Resumen o sumario

La determinacin del cortisol srico total forma parte fundamental de la exploracin

bioqumica de la funcin adrenocortical. Dado que esta hormona circula en plasma,
en parte unida a protenas de transporte y en parte en estado libre, existe la
posibilidad de realizar la determinacin de sus diferentes fracciones no solo en
sangre sino tambin en orina, saliva y otros fluidos biolgicos. Es posible realizar
tanto determinaciones basales como pruebas funcionales y de esta manera evaluar
la secrecin de cortisol en un momento dado del da, estudiar su variacin
circadiana y analizar su relacin con el resto de los componentes del eje hipotlamo-
hipfiso-adrenal.
Marco Terico
Cortisol (Hidrocortisona, Componente F), un esteroide C21 con un peso molecular
de 363,5 Dalton, es el glucocorticoide humano ms importante. Es formado y
secretado por la corteza suprarrenal.
El 90% del cortisol est ligado a la plasmaprotena transcortina y un 7% est ligado
a la albmina. El resto, la parte no ligada, es la forma biolgicamente activa del
cortisol, que puede ser determinada en suero, plasma, saliva u orina.
Entre las hormonas secretadas por la corteza suprarrenal, juega solamente el
cortisol, mediante el mecanismo de retroacoplamiento negativo, un papel en la
regulacin de la secrecin de ACTH.
Los glucocorticoides intervienen regulando en los importantes procesos fisiolgicos
del metabolismo de hidratos de carbono (por ej. glucognesis, sntesis de glicgeno
o aumento de glucosa sangunea), protenas (incremento del catabolismo, inhibicin
de la sntesis) y lpidos. Ellos participan tambin en la inhibicin de reacciones
alrgicas e inflamatorias.
El cortisol entonces juega un papel importante en reacciones de estrs del cuerpo
humano, por ej. Operaciones, enfermedades mayores o en traumas severos.
La determinacin de cortisol se efecta para el diagnstico clnico de anomalas de
la sntesis glucocorticoide 1, por ej. Sospecha del sndrome de Cushing, enfermedad
de Addison o insuficiencia de la corteza suprarrenal.
EIA Competitivo - El anlisis CORTISOL ELISA de HUMAN est destinado al uso
profesional. El ELISA se basa en la interaccin competitiva de cortisol de la muestra
y un conjugado enzimticohormonal por una cantidad limitada de anticuerpos anti-
cortisol monoclonales (ratn). Por eso la cantidad de conjugado hormonal-
enzimtico ligado es inversamente proporcional a la concentracin de cortisol en la
muestra. Despus de la incubacin de la muestra y del conjugado
hormonalenzimtico, el conjugado no ligado es eliminado por lavado. Con la adicin
de la solucin sustrato (paso 2) se desarrolla un color azul, que se transforma a
amarillo despus de parar la reaccin. La intensidad del color es inversamente
proporcional a la concentracin de cortisol de la muestra. La absorbancia de los
calibradores y muestras se determina haciendo uso de un lector de micropocillos
ELISA o sistemas completamente automatizadas (p.ej. instrumentos de las lneas
HumaReader o ELISYS de HUMAN). Los valores de concentracin de muestras
desconocidas se determinan mediante una curva de calibracin obtenida con ayuda
de calibradores de concentraciones conocidas de cortisol.
Interpretacin de resultados La concentracin de cortisol est sujeta a fuertes
fluctuaciones circadianas con valores altos por la maana y bajos por la noche. Por
esta razn es muy importante realizar siempre determinaciones de cortisol de
muestras que fueron obtenidas a una hora definida (comnmente 8 horas de la
maana). Solamente entonces puede resultar una interpretacin til (vase valores
normales). Valores de cortisol por encima de los valores normales
(hipercortisolismo) sealan al sndrome de Cushing, el cual es indicado en pacientes
con concentracin anormal de transcortina, por ej. En adiposidad, embarazo o
hipotiroidismo. Sin embargo, tampoco puede excluirse el sndrome de Cushing con
valores en el rango normal 2. Hipocortisolismo (valores de cortisol en repetidas
determinaciones por debajo de valores basales) es comprobable en insuficiencia
primaria y secundaria de la corteza suprarrenal, la cual debe confirmarse efectuando
una determinacin de ACTH 3. La determinacin de cortisol por s sola es
insuficiente para un diagnstico. La anamnesis as como exmenes clnicos
adicionales, especialmente parmetros diagnsticos (hormonales), deben tenerse
en cuenta.

