Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
a
Biologia Molecular da Clula, 5 Edio
Uma criatura do mar avistada entre as Antilhas e Nice, em 1562. Nunca saberemos exatamente o que a
pessoa que desenhou esta figura realmente viu, mas pouco provvel que esta criatura tenha sido totalmente
inventada. Qualquer um que tenha feito um curso de histologia sabe como difcil aprender a observar e cap-
tar detalhes relevantes e precisos a partir de uma cena no familiar. Isto importante para os bilogos celula-
res; muito fcil interpretar o que no familiar quando j se tem um conhecimento prvio, impossibitando a
percepo de algo novo.
1-3 Verdadeiro. Os genomas das bactrias so reduzidos ao essencial: apenas uma pe-
quena poro se destina ao controle da expresso gnica. J no genoma humano,
apenas cerca de 1,5% das sequncias de DNA codifica protenas.
1-4 A resistncia a mutaes, observada no cdigo gentico, sugere que ele esteja su-
jeito s presses da seleo natural. Dessa maneira, a resistncia a mutaes
uma caracterstica favorvel do cdigo gentico, pois permite que os organismos
mantenham informaes suficientes para especificar fentipos complexos. Esta
lgica sugere que um evento aleatrio aproximadamente de um em um milho
tenha sido responsvel pelo surgimento de um cdigo gentico prova de erros
como o nosso.
Contudo, na prtica isto no to simples. Se a resistncia a mutaes for uma
caracterstica essencial de qualquer cdigo gentico, ento os nicos cdigos que
observaramos seriam aqueles prova de erros. Um evento evolutivo menos rgi-
do, que originasse um cdigo mais sujeito a erros, poderia limitar a complexidade
da vida.
Existem diversas provas de que o cdigo gentico no esttico e responde s
foras da seleo natural. Variantes do cdigo gentico j foram identificadas em
mitocndrias e no genoma nuclear de diversos organismos.
1-6 Alimentar-se significa obter energia livre ou substratos a partir de, seja esta
fonte a luz solar ou compostos qumicos inorgnicos. No caso da fotossntese, os
ftons da luz solar so utilizados para excitar os eltrons de algumas molculas,
criando espcies instveis. Quando estes eltrons voltam ao seu estado natural, a
energia liberada aproveitada por mecanismos que direcionam a sntese de ATP.
De modo similar, os organismos litotrficos obtm energia livre pela oxidao de
uma ou mais molculas reduzidas obtidas das fendas termais (p. ex., H2S S +
2H+), utilizando alguma molcula comum presente no ambiente como aceptora
de eltrons (2H+ + O2 H2O). A energia liberada nestas reaes de oxidao-
reduo (transferncia de eltrons) utilizada em reaes que envolvam a sntese
de ATP.
1-7 So possveis quatro rvores filogenticas (Figura R1-1). Os trs grupos podem ter
divergido de um ancestral comum ao mesmo tempo. As eubactrias e as arque-
bactrias podem ter divergido dos eucariotos e ento se separado. As eubactrias
e os eucariotos podem ter divergido das arquebactrias e ento formado ramos
distintos. Ou ainda, as arquebactrias e os eucariotos podem ter divergido das
eubactrias antes de divergirem entre si. Apesar de os eventos de transferncia
horizontal tornarem a anlise filogentica mais complicada, acredita-se que as
arquebactrias e os eucariotos se separaram das eubactrias e ento as arquebac-
trias divergiram do grupo dos eucariotos.
1-8 pouco provvel que qualquer gene tenha se originado com as caractersticas
perfeitas para a sua funo. Assume-se que genes altamente conservados, como
os que codificam o RNA ribossomal, tenham sido otimizados por processos evo-
lutivos mais rpidos durante a evoluo do ancestral comum a arquebactrias,
eubactrias e eucariotos. Uma vez que RNAs ribossomais (e os produtos de outros
genes altamente conservados) participam nos processos fundamentais aperfei-
oados anteriormente, no houve presso evolutiva para mudana. J os genes
menos conservados ou seja, os que evoluem mais rapidamente esto cons-
tantemente sujeitos a ocupar novos nichos funcionais. Considere, por exemplo, a
evoluo dos diferentes genes da globina (veja a resposta da Questo 1.1).
1-9
A. Uma vez que os genes envolvidos nos processos de fluxo de informao esto
menos sujeitos transferncia horizontal, as rvores evolutivas derivadas destes
genes so mais confiveis para estimar as relaes evolutivas entre os organismos.
Portanto, provvel que as arquebactrias tenham se separado dos eucariotos de-
pois de ambos terem divergido do grupo das eubactrias.
