CampylobacterAcanthamoeba interactions

Campylobacter jejuni es un patgeno transmitido por los alimentos reconocido como la principal
causa de enteritis bacteriana humana. Los productos de aves de corral poco cocidos y el agua
contaminada se consideran como las fuentes ms importantes de infeccin. Algunos estudios
sugieren que la transmisin y la supervivencia de este patgeno bacteriano pueden ser asistidos
por los protozoarios de vida libre Acanthamoeba. Este ltimo es conocido por desempear el papel
de un husped de varias bacterias patgenas, protegindolos de las duras condiciones ambientales.
Es importante destacar que existe una similitud entre los mecanismos de supervivencia bacteriana
dentro de las amebas y los macrfagos, haciendo que la primera sea una herramienta conveniente
para la investigacin de la supervivencia de las bacterias patgenas en el medio ambiente. Sin
embargo, los mecanismos moleculares implicados en la interaccin entre Campylobacter y
Acanthamoeba no se conocen bien. Mientras que algunos estudios sugieren la capacidad de C.
jejuni para sobrevivir dentro de los protozoos, los otros informes apoyan un modo extracelular de
supervivencia solamente. En esta revisin, nos centramos en los estudios que investigan la
interaccin entre Campylobacter y Acanthamoeba, se abordan algunas razones de la

Resultados contradictorios, y discutir posibles implicaciones de estos resultados para la

epidemiologa. Adems, como los mecanismos moleculares implicados permanecen desconocidos,
tambin sugerimos posibles factores que pueden estar involucrados en este proceso. Descifrar los
mecanismos moleculares de la interaccin patgeno-protozoos ayudar en una mejor comprensin
del estilo de vida de Campylobacter y en el desarrollo de nuevos frmacos antibacterianos.

INTRODUCCIN

Los protozoos de vida libre, como las amebas, estn muy extendidos en naturaleza. Se han aislado
de una amplia variedad de los suministros pblicos de agua, piscinas, agua embotellada, Conductos
de ventilacin, suelo, instrumentos quirrgicos y (Sandstrom et al., 2011). Las amebas son los
consumidores bacterianos dominantes, contribuyendo al reciclaje de nutrientes y manteniendo la
estructura de la comunidad microbiana (Greub & Raoult, 2004). Estos microorganismos han sido
objeto de una intensa investigacin debido a su capacidad para capturar presas por fagocitosis,
actuar como vectores y huspedes de organismos patgenos, y su capacidad para producir
infecciones humanas graves (Siddiqui & Khan, 2012a). Las bacterias Campylobacter, conocidas por
ser el patgeno entrico ms importante, son sensibles al estrs ambiental fuera de sus huspedes
de sangre caliente (Park, 2002). Se inform que las amebas pueden actuar como un husped
ambiental protector para este patgeno; Creando as un problema para la salud humana y animal.
Sin embargo, hay varios relatos en la literatura sobre los tipos de interaccin entre Campylobacter y
Acanthamoeba. En esta revisin, realizamos un anlisis crtico de estos datos y discutimos las
posibles razones de los resultados contradictorios. Tambin se indican factores de Campylobacter
que pueden estar implicados en la interaccin de este patgeno con ameba. La elucidacin de los
mecanismos moleculares de la interaccin Campylobacter-Acanthamoeba es importante para la
salud pblica, ya que los patgenos transmitidos por los alimentos y las amebas coexisten en los
mismos ambientes (Vaerewijck et al., 2014).

ACANTHAMOEBA

Acanthamoeba es un gnero de amebas que incluye freeliving Patgenos comnmente

encontrados en el suelo y Agua y se caracteriza por estructuras similares a la espina Superficie,
conocida como acanthopodia. Contienen uno o ms Vacuolas contrctiles, cuya funcin es expulsar
agua Para regulacin osmtica, vacuolas digestivas, lisosomas y Vacuolas que contienen glicgeno
(Siddiqui & Khan, 2012c). Acanthamoebae tienen dos etapas en su ciclo de vida: una Trofozoito, en
la que exhiben crecimiento vegetativo Cuando las clulas se dividen mitticamente y cuando se
alimentan Partculas orgnicas y microbios; Y un doble dormido Estadio del quiste con actividad
metablica mnima, Amoebae adoptan cuando bajo condiciones ambientales severas (Siddiqui &
Khan, 2012c). Aunque los trofozotos Son las formas infecciosas, ambas formas amoticas pueden
Humano a travs de una variedad de rutas, incluyendo los ojos, Causando ceratitis cegadora severa,
y tambin a travs de la nasal Pasajes o lesiones de la piel, desde donde pueden invadir el sistema
nervioso, causando encefalitis granulomatosa (Khan, 2006). La queratitis de Acanthamoeba es una
enfermedad rara Que puede afectar a cualquiera, pero es ms comn en individuos Que usan
lentes de contacto (Khan, 2006). Histricamente, estos microorganismos se alimentan de bacterias
para cumplir Sus necesidades nutricionales; Por lo tanto, la regulacin bacteriana Las poblaciones
del medio ambiente y contribuir a la Equilibrio en los ecosistemas (Khan, 2006; Rnn et al., 2002).
Un Nmero creciente de microorganismos, incluidos los patgenos Bacterias y virus, se han
descrito como beneficiarios De sus relaciones con amebas (Thomaset al., 2010). Estas asociaciones
son de gran preocupacin para los seres Salud del ecosistema. Al servir como sus anfitriones y ser
altamente Resistentes a las tensiones fsicas y qumicas, permiten Bacterias patgenas para
sobrevivir bajo condiciones Condiciones que normalmente los mataran. adems, el Amibas ayudan
en su transmisin a huspedes susceptibles, Lo que conduce a la infeccin (Siddiqui & Khan, 2012a,
Thomas et al., 2010). El primer informe que describe la capacidad de las bacterias coliformes
Sobrevivir a la ingestin de protozoos en 1988 (King Et al., 1988). Aunque la interaccin entre
Legionella Pneumophila yAcanthamoeba fue el ms estudiado y Establecido (Hoffmann et al.,
2014), muchos otros microorganismos Se beneficiaron de su relacin con los Este microorganismo
protozoario (Thomaset al., 2010). Entre Las bacterias conocidas por ser Acanthamoeba son:
Acinetobacterspp., Aeromonasspp., Bacillusspp., Burkholderia Spp., Campylobacter spp.,
Enterobacter spp., Escherichia coli, Helicobacter pylori, Klebsiella pneumoniae, Mycobacterium
Spp., Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium, Serratia spp., Shigella spp.,
Staphylococcus aureus, Streptococcus Pneumoniae, Vibrio cholerae, Yersinia spp. y otros (Thomas
et al., 2010). Diferentes tipos de interaccin entre Se han descrito bacterias y protozoos, con
posibles Los resultados, incluyendo la supervivencia intracelular y la multiplicacin De bacterias que
conduce a la lisis amibiana, o lisis intracelular de Bacterias, seguido de su digestin por las amebas.
adems, el Presencia de amebas puede estimular la supervivencia extracelular y Multiplicacin de
bacterias. Los microorganismos que residen dentro de la ameba estn Los brotes de enfermedades
causados por el agua contaminada, Ms resistentes a los desinfectantes (Winiecka-Krusnell &
Linder, 2001). Por ejemplo, la internalizacin de L. Pneumophila por amebas da como resultado una
capacidad Estas bacterias para invadir macrfagos, aumento de la virulencia Y resistencia a los
antibiticos (Barker & Brown, 1995; Winiecka-Krusnell & Linder, 2001).

