Reao de VDRL em amostras

Aula 3 de lquor
A realizao do VDRL em amostras de lquor uma ferramenta fundamental para o diagnstico da
sfilis congnita ou da neurossfilis.

Para analisar amostras de lquor, o preparo do antgeno sofre algumas modificaes, conforme
voc ver nesta aula. Mas, antes, fique atento s orientaes a seguir.

Somente o VDRL pode ser utilizado para testar amostras de lquor.

No teste amostras de lquor com conjuntos diagnsticos que no tenham sido
padronizados para a utilizao nesse tipo de amostra.
Antes de realizar o teste, certifique-se de que o kit de que voc dispe permite testar
amostras de lquor.
Leia as instrues do fabricante do produto antes de iniciar o teste.

Cuidados com a amostra de lquor

para fazer o VDRL
A amostra de lquor deve ser centrifugada, a fim de sedimentar e remover hemcias ou
contaminaes bacterianas que podem estar presentes e causar interferncia no teste.

!
A amostra de lquor no precisa ser inativada para a realizao do
VDRL.

Amostras de lquor turvas aps a centrifugao, ou com hemlise, no so adequadas para o

teste VDRL. Nesses casos, solicite uma nova amostra.

Se no for possvel obter nova amostra, e se houver concordncia do mdico que estiver
assistindo o indivduo, pode-se fazer um teste treponmico. No entanto, se esse teste for
reagente, deve-se obrigatoriamente fazer o VDRL para o acompanhamento do tratamento.

Diagnstico da Sfilis - Aula 3 1

Procedimentos do VDRL em amostras de lquor

1. Preparo da suspenso antignica modificada para uso em amostras de lquor

Materiais necessrios:

Suspenso antignica de VDRL preparada conforme est detalhado na ao 3 e validada

de acordo com a ao 6, na aula 2.
Soluo de NaCl 10% (10 g de NaCl em 100 mL de gua destilada).
Erlenmeyer de 25 mL com tampa de vidro esmerilhado.
Pipetas de volume ajustvel entre 1,0 mL e 5,0 mL ou pipetas de vidro de 2 mL.
Pera ou macrocontrolador de pipetagem para pipetas de vidro.
Recipiente para descarte de ponteiras ou recipiente com gua e sabo neutro para colocar
as pipetas de vidro utilizadas.
Cronmetro.
Caneta para escrever em vidro.
Protocolo de trabalho.

Como fazer?
a) Misture, em um Erlenmeyer, uma parte de soluo de NaCl 10% com uma parte da
suspenso antignica do VDRL previamente preparada e validada para utilizao com
amostras de soro.
b) Para testar entre uma e cinco amostras de lquor, misture 1,5 mL de NaCl 10% com 1,5
mL da suspenso antignica.
c) Homogeneize a mistura por meio de suaves movimentos de rotao. Deixe a mistura
descansar ao menos 5 minutos antes do uso.
d) Identifique o Erlenmeyer: Suspenso antignica para VDRL em lquor, horrio e data do
preparo.
f) Utilize a suspenso em at 2 horas aps o preparo. Depois desse perodo, se houver
necessidade de testar outras amostras de lquor, prepare uma nova suspenso antignica.

Diagnstico da Sfilis - Aula 3 2

2. O teste de VDRL qualitativo em amostras de lquor

Materiais necessrios:

Suspenso antignica modificada.

Soluo salina (NaCl 0,9%).
Seringa de vidro de 1 mL com agulha de calibre 22 G calibrada para 50 gotas com 0,5 mL
da suspenso antignica ou pipeta de 10 L.
Lmina de vidro escavada com crculos cncavos de 14 mm de dimetro e 1,75 mm de
profundidade (lminas de Kline).
Agitador orbital, tipo Kline, ajustado para 180 2 rpm.
Microscpio ptico comum (objetiva 10X e ocular 10X).
Pipetas de volume ajustvel entre 50 L e 200 L.
Ponteiras descartveis para volumes entre 50 L e 200 L.
Caixa para descarte de ponteiras.
Recipiente de vidro para descontaminao de produtos biolgicos, contendo soluo
aquosa de hipoclorito de sdio (uma parte de gua sanitria comercial mais quatro partes de
gua) ou contendo lcool 70% (peso a peso p/p).
Caneta para escrever em vidro.
Cronmetro.
Protocolo de trabalho.

