este captulo.
Para anfotericina B, colistimetato sdico y nistatina, preparar las soluciones de la Sustancia de referencia y la Solucin muestra simultneamente.
Para anfotericina B, diluir adicionalmente la Solucin madre con dimetilsulfxido hasta obtener una serie de soluciones cuya concentracin intermedia sea de
20 Pg por ml antes de hacer las soluciones muestra. La Solucin muestra debe contener la misma cantidad de dimetilsulfxido que las soluciones de la
Sustancia de referencia.
Para bacitracina cinc, cada una de las diluciones del estndar debe contener la misma cantidad de cido clorhdrico que la Solucin muestra.
Para la valoracin turbidimtrica de neomicina, diluir la Solucin madre de 100 Pg por ml cuantitativamente con Solucin reguladora N 3 hasta obtener una
solucin que tenga una concentracin equivalente a 25,0 Pg de neomicina por ml. Para cada Solucin muestra agregar 5,0 ml de cido clorhdrico 0,01 N a
cada matraz aforado, diluir a volumen con Solucin reguladora N3 y mezclar para obtener una serie de soluciones cuya concentracin intermedia sea de
1,0 g de neomicina por ml.
Para nistatina, diluir adicionalmente la Solucin madre con dimetilformamida hasta obtener una concentracin intermedia de 400 Unidades por ml antes de
hacer las Soluciones muestra. Las Soluciones muestra deben contener la misma cantidad de dimetilformamida que las Soluciones estndar. Emplear material
inactnico de vidrio.
Para Polimixina B, preparar la Solucin madre mediante el agregado de 2 ml de agua por cada 5 mg de Sustancia de referencia.
Tabla 2. Organismos de ensayo para antibiticos valorados segn el procedimiento indicado en la Tabla 1.
Antibitico Organismo de Ensayo Nmero ATCC *
American Type Culture Collection, 12.301 Parklawn drive, Rockville, MD 20852, EEUU.
Pueden emplearse tambin otras cepas de coleccin de caractersticas equivalentes, como ser:
NCTC (National Collection of Type Cultures), Central Publish Health Laboratory, Colindone Av, London NW
95HT, Inglaterra.
NCYC (National Collection of Yeast Cultures), Brewing Industry Research Fundation, Nutfield, Redhill RH 14
HY, Surrey, Inglaterra.
NCIB (National Collection of Industry Bacteria), Torry Research Station, PO Box 31, 135 AbbeyRoad,
Aberdeen AB) 8 DG, Escocia.
Tabla 3. Preparacin del inculo.
Condiciones de incubacin Condiciones para inocular el medio de cultivo
Organismo de ensayo y Tiempo Dilucin de la susp. Cantidad
Medio Temp. Medio Antibiticos analizados
N ATCC (horas) original (25 % T) (ml por 100 ml)
11 2 Paromomicina
1
Los solventes relativamente neutros de baja constante dielctrica como benceno, tolueno, cloroformo o dioxano pueden emplearse con cualquier solvente cido o bsico para aumentar la sensibilidad
del punto final.
2
En la solucin titulante.
Tabla 2. Sistemas de electrododos para titulaciones potenciomtricas.
Precipitimetra
(plata)
Plata E >
E q 0,0591 log Ag @ Calomel (con puente salino
de nitrato de potasio)
Titulacin con/de plata
incluyendo haluros o
tiocianatos
xido-reduccin Platino E E 0,0591 / n log >ox @/>red @ Calomel o Titulaciones con arsenito,
Plata/Cloruro de plata bromo, cerato, dicromato,
hexacianoferrato (III),
iodato, nitrito, permanganato
y tiosulfato
1
Forma apropiada de la ecuacin de Nernst que describe el sistema de electrodos indicado: k = constante del electrodo de vidrio; k = constante derivada del
equilibrio Hg-Hg (II)-EDTA; M = cualquier metal titulable con EDTA; [ox] y [red] de la ecuacin, ox + ne- l red.
2
La lista es representativa pero no es completa.
TEXTOS DE INFORMACIN GENERAL
TEXTOS DE INFORMACIN GENERAL
Ensayo biolgico para identidad y potencia - de masa debe comportase como una constante
Los mtodos para determinar la potencia de acotada dentro de lmites claramente especificados
productos biolgicos obtenidos por tcnicas de y autorizados. La actividad expresada por unidad
ADN recombinante son de fundamental de masa se denomina actividad especfica y
importancia, pues miden la actividad del producto. constituye un parmetro de identidad y/o pureza.
La actividad biolgica, expresada en unidades Esencialmente hay dos mtodos para cuantificar
internacionales, debe conservar una estricta relacin la actividad: Anlisis empleando un modelo animal
directa con la masa del producto. Esto significa que y Anlisis basados en cultivos de clulas. Para
el efecto biolgico medido (actividad) por unidad medir la masa se realizan Anlisis fisicoqumicos.
Cada uno de estos mtodos es de frecuente
aplicacin en el control de calidad de productos
biolgicos.
Anlisis empleando un modelo animal - Los
anlisis biomimticos en modelos animales han sido
empleados rutinariamente, desde hace mucho
tiempo, en el control de calidad de productos
biolgicos. A pesar de su larga historia, tienen una
serie de desventajas como la necesidad de un gran
nmero de animales de caractersticas definidas,
contar con instalaciones apropiadas y personal
debidamente capacitado para el manejo de los
animales, largo tiempo de anlisis (das semanas).
Se emplean en aquellos casos donde los anlisis
basados en cultivos de clulas o en mtodos
fisicoqumicos no dan resultados ms confiables
que los biomimticos. Se podrn emplear mtodos
fisicoqumicos cuando se especifique en la
monografa correspondiente.
La ventaja esencial de este tipo de mtodos
reside en que son los nicos capaces de reflejar
fielmente la integridad y apropiada disponibilidad
de la molcula biolgica para expresar el efecto
deseado.
Anlisis basados en cultivo de clulas (in vitro)
- Los anlisis basados en cultivo de clulas proveen
informacin sobre el efecto del producto biolgico
en un sistema vivo, pero pueden dar menos
informacin sobre el estado conformacional de la
molcula (integridad y reconocimiento por
receptores especficos) que cuando se utilizan
animales. El hecho que estos mtodos puedan ser
automatizados y que puedan ser repetidos un gran
nmero de veces permite obtener resultados
reproducibles.
Los bioanlisis basados en cultivo de clulas
pueden ser divididos en dos grupos:
a) Los que necesitan cultivos primarios, de
origen humano o animal.
b) Los que requieren lneas celulares en cultivo
continuo, como por ej., la medicin del efecto de
citoquinas, ya sea promoviendo la actividad celular
o bien inhibiendo la actividad o secrecin de otras
citoquinas.
Anlisis por mtodos fisicoqumicos - Este
grupo de anlisis no se basa en un modelo vivo sino
que, generalmente, tienen en cuenta la accin
qumica de un producto biolgico. Estos mtodos
son comparativamente simples, rpidos, precisos y
exactos. Otra ventaja de este tipo de anlisis, por su
precisin y exactitud, es que pueden ser empleados
para proveer resultados confiables de la estabilidad
del producto. La principal desventaja de estos
mtodos es que pueden ser insensibles a cambios en
la molcula, con la lgica divergencia con la
actividad en sistemas biolgicos.
1130. VALIDACIN DE MTODOS ANALTICOS
Las buenas prcticas de fabricacin y control pureza conocida (como por ej., una Sustancia de
requieren que los mtodos analticos empleados referencia) o por comparacin de los resultados del
para evaluar las especificaciones establecidas sean mtodo analtico propuesto con los de otro mtodo
apropiados. cuya exactitud haya sido establecida.
En el caso de la valoracin de una sustancia en
PRESENTACIONES DE MTODOS
un producto farmacutico, la exactitud puede
ANALTICOS
determinarse mediante la aplicacin del mtodo
Las presentaciones de mtodos analticos analtico a mezclas preparadas con todos los
nuevos o revisados deben contener suficiente componentes del producto a las cuales se les ha
informacin para permitir la evaluacin de los agregado cantidades conocidas del analito dentro
procedimientos propuestos. La informacin puede del intervalo del mtodo.
variar segn el tipo de valoracin empleada. Sin Si no es posible obtener muestras de todos los
embargo, en la mayora de los casos una componentes del producto, puede ser aceptable
presentacin constar de las siguientes secciones. agregar cantidades conocidas del analito al producto
Justificacin - Esta seccin debe identificar la o comparar los resultados obtenidos con un segundo
necesidad y las ventajas del mtodo propuesto. mtodo cuya exactitud haya sido establecida.
Para mtodos revisados, debe proporcionarse una En el caso del anlisis cuantitativo de
comparacin de las limitaciones del mtodo vigente impurezas, la exactitud debe evaluarse sobre
en los libros oficiales y las ventajas ofrecidas por el muestras (sustancia o producto farmacutico) a las
mtodo propuesto. que se les han agregado cantidades conocidas de
Mtodo analtico propuesto - Esta seccin debe impurezas. Si es imposible obtener muestras de las
contener la descripcin completa y suficientemente impurezas y/o los productos de degradacin, es
detallada del mtodo analtico para permitir que aceptable comparar los resultados obtenidos por un
personas capacitadas puedan repetirlo. La mtodo independiente (mtodo farmacopeico u otro
redaccin debe incluir todos los parmetros mtodo analtico validado). En ausencia de otra
operativos importantes e indicaciones especficas, informacin, puede ser necesario calcular la
como por ej., la preparacin de reactivos, las cantidad de impureza comparando su respuesta con
condiciones de aptitud del sistema, descripcin de la respuesta de la sustancia, en estos casos debe
los blancos empleados, precauciones y frmulas emplearse el factor de respuesta si se conoce.
para calcular los resultados. La exactitud debe evaluarse empleando un
Datos - Esta seccin debe proporcionar mnimo de nueve determinaciones sobre un mnimo
documentacin detallada y completa de la de tres niveles de concentracin que cubran el
validacin del mtodo, incluyendo datos intervalo especificado (como por ej., tres
experimentales y clculos que fundamenten cada concentraciones/ tres repeticiones completas del
uno de los atributos estudiados. mtodo). La exactitud se calcula como el
ATRIBUTOS ANALTICOS porcentaje de recuperacin obtenido a partir de la
valoracin de una cantidad agregada conocida de
La validacin de un mtodo analtico es el analito en la muestra, o como la diferencia entre la
proceso por el cual se establece, por medio de media y el valor aceptado como verdadero junto
estudios de laboratorio, que un mtodo es apropiado con los intervalos de confianza.
para el uso propuesto. A continuacin se definen
cada uno de los atributos necesarios para validar un Precisin
mtodo analtico junto con una breve descripcin de Definicin - La precisin de un mtodo
cmo deben determinarse. analtico es el grado de concordancia entre los
resultados del ensayo individual cuando el mtodo
Exactitud se aplica repetidamente a varias alcuotas de una
Definicin - La exactitud de un mtodo muestra homognea. La precisin de un mtodo
analtico es la proximidad entre el resultado analtico, generalmente se expresa como la
obtenido y el valor real. La exactitud debe desviacin estndar o desviacin estndar relativa
establecerse en todo el intervalo especificado para (coeficiente de variacin) de una serie de
el mtodo analtico. mediciones. La precisin puede ser considerada en
Determinacin - En el caso de la valoracin de tres niveles: repetibilidad, precisin intermedia y
una sustancia, la exactitud puede determinarse por reproducibilidad. La repetibilidad expresa la
la aplicacin del mtodo analtico a una muestra de precisin bajo las mismas condiciones operativas en
un intervalo de tiempo corto. La precisin En el caso del anlisis de impurezas, la
intermedia expresa las variaciones intralaboratorio: especificidad puede establecerse por el agregado de
diferentes das, diferentes analistas, diferentes cantidades apropiadas de impurezas a la sustancia o
equipos, etc. La reproducibilidad expresa la al producto farmacutico y demostrando que estas
precisin entre laboratorios (estudios impurezas son determinadas con la precisin y
colaborativos). exactitud necesarias.
Determinacin - La precisin de un mtodo En el caso de una valoracin, se debe demostrar
analtico se determina mediante el anlisis de un que el mtodo no se ve afectado por la presencia de
nmero suficiente de alcuotas de una muestra impurezas o excipientes. En la prctica, esto puede
homognea, lo que permite un clculo realizarse agregando, a la sustancia o al producto
estadsticamente vlido de la desviacin estndar o farmacutico, cantidades apropiadas de impurezas o
la desviacin estndar relativa. En este contexto, excipientes y demostrando que el resultado de la
las valoraciones son anlisis independientes que se valoracin no se ve afectado por la presencia de
llevan a cabo siguiendo el procedimiento analtico estos materiales extraos. Si no se dispone de los
completo desde la preparacin de la muestra hasta productos de degradacin o impurezas, la
el resultado final del ensayo. especificidad puede ser demostrada por
La repetibilidad puede evaluarse empleando un comparacin de los resultados del ensayo con
mnimo de nueve determinaciones que cubran el muestras que contienen impurezas o productos de
intervalo especificado para el mtodo (como por ej., degradacin a travs de un segundo mtodo
tres concentraciones/tres repeticiones de cada una) independiente (como por ej., mtodos
o un mnimo de seis determinaciones al 100 % del farmacopeicos u otro mtodo analtico validado).
valor declarado. Estas comparaciones deberan incluir muestras
almacenadas bajo condiciones exigentes: luz, calor,
Especificidad
Definicin - La especificidad es la capacidad de humedad, hidrlisis cido base y oxidacin. En el
un mtodo para evaluar inequvocamente al analito caso de valoraciones los dos resultados deberan
en presencia de los componentes que pueden estar compararse. En el caso de ensayos cromatogrficos
presentes, tales como impurezas, productos de para impurezas deberan compararse los perfiles
degradacin, componentes de la matriz, etc. La cromatogrficos.
falta de especificidad de un mtodo analtico puede Para mtodos cromatogrficos instrumentales,
ser compensada por otros procedimientos analticos. deben desarrollarse cromatogramas para demostrar
Para ensayos de identificacin esta definicin la especificidad. Los ensayos de pureza de pico
implica asegurar la identidad del analito, para (como por ej., empleando arreglo de diodos o
ensayos de pureza implica asegurar que el mtodo espectrometra de masa) pueden ser tiles para
permita una exacta determinacin del contenido de demostrar que el pico cromatogrfico del analito no
impurezas, es decir las sustancias relacionadas, incluye a otro componente.
lmite de metales pesados, lmite de impurezas Lmite de deteccin
orgnicas voltiles, de productos de degradacin, Definicin - El lmite de deteccin es la
etc. Para valoraciones asegurar un resultado que concentracin ms baja de analito que puede
permita establecer el contenido o potencia del detectarse, pero no necesariamente cuantificarse, en
analito en una muestra. una muestra bajo las condiciones experimentales
Determinacin - En el caso del anlisis establecidas.
cualitativo (ensayos de identificacin) debe Determinacin - Existen diversas maneras para
demostrarse la capacidad de discriminar entre determinar el lmite de deteccin, dependiendo de
sustancias de estructuras estrechamente que se trate de un mtodo no instrumental o
relacionadas que pudieran estar presentes. La instrumental. Pueden emplearse otras
discriminacin del mtodo puede ser confirmada aproximaciones a las presentadas a continuacin.
mediante la obtencin de resultados positivos Para mtodos no instrumentales, el lmite de
(como por ej., por comparacin con una Sustancia deteccin es generalmente determinado por el
de referencia), a partir de muestras que contienen el anlisis de muestras con concentraciones conocidas
analito, junto con resultados negativos, a partir de de analito y estableciendo el mnimo nivel al cual el
muestras que no contienen el analito. Adems, el analito puede ser detectado en forma confiable.
ensayo de identificacin puede aplicarse a Este procedimiento puede emplearse tambin para
materiales estructuralmente parecidos o mtodos instrumentales.
estrechamente relacionados al analito, para En el caso de mtodos instrumentales que
confirmar que no se obtiene una respuesta positiva. exhiben ruido de fondo, puede emplearse una
aproximacin basada en la comparacin de las directamente proporcionales a la concentracin de
seales medidas con muestras que contienen analito dentro de un intervalo dado.
pequeas cantidades conocidas de analito con En algunos casos puede ser necesaria la
muestras blanco y determinando la relacin seal- aplicacin de transformaciones matemticas para
ruido. Una relacin seal ruido de 3:1 2:1 se obtener una recta.
considera generalmente aceptable para estimar el Intervalo - Se refiere al intervalo de
lmite de deteccin. concentraciones de analito que pueden ser
Otras aproximaciones se basan en la determinadas con precisin, exactitud y linealidad.
determinacin de la pendiente de la recta de Normalmente, el intervalo se expresa con las
calibracin y la desviacin estndar de la respuesta. mismas unidades que los resultados del ensayo.
Cualquiera sea el mtodo empleado, el lmite de Determinacin de linealidad e intervalo - La
deteccin debera ser luego confirmado por medio linealidad debe establecerse a lo largo del intervalo
del anlisis de un nmero apropiado de muestras del mtodo analtico. Se debe establecer por medio
con concentraciones cercanas o en el lmite de de un mtodo estadstico apropiado (como por ej.,
deteccin propuesto. clculo de regresin por cuadrados mnimos). En
algunos casos, para obtener la proporcionalidad
Lmite de cuantificacin
Definicin - El lmite de cuantificacin es la entre los resultados y las concentraciones, los datos
menor concentracin de analito que puede deben ser sometidos a una transformacin
determinarse con precisin y exactitud en una matemtica antes del anlisis de regresin. Los
muestra, bajo las condiciones experimentales datos obtenidos a partir de la mejor recta pueden ser
establecidas. El lmite de cuantificacin se expresa tiles para estimar matemticamente el grado de
en las mismas unidades de concentracin empleadas linealidad. Deben informarse el coeficiente de
para el analito de la muestra. correlacin, la ordenada al origen y la pendiente de
Determinacin - Existen diversas maneras para la recta de regresin.
determinar el lmite de cuantificacin, dependiendo El intervalo del mtodo es validado al
de que se trate de un mtodo no instrumental o comprobar que el mtodo analtico es preciso,
instrumental. Pueden emplearse otras exacto y lineal, cuando es aplicado a muestras que
aproximaciones a las presentadas a continuacin. contienen el analito en los extremos del intervalo
Para mtodos no instrumentales, el lmite de as como dentro del mismo.
cuantificacin es generalmente determinado por el Para establecer la linealidad se deben investigar
anlisis de muestras con concentraciones conocidas un mnimo de cinco concentraciones. Tambin se
de analito y estableciendo el mnimo nivel al cual el recomienda considerar los siguientes intervalos:
analito puede ser cuantificado con precisin y Para la valoracin de una sustancia (o un
exactitud. Este procedimiento puede emplearse producto farmacutico): de 80 a 120 % de la
tambin para mtodos instrumentales. concentracin de ensayo.
En el caso de mtodos instrumentales que Para la determinacin de una impureza: de 50 a
exhiben ruido de fondo, puede emplearse una 120 % de la especificacin.
aproximacin basada en la comparacin de las Para la determinacin de uniformidad de
seales medidas con muestras que contienen contenido: un mnimo de 70 a 130 % de la
pequeas cantidades conocidas de analito con concentracin de ensayo a menos que se justifique
muestras blanco y determinando la relacin seal- otro intervalo de acuerdo a la naturaleza de la forma
ruido. Una relacin seal ruido de 10:1 se farmacutica.
considera generalmente aceptable para estimar el Para ensayos de disolucin: 20 % del intervalo
lmite de cuantificacin. especificado (como por ej., si la especificacin para
Otras aproximaciones se basan en la un producto de liberacin prolongada cubre una
determinacin de la pendiente de la recta de regin de 20 %, despus de 1 hora, hasta 90 %
calibracin y la desviacin estndar de la respuesta. luego de 24 horas, el intervalo validado debe ser de
Cualquiera sea el mtodo empleado, el lmite de 0 a 110 % del valor declarado).
cuantificacin debe ser confirmado por medio del Robustez
anlisis de un nmero apropiado de muestras con Definicin - La robustez de un mtodo analtico
concentraciones cercanas o en el lmite de es una medida de su capacidad de no verse afectado
cuantificacin propuesto. por variaciones pequeas, pero deliberadas, en los
Linealidad e intervalo parmetros del mtodo y proporciona una
Linealidad - La linealidad de un mtodo indicacin de su confiabilidad. Ejemplos de
analtico es su capacidad de producir resultados variaciones que deben estudiarse durante la
evaluacin de la robustez de un mtodo son: principios activos (incluyendo conservantes) en
diferentes instrumentos, diferentes lotes de productos farmacuticos.
reactivos, diferentes tiempos de valoracin, CATEGORA II - Incluye los mtodos
diferentes temperaturas de valoracin, diferentes analticos empleados para la determinacin de
columnas cromatogrficas (distintos lotes o impurezas en las materias primas o productos de
proveedores), etc. La robustez se expresa degradacin en los productos farmacuticos. Estos
normalmente como la falta de influencia de las mtodos incluyen valoraciones cuantitativas y
variables operativas y del entorno sobre los ensayos lmites.
resultados del ensayo. CATEGORA III - Incluye mtodos analticos
Determinacin - La robustez de un mtodo para la determinacin de las caractersticas de
analtico se determina mediante el anlisis de desempeo (como por ej., disolucin, liberacin de
alcuotas a partir de lotes homogneos empleando principios activos).
condiciones operativas y ambientales diferentes CATEGORA IV - Incluye ensayos de
pero que estn dentro de los parmetros identificacin.
especificados en la valoracin. El grado de
Para cada categora de anlisis, se necesita
reproducibilidad de los resultados del ensayo es
diferente informacin analtica. En la Tabla se
luego determinado como una funcin de las
indican los elementos que normalmente se
variables de la valoracin. Esta reproducibilidad
requieren para cada una de estas categoras.
puede compararse con la precisin de la valoracin
Las valoraciones y ensayos generales ya
bajo condiciones normales para obtener de una
establecidos (por ej., mtodo volumtrico para la
medida de la robustez del mtodo analtico.
determinacin de agua, ensayo de endotoxinas
DATOS REQUERIDOS PARA LA bacterianas) deben tambin validarse para
VALIDACION DE UN METODO ANALITICO comprobar su exactitud (y ausencia de posibles
Los mtodos analticos descritos en esta interferencias) cuando se emplea para un producto o
Farmacopea varan desde determinaciones materia prima nuevos.
analticas complejas hasta la evaluacin subjetiva La validez de un mtodo analtico puede
de ciertas caractersticas, para los cuales se comprobarse slo mediante estudios de laboratorio.
requieren diferentes esquemas de validacin. Las En consecuencia, la documentacin que avale tales
categoras de mtodos analticos ms comunes son estudios es un requisito bsico para determinar si un
las siguientes: mtodo es apropiado para una aplicacin
CATEGORA I - Incluye los mtodos determinada. Cualquier mtodo analtico propuesto
analticos para la cuantificacin de los componentes debe estar acompaado de la documentacin
mayoritarios de las materias primas o de los necesaria.
Almina activada - Emplear uno de grado D-Amilasa - Emplear uno de grado apropiado.
apropiado. 4-Aminoantipirina - C 11 H 13 N 3 O - (PM: 203,3)
Aluminio - Al - (PA: 26,98) - Emplear un - Polvo cristalino amarillo brillante. 500 mg se
reactivo analtico apropiado, que tambin cumpla disuelven completamente en 30 ml de agua,
con los requisitos del ensayo se indica a proporcionando una solucin transparente.
continuacin. Intervalo de fusin <260> - Entre 108 y 110 C.
Arsnico - Transferir 750 mg a un generador 4-Aminobenzoato de metilo - C 8 H 9 NO 2 -
(ver Arsnico en Ensayos parar Reactivos), (PM: 151,2) - Polvo casi blanco.
omitiendo la torunda de algodn. Agregar 10 ml de Valoracin - Disolver aproximadamente 38 mg,
agua y 10 ml de solucin de hidrxido de sodio exactamente pesados, en 50 ml de cido actico
(3 en 10) y dejar que la reaccin proceda durante glacial. Titular con cido perclrico 0,1 N (SV),
30 minutos: una mancha apenas perceptible se determinando el punto final potenciomtricamente.
produce en el papel de bromuro mercrico. Realizar una determinacin con un blanco y hacer
Amalgama de cinc - Agregar 54 g de cinc las correcciones necesarias. Cada mililitro de cido
granular o en granallas a 100 ml de mercurio en un perclrico 0,1 N equivale a 15,12 mg de C 8 H 9 NO 2 .
vaso de precipitados. Calentar, con agitacin, en Contiene no menos de 99,0 %.
una placa calefactora bajo una campana extractora Intervalo de fusin <260> - Entre 108 y 110 C.
[Precaucin - Los vapores de mercurio son 2-Aminobutanol - Lquido oleoso, miscible con
sumamente txicos] hasta que el cinc se disuelva agua; soluble en alcohol.
totalmente o prcticamente todo. Dejar enfriar a Densidad relativa <160> - Aproximadamente
temperatura ambiente y, si fuera necesario, agregar 0,94, a 20 C.
mercurio suficiente para impedir la solidificacin de ndice de refraccin <230> - Aproximadamente
la amalgama. Transferir la amalgama a una botella 1,453, a 20 C.
con tapn de vidrio y agitar unas pocas veces con Intervalo de ebullicin (Ensayo para reactivos) -
cido clorhdrico diluido (1 en 2), para remover el Entre 178 y 182 C.
xido de cinc formado.
4-Amino-6-cloro-1,3-bencenodisulfonamida -
Amarillo de tiazol - C 28 H 19 N 5 Na 2 O 6 S 4 - C 6 H 8 ClN 3 O 4 S 2 - (PM: 285,7) - Polvo blanco,
(PM: 695,7) - Polvo pardo amarillento. Soluble en inodoro. Insoluble en agua y cloroformo; soluble en
agua y alcohol para proporcionar en cada caso una amonaco (SR).
solucin amarilla; soluble en lcali diluido para Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
proporcionar una solucin roja pardusca. No ms de 2 mg, determinado sobre 2 g (0,1 %).
Almacenar en envases inactnicos. Absorbancia - Una solucin (1 en 200.000) en
Solubilidad - 200 mg mezclados con 50 ml de metanol presenta mximos de absorbancia a
agua no presentan ms que una ligera turbidez. aproximadamente 223, 265 y 312 nm. Su
Residuo de ignicin - Pesar exactamente absortividad (ver 470. Espectrofotometra
alrededor de 1,5 g, previamente secados a 105 C ultravioleta y visible) a 265 nm es
durante 2 horas, y someter a ignicin hasta aproximadamente 64,0.
carbonizacin completa. Enfriar, agregar 2 ml de
Aminoclorobenzofenona - (2-Amino-
cido ntrico y 2 ml de cido sulfrico, someter a
5-clorobenzofenona) - C 13 H 10 ClNO - (PM: 231,7)
ignicin suavemente para liberar el exceso de cido,
Polvo cristalino amarillo; fcilmente soluble en
luego de 600 a 800 C hasta peso constante: el
agua, soluble en alcohol, prcticamente insoluble.
residuo de sulfato de sodio (Na 2 SO 4 ) est entre
Intervalo de fusin <260> - Aproximadamente
19,8 y 21,5 % del peso de la muestra (el terico es
97 C.
20,4 %).
2-Aminoetildifenilborinato - C 14 H 16 BNO de sodio 0,1 N empleado, calcular el volumen, en
(PM: 225,09) Polvo cristalino blanco. Emplear ml, de bromo 0,1 N consumido por la muestra.
uno de grado apropiado. Cada mililitro de bromo 0,1 N equivale a 1,819 mg
1-(2-Aminoetil)piperazina - C 6 H 15 N 3 - de C 6 H 7 NO. Contiene no menos de 99,5 %.
Intervalo de fusin <260> - Entre 121 y 123 C.
(PM: 129,2) - Lquido viscoso, incoloro.