CAMPYLOBACTER

Campylobacter es un gnero de bacterias microaeroflicas en forma de espiral, Gram-negativas, que

no forman esporas. Estos organismos pueden encontrarse en el agua y otras fuentes ambientales,
como organismos comensales en algunos animales y en algunos productos alimenticios (Dasti et al.,
2010). A pesar de ser exigentes bajo cultivo en condiciones de laboratorio, pueden sobrevivir en el
ambiente durante largos perodos de tiempo (Joshua et al., 2006). Entre las diversas especies
patgenas de Campylobacter (por ejemplo C. lari, C. hyointestinalis, C. fetus, C. coli), C. jejuni es la
causa ms frecuente de infecciones humanas (Altekruse et al., 1999; Gebhart et al., 1985; Moore et
al., 2005, Dasti et al., 2010). Ms comnmente, la enfermedad surge despus del consumo de
productos avcolas contaminados, leche cruda o agua, donde Campylobacter puede asociarse con
protozoos y formar biofilms. En los seres humanos, C. jejuni puede invadir la capa epitelial del
intestino, resultando en una enfermedad gastrointestinal aguda y autolimitada caracterizada por
fiebre, diarrea y calambres abdominales (Young et al., 2007). La complicacin ms importante
precedida por la infeccin por C. jejuni es el sndrome de Guillain-Barr, que es una enfermedad
desmielinizante del sistema nervioso perifrico que conduce a la parlisis, que puede durar varias
semanas y requiere atencin mdica intensiva (Vucic et al., 2009). ). Desafortunadamente, no existe
una vacuna con licencia contra este patgeno entrico (Albert, 2014).

INTERACCIN ENTRE ACANTHAMOEBA Y CAMPYLOBACTER

Ha habido una serie de informes sobre la interaccin Entre Campylobacter y Acanthamoeba con
resultados algo contradictorios. Aunque la mayora de los estudios sugieren la supervivencia
intracelular de C. jejuni en Acanthamoeba (AxelssonOlsson et al., 2005, 2007a, b, Snelling et al.,
2005, Bare y otros, 2010, Olofsson y col., 2013), los otros indican que las bacterias slo pueden
sobrevivir extracelularmente (Bui et al., 2012a, b; Dirks & Quinlan, 2014). Estos resultados
contradictorios pueden explicarse por una variacin en el Campylobacter y Acanthamoeba especies
estudiadas, o por las diferentes metodologas utilizadas. La variabilidad en las estructuras de los
lipooligosacridos (LOS) y polisacridos capsulares (CPS) en diferentes cepas de C. jejuni puede
influir en el resultado de la infeccin en el husped, ya que estas estructuras participan en la
adhesin celular y la invasin (Backert & Hofreuter, 2013). La invasin de C. jejuni es dependiente
de la bacteria y de la cepa dependiente (Backert & Hofreuter, 2013) y dependiente de la clula
husped dependiente (Poly et al., 2007). Por ejemplo, se demostr que C. jejuni cepa CG8486 Seria
mucho menos invasivo en comparacin con C. jejuni 81-176 hacia INT-407 clulas intestinales, pero
ambos mostraron el mismo fenotipo en la infeccin de Caco-2 clulas intestinales (Poly et al.,
2007). Los resultados de estos experimentos tambin pueden resultar de la variacin en las
condiciones experimentales. Por ejemplo, aunque el m.o.i. En la mayora de los estudios fue de 100
Bacterias por ameba, en otros experimentos era tan bajo como 1 (Snelling et al., 2008) y tan alto
como 1000 bacterias por ameba (Dirks & Quinlan, 2014) (Tabla 1). Es importante tener en cuenta el
m.o.i. Ya que puede tener un efecto sobre la eficacia de la infeccin (Backert & Hofreuter, 2013). Se
observ que el nivel mximo de internalizacin de C. jejuni cepa 81-176 se logra a las 2 y 4 h a
m.o.i. Valores de 200 y 20, respectivamente (Hu & Kopecko, 1999). Es importante destacar que,
como no se utiliz gentamicina en algunos de estos estudios, las cifras referentes a nmeros
bacterianos intracelulares (calculados como c.f.u.) podran ser engaosas. Sin embargo, algunos de
estos datos se complementaron con microscopa, permitiendo la visualizacin y anlisis
semicuantitativo de bacterias internalizadas (Axelsson-Olsson et al., 2007, 2010a, Snelling et al.
2008). La Tabla 1 contiene un resumen de la metodologa utilizada y las principales conclusiones de
estos estudios, cuyos detalles se analizan a continuacin.

LA EVIDENCIA DEL MODO INTRACELULAR DE SUPERVIVENCIA DE CAMPYLOBACTER EN

ACANTHAMOEBA

En 2005, se inform de que C. jejuni puede infectar Acanthamoeba polyphaga in vitro y

multiplicarse dentro de este husped (Axelsson-Olsson et al., 2005). En este estudio, los autores
investigaron la supervivencia intracelular de un aislamiento clnico de C. jejuni a varias
temperaturas (4, 10, 25 y 30 uC) y la multiplicacin a 37 C durante el co-cultivo con A. polyphaga
(Tabla 1). Las bacterias intracelulares se visualizaron utilizando tcnicas de microscopa de
contraste de fase. En primer lugar, se observ que a todas las temperaturas ensayadas, poco
despus de la inoculacin en cultivos amebianos, las clulas de C. jejuni se agregaron en ciertas
localizaciones de la pared celular de A. polyphaga, confirmando la capacidad bacteriana de
adherirse a este husped. Adems, 1 h despus de la inoculacin, se observaron bacterias vivas y
mviles en las vacuolas amebianas a todas las temperaturas ensayadas. Los autores informaron que
las clulas de C. jejuni sobrevivieron durante perodos ms largos cuando estaban presentes dentro
de las vacuolas amebianas que en el medio de cultivo solo. Sorprendentemente, se encontr que C.
jejuni podra sobrevivir dentro de A. polyphaga durante ms de 60 das a 10C. La incubacin
aerbica a 37 C result en la multiplicacin intracelular de C. jejuni y la lisis de amebas, tal como
se detect mediante microscopa de contraste de fase. En general, los resultados demostraron que
a bajas temperaturas,