B. A complexidade uma explicao lgica para as diferenas nas taxas de transfe-
rncia horizontal de genes. A transferncia bem sucedida de um gene relacionado
ao processo de fluxo de informao necessita que o seu produto gnico se encaixe
em um complexo funcional preexistente, talvez suplantando a protena original
presente no organismo. Para que esta protena se encaixe em um complexo pro-
teico, necessrio que ela apresente superfcies de ligao complementares ao
complexo, permitindo a sua interao correta. J um produto gnico que desem-
penhe uma reao metablica independente pode ser perfeitamente funcional
em qualquer organismo. Se esta reao metablica conferir alguma vantagem
adaptativa ao organismo que receber este gene (ou ao menos, no conferir des-
vantagens), o gene em questo pode ser acomodado no genoma do organismo
receptor.
A B E A B E A B E A E B
1-10
A. A hiptese mais simples que a transferncia gnica tenha ocorrido no ponto in-
dicado na Figura R1-2. As linhagens alm deste ponto apresentam o gene Cox2
nuclear, enquanto as linhagens que se ramificam nos pontos anteriores no apre-
sentam.
B. Cinco gneros (Lespedeza, Dumasia, Pseudeminia, Neonotonia e Amphicarpa)
aparentemente possuem cpias funcionais dos genes mitocondrial e nuclear,
conforme indicado em cinza na Figura R1-2.
C. Dez gneros (Eriosema, Atylosia, Erythrina, Ramirezella, Vigna, Phaseolus,
Ortholobium, Psoralea, Cullen e Glycine) no apresentam o gene mitocondrial
funcional. O nmero mnimo de eventos de inativao quatro, conforme indica-
do pelos quadrados na Figura R1-2.
D. Seis gneros (Calopogonium, Pachyrrhizus, Cologania, Pueraria, Pseudovigna e
Teramnus) no apresentam a cpia funcional do gene nuclear. O nmero mnimo
de eventos de inativao cinco, conforme indicado pelos crculos na Figura R1-
2.
E. Estes dados sugerem que a transferncia de genes da mitocndria para o ncleo
no um processo de apenas uma etapa; isto , simultnea perda do gene mito-
condrial e aparecimento deste gene no ncleo. Este um cenrio bastante impro-
vvel uma vez que as verses nucleares dos genes mitocondriais devem adquirir
ainda sequncias sinalizadoras que permitam o transporte das protenas sinteti-
zadas para a mitocndria (veja o Captulo 12 da obra). Os dados apresentados na
Figura R1-2 indicam que o processo de transferncia iniciou com o aparecimento
do gene no ncleo. Esta primeira etapa no acompanhada pela perda do gene
mitocondrial. Uma vez que o gene nuclear esteja ativado, observado um est-
gio intermedirio onde as duas cpias do gene esto ativadas. Posteriormente,
uma das cpias inativada. Se o gene nuclear for inativado, o processo de transfe-
rncia do gene interrompido. Se o gene mitocondrial for inativado (geralmente
por mutaes pontuais), a transferncia gnica pode continuar. O estgio final da
transferncia a eliminao do gene mitocondrial no funcional, um processo
que ocorrer durante a replicao do genoma.
Referncia: Adams KL, Song K, Roessler OG, Nugent JM, Doyle JL, Doyle JJ e
Palmer JD (1999) Intracellular gene transfer in action: Dual transcription and
multiple silencing of nuclear and mitocondrial cox2 genes in legumes. Proc. Natl.
Acad. Sci. U.S.A. 96, 13863-13868.
1-11
A. Os dados da rvore filogentica (ver Figura 1-3, constante na obra, p. 43) indicam
que o gene da hemoglobina de plantas tenha se originado por transferncia hori-
zontal. As sequncias das hemoglobinas de plantas parecem ter divergido h mui-
to tempo na escala evolutiva, no mesmo momento, ou ainda antes, do surgimento
dos moluscos, insetos e nematoides. As relaes evolutivas indicadas na rvore
sugerem que o gene da hemoglobina surgiu a partir de algum ancestral comum.
B. Se o gene da hemoglobina de plantas tivesse se originado de transferncia hori-
zontal a partir de um parasita nematoides, a sua sequncia estaria agrupada com
as sequncias de genes de hemoglobina de nematoides na rvore filogentica da
Figura Q1-3.
Cologania + +
Pueraria + +
Pseudeminia + + + +
Pseudovigna + + +
Ortholobium + +
Psoralea + +
Cullen + +
Glycine + + +
Neonotonia + + + +
Teramnus + +
Amphicarpa + + + +
2-4 Verdadeiro. A diferena entre animais e plantas o modo como obtm as molcu-
las que sero oxidadas para consumo de energia. As plantas utilizam as reaes de
fotossntese, e os animais precisam ingerir suas fontes de alimento.
2-8 Falso. A gliclise a nica via metablica capaz de gerar ATP na ausncia de oxi-
gnio. Existem diversas situaes de anoxia em que as clulas dependem da gli-
clise para a obteno de energia. Por exemplo, em treinos intensos de corrida, a
circulao no capaz de manter condies adequadas de oxigenao nos ms-
culos das pernas, que dependem ento da gliclise, realizada a partir das molcu-
las de glicognio celular. Outro exemplo so as hemcias, que, por apresentarem
mitocndrias, no realizam metabolismo oxidativo.