Prdida por secado <680> - Secar sobre
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en
cloruro de calcio durante 4 horas: la prdida de peso
un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa)
equipado con un detector de ionizacin a la llama y es mnima.
una columna capilar de 30 m 0,25 mm recubierta Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
Inapreciable, determinado sobre 2 g.
con goma de dimetilpolisiloxano. Mantener el
inyector y el detector a aproximadamente 280 y p-Aminofenol - C 6 H 7 NO - (PM: 109,1) -
300 C, respectivamente. La temperatura de la Polvo fino, amarillento, cristalino. Poco soluble en
columna se mantiene a 180 C, se programa un agua y alcohol.
ascenso de 10 C por minuto y se mantiene a esa Intervalo de fusin <260> - Entre 187 y 189 C.
temperatura durante 10 minutos. Se emplea helio
N-Aminohexametilenimina -
como gas transportador. El rea del pico principal
(N-Aminohomopiperidina;
no es menor de 97 % del rea total.
1-Aminohomopiperidina) - C 6 H 14 N 2 - (PM:
ndice de refraccin - Entre 1,4978 y 1,5010, a 114,2) - Lquido incoloro.
20 C. Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en
2-Aminofenol - C 6 H 7 NO - (PM: 129,2) - un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa)
Polvo color casi blanco. equipado con un detector de ionizacin a la llama y
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en una columna capilar de 30 m 0,25 mm recubierta
un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa) con goma de dimetilpolisiloxano. Mantener el
equipado con un detector de ionizacin a la llama y inyector y el detector a aproximadamente 180 y
una columna capilar de 0,25 mm 30 m recubierta 300 C, respectivamente. La temperatura de la
con una capa de 1 m de goma de columna se mantiene a 80 C y se programa un
dimetilpolisiloxano. Mantener el inyector y el ascenso de 10 C por minuto hasta 230 C,
detector a aproximadamente 280 y 300 C, mantenindose a esa temperatura durante 5
respectivamente. La temperatura de la columna se minutos. Se emplea helio como gas transportador.
mantiene a 130 C y se programa un ascenso de El rea del pico principal no es menor de 95 % del
10 C por minuto hasta alcanzar los 280 C. Se rea total.
emplea helio como gas transportador. El rea del ndice de refraccin - Entre 1,4840 y 1,4860, a
pico de C 6 H 7 NO no es menor de 97 % del rea 20 C.
total. Aminonitrobenzofenona -
Intervalo de fusin <260> - Entre 174 y 177 C.
(2-Amino-5-nitrobenzofenona) - C 13 H 10 N 2 O 3 -
m-Aminofenol - C 6 H 7 NO - (PM: 109,1) - Polvo cristalino amarillo; soluble en
Escamas de color crema a amarillo plido. tetrahidrofurano, poco soluble en metanol,
Moderadamente soluble en agua fra; fcilmente prcticamente insoluble en agua.
soluble en agua caliente, alcohol y ter. Punto de fusin - Aprox. 160 C.
Valoracin - Disolver aproximadamente 1,5 g, Absorcin ultravioleta - Determinar la
exactamente pesados, en 400 ml de agua en un absorbancia de una solucin al 1 % en metanol en
matraz aforado de 500 ml, completar a volumen con una celda de 1 cm a 233 nm con un
agua y mezclar. Transferir 25,0 ml de esta solucin espectrofotmetro. El coeficiente de absorcin
a un matraz para iodo, agregar 50,0 ml de bromo debe estar comprendido entre 690 y 720.
0,1 N (SV), diluir con 50 ml de agua, agregar 5 ml
Aminopirazolona - (4-Amino-1-fenil-2,3-
de cido clorhdrico e insertar el tapn en el matraz
dimetil-3-pirazolin-5-ona) - C 11 H 13 N 3 O -
de inmediato. Agitar durante 1 minuto, dejar
(PM: 203,2) - Polvo o agujas amarillo plido.
reposar durante 2 minutos y agregar 5 ml de ioduro Fcilmente soluble en alcohol; moderadamente
de potasio (SR) a travs del tapn aflojado. Agitar soluble en agua; poco soluble en ter.
vigorosamente, dejar reposar durante 5 minutos,
Punto de fusin - Aprox. 108 C.
remover el tapn y lavar ste y el cuello del matraz
con 20 ml de agua, agregando el lavado al matraz. Amonaco - NH 3 - (PM:17,03) - Contiene no
Titular el iodo liberado con tiosulfato de sodio menos de 17 % p/v y no ms de 18 % p/v de
0,1 N (SV), agregando 3 ml de almidn (SR) cerca amonaco gas NH 3 .
del punto final. A partir del volumen de tiosulfato
Amonaco concentrado - NH 3 - (PM: 17,03) - cido clorhdrico 1 N empleando como indicador
La solucin concentrada de amonaco contiene no 0,5 ml de fenolftalena (SR). Calcular el volumen,
menos de 25,0 % p/p y no ms de 30,0 % p/p de en ml, de hidrxido de sodio 1 N empleados para 1
amonaco. g (n 2 ). Calcular el contenido porcentual en
(CH 3 CO) 2 O empleando la expresin siguiente:
Amonaco diluido - Disolver 41 g de amonaco
concentrado y diluir a 100 ml con agua. 10,2 (n 1 - n 2 )
Amonio, formiato de - Ver formiato de Anhdrido ftlico - C 8 H 4 O 3 - (PM: 148,1) -
amonio. Emplear un reactivo analtico apropiado.
Anetol - (1-Metoxi-4-(1-propenil)benceno) - Anhdrido propinico - C 6 H 10 O 3 - (PM:
C 10 H 12 O - (PM: 148,2) - Masa blanca cristalina 130,1) - Lquido incoloro, de olor acre. Se
hasta los 20-21 C. Lquida por encima de los descompone en agua. Soluble en metanol, alcohol,
23C. Fcilmente soluble en alcohol, soluble en ter y cloroformo.
acetato de etilo y ter de petrleo, prcticamente Valoracin - Pesar exactamente 350 mg en un
insoluble en agua. erlenmeyer previamente pesado, con tapn de
ndice de refraccin <230> - Aprox. 1,56. vidrio que contenga 50 ml de dimetilformamida
Punto de ebullicin (Ensayo para reactivos) - previamente neutralizada a punto final de azul de
Aprox. 230 C. timol con metxido de sodio 0,1 N en metanol
Para uso en cromatografa de gases, debe (SV). Titular con metxido de sodio 0,1 N en
cumplir con el siguiente ensayo. metanol (SV) al punto final de azul de timol.
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en Realizar una determinacin con un blanco y hacer
un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa) las correcciones necesarias. Cada mililitro de
equipado con un detector de ionizacin a la llama y metxido de sodio 0,1 N equivale a 13,014 mg de
una columna capilar de 30 a 60 m 0,3 mm C 6 H 10 O 3 . Contiene no menos de 97,0%.
recubierta con una capa de fase estacionaria ndice de refraccin - Entre 1,4035 y 1,4045, a
constituida por polietilenglicol 20.000. Mantener el 20 C.
inyector a una temperatura comprendida entre 180 y Anhdrido trifluoroactico - (F 3 CCO) 2 O -
200 C, y el detector entre 220 y 250 C. La
(PM: 210,0) - Lquido incoloro. Hierve entre 40 y
temperatura de la columna se debe mantener a
42 C. Sumamente voltil. Evitar la exposicin al
60 C durante 4 minutos, se programa un ascenso aire o a la humedad.
de 2 C por minuto hasta 210 C, y mantener a esa Valoracin - Transferir aproximadamente
temperatura durante 15 minutos. Se emplea helio 800 mg, exactamente pesados, a un erlenmeyer con
como gas transportador. La respuesta del pico tapn de vidrio que contiene 50 ml de metanol.
principal correspondiente a trans-anetol con un Agregar 500 mg de fenolftalena y titular con
tiempo de retencin aproximadamente 41 minutos metxido de sodio 0,1 N (SV) hasta punto final
no debe ser menor de 99 % de la suma de las rosado. Calcular A por la frmula siguiente:
respuestas de todos los picos.
V/P
Anhdrido actico - (CH 3 CO) 2 O - (PM:
102,1) - Contiene no menos de 97,0 % p/p de en la cual V es el volumen, en ml, de metxido de
(CH 3 CO) 2 O. Lquido incoloro y transparente. sodio 0,1 N y P es el peso, en mg, de muestra. A un
Intervalo de ebullicin - Entre 136 a 142 C. segundo erlenmeyer con tapn de vidrio que
Valoracin - En un erlenmeyer con boca contiene 50 ml de una mezcla de dimetilformamida
esmerilada, disolver 2,00 g de anhdrido actico en y agua (1:1) transferir 400 mg de muestra,
50 ml de hidrxido de sodio 1 M y calentar a reflujo exactamente pesados, agregar 500 mg de
durante 1 hora. Valorar con cido clorhdrico 1 M, fenolftalena y titular con hidrxido de sodio 0,1 N
empleando como indicador 0,5 ml de fenolftalena (SV) hasta punto final rosado. Calcular B por la
(SR). Calcular el volumen, en ml, de hidrxido de frmula siguiente:
sodio 1 M empleados para 1 g (n 1 ). V1/P1
En un erlenmeyer con boca esmerilada, disolver
2,00 g de anhdrido actico en 20 ml de en la cual V1 es el volumen, en ml, de hidrxido de
ciclohexano; dejar enfriar en un bao de agua-hielo sodio 0,1 N y P1 es el peso de muestra, en mg.
y agregar una mezcla enfriada de 10 ml de anilina y Calcular el porcentaje de (F 3 CCO) 2 O por la
20 ml de ciclohexano. Calentar a reflujo durante 1 frmula siguiente:
hora, agregar 50 ml de una solucin de hidrxido de 2100,3(B A).
sodio 1 N y agitar vigorosamente. Valorar con
Contiene no menos de 97 %. Si 2 A es mayor Antitrombina-III por mg de protena en presencia
que B, calcular el porcentaje de F 3 CCOOH por la de heparina.
frmula siguiente: Ausencia de heparina - A una solucin que
contenga 1 UI de Antitrombina III por ml, agregar
1140,3(2A - B).
1 l de solucin de azul de toluidina: no se detecta
Anilina - C 6 H 5 NH 2 - (PM: 93,1) - Emplear un heparina. [NOTA: en presencia de heparina el
reactivo analtico apropiado. color cambia de azul a prpura.]
Anisaldehdo - (4-Metoxibenzaldehdo) - Antraceno - C 14 H 10 - (PM: 178,2) - Cristales
C 8 H 8 O 2 - (PM: 136,1) - Lquido oleoso, muy o laminillas blancas o casi blancas. Se oscurece a la
poco soluble en agua, miscible con alcohol y ter. luz solar. Insoluble en agua; moderadamente
Punto de ebullicin (Ensayo para reactivos) - soluble en alcohol, benceno y cloroformo.
Aprox. 248 C. Intervalo de fusin <260> - Entre 215 y 218 C.
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en
Antrona - C 14 H 10 O - (PM: 194,2) - Emplear
un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatorafa)
un reactivo analtico apropiado.
equipado con un detector de ionizacin a la llama y
una columna de vidrio de 30 a 60 m u 0,3 mm de Apigenina - (4,5,7-Trihidroxiflavona) -
dimetro interno recubierta con polietilenglicol C 15 H 10 O 5 - (PM: 270,2) - Polvo ligeramente
20.000. Mantener la temperatura de la columna a amarillento; moderadamente soluble en alcohol,
60 C durante 4 minutos y programar un ascenso de prcticamente insoluble en agua.
2 C por minuto hasta 210 C y mantener a esta Punto de fusin <260> - Aprox. 310 C, con
temperatura durante 15 minutos. Mantener la descomposicin.
temperatura del inyector entre 180 y 200 C, y la Cromatografa - Proceder segn se indica en
del detector entre 220 y 250 C. Emplear helio Flores de Manzanilla, aplicando 10 l de una
como gas transportador. La respuesta del pico solucin de 0,25 mg de apigenina por ml de
principal no debe ser menor de 99,0 % de la suma metanol. El cromatograma debe presentar en su
de las respuestas de todos los picos. tercio central una banda principal de fluorescencia
verde amarillenta.
Anisol - CH 3 OC 6 H 5 - (PM: 108,1) - Lquido
incoloro. Apigenina-7-glucsido - (7-O-Glucsido de
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada apigenina) - C 21 H 20 O 10 - (PM: 432,6) - Polvo
(aproximadamente 0,5 l) en un cromatgrafo de ligeramente amarillento; moderadamente soluble en
gases (ver 100. Cromatografa) equipado con un alcohol, prcticamente insoluble en agua.
detector de ionizacin a la llama y una columna Intervalo de fusin <260> - Entre 198 y 201 C.
capilar de 30 m recubierta con una fase estacionaria Cromatografa - Proceder segn se indica en
constituida por 50 % de fenilsilicona y 50 % de Flores de Manzanilla, aplicando 10 l de una
metilpolisiloxano. Mantener el inyector y el solucin de 0,25 mg de apigenina-7-glucsido por
detector a 140 y 300 C, respectivamente. La ml de metanol. El cromatograma debe presentar en
temperatura de la columna se mantiene en 70 C y su tercio central una banda principal de
se programa un ascenso de 10 C por minuto hasta fluorescencia amarillenta.
170 C. Se emplea nitrgeno como gas Aprobarbital - C 10 H 14 N 2 O 3 - (PM: 210,2) -
transportador. El rea del pico de anisol no es Polvo fino cristalino blanco. Poco soluble en agua
menor de 99 % del rea total. fra; soluble en alcohol, cloroformo y ter.
ndice de refraccin <230> - Aproximadamente Valoracin - Disolver aproximadamente
1,5160, a 20 C. 200 mg, previamente secados a 105 C durante
Antitrombina-III para el ensayo de antifactor 2 horas y exactamente pesados, en 20 ml de
X a - La antitrombina-III es un inhibidor de dimetilformamida en un erlenmeyer de 100 ml.
proteasa de serina obtenida de plasma bovino, que Agregar 4 gotas de solucin azul de timol (1 en 200
inhibe el Factor X a de la enzima y otros factores de en metanol) y titular con metxido de litio 0,1 N
coagulacin sangunea. Es una glicoprotena que empleando una bureta de 10 ml, un agitador
tiene un peso molecular de 58.000. Por magntico y una cubierta para el erlenmeyer para
electroforesis en gel (ver 300. Electroforesis) la proteger la solucin del dixido de carbono
protena principal de inters constituye no menos de atmosfrico. Realizar una determinacin con un
90 % de las cantidad total de zonas proteicas. blanco y hacer las correcciones necesarias. Cada
Actividad especfica - Una solucin que mililitro de metxido de litio 0,1 N equivale a 21,02
contiene 0,25 mg de equivalente proteico y 0,1 UI mg de C 10 H 14 N 2 O 3 . Contiene entre 98,5 y 101,0 %
de Heparina por ml contiene no menos de 4 UI de de C 10 H 14 N 2 O 3 .
Intervalo de fusin <260> - Entre 140 y 143 C. contenido de arbutina no debe ser menor de 95,0 %,
L-Arabinitol - (L-Arabitol; 1, 2, 3, 4, 5- calculado por el procedimiento de normalizacin.
pentanopentol) - C 4 H 12 O 5 - (PM: 152,2) - Arena estndar, 20 a 30 m - Arena de slice,
Cristales blancos o polvo cristalino. Estable en el compuesta casi completamente de granos
aire. Fcilmente soluble en agua proporcionando naturalmente redondeados prcticamente de cuarzo
una solucin transparente, incolora. Almacenar en puro. Con un tamao de partcula tal que pasa por
sitio fresco o a temperatura ambiente en un rea un tamiz de 850 m (N 20) (pasando entre 85 y
seca. 100 %) y se retiene por un tamiz de 600 m (N 30)
Intervalo de fusin <260> - Entre 102 y 104 C. (pasando entre 0 y 5 %).
Agua <120> - Titulacin volumtrica directa.
Arena lavada - Puede prepararse del siguiente
No ms de 0,5 %.
modo. Digerir arena limpia a temperatura ambiente
Residuo de ignicin <270> - No ms de 0,1 %.
con una mezcla de 1 parte de cido clorhdrico y
Arbutina - (Arbutosia; 2 partes de agua (aproximadamente 13 % de HCl)
4-Hidroxifenil-E-D-glucopiransido) - C 12 H 16 O 7 - durante varios das o a una temperatura elevada
(PM: 272,3) - Agujas finas blancas brillantes, muy durante varias horas. Recolectar la arena en un
solubles en agua caliente, fcilmente solubles en filtro y lavar con agua hasta que los lavados sean
agua, solubles en alcohol, prcticamente insolubles neutros y proporcionen slo una leve reaccin ante
en ter. el cloruro y finalmente secar. La arena lavada
Rotacin especfica <170> - Aprox. 64, cumple los siguientes ensayos.
determinado sobre una solucin de 20 g por litro. Sustancias solubles en cido clorhdrico -
Punto de fusin <260> - Aprox. 200 C. Digerir 10 g con una mezcla de 10 ml de cido
Valoracin - clorhdrico y 40 ml de agua en un bao de vapor
Fase estacionaria - Emplear una placa para durante 4 horas, reemplazando espordicamente el
cromatografa en capa delgada (ver 100. agua perdida por evaporacin. Filtrar y agregar a
Cromatografa), recubierta con gel de slice para 25 ml del filtrado, 5 gotas de cido sulfrico,
cromatografa con indicador de fluorescencia con evaporar y someter a ignicin hasta peso constante:
0,25 mm de espesor. el residuo no pesa ms de 8 mg (0,16 %).
Fase mvil - Acetato de etilo, agua y cido Cloruro (Ensayo para reactivos) - Agitar 1 g
frmico anhidro (88:6:6). con 20 ml de agua durante 5 minutos, filtrar y
Revelador 1 - Preparar una solucin de 10 g agregar al filtrado 1 ml de cido ntrico y 1 ml de
dicloroquinonaclorimida por litro en metanol. nitrato de plata (SR): cualquier turbidez producida
Revelador 2 - Preparar una solucin de 20 g de corresponde a no ms de 0,03 mg de Cl (0,003 %).
carbonato de sodio anhidro por litro. Arginina - Emplear Arginina.
Procedimiento - Aplicar sobre la placa una
solucin de 2,5 mg de arbutina por ml de metanol. Arsenito de sodio - NaAsO 2 - (PM: 129,9) -
Desarrollar el cromatograma hasta que el frente de Polvo blanco, cristalino, inodoro. Soluble en agua;
solvente haya recorrido aproximadamente tres poco soluble en alcohol.
cuartas partes de la longitud de la placa. Retirar la Valoracin - Transferir aproximadamente 5,5 g,
placa de la cmara, secar entre 105 y 110 C, exactamente pesados, a un matraz aforado de
pulverizar sobre la placa con Revelador 1. 500 ml, disolver en agua, completar a volumen con
Pulverizar sobre la placa con Revelador 2: el agua y mezclar. Transferir 25 ml de esta solucin a
cromatograma debe presentar slo una mancha un envase apropiado, agregar 50 ml de agua y 5 g
principal. de fosfato dibsico de sodio, agitar por rotacin
Para uso en cromatografa de lquidos, debe hasta disolver y titular con iodo 0,1 N (SV),
cumplir con el siguiente ensayo. agregando 3 ml de almidn (SR) cerca del punto
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en final. Cada mililitro de iodo 0,1 N equivale a 3,746
un equipo para cromatografa de lquido (ver 100. mg de As. Contiene entre 57,0 y 60,5 %
Cromatografa) equipado con un detector (equivalente a 98,8 a 104,9 % de NaAsO 2 ).
ultravioleta ajustado a 280 nm y una columna de Cloruro (Ensayo para reactivos) - 1 g no
25 cm 4,0 mm recubierta con fase estacionaria presenta ms de 0,10 mg de Cl (0,01 %).
constituida por octadecilsilano desactivado para Metales pesados - Disolver 200 mg en 8 ml de
bases de 5 m. El caudal debe ser cido clorhdrico diluido (3 en 8) y evaporar en un
aproximadamente 1,2 ml por minuto con fase mvil bao de vapor hasta sequedad. Disolver el residuo
constituida por agua y metanol (90:10). El en 5 ml de cido clorhdrico diluido (2 en 5) y
nuevamente evaporar hasta sequedad. Disolver el
residuo en 10 ml de agua y agregar 2 ml de cido Centella, hierba. Debe contener no menos de
actico diluido y 10 ml de sulfuro de hidrgeno 97,0 %.
(SR). Ningn color pardo que se produzca debe ser L-Asparagina - (cido L-2-
ms oscuro que el de un control que contenga
Aminosuccinmico) - COOHCH(NH 2 )CH 2 CONH 2
0,01 mg de Pb (0,005%).
. H 2 O - (PM: 150,1) - Cristales incoloros,
Hierro - Disolver 1 g en 20 ml de cido
inodoros. Moderadamente soluble en agua; soluble
clorhdrico diluido (1 en 5) y agregar, gota a gota,
en cidos y lcalis; insoluble en alcohol y ter. Sus
un ligero exceso de bromo (SR). Calentar a soluciones neutras o alcalinas son levorotatorias;
ebullicin la solucin para eliminar el exceso de sus soluciones cidas son dextrorotatorias.
bromo, enfriar, diluir con agua a 40 ml y agregar
Rotacin especfica <170> - Entre + 31 y +
10 ml de solucin de tiocianato de amonio (3 en
33, determinada en una solucin en cido
10). Ningn color rojo que se produzca debe ser
clorhdrico diluido que contiene el equivalente de 5
ms oscuro que el de un control que contenga
g (calculado sobre la sustancia anhidra, secada a
0,02 mg de Fe (0,02 %). 105 C durante 5 horas) en cada 100 ml.
Sulfuro - Disolver 1 g en 20 ml de agua y Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
agregar 5 gotas de acetato de plomo (SR): no se
No ms de 0,1 %.
produce ningn color pardo (aproximadamente
Cloruro (Ensayo para reactivos) - 1 g no
0,0005 %).
presenta ms que 0,03 mg de Cl (0,003 %).
Sulfato (Ensayo para reactivos) - Mtodo II.
Sulfato (Ensayo para reactivos) - Mtodo I. 1 g
Disolver 5 g en 100 ml de agua, agregar naranja de no presenta ms que 0,05 mg de SO 4 (0,005 %).
metilo (SR), neutralizar con cido clorhdrico 1 N, Metales pesados (Ensayo para reactivos) - No
agregar 3 ml del cido en exceso y filtrar: el filtrado ms de 0,002 %.
proporciona no ms de 3 mg de residuo (0,02 %). Determinacin de nitrgeno <200> - Mtodo II.
Aserrn purificado - Puede prepararse del Contiene entre 18,4 y 18,8 % de N.
siguiente modo. Extraer aserrn en un percolador, Azida de sodio - NaN 3 - (PM: 65,0) - Polvo
primero con solucin de hidrxido de sodio cristalino blanco o cristales fcilmente solubles en
(1 en 100) y luego con cido clorhdrico diluido agua, poco solubles en alcohol, prcticamente
(1 en 100) hasta que el percolado cido no cumpla insoluble en ter.
el ensayo para alcaloides con iodomercuriato de
potasio (SR) o con iodo (SR). Luego lavar con agua Azometino H -
hasta eliminar el cido y las sales solubles y secar. (Hidrgeno-4-hidroxi-5-(2-hidroxibencilidenamino)
El aserrn purificado cumple el siguiente ensayo. -2,7-naftalendisulfonato de sodio) - (PM: 445,4) -
Alcaloides - Agregar a 5 g de aserrn purificado C 17 H 12 NNaO 8 S 2 - Emplear un reactivo analtico
contenido en un erlenmeyer, 10 ml de amonaco apropiado.
(SR) y 50 ml de una mezcla de ter y cloroformo Azufre - Emplear Azufre precipitado.
(2:1) y agitar frecuentemente durante 2 horas.
Decantar 20ml del extracto etreo-clorofrmico Azul brillante de Coomassie R-250 -
transparente y evaporar hasta sequedad. Disolver el (PM:826,0) - C 45 H 44 N 3 O 7 S 2 Na - Polvo marrn.
residuo en 2 ml de cido clorhdrico diluido (1 en (CI 42660).
12) y dividir en dos porciones. Agregar a una Azul de anilina - Colorante soluble en agua
porcin iodomercuriato de potasio (SR) y agregar a que consiste en una mezcla de trisulfonatos de
la otra iodo (SR): no se produce turbidez en trifenilpararosanilina y de difenilrosanilina.
ninguna de las porciones.
Azul de hidroxinaftol - C 20 H 12 N 2 O 11 S 3 Na 2 -
Asiaticsido - (PM: 598,50) - Emplear un reactivo analtico
(2D,3E23-trihidrxi-4D-urs-12-en-28-oato-deO-6-d apropiado.
esoxi-D-L-manopiranosil-(1o4)-O-E-D-glucopiran
Azul de metileno - C 16 H 18 ClN 3 S . 3H 2 O -
osil(1o6)-E-D-glucopiranosilo) - C 48 H 78 O 19 - (PM: 373,9) - Cristales verde oscuro o polvo
(PM: 959,0) - Polvo blanco, higroscpico, soluble cristalino, con brillo de color bronce. Soluble en
en metanol, poco soluble en alcohol, insoluble en agua y cloroformo; moderadamente soluble en
acetonitrilo. Proteger de la humedad. alcohol.
Punto de fusin <260> - Aprox. 232 C, con Relacin de absortividad - La relacin entre la
descomposicin. absortividad (ver 470. Espectrofotometra
Agua <120> - No ms de 6,0 %. ultravioleta y visible) a 635 y 665 nm, medidas en
Para uso en cromatografa de lquidos, debe
cumplir con los requisitos de Valoracin en
una solucin diluida del colorante en alcohol secada previamente a 105 C durante 3 horas y
diluido, est comprendida entre 0,56 y 0,62. exactamente pesada y preparar mediante dilucin en
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) - etapas una solucin que contenga aproximadamente
Someter a ignicin 1 g con 0,5 ml de cido 10 g por ml.
sulfrico: el residuo no pesa ms de 10 mg (1 %). Procedimiento - Transferir porciones de 10, 15
Prdida por secado <680> - Secar a 105 C y 20 ml de Solucin estndar a erlenmeyer
durante 18 horas: no pierde ms de 15,0 % de su separados, con tapn de vidrio, de 50 ml. Agregar
peso. 10 ml y 5 ml, respectivamente, de alcohol a los
Azul sulfn - [[[(4-(Dietil- erlenmeyer que contienen 10 y 15 ml de Solucin
estndar y agitar por rotacin para mezclar. A cada
amino)fenil](2,4-disulfonato fenil)metiln]-2,5-ci-
uno de los erlenmeyer y a un cuarto que contiene 20
clohexadien-1-ilideno]dietilamonio de sodio.
ml de alcohol, agregar 2,0 ml de una solucin
C 27 H 31 N 2 NaO 6 S 2 - Polvo malva o prpura,
preparada disolviendo 50 mg de azul de tetrazolio
soluble en agua. Las soluciones diluidas del azul
sulfn son azules y viran al amarillo por adicin de en 10 ml de alcohol, mezclar y luego agregar 2,0 ml
cido clorhdrico concentrado. de una solucin preparada al diluir 1 ml de
hidrxido tetrametilamonio (SR) con alcohol a 10
Azul de tetrazolio - (3,3'-(3,3'-Dimetoxi[1,1'- ml. Mezclar, dejar los erlenmeyer en la oscuridad
bifenil]-4,4'-diil)bis[2,5-difenil-2H-tetrazolio] durante 90 minutos y determinar las absorbancias
dicloruro) - C 40 H 32 Cl 2 N 8 O 2 - (PM: 727,7) - de las tres Soluciones estndar a 525 nm, con un
Cristales amarillo limn. Poco soluble en agua; espectrofotmetro apropiado, empleando la
fcilmente soluble en cloroformo y metanol; solucin del cuarto erlenmeyer como blanco.
insoluble en acetona y ter. Graficar las absorbancias en la abscisa y la cantidad
Solubilidad en metanol - Disolver 1 g en 100 de hidrocortisona en la ordenada sobre papel
ml de metanol: se disuelve completamente milimetrado y trazar la curva que mejor se ajuste: la
proporcionando una solucin clara. absorbancia de cada solucin es proporcional a la
Color - Transferir una porcin de la solucin de concentracin y la absorbancia de la solucin que
metanol obtenida en el ensayo anterior a una celda contiene 200 g de hidrocortisona no es menor de
de 1 cm y determinar su absorbancia a 525 nm, 0,50.
empleando agua como blanco: la absorbancia no
excede 0,20. Azul de toluidina - (Cloruro de 3-amino-7-
Absortividad molar <470> - Su absortividad dime-tilamino-2-metil-5-fenotiazinio) -
C 15 H 16 ClN 3 S - (PM: 305,8) - Polvo verde oscuro.
molar en metanol, a 252 nm, no es menor a 50.000.