Las fuentes naturales de agua, Campylobacter podra entrar y permanecer viable dentro de las
amebas, y tambin es capaz de replicarse a temperaturas elevadas. Este estudio sugiere que estas
bacterias pueden emplear un mecanismo de supervivencia dentro de A. polyphaga como un medio
para escapar condiciones ambientales adversas (Axelsson-Olsson et al., 2005).
En el mismo ao, se publicaron los resultados de otro estudio que examinaba la supervivencia
intracelular de Campylobacter en protozoos acuticos (Snelling et al., 2005). Snelling y sus
colaboradores sospecharon que la falta de reduccin de la contaminacin por Campylobacter de
aves de corral criadas podra ser parcialmente debido a la resistencia de Campylobacter a la
desinfeccin en el agua potable de pollos de engorde despus de su internalizacin por protozoos
de origen hdrico. En este estudio, se ensay la presencia de Campylobacter en pollos de diferentes
granjas, seguidos por la confirmacin de la presencia de microorganismos bacterianos y eucariotas
en el agua potable. Dado que en este estudio se demostr que Campylobacter y protozoos
coexisten en los sistemas de agua de la granja avcola, se investig la interaccin potencial entre
estos microorganismos. Para evaluar la actividad intracelular Supervivencia, se incubaron co-
cultivos de Acanthamoeba castellanii infectados con C. jejuni y C. coli a 25 uC (Tabla 1). Aunque
despus de 24 h de co-incubacin Campylobacter Las clulas dentro de vacuoles alimentarios de A.
castellanii eran viables, las bacterias no sobrevivieron despus de 2 das adicionales de incubacin.
Los mtodos de microscopa utilizados para examinar los co-cultivos mostraron claramente que
Campylobacter estaba presente dentro de las vacuolas amebianas, apoyando la supervivencia
intracelular de este patgeno entrico dentro de Acanthamoeba. Otro hallazgo importante fue una
disminucin tarda en la viabilidad de Campylobacter spp. Cepas en co-culturas. Por ejemplo,
Campylobacter fue capaz de sobrevivir durante 36 horas adicionales en presencia de amebas, en
comparacin con su supervivencia en medio sin amebas. Adems, se demostr que Campylobacter
internalizado por protozoos era significativamente ms resistente a Virudina (un desinfectante
ampliamente utilizado en la industria avcola) que el Campylobacter planctnico. Colectivamente,
estos hallazgos sugieren que la presencia de protozoos y su interaccin con Campylobacter en el
abastecimiento de agua de aves de corral criadas puede conducir a un mayor riesgo de que los
pollos de engorde sean colonizados por este patgeno (Snelling et al., 2005). Un mtodo novedoso
para el aislamiento y enriquecimiento de la especie Campylobacter denominada Acanthamoeba-
Campylobacter coculture (ACC) fue descrito por Axelsson-Olsson et al. (2007). La deteccin de
Campylobacter a partir de muestras no clnicas a menudo implica un paso de enriquecimiento en
un caldo especfico de Campylobacter antes de depositar en agar sangre, lo que aumenta el
rendimiento de bacterias (Bolton y Robertson, 1982; Corry et al., 1995). En contraste con los
mtodos de cultivo convencionales utilizados para el aislamiento de Campylobacter spp., El mtodo
ACC no requiere el uso de sangre o un ambiente de gas microaerbico. El objetivo de este estudio
fue investigar la cintica de crecimiento de diferentes especies de Campylobacter durante el
cocultivo con A. polyphaga a lo largo de 96 h (Tabla 1). Los autores afirmaron que todas las cepas
de Campylobacter ensayadas entraron y proliferaron dentro de amebas en 24 h, lo que result en
un enriquecimiento exitoso de bacterias. Sin embargo, no hay pruebas (por ejemplo, utilizando el
ensayo de proteccin de gentamicina o microscopa) que apoyan la supervivencia intracelular de
bacterias fue previsto. Aunque los autores consideraron que el mtodo ACC es una tcnica rpida,
eficiente, simple y sensible para el enriquecimiento de Campylobacter, y que tambin podra
establecerse para otras bacterias fastidiosas, no queda claro si el enriquecimiento se produjo
debido a la multiplicacin intracelular o extracelular (Axelsson -Olsson et al., 2007). En un estudio
subsiguiente, se sugiri que C. jejuni intraemeral podra colonizar pollos de engorde (Snelling et al.,
2008). En experimentos sobre la investigacin de la capacidad de C. jejuni cepa NCTC 11168 que
resida en el interior de A. castellanii para colonizar pollos de engorde, estas aves fueron desafiadas
oralmente por: (i) Solucin salina de amobeba (PAS); (Ii) C. jejuni en su medio de crecimiento
estndar; Y (iii) A. castellanii con C. jejuni internalizado, incubado durante 3 ha 25C. Despus de
diferentes nmeros de das despus de la exposicin, siete pollos de engorde de cada grupo fueron
sacrificados por c.f.u. Enumeracin (Tabla 1). Como era de esperar, no se encontraron C. jejuni en
pollos de engorde del grupo negativo (i). Los pollos de engorde fueron colonizados por C. jejuni que
residen dentro de la ameba (grupo iii) tan eficientemente como con una suspensin de clulas de C.
jejuni (grupo ii).

Como se mencion anteriormente, las bacterias Campylobacter se consideran organismos frgiles

con exigentes requerimientos de crecimiento y capacidad reducida para tolerar el estrs ambiental
en comparacin con otros patgenos transmitidos por los alimentos (Park, 2002). Se encontr que
Campylobacter spp. Pueden utilizar potencialmente una amplia variedad de organismos eucariotas
unicelulares como huspedes para la supervivencia en el medio ambiente (Axelsson-Olsson et al.,
2010a). Para llegar a esta conclusin, diferentes especies de protozoos, tales como amebas,
protozoos flagelados, algas y protozoos ciliados, fueron desafiados con diferentes especies de
Campylobacter. Se realizaron dos ensayos diferentes: el ensayo de supervivencia, en el que los co-
cultivos se incubaron a 10 C durante varios das; Y el ensayo de replicacin, en el que los co-
cultivos se incubaron a 37C durante 96 h (Tabla 1).

