NORMAS PARA TOMA DE MUESTRAS

DE AZUCAR PARA ANALISIS

MICROBIOLOGICOS

Introduccin

La toma de muestra para anlisis microbiolgicos debe realizarse bajo estrictas

condiciones de asepsia, evitando introducir cualquier tipo de contaminacin
externa en las muestras recolectadas.
Se describirn los requerimientos y los pasos a realizarse para obtener una
muestra para ser analizada microbiolgicamente.
La metodologa es aplicable ya sean materiales slidos o lquidos.

Metodologa

Materiales
Recipientes de muestra estriles: la muestra puede ser recolectada en
frascos plsticos de boca ancha y tapa rosca, secos, limpios y estriles o en
bolsas estriles con bordes autosellables. Pueden emplearse otros
recipientes plsticos o metlicos estriles con cierre hermtico.
Dispositivos de toma de muestra: se emplearn muestreadores,
cucharas, cucharones, pipetas, sondas u otros dispositivos adecuados que
puedan ser esterilizados.
Materiales para identificar la muestra: el recipiente conteniendo cada
muestra deber ser debidamente rotulado, empleando para ello marcadores
a prueba de agua y cinta adhesiva.
Recipientes refrigerados para el transporte de la muestra: la muestra
deber ser inmediatamente transportada al laboratorio para la realizacin
del anlisis microbiolgico. Cuando esto no sea posible y se trate de
muestras lquidas, deber ser inmediatamente refrigerada entre 0 y 5C en
recipientes apropiados hasta su procesamiento. El perodo de refrigeracin
no deber exceder las 4 horas.
Vestimenta del personal involucrado: el personal que llevar a cabo la
toma de las muestras para anlisis microbiolgico deber estar provisto de
delantal limpio o bata desechable, deber lavarse sus manos con agua
caliente y detergente durante al menos 30 segundos antes de realizar la
recoleccin de la muestra. En el momento de la misma, usar guantes
descartables para evitar el contacto y contaminacin de la muestra con los
microorganismos presentes en su piel.
Reactivos
Alcohol Etlico al 70%: se emplear para desinfectar los lugares donde se
tomar la muestra, la superficie del envase que la contenga y cualquier otra
rea que requiera desinfeccin durante el muestreo o anlisis.
 Solucin de hipoclorito de sodio (100 ppm de cloro disponible) para la
desinfeccin de mesadas, pisos u otras superficies. Este desinfectante se
emplea en el rea de laboratorio y mesn de trabajo en lugar del alcohol al
70%, para mantener condiciones aspticas durante el anlisis.

Frecuencia de Anlisis
La frecuencia de anlisis y nmero de muestras depender de las
especificaciones del producto terminado o materia prima y del objetivo del
anlisis microbiolgico. Si la realizacin del mismo es con fines de control
microbiolgico en planta, deber realizarse en forma seriada con una
frecuencia tal que permita valorar las variaciones de las condiciones
ambientales y del producto en perodos cortos de tiempo.

Desarrollo

a) Muestras

Las muestras microbiolgicas debern ser tomadas por personal tcnico

calificado y entrenado para el muestreo microbiolgico.
Se entregar las muestras al laboratorio en los recipientes originales
cerrados para evitar su contaminacin. Si se trata de material o producto a
granel deber muestrearse aspticamente al azar, para obtener una
muestra representativa. Se transferir luego la muestra a un recipiente
estril cuidando las condiciones de asepsia.
El responsable del muestreo debe estar ataviado con ropa limpia y
apropiada y/o con otros artculos de proteccin. La zona ms prxima al
lugar de la toma de muestra se desinfectar con alcohol al 70%. Es
conveniente tener un mechero o hisopo encendido cerca del lugar de
muestreo para evitar el ingreso de microflora desde el aire circundante.
Deber utilizar cucharas, cucharones, pipetas, etc., secos y estriles y
transferir la muestra apropiada al recipiente seco y estril.