Soluble en agua; poco soluble en alcohol
Ensayo de aptitud -
(CI 52040).
Solucin estndar - Disolver en alcohol una
cantidad apropiada de Hidrocortisona SR-FA,
B
Cadmio - Cd - 112,4 - Metal blanco plateado u 0,25 mm recubierta con una capa de fase
brillante. Prcticamente insoluble en agua. estacionaria constituida por goma de
Fcilmente soluble en cido ntrico y cido dimetilpoliloxano de 1 m. Mantener el inyector,
clorhdrico caliente. el detector y la columna a aproximadamente 280,
Cafena - Ver Cafena. 300 y 280 C, respectivamente. Se debe emplear
helio como gas transportador. La respuesta del pico
Caoln lgero - Silicato de aluminio hidratado de C 12 H 9 N no debe ser menor de 95,5 % de la
natural, purificado con un dispersante apropiado. respuesta total.
Polvo blanco, ligero, libre de partculas granulares.
Graso al tacto. Prcticamente insoluble en agua y Carbn vegetal activado - (Carbn activado;
cidos minerales. Carbn decolorante) - Polvo fino, negro, inodoro,
Partculas gruesas - Transferir 5,0 g de Caoln es el residuo de la destilacin destructiva de
ligero a una probeta con tapn esmerilado, agregar diversos materiales orgnicos, tratado para
60 ml de una solucin de 10 mg de pirofosfato de aumentar su alta capacidad de adsorcin de
sodio por ml, agitar enrgicamente y dejar reposar sustancias orgnicas coloreadas, as como bases
durante 5 minutos. Con la ayuda de una pipeta, nitrogenadas.
extraer 50 ml, tomados a unos 5 cm por debajo de la Poder adsorbente - Disolver 100 mg de sulfato
superficie. Agregar 50 ml de agua, agitar y dejar de estricnina en 50 ml de agua, agregar 1 g de
reposar durante 5 minutos. Repetir esta operacin muestra, agitar durante 5 minutos y filtrar a travs
hasta que se hayan retirado 400 ml. Transferir la de un filtro seco, descartando los primeros 10 ml
suspensin restante a una cpsula, evaporar a del filtrado. A 10 ml del filtrado, agregar 1 gota de
sequedad en un bao de agua y secar el residuo a cido clorhdrico y 5 gotas de ioduro
una temperatura comprendida entre 100 y 105 C mercrico (SR): no se produce turbidez.
hasta peso constante. El peso del residuo no debe Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) - El
ser mayor a 25 mg (0,5 %). residuo no pesa ms de 20 mg, determinado sobre
Partculas finas - Dispersar 5,0 g de Caoln 500 mg (4,0 %).
ligero en 250 ml de agua, agitar enrgicamente Reaccin - Calentar a ebullicin 2 g con 50 ml
durante 2 minutos y transferir a una probeta. Con la de agua durante 5 minutos, dejar enfriar, restaurar el
ayuda de una pipeta, transferir 20 ml de la volumen original agregando cantidad suficiente de
suspensin a una cpsula, evaporar a sequedad en agua y filtrar: el filtrado es incoloro y es neutro al
un bao de agua y secar el residuo a una papel de tornasol.
temperatura comprendida entre 100 y 105 C hasta Sustancias solubles en cidos - Calentar a
peso constante. Dejar el resto de la suspensin en ebullicin 1,0 g con 25 ml de cido clorhdrico
reposo a 20 C durante 4 horas y con la ayuda de diluido (1 en 5) durante 5 minutos, filtrar a travs
una pipeta transferir 20 ml tomados exactamente a de un crisol de porcelana previamente pesado y
5 cm por debajo de la superficie de la suspensin, a lavar el residuo con 10 ml de agua caliente.
una cpsula. Evaporar a sequedad en un bao de Combinar los lavados y el filtrado, agregar 1 ml de
agua y secar el residuo a una temperatura cido sulfrico, evaporar hasta sequedad e incinerar
comprendida entre 100 y 105 C hasta peso hasta peso constante: el residuo no pesa ms de
constante. El peso del residuo de la segunda 35 mg (3,5 %).
extraccin no debe ser menor al 70 % del peso del Sustancias solubles en alcohol - Calentar a
residuo obtenido en la primera extraccin. ebullicin 2 g con 40 ml de alcohol durante
5 minutos bajo un condensador a reflujo y filtrar.
Carbamato de metilo - C 2 H 5 NO 2 - (PM: 75,1) Evaporar 20 ml del filtrado en un bao de vapor y
- Cristales blancos. Fcilmente soluble en agua. secar a 105 C durante 1 hora: el residuo no pesa
Intervalo de fusin <260> - Entre 54 y 56 C. ms de 2 mg (0,2%).
Carbazol - C 12 H 9 N - (PM: 167,21) - Polvo Elementos constitutivos no carbonizados - A
casi blanco a canela. 250 mg agregar 10 ml de hidrxido de sodio (SR),
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en calentar a ebullicin y filtrar: el filtrado es incoloro.
un equipo para cromatografa de gases (ver 100. Cloruro (Ensayo para reactivos) - 5 ml del
Cromatografa) equipado con un detector de filtrado obtenido en el ensayo para Reaccin no
ionizacin a la llama y una columna capilar de 30 m presenta ms de 0,04 mg de Cl (0,02 %).
Sulfato (Ensayo para reactivos) - Mtodo I. 5 ml baja y secar a 80 C: el peso del residuo no excede
del filtrado obtenido en el ensayo de Reaccin no 5 mg (0,5 %).
presenta ms de 0,3 mg de SO 4 (0,15 %). Determinacin de nitrgeno <200> - Mtodo I.
Sulfuro - Colocar 1 g en un erlenmeyer pequeo Contiene entre 15,2 y 16,0 % de N, sobre la
con un cuello estrecho, agregar 35 ml de agua y 5 sustancia anhidra.
ml de cido clorhdrico y calentar a ebullicin Cuando se requiera casena libre de vitaminas,
suavemente: los vapores que se desprenden no emplear casena que se ha liberado de su contenido
oscurecen un papel humedecido con acetato de de vitaminas liposolubles mediante extraccin
plomo (SR). continua con alcohol caliente durante 48 horas
Carbonato de amonio - Emplear un reactivo seguido de secado al aire para remover el solvente.
analtico apropiado. Caseinato de calcio - Polvo blanco o algo
Carbonato de calcio - CaCO 3 - (PM: 100,1) - amarillo, casi inodoro. Insoluble en agua fra, pero
Emplear un reactivo analtico apropiado. forma una solucin lechosa cuando es suspendido
en agua, agitado y calentado.
Carbonato de calcio, estndar para Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
quelatometra - CaCO 3 - (PM: 100,1) - Emplear Someter a ignicin 5 g a 550 C: el residuo pesa
un reactivo analtico apropiado. entre 150 y 300 mg (3,0 a 6,0 %).
Carbonato de calcio precipitado - Emplear Calcio - Tratar el residuo del ensayo anterior
Carbonato de calcio precipitado. con 10 ml de cido clorhdrico diluido, filtrar, y al
filtrado transparente agregarle 5 ml de oxalato de
Carbonato de potasio - Ver Carbonato de amonio (SR): en reposo aparece un precipitado
potasio anhidro. blanco.
Carbonato de potasio anhidro - K 2 CO 3 - Prdida por secado <680> - Secar al vaco a
(PM: 138,2) - Emplear un reactivo analtico 70 C hasta peso constante: no pierde ms de 7,0 %
apropiado. de su peso.
Grasa - Suspender 1,0 g en 5 ml de alcohol en
Carbonato de sodio - Emplear Carbonato de un matraz de Mojonnier, agregar 0,8 ml de agua de
sodio anhidro. amonaco fuerte y 9 ml de agua y agitar. Agregar
Carbonato de sodio anhidro - Na 2 CO 3 - una segunda porcin de 5 ml de alcohol luego
(PM: 106,0) - Emplear un reactivo analtico agregar porciones sucesivas de 25 ml cada una de
apropiado. ter de petrleo, agitando despus de cada agregado
invirtiendo el matraz 30 veces. Centrifugar,
Carbonato sdico hidrogenado - Ver
decantar la fase orgnica, evaporar a temperatura
Bicarbonato de sodio.
baja y secar en un bao de vapor: el residuo pesa no
Casena - Polvo blanco o algo amarillo, ms de 20 mg (2,0 %).
inodoro, granular. Insoluble en agua y otros Determinacin de nitrgeno <200> - Mtodo I.
solventes neutros; fcilmente soluble en amonaco Contiene entre 12,5 y 14,3 % de N, calculado sobre
(SR) y soluciones de hidrxidos de lcali, la sustancia anhidra.
generalmente forma una solucin turbia. Suspendibilidad en agua - Colocar 2 g en un
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos ) - vaso de precipitados y agregar agua fresca
El residuo no pesa ms de 20 mg, determinado lentamente con agitacin hasta formar una pasta
sobre 2 g (1,0 %). delgada, suave. Completar con agua hasta obtener
Prdida por secado <680> - Secar a 105 C 100 ml. Agitar, y calentar a 80 C: se forma una
hasta peso constante: no pierde ms de 10,0 % de su suspensin lechosa que no sedimenta despus de
peso. 2 horas de reposo.
Alcalinidad - Agitar 1 g con 20 ml de agua
Catalizador de nquel-aluminio - Emplear uno
durante 10 minutos y filtrar: el filtrado no es
de grado apropiado.
alcalino frente al papel de tornasol rojo.
Sustancias solubles - Evaporar el filtrado del Catecol - (o-Dihidroxibenceno) - C 6 H 4 (OH) 2 -
ensayo de Alcalinidad y secarlo a 105 C, el residuo (PM: 110,1) - Cristales blancos, que se decoloran
no pesa ms de 1 mg (0,1 %). por exposicin al aire y luz. Fcilmente soluble en
Grasas - Disolver 1 g en una mezcla de 10 ml agua, alcohol, ter, cloroformo y piridina, formando
de agua y 5 ml de amonaco alcohlico (SR) y soluciones claras.
agitar con dos porciones de 20 ml de ter de Intervalo de fusin <260> - Entre 104 y 105 C.
petrleo. Evaporar el ter de petrleo a temperatura
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) - Cianuro de sodio - NaCN - (PM: 49,0) -
Someter a ignicin 500 mg con 5 gotas de cido Emplear un reactivo analtico apropiado.
sulfrico: el residuo no pesa ms de 1 mg (0,2 %). Ciclohexano - C 6 H 12 - (PM: 84,2) - Emplear un
Cefelina - (Dihidrocloruro de reactivo analtico apropiado.
(R)-1->(2S,3R,11bS)-3-etil-1,3,4,6,7,11b-hexahidro- Ciclohexanol - C 6 H 12 O - (PM: 100,2) - Lquido
9,10-dimetoxi-2H-benzo>D@quinolicin-2-ilmetil@-1,2 transparente de olor alcanforceo. Fcilmente
,3,4-tetrahidro-7-metoxi-6-isoquinolinol soluble en agua. Miscible con alcohol, acetato de
heptahidrato; Desmetilemetina) - etilo e hidrocarburos aromticos. Punto de fusin:
C 28 H 40 Cl 2 N 2 O 4 . 7H 2 O - (PM: 666) - Polvo aproximadamente a 23 C. Densidad relativa:
cristalino blanco o amarillento. Fcilmente soluble aproximadamente 0,962, a 20 C.
en agua, soluble en acetona y alcohol. Valoracin - Cuando se analiza por
Rotacin especfica <170> - 25 , determinada cromatografa gas-lquido, empleando un
a 20 C en una solucin que contenga 20 mg por cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa) y
ml. condiciones apropiadas, presenta una pureza no
Celulosa con indicador de fluorescencia para menor al 98 %.
cromatografa - Mezcla de celulosa con una Cinamato de bencilo - (3-Fenilprop-2-enoato
sustancia fluorescente apropiada. de bencilo) - C 16 H 14 O 2 - (PM: 238,3) - Cristales
Celulosa microcristalina - Emplear Celulosa amarillentos o incoloros. Prcticamente insoluble en
microcristalina. agua, soluble en alcohol y ter. Punto de fusin:
aproximadamente a 39 C.
Celulosa para cromatografa - Emplear uno Cromatografa - Analizar segn se especifica en
de grado apropiado. la monografa de Blsamo de Per, aplicando sobre
Cerebro de buey desecado con acetona, polvo la placa 20 l de una solucin al 0,3 % en acetato
de - Cortar en trozos pequeos un cerebro de buey de etilo. Luego de pulverizar la placa y calentar, el
fresco, libre de tejidos vasculars y conjuntivos. cromatograma presenta una mancha principal cuyo
Deshidratar el material sumergindolo en acetona. R f es aproximadamente 0,6.
Triturar 30 g en un mortero para completar la Cinc - Zn - (PA: 65,39) - Emplear un reactivo
deshidratacin y agregar porciones sucesivas de analtico apropiado.
75 ml de acetona hasta obtener un polvo seco luego
de filtrar. Secar a 37 C durante 2 horas o hasta que Cinconidina - C 19 H 22 N 2 O - (PM: 294,4) -
el olor a acetona desaparezca. Cristales, polvo cristalino o granular color blanco.
Soluble en alcohol y cloroformo; prcticamente
Cetrimida - (Bromuro de alquiltrimetilamonio) insoluble en agua.
- Emplear un reactivo analtico apropiado. Valoracin - Disolver aproximadamente
Cianoacetato de etilo - CNCH 2 COOC 2 H 5 - 125 mg, exactamente pesados, en 50 ml de cido
(PM: 113,1) - Lquido incoloro a amarillo plido, de actico glacial. Agregar unas gotas de
olor agradable. Poco soluble en agua. Miscible con p-naftolbencena (SR) y titular con cido perclrico
alcohol y ter. Intervalo de ebullicin: entre 205 y 0,1 N (SV). Realizar una determinacin con un
209C, con descomposicin. A una presin de 10 blanco y hacer las correcciones necesarias. Cada
mm de Hg destila aproximadamente a 90 C. mililitro de cido perclrico 0,1 N equivale a 14,72
Densidad relativa <160> - Entre 1,057 y 1,062. mg de C 19 H 22 N 2 O. Contiene no menos de 99,0 %.
Acidez - Disolver 2 ml en 25 ml de alcohol Prdida por secado <680> - Secar a 105 C
neutralizado, agregar fenolftalena (SR) y titular hasta peso constante: no pierde ms de 1,0 % de su
con hidrxido de sodio 0,10 N: no se requieren ms peso.
de 1,5 ml para producir color rosado. Intervalo de fusin <260> - Entre 200 y 205 C.
Cianoguanidina - (Diciandiamida; Rotacin especfica <170> - Entre 105 y
1-cianoguanina) - C 2 H 4 N 4 - (PM: 84,1) - Polvo 115, calculado sobre la sustancia seca,
blanco cristalino. Moderadamente soluble en determinada en una solucin alcohlica que
alcohol; prcticamente insoluble en cloroformo y contiene 10 mg por ml.
cloruro de metileno. Funde a proximadamente a Cinconina - C 19 H 22 N 2 O - (PM: 294,4) -
210 C. Cristales, polvo cristalino o granular color blanco.
Cianuro de potasio - KCN - (PM: 65,1) - Poco soluble en cloroformo; moderadamente
Emplear un reactivo analtico apropiado. soluble en alcohol; prcticamente insoluble en agua.
Valoracin - Disolver aproximadamente del pico principal no debe ser menor de 98,0 % de
125 mg, exactamente pesados, en 50 ml de cido la suma de las respuestas de todos los picos.
actico glacial. Agregar unas pocas gotas de
Circonilo, nitrato de - ZrO(NO 2 ) 2 . 2H 2 O -
p-naftolbencena (SR) y titular con cido perclrico
Polvo blanco o cristales higroscpicos. Soluble en
0,1 N (SV). Realizar una determinacin con un
agua. La solucin acuosa debe ser transparente o
blanco y hacer las correcciones necesarias. Cada
ligeramente opalescente. Conservar en envases
mililitro de cido perclrico 0,1 N equivale a 14,72
hermticos.
mg de C 19 H 22 N 2 O. Contiene no menos de 99,0 %.
Prdida por secado <680> - Secar a 105 C L-Cistina - (PM: 240,3) -
hasta peso constante: no pierde ms de 1,0 % de su HOOC(NH 2 )CHCH 2 S-SCH 2 CH(NH 2 )COOH -
peso. Polvo blanco, cristalino. Muy poco soluble en agua;
Intervalo de fusin <260> - Entre 255 y 261 C. soluble en cidos minerales diluidos y en soluciones
Rotacin especfica <170> - Entre + 219 y de hidrxidos alcalinos; insoluble en alcohol y en
+ 229, calculado sobre la sustancia seca, otros solventes orgnicos.
determinada en una solucin alcohlica que Rotacin especfica <170> - Entre 215 y
contiene 50 mg por 10 ml. 225, determinada en una solucin (2 en 100) de
la muestra, secada previamente sobre gel de slice
Cineol - (Eucaliptol; 1,8-Cineol;
durante 4 horas, en cido clorhdrico diluido (1 en
1,8-Epoxi-p-mentano) - C 10 H 18 O - (PM: 154,3) -
10), a 20 C.
Lquido incoloro, miscible en alcohol y ter;
prcticamente insoluble en agua. Prdida por secado <680> - Secar sobre gel de
Densidad relativa <160> - Entre 0,922 y 0,927. slice durante 4 horas: no pierde ms de 0,2 % de su
peso.
ndice de refraccin <230> - Entre 1,456 y
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
1,459.
No ms de 0,1 %.
Punto de solidificacin <180> - Entre 0 y 1 C.
Intervalo de destilacin <240> - Entre 174 y Citral - C 10 H 16 O - (PM: 152,2) - Mezcla de
177 C. (2E)- y (2Z)-3,7-dimetilocta-2,6-dienal. Lquido
Fenol - Agitar 1 g de Cineol con 20 ml de agua. amarillo claro, miscible con alcohol, ter y
Dejar reposar. Separar 10 ml de la fase acuosa y glicerina, prcticamente insoluble en agua.
agregar 0,1 ml de cloruro frrico (SR): no debe Valoracin -
producirse coloracin violeta. Fase estacionaria - Emplear una placa para
Escencia de trementina - Disolver 1 g de Cineol cromatografa en placa delgada (ver 100.
en 5 ml de alcohol. Agregar gota a gota agua de Cromatografa), recubierta con gel de slice para
bromo, recientemente preparada: el viraje al cromatografa con indicador de fluorescencia con
amarillo de persistir durante 30 minutos y no se 0,25 mm de espesor.
requieren ms de 0,5 ml de agua de bromo. Fase mvil - Tolueno y acetato de etilo (85:15).
Residuo de evaporacin - A 10 ml de Cineol Procedimiento - Aplicar sobre la placa 10 Pl de
agregar 25 ml de agua, evaporar en un bao de agua una solucin de citral en tolueno de 1 g por litro.
y secar el residuo entre 100 y 105 C hasta peso Desarrollar el cromatograma hasta que el frente de
constante: no debe contener ms de 0,05 %. solvente haya recorrido aproximadamente tres
Para uso en cromatografa de gases, debe cuartas partes de la longitud de la placa. Retirar la
cumplir con el siguiente ensayo. placa de la cmara, dejar secar y examinar bajo luz
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en ultravioleta a 254 nm: el cromatograma debe
un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa) presentar slo una mancha principal.
equipado con un detector de ionizacin a la llama y Para uso en cromatografa de gases, debe
una columna capilar de 60 m 0,25 mm recubierta cumplir con el siguiente ensayo.
con una capa de fase estacionaria constituida por Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en
goma de polietilenglicol 20.000. Mantener el un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa)
inyector y el detector a aproximadamente 220 C. equipado con un detector de ionizacin a la llama y
La temperatura de la columna se debe mantener a una columna capilar de 60 m 0,25 mm recubierta
60 C durante 10 minutos, se programa un ascenso con una capa de fase estacionaria constituida por
de 2 C por minuto hasta 180 C, y mantener a esta goma de polietilenglicol 20.000 de 0,2 m.
temperatura durante 5 minutos. Se emplea helio Mantener el inyector y el detector a
como gas transportador, el caudal debe ser aproximadamente 260 C. La temperatura de la
aproximadamente 1,5 ml por minuto. La respuesta columna se debe mantener a 80 C durante
2 minutos, se programa un ascenso de 3 C por
minuto hasta 150 C, luego un ascenso de 2,2 C Citrato dibsico de amonio - (NH 4 ) 2 HC 6 H 5 O 7
por minuto hasta 185 C y luego se programa un - (PM: 226,2) - Emplear un reactivo analtico
ascenso de 9,3 C por minuto hasta 250 C. Se apropiado.
emplea helio como gas transportador, el caudal
Citrato frrico amnico - Escamas delgadas,
debe ser aproximadamente 1,0 ml por minuto. El
transparentes, de color rojo granate o grnulos o
contenido de citral (neral geranial) no debe ser polvo amarillo pardusco, inodoro o con un ligero
menor de 95,0 %, calculado por el procedimiento de olor a amonaco. Es delicuescente y sensible a la
normalizacin. luz. Muy soluble en agua; insoluble en alcohol.
Citrato cprico - ([Citrato(4-)]dicobre) - (PM: Valoracin - Pesar exactamente alrededor de 1 g
315,2) - Cu 2 C 6 H 4 O 7 - Emplear uno de grado y transferir a un erlenmeyer con tapn de vidrio.
apropiado. Disolver en 25 ml de agua, agregar 5 ml de cido
clorhdrico y 4 g de ioduro de potasio, colocar el
Citrato de sodio - Emplear Citrato de sodio.
tapn en el erlenmeyer y dejar reposar en la
Citrato de calcio - Ca 3 (C 6 H 5 O 7 ) 2 . 4H 2 O - oscuridad durante 15 minutos. Agregar 100 ml de
(PM: 570,5) - Polvo blanco, inodoro, cristalino. agua y titular el iodo liberado con tiosulfato de
Poco soluble en agua; fcilmente soluble en cido sodio 0,1 N (SV), agregando 3 ml de almidn (SR)
clorhdrico 3 N y cido ntrico 2 N; insoluble en cerca del punto final. Realizar una determinacin
alcohol. A 15 ml de cido sulfrico 2 N caliente con un blanco y hacer las correcciones necesarias.
agregar, en porciones y con agitacin, Cada mililitro de tiosulfato de sodio 0,1 N equivale
aproximadamente 500 mg de citrato de calcio. a 5,585 mg de Fe. Contiene entre 16,5 y 18,5 %.
Calentar a ebullicin la mezcla durante 5 minutos y Citrato frrico - A 250 mg disueltos en 25 ml de
filtrar en caliente: el filtrado enfriado responde al agua, agregar 1 ml de ferrocianuro de potasio (SR):
ensayo de identificacin para Citrato (ver 410. no se forma precipitado azul.
Ensayos generales de identificacin). Tartrato - Disolver 1 g en 10 ml de agua,
Valoracin - Pesar exactamente 400 mg de la agregar 1 ml de hidrxido de potasio (SR), calentar
sal, previamente secada a 150 C hasta peso a ebullicin para coagular el hidrxido frrico,
constante, y transferir a un vaso de precipitados de agregando ms hidrxido de potasio (SR), si fuera
250 ml. Disolver la muestra en 150 ml de agua que necesario, para precipitar todo el hierro, filtrar y
contiene 2 ml de cido clorhdrico 3 N, agregar 15 acidificar levemente el filtrado con cido actico
ml de hidrxido de sodio 1 N y 250 mg de azul glacial. Agregar 2 ml de cido actico glacial y
hidroxi naftol. Titular con edetato disdico 0,05 M dejar reposar durante 24 horas: no se forma
(SV) hasta que la solucin se torna de color azul precipitado blanco cristalino.
profundo. Cada mililitro de edetato disdico 0,05 M Plomo <600> - Disolver 1,0 g en 30 ml de agua,
equivale a 8,307 mg de Ca 3 (C 6 H 5 O 7 ) 2 . Contiene agregar 5 ml de cido ntrico diluido (1 en 21),
entre 97,5 y 101 %. calentar a ebullicin suavemente durante 5 minutos,
xido de calcio y carbonato - Triturar 1 g de enfriar y diluir con agua a 50 ml: 20 ml de solucin
citrato de calcio con 5 ml de agua durante 1 minuto: no presentan ms de 0,008 mg de Pb (0,002 %).
la mezcla no colorea de rojo el papel de tornasol
Citronelal - (3,7-Dimetil-6-octenal) - C 10 H 18 O
azul. Luego agregar 5 ml de cido clorhdrico 3 N
- (PM: 154,3) - Soluble en alcoholes, muy poco
caliente: slo se desprenden unas pocas burbujas
soluble en agua.
aisladas.
Densidad relativa <160> - Entre 0,848 y 0,856.
Materia insoluble en cido clorhdrico -
ndice de refraccin <230> - Aprox. 1,446.
Disolver 5 g calentando con una mezcla de 10 ml de
cido clorhdrico y 50 ml de agua durante Rotacin especfica <170> - Aprox. 11,50.
Para uso en cromatografa de gases, debe
30 minutos: se obtiene no ms de 2,5 mg de residuo
cumplir con el siguiente ensayo.
insoluble (0,05%).
Prdida por secado <680> - Secar a 150 C Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en
hasta peso constante: pierde entre 12,2 y 13,3 % de un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa)
equipado con un detector de ionizacin a la llama y
su peso.
una columna capilar de 60 m 0,25 mm recubierta
Lmite de arsnico <540> - Proceder segn se
con una capa de fase estacionaria constituida por
indica para compuestos orgnicos, empleando 0,50
goma de polietilenglicol 20.000 de 0,2 m.
g (6 ppm de As).
Metales pesados <590> - Mtodo I. No ms de Mantener el inyector y el detector a
0,002 %. aproximadamente 260 C. La temperatura de la
columna se debe mantener a 80 C durante
2 minutos, se programa un ascenso de 3 C por
minuto hasta 150 C, luego un ascenso de 2,2 C Materia insoluble - Disolver 2 g en 100 ml de
por minuto hasta 185 C y luego se programa un agua sin calentar y filtrar de inmediato: el residuo
ascenso de 9,3 C por minuto hasta 250 C. Se insoluble no es mayor de 1 mg (0,05 %).
emplea helio como gas transportador, el caudal Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
debe ser aproximadamente 1,0 ml por minuto. El No ms de 1 mg, determinado sobre 2 g (0,05 %).
contenido de citronelal no debe ser menor de Ensayo de aptitud para la deteccin de selenio -
95,0 %, calculado por el procedimiento de Disolver 1,633 g de cido selenioso (H 2 SeO 3 ) en
normalizacin. agua y diluir con agua a 1 litro. Diluir 10 ml de esta
Cloramina T - (p-Toluensulfocloramida) - solucin con agua a 1 litro, hasta obtener una
solucin que contenga 0,010 mg de Se por ml
(PM: 281,7) - C 7 H 7 ClNNaO 2 S . 3H 2 O - Cristales o
(Solucin de selenio estndar). Transferir 1 ml de la
polvo cristalino blanco o dbilmente amarillo, con
solucin resultante a un vaso de precipitados de 100
un leve olor a cloro. Fcilmente soluble en agua y
ml, agregar 2 ml de solucin de cido frmico (1 en
agua hirviendo; soluble en alcohol, con
descomposicin; insoluble en cloroformo y ter. 7) y diluir con agua a 50 ml. Agregar 2 ml de
Almacenar en envases inactnicos de cierre solucin de clorhidrato de 3,3c-diaminobencidina (1
perfecto, en un sitio fro. en 200) y dejar reposar durante 30 a 50 minutos.