Los autores observaron variacin en las tasas de supervivencia entre diferentes especies de
Campylobacter dependiendo de qu especie eucaritica se utiliz. En comparacin con otras
especies bacterianas, C. jejuni se encontr que tienen la mayor capacidad de sobrevivir cuando co-
cultivadas con todos los protozoos probados. Entre Campylobacter spp., C. coli y C. hyointestinalis
fueron menos capaces de sobrevivir en protozoos que C. jejuni y C. lari. En general, los autores
observaron que las bacterias sobrevivieron ms tiempo cuando se co-cultivaron con todos los
organismos eucariotas probados, especialmente dentro de algas y especies de Acanthamoeba, en
comparacin con cuando se cultivaron en medio solo. Curvas de crecimiento obtenidas por c.f.u.
Los recuentos mostraron que slo las especies de Acanthamoeba promovieron la replicacin de
Campylobacter spp., Con C. jejuni mostrando la mejor tasa de replicacin. Por el contrario, C.
hyointestinalis se ha demostrado que tiene la menor tasa de replicacin en las tres especies de
Acanthamoeba. Los autores concluyeron que haban confirmado la multiplicacin intracelular de
Campylobacter dentro de A. polyphaga (Axelsson-Olsson Et al., 2010a). Sin embargo, esto no fue
apoyado por la microscopa, como se hizo en otros estudios (Axelsson-Olsson et al., 2005;
Griekspoor et al., 2013).

Dos artculos publicados en 2010 informaron el efecto de las tensiones ambientales sobre la
interaccin entre C. jejuni y Acanthamoeba spp. (Axelsson-Olsson et al., 2010b, Bare et al., 2010).
Axelsson-Olsson y co-autores investigaron si la internalizacin de C. jejuni por Acanthamoeba afecta
la tolerancia bacteriana a pH bajo. Como las amebas son naturalmente resistentes a muchas
condiciones ambientales que son letales para Campylobacter, pueden ser huspedes adecuados
que aumentan la supervivencia de estas bacterias. En este estudio, A. polyphaga fue desafiado con
C. jejuni y el medio de co-cultivo fue reemplazado por PBS acidificado a diferentes niveles de pH (1
a 5) (Tabla 1]. La microscopa de fluorescencia se utiliz para visualizar clulas de C. jejuni unidas e
internalizadas en A. polyphaga. Se observ que a todo pH ensayado, C. jejuni incubado en presencia
de A. polyphaga (unido o internalizado) sobrevivi ms tiempo que cuando estaba en medio de
cultivo solo. Se observaron tasas de supervivencia similares a pH bajo cuando C. jejuni fue co-
cultivado con otras especies de Acanthamoeba. Estos hallazgos confirman que los protozoos
pueden actuar como huspedes protectores para Campylobacter frente a condiciones ambientales
severas, tales como pH bajo (Axelsson Olsson et al., 2010b).

Bare y colaboradores estudiaron la influencia de la temperatura y el oxgeno en la interaccin entre

varias cepas de C. jejuni con A. castellanii (Bare et al., 2010). Con el fin de probar la capacidad de
varias cepas de C. jejuni para sobrevivir y replicar dentro de este husped, los co-cultivos se
incubaron en condiciones aerobias y microaerbicas a 25 y 37 uC, durante 2 semanas (Tabla 1]. Los
resultados mostraron que, contrario a lo que se describi anteriormente (AxelssonOlsson et al.,
2007), el co-cultivo no aument la poblacin de C. jejuni, pero slo dio lugar a una disminucin
tarda de la viabilidad. Tambin se observ un aumento en la supervivencia a largo plazo de
Campylobacter, hasta 6 das ms, especialmente en condiciones microaerbicas.

CLSM experimentos utilizando co-culturas crecido a 25 uC en condiciones aerbicas revelC. Jejuni

unidas a clulas amebianas despus de 30 min de incubacin. Como se inform anteriormente por
Axelsson-Olsson et al. (2005), las bacterias mostraron una fuerte tendencia a recolectarse en ciertas
posiciones de las paredes celulares de las amibas. Se observ que un gran nmero de bacterias se
encontraban dentro de organelos 3 h despus de la infeccin. Sin embargo, despus de 24 h, el
nmero de bacterias intracelulares se redujo significativamente. A pesar de que los autores no
aplicaron gentamicina durante sus experimentos in vitro, estos datos fueron apoyados por
microscopa. El estudio sugiri la supervivencia intracelular de C. jejuni dentro de A. castellanii
durante un cierto perodo, sin multiplicacin (Bare' et al., 2010). Experimentos con clulas
epiteliales humanas y C. jejuni, que demuestran que la viabilidad bacteriana es importante para la
entrada de bacterias (Konkel & Cieplak, 1992), indujeron a Olofsson y otros a investigar si la
viabilidad bacteriana tambin es necesaria para la internalizacin de C. jejuni por las amebas.
Olofsson et al., 2013). Se aadieron suspensiones bacterianas con la cepa 81-176 de C. jejuni viva y
muerta (inactivada por calor) a A. polyphaga y se incubaron a temperatura ambiente durante
periodos de entre 1 y 96 h (Tabla 1). Para la cuantificacin de C. jejuni, adherido / internalizado,
viable y sometido a calor en A. polyphaga, se utiliz un kit de viabilidad bacteriana. Con el fin de
determinar la localizacin intracelular de bacterias viables y calcinadas en A. polyphaga, bacterias y
amebiana Los lisosomas se tieron con solucin de CTC (cloruro de 5-ciano-2,3-ditolil tetrazolio) y
con dextrano, respectivamente.
En primer lugar, se demostr que durante la co-incubacin con A. polyphaga, tanto las bacterias
viables como las muertas por calor fueron internalizadas, pero que la cintica de internalizacin y el
nmero total de bacterias internalizadas dependan de la viabilidad bacteriana. Especficamente, se
demostr que la internalizacin era significativamente mayor con las bacterias viables comparadas
con las muertas por calor. Tambin se observ que, despus de 1 h de co-incubacin, el 90% de las
bacterias viables se unieron a la superficie amebiana, mientras que el 10% se encontraron dentro
de las vacuolas amebianas. En etapas posteriores, de 24 a 96 h, ms del 80% de las bacterias viables
se observaron dentro de las vacuolas. Por el contrario, las bacterias muertas por el calor apenas se
vean adheridas a la superficie de las amebas en cualquier punto, pero se encontraron dentro de las
vacuolas.

Adems, se observ que las bacterias viables estaban igualmente presentes tanto en vacuolas no
digestivas como digestivas, pero con el tiempo las bacterias viables se encontraron en mayor
nmero en las vacuolas no digestivas, en contraste con las bacterias muertas por calor.
Curiosamente, tambin se demostr que C. jejuni viable y C. matado por calor fueron absorbidos en
diferentes tipos de vacunas de A. polyphaga. Las bacterias viables se localizaron
predominantemente a vacuolas pequeas distribuidas a travs de las amebas, donde las bacterias
estaban densamente empaquetadas (Fig. 1). Por el contrario, las bacterias calcinadas se reunieron
en su mayora en una vacuola espaciosa gigante dentro de las amebas, a menudo ubicada cerca de
la membrana amebiana. Colectivamente, los autores concluyeron que tanto las bacterias viables
como las muertas por calor fueron procesadas para degradarse en vacuolas cidas, pero que las
bacterias viables podran escapar de esta va degradativa, lo que sugiere que C. jejuni es capaz de
sobrevivir dentro de la ameba (Olofsson et al., 2013).