Resultados
Niveles de estradiol --------------------------- fuera del rango normal
Discusin de resultados
El manejo y realizacin de esta prctica que es la ELISA competitivo se tiene que
realizar con las medidas correctas, el tiempo establecido y con cuidado al lavarlo ya
que no se deben tocar en la parte de bajo ya que dejan grasa de las yemas de los
dedos, este da resultados alterado de la muestra.
Pero si este resultado estuviera dentro de los valores normales no tiene ninguna
alteracin pero eso va dependiendo tambin de la hora en que se tome la muestra
ya que por lo regular en la madrugada estas tienden a aumentar para preparar al
cuerpo el resto del da que es de 50 a 250 ng/ml.
Si los valores estn por encima de lo normal puede que el cuerpo este en
situaciones de estrs o est sufriendo de una enfermedad de Cushing sndrome de
Cushing ectpico o un feocromocitoma.
O un nivel bajo de cortisol en la sangre puede que la persona este sufriendo de
enfermedad de Addison hipopituitarismo ya sea primario o secundario donde la
hipfisis le da la seal a la glndula para que este libere ms sntesis y secrecin
de cortisol; o inhibicin del funcionamiento normal de la hipfisis o de las glndulas
suprarrenales por causa de medicamentos

Conclusiones
Al realizar una Prueba de ELISA esta debe ser controlada muy bien en lo que
se refiere al tiempo, en los reactivos que se utilizan como tambin en las
medidas ya que pueden ocasionar un falso positivo y alterar el diagnostico.
Los niveles de cortisol en suero nos ayudan a controlar el funcionamiento de
la glndula suprarrenal en el cual podemos detectar si hay o no, una
hipersecrecin o hiposecrecin.
El eje hipotlamo hipfisis adrenal debe funcionar correctamente una
alteracin en estos podra causar que estos no acten correctamente en el
cuerpo y no puedan ejercer un adecuado funcionamiento a nivel fisiolgico.

Anexos
Anexo
Investigue lo siguiente:
1. Investigue brevemente qu condiciones mdicas pueden dar
origen a niveles alterados de cortisol
- Estrs
- Problemas en la hipfisis
- Consumo de esteroides y bebidas alchololicas
- Problemas en glndulas suprarrenales
- Hipercortisolismo
- Sndrome de Cushing
- Enfermedad de addison
2. Qu pruebas complementarias deben acompaar al cortisol para
dar un diagnstico ms certero?
Niveles de ACTH a nivel hipofisiario
Niveles de CRH hormona liberadora de cortiotropina a nivel
hipotalamo
3. Menciones los efectos que tiene el cortisol sobre:
a. El metabolismo de los carbohidratos
Estimulacin de la gluconeognesis
Reduccin del consumo de glucosa en las clulas
 Elevacin de la glucemia y diabetes suprarrenal
b. El metabolismo de las protenas
Disminucin de las reservas en casi todas las clulas,
excepto las hepticas.
Incremento en las protenas plasmticas y hepticas
c. El metabolismo de las grasas
Movilizacin de cidos grasos
4. Investigue la funcin del cortisol en el estrs y la
inflamacin
Se eleva su produccin en situaciones de estrs: siempre que
hay estrs se libera cortisol, as como con las infecciones,
los traumatismos y el ejercicio.

Bibliografa

nora, f. (2007). Obtenido de http://www.higiene.edu.uy/parasito/trabajos/elisa.pdf

worldwide, H. d. (s.f.). Human . Obtenido de http://www.human-de.com/data/gb/vr/el.estra.pdf

rea Endocrinologa, Departamento de Bioqumica Clnica, INFIBIOC, Facultad de

Farmacia y Bioqumica, Universidad de Buenos Aires,
Human, cortisol anlisis de ELISA para la determinacin cuantitativa de cortisol en suero o plasma
humano Human Gesellschaft fr Biochemica und Diagnostica mbH, Germany

ndice
Resumen o sumario 1
Marco terico 1
Datos, clculos y resultados 2
Discusin de resultados 2
Conclusiones 3
Anexos 3
Bibliografa 4
Universidad Mariano Glvez de Guatemala
Facultad de ciencias mdicas y de la salud
Campus Huehuetenango
Bioqumica III
Lic. Mara Rene Aguilar

Reporte: PRCTICA NO. 9

DETERMINACIN CUALITATIVA DE CORTISOL POR EL MTODO DE ELISA

Estefany Veliz 6200-15-99

Karla Castillo 6200-15-244
Boris Recinos 6200-15-271
Brandon Galindo 6200-15-779
Fecha: 25 de abril de 2017