Valoracin - Pesar exactamente 400 mg y Ajustar con hidrxido de amonio 6 N a pH entre 6 y
disolver en 50 ml de agua. Agregar, en el siguiente 7. Transferir a una ampolla de decantacin de 125
orden, 10 ml de ioduro de potasio (SR) y 5 ml de ml, agregar 10,0 ml de tolueno y agitar
cido sulfrico diluido. Dejar reposar durante vigorosamente durante 30 segundos: se produce un
10 minutos y titular el iodo liberado con tiosulfato color amarillo caracterstico en la fase de tolueno.
de sodio 0,1 N (SV). Cada mililitro de solucin de Un blanco conteniendo clorhidrato de
tiosulfato de sodio 0,1 N equivale a 14,1 mg de diaminobencidina pero no Solucin de selenio
C 7 H 7 ClNNaO 2 S.3H 2 O. Contiene entre 98,0 y estndar, tratado de la misma manera, no presenta
103,0 % de C 7 H 7 ClNNaO 2 S. 3H 2 O. color en la fase de tolueno.
Compuesto orto - Calentar a ebullicin 2,0 g con Clorhidrato de 2-etilaminopropiofenona -
una mezcla de 10 ml de agua y 1,0 g de (PM: 213,7) - C 6 H 5 COCH(CH 3 )NHC 2 H 5 . HCl -
metabisulfito de sodio, enfriar en hielo y filtrar Emplear uno de grado apropiado.
rpidamente: el residuo, luego de lavarse con tres
Clorhidrato p-fenilendiamina - (Diclorhidrato
porciones de 5 ml de hielo-agua fra y secado al
de 1,4-diaminobenceno) - C 6 H 8 N 2 . 2HCl - (PM:
vaco sobre pentxido de fsforo, funde a una
181,1) - Cristales de color entre blanco y canela
temperatura mayor o igual a 134 C.
plido o polvo cristalino, que se torna de color rojo
Cloruro de sodio - Pesar exactamente 1 g, agitar
por exposicin al aire. Fcilmente soluble en agua;
con 15 ml de alcohol absoluto, filtrar, lavar el
algo soluble en alcohol y ter. Conservar en envases
residuo con dos porciones de 5 ml de alcohol
inactnicos de cierre perfecto.
absoluto y secar a 105 C hasta peso constante: el
Materia insoluble - Disolver 1 g en 10 ml de
residuo representa no ms de 1,5 % del peso
agua: la solucin es clara y completa.
tomado.
Absortividad molar (ver 470.
Clorato de potasio - KClO 3 - (PM: 122,6) - Espectrofotometra ultaravioleta y visible) -
Emplear un reactivo analtico apropiado. Disolver 60 mg en 100,0 ml de agua y mezclar.
Clorhidrato de alprenolol - C 15 H 23 NO 2 . HCl Transferir 2 ml de esta solucin a un matraz aforado
- (PM: 285,8) - Emplear uno de grado apropiado. de 50 ml, completar a volumen con solucin
reguladora pH 7 y mezclar. La absortividad molar
Clorhidrato de clortetraciclina - Emplear de esta solucin, a 239 nm, no es menor de 9000.
Clorhidrato de clortetraciclina.
Clorhidrato de fenilhidracina - (PM: 144,6) -
Clorhidrato de 3,3cc-diaminobencidina - (PM: C 6 H 5 NHNH 2 . HCl - Cristales o polvo blanco o
360,1) - (NH 2 ) 2 C 6 H 3 C 6 H 3 (NH 2 ) 2 . 4HCl - amarillento. Soluble en agua y alcohol. Almacenar
Cristales en forma de aguja, de color blanco a en envases inactnicos de cierre perfecto.
canela amarillento (ocasionalmente prpura). Intervalo de fusin <260> - Entre 242 y 246 C,
Soluble en agua. Estable en solventes orgnicos con un leve oscurecimiento.
pero inestable en solucin acuosa a temperatura Solubilidad - Disolver porciones separadas de
ambiente. Almacenar las soluciones acuosas en un 500 mg en 10 ml de agua y en 10 ml de alcohol,
refrigerador. respectivamente, para obtener soluciones completas
y transparentes o prcticamente transparentes.
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) - Clorhidrato de metilbenzotiazolona-
Someter a ignicin 1 g con 0,5 ml de cido hidrazona - Ver Metilbenzotiazolona-hidrazona,
sulfrico: el residuo no pesa ms de 1 mg (0,1 %). clorhidtato de.
Clorhidrato de fenoxibenzamina - [N-(2- Clorhidrato de 1-naftilamina -
Cloroetil)-N-(1-metil-2-fenoxietil)bencilamina C 10 H 7 NH 2 . HCl (PM: 179,7) - Polvo blanco,
clorhidrato] - C 18 H 22 -ClNO . HCl - (PM: 340,3) - cristalino que se torna azulado por exposicin a la
Polvo blanco, cristalino. luz y al aire. Soluble en agua, alcohol y ter.
Intervalo de fusin <260> - Entre 137 y 140 C. Una solucin (1 en 100) acidificada con cido
Absortividad - Su absortividad (1 %, 1 cm) en el actico, da un color violeta con 5 gotas de cloruro
intervalo de 272 a 290 nm, en solucin de frrico (SR). Una solucin (1 en 40) en cido
cloroformo es aproximadamente 178. actico diluido es incolora y slo algo opalescente.
Clorhidrato de guanidina - CH 5 N 3 . HCl - Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
(PM: 95,5) - Polvo cristalino blanco. Fcilmente Someter a ignicin 200 mg con unas pocas gotas de
cido sulfrico: el peso del residuo es mnimo.
soluble en agua y alcohol.
Intervalo de fusin <260> - Entre 178 y 189 C. Clorhidrato de N-(1-naftil)etilendiamina -
Contenido de cloruro - Disolver C 12 H 14 N 2 . HCl - (PM: 259,2) - Emplear un
aproximadamente 400 mg, exactamente pesados, en reactivo analtico apropiado.
5 ml de agua. Agregar 5 ml de cido actico glacial,
Clorhidrato del ster metlico de p-
50 ml de metanol y 1 gota de eosina (SR). Titular
toluensulfonil-L-arginina - C 14 H 22 N 4 O 4 S . HCl -
con nitrato de plata 0,1N (SV). Cada mililitro de
(PM: 378,9) - Determinar su aptitud segn se
nitrato de plata 0,1 N equivale a 3,545 mg de Cl.
especifica en el ensayo Lmite de tripsina en
Contiene no menos de 36,1 % y no ms de 37,1 %, Quimotripsina.
calculado sobre la sustancia anhidra.
Clorhidrato del ster etlico de N-benzol-L-
Clorhidrato de guanina -
arginina - C 15 H 22 N 4 O 3 . HCl - (PM: 342,8) -
C 5 H 5 N 5 O . HCl . H 2 O - (PM: 205,6) - Polvo Determinar si es apropiado para emplear como
blanco, cristalino. Funde por encima de 250 C, con sustrato segn se especifica en Tripsina
descomposicin. Poco soluble en agua y alcohol;
cristalizada.
soluble en agua acidulada e hidrxido de
sodio (SR). Sus soluciones no son precipitadas por Clorhidrato de piridoxal - C 8 H 9 NO 3 . HCl -
iodo (SR) o por iodomercuriato de potasio (SR) (PM: 203,6) - Cristales o polvo cristalino de un
pero forman un precipitado con trinitrofenol (SR). color entre blanco a ligeramente amarillo. Se
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) - oscurece gradualmente por exposicin al aire o a la
Inapreciable, determinado sobre 100 mg. luz solar. Fcilmente soluble en agua; soluble en
Prdida por secado <680> - Secar a 105 C alcohol; insoluble en acetona, cloroformo y ter.
hasta peso constante: no pierde ms de 10,0 % de su Sus soluciones son cidas (aproximadamente pH 3).
peso. Intervalo de fusin <260> - Entre 171 y 175 C,
con descomposicin.
Clorhidrato de hidroxilamina - NH 2 OH . HCl
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
- (PM: 69,5) - Emplear un reactivo analtico
No ms de 0,1 %.
apropiado.
Prdida por secado <680> - Secar a 105 C
Clorhidrato de metafenilendiamina - durante 2 horas: no pierde ms de 0,5 % de su peso.
(Diclorhidrato de metafenilendiamina) - Contenido de nitrgeno (Ensayo para reactivos)
C 6 H 4 (NH 2 ) 2 . 2HCl -(PM: 181,1) - Polvo cristalino - Determinar por el mtodo de Kjeldahl, empleando
blanco o algo rojizo. Fcilmente soluble en agua. una muestra secada previamente a 105 C durante 2
Expuesto a la luz adquiere un color rojizo. horas: contiene entre 6,7 y 7,1 % de N.
Almacenar en envases inactnicos. Contenido de cloruro - Pesar exactamente
Solubilidad - Una solucin de 1 g en 200 ml de 500 mg, previamente secados a 105 C durante
agua es incolora. 2 horas, y disolver en 50 ml de agua. Agregar 3 ml
[NOTA: la solucin de clorhidrato de de cido ntrico y 50,0 ml de nitrato de plata
metafenilendiamina puede ser decolorada mediante 0,1 N (SV) luego agregar 5 ml de nitrobenceno,
tratamiento con una pequea cantidad de carbn agitar durante aproximadamente 2 minutos, agregar
activado.] sulfato frrico amnico (SR) y titular el nitrato de
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) - plata en exceso con tiocianato de amonio
Someter a ignicin 1 g con 0,5 ml de cido 0,1 N (SV). Cada mililitro de nitrato de plata 0,1 N
sulfrico: el residuo no pesa ms de 1 mg (0,1 %).
equivale a 3,545 mg de Cl. Contiene entre 17,2 y Mantener el inyector y el detector a
17,7 %. aproximadamente 250 y 300 C, respectivamente.
Cloro - Cl 2 - (PM: 70,9) - Gas amarillo verdoso. La temperatura de la columna se mantiene a 150 C
y se programa un ascenso de 10C por minuto hasta
Grado de alta pureza comercialmente disponible por
280 C. Se emplea helio como gas transportador. El
la mayora de los proveedores de gases de la
rea del pico de C 6 H 6 ClN no es menor de 99 % del
especialidad.
rea total.
m-Cloroacetanilida - C 8 H 8 ClNO - (PM: 169,6) ndice de refraccin <230> - Entre 1,592 y
- Grnulos de color beige a casi blanco. 1,596, a 20 C.
Valoracin -
Clorobenceno - C 6 H 5 Cl - (PM: 112,6) -
Fase mvil - Acetonitrilo y agua (22:3).
Lquido transparente, incoloro de olor
Procedimiento - Inyectar aproximadamente
20 l en un cromatgrafo de lquidos (ver 100. caracterstico. Insoluble en agua; soluble en alcohol,
Cromatografa) equipado con un detector a 254 nm cloroformo y ter.
Densidad relativa <160> - Entre 1,100 y 1,111.
y una columna de 15 cm x 4,6 mm con fase
Intervalo de ebullicin (Ensayo para reactivos) -
estacionaria constituida por octadecilsilano
No menos de 95 % destila entre 129 y 131 C.
qumicamente unido a partculas de slice porosa de
Acidez - A 200 ml de metanol agregar rojo de
3 a 10 m de dimetro. El caudal es de
aproximadamente 1,5 ml por minuto. El rea del metilo (SR) y neutralizar con hidrxido de sodio 0,1
pico de C 8 H 8 ClNO no es menor de 99,9 % del rea N, sin tener en cuenta la cantidad de lcali
consumido. Disolver 23 ml de muestra en el
total.
metanol neutralizado y titular con hidrxido de
Intervalo de fusin <260> - Entre 79 y 80 C.
sodio 0,10 N: no se requiere ms de 1,0 ml para
p-Cloroacetanilida - C 8 H 8 ClNO - (PM: 169,6) neutralizar la muestra (aproximadamente 0,015 %
- Cristales o polvo cristalino en forma de agujas, como HCl).
blanco o amarillo plido. Insoluble en agua; soluble Residuo de evaporacin - Evaporar 91 ml en
en alcohol y ter. una placa calefactora y secar a 105 C durante
Solubilidad - 1 g se disuelve en 30 ml de alcohol 30 minutos: el residuo no pesa ms de 10 mg
para formar una solucin transparente. (aproximadamente 0,010 %).
Intervalo de fusin <260> - Entre 178 y 181 C.
4-Clorobenzofenona - C 13 H 9 ClO - (PM: 216,7)
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
- Emplear uno de grado apropiado.
No ms de 0,1 %.
1-Cloroadamantano - C 10 H 15 Cl - (PM: 170,7) 1-Clorobutano - Ver Cloruro de n-butilo.
- Slido cristalino de color blanco. Clorobutanol - (1,1,1-tricloro-2-metil-2-pro-
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en panol) - Emplear un reactivo analtico apropiado.
un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa)
2-Cloroetilamina monoclorhidrato -
equipado con un detector de ionizacin a la llama y (PM: 116,0) - C 2 H 6 ClN . HCl - Polvo casi blanco.
una columna capilar de 30 m 0,25 mm recubierta Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en
con una capa de fase estacionaria constituida por
un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa)
goma de dimetilpolisiloxano de 1 m. Mantener el
equipado con un detector de ionizacin a la llama y
inyector y el detector a aproximadamente 250 y 300
una columna capilar de 30 m 0,25 mm recubierta
C, respectivamente. La temperatura de la columna
con una capa de 1 m de fase estacionaria que
se mantiene a 150 C y se programa un ascenso de consiste en 14 % de cianopropilfenil y 86 % de
10 C por minuto hasta 280 C. Se emplea helio
dimetilpolisiloxano. Mantener el inyector y el
como gas transportador. El rea del pico de
detector a aproximadamente 150 C y 300 C,
C 10 H 15 Cl no es menor de 97,5 % del rea total.
respectivamente. La temperatura de la columna se
3-Cloroanilina - C 6 H 6 ClN - (PM: 127,6) - mantiene a aproximadamente 50 C y se programa
Lquido incoloro a pardo claro. Soluble en cido y un ascenso de 10 C por minuto hasta 200 C. Se
en la mayora de los solventes orgnicos; empleando helio como gas transportador. El rea
prcticamente insoluble en agua. del pico de C 2 H 6 ClN . HCl no es menor de 99 %
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en del rea total.
un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa) Intervalo de fusin <260> - Entre 150 y 246 C.
equipado con un detector de ionizacin a la llama y p-Clorofenol - C 6 H 5 ClO - (PM: 128,6) - Slido
una columna capilar de 30 m 0,25 mm recubierta
cristalino blanco a amarillo plido, de olor
con una capa de 1 m de fase estacionaria
constituida por goma de dimetilpolisiloxano.
caracterstico. Moderadamente soluble en agua; a 250 C. Contiene no menos de 98 % de C 10 H 7 Cl,
muy soluble en acetona, ter y metanol. siendo 2-cloronaftaleno no ms de 2 %.
Valoracin - Transferir aproximadamente ndice de refraccin - Entre 1,6320 y 1,6340, a
200 mg, exactamente pesados, a un vaso de 20 C.
precipitados de 100 ml, agregar 25 ml de agua,
2-Cloro-4-nitroanilina - C 6 H 5 ClN 2 O 2 -
agitar por rotacin hasta disolver y agregar gota a
(PM: 172,6) - Polvo cristalino amarillo.
gota, suficiente solucin de hidrxido de sodio para
Fcilmente soluble en metanol. Funde
asegurar la completa disolucin de la muestra. aproximadamente a 107 C. Conservar en envases
Transferir la solucin a un erlenmeyer con tapn de inactnicos.
vidrio de 500 ml, emplear agua para lavar el vaso
de precipitados y diluir con agua a Cloroplatinato de potasio - K 2 PtCl 6 -
aproximadamente 100 ml. Agregar 25,0 ml de (PM: 486,0) - Polvo pesado, amarillo. Soluble en
bromurobromato de potasio 0,1 N (SV) y 10 ml de cido clorhdrico y cido ntrico.
cido clorhdrico, inmediatamente insertar el tapn Valoracin - Pesar exactamente alrededor de
en el erlenmeyer y agitar por rotacin 300 mg, transferirlos a un vaso de precipitados de
vigorosamente durante 2 a 3 minutos. Remover el 600 ml, agregar 20 ml de cido clorhdrico y
tapn, agregar rpidamente 5 ml de solucin de calentar suavemente, si fuera necesario, para lograr
ioduro de potasio (1 en 5), teniendo cuidado de la disolucin completa. Agregar granallas de cinc,
evitar prdida de bromo, insertar de inmediato el lentamente, hasta que no se disuelvan ms. Agregar
tapn y agitar vigorosamente durante 2 ml de cido clorhdrico y digerir durante 1 hora en
aproximadamente 1 minuto. Lavar el tapn y el un bao de vapor para coagular el platino reducido.
cuello del erlenmeyer con agua. Titular con Agregar ms cido, si fuera necesario, para asegurar
tiosulfato de sodio 0,1 N (SV), agregando 3 ml de que se haya disuelto todo el cinc. Filtrar a travs de
almidn (SR) cerca del punto final. Cada mililitro papel, lavando el vaso de precipitados con cido
de bromuro-bromato de potasio 0,1 N equivale a clorhdrico diluido hasta que todo el precipitado sea
6,43 mg de C 6 H 5 OCl. Contiene no menos de 99 %. transferido al filtro luego lavar con varias porciones
Intervalo de fusin <260> - Entre 42 y 44 C. de agua. Incinerar el filtro en un crisol previamente
Intervalo de ebullicin (Ensayo para reactivos) - pesado a 800 25 C hasta peso constante. Cada
No menos de 90 % destila entre 218,5 y 221,5 C. miligramo de residuo equivale a 1,0 mg de platino.
Contiene no menos de 40 %.
Cloroformo - CHCl 3 - (PM: 119,4) - Emplear
un reactivo analtico apropiado. 5-Cloro saliclico, cido - Ver cido 5-cloro
saliclico.
Cloroformo libre de alcohol - Emplear uno de
grado apropiado. Clorotrimetilsilano - C 3 H 9 ClSi - (PM: 108,6) -
Lquido transparente, incoloro a amarillo claro.
Cloroformo, metil - Ver Metilcloroformo.
Emite gases cuando se expone al aire hmedo.
1-Cloronaftaleno - (Alfacloronaftaleno) - (PM: Precaucin - Reacciona violentamente con
162,6) - C 10 H 7 Cl - Lquido incoloro a amarillo agua, alcoholes y otros dadores de hidrgeno.
claro. Almacenar en envases de vidrio de cierre perfecto.
Valoracin - Emplear un cromatgrafo de gases ndice de refraccin - Entre 1,3850 y 1,3890, a
(ver 100. Cromatografa) equipado con un detector 20 C.
de ionizacin a la llama y una columna de acero
Cloruro cobaltoso - (Cloruro de cobalto) -
inoxidable de 1,83 m 3,2 mm con una fase (PM: 237,9) - CoCl 2 . 6H 2 O -Emplear un reactivo
estacionaria constituida por goma de
analtico apropiado.
dimetilpolisiloxano al 7 % sobre soporte constituido
por tierra silcea para cromatografa de gases la cual Cloruro cprico - CuCl 2 . H 2 O - (PM: 170,5) -
ha sido calcinada mezclando diatomea con Na 2 CO 3 Cristales delicuescentes verde azulados. Fcilmente
y calcinada a 900 C [NOTA: la tierra silcea se soluble en agua; soluble en alcohol; poco soluble en
lava con cido luego se lava con agua hasta ter.
neutralidad, pero no se lava con bases. La tierra Materia insoluble (Ensayo para reactivos) - No
silcea puede ser silanizada al tratarla con un agente ms de 1,0 mg, determinado sobre 10 g (0,010 %).
como dimetildiclorosilano para bloquear los grupos Retener el filtrado y los lavados combinados para el
silanoles superficiales]. Mantener el inyector y el ensayo de Sulfato.
detector a aproximadamente 250 y 310 C, Nitrato - Disolver 500 mg en 30 ml de cido
respectivamente. La temperatura de la columna se sulfrico diluido (1 en 30). Lentamente agregar la
programa para que aumente 10 C por minuto de 50 solucin, con agitacin constante, a 20 ml de
solucin de hidrxido de sodio (1 en 10) y digerir Intervalo de fusin <260> - Cuando se seca
en un bao de vapor durante 15 minutos. Enfriar, previamente a 110 C en un tubo capilar durante
diluir con agua a 50 ml y filtrar. A 10 ml del 1 hora, funde entre 149 y 152 C.
filtrado transparente, agregar 0,05 ml de ndigo Reaccin - Una solucin 1 en 10 es neutra frente
carmn (SR) seguido de 10ml de cido sulfrico: el al tornasol.
color azul no desaparece completamente dentro de Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
5 minutos (aproximadamente 0,15 %). Inapreciable, determinado sobre 200 mg.
Sulfato (Ensayo para reactivos) - Mtodo II. El Solubilidad en alcohol - Una solucin de
filtrado y los lavados combinados retenidos del 500 mg en 5 ml de alcohol es completa e incolora.
ensayo para Materia insoluble no producen ms de Porcentaje de acetilo (CH 3 CO) - Pesar
1,2 mg de residuo (0,005 %). exactamente 400 mg, previamente secados a 105 C
Sustancias no precipitadas por sulfuro de durante 3 horas, y disolver en 15 ml de agua en un
hidrgeno - Disolver 2 g en 100 ml de agua, erlenmeyer con tapn de vidrio. Agregar 40,0 ml de
agregar 1 ml de cido sulfrico, calentar la solucin hidrxido de sodio 0,1 N (SV), calentar en un bao
a 70 C y pasar sulfuro de hidrgeno a travs de la de vapor durante 30 minutos. Insertar el tapn, dejar
solucin hasta que el cobre precipite enfriar, agregar fenolftalena (SR) y titular el exceso
completamente. Dejar que el precipitado sedimente de lcali con cido sulfrico 0,1 N (SV).
y filtrar sin lavar. Transferir 50,0 ml del filtrado a Determinar la normalidad exacta del hidrxido de
un cristalizador previamente pesado y evaporar en sodio 0,1 N titulando 40,0 ml, una vez tratados de la
un bao de vapor hasta sequedad. Suavemente misma manera que en el ensayo. Cada mililitro de
calcinar el cristalizador sobre una llama y luego a hidrxido de sodio 0,1 N equivale a 4,305 mg de
800 25 C hasta peso constante. Enfriar y pesar: CH 3 CO. Contiene entre 23,2 y 24,2 %.
el residuo no pesa ms de 1,0 mg (0,1%). Retener el Porcentaje de cloro (Cl) - Pesar exactamente
residuo para el ensayo de Hierro. 400 mg, previamente secados a 105 C durante
Hierro <580> - Al residuo retenido del ensayo 3 horas, y disolver en 50 ml de agua en un
anterior, agregar 2 ml de cido clorhdrico, 2 ml de erlenmeyer de 125 ml con tapn de vidrio. Agregar
agua y 0,05 ml de cido ntrico. Evaporar mediante agitacin 30,0 ml de nitrato de plata 0,1 N
lentamente en un bao de vapor hasta sequedad (SV), a continuacin agregar 5 ml de cido ntrico y
luego tomar el residuo en 1 ml de cido clorhdrico 5 ml de nitrobenceno, agitar, agregar 2 ml de
y 10 ml de agua. Diluir con agua a 100 ml y sulfato frrico amnico (SR) y titular el nitrato de
mezclar. A 20 ml de la dilucin agregar 10 ml de plata en exceso con tiocianato de amonio 0,1 N
agua y mezclar: 10 ml de esta solucin no presenta (SV). Cada mililitro de nitrato de plata 0,1 N (SV)
ms de 0,01 mg de Fe (0,015 %). Retener la equivale a 3,545 mg de Cl. Contiene entre 19,3 y
dilucin del residuo para el ensayo de Otros 19,8 % de Cl.
metales. Cloruro de acetilo - CH 3 COCl - (PM: 78,5) -
Otros metales - A 20 ml de la solucin del Lquido transparente, incoloro, de fuerte olor acre.
residuo retenida del ensayo para Hierro agregar un Se descompone en presencia de agua y alcohol.
leve exceso de hidrxido de amonio, calentar a Miscible con cloroformo. Densidad relativa: aprox.
ebullicin la solucin durante 1 minuto, filtrar y 1,1.
lavar el residuo con agua hasta que el filtrado y los Intervalo de ebullicin (Ensayo para reactivos) -
lavados combinados midan 20 ml. Neutralizar el No menos de 94 % destila entre 49 y 53 C.
filtrado con cido clorhdrico diluido, diluir con Residuo de evaporacin - Evaporar 10 ml en un
agua a 25 ml y agregar 0,15 ml de hidrxido de bao de vapor y secar a 105 C durante 1 hora: el
amonio y 1 ml de sulfuro de hidrgeno (SR): residuo no pesa ms de 2,5 mg (aproximadamente
cualquier color producido no es ms oscuro que el 0,02 %).
de un control que contiene, en el mismo volumen, Miscibilidad con cloroformo - Porciones
0,15 ml de hidrxido de amonio, 1 ml de sulfuro de separadas de 5 ml proporcionan soluciones claras
hidrgeno (SR) y 0,02 mg de Ni (0,01 % como Ni). con 20 ml de cloroformo.
Cloruro de acetilcolina - (PM: 181,7) - Solubilidad - Colocar 5 ml en una probeta de
[CH 3 COOCH 2 CH 2 N(CH 3 )]Cl - Polvo blanco 50 ml y agregar con cuidado, gota a gota,
cristalino, inodoro o casi inodoro. Muy aproximadamente 3 ml de agua, agitando luego de
delicuescente. Muy soluble en agua; fcilmente cada agregado hasta que la reaccin se complete,
soluble en alcohol. luego diluir con agua a 50 ml: la solucin es
transparente.
Compuestos fosforados (Ensayo para reactivos) Cloruro de n-butilo - (1-Clorobutano) -
- Agregar 3 ml de cido ntrico a 5 ml de la solucin C 4 H 9 Cl - (PM: 92,6) - Lquido transparente,
obtenida en el ensayo para Solubilidad y evaporar incoloro, voltil, de olor leve, caracterstico.
en un bao de vapor hasta sequedad. El residuo, Altamente inflamable. Prcticamente insoluble en
disuelto en 20 ml de agua, no presenta ms de 0,03 agua. Miscible con alcohol y ter.
mg de PO 4 (0,02 % como P). Valoracin - Analizar por cromatografa gas-
Metales pesados - Diluir 10 ml de la solucin lquido empleando un cromatgrafo de gases (ver
obtenida en el ensayo para Solubilidad con 30 ml de 100. Cromatografa) equipado con un detector de
agua, agregar 10 ml de sulfuro de hidrgeno (SR) y ionizacin a la llama y una columna de acero
alcalinizar con amonaco (SR): no se produce inoxidable de 1,8 m 3 mm con una fase
ningn cambio notorio en el color. estacionaria de polietilenglicol (p.m.p
aproximadamente 15.000 [NOTA: un compuesto de
Cloruro de amonio - NH 4 Cl - (PM: 53,5) -
polietilenglicol de alto peso molecular con un
Emplear un reactivo analtico apropiado.
ligando diepxido]) sobre soporte constituido por
Cloruro de bario - BaCl 2 . 2H 2 O - (PM: 244,3) tierra silcea para cromatografa de gases la cual ha
- Emplear un reactivo analtico apropiado. sido calcinada mezclando diatomea con Na 2 CO 3 y
Cloruro de bario anhidro - BaCl 2 - calcinada a 900 C [NOTA: la tierra silcea se lava
(PM: 208,2) - Puede obtenerse secando cloruro de con cido luego se lava con agua hasta neutralidad,
bario en capas delgadas a 125 C hasta que la pero no se lava con bases. La tierra silcea puede ser
prdida de peso entre dos periodos de secado de silanizada al tratarla con un agente como
3 horas sucesivos no sea mayor de 1 %. dimetildiclorosilano para bloquear los grupos
silanoles superficiales]. Mantener el detector y el
Cloruro de bario dihidrato - Emplear cloruro inyector a aproximadamente 310 y 230 C,
de bario. respectivamente. La temperatura de la columna se
Cloruro de bencenosulfonilo - C 6 H 5 SO 2 Cl - programa para aumentar 10 C por minuto de 35 a
(PM: 176,6) - Lquido incoloro, aceitoso. Insoluble 150 C. Se emplea helio como gas transportador
en agua fra; soluble en alcohol y ter. Solidifica a 0 con un caudal de aproximadamente 40 ml por
C. minuto. Presenta una pureza de no menos de 98 %.
Intervalo de fusin <260> - Entre 14 y 17 C. Intervalo de ebullicin <240> - Entre 76 y
Intervalo de ebullicin (Ensayo para reactivos) - 80 C, con un intervalo de fusin no mayor de 2 C.