ACANTHAMOEBA AYUDA A LA SUPERVIVENCIA DE CAMPYLOBACTER SIN FAGOCITOSIS

Recientemente, se han publicado tres estudios que apoyan el papel de las amebas en la mejora de
la supervivencia extracelular de C. jejuni (Bui et al., 2012a, b; Dirks & Quinlan, 2014). En 2012, Bui y
sus colegas investigaron el efecto del agotamiento amoebamediated de oxgeno disuelto en la
supervivencia de C. jejuni cuando en co-cultivo con A. castellanii (Buiet al., 2012a). Los objetivos del
estudio fueron investigar la supervivencia intracelular de C. jejuni en A. castellanii a ambos 25 y 37
C en condiciones aerbicas, si C. jejuni puede replicarse dentro de la ameba a 37 C en condiciones
aerbicas y averiguar si C. Jejuni podra beneficiarse de la presencia de amebas para crecer
extracelularmente en condiciones aerbicas. Se aadi gentamicina a los pocillos de cultivo para
matar bacterias extracelulares, seguido de 0, 5 y 24 h de incubacin antes de lisar las clulas (Tabla
1). CLSM se utiliz para visualizar el ambiente intracelular donde, a 25 C, se observ que
inmediatamente despus de tratamiento con gentamicina (0 h), un porcentaje significativo de las
bacterias mviles se internaliz y confinado a vacuolas estrechas dentro de las amebas. Sin
embargo, a las 5 y 24 h despus del tratamiento con gentamicina, el nmero de bacterias
internalizadas disminuy significativamente, confirmando un hallazgo previo (Bare' et al., 2010).
Segn estos datos, C. jejuni pierde rpidamente la viabilidad dentro de amebas a 25 C. Aunque las
bacterias permanecen viables intracelularmente durante 5 h, son finalmente destruidas dentro de
las vacuolas. El mismo experimento se realiz a 37C. Sin embargo, la microscopa no revel C.
jejuni intracelular dentro de A. castellanii despus de 24 h de tratamiento con gentamicina, lo que
demuestra que a esta temperatura A. castellanii slo puede apoyar un modo extracelular de
supervivencia y crecimiento bacteriano. Bajo condiciones aerobias a 37 C, el nmero de bacterias
recuperadas en el medio de co-cultivo aument significativamente con el tiempo, demostrando que
C. jejuni puede sobrevivir y replicarse en co-cultivo, pero no dentro de estos protozoos.

Adems, para entender cmo C. jejuni puede sobrevivir y se multiplican bajo condiciones aerobias
en co-culturas, los autores plantearon la hiptesis de que las amebas podran Nivel de oxgeno en el
medio de co-cultivo de una manera Beneficiosos para la supervivencia y multiplicacin de C. jejuni.
Los investigadores observaron una disminucin en los niveles de oxgeno disuelto en cultivos de A.
castellanii con o sin C. jejuni. Estos datos apoyan la hiptesis anterior, en la cual las clulas de A.
castellanii pueden reducir el nivel de oxgeno disuelto, lo que conduce a la promocin de la
supervivencia y replicacin de C. jejuni (Bui et al., 2012a).

En un informe de seguimiento de Bui y otros, se investigaron los efectos de diferentes tensiones

ambientales sobre la captacin y supervivencia de C. jejuni en A. castellanii (Bui et al., 2012b). Se
plante la hiptesis de que la exposicin de C. jejuni a las condiciones de estrs aumenta la
resistencia bacteriana a la fagocitosis y la muerte intracelular por la ameba.

Para probar esta hiptesis, los efectos del calor, los nutrientes bajos, Oxidativo y osmtico en la
absorcin y se ensay la supervivencia intracelular de C. jejuni en amebas. Tambin se incluyeron
controles no estresados en todos los ensayos. A. castellanii fue desafiado con las clulas
bacterianas preexpuestas a diferentes condiciones de estrs. Los co-cultivos se incubaron a
continuacin durante 3 ha 25 C en condiciones aerobias y se monitoriz la supervivencia
intracelular mediante lisis de ameba a 0, 5 y 24 h despus del tratamiento con gentamicina (Tabla
1). Se observ que la preexposicin de C. jejuni al calor, la inanicin y el estrs osmtico pero no
oxidativo aument la susceptibilidad bacteriana a la muerte intracelular por la ameba.
Inmediatamente despus del tratamiento con gentamicina, ambos C. jejuni viables no estresados y
preexpuestos al estrs se limitaban a vacuolas amobicas estrechas (Fig. 2a). Sin embargo, a las 5 h
despus del tratamiento, se observaron menos bacterias internalizadas dentro de las vacuolas de
las amebas (Figura 2b).

Estos datos confirman las observaciones del estudio anterior (Bui et al., 2012a), y sugieren no slo
que la preexposicin de C. jejuni a diferentes tensiones compromete fuertemente la capacidad De
C. jejuni para sobrevivir dentro de amebas, pero tambin que C. jejuni es incapaz de sobrevivir
durante largos perodos dentro de este husped (Bui et al., 2012b). A pesar de que ambos estudios
sugieren que C. jejuni es incapaz de sobrevivir dentro de la ameba por ms de 5 h (Buiet al., 2012a,
b), incluso el corto perodo que C. jejuni puede permanecer viable dentro de este husped puede
aumentar el riesgo de Infeccin en aves de corral.

La supervivencia extracelular de C. jejuni en presencia de A. castellanii tambin fue apoyada por un

estudio de Dirks & Quinlan (2014). Los autores modificaron el ensayo de proteccin de la
gentamicina utilizado actualmente (Friis et al., 2005) para aumentar la precisin de la cuantificacin
de la tasa de internalizacin bacteriana y utilizaron un protocolo modificado para la investigacin
de la interaccin entre C. jejuni y amebas. Las clulas de A. castellanii se mezclaron con clulas de C.
jejuni NCTC 11168 en tubos de centrfuga. Los co-cultivos se incubaron entonces durante 2 h a
temperatura ambiente para permitir que C. jejuni penetrara en las amebas y se tratara con
gentamicina (Tabla 1). Los La integridad de las amebas fue alcanzada y confirmada usando un
procedimiento de exclusin de azul de tripn. Se encontr que los resultados eran inconsistentes
entre los experimentos. En algunas pruebas, se recuperaron nmeros bacterianos superiores
despus de la coincubacin con A. castellanii, lo que sugiere la internalizacin bacteriana y un
efecto protector de la ameba, mientras que en otras pruebas no se detect efecto protector de las
amebas en las bacterias, con una mayor recuperacin de C. jejuni en la Ausencia de ameba.