b) Transporte de las Muestras a laboratorio externo

En caso en que el anlisis sea realizado en laboratorios externos a la planta
, las muestras debern ser transportadas de manera que lleguen sin
cambios. Si la muestra es refrigerada o congelada, deber transportarse
rpidamente en un recipiente trmico pre-congelado. Estos cuidados se
aplican a muestras que pueden tener alteraciones microbiolgicas por el
tiempo y condiciones ambientales (por ejemplo azcar lquida, jarabes,
etc.), no siendo el caso del azcar granular,
Las muestras refrigeradas deben mantenerse entre 0 C y 5 C.
Las muestras congeladas deben mantenerse a 0C o menos con hielo
seco.
Si las muestras van a ser enviadas bajo condiciones climticas extremas, es
necesario tomar precauciones para que las muestras no se vean afectadas
por dichas condiciones.
 Cuando se enven muestras refrigeradas o congeladas, se debe notificar al
laboratorio receptor y registrar las condiciones de muestreo: fecha, hora y
lugar de muestreo, tipo de muestra, cantidad de muestras, fecha y hora de
envo, temperatura de muestreo y temperaturas de conservacin y todo otro
dato que se considere importante.
Identificar cada una de las muestras del envo adecuadamente. La hora de
recoleccin, datos y lugar de muestreo son parte de su identificacin.

c) Tcnicas de Muestreo

En el caso de emplear bolsas con cierre estriles :

Se recolectar cada muestra en una bolsa.

Se identificar cada muestra en el exterior de la bolsa, con marcador
resistente al agua.
Se deber quitar la parte superior de la bolsa y tirar las lengetas para
abrirla. No tocar el interior de la bolsa.
Una vez introducida la muestra cerrar la bolsa tirando de las lengetas .
Se enrollar la bolsa dos o tres veces para sellar la apertura.
Se anudarn las lengetas de cierre.

En el caso de emplear recipientes estriles con tapa:

Se tomar cada muestra en un recipiente.

Se identificar cada muestra en el exterior del mismo, con marcador
resistente al agua.
Se deber quitar la tapa aspticamente mientras se introduce la muestra.
Una vez completado del volumen del recipiente se coloca la tapa y se
cierra hermticamente.

d) Muestreo de Vlvulas:
Se abrir la vlvula y permitir que salga lquido durante 20 segundos.
Se recoger el lquido en un recipiente apropiado sin dejar caer al piso.
Se cerrar la vlvula y limpiar con alcohol etlico al 70% .
Se insertar un hisopo estril o un cepillo empapado en alcohol etlico al
70% en la salida de la vlvula, frotndola hasta que quede limpia.
Se limpiar nuevamente con alcohol al 70%, dejndolo actuar al menos
durante 30 segundos.
Se abrir nuevamente la vlvula y se dejar que fluyan aproximadamente
500 cc. de lquido al recipiente.
Recin entonces se tomar la muestra empleando un reciente limpio, seco
y estril o una bolsa con cierre estril ( se recolectara no menos de 200 ml.)
Se cerrar la vlvula y limpiar los residuos de muestra de la apertura con
alcohol al 70%.
e) Muestreo de un Recipiente Abierto:

Se limpiarn las paredes interiores y exteriores del recipiente de muestreo

(cuchara, cucharn o taza de acero inoxidable) con algodn empapado en
alcohol al 70% y se flamear a la llama. Se dejar enfriar hasta consumir el
alcohol. Puede utilizarse para la toma de muestra pipetas o dispositivos de
muestreo previamente esterilizados.
A continuacin se tomar la muestra y se la transferir a una bolsa estril.

f) Muestreo de Recipiente Cerrado ( Bolsas ) :

Se limpiar el muestreador con algodn empapado en alcohol al 70% y se

flamear a la llama. Se dejar enfriar hasta consumir el alcohol.
Se introducir el muestreador en la bolsa elegida con un pequeo ngulo,
de tal forma que, con movimientos circulares y axiales, se permita el
escurrimiento del azcar hacia el extremo delantero del muestreador, donde
se recoger dicha muestra en el recipiente estril intermedio (en caso de
muestreo compuesto) o final.
La cantidad de muestra recolectada en caso de muestreos individuales de
bolsas no debe pasar el del contenido de la bolsa de muestreo ( no
siendo inferior a 200 grs.)
El muestreador antes de su prxima utilizacin debe ser lavado y
esterilizado segn lo descripto anteriormente.