Entre 251 y 252 C. ndice de refraccin - Entre 1,4015 y 1,4035, a
20 C.
Cloruro de benciltrimetilamonio - Acidez - Agregar fenolftalena (SR) a 75 ml y
(PM: 185,7) C 6 H 5 CH 2 N(CH 3 ) 3 Cl - Disponible titular con hidrxido de potasio 0,1 N en metanol
como una solucin acuosa al 60 %. Esta solucin es hasta color rosado dbil persistente, con agitacin,
transparente e incolora o algo amarillenta y tiene un durante 1,5 segundos: no se requieren ms de
leve olor a amina. 0,91 ml (aproximadamente 0,005 % como HCl).
Valoracin - Transferir 2 ml a un matraz Agua <120> - Titulacin volumtrica directa.
aforado de 50 ml y completar a volumen con agua. No ms de 0,02 %.
Transferir 20 ml de la solucin en un erlenmeyer de Residuo despus de la evaporacin - Evaporar
125 ml, agregar aproximadamente 30 ml de agua, aproximadamente 60 ml (50 g), exactamente
luego agregar 0,25 ml de diclorofluorescena (SR) y pesados, en una cpsula de platino, previamente
titular con nitrato de plata 0,1 N (SV). pesada, en un bao de vapor y secar a 105 C
Cada mililitro de nitrato de plata 0,1 N equivale durante 1 hora: no contiene ms de 0,005 %.
a 18,57 mg de C 6 H 5 CH 2 N(CH 3 ) 3 Cl. Contiene
entre 59,5 y 60,5 %. Cloruro de calcio - CaCl 2 . 2H 2 O -
(PM: 147,0) - Emplear cloruro de calcio dihidrato
Cloruro de benzalconio - Emplear Cloruro de de grado apropiado.
benzalconio.
Cloruro de calcio anhidro (para secado) -
Cloruro de benzolo - C 6 H 5 COCl - CaCl 2 - (PM: 111,0) - Emplear un reactivo
(PM: 140,6) - Emplear un reactivo analtico analtico apropiado.
apropiado.
Cloruro de cesio - CsCl - (PM: 168,4) - Polvo
Cloruro de cobalto - CoCl 2 . 6H 2 O - blanco. Muy soluble en agua; fcilmente soluble en
(PM: 237,9) - Polvo cristalino rojo o cristales rojo metanol; prcticamente insoluble en acetona.
oscuro. Muy soluble en agua; soluble en alcohol.
Cloruro de cetiltrimetilamonio al 25 % en Cloruro de litio - LiCl - (PM: 42,4) - Cristales
agua - C 19 H 42 ClN - (PM: 320,0) - Emplear uno de o grnulos blancos, delicuescentes. Fcilmente
grado apropiado. soluble en agua; soluble en acetona, alcohol,
alcohol amlico y ter. Conservar en envases de
Cloruro de cinc anhidro pulverizado -
cierre perfecto.
Emplear Cloruro de cinc secado y pulverizado.
Valoracin - Disolver aproximadamente 1,3 g,
Cloruro de colina - HOCH 2 CH 2 N(CH 3 ) 3 Cl - previamente secados a 120 C durante 1 hora y
(PM: 139,6) - Cristales blancos o polvo cristalino. exactamente pesados, en agua para obtener 50,0 ml.
Muy soluble en agua. Es higroscpico. Almacenar Transferir 5 ml de la solucin a un erlenmeyer de
en envases de cierre perfecto. 250 ml y agregar 5 ml de cido actico glacial, 50
Valoracin - Transferir aproximadamente ml de metanol y 2 gotas de eosina (SR). Titular
100 mg, previamente secados a 105 C durante lentamente con nitrato de plata 0,1 N (SV),
2 horas y exactamente pesados, a un vaso de agregndolo gota a gota hacia el final, hasta que se
precipitados, agregar 20 ml de agua y 1 gota de torne de un color rojo intenso algo fluorescente.
solucin de cloruro de aluminio (1 en 10) y Cada mililitro de nitrato de plata 0,1 N equivale a
mezclar. Agregar lentamente 20 ml de una solucin 4,239 mg de LiCl. Contiene no menos de 98 %.
de tetrafenilborato de sodio recientemente Neutralidad - Disolver 2 g en 20 ml de agua y
preparada y filtrada (1 en 50) y dejar la mezcla en agregar 1 gota de rojo de metilo (SR): cualquier
reposo durante 30 minutos agitando ocasionalmente color rojo producido vira al amarillo con el
por rotacin. Filtrar a travs de un filtro de vidrio agregado de no ms de 0,30 ml de hidrxido de
sinterizado de porosidad media y lavar el vaso de sodio 0,020 N. Cualquier color amarillo producido
precipitados y el precipitado con cuatro porciones vira a rosado con el agregado de no ms de 0,30 ml
de 10 ml de agua. El peso del precipitado, de cido clorhdrico 0,020 N.
determinado luego de secar a 105 C durante 2 Materia insoluble (Ensayo para reactivos) - No
horas y multiplicado por 0,3298, da el peso ms de 1,0 mg, determinado sobre 10 g (0,010 %).
equivalente de C 5 H 14 ClNO. Contiene no menos de Nitrato (Ensayo para reactivos) - 1 g disuelto en
99,5 %. 2 ml de agua no presenta ms color que el que se
Residuo de ignicin <270> - No ms de 0,1 %. observa en 1,0 ml de Solucin de nitrato estndar
Cloruro de dimetiletil(3-hidroxifenil)amonio - (0,001 %).
Emplear Cloruro de edrofonio. Fosfato (Ensayo para reactivos) - 2 g no
presentan ms de 0,02 mg de PO 4 (0,001 %).
Cloruro de 3,5-dinitrobenzolo - (PM: 230,6) - Sulfato (Ensayo para reactivos) - Mtodo I. 1 g
(NO 2 ) 2 C 6 H 3 COCl- Polvo cristalino amarillo presenta no ms de 0,2 mg de SO 4 (0,02 %).
plido. Fcilmente soluble en soluciones de Amonio -
hidrxido de sodio diluidas; soluble en alcohol. Solucin de amonio estndar - Disolver 296 mg
Intervalo de fusin <260> - Entre 67 y 69 C. de cloruro de amonio en agua para obtener 1 litro.
Solubilidad en hidrxido de sodio - Una Esta solucin contiene el equivalente de 0,1 mg de
solucin de 500 mg en 25 ml de hidrxido de sodio amonio (NH 4 ) por ml.
1 N es transparente o no ms que dbilmente turbia. Procedimiento - A una solucin de 900 mg en
Residuo de ignicin - Someter a ignicin 1 g con 50 ml de agua, agregar 1 ml de solucin de
0,5 ml de cido sulfrico: el residuo no pesa ms de hidrxido de sodio (1 en 10) y 2 ml de
1 mg (0,1 %). iodomercuriato de potasio alcalino (SR): no se
Cloruro de etileno - (1,2-Dicloroetano) - produce ms color que el producido por 0,3 ml de
C 2 H 4 Cl 2 - (PM: 99,0) - Lquido transparente e Solucin de amonio estndar, diluido con agua a 50
incoloro: Miscible con ter. Soluble en 120 partes ml y tratado en forma similar (0,003 %).
de agua aproximadamente; soluble en 2 partes de Bario - Disolver 2 g en 20 ml de agua, filtrar y
alcohol. fraccionar el filtrado en dos porciones iguales. A
Densidad relativa <160> - Aprox. 1,250. una porcin agregar 1 ml de cido sulfrico diluido
Intervalo de ebullicin (Ensayo para reactivos) - y al otro agregar 1 ml de agua: luego de 2 horas, las
No menos de 95 % destila entre 82 y 84 C. dos porciones estn igualmente claras.
Calcio (Ensayo para reactivos) - Disolver 2,50 g
Cloruro de 3-hidroxifenildimetiletil amonio - en agua para obtener 100 ml (Solucin muestra).
[Cloruro de dimetiletil(3-hidroxifenil)amonio] - Disolver otros 2,50 g en una mezcla de 5,00 ml de
Emplear Cloruro de edrofonio. Solucin de calcio estndar y agua para obtener
Cloruro de lantano - LaCl 3 - (PM: 245,2) - 100ml (Solucin control). Determinar el calcio
Emplear un reactivo analtico apropiado. segn se indica en Espectrofotometra de absorcin
y emisin atmica para reactivos (Ensayo para Valoracin - Disolver 80 mg, exactamente
reactivos) (0,02%). pesados, en 10 ml de cido clorhdrico diluido,
Metales pesados (Ensayo para reactivos) - No diluir con agua a 50 ml y agregar 25 ml de una
ms de 0,001 %. solucin 1 en 100 de dimetilglioxima en alcohol.
Hierro <580> - Una solucin de 500 mg en Dejar reposar durante 1 hora y filtrar. Controlar la
47 ml de agua que contiene 2 ml de cido completa precipitacin con la solucin de
clorhdrico no presenta ms de 0,01 mg de Fe dimetilglioxima. Incinerar el precipitado en un
(0,002 %). crisol de platino, previamente pesado, a 850 C
Magnesio - durante 2 horas, enfriar y pesar el paladio. El peso
Solucin de magnesio estndar - Disolver del residuo no es menor de 59,0 % del peso de la
1,014 g de cristales transparentes no eflorecidos de muestra.
sulfato de magnesio en agua para obtener 1 litro.
Cloruro de potasio - KCl - (PM: 74,6) -
Esta solucin contiene el equivalente de 0,1 mg de
Emplear un reactivo analtico apropiado.
magnesio (Mg) por ml.
Procedimiento - A una solucin de 1 g en 45 ml Cloruro de sodio - NaCl - (PM: 58,4) -
de agua, agregar 0,5 ml de solucin de amarillo de Emplear un reactivo analtico apropiado.
tiazol (1 en 10.000) y 5 ml de solucin de hidrxido Cloruro de tetrametilamonio - (CH 3 ) 4 NCl -
de sodio (1 en 10): el color rosado que se produce (PM: 109,6) - Cristales incoloros. Soluble en agua y
no es ms intenso que el producido por 1 ml de alcohol; insoluble en cloroformo.
Solucin de magnesio estndar, diluida con agua a Valoracin - Transferir aproximadamente
45 ml y tratada en forma similar (0,1 %). 200 mg, exactamente pesados, a un vaso de
Potasio (Ensayo para reactivos) - Disolver 5,0 g precipitados, agregar 50 ml de agua y 10 ml de
en agua para obtener 100 ml (Solucin muestra). cido ntrico diluido, agitar por rotacin hasta
Disolver otros 5,0 g en una mezcla de 1,00 ml de disolver la muestra, agregar 50,0 ml de nitrato de
Solucin de potasio estndar y agua para obtener plata 0,1 N (SV) y mezclar. Agregar 2 ml de sulfato
100 ml (Solucin control). Determinar el potasio frrico amnico (SR) y 5 ml de nitrobenceno, agitar
segn se indica en Fotometra de llama para y titular el exceso de nitrato de plata con tiocianato
reactivos (Ensayo para reactivos) (0,01 %). de amonio 0,1 N (SV). Cada mililitro de nitrato de
Sodio (Ensayo para reactivos) - Disolver 200 mg plata 0,1 N equivale a 10,96 mg de (CH 3 ) 4 NCl.
en agua para obtener 100 ml (Solucin muestra). Contiene no menos de 98 %.
Disolver otros 200 mg en una mezcla de 20 ml de
Solucin de sodio estndar y agua para obtener 100 Cloruro de trifeniltetrazolio - C 19 H 15 ClN 4 -
ml (Solucin control). Determinar el sodio segn se (PM: 334,8) - Polvo cristalino blanco a amarillento.
indica en Fotometra de llama para reactivos Fcilmente soluble en agua y alcohol; poco soluble
(Ensayo para reactivos) (0,1 %). en acetona; insoluble en ter. Contiene
generalmente solvente de cristalizacin y cuando se
Cloruro de magnesio - MgCl 2 . 6H 2 O - seca a 105 C funde aproximadamente a 240 C,
(PM: 203,3) - Emplear un reactivo analtico con descomposicin.
apropiado. Solubilidad - Porciones separadas de 100 mg se
Cloruro de metileno - (Diclorometano) - disuelven completamente en 10 ml de agua y en
CH 2 Cl 2 - (PM: 84,9) - Emplear un reactivo 10 ml de alcohol, respectivamente, dando
analtico apropiado. soluciones transparentes o prcticamente
transparentes.
Cloruro de nitrobenzoilo - C 7 H 4 ClNO 3 - Prdida por secado <680> - Secar a 105 C
(PM: 185,6) - Masa cristalizada o cristales hasta peso constante: no pierde ms de 5,0 % de su
amarillos que se descomponen el aire hmedo.
peso.
Muy soluble en soluciones de hidrxido de sodio
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
dando una solucin amarilla-anaranjada.
Inapreciable, determinado sobre 100 mg.
Punto de fusin - Aprox. 72 C.
Sensibilidad - Disolver 10 mg en 10 ml de
Cloruro de oro - (cido clorurico) - alcohol absoluto (A). Luego disolver 10 mg de
HAuCl 4 . 3H 2 O - (PM:393,8) - Emplear un reactivo dextrosa en 20 ml de alcohol absoluto (B). A 0,2
analtico apropiado. ml de B agregar 1 ml de alcohol absoluto y 0,5 ml
Cloruro de paladio - PdCl 2 - (PM: 177,3) - de hidrxido de tetrametilamonio (SR) diluido
Polvo cristalino marrn. Soluble en agua, alcohol, (1 volumen se diluye con 9 volmenes de alcohol
acetona y cido clorhdrico diluido. absoluto) luego agregar 0,2 ml de A: un color rojo
intenso se desarrolla dentro de los 10 minutos.
Cloruro de trifluorvinilo (polmero) - Emplear Cortisona - C 21 H 28 O 5 - (PM: 360,4) - Polvo
un reactivo analtico apropiado. blanco, cristalino. Prcticamente insoluble en agua;
Cloruro de vinilo - C 2 H 3 Cl - (PM: 62,5) - Gas moderadamente soluble en alcohol y acetona.
Funde aproximadamente a 220 C, con
incoloro. Poco soluble en solventes orgnicos.
descomposicin.
Cloruro de trimetilacetohidrazida amonio - Mximo de absorcin - El espectro de absorcin
(Cloruro de betan hidracida; Reactivo de ultravioleta de una solucin 1 en 100.000 en alcohol
Girard T) [(CH 3 ) 3 N+CH 2 CONHNH 2 ]Cl - presenta un mximo aproximadamente a 238 nm.
(PM: 167,6) - Cristales incoloros o blancos. Rotacin especfica <170> - Aproximadamente
Fcilmente soluble en agua; soluble en alcohol; + 209, determinada en una solucin 1 en 100 en
insoluble en cloroformo y ter. Higroscpico. alcohol.
Intervalo de fusin <260> - Entre 185 y 192 C,
determinado luego de recristalizacin de alcohol Cromato de potasio - K 2 CrO 4 - (PM: 194,2) -
caliente, si fuera necesario. Emplear un reactivo analtico apropiado.
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) - Cromatografa, celulosa con indicador de
Someter a ignicin 1 g con 0,5 ml de cido fluorescencia para - Ver Celulosa con indicador de
sulfrico: el residuo no pesa ms de 10 mg (1 %). fluorescencia para cromatografa.
Cloruro estaoso - SnCl 2 . 2H 2 O - (PM: 225,7) Cromatografa, ter de petrleo para - Ver
- Emplear un reactivo analtico apropiado. ter de petrleo para cromatografa.
Cloruro frrico - FeCl 3 . 6H 2 O - (PM: 270,3) - Cromatografa, gel de slice para - Ver Gel de
Emplear un reactivo analtico apropiado. slice para cromatografa.
Cloruro mercrico - HgCl 2 - (PM: 271,5) - Cromatografa, gel de slice con indicador de
Emplear un reactivo analtico apropiado. fluorescencia para - Ver Gel de slice con
indicador de fluorescencia para cromatografa.
Cloruro platnico - (cido cloroplatnico) -
H 2 PtCl 6 . 6H 2 O - (PM: 517,9) - Emplear cido Cromatografa, n-heptano para - Ver n-
cloroplatnico de grado apropiado. Heptano para cromatografa.
Cromatografa, xido de magnesio para - Ver
Cloruro talioso - TlCl - (PM: 239,8) - Polvo
xido de magnesio para cromatografa.
fino, blanco, cristalino. Poco soluble en agua fra;
moderadamente soluble en agua en ebullicin; Cromatografa, tierra de Fuller para - Ver
insoluble en alcohol. Precaucin - Venenoso; Tierra de Fuller para cromatografa.
emplear con ventilacin apropiada. Cromatografa, tierra silcea para - Ver Tierra
Valoracin - Disolver aproximadamente silcea para cromatografa.
500 mg, exactamente pesados, en una mezcla de 80 Cromatografa, tierra silcea silanizada para
ml de agua y 0,5 ml de cido sulfrico. Cuando la - Ver Tierra silcea silanizada para cromatografa.
disolucin es completa, agregar 20 ml de cido
Cromazurol -
clorhdrico. Calentar a 60 C y mantener esta
(5-[(3-Carboxilato-5-metil-4-oxociclohexa-2,5-dien
temperatura mientras se titula con sulfato crico 0,1
-1-ilideno)(2,6-dicloro-3-sulfonatofenil)metil]-2-hid
N (SV), determinando el punto final
roxi-3-metilbenzoato de trisodio) -
potenciomtricamente, empleando electrodos de
C 23 H 13 Cl 2 Na 3 O 9 S - (PM: 605,0) - Polvo negro
plata-cloruro de plata y platino. Cada mililitro de
pardusco, soluble en agua, poco soluble en alcohol.
sulfato crico 0,1 N equivale a 11,99 mg de TlCl.
Contiene no menos de 99 %. Cromotropato de sodio - Ver cido
cromotrpico.
Cobaltinitrito de sodio - Na 3 Co(NO 2 ) 6 -
(PM: 403,9) - Emplear un reactivo analtico Cromotropato disdico - (Sal disdica del
apropiado. cido 4,5-dihidroxi-2,7-naftalenodisulfnico) -
C 10 H 6 O 8 S 2 Na 2 . 2H 2 O - (PM: 400,3) - Emplear un
Cobalto, cloruro de - Ver Cloruro de cobalto.
reactivo analtico apropiado.
Cobre - Cu - (PA: 63,55) - Emplear un reactivo
analtico apropiado.
Colestano - C 27 H 48 - (PM: 372,7) - Emplear un
reactivo analtico apropiado.
Colesterilo, n-heptilato - Emplear un reactivo
analtico apropiado.
D
Factor X a (Factor X Activado) para el ensayo Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en
de antifactor X a - El Factor X a es la enzima prote- un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa)
oltica obtenida a partir del plasma bovino, que equipado con un detector de ionizacin a la llama y
escinde a la protrombina para formar trombina. Es una columna capilar de 30 m 0,25 mm recubierta
una glicoprotena que tiene un peso molecular de por una fase estacionaria constituida por aceite de
40.000. Por electroforesis en gel (ver 300. Electro- dimetilpolisiloxano. Mantener el inyector y el de-
foresis) la protena principal de inters constituye tector a aproximadamente 250 y 310 C, respecti-
no menos de 90 % de la cantidad total de zonas vamente. La temperatura de la columna se mantiene
proteicas. Para emplear como un reactivo en el a 150 C y se programa un ascenso de 15 C por
ensayo de Antifactor X a , la enzima es activada por minuto hasta 250 C. Se emplea helio como gas
el veneno de serpiente de Russel, se retira el agente transportador. El rea del pico de 3-fenilfenol no es
activante mediante cromatografa, la preparacin se menor de 98 % del rea total.
estabiliza con albmina bovina y se liofiliza. Intervalo de fusin <260> - Entre 76 y 79 C.
Actividad especfica - No menos de 40 UI de
Fenil isocianato - C 6 H 5 NCO - (PM: 119,1) -
Factor X a por mg de protena, cuando se ensaya del
Lquido transparente, incoloro o amarillo plido de
siguiente modo: mezclar 0,1 ml de una solucin
volatilidad media.
saturada de cefalina derivada de tromboplastina Precaucin - El Fenil isocianato es un violento
cerebral de conejos, equivalente a la tromboplastina lacrimatorio y el vapor es altamente txico. Mani-
de aproximadamente 20 mg de polvo de cerebro-
pular con cuidado.
acetona de conejo por ml, en plasma bovino y
Valoracin - Transferir 250 mg, exactamente
0,1 ml de cloruro de calcio 0,025 M; agregar de
pesados, a un erlenmeyer de 250 ml con tapn de
inmediato 0,1 ml de la solucin de Factor X a , co- vidrio. Tomar precauciones para evitar prdidas por
rrespondiente a una concentracin de 0,01 mg de volatilizacin y evitar la respiracin del vapor.
protena especfica por ml, e incubar a 37 C: pro-
Agregar 20 ml de solucin de butilamina (25 g de
duce un cogulo en 15 segundos.
butilamina, previamente secados sobre pellets de
Ausencia de trombina - Una solucin que con-
hidrxido de potasio, diluidos a 1 litro con dioxa-
tenga 3,0 UI de Factor X a por ml en Solucin regu-
no), insertar el tapn en el erlenmeyer y dejar repo-
ladora de pH 8,4 (ver Heparina Sdica) se incuba a sar durante 15 minutos. Agregar unas pocas gotas
20 C en ausencia de iones calcio: no se produce de rojo de metilo (SR) y 25 ml de agua y titular el
exceso de coagulacin del fibringeno puro dentro
exceso de amina con cido sulfrico 0,1 N (SV).
de un periodo de 24 horas.
Realizar una determinacin con un blanco emple-
Fenacetina - Emplear uno de grado apropiado. ando 20 ml de la solucin de butilamina (ver Titula-
1,10-Fenantrolina - (Ortofenantrolina) - ciones residuales en 780. Volumetra). Restar el
volumen de cido sulfrico 0,1 N consumido en la
(PM: 198,2) - C 12 H 8 N 2 . H 2 O - Emplear un reacti-
vo analtico apropiado. titulacin de la muestra de aqul consumido en la
titulacin del blanco. Cada mililitro de cido sulf-
Fenantrolina, clorhidrato de - rico 0,1 N, representando por esta diferencia, equi-
C 12 H 9 ClN 2 . H 2 O - (PM: 234,7) - Polvo cristalino vale a 11,91 mg de C 6 H 5 NCO. Contiene no menos
blanco o casi blanco. Fcilmente soluble en agua; de 97,0 % de C 6 H 5 NCO.
soluble en alcohol.
Fenilhidracina - C 6 H 5 NHNH 2 - (PM: 108,1) -
Punto de fusin- Aprox. 215 C, con descom-
posicin. Lquido incoloro o ligeramente amarillento, alta-
mente refractivo. [NOTA: proteger de la luz y desti-
Fenazona - (Antipirina; 2,3-dimetil-1-fenil-3- lar bajo presin reducida antes de emplear.]
pirazolin-5-ona) - C 11 H 12 N 2 O - (PM: 188,2) - Temperatura de solidificacin <180> - No me-
Polvo cristalino incoloro. nor de 16 C.
Punto de fusin- Aprox. 112 C. Materia insoluble - Agitar 1 ml con 20 ml de
dl-Fenilalanina - C 9 H 11 NO 2 - (PM: 165,2) - cido actico diluido: la solucin resultante es
Emplear uno de grado apropiado. transparente o casi transparente.
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
3-Fenilfenol - (m-Fenilfenol) - C 6 H 5 C 6 H 4 OH - Someter a ignicin 1 ml con 0,5 ml de cido sulf-
(PM: 170,2) - Polvo cristalino blanco o casi blanco. rico: el residuo pesa no ms de 1 mg (0,1 %).
Fenol - Emplear un reactivo analtico apropiado. Sulfato - Disolver 5 g en 100 ml de agua sin ca-
Fenolsulfoftalena - Emplear Rojo de fenol (ver lentar, filtrar y agregar al filtrado 0,25 ml de cido
Indicadores en Indicadores, papeles y papeles indi- actico glacial y 5 ml de cloruro de bario (SR): no
se produce turbidez en 10 minutos (aproximada-
cadores).
mente 0,01 % como SO 4 ).
2-Fenoxietanol - C 6 H 5 OCH 2 CH 2 OH -
(PM: 138,2) - Lquido incoloro, algo viscoso. Solu- Ferrona - Transferir 0,7 g de sulfato frroso y
ble en agua. Miscible con alcohol, acetona y glice- 1,76 g de clorhidrato de fenantrolina a un matraz
aforado de 100 ml, disolver en 70 ml de agua y
rina. Densidad: aproximadamente 1,107.
completar a volumen con el mismo solvente.
Valoracin - A 2 g, exactamente pesados, agre-
Ensayo de sensibilidad - A 50 ml de cido
gar 10 ml de una solucin recientemente preparada
sulfrico diluido, agregar 0,15 ml de una solucin
mediante disolucin de 25 g de anhdrido actico en
100 g de piridina anhidra. Agitar por rotacin para de 2,5 mg de tetrxido de osmio por ml de cido
mezclar los lquidos, calentar en un bao de vapor sulfrico 0,05 M y agregar 0,1 ml de ferrona.
Despus del agregado de 0,1 ml de nitrato crico
durante 45 minutos, agregar 10 ml de agua, calentar
amnico 0,1 M, el color vira del rojo al verde pli-
durante 2 minutos adicionales y enfriar. Agregar
do.
10 ml de alcohol n-butlico, agitar vigorosamente,
agregar fenolftalena (SR) y titular con hidrxido de Floroglucinol - C 6 H 3 (OH) 3 . 2H 2 O -
sodio 1 N (SV). Realizar una determinacin con un (PM: 162,1) - Cristales blancos o blanco amarillen-
blanco y hacer las correcciones necesarias. Cada tos o polvo cristalino. Algo soluble en agua; soluble
mililitro de hidrxido de sodio 1 N equivale a en alcohol y ter.
138,2 mg de C 8 H 10 O 2 . Contiene no menos de Solubilidad en alcohol - Disolver 1 g en 20 ml
99 %. de alcohol: resulta una solucin transparente y
Fenol - Agregar 0,2 ml a 20 ml de agua, mezclar completa.
y, a 5 ml de la mezcla, agregar 0,2 ml de reactivo de Intervalo de fusin <260> - Mtodo I. Entre 215
Millon. Calentar la solucin a 60 C durante y 219 C.
90 segundos y dejar reposar: ningn color rosado o Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
rojo se produce dentro de 1 minuto. Someter a ignicin 1 g con 0,5 ml de cido sulfri-
Ferricianuro de potasio - K 3 Fe(CN) 6 - co: el residuo no pesa ms de 1 mg (0,1 %).
Diresorcinol - Calentar a ebullicin una solu-
(PM: 329,2) - Emplear un reactivo analtico apro-
cin de 100 mg en 10 ml de anhdrido actico, en-
piado.
friar la solucin y superponerla sobre 10 ml de
Ferrocianuro de potasio - K 4 Fe(CN) 6 . 3H 2 O - cido sulfrico: ningn color violeta aparece en la
(PM: 422,4) - Emplear un reactivo analtico apro- zona de contacto de los lquidos.
piado.
Fluoreno - C 13 H 10 - (PM: 166,2) - Cristales o
Ferrocianuro de sodio - Na 4 Fe(CN) 6 . 10H 2 O polvo blanco o casi blanco. Soluble en disulfuro de
- (PM: 484,1) - Cristales o grnulos amarillos. carbono, ter y alcohol caliente; fcilmente soluble
Fcilmente soluble en agua. en cido actico glacial.
Valoracin - Disolver 2 g, exactamente pesados, Ensayo de solubilidad - 1 g se disuelve en 10 ml
en 400 ml de agua, agregar 10 ml de cido sulfrico de acetona para proporcionar una solucin transpa-
y titular con permanganato de potasio 0,1 N (SV). rente y completa.