Los autores concluyeron que C. jejuni clulas no sobreviven a la internalizacin por A. castellanii,
pero sobreviven extracelularmente durante largos perodos. Sin embargo, dado que en un gran
nmero de experimentos los autores demostraron realmente la recuperacin de C. jejuni despus
del tratamiento con gentamicina, a nuestro juicio este estudio apoya la posibilidad de la
supervivencia intracelular de C. jejuni en Acanthamoeba, en lugar de la mera supervivencia
extracelular (Dirks & Quinlan, 2014).

INTERACCIN DE C. JEJUNI CON CLULAS HUSPED DEL CULTIVO DE TEJIDOS

Existe una notable similitud entre los macrfagos y las amebas, particularmente en la estructura
celular, motilidad molecular, fisiologa bioqumica y capacidad para capturar presas por fagocitosis.
En consecuencia, los mecanismos moleculares implicados en la interaccin bacteriana con estas
clulas husped tambin pueden tener algunas similitudes (Siddiqui & Khan, 2012b).

Aunque las clulas epiteliales y fagocticas son diferentes, los mecanismos de interaccin bacteriana
con estos objetivos pueden tener cierta similitud. Se encontr que la capacidad de C. jejuni para
invadir clulas intestinales humanas in vitro era dependiente de la cepa, con C. jejuni cepa 81-176
que posea propiedades invasivas superiores (Hu & Kopecko, 1999). La variacin de la deformacin
a la deformacin puede atribuirse a diferencias en las estructuras de las molculas implicadas en la
interaccin husped-patgeno, incluyendo LOS y CPS (Parkhill et al., 2000, Gilbert et al., 2002,
Karlerhe et al., 2005, Guerry et al ., 2006). Varios estudios in vitro que implicaron lneas epiteliales
intestinales (INT407) y colon humano (Caco-2) condujeron al establecimiento del modelo hipottico
para la interaccin de C. jejuni con clulas husped. C. jejuni invade las clulas epiteliales
intestinales, lo que permite que las bacterias sobrevivan dentro de un compartimento intracelular
definido, la vacuola que contiene Campylobacter (Backert & Hofreuter, 2013). Los estudios
posteriores permitieron la identificacin de factores bacterianos implicados en la adhesin y la
invasin, incluyendo la protena de unin a fibronectina CadF, el factor de unin a clulas PEB1, la
protena CapA de la biosntesis de cpsulas, la serina proteasa HtrA, la protena FlpA de unin a
fibronectina, las subunidades flagelares FlaA y FlaC, Flagelar biosinttico FlhB, LOS, CPS, toxina
distal citoltica (CDT) y antgenos Cia (Konkel et al., 1997, 2004, 2010, Monteville et al, 2003, Ashgar
et al., 2007; Baek et al., 2011; Wassenaar et al., 1991, Song y otros, 2004, Backert & Hofreuter,
2013).

La interaccin entre Campylobacter y las clulas epiteliales tambin puede ser asistida por sistemas
de secrecin de protenas responsables de la administracin de molculas efectoras (Filloux et al.,
2008; Young et al., 2007). Por ejemplo, se inform que el aparato de exportacin de flagelos de C.
jejuni, que funciona como un sistema de secrecin tipo III (T3SS), est implicado en la invasin de
clulas husped (Samuelson et al., 2013). Adems, se utiliza un sistema de secrecin de protenas
de tipo VI para dirigir las clulas mediante la inyeccin de toxinas antibacterianas, y tambin se
requiere para la adhesin e invasin de C. jejuni a las clulas husped y para la colonizacin
(Bleumink-Pluym et al., 2013; Lertpiriyapong Et al., 2012). Se demostr que diferentes sistemas de
secrecin de protenas eran importantes para la supervivencia de otros patgenos bacterianos
dentro de la ameba. Los ejemplos son el sistema de secrecin T3SS y tipo IV, siendo el primero
importante para la supervivencia de E. coli y P. aeruginosa dentro de las amebas, y el segundo para
la multiplicacin intracelular de L. pneumophila dentro de estos protozoos (Siddiqui et al., 2011; Al.,
2008, Bandyopadhyay et al., 2004).

Entre los otros factores que se sabe que son necesarios para la supervivencia intracelular de
Campylobacter dentro de las clulas husped, se encuentran: superxido dismutasa SodB;
Aspartato amonaco liasa AspA; Aspartato aminotransferasa AspB; El antgeno de invasin de
Campylobacter CiaI; Guanosina - 3 - pirofosfohidrolasa SpoT; Polifosfato quinasa Ppk1;
Heptosiltransferasa WaaF (necesaria para la formacin de LOS); La fosfatasa alcalina PhoX (un
sustrato del sistema de transporte TAT); Fumarato reductasa flavoprotena FrdA; La quinasa
sensora CprS; Y una protena de virulencia hipottica VirK (Novik et al., 2009, 2010, Buelow et al.,
2011, Gaynor et al., 2005, Candon

Et al., 2007; Naito et al., 2010; Drozd et al., 2011; Liu et al., 2012; Svensson et al., 2009). Mientras
que la adherencia, la entrada y los procesos de supervivencia intracelular de C. jejuni para las
clulas husped epiteliales han sido ampliamente estudiados, su supervivencia intracelular dentro
de los macrfagos sigue siendo poco entendida (Backert & Hofreuter, 2013); Sin embargo, se
inform previamente que C. Jejuni podra sobrevivir dentro de macrfagos murinos (Kiehlbauch et
al., 1985, Day et al., 2000, Hickey et al., 2005).

FACTORES POTENCIALES QUE INTERVIENEN EN LA INTERACCIN ENTRE C. JEJUNI Y LA AMEBA

La elucidacin de los posibles factores de C. jejuni que pueden estar implicados en la interaccin
con amebas es asistida por la consideracin de tales factores identificados en otros patgenos
bacterianos. Las protenas de Campylobacter ortlogas se pueden identificar usando la bsqueda
de similitud de BLAST. Adems, se pueden considerar los factores de C. jejuni necesarios para la
invasin de otras clulas husped, en particular los macrfagos que comparten cierta similitud con
los protozoos. Un resumen de nuestros hallazgos utilizando el genoma NCTC 11168 como una cepa
de referencia se presenta en la Tabla 2. Similar genes / productos gnicos tambin se identificaron
en el genoma de una mancha altamente invasiva 81-176 (datos no presentados).

Como se mencion anteriormente, los flagelos contribuyen a la adhesin e invasin (Ramos et al.,
2004). La protena estructural de flagelina de Burkholderia pseudomallei FliC y la Salmonella
enterica subsp. Se encontr que la protena SsaU del sistema de secrecin de Typhimurium
Typhimurium (S. Typhimurium) era necesaria para la adherencia / entrada bacteriana y la
supervivencia dentro de Acanthamoeba, respectivamente (Inglis et al., 2003; Bleasdale et al., 2009).
A pesar de la ausencia de FliC en C. jejuni, la protena comparte cierta secuencia de aminocidos y
similitud funcional con las protenas flageladas FlaA y FlaB (Tabla 2). Adems, el S. Typhimurium
SsaU comparte alta funcionalidad y similitud de secuencia con Campylobacter protena FlhB (Tabla
2]. Tambin, la FlaA de L. pneumophila, importante para su interaccin con ameba (Dietrich et al.,
2001), comparte similitud de secuencia significativa con FlaA y FlaB de C. jejuni (Tabla 2).