!
Para calibrar a agulha utilizada para pipetar a suspenso antignica do
VDRL no lquor voc deve seguir os mesmos procedimentos detalhados
anteriormente na ao 4 (aula 2) para o VDRL. Observe ainda que:

o calibre da agulha de 22 G;
a agulha estar calibrada se voc contar 50 gotas (1) para cada 0,5 mL
de suspenso antignica modificada, correspondente a 10 L por gota.

Diagnstico da Sfilis - Aula 3 3

Como fazer?

Organize seu protocolo de trabalho.

Confira os procedimentos do VDRL qualitativo em amostras de liquor no passo a passo a seguir.

1 Pipete 50 L do lquor em uma demarcao da lmina escavada de Kline.

2 Cuidadosamente, faa a homogeneizao da suspenso antignica modificada.

3 Pipete 10 L da suspenso antignica modificada na demarcao da lmina que contm o lquor.

4 Coloque a lmina no agitador orbital durante 8 minutos, com agitao de 180 rpm.

5 Faa a leitura da reao em microscpio ptico, com objetiva de 10X e ocular de 10X,
imediatamente aps o trmino da agitao.

6 Se no for observada floculao na amostra, a reao negativa e o laudo pode ser emitido. Caso
haja floculao na amostra de lquor puro, a reao positiva. Neste caso, para determinar o ttulo
necessrio fazer a reao quantitativa por meio da diluio seriada do lquor em soluo salina.

Diagnstico da Sfilis - Aula 3 4

 Reao de VDRL quantitativa no lquor
Faa seu protocolo de trabalho e confira os procedimentos do VDRL quantitativo em amostras de
liquor no passo a passo a seguir.

1 Faa diluies seriadas do lquor seguindo os mesmos procedimentos apresentados na ao 8 da

aula 2.

2 Use a suspenso antignica modificada para fazer o VDRL quantitativo em lquor. Utilize 10 L de
suspenso antignica modificada. A reao dever ser agitada, por 8 minutos, a 180 rpm.

3 A reao estar finalizada quando for possvel estabelecer a ltima diluio do lquor que ainda
apresentar reatividade. Esta corresponder ao ttulo que ser reportado como o resultado final do
teste.

Diferenas entre VDRL no soro e VDRL no lquor

VDRL no soro VDRL no lquor
Modificao da suspenso antignica No Sim
Estabilidade da suspenso antignica 8 horas 2 horas
Volume da suspenso antignica 17l 10l
Tempo de agitao da reao 4 minutos 8 minutos
Tipo de lmina Plana Escavada

Quadro 1 VDRL no soro e no lquor

!
Os testes de floculao s devem ser realizados em ambientes
com temperatura ambiente entre 23C e 29C.

Temperaturas fora dessa faixa desestabilizam a reao, o que pode

gerar resultados falso-positivos ou falso-negativos.

Diagnstico da Sfilis - Aula 3 5

 Referncias

LARSEN, S.A., POPE, V., JOHNSON, R.E., KENNEDY, JR., E.J. A Manual of Tests for Syphilis.
Washington: APHA, 1998, 361p. 9 edio

LARSEN S.A., STEINER, B.M., RUDOLPH, A.H. Laboratory Diagnosis and Interpretation of Tests
for Syphilis. Clin. Microbiol. Rev., Washington, v.8, n.1, p.1-21, 1995.

BERRY, C.D.; HOOTEN, T.M.; COLLIER, A.C.; LUKEHART, A.S. Neurologic relapse after benzathine
penicillin therapy for secondary syphilis in a patient with HIV infection. N Engl J Med.1987;
316:1587-1589.

CENTERS FOR DISEASES CONTROL AND PREVENTION (CDC). Recommendations for Partner
Services Programs for HIV infection, Syphilis, Gonorrhea and Chlamydia infections. Morbid
Morttal Wkly Rep, Recomm Rep. 57(RR-9): 1-93, 2008.

Diagnstico da Sfilis - Aula 3 6