Cada mililitro de permanganato de potasio 0,1 N Intervalo de fusin <260> - Entre 113 y 117 C,
equivale a 48,41 mg de Na 4 Fe(CN) 6 . 10H 2 O. Con- con un intervalo de fusin no mayor de 2 C.
tiene no menos de 98 %.
Fluorescamina - C 17 H 10 O 4 - (PM: 278,3) -
Materia insoluble (Ensayo para reactivos) - No
Polvo blanco o casi blanco. Poco soluble en agua y
ms de 1 mg, determinado sobre 10 g (0,01 %).
cloroformo; fcilmente soluble en cloruro de meti-
Cloruro (Ensayo para reactivos) - Disolver 1 g
en 75 ml de agua, agregar una solucin preparada leno; soluble en alcohol.
disolviendo 1,2 g de sulfato cprico en 25 ml de Valoracin - Disolver aproximadamente 600 mg
en 75 ml de dimetilformamida y titular con metxi-
agua, mezclar y dejar reposar durante 15 minutos. A
do de litio 0,1 N hasta punto final azul, empleando
20 ml del lquido decantado transparente agregar
azul de timol al 1 % en dimetilformamida como
2 ml de cido ntrico y 1 ml de nitrato de plata (SR):
indicador. Realizar una determinacin con un blan-
si aparece turbidez no excede la de un control que
contenga 0,02 mg de Cl, 2 ml de cido ntrico, 1 ml co y hacer las correcciones necesarias. Cada milili-
de nitrato de plata (SR) y sulfato cprico suficiente tro de metxido de litio 0,1 N equivale a 27,83 mg
de C 17 H 10 O 4 . Contiene no menos de 99 %.
para armonizar el color de la solucin muestra.
Prdida por secado <680> - Secar a 105 C du- Fosfatasa alcalina - Emplear uno de grado
rante 4 horas: no pierde ms de 0,5 % de su peso. apropiado.
Fluorescena sdica - C 20 H 10 Na 2 O 5 - Fosfato amnico de sodio -
(PM: 376,3) - Polvo higroscpico rojo-anaranjado. NaNH 4 HPO 4 . 4H 2 O - (PM: 209,1) - Cristales
Fcilmente soluble en agua; poco soluble en alco- incoloros o grnulos blancos. Fcilmente soluble en
hol. Su solucin en agua es de color rojo amarillen- agua; insoluble en alcohol. Es eflorescente al aire y
to y presenta una fuerte fluorescencia verde amari- pierde amonaco.
llenta que desaparece cuando se acidifica la solu- Materia insoluble y precipitado de hidrxido de
cin y reaparece cuando se neutraliza o se alcalini- amonio - Disolver 10 g en 100 ml de agua, agregar
za. 10 ml de amonaco (SR) y calentar en un bao de
Prdida por secado <680> - Secar a 120 C has- vapor durante 1 hora. Si se forma precipitado, fil-
ta peso constante: no pierde ms de 7,0 % de su trar, lavar bien con agua y someter a ignicin: el
peso. precipitado sometido a ignicin no pesa ms de
1 mg (0,01 %).
4-Fluoroacetofenona - FC 6 H 4 COCH 3 -
Cloruro (Ensayo para reactivos) - 1 g no presen-
(PM: 138,1) - Lquido incoloro.
ta ms de 0,02 mg de Cl (0,002 %).
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en
Metales pesados - Disolver 3 g en 25 ml de
un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa)
equipado con un detector de ionizacin a la llama y agua, agregar 15 ml de cido sulfrico 1 N luego
una columna capilar de 30 m 25 mm recubierta agregar 10 ml de sulfuro de hidrgeno (SR): ningn
color pardo que se desarrolle en 1 minuto debe ser
con una capa de 1 m de goma de dimetilpolisi-
ms oscuro que el de un control que contenga 3 ml
loxano. Mantener el inyector y el detector a
de Solucin estndar de plomo (ver 600. Lmite de
aproximadamente 200 y 250 C, respectivamente.
La temperatura de la columna se mantiene a 100 C plomo) y 0,5 ml de cido sulfrico 1 N (0,001 %).
y se programa un ascenso de 10 C por minuto Nitrato - Disolver 1 g en 10 ml de agua, agregar
0,1 ml de ndigo carmn (SR) luego agregar, con
hasta 250 C. Se emplea helio como gas transporta-
agitacin, 10 ml de cido sulfrico: el color azul
dor. El rea del pico de FC 6 H 4 COCH 3 no es menor
persiste durante 10 minutos (aproximadamente
de 99 % del rea total.
0,005 %).
ndice de refraccin <230> - Aproximadamente
1,510, a 20 C. Sulfato (Ensayo para reactivos) - Mtodo II. Di-
solver 10 g en 100 ml de agua, agregar 5 ml de
Fluoruro de amonio - NH 4 F - (PM: 37,0) - cido clorhdrico y filtrar si fuera necesario: el fil-
Emplear un reactivo analtico apropiado. trado no produce ms de 5 mg de residuo (0,02 %).
Fluoruro de sodio - NaF - (PM: 42,0) - Emple- Fosfato de amonio - Ver Fosfato dibsico de
ar un reactivo analtico apropiado. amonio.
Formaldehdo - CH 2 O - (PM: 30,0) - Emple- Fosfato de dodeciltrietilamonio 0,5 M -
ar un reactivo analtico apropiado. [C 12 H 25 N . (C 2 H 5 ) 3 ] 3 PO 4 ] - (PM: 906,0) - Emplear
Formamida - HCONH 2 - (PM: 45,0) - Emplear uno de grado apropiado.
un reactivo analtico apropiado. 5-Fosfato de piridoxal - (PM: 265,2) -
Preparacin para la valoracin de digitoxina - 4-CHOC 5 HN-2-CH 3 ,3-OH, 5-CH 2 PO 4 H 2 . H 2 O -
Para garantizar la ausencia de amonaco, proceder Polvo amarillo brillante.
del siguiente modo. Agitar una cantidad apropiada Valoracin - Transferir aproximadamente
de formamida con aproximadamente 10 % de su 500 mg, exactamente pesados, a un erlenmeyer
peso de carbonato de potasio anhidro durante apropiado. Agregar 20,0 ml de hidrxido de sodio
15 minutos y filtrar. Destilar el filtrado en un apara- 0,5 N (SV) y 130 ml de agua y calentar a reflujo
to totalmente de vidrio bajo vaco a una presin de durante 1 hora. Enfriar, transferir la solucin a un
aproximadamente 25 mm Hg o menor. Descartar la vaso de precipitados de 250 ml, lavar el erlenmeyer
primera porcin del destilado que contiene agua y con aproximadamente 30 ml de agua y agregar el
recolectar la fraccin que destila aproximadamente lavado al vaso de precipitados. Titular la solucin
a 115 C a una presin de 25 mm Hg o a 101 C a con cido clorhdrico 0,5 N (SV), determinando el
una presin de 12 mm Hg. Almacenar en envases primer punto final potenciomtricamente. Realizar
inactnicos de cierre perfecto. una determinacin con un blanco y hacer las co-
Formiato de amonio - (Sal de amonio del ci- rrecciones necesarias. Cada mililitro de hidrxido
do frmico) - CH 5 NO 2 - (PM: 63,1) - Emplear de sodio 0,1 N consumido equivale a 8,839 mg de
uno de grado apropiado. C 8 H 10 NO 6 P . H 2 O. Contiene no menos de 95 %.
Intervalo de fusin <260> - Entre 140 y 143 C, Fosfito de tris(2,4-di-ter-butilfenilo) -
con descomposicin. C 42 H 63 O 3 P - (PM: 647) - Polvo blanco. Intervalo
Agua <120> - Titulacin volumtrica directa. de fusin: entre 182 y 186 C.
Entre 8,5 y 9,5 %.
Fosfito sdico - (Fosfito disdico; fosfonato
Fosfato de tetrabutilamonio - sdico) - Na 2 HPO 3 . 5H 2 O - (PM: 216,0) - Emplear
(C 4 H 9 ) 4 NH 2 PO 4 - (PM: 339,5) - Polvo blanco a un reactivo analtico apropiado.
casi blanco. Soluble en agua. Fosfonoformiato de trietilo - ((Dietoxifosfo-
Valoracin - Disolver aproximadamente 1,5 g,
ril)formiato de etilo) - C 7 H 15 O 5 P - (PM: 210,2) -
exactamente pesados, en 100 ml de agua. Titular sin
Lquido incoloro.
demora con hidrxido de sodio 0,5 N (SV), deter-
Punto de ebullicin (Ensayo para reactivos) -
minando el punto final potenciomtricamente. Rea-
Aprox. 135 C.
lizar una determinacin con un blanco y hacer las
correcciones necesarias. Cada mililitro de hidrxido Fsforo rojo - P - (PA: 30,97) - Polvo rojo os-
de sodio 0,5 N equivale a 169,7 mg de curo. Insoluble en agua y en cidos diluidos; soluble
(C 4 H 9 ) 4 NH 2 PO 4 . Contiene no menos de 97,0 %. en alcohol absoluto.
Fsforo amarillo - Agitar 20 g con 75 ml de di-
Fosfato de tributilo - (Tri-n-butil fosfato) - sulfuro de carbono en un recipiente con tapn de
(C 4 H 9 ) 3 PO 4 - (PM: 266,3) - Lquido transparente, vidrio y dejar reposar en la oscuridad de la noche a
casi incoloro. Poco soluble en agua. Miscible con
la maana. Filtrar y lavar el residuo con disulfuro
solventes orgnicos comunes. Densidad relativa:
de carbono hasta que el filtrado, recolectado en una
aproximadamente 0,976.
probeta, sea de 100 ml. Evaporar el solvente a
ndice de refraccin - Entre 1,4205 y 1,4225.
10 ml sumergiendo la probeta en agua caliente.
Fosfato dibsico de amonio - (Fosfato de amo- Sumergir una tira de papel de sulfato cprico en el
nio) - (NH 4 ) 2 HPO 4 - (PM: 132,1) - Emplear un solvente restante: no se produce color ms fuerte
reactivo analtico apropiado. que en una tira similar sumergida en 10 ml de una
Fosfato dibsico de potasio - (Fosfato cido solucin en disulfuro de carbono que contiene 3 mg
dipotsico; Fosfato dipotsico) - K 2 HPO 4 - de fsforo amarillo (0,015 % como P).
Sustancias solubles - Digerir 2 g con 30 ml de
(PM: 174,2) - Emplear un reactivo analtico apro-
cido actico en un bao de vapor durante 15 minu-
piado.
tos. Enfriar, diluir con agua a 40 ml y filtrar. Evapo-
Fosfato dibsico de sodio - (Fosfato disdico; rar 20 ml del filtrado en un bao de vapor y secar a
Fosfato cido disdico; Fosfato sdico, dibsico, 105 C durante 2 horas: el residuo no pesa ms de
heptahidrato) - Na 2 HPO 4 . 7H 2 O - (PM: 268,1) - 6 mg (0,6 %).
Emplear un reactivo analtico apropiado.
Ftalato cido de potasio - C 8 H 5 KO 4 (PM:
Fosfato dibsico de sodio anhidro - (Fosfato 204,2) - Cristales blancos o casi blancos, soluble
de hidrgeno disdico anhidro) (para soluciones en agua y ligeramente soluble en alcohol. Emplear
reguladoras) - Na 2 HPO 4 - (PM: 142,0) - Emplear un reactivo analtico apropiado.
un reactivo analtico apropiado.
Ftalato de bis(2-etilhexilo) - (PM: 390,6) -
Fosfato disdico - Ver Fosfato dibsico de so- C 6 H 4 -1,2-[COOCH 2 (C 2 H 5 )CH(CH 2 )] 2 - Lquido
dio. incoloro o amarillo claro.
Fosfato monobsico de amonio - (Fosfato di- ndice de refraccin - Entre 1,4855 y 1,4875, a
cido de amonio) - NH 4 H 2 PO 4 - (PM: 115,0) - 20 C.
Emplear un reactivo analtico apropiado. Ftalato de dibutilo - C 16 H 22 O 4 - (PM: 278,3) -
Fosfato monobsico de potasio - (Bifosfato de Lquido transparente, incoloro.
potasio; Fosfato dicido de potasio) - KH 2 PO 4 - Valoracin - Pesar exactamente alrededor de 2 g
(PM: 136,1) - Emplear un reactivo analtico apro- y transferirlos a un erlenmeyer apropiado. Agregar
piado. 25,0 ml de hidrxido de sodio 1 N y 30 ml de alco-
hol isoproplico y mezclar. Digerir la mezcla a una
Fosfato monobsico de sodio - NaH 2 PO 4 . temperatura cercana al punto de ebullicin durante
H 2 O - (PM: 138,0) - Emplear un reactivo analtico 30 minutos y luego enfriar en un bao de agua a
apropiado. temperatura ambiente. Agregar fenolftalena (SR) y
Fosfato tribsico de sodio - Na 3 PO 4 . 12H 2 O - titular con cido sulfrico 1 N (SV) hasta la desapa-
(PM: 380,1) - Emplear un reactivo analtico apro- ricin del color rosado. Realizar una determinacin
piado. con un blanco y hacer las correcciones necesarias.
Cada mililitro de cido sulfrico 1 N consumido Sistema cromatogrfico - Emplear un equipo pa-
equivale a 139,2 mg de C 16 H 22 O 4 . Contiene no ra cromatografa de lquidos con un detector ultra-
menos de 98 %. violeta ajustado a 230 nm y una columna de
ndice de refraccin <230> - Entre 1,491 y 15 cm 4,6 mm con fase estacionaria constituida
1,493, a 20 C. por partculas porosas de slice de 5 a 10 m de
Contenido cido - Pesar exactamente alrededor dimetro. El caudal es de aproximadamente 2 ml
de 10 g y disolver en 100 ml de una mezcla de al- por minuto.
cohol y ter (1:1). Agregar fenolftalena (SR) y Fase mvil - Isooctano y metil ter-butil ter
titular de inmediato con hidrxido de potasio al- (88:12).
cohlico 0,05 N (SV). Cada mililitro de hidrxido Procedimiento - Inyectar en el cromatgrafo
de potasio alcohlico 0,05 N equivale a 4,15 mg de aproximadamente 20 l (ver 100. Cromatografa).
cido ftlico. Contiene no ms de 0,02 %. El rea del pico de C 8 H 5 NO 2 no es menor de 99 %
del rea total.
Ftalato de dipropilo - C 14 H 18 O 4 - (PM: 250,3)
- Lquido viscoso, incoloro. Intervalo de fusin <260> - Entre 233 y 235 C,
Valoracin - con descomposicin.
Sistema cromatogrfico - Emplear un equipo pa- Fucsina bsica - Constituye una mezcla de
ra cromatografa de lquidos con un detector ultra- clorhidratos de rosanilina y de pararrosanilina.
violeta ajustado a 230 nm y una columna de Cristales o fragmentos cristalinos con un lustre
15 cm 4,6 mm con fase estacionaria constituida brillante de color bronce verdoso. Soluble en agua,
por octadecilsilano qumicamente unido a partculas alcohol y alcohol amlico.
de slice porosa de 3 a 10 m de dimetro. El caudal A 10 ml de una solucin (1 en 500) agregar
es de aproximadamente 2,0 ml por minuto. 10 ml de amonaco (SR) y 500 mg de polvo de cinc
Fase mvil - Acetonitrilo y agua (52:48). y agitar la mezcla: la solucin se torna incolora.
Procedimiento - Inyectar en el cromatgrafo Colocar unas pocas gotas de la solucin decolorada
aproximadamente 20 l (ver 100. Cromatografa). sobre un papel de filtro y cerca, en el mismo papel,
El rea del pico C 14 H 18 O 4 no es menor de 99 % del colocar unas pocas gotas de cido clorhdrico dilui-
rea total. do: se desarrolla un color rojo en la zona de contac-
ndice de refraccin <230> - Entre 1,495 y to.
1,499, a 20 C. Prdida por secado <680> - Secar a 105 C has-
Ftalazina - C 8 H 6 N 2 - (PM: 130,2) - Cristales de ta peso constante: no pierde ms de 5,0 % de su
color amarillo o pardo. peso.
Intervalo de fusin <260> - Entre 89 y 92 C. Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) -
Someter a ignicin 1 g con 0,5 ml de cido sulfri-
o-Ftaldehdo - (Benceno-1,2-dicarboxaldehdo) co: el residuo no pesa ms de 3 mg (0,3 %).
- C 8 H 6 O 2 - (PM: 134,1) - Polvo cristalino amari-
llo. [NOTA: conservar en envases hermticos in- Furfural - C 4 H 3 OCHO - (PM: 96,1) - Lquido
transparente e incoloro cuando est recientemente
actnicos].
destilado, pero en seguida adquiere un color pardo
Punto de fusin - Aprox. 55 C
rojizo. Soluble en agua. Miscible con alcohol. Al-
Ftalimida - C 8 H 5 NO 2 - (PM: 147,1) - Polvo macenar en envases inactnicos de cierre perfecto.
blanco. Debe destilarse en el momento de ser empleado.
Valoracin - Intervalo de ebullicin (Ensayo para reactivos) -
No menos de 95 % destila entre 159 y 162 C.
G
Imidazol - C 3 H 4 N 2 - (PM: 68,1) - Cristales co- Iodato de potasio - KIO 3 - (PM: 214,0) - Em-
lor blanco a amarillo claro. Fcilmente soluble en plear un reactivo analtico apropiado.
agua.
Iodo - I - (PA: 126,90) - Emplear un reactivo
Valoracin - Transferir aproximadamente
analtico apropiado.
700 mg, exactamente pesados, a un vaso de precipi-
tados de 250 ml. Disolver en 100 ml de cido acti- 5-Iodouracilo - C 4 H 3 IN 2 O 2 - (PM: 238,0).
co glacial. Titular con cido perclrico 0,1 N (SV), Punto de fusin <260> - Aprox. 276 C, con
determinando el punto final potenciomtricamente. descomposicin.
Realizar una determinacin con un blanco y hacer Cromatografa - Analizar segn se indica en
las correcciones necesarias. Cada mililitro de cido Sustancias relacionadas para Idoxiuridina emple-
perclrico 0,1 N equivale a 6,808 mg de C 3 H 4 N 2 . ando 5 l de una solucin de 5-iodouracilo de 0,25
Contiene no menos de 98 %. mg por ml. El cromatograma slo presenta una
mancha principal.
Iminoestilbeno - C 14 H 11 N - (PM: 193,2) - Pol-
vo amarillo anaranjado. Moderadamente soluble en Ioduro de 1-etilquinaldinio - C 12 H 14 IN -
acetato de etilo. (PM: 299,2) - Slido verde amarillo. Moderada-
Intervalo de fusin <260> - Entre 197 y 201 C. mente soluble en agua.
Valoracin - Disolver aproximadamente
Iminodibencilo - C 14 H 13 N - (PM: 195,3) -
290 mg, exactamente pesados, en 100 ml de agua y
10,11-Dihidrodibenz[b,f]azepina - Polvo cristalino,
agregar 10 ml de cido actico glacial. Titular con
amarillo plido. Fcilmente soluble en acetona; nitrato de plata 0,1 N (SV), determinando el punto
prcticamente insoluble en agua.
final potenciomtricamente, empleando un electro-
Punto de fusin - Aproximadamente 106 C.
do selectivo para iones plata y un electrodo de refe-
Indeno - C 9 H 8 - (PM: 116,2) - Lquido incolo- rencia de calomel que contiene nitrato de potasio
ro. 1 M. Realizar una determinacin con un blanco y
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en hacer las correcciones necesarias. Cada mililitro de
un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa) nitrato de plata 0,1 N equivale a 29,92 mg de
equipado con un detector de ionizacin a la llama y C 12 H 14 IN. Contiene no menos de 97,0 %.
una columna capilar de 10 m u 0,25 mm recubierta Ioduro de mercurio II - (Diioduro de mercu-
con una capa de 1 m de metilsilicona. Mantener el rio) - HgI 2 - (PM: 454,4) - Polvo cristalino, denso,
inyector y el detector a aproximadamente 200 y rojo escarlata. Poco soluble en agua; soluble en
300C, respectivamente. La temperatura de la co- acetona, alcohol, ter y solucin de ioduro de pota-
lumna se mantiene a 100 C y se programa un as- sio en exceso. Almacenar en envase inactnico.
censo de 10 C por minuto hasta 250 C. Se emplea
helio como gas transportador. El rea del pico de Ioduro de metilo - CH 3 I - (PM: 141,9) - Lqui-
indeno no es menor de 99 % del rea total. do incoloro, pesado, transparente. Poco soluble en
ndice de refraccin - Entre 1,5749 y 1,5769, a agua. Miscible con alcohol, ter y ter de petrleo.
20 C. Se torna pardo por exposicin a la luz como resul-
tado de la liberacin de iodo.
ndigo carmn - (Indigotindisulfonato sdico) - Valoracin - Agregar 1 ml a un matraz aforado
Emplear un reactivo analtico apropiado. de 100 ml peviamente pesado con 10 ml de alcohol.
Inositol - (Hexahidroxiciclohexano) - Pesar nuevamente, completar a volumen con alco-
C 6 H 6 (OH) 6 - (PM: 180,2) - Cristales blancos o hol y mezclar. Transferir 20 ml a un erlenmeyer con
polvo blanco, cristalino, inodoro y estable al aire. tapn de vidrio y agregar 50,0 ml de nitrato de plata
Sus soluciones son neutras al papel de tornasol. 0,1 N (SV) y 2 ml de cido ntrico. Tapar inmedia-
pticamente inactivo. Fcilmente soluble en agua; tamente, agitar con frecuencia durante 2 horas y
poco soluble en alcohol; insoluble en ter y cloro- dejar reposar en la oscuridad de la noche a la maa-
formo. Almacenar en envases bien cerrados. na. Agitar nuevamente durante 2 horas luego agre-
Intervalo de fusin <260> - Entre 223 y 226 C. gar 50 ml de agua y 3 ml de sulfato frrico amnico
Prdida por secado <680> - Secar a 105 C du- y titular el nitrato de plata en exceso con tiocianato
rante 4 horas: no pierde ms de 0,5 % de su peso. de amonio 0,1 N (SV). Cada mililitro de nitrato de
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) - plata 0,1 N equivale a 14,19 mg de CH 3 I. Contiene
No ms de 0,1 %. no menos de 98,5 %.
Intervalo de ebullicin (Ensayo para reactivos) - Intervalo de fusin <260> - Entre 146 y 147 C.
Destilar 50 ml en un recipiente enfriado, parcial- Ioduro isoproplico - (2-Iodopropano) - C 3 H 7 I
mente tapado: no destila menos de 48 ml entre 41,5 - (PM: 170,0) - Lquido incoloro, se descolora con
y 43 C.
exposicin al aire y a la luz. Moderadamente solu-
Densidad - Entre 2,270 y 2,285.
ble en agua; miscible con alcohol, cloroformo y
Residuo de evaporacin - Evaporar 4 ml (10 g)
ter.
en un bao de vapor y secar el residuo a 105 C
Densidad - Entre 1,696 y 1,704.
durante 1 hora: el residuo no pesa ms de 1 mg ndice de refraccin - Entre 1,4987 y 1,4997 a
(0,01 %). 20C.
Acidez - Agitar 3 ml con 5 ml de agua durante
30 segundos y de inmediato extraer la fase inferior: 4-Isobutilacetofenona - C 12 H 16 O - (PM: 176,0)
la fase acuosa es neutra frente al tornasol y cuando - Lquido amarillo plido. Soluble en cloroformo,
se agrega 1 ml de nitrato de plata (SR), no presenta gliceroles, alcoholes, ter y aceites grasos; insoluble
ms que una leve opalescencia. en agua. Emplear uno de grado apropiado.
Ioduro de potasio - KI - (PM: 166,0) - Emplear N-Isobutilpiperidona - C 9 H 17 NO - (PM:
un reactivo analtico apropiado. 155,2) - Emplear uno de grado apropiado.
Ioduro de tetrabutilamonio - (C 4 H 9 ) 4 NI - Isooctano - Ver 2,2,4-Trimetilpentano.
(PM: 369,4) - Escamas blancas, brillosas, cristali- Isopropilamina - (2-Aminopropano) -
nas. Soluble en alcohol y ter; poco soluble en C 3 H 7 NH 2 - (PM: 59,1) - Lquido transparente,
agua. incoloro, inflamable con un olor fuerte a amonaco.
Valoracin - Disolver 200 mg, exactamente pe- Miscible con agua, alcohol y ter.
sados, en 40 ml de agua hirviendo, con agitacin Valoracin - Transferir aproximadamente
vigorosa y enfriar a temperatura ambiente. Agitar la 200 mg, exactamente pesados, a un envase apropia-
solucin mecnicamente, agregar 5 ml de cido do, agregar 50 ml de agua y mezclar. Titular con
ntrico 2 N. Titular con nitrato de plata 0,1 N (SV), cido clorhdrico 0,1 N (SV), empleando una mez-
determinando el punto final potenciomtricamente, cla de verde de bromocresol (SR) y rojo de metilo
empleando un electrodo de plata y vidrio y agre- (SR) (5:1) como indicador. Cada mililitro de cido
gando la solucin titulante en porciones de 0,1 ml clorhdrico 0,1 N equivale a 59,11 mg de C 3 H 9 N.
cerca del punto final. Realizar una determinacin Contiene no menos de 98 %.
con un blanco y hacer las correcciones necesarias. Intervalo de ebullicin (Ensayo para Reactivos)
Cada mililitro de nitrato de plata 0,1 N equivale a - No menos de 95 % destila entre 31 y 33 C.
36,94 mg de (C 4 H 9 ) 4 NI. Contiene no menos de ndice de refraccin - Entre 1,3743 y 1,3753, a
99,0 %. 20 C.
L
Magnesio - Mg - (PA: 24,31) - Metal plateado Muy soluble en alcohol, cloroformo, ter y ter de
en forma de cinta. Reacciona lentamente con agua a petrleo; fcilmente soluble en cido actico glacial
temperatura ambiente. Se disuelve fcilmente en y parafina lquida; moderadamente soluble en agua.
cidos diluidos con liberacin de hidrgeno. Intervalo de fusin <260> - Entre 41 y 43 C.
Valoracin - Transferir 1 g, exactamente pesa- Rotacin ptica <170> - Aprox. 50, determi-
do, a un matraz aforado de 250 ml y disolver en una nado sobre una solucin de 100 mg por ml en alco-
mezcla de 15 ml de cido clorhdrico y 85 ml de hol.
agua. Cuando se completa la disolucin, diluir a
Mercaptopurina - C5H4N4S . H2O -
volumen con agua y mezclar. Transferir 25 ml de la
(PM: 170,2) - 7H-purina-6-tiol - Emplear un reac-
dilucin a un vaso de precipitados de 400 ml, diluir
tivo analtico apropiado de una pureza no menor de
con agua a 250 ml, agregar 20 ml de solucin regu-
98 %.
ladora de amonaco-cloruro de amonio (SR) y unos
mg de negro de eriocromo T triturado y titular con Mercurio - Hg - (PA: 200,59) - Emplear un re-
edetato disdico 0,1 M (SV) hasta punto final azul. activo analtico apropiado.
Cada mililitro de edetato disdico 0,1 M (SV) equi- Metabisulfito de sodio - Na 2 S 2 O 5 -
vale a 2,430 mg de Mg. Contiene no menos de 99 (PM: 190,1) - Emplear Metabisulfito de sodio.
%.
Metaborato de litio - LiBO 2 - (PM: 49,8) -
Magnesio, xido de - MgO - (PM: 40,3) - Emplear un reactivo analtico apropiado.
Emplear un reactivo analtico apropiado.
Metacresol - Emplear un reactivo analtico
Maleato de bis(2-etilhexilo) - C 20 H 36 O 4 - apropiado.
(PM: 340,5) - Lquido transparente incoloro a ama-
rillo plido. Miscible con acetona y alcohol. Densi- Metacrilato de metilo - Emplear uno de grado
dad relativa: aproximadamente 0,945. apropiado.