Varios tipos de protena de la membrana externa pueden estar implicados en la interaccin

bacteriana con la ameba. Se inform que la protena de membrana externa OmpA fue crucial para
la invasin y la supervivencia intracelular de E. coli en Acanthamoeba (Alsam et al., 2006). Aunque
C. jejuni cepa 11168 tiene una protena OmpA putativo (Cj0599), CadF comparte la mayor similitud
con OmpA de E. coli. Por el contrario, se demostr que en V. cholerae la ausencia de protena de
membrana externa OmpA suprime la viabilidad de Acanthamoeba, y su supervivencia dentro de
este husped aumenta en ausencia de esta protena (Valeru et al., 2014). En cambio, se encontr
que el regulador transcripcional ToxR, que modula la expresin de las protenas de membrana
externa OmpU y OmpT en V. cholerae, es necesario para la supervivencia de este patgeno dentro
de las amebas (Valeru et al., 2012), pero no hay posibles ortlogos De estas protenas se pueden
encontrar en C. jejuni. Sin embargo, la protena de membrana externa de K. pneumoniae OmpA,
importante para la resistencia a la fagocitosis por la ameba Dictyostelium discoideum (March et
al.,2013), comparte la mayor similitud con C. jejuni CadF. En Adems de OmpA, la protena de
membrana externa OmpK360 Y LPS de K. pneumoniae tambin fueron importantes para la
resistencia a la fagocitosis. Aunque no se encontraron ortlogos OmpK36 en C. jejuni, este ltimo
produce una protena de porina (PorA, tambin conocida como la protena de membrana externa
principal, MOMP), que demostr ser importante para la unin bacteriana a clulas epiteliales
(Moser et al. 1997, Mahdavi et al., 2014). Adems, la protena de eflujo de la membrana externa de
L. pneumophila TolC, que desempea un papel en la resistencia a mltiples frmacos y es
importante para la virulencia, invasin y multiplicacin intracelular del organismo dentro de las
amebas (Ferhat et al., 2009), comparte la secuencia y la similitud funcional con La protena CmeC
de la bomba de eflujo multidrogas de C. jejuni. Hasta el momento, no hay estudios que sugieran la
participacin de este factor en C. jejuni invasin de las clulas husped.

Se descubri que las sntesis de cido silico de E. coli, NeuB y NeuD eran esenciales para la
invasin bacteriana y la supervivencia dentro de Acanthamoeba (Jung et al., 2007). E. coli NeuD
comparte la similitud de secuencias con la C. jejuni glycotransferase PglD implicada en la
glicosilacin de protenas. Tambin se inform que otras protenas de glicosilacin, PglB y PglE,
estaban implicadas en la adhesin e invasin de clulas husped de Campylobacter (Szymanski et
al., 2002). Sialic sintasas son responsables de la sntesis de NeuNAc (cido N-acetil neuramnico), el
derivado acetilado del cido silico, que constituye la cpsula de polisacrido (Daines et al., 2000).
Similar a E. coli, vale la pena investigar un posible papel de la cpsula en la interaccin de C. jejuni
con la ameba. Algunos estudios previos demostraron que la cpsula de Campylobacter es necesaria
para la adherencia e invasin a clulas epiteliales (Bacon et al., 2001, Karlyshev & Wren, 2001,
Bachtiar et al., 2007). En otro patgeno, el Streptococcus suis de Gram-positivo, tambin se
encontr que la cpsula es importante por su virulencia hacia la ameba D. discoideum (Bonifait et
al., 2011).

Aunque NeuB de E. coli est implicado en la formacin de cpsulas, el C. jejuni NeuB es necesario
para la biosntesis de LOS (Linton et al., 2000). Se inform que LOS sialilados contribuye a la
invasin epitelial por C. jejuni (Louwen et al., 2008). Adems, se encontr que la sialiltransferasa
Cst-II de C. jejuni, que participa en la biosntesis de una estructura de LOS similar a ganglisido, es
importante para la invasin de C. jejuni y la supervivencia intracelular dentro de las clulas husped
(Louwen et al., 2012).

Una protena reguladora de fosfato, PhoB, que se sabe que es necesaria para la adaptacin
bacteriana a fosfato inorgnico de bajo nivel y virulencia (Crepino et al., 2011), contribuye a la
supervivencia de E. coli en Acanthamoeba (Chekabab et al., 2012). Un orthologue de la protena
PhoB se puede encontrar en C. jejuni (Tabla 2]. Sorprendentemente, a pesar de la baja similitud de
secuencias de aminocidos, ambas protenas de Campylobacter y E. coli son reguladores de
respuesta de unin a ADN implicados en sistemas de transduccin de seales de fosforilacin.
Adems, la protena PhoP de unin al ADN de S. Typhimurium, que tambin se demostr que
estaba implicada en la supervivencia bacteriana dentro de Acanthamoeba (Bleasdale et al., 2009),
comparte la secuencia y la similitud funcional con el regulador transcripcional Cj0890c de
transduccin sensorial de C. jejuni (Tabla 2 ). El regulador global de la respuesta de estrs de L.
pneumophila RpoS, tambin Implicado en la unin al ADN, comparte un aminocido significativo y
una similitud funcional con C. jejuni RpoD (C. jejuni carece de un gen que codifica RpoS) (Tabla 2).
Sin embargo, la sonda kinase PrmB del sensor de la seal del sistema regulador de dos
componentes de L. pneumophila, importante para la replicacin dentro de la ameba (Al-Khodor y
otros, 2009), comparte la similitud baja pero la funcin similar con el C. jejuni histidine kinase DccS
del sensor de dos componentes (Tabla 2). Se encontr que este ltimo es importante para la
colonizacin de C. jejuni in vivo, pero es dispensable para el crecimiento in vitro (MacKichan et al.,
2004).
La proteasa intracelular Lon y la GTPasa de unin al ribosoma TypA son importantes para la
supervivencia de P. aeruginosa despus de la invasin de ameba D. discoideum, y estn implicadas
en la unin a ATP y GTP, respectivamente (Breidenstein et al., 2012; Neidig et al., 2013) . Se podra
predecir un papel similar para la protena Campylobacter Lon (Tabla 2), que se encontr que era
necesaria para la invasin de clulas epiteliales (Cohn et al., 2007). Orthologues de L. pneumophila
ATP dependiente Clp proteasa subunidad proteoltica ClpP y el almacenamiento de carbono
regulador CsrA tambin se encontraron en C. jejuni. El ClpP y CsrA protenas en estas bacterias
comparten similitud tanto en las secuencias de aminocidos y funciones (Tabla 2].
Sorprendentemente, tanto ClpP y CsrA protenas de C. jejuni son importantes para C. jejuni invasin
de clulas husped (Fields & Thompson, 2008; Cohn et al., 2007).