Valoracin - Transferir aproximadamente 2,5 g, Metanol - (Alcohol metlico) - CH 3 OH -
exactamente pesados, a un erlenmeyer de 250 ml, (PM: 32,0) - Emplear un reactivo analtico apropia-
agregar 50,0 ml de hidrxido de potasio alcohlico do.
0,5 N (SV) y calentar a reflujo durante 45 minutos.
Enfriar, agregar 0,5 ml de fenolftalena (SR) y titu- Metanol anhidro - Ver Metanol.
lar el lcali en exceso con cido clorhdrico 0,5 N Metanol para cromatografa de lquidos -
(SV). Realizar una determinacin con un blanco al Debe contener no menos de 99,8 por ciento de
mismo tiempo, empleando la misma cantidad de CH 4 O (PM: 32,0).
hidrxido de potasio alcohlico 0,5 N (ver Titula- Absorbancia - La absorbancia a 225 nm emple-
ciones residuales en 780. Volumetra). La diferen- ando agua como blanco, no debe ser mayor a 0,17.
cia, en ml, entre los volmenes de cido clorhdrico
Metanol para espectrofotometra - Emplear
0,5 N consumidos en la titulacin de la muestra y la
Metanol apropiado para uso en espectrofotometra
titulacin del blanco, multiplicada por 85,1, repre-
ultravioleta.
senta la cantidad, en mg, de maleato de bis(2-
etilhexilo) en la porcin tomada. Contiene no me- Metaperiodato de sodio - NaIO 4 -
nos de 97 %. (PM: 213,9) - Emplear un reactivo analtico apro-
piado.
Manganeso - Mn - (PA: 54,94) - Emplear uno
de grado apropiado. Metilamina al 40 % en agua - CH 5 N -
(PM: 31,1) - Lquido incoloro.
Manitol - Emplear Manitol.
Valoracin - Empleando una jeringa, transferir
Melamina - (1,3,5-Triazina-2,4,6-triamina) - aproximadamente 0,5 ml de una muestra bien agita-
C 6 H 6 N 6 - (PM: 126,1) - Polvo blanco amorfo. da a 100 ml de agua en un punto debajo de la super-
Muy soluble en agua y alcohol. ficie del agua. Determinar el peso de la muestra
Menadiona - Emplear Menadiona. pesando la jeringa antes y despus de la transferen-
cia. Mezclar y titular con cido clorhdrico 0,5 N
Mentol - (SV), determinando el punto final potenciomtri-
((1D,2E,5D)-5-Metil-2-(1-metiletil)-ciclohexanol) - camente, empleando un electrodo de plata-cloruro
C 10 H 20 O - (PM: 156,3) - Cristales o grnulos. de plata y un electrodo de referencia de calomel.
Realizar una determinacin con un blanco y hacer Metil etil cetona - (2-Butanona) -CH 3 COC 2 H 5
las correcciones necesarias. Cada mililitro de cido - (PM: 72,1) - Lquido incoloro, de olor similar a la
clorhdrico 0,5 N equivale a 15,53 mg de CH 5 N. acetona. Soluble en agua. Miscible con alcohol y
Contiene entre 39,0 y 41,0 %. ter.
ndice de refraccin - Entre 1,3680 y 1,3710, a Intervalo de ebullicin (Ensayo para reactivos) -
20 C. Entre 79,0 y 81,0 C.
Densidad relativa <160> - Entre 0,801 y 0,803.
Metilbenzotiazolona-hidrazona, clorhidrato
de - (Clorhidrato de 3-metilbenzotiazol-2(3H)-ona Residuo de evaporacin - Evaporar 50 ml en un
hidrazona, monohidrato) - C 8 H 10 ClN 3 S . H 2 O - bao de vapor y secar a 105 C durante 1 hora: el
residuo no pesa ms de 1,0 mg (0,0025 %).
(PM: 233,7) - Polvo blanco cristalino o amarillen-
Acidez - Agregar 25 ml a 10 ml de alcohol al
to.
80 %, previamente neutralizado a la fenolftale-
Punto de fusin - Aprox. 207 C.
na (SR) con hidrxido de sodio 0,02 N. Titular con
Ensayo de validez para la determinacin de al-
dehdos - A 2 ml de metanol libre de aldehdo hidrxido de sodio 0,020 N (SV) hasta la aparicin
de un color rosado que persiste no menos de 15
agregar 60 Pl de una solucin de 1 mg de propio-
segundos: no se requieren ms de 0,50 ml (0,003 %
naldehdo por ml de metanol libre de aldehdo y
como CH 3 COOH).
5 ml de una solucin de 4 mg de clorhidrato de
Solubilidad en agua - Agregar 5 ml a 40 ml de
metilbenzotiazolona-hidrazona por ml. Mezclar y
agua y dejar reposar durante 20 minutos: la solucin
dejar en reposo durante 30 minutos. Preparar una
permanece transparente.
solucin blanco sin propionaldehdo. Agregar
25 ml de un solucin de 2 mg de cloruro frrico por Metil isobutil cetona - Ver 4-Metil-2-
ml a la solucin muestra y a la solucin blanco y pentanona.
diluir a 100 ml con acetona. La absorbancia a N-Metil-N-nitroso-p-toluensulfonamida - (p-
660 nm empleando la solucin blanco no debe ser Tolilsulfonilmetilnitrosamina) - C 8 H 10 N 2 O 3 S -
menor a 0,62. (PM: 214,2) - Polvo o cristales amarillo claro. Inso-
Metilcloroformo - (1,1,1-Tricloroetano) - luble en agua; soluble en tetracloruro de carbono y
(PM: 133,4) - CH 3 CCl 3 - Lquido incoloro, pesado. cloroformo.
Insoluble en agua pero algo higroscpico. Miscible Intervalo de fusin <260> - Entre 59 y 63 C,
con alcohol, ter y cloroformo. con un intervalo de fusin no mayor de 2 C.
Intervalo de ebullicin (Ensayo para reactivos) - 2-Metil-5-nitroimidazol - C4H5N3O2 -
Destilar 100 ml: la diferencia entre las temperaturas (PM: 127,1) - Polvo blanco a amarillo plido.
observadas cuando se destilan 1 y 95 ml no excede Intervalo de fusin - Entre 252 y 254 C.
16 C. Su temperatura de ebullicin a una presin
de 760 mm Hg es aproximadamente 74 C. Metilparabeno - (Ester del cido metil
Densidad relativa <160> - Entre 1,312 y 1,321. p-hidroxibenzoico) - C 8 H 8 O 3 - (PM: 152,1) -
Acidez - Agregar 25 ml a 25 ml de alcohol neu- Emplear un reactivo analtico apropiado.
tralizado, frente al azul de bromotimol (SR), con 3-Metil-2-pentanona - C 6 H 12 O - (PM: 100,2)
hidrxido de sodio 0,02 N. Mezclar suavemente y - Emplear un reactivo analtico apropiado.
titular con hidrxido de sodio 0,020 N (SV): no se
requiere ms de 0,50 ml para restaurar el color azul 4-Metil-2-pentanona - (Isobutil Metil Cetona) -
(0,001 % como HCl). (CH 3 ) 2 CHCH 2 COCH 3 - (PM: 100,2) - Emplear un
Residuo de evaporacin - Evaporar 76 ml en un reactivo analtico apropiado.
bao de vapor y secar a 105 C durante 1 hora: el 2-Metil-2-propanol - Ver Alcohol terbutlico.
residuo no pesa ms de 1 mg (aproximadamente
2-Metil-2-propil-1,3-propanodiol - C 7 H 16 O 2 -
0,001 %).
(PM: 132,2) - Cristales blancos, que funden
Metilenbisacrilamida - aproximadamente a 58 C.
(N,N-metilendipropenamida) - C 7 H 10 N 2 O 2 -
Metilsulfxido - (Dimetilsulfxido) - (CH 3 ) 2 SO
(PM: 154,2) - Polvo fino y casi blanco. Poco solu-
- (PM: 78,1) - Emplear un reactivo analtico apro-
ble en agua; soluble en alcohol.
piado.
Punto de fusin - Funde con descomposicin
por encima de los 300 C. p-Metoxibenzaldehdo - Ver Anisaldehdo.
3-O-Metilestrona - C 19 H 24 O 2 - (PM: 284,4) - Metxido de sodio - CH 3 ONa - (PM: 54,0) -
Emplear uno de grado apropiado. Polvo blanco fino. Reacciona violentamente con
agua con desprendimiento de calor. Soluble en narla hasta una altura de 15 cm. Pasar 500 ml del
alcohol y metanol. miristato de isopropilo a travs de la columna, em-
Valoracin - Transferir aproximadamente plear una leve presin positiva para mantener un
220 mg a un erlenmeyer previamente pesado, con caudal constante y emplear el eluato recolectado
tapn de vidrio y pesar exactamente. Disolver la directamente en el procedimiento de ensayo de
muestra en aproximadamente 10 ml de metanol, esterilidad.
luego agregar 100 ml de agua lentamente, con agi-
Miristicina - (5-Alil-1-metoxi-2,3-
tacin. Agregar fenolftalena (SR) y titular con metilendioxibenceno) - C 11 H 12 O 3 - (PM: 192,2) -
cido clorhdrico 0,1 N (SV) hasta punto final inco- Lquido oleoso, incoloro, prcticamente insoluble
loro. Cada mililitro de cido clorhdrico 0,1 N (SV)
en agua; poco soluble en etanol; soluble en ter;
equivale a 5,402 mg de CH 3 ONa. Contiene no
miscible en tolueno y xileno.
menos de 98,0 %.
Densidad relativa <160> - Aproximadamente
Metoxietanol - (Etilenglicol monometil ter; 2- 1,144, a 20 C.
Metoxietanol) - CH 3 OCH 2 CH 2 OH - (PM: 76,1) - ndice de refraccin <230> - Aproximadamente
Lquido transparente, incoloro a ligeramente amari- 1,540, a 20 C.
llo. Miscible con agua, acetona, alcohol, ter, dime- Intervalo de ebullicin (Ensayo para reactivos) -
tilformamida y glicerina. ndice de refraccin: Entre 276 y 277 C.
aproximadamente 1,420. Precaucin - Es venenoso; Molibdato de sodio - Na 2 MoO 4 . 2H 2 O -
emplear con ventilacin apropiada. (PM: 242,0) - Emplear un reactivo analtico apro-
Densidad relativa <160> - Entre 0,960 y 0,964.
piado.
Intervalo de ebullicin (Ensayo para reactivos) -
Destilar 100 ml: 95 % destila entre 123 y 126 C. Molibdato de amonio - (NH 4 ) 6 Mo 7 O 24 . 4H 2 O
Acidez - A 62 ml (60 g) agregar fenolftale- - (PM: 1.235,9) - Emplear un reactivo analtico
na (SR) y titular con hidrxido de potasio alcohli- apropiado.
co 0,1 N: no se requiere ms de 1 ml para producir Monocloruro de iodo - ICl - (PM: 162,4) -
un punto final rosado que persiste no menos de Emplear un reactivo analtico apropiado.
15 segundos (0,01 % como CH 3 COOH).
Ensayo de dilucin - Medir 10 ml en una probe- Monoetanolamina - C 2 H 7 NO - (PM: 61,1) -
ta de 100 ml con tapn de vidrio. Diluir con agua a Lquido transparente, incoloro a dbilmente amari-
100 ml, insertar el tapn y mezclar: no se observa llo, viscoso, con olor amoniacal. Miscible con agua,
opalescencia o turbidez despus de que la mezcla se metanol y acetona. Funde aproximadamente a 9 C.
ha dejado reposar a temperatura ambiente durante 2 Valoracin - Pesar exactamente un pesafiltro
horas. con tapn de vidrio que contiene 25 ml de agua.
Agua <120> - Titulacin volumtrica directa. Agregar aproximadamente 2 g de muestra, tapar, y
No ms de 0,05 %. nuevamente pesar con exactitud. Agregar 3 gotas de
una mezcla indicadora preparada agregando
3-Metoxi-L-tirosina - C 10 H 13 NO 4 H 2 O - (PM: 5 volmenes de verde de bromocresol (SR) a
229,2) Polvo amarillo o blanco. 6 volmenes de rojo de metilo (SR) (preparada a
Miristato de isopropilo - C 17 H 34 O 2 - partir de clorhidrato de rojo de metilo) y titular con
(PM: 270,5) - Emplear Miristato de isopropilo. Para cido clorhdrico 1 N (SV). Cada mililitro de cido
emplear como solvente en los procedimientos de clorhdrico 1 N (SV) equivale a 61,08 mg de
ensayo para esterilidad, el miristato de isopropilo se C 2 H 7 NO. Contiene no menos de 99 %.
ajusta a la siguiente especificacin adicional: ndice de refraccin <230> - Entre 1,453 y
pH del extracto acuoso - Transferir 100 ml a un 1,455, a 20 C.
tubo de centrfuga de 250 ml, agregar 10 ml de Residuo de ignicin <270> - Evaporar 20 g en
agua, cerrar el tubo con un cierre apropiado y agitar un bao de vapor hasta sequedad y calcinar el resi-
vigorosamente durante 60 minutos. Centrifugar la duo a 800 25 C durante 15 minutos: el residuo
mezcla a 1.800 rpm durante 20 minutos, aspirar la no pesa ms de 1 mg (0,005 %).
fase superior (miristato de isopropilo) y determinar Monxido de plomo - (Litargirio) - PbO -
el pH de la fase acuosa: el pH no es menor de 6,5. (PM: 223,2) - Polvo amarillo pesado, amarillento o
Si el miristato de isopropilo no se ajusta al ensa- rojizo. Insoluble en agua y alcohol; soluble en cido
yo de pH del extracto acuoso se puede adecuar para actico, cido ntrico diluido y en soluciones calien-
emplearse en procedimientos de ensayo de esterili- tes de hidrxidos alcalinos fijos.
dad del siguiente modo: Valoracin - Pesar exactamente 300 mg, some-
Empleando una columna de vidrio de ter a ignicin rpidamente en una mufla a
20 cm 20 mm, agregar almina activada y apiso-
600 50 C y disolver mediante calentamiento con calentar a ebullicin suavemente durante 5 minutos,
10 ml de agua y 1 ml de cido actico glacial. Diluir filtrar, lavar el residuo con cido actico diluido y
con 75 ml de agua, calentar a ebullicin, agregar secar a 105 C durante 2 horas: el residuo no pesa
50,0 ml de dicromato de potasio 0,1 N (SV) y ca- ms de 10 mg (0,5 %).
lentar a ebullicin durante 2 a 3 minutos. Enfriar, Sustancias no precipitadas por sulfuro de
transferir a un matraz aforado de 200 ml con la hidrgeno - Precipitar completamente el plomo del
ayuda de agua, completar a volumen con agua, filtrado obtenido en el ensayo de Insolubilidad en
mezclar y dejar sedimentar. Retirar 100,0 ml del cido actico pasando sulfuro de hidrgeno a travs
lquido transparente, y transferir a un erlenmeyer del filtrado, filtrar y lavar el precipitado con 20 ml
con tapn de vidrio. Agregar 10 ml de cido sulf- de agua. A la mitad del filtrado y lavados mezcla-
rico diluido y 1 g de ioduro de potasio, insertar el dos agregar 5 gotas de cido sulfrico, evaporar
tapn, mezclar suavemente y dejar reposar durante hasta sequedad y someter a ignicin a 800 25 C
10 minutos. Titular el iodo liberado, que representa durante 15 minutos: el residuo no pesa ms de 5
el exceso de dicromato, con tiosulfato de sodio 0,1 mg (0,5 %).
N (SV), agregando 3 ml de almidn (SR) cerca del Sustancias voltiles - Pesar exactamente 5 g y
punto final. Cada mililitro de dicromato de potasio calentar fuertemente en un crisol de porcelana cu-
0,1 N equivale a 7,440 mg de PbO. Contiene no bierto: no pierde ms de 2,0 % de su peso.
menos de 98 %.
Morfolina - (Tetrahidro-1,4-oxazina) -
Insolubilidad en cido actico - Disolver 2 g en
C 4 H 9 NO - (PM: 87,1) - Emplear un reactivo anal-
30 ml de cido actico glacial diluido (1 en 2), tico apropiado.
N
Octadecilsilano - Este reactivo se forma in situ Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en
mediante reaccin del soporte de columnas con un un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa)
agente silanizante apropiado, como por ej., el octa- equipado con un detector de ionizacin a la llama y
decil triclorosilano. una columna capilar recubierta con una capa 1 m
de fase estacionaria constituida por goma de dime-
Octanofenona - C 14 H 20 O - (PM: 204,3) -
tilpolisiloxano. Mantener el inyector y el detector
Lquido incoloro.
aproximadamente a 300 C, respectivamente. La
Valoracin -
Fase mvil - Acetonitrilo y agua (7:3), filtrado y temperatura de la columna se mantiene a 230 C y
se programa un ascenso de 10 C por minuto hasta
desgacificado.
280 C. Se emplea helio como gas transportador. El
Procedimiento - Inyectar aproximadamente
rea del pico de C 19 H 36 O 2 no es menor de 99 % del
20 l en un cromatgrafo de lquidos apropiado
rea total.
(ver 100. Cromatografa) equipado con un detector
ultravioleta a 254 nm y una columna de ndice de refraccin <230> - 1,452, a 20 C.
15,0 cm 4,6 mm con fase estacionaria constituida Orcinol - (5-Metilresorcinol) - C 7 H 8 O 2 . H 2 O -
por octadecil silano, qumicamente unido a partcu- (PM: 142,2) - Cristales de color blanco a canela
las de slice porosa o micropartculas cermicas, de brillante.
3 a 10 m de dimetro. El caudal es de aproxima- Valoracin - Transferir aproximadamente
damente 2 ml por minuto. El rea del pico C 14 H 20 O 60 mg, exactamente pesados, a un matraz aforado
no es menor de 99 % del rea total. de 100 ml, disolver en metanol, completar a volu-
ndice de refraccin <260> - 1,5043, a 20 C. men con metanol y mezclar. Transferir 5,0 ml de
esta solucin a un matraz aforado de 50 ml, comple-
1-Octanosulfonato de sodio - C 8 H 17 NaO 3 S -
tar a volumen con metanol y mezclar. Determinar la
(PM: 216,3) - Emplear uno de grado apropiado.
absorbancia de la solucin en celdas de 1 cm, a la
(p-ter-Octilfenoxi)nonaetoxietanol - (Polieti- longitud de onda de mxima absorcin, aproxima-
lenglicol fenil nonil ter) - C 34 H 62 O 11 - (PM: 646,9) damente 273 nm, con un espectrofotmetro apro-
- Emplear uno de grado apropiado. piado, empleando metanol como blanco. A partir de
(p-ter-Octilfenoxi)polietoxietanol - Emplear la absorbancia observada, calcular la absortividad
uno de grado apropiado. (ver 470. Espectrofotometra ultravioleta y visible):
la absortividad no es menor de 13,2, correspondien-
Octil sulfato, sal sdica - C 8 H 17 O 4 SNa - te a no menos de 98 % de C 7 H 8 O 2 .H 2 O.
(PM: 232,3) - Polvo blanco. Intervalo de fusin <260> - Entre 58 y 61 C.
Solubilidad - 2 g se disuelven en 100 ml de
agua. Ortofenantrolina - Ver 1,10-Fenantrolina.
Intervalo de fusin <260> - Entre 195 y 197 C, Oxalato de amonio - (NH 4 ) 2 C 2 O 4 . H 2 O -
con descomposicin. (PM: 142,1) - Emplear un reactivo analtico apro-
Octoxinol 9 - Ver Agente humectante no ini- piado.
co. Oxalato de sodio - Na 2 C 2 O 4 - (PM: 134,0) -
Octoxinol 10 - (D->4-(1,1,3,3- Emplear un reactivo analtico apropiado.
tetrametilbutil)fenil@-w-hidroxipropil(oxietileno)) - 3,3'-Oxidipropionitrilo - O(CH 2 CH 2 CN) 2 -
C 34 H 62 O 11 - (PM: 647,0) - Lquido transparente, (PM: 124,1) - Lquido transparente, incoloro a algo
amarillo plido, viscoso, miscible con acetona, agua amarillo. ndice de refraccin: aproximadamente
y alcohol. Soluble en tolueno. Conservar en enva- 1,446, a 20 C.
se hermtico. Intervalo de ebullicin - Entre 174 y 176 C, a
10 mm Hg.
Oleamida - ((z)-Octadec-9-enamida) -
C 18 H 35 NO (PM: 281,5) - Polvo o granulado blanco xido de aluminio lavado con cido - (Almi-
o amarillento. Prcticamente insoluble en agua; na especialmente preparada para emplear en anli-
muy soluble en cloruro de metileno; soluble en sis cromatogrfico) - Polvo blanco o grnulos finos
etanol. prcticamente blancos. Muy higroscpico. Almace-
Punto de fusin - Aproximadamente a 80 C. nar en envases de cierre perfecto.
Oleato de metilo - C 19 H 36 O 2 - (PM: 296,5) - pH - El pH de una pasta espesa bien mezclada
de 5 g en 150 ml de agua libre de amonaco, luego
Lquido incoloro.
de 10 minutos en reposo, se encuentra entre 3,5 y equipado con un detector de ionizacin a la llama y
4,5. una columna capilar de 30 m 0,25 mm recubierta
Prdida por ignicin - Pesar exactamente 1 g y con una capa de 1 m de fase estacionaria consti-
calcinar, preferentemente en una mufla, entre 800 y tuida por goma de dimetilpolisiloxano. Mantener el
825 C, hasta peso constante: no pierde ms de inyector y el detector aproximadamente a 150 y 300
5,0 % de su peso. C, respectivamente. La temperatura de la columna
Slice - Fundir 500 mg con 10 g de bisulfato de se mantiene en 50 C y se programa un ascenso de
potasio durante 1 hora en un crisol de platino, en- 10 C por minuto hasta 200 C. Se emplea helio
friar y disolver en agua caliente: no se obtiene ms como gas transportador. El rea del pico C 6 H 10 O
que una cantidad pequea de materia insoluble. no es menor de 98 % del rea total.
Aptitud para adsorcin cromatogrfica - Disol- ndice de refraccin <230> - Entre 1,443 y
ver 50 mg de o-nitroanilina en benceno para obtener 1,447, a 20 C.
50,0 ml. Diluir 10 ml de la solucin resultante con
xido de plata - Ag 2 O - (PM: 231,7) - Polvo
benceno a 100,0 ml y mezclar (Solucin A). pesado negro pardusco, inodoro. Se descompone
De inmediato, pesar rpido aproximadamente 2 lentamente por exposicin a la luz. Absorbe dixido
g ( 0,005) de muestra en un pesafiltro y transferir-
de carbono cuando se humedece. Prcticamente
lo a un tubo de ensayo seco, con tapn de vidrio.
insoluble en agua; fcilmente soluble en cido ntri-
Agregar 20,0 ml de Solucin A, tapar, agitar vigoro-
co diluido y amonaco; insoluble en alcohol. Alma-
samente durante 3 minutos y dejar sedimentar.
cenar en envases bien cerrados; no exponer a vapo-
Transferir 10 ml de la solucin sobrenadante trans- res de amonaco ni a sustancias fcilmente oxida-
parente a un matraz aforado de 100 ml, completar a bles.
volumen con benceno y mezclar (Solucin B). De- Valoracin - Disolver aproximadamente 500
terminar las absorbancias de las Soluciones A y B, a mg, previamente secados a 120 C durante 3 horas
395 nm, con un espectrofotmetro apropiado, em- y exactamente pesados, en una mezcla de 20 ml de
pleando benceno como blanco. Calcular la cantidad agua y 5ml de cido ntrico. Diluir con agua a
absorbida, en mg por g de muestra, por la frmula 100 ml, agregar 2 ml de sulfato frrico amnico
siguiente: (SR) y titular con tiocianato de amonio 0,1 N (SV)
[2(1 - A B /A A )]/P hasta un color pardo rojizo permanente. Cada milili-
en la cual, A A y A B son las absorbancias de las So- tro de tiocianato de amonio 0,1 N equivale a 11,59
luciones A y B, respectivamente y P es el peso, en mg de Ag 2 O. No contiene menos de 99,7 % de
Ag 2 O.
g, de xido de aluminio. Cada gramo de xido de
Prdida por secado - Secar a 120 C durante
aluminio absorbe no menos de 0,3 mg de
3 horas: no pierde ms de 0,25 % de su peso.
o-nitroanilina.
Nitrato - A 500 mg, agregar 30 mg de carbonato
xido de cinc - ZnO - (PM: 81,4) - Polvo de sodio y 2 ml de cido fenoldisulfnico (SR),
amorfo, ligero y blanco o dbilmente blanco- mezclar y calentar en un bao de vapor durante 15
amarillento, sin aglomerados. Prcticamente insolu- minutos. Enfriar, agregar con precaucin 20 ml de
ble en agua y alcohol. Se disuelve en cidos minera- agua, alcalinizar con amonaco (SR) y diluir con
les diluidos. agua a 30 ml: ningn color que produzca la solu-
xido de deuterio - (Agua deuterada) - D 2 O - cin muestra es ms intenso que el producido por
(PM: 20,03) - Emplear uno de grado apropiado que un control que contenga 0,01 mg de NO 3 (0,002
tiene una pureza isotpica mnima de 99,8 % para el %).
tomo de deuterio. Sustancias insolubles en cido ntrico - Disolver
5 g en una mezcla de 5 ml de cido ntrico y 10 ml
xido de holmio - Ho 2 O 3 - (PM: 377,9) - Pol- de agua, diluir con agua a aproximadamente 65 ml
vo amarillento. Prcticamente insoluble en agua. y filtrar el residuo no disuelto en un crisol filtrante
xido de magnesio - MgO - (PM: 40,3) - Em- previamente pesado (retener el filtrado para el en-
plear un reactivo analtico apropiado. sayo de Sustancias no precipitadas por cido
clorhdrico). Lavar el crisol con agua hasta que el
xido de magnesio para cromatografa - Em- ltimo lavado no presente opalescencia con 1 gota
plear uno de grado apropiado. de cido clorhdrico y secar a 105 C hasta peso
xido de mesitilo - C 6 H 10 O - (PM: 98,1) - constante: el residuo no pesa ms de 1 mg (0,02 %).
Lquido incoloro. Sustancias no precipitadas por cido clorhdri-
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en co - Diluir el filtrado obtenido en el ensayo de Sus-
un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa) tancias insolubles en cido ntrico con agua a
250 ml, calentar a ebullicin y agregar, cido primeros 10 ml del filtrado. Agregar a 25 ml del
clorhdrico gota a gota, suficiente para precipitar filtrado posterior, 2 gotas de fenolftalena (SR) y
toda la plata (aproximadamente 5 ml), evitando titular con cido clorhdrico 0,02 N (SV) hasta la
cualquier exceso. Enfriar, diluir con agua a 300 ml desaparicin de cualquier color rosado: no se con-
y dejar reposar durante toda la noche. Filtrar, eva- sume ms de 0,20 ml (0,016 % como NaOH).
porar 200 ml del filtrado en una cpsula de porcela-
xido de trioctilfosfina - C 24 H 51 PO -
na, previamente pesada, hasta sequedad y someter a
(PM: 386,6) Polvo blanco, cristalino. Insoluble en
ignicin: el residuo no pesa ms de 1,7 mg (0,05 agua; soluble en solventes orgnicos.
%). Intervalo de fusin <260> - Entre 54 y 56 C.
Alcalinidad - Calentar 2 g con 40 ml de agua en
un bao de vapor durante 15 minutos, enfriar y xido mercrico amarillo - HgO - (PM:
diluir con agua a 50 ml. Filtrar, descartando los 216,6) - Emplear un reactivo analtico apropiado.
P
Xantidrol - C 13 H 10 O 2 - (PM: 198,2) - Polvo damente 27,5 ml por minuto. Presenta una pureza
cristalino amarillo plido. Insoluble en agua; solu- no menor de 95 %.
ble en alcohol, cloroformo y ter. Soluble en cido ndice de refraccin - Entre 1,5040 y 1,5060, a
actico glacial, dando una solucin prcticamente 20 C.
incolora; cuando el polvo se trata con cido clorh- p-Xileno - C 8 H 10 - (PM: 106,2) - Lquido inco-
drico diluido, se produce un color amarillo limn. loro.