Dos protenas involucradas en el transporte de hierro, IroT y FeoB (protena ferrosa de transporte
de hierro B), tambin fueron identificadas como importantes para la replicacin de L. pneumophila
dentro de las amebas (Portier et al., 2014; Robey y Cianciotto, 2002). C. jejuni FeoB orthologues
compartir identidad de secuencia significativa con L. pneumophila FeoB (Tabla 2]. Adems, se
inform de que C. jejuni FeoB tiene un papel importante en su supervivencia intracelular en clulas
epiteliales husped (Naikare et al., 2006). Aunque no se encontraron ortlogos de L. pneumophila
IroT en C. jejuni, otras protenas que participan en el transporte del hierro tambin pueden
contribuir a la interaccin con la ameba.

Los sistemas de secrecin de protenas bacterianas son cruciales para la virulencia y la

supervivencia dentro de los huspedes (Filloux et al., 2008). Se encontr que el T3SS era necesario
para E. coli y P. aeruginosa para la interaccin con amebas (Siddiqui et al., 2011; Abd et al., 2008).
En particular, la citotoxina exoU de P. aeruginosa secretada por este sistema se inform que era
necesaria para la supervivencia intracelular dentro de amebas (Pukatzki et al., 2002). A pesar de la
presencia de T3SS en C. jejuni, no hay protenas compartiendo similitud de secuencia con esta
citotoxina. Sin embargo, se demostr que los Campylobacter CiaB y CiaC, secretados a travs del
T3SS, eran necesarios para la invasin mxima de clulas epiteliales por C. jejuni (Christensen et al.,
2009). En 2012 se inform que los factores de virulencia exportados por el sistema de secrecin
ESX-1 de Mycobacterium marinum eran necesarios para la supervivencia intracelular y la
multiplicacin dentro de Acanthamoeba (Kennedy et al., 2012). Sin embargo, este sistema de
secrecin est presente principalmente en micobacterias y otras bacterias Grampositivas, y est
relacionado con el sistema de secrecin tipo VII, que no se encuentra en C. jejuni.

Se descubri que el opern de L. pneumophila bdhA-patD era importante para la virulencia y la

replicacin de la Legionella dentro de las amebas (Aurass et al., 2009). La 3-cetoacilo-ACP reductasa
de C. jejuni FabG comparte una identidad significativa con la protena 3-hidroxibutirato de
Legionella BdhA, ambas tienen funcin molecular oxidoredutasa. Sin embargo, el gen Legionella
bdhA se cotranscribe con el gen patD, que codifica una protena tipo patata PatD (Aurass et al.,
2009), y no se encontr similitud entre estas ltimas y las protenas C. jejuni.
LAS PROTENAS ANKYRIN ANKB, ANKH Y ANKJ REQUERIDAS PARA

Replicacin de Legionella dentro de la ameba (Habyarimana et al., 2008; Price et al., 2010),
comparten similitud de secuencia con C. jejuni 11168 ankyrin Cj0834c. Adems, se demostr que
otra protena Cj1386 de C. jejuni ankyrin era importante para la colonizacin y la patognesis,
aunque no se ha investigado el papel de esta protena en la invasin de clulas husped (Flint et al.,
2012). Adems, sera interesante investigar los factores bacterianos de C. jejuni ya conocidos como
importantes para la supervivencia intracelular de las bacterias en macrfagos, tales como la
catalasa KatA y la protena Dps de unin al hierro (Day et al., 2000; Theoret et al ., 2011).

Como se mencion anteriormente, la cepa 81-176 de C. jejuni es ms invasiva que la cepa NCTC
11168 (Backert & Hofreuter, 2013). Sin embargo, no se encontraron factores adicionales a los
enumerados en la Tabla 2 para la cepa de referencia 11168 en la primera. Adems, las cifras de
similitud y cobertura de estos factores son casi idnticas entre estas dos cepas. Una posible
explicacin de la diferencia en las actividades de invasin podra ser los diferentes niveles de
expresin de estos genes en estas cepas. Adems, una variacin estructural de tales molculas de la
superficie celular como LOS y CPS tambin puede contribuir a una cepa para la variacin de la
tensin en la capacidad de las bacterias para invadir la ameba. De hecho, se sugiri que la
diferencia en la eficiencia de invasin de C. jejuni cepas hacia clulas de cultivo de tejidos podra
estar asociado con una diferencia en sus estructuras de CPS (Young et al., 2007).

Basndonos en la informacin disponible, sugerimos un modelo que describe un mecanismo de

interaccin entre amebas y C. jejuni. Higo. 3 resume los posibles resultados de la interaccin de C.
jejuni con este husped protozoario. La seleccin de los genes y sus productos se basa en
similitudes funcionales o de secuencia de aminocidos con las encontradas en otras bacterias, o se
basa en factores que se ha demostrado que son importantes para la infeccin por C. jejuni de otras
clulas husped.

CONCLUSIN

Esta revisin proporciona un resumen actualizado de los estudios

Investigando las interacciones Campylobacter-Acanthamoeba.

En general, todos los investigadores coinciden en que la supervivencia de Campylobacter aumenta

en presencia de Acanthamoeba, pero existe un desacuerdo sobre si la interaccin ocurre
intracelular o extracelularmente. Aunque la supervivencia intracelular parece haber sido probada
por la mayora de los estudios descritos aqu, algunos investigadores siguen siendo escpticos sobre
esto. Incluso si Campylobacter es capaz de residir dentro de la ameba por un corto perodo de
tiempo, esto puede ser de importancia epidemiolgica ya que esto podra representar todava un
perodo de tiempo suficiente para que este organismo eucaritico sea una fuente de transmisin de
este patgeno. Adems, en el medio ambiente, los protozoarios pueden ser sometidos a ciclos
repetidos de infeccin por el patgeno. La presencia de amebas en fuentes de agua en granjas
avcolas puede aumentar el riesgo de infeccin con Campylobacter, ya que se ha informado
anteriormente.

Por lo tanto, se requiere una investigacin adicional para resolver estos hallazgos contradictorios.
Sugerimos posibles factores que pueden estar implicados en la interaccin entre Campylobacter y
Acanthamoeba. La exploracin de este tema es importante para una mejor comprensin de los
mecanismos y caractersticas genticas de Campylobacter

Contribuyendo a su interaccin y supervivencia dentro de amebas; Mejorando as nuestra

comprensin del riesgo de infeccin. Un enfoque prometedor en esta direccin sera un estudio de
expresin gnica (anlisis transcriptmico) dirigido a la identificacin de los genes bacterianos
regulados diferencialmente durante la invasin.