Intervalo de fusin <260> - Entre 121 y 123 C.
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en
Residuo de ignicin <270> - Someter a ignicin
un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa)
500 mg con 0,5 ml de cido sulfrico: el residuo no
equipado con un detector de ionizacin a la llama y
pesa ms de 10 mg (2,0 %).
una columna capilar de 30 m x 0,25 mm recubierta
Xantina - C 5 H 4 N 4 O 2 - (PM: 152,1) - Polvo con una capa de 1 m de una fase estacionaria
blanco, cristalino. Se descompone con el calenta- constituida por polietilenglicol (p.m.p de 950 a
miento. Poco soluble en agua y alcohol; soluble en 1.050). Mantener el inyector y el detector a aproxi-
hidrxido de sodio (SR); moderadamente soluble en madamente 130 y 300 C, respectivamente. La
cido clorhdrico diluido. Cuando se somete a la temperatura de la columna se mantiene a 50 C y se
reaccin de murexida se produce un color prpura programa un ascenso de 10 C por minuto hasta
con el amonaco; con el agregado posterior de 100 C. Se emplea helio como gas transportador. El
hidrxidos alcalinos, el color no desaparece pero rea del pico de C 8 H 10 no es menor de 99 % del
cambia a violeta. rea total.
Residuo de ignicin (Ensayo para reactivos) - ndice de refraccin <230> - Entre 1,493 y
Inapreciable, determinado sobre 100 mg. 1,497, a 20 C.
Prdida por secado <680> - Secar a 105 C du-
Xileno cianol FF - C 25 H 27 N 2 NaO 6 S 2 -
rante 2 horas: no pierde ms de 1 % de su peso.
(PM: 538,6) - Polvo de color gris azulado a azul
Xileno - C 8 H 10 - (PM: 106,2) - Emplear un re- oscuro. Soluble en agua.
activo analtico apropiado. Valoracin - Transferir aproximadamente
50 mg, exactamente pesados, a un matraz aforado
o-Xileno - C 8 H 10 - (PM: 106,2) - Lquido
de 100 ml, disolver en agua, completar a volumen
transparente, incoloro, mvil e inflamable. Insolu-
con agua y mezclar. Transferir 2,0 ml de la solucin
ble en agua; miscible con alcohol y ter.
a un matraz aforado de 50 ml, completar a volumen
Valoracin - Inyectar una alcuota apropiada en
un cromatgrafo de gases (ver 100. Cromatografa) con solucin reguladora de fosfato pH 7,0 (ver
equipado con un detector de ionizacin a la llama y Soluciones reguladoras) y mezclar. Determinar la
absorbancia de la solucin en celdas de 1 cm, a la
una columna de acero inoxidable de 1,8 m x 3 mm
longitud de onda de mxima absorcin, aproxima-
empacada con 1,75 % de silicato de aluminio hidra-
damente a 614 nm, con un espectrofotmetro apro-
tado ms 5,0 % de diisodecil ftalato sobre un sopor-
piado, empleando agua como blanco. Calcular la
te constituido por tierra silcea para cromatografa
de gases la cual ha sido calcinada mezclando dia- absortividad (ver 470. Espectrofotometra ultravio-
tomea con Na 2 CO 3 y calcinada a 900 C. [NOTA: leta y visible): la absortividad no es menor de 55,9,
correspondiendo aproximadamente a 83 % de
la tierra silcea se lava con cido luego se lava con
C 25 H 27 N 2 NaO 6 S 2 .
agua hasta neutralidad pero no se lava con bases. La
Prdida por secado <680> - Secar a 110 C has-
tierra silcea puede ser silanizada al tratarla con un
agente como dimetildiclorosilano para bloquear los ta peso constante: no pierde ms de 6,0 % de su
grupos silanoles superficiales]. Mantener el detec- peso.
tor, el inyector y la columna a aproximadamente Xilosa - C 5 H 10 O 5 - (PM: 150,1) - Emplear uno
280, 180 y 80 C, respectivamente. Se emplea helio de grado apropiado.
como gas transportador con un caudal de aproxima-
INDICADORES, PA PE L E S Y PA PE L E S I NDI C A DOR E S
INDICADORES
Los indicadores se emplean en los ensayos y va- Azul de bromocresol - Ver Verde de bromocre-
loraciones de este compendio para indicar la finali- sol.
zacin de una reaccin qumica en el anlisis vo- Azul de bromofenol - C 19 H 10 Br 4 O 5 S -
lumtrico o para indicar la concentracin de ion (3,3,5,5-Tetrabromofenolsulfoftalena) -
hidrgeno (pH) de las soluciones. Las soluciones
(PM: 670,0) - Cristales rosados. Insoluble en agua;
indicadoras necesarias se enumeran entre las Solu-
soluble en alcohol y en soluciones de hidrxidos
ciones de reactivos, abreviadas como (SR).
alcalinos. Intervalo de transicin: de pH 3,0 a 4,6.
Las soluciones de indicadores bsicos y del gru- Cambio de color: de amarillo a azul.
po de las ftalenas se preparan mediante disolucin
en alcohol. En el caso de indicadores que contienen Azul de bromofenol sdico - (Sal sdica de
un grupo cido, este grupo debe, en primer lugar, 3,3,5,5-Tetrabromofenolsulfoftalena) -
neutralizarse con hidrxido de sodio del siguiente (PM: 646,4) - C 19 H 9 Br 4 O 5 SNa - Cristales rosados.
modo: Soluble en agua y en alcohol. Intervalo de transi-
Triturar 100 mg del indicador en un mortero de cin: de pH 3,0 a 4,6. Cambio de color: de amarillo
superficie lisa con el volumen de hidrxido de sodio a azul.
0,05 N especificado en las indicaciones para prepa- Azul de bromotimol - C 27 H 28 Br 2 O 5 S - (3,3-
rar la Solucin de reactivo, o con el equivalente de Dibromotimolsulfoftalena) - (PM: 624,4) - Polvo
hidrxido de sodio 0,02 N. Cuando se ha disuelto el color crema. Insoluble en agua; soluble en alcohol y
indicador, diluir la solucin con agua a 200 ml en soluciones de hidrxidos alcalinos. Intervalo de
(0,05%). Almacenar las soluciones en envases in- transicin: de pH 6,0 a 7,6. Cambio de color: de
actnicos apropiados. amarillo a azul.
Enumerados en orden ascendente segn el lmite
inferior del intervalo, los indicadores de pH tiles Azul de hidroxinaftol - C 20 H 14 N 2 O 11 S 3 -
son: azul de timol, pH 1,2 - 2,8; amarillo de metilo, (PM: 554,5) - Sal disdica del cido 1-(2-naftolazo-
pH 2,9 - 4,0; azul de bromofenol, pH 3,0 - 4,6; 3,6- disulfnico)-2-naftol-4-sulfnico depositado
verde de bromocresol, pH 4,0 - 5,4; rojo de metilo, sobre cristales de cloruro de sodio - Cristales azules
pH 4,2 - 6,2; prpura de bromocresol, pH 5,2 - 6,8; pequeos. Fcilmente soluble en agua. En el inter-
azul de bromotimol, pH 6,0 - 7,6; rojo de fenol, pH valo de pH entre 12 y 13, su solucin es de color
6,8 - 8,2; azul de timol, pH 8,0 - 9,2 y timolftalena, rojo rosado en presencia de ion calcio y azul pro-
pH 8,6-10,0. fundo en presencia de edetato disdico en exceso.
Aptitud para la determinacin de calcio - Disol-
Alfazurina 2G - Emplear uno de grado apro- ver 300 mg en 100 ml de agua, agregar 10 ml de
piado. hidrxido de sodio (SR) y 1,0 ml de solucin de
Amarillo brillante (C.I. 24.890) - (PM: 592,5) - cloruro de calcio (1 en 200) y diluir con agua a
C 26 H 18 N 4 Na 2 O 8 S - Polvo anaranjado o color xi- 165 ml: la solucin es rojizo rosada. Agregar 1,0 ml
do. Soluble en agua. de edetato disdico 0,05 M: la solucin vira a azul
Prdida por secado <680> - Secar al vaco a profundo.
60C durante 1 hora: no pierde ms de 5 % de su Azul de oracet B - (Solvente azul 19) - Una
peso. mezcla de (C 21 H 16 N 2 O 2 ) 1-metilamino-4-
Amarillo de metilo - C 14 H 15 N 3 - (p- anilinoantraquinona y de (C 20 H 14 N 2 O 2 ) 1-amino-4-
Dimetilaminoazobenceno) - (PM: 225,3) - Cristales anilinoantraquinina - Cuando se emplea para titula-
amarillos que funden entre 114 y 117 C. Insoluble cin en medios no acuosos, su color cambia de azul
en agua; soluble en alcohol, cloroformo, ter, cidos (bsico), prpura (neutro) a rosado (cido).
minerales diluidos y aceites. Intervalo de transicin: Azul de timol - (Timolsulfoftalena) -
de pH 2,9 a 4,0. Cambio de color: de rojo a amari- C 27 H 30 O 5 S (PM: 466,6) - Polvo cristalino de color
llo. oscuro. Poco soluble en agua; soluble en alcohol y
Azo violeta - [4-(p-Nitrofenilazo)resorcinol] - en soluciones de lcalis diluidos. cido - Intervalo
C 12 H 9 N 3 O 4 - (PM: 259,2) - Polvo rojo. Funde de transicin: de pH 1,2 a 2,8. Cambio de color: de
aproximadamente a 193 C, con descomposicin. rojo a amarillo. Alcalino - Intervalo de transicin:
de pH 8,0 a 9,2. Cambio de color: de amarillo a mercurio, escandio, torio o cinc se titula con edetato
azul. disdico.
Azul nilo, clorhidrato - C 20 H 20 ClN 3 O - Negro de eriocromo T - [1-(1-Hidroxi-2-
(PM: 353,9) - (Azul nilo A, como clorhidrato; Clo- naftilazo)-5-nitro-2-naftol-4-sulfonato de sodio] -
ruro de 5-amino-9-(dietilamino)benzo [a] fenoxa- (PM: 461,4) - C 20 H 12 N 3 NaO 7 S - Polvo negro par-
zin-7-io) - Poco soluble en alcohol y en cido acti- dusco que tiene un dbil brillo metlico. Soluble en
co glacial. Intervalo de transicin: de pH 9,0 a 13,0. alcohol, metanol y agua caliente.
Cambio de color: de azul a rosado. Sensibilidad - A 10 ml de una solucin (1 en
200.000) en una mezcla de partes iguales de meta-
Cristal violeta - (Cloruro de hexametil p-
nol y agua agregar solucin de hidrxido de sodio
rosanilina) - C 25 H 30 ClN 3 - (PM: 408,0) - Cristales
(1 en 100) hasta pH 10: la solucin es color azul y
verde oscuro. Poco soluble en agua; moderadamen-
te soluble en alcohol y en cido actico glacial. Sus exenta de turbidez. Agregar 0,01 mg de ion magne-
soluciones son color violeta profundo. sio (Mg): el color de la solucin se torna de color
rojo violeta y con el agregado continuado de ion
Sensibilidad - Disolver 100 mg en 100 ml de
magnesio adquiere una coloracin rojo vino.
cido actico glacial y mezclar. Transferir 1 ml de
solucin a un matraz aforado de 100 ml y completar Negro de eriocromo T triturado - Reducir a
a volumen con cido actico glacial: la solucin es polvo 200 mg de negro de eriocromo T a polvo fino
color azul-violeta y no presenta un tinte rojizo. con 20 g de cloruro de potasio.
Transferir 20 ml de la solucin diluida a un vaso de
Prpura de bromocresol - (Dibromo-o-
precipitados y titular con cido perclrico
cresolsulfoftalena) - C 21 H 16 Br 2 O 5 S - (PM: 540,2)
0,1 N (SV), agregando el cido perclrico lenta-
- Polvo cristalino blanco a rosado. Insoluble en
mente desde una microbureta: no se consumen ms agua; soluble en alcohol y en soluciones de hidrxi-
de 0,10 ml de cido perclrico 0,1 N para producir
dos alcalinos. Intervalo de transicin: de pH 5,2 a
un color verde-esmeralda.
6,8. Cambio de color: de amarillo a prpura.
Fenolftalena - [3,3-Bis(p-hidroxifenil)ftalida] - Rojo congo - Ver Rojo congo en Especificacio-
C 20 H 14 O 4 - (PM: 318,3) - Polvo blanco o dbil- nes de reactivos.
mente amarillento blanco, cristalino. Insoluble en
agua; soluble en alcohol. Intervalo de transicin: de Rojo cresol - (o-Cresolsulfoftalena) -
pH 8,0 a 10,0. Cambio de color: de incoloro a rojo. C 21 H 18 O 5 S - (PM: 382,4) - Polvo rojo-pardo. Poco
soluble en agua; soluble en alcohol y en soluciones
p-Naftolbencena - (PM: 374,4) - (4-[D-(4- diluidas de hidrxidos alcalinos. Intervalo de transi-
Hidroxi-1-naftil)bencilideno]-1(4H)-naftalenona) - cin: de pH 7,2 a 8,8. Cambio de color: de amarillo
(4-HOC 10 H 6 )C(:C 10 H 6 -4:O)(C 6 H 5 ) - Polvo pardo a rojo.
rojizo. Insoluble en agua; soluble en alcohol, ter y
cido actico glacial. Intervalo de transicin: de pH Rojo de fenol - [4,4-(3H-2,1-Benzoxatiol-3-
8,8 a 10,0. Cambio de color: de anaranjado a verde. iliden)difenol, S,S-dixido] - C 19 H 14 O 5 S -
(PM: 354,4) - Polvo cristalino, vara el color de
Naranja de metilo - (Heliantina o tropeolina rojo brillante a rojo oscuro. Muy poco soluble en
D) - C 14 H 14 N 3 NaO 3 S - (PM: 327,3) - Sal sdica agua; fcilmente soluble en soluciones de carbona-
del cido dimetilaminoazobenceno sulfnico o tos e hidrxidos alcalinos; poco soluble en alcohol.
dimetilaminoazobenceno sulfonato sdico. Polvo o Intervalo de transicin: de pH 6,8 a 8,2. Cambio de
escamas cristalinas de color amarillo anaranjado. color: de amarillo a rojo.
Poco soluble en agua fra; fcilmente soluble en
agua caliente; insoluble en alcohol. Intervalo de Rojo de metilo - (PM: 305,8) - (cido 2-[[4-
transicin: de pH 3,2 a 4,4. Cambio de color: de (dimetilamino)fenil]azo]benzoico, clorhidrato) - 2-
rosado a amarillo. [4-(CH 3 ) 2 NC 6 H 4 N:N]C 6 H 4 COOH] . HCl - Polvo
rojo oscuro o cristales de color violeta. Moderada-
Naranja de xilenol - C 31 H 28 N 2 Na 4 O 13 - (N,N- mente soluble en agua; soluble en alcohol. Intervalo
[3H-2,1-Benzoxatiol-3-ilidenbis-[(6-hidroxi-5- de transicin: de pH 4,2 a 6,2. Cambio de color: de
metil-3,1-fenilen)metilen]]bis[N- rojo a amarillo.
(carboximetil)glicina] S,S-dixido) - (PM: 760,6) -
Polvo anaranjado. Soluble en alcohol y agua. En Rojo de metilo sdico - (Sal sdica del cido 2-
solucin cida, es color amarillo limn y sus com- [[4-(dimetilamino)fenil]azo] benzoico) -
plejos metlicos son intensamente rojos. Proporcio- (PM: 291,3) - 2-[4-
na un punto final diferenciado cuando un metal, (CH 3 ) 2 NC 6 H 4 N:N]C 6 H 4 COONa - Polvo naranja
como por ej., bismuto, cadmio, lantano, plomo, pardusco. Fcilmente soluble en agua fra y alcohol.
Intervalo de transicin: de pH 4,2 a 6,2. Cambio de Solucin mezcla de azul sulfn y bromuro de
color: de rojo a amarillo. dimidium
Rojo de quinaldina - (Ioduro de 5- Timolftalena - C 28 H 30 O 4 - (PM: 430,5) - Pol-
dimetilamino-2-estiriletil quinolinio) - C 21 H 23 IN 2 - vo cristalino blanco a algo amarillo. Insoluble en
(PM: 430,3) - Polvo de color azul oscuro a negro. agua; soluble en alcohol y en soluciones de hidrxi-
Moderadamente soluble en agua; fcilmente soluble dos alcalinos. Intervalo de transicin: de pH 9,3 a
en alcohol. Funde aproximadamente a 260 C, con 10,5. Cambio de color: de incoloro a azul.
descomposicin. Intervalo de transicin: de pH 1,4
Tornasol - Polvo azul. Parcialmente soluble en
a 3,2. Cambio de color: de incoloro a rojo.
agua y alcohol. Intervalo de transicin: de pH
Rojo neutro - (3-Amino-7-dimetilamino-2- aproximadamente 4,5 a 8. Cambio de color: de rojo
metilfenazina monoclorhidrato) - C 15 H 16 N 4 .HCl - a azul. El papel de tornasol no es apropiado para
(PM: 288,8) - Polvo grueso color rojizo a verde determinar el pH de alcaloides, carbonatos y bicar-
aceituna. Moderadamente soluble en agua y alco- bonatos.
hol. Intervalo de transicin: de pH 6,8 a 8,0. Cam-
Verde brillante - Ver Verde brillante en la Es-
bio de color: de rojo a anaranjado.
pecificaciones de reactivos.
Sal sdica de prpura de bromocresol -
Verde de bromocresol - (Azul de bromocresol;
(PM: 562,2) - C 21 H 15 Br 2 O 5 SNa - Polvo negro.
Tetrabromo m-cresolsulfoftalena) -
Soluble en agua. Intervalo de transicin: de pH 5,0
C 21 H 14 Br 4 O 5 S - (PM: 698,0) - Polvo blanco o
a 6,8. Cambio de color: de amarillo verdoso a
amarillo plido. Poco soluble en agua; soluble en
prpura-violeta. alcohol y en soluciones de hidrxidos alcalinos.
Intervalo de fusin <260> - Entre 261 y 264 C. Intervalo de transicin: de pH 4,0 a 5,4. Cambio de
Sal sdica de verde de bromocresol - Emplear color: de amarillo a azul.
uno de grado apropiado. Verde de malaquita, oxalato - (PM: 927,0) -
Sal trisdica del cido 2-(4-sulfofenilazo)-1,8- [4-NH(CH 3 ) 2 C 6 H 4 C(C 6 H 5 ):C 6 H 4 -4-:N(CH 3 ) 2 (OC
dihidroxi-3,6 naftaleno disulfnico - (Sal trisdi- OCOOH)] 2 (COO) 2 - Es el oxalato, cristalizado con
ca del cido 4,5-dihidroxi-3-(p-sulfofenilazo)-2,7- cido oxlico, de un colorante derivado del trife-
naftalenodisulfnico) - C 16 H 9 N 2 O 11 S 3 Na 3 - nilmetano. Polvo verde oscuro, de brillo metlico.
(PM: 570,4) - Polvo rojo. Soluble en agua. Moderadamente soluble en agua; soluble en cido
actico glacial. Intervalo de transicin: de pH 0,0 a
Sulfito de bismuto - Emplear uno de grado
2,0. Cambio de color: de amarillo a verde.
apropiado.
Los papeles y papeles indicadores son tiras de en varillas de vidrio u otro material inerte en un
papel de dimensin y grado apropiado (ver Papel de espacio exento de cido, lcali y otros gases.
filtro cuantitativo, en Especificaciones de reactivos) Cortar el papel en tiras de tamao conveniente y
impregnadas con un indicador o un reactivo. Algu- almacenar los papeles en envases inactnicos, bien
nos papeles pueden obtenerse comercialmente. cerrados, protegidos de la humedad.
Aquellos requeridos en los ensayos y valoraciones
Papel de acetato de plomo Generalmente de
de este compendio pueden ser preparados segn se
un tamao aproximado de 6 mm por 80 mm. Usar
indica a continuacin.
acetato de plomo (SR) y secar el papel a 100 C,
Tratar el papel de filtro con cido clorhdrico y
evitando el contacto con metales.
lavarlo con agua hasta que el ltimo lavado ya no
de reaccin cida con rojo de metilo. Luego tratar Papel de amarillo de metilo - Emplear una so-
con amonaco (SR) y lavar nuevamente con agua lucin (1 en 2000) de amarillo de metilo en alcohol.
hasta que el ltimo lavado no sea alcalino a la fe- Papel de bromuro mercrico- Emplear bromu-
nolftalena. ro mercrico alcohlico (SR). Almacenar protegido
Luego de un secado minucioso, saturar el papel de la luz.
con la concentracin apropiada de soluciones indi-
cadoras y cuidadosamente secar al aire, a menos Papel de crcuma - Emplear una solucin pre-
que se especifique de otro modo, suspendindolos parada del siguiente modo: macerar 20 g de polvo
de crcuma, la raz seca de Curcuma longa Linne
(Fam. Zingiberaceae), con cuatro porciones de evaporar hasta sequedad: el residuo no presenta ms
100 ml de agua fra, decantando la porcin lquida de 0,02 mg de PO 4 .
transparente cada vez y descartndola. Secar el Residuo de ignicin - Someter a ignicin cuida-
residuo a una temperatura no mayor de 100 C. dosamente 10 tiras del papel hasta peso constante:
Macerar con 100 ml de alcohol durante varios das el peso del residuo corresponde a no ms de 0,4 mg
y filtrar. por tira de aproximadamente 3 cm2.
Sensibilidad - Sumergir una tira del papel, de cidos de colofonia - Sumergir una tira del pa-
longitud de aproximadamente 1,5 cm, en una solu- pel azul en una solucin de 100 mg de nitrato de
cin de 1,0 mg de cido brico en 5 ml de agua, plata en 50 ml de agua: el color del papel no cambia
previamente mezclada con 1 ml de cido clorhdri- en 30 segundos.
co. Luego de 1 minuto remover el papel del lquido Sensibilidad - Dejar caer una tira de 10 a 12 mm
y dejarlo secar: el color amarillo cambia a pardo. en un vaso de precipitados que contenga 100 ml de
Luego humedecer el papel con amonaco (SR): el cido 0,0005 N y agitar continuamente: el color del
color del papel cambia a negro verdoso. papel cambia dentro de los 45 segundos. El cido
Papel de fenolftalena - Emplear una solucin 0,0005 N se prepara diluyendo 1 ml de cido
clorhdrico 0,1 N con agua purificada hervida re-
(1 en 1.000) de fenolftalena en alcohol diluido.
cientemente y enfriada a 200 ml.
Papel de iodato - almidn - Emplear una mez-
cla de volmenes iguales de almidn (SR) y solu- Papel de tornasol rojo - Generalmente de un
cin de iodato de potasio (1 en 20). tamao aproximado de 6 mm 50 mm. El papel de
tornasol rojo cumple con los requisitos de los ensa-
Papel de ioduro - almidn - Emplear una solu- yos para Fosfato, Residuo de ignicin y cidos de
cin de 500 mg de ioduro de potasio en 100 ml de colofonia en Papel de tornasol azul.
almidn recientemente preparado (SR). Sensibilidad - Dejar caer una tira de 10 a 12 mm
Papel de sulfato cprico - Emplear sulfato en un vaso de precipitados que contenga 100 ml de
cprico (SR). hidrxido de sodio 0,0005 N y agitar continuamen-
te: el color del papel cambia dentro de los 30 se-
Papel de tornasol azul - Generalmente de un gundos. El hidrxido de sodio 0,0005 N es prepara-
tamao aproximado de 6 mm 50 mm. Cumple do diluyendo 1 ml de hidrxido de sodio 0,1 N con
con los requisitos de los siguientes ensayos. agua purificada recientemente hervida y enfriada a
Fosfato (Ensayo para reactivos) - Cortar 5 tiras 200 ml.
en piezas pequeas, mezclar con 500 mg de nitrato
de magnesio en un crisol de porcelana y someter a Papel indicador de pH de intervalo corto -
ignicin. Agregar al residuo 5 ml de cido ntrico y Emplear uno grado apropiado.
SOL UC I ONE S
100 99 98 97 96 95 94 93 92
95 6,50 5,15 3,83 2,53 1,25
90 13,25 11,83 10,43 9,07 7,23 6,41 5,10 3,80 2,54
85 20,54 19,05 17,58 16,15 14,73 13,33 11,96 10,59 9,24
80 28,59 27,01 25,47 23,95 22,45 20,95 19,49 18,04 16,61
75 37,58 35,90 34,28 32,67 31,08 29,52 27,97 26,43 24,94
70 47,75 45,98 44,25 42,54 40,85 39,18 37,53 35,89 34,27
65 59,37 57,49 55,63 53,81 52,00 50,22 48,45 46,70 44,96
60 72,82 70,80 68,80 66,85 64,92 63,00 61,10 59,21 57,33
55 88,60 86,42 84,28 82,16 80,06 77,99 75,93 73,88 71,85
50 107,44 105,08 102,75 100,44 98,15 95,89 93,64 91,41 89,19
45 130,26 127,67 125,11 122,57 120,06 117,57 115,09 112,64 110,18
40 158,56 155,68 152,84 150,02 147,22 144,46 141,70 138,95 136,23
35 194,63 191,39 188,19 185,01 181,85 178,71 175,60 172,49 169,39
30 242,38 238,67 234,99 231,33 227,70 224,08 220,49 216,90 213,33
25 308,90 304,52 300,18 295,86 291,56 287,28 283,02 278,77 274,53
20 408,50 403,13 397,79 392,47 387,17 381,90 376,64 371,40 366,16
15 574,75 567,43 560,53 553,55 548,59 539,66 532,74 525,83 518,94
10 907,09 896,73 886,40 876,10 865,15 855,55 845,31 835,08 824,86
90 85 80 75 70 65 60 55 50
85 6,56
80 13,79 6,83
75 21,89 14,48 7,20
70 31,10 23,14 15,35 7,64
65 41,53 33,03 24,66 16,37 8,15
60 53,65 44,48 35,43 26,47 17,58 8,76
55 67,87 57,90 48,07 38,32 28,63 19,02 9,47
50 84,71 73,90 63,04 52,43 41,73 31,25 20,47 10,35
45 105,34 93,30 81,38 69,54 57,78 46,09 34,46 22,90 11,45
40 130,80 117,34 104,01 90,76 77,58 64,48 51,43 38,46 25,55
35 163,28 148,01 132,88 117,82 102,84 87,93 70,08 58,31 43,59
30 206,22 188,57 171,05 153,53 136,34 118,94 101,71 84,57 67,45
25 266,12 245,15 224,30 203,61 182,83 162,21 141,65 121,16 100,73
20 355,80 329,84 304,01 278,26 252,58 226,98 201,43 175,96 150,55
15 505,27 471,00 436,85 402,81 368,83 334,91 301,07 267,29 233,64
10 804,50 753,65 702,89 652,51 601,60 551,06 500,50 450,19 399,85
Ejemplo - Para reducir un alcohol de 80 por 100 (en volumen) al ttulo de 40 por 100 se busca en la columna vertical correspondiente a
80 por 100 el nmero correspondiente a la lnea horizontal 40, lo que da 104,01. Luego a 100 volmenes de alcohol de 80 por 100 hay que
agregar 104,01 volmenes de agua para obtener alcohol de 40 por 100.
Tablas alcoholimtricas
Determinacin de la concentracin alcohlica en peso y en volumen de agua, segn K. Windisch
Determinacin de la concentracin alcohlica en peso y en volumen de agua, segn K. Windisch
Determinacin de la concentracin alcohlica en peso y en volumen de agua, segn K. Windisch
Determinacin de la concentracin alcohlica en peso y en volumen de agua, segn K. Windisch
Determinacin de la concentracin alcohlica en peso y en volumen de agua, segn K. Windisch
Determinacin de la concentracin alcohlica en peso y en volumen de agua, segn K. Windisch
Determinacin de la concentracin alcohlica en peso y en volumen de agua, segn K. Windisch
Determinacin de la concentracin alcohlica en peso y en volumen de agua, segn K. Windisch
Determinacin de la concentracin alcohlica en peso y en volumen de agua, segn K. Windisch
Determinacin de la concentracin alcohlica en peso y en volumen de agua, segn K. Windisch