2-10 A qumica orgnica realizada nos laboratrios raramente realizada em gua, de-
vido baixa solubilidade de alguns compostos e reatividade da gua com algu-
mas reaes. No entanto, a maior diferena entre a qumica orgnica das clulas
2-11
A. O etanol em uma cerveja com graduao alcolica igual a 5% est na concentra-
o 0,86 M. O etanol puro 17,2 M ([789 g/L] [mol/46 g]).
B. No limite legal de 80 mg/100 mL, haver uma concentrao de etanol igual a 17,4
mM no sangue ([80 mg/0,1 L0 [mmol/46 mg]).
C. No limite legal (17,4 mM), o etanol de cervejas com graduao alcolica igual a
5% (0,86 M) estar diludo 49,4 vezes (860 mM/17,4 mM). Esta diluio repre-
senta 809 mL de cerveja em 40 L de gua corporal, o que equivale a 2,3 cervejas
de 355 mL.
D. Aproximadamente quatro horas. Com duas vezes o limite legal, uma pessoa ter
64 g de etanol ([0,16 g/0,1L] [40 L]). Uma pessoa capaz de metabolizar 8,4 g de
etanol por hora, levando 3,8 horas para metabolizar 32 g de etanol (equivalente
quantidade que excede o limite legal).
2-12 Quanto menor a meia-vida, maior o nmero de tomos que diminuiro por uni-
dade de tempo, aumentando o nmero de dpm ou curies. Se tomos radiativos
estiverem presentes em quantidades equimolares, aqueles com meia-vida mais
curta apresentaro maior valor de dpm ou Ci/mmol uma atividade especfica
maior.
2-13
A. Uma soluo considerada neutra quando as concentraes de H e OH so
iguais. Isto ocorre quando a concentrao de cada um destes ons igual a 107 M,
e seu produto equivale a 1014 M2.
B. Em uma soluo de NaOH de 1 mM, a concentrao de OH 103M. Portanto, a
concentrao de H igual a 1011 M, o que corresponde a um valor de pH igual a
11.
KW
[H]
[OH]
1014 M2
1011 M
103 M
5
C. Um valor de pH igual a 5,0 corresponde a uma concentrao de H igual a 10 M.
9
A concentrao de ons OH nesta mesma soluo ser igual a 10 M.
2-14 Os valores de pK, do menor para o maior, sero 4, 1, 2, 3. Considere o grupo carbo-
xila da cadeia lateral do aspartato, ou cido asprtico, na superfcie de uma pro-
tena, na ausncia de outros grupos ionizveis (condio 1). Nestas condies, o
seu valor de pK ser de aproximadamente 4,5, um valor maior do que o observado
no aminocido livre, pois no sofre a influncia do grupo amino carregado positi-
vamente. Se esta cadeia lateral se encontrar em um ambiente hidrofbico, no in-
terior de uma protena (condio 2), o seu valor de pK ser maior, pois a presena
de um grupo carregado em um ambiente hidrofbico desfavorvel. Havendo um
segundo grupo negativamente carregado neste ambiente hidrofbico (condio
3), o valor de pK da cadeia lateral do aspartato ser ainda maior devido repulso
eletrosttica. Caso exista um grupo de carga positiva neste ambiente (condio
4), a atrao eletrosttica favorecer a transferncia de um prton, diminuindo o
valor de pK da cadeia lateral do aspartato, mesmo quando comparado ao mesmo
aminocido exposto na superfcie de uma protena (1).
2-16 Antes de uma corrida, o corredor deve respirar rapidamente. Como uma corrida O grupo
de curta distncia resultar em uma diminuio do pH do sangue, o objetivo antes
O P O carboxlico
da corrida aumentar o pH sanguneo, aumentando o tempo que o atleta levar fosfrico do
O cido andrico
para atingir o estado de fadiga. Segurar o flego ir aumentar a quantidade de CO2
dissolvido no sangue, deslocando o equilbrio da reao para a direita, aumentan- C O
do a [H] e diminuindo o pH do sangue. Ao respirar rapidamente, a concentrao hidroxila HO C H
de CO2 do sangue diminui e desloca o equilbrio da reao para a esquerda, dimi-
CH2
nuindo a [H] e aumentando o pH do sangue.
O
2-17 Os grupos funcionais das trs molculas esto indicados e devidamente denomi-
O P O fosforil
nados na Figura R2-1.
O
2-18 O clculo feito do seguinte modo (utilizando a molcula de gua como exem- 1,3-bifosfoglicerato
23
plo): massa da gua 3 10 g ([18g/mol] [mol/6 10 molculas]).
23
v (kT/m)1/2
O O carboxilato
v C
C carbonil
v 3,78 10 cm/seg
4
CH3
piruvato
As velocidades instantneas para as molculas de gua, glicose e mioglobina so:
3,8 104 cm/seg, 1,2 104 cm/seg e 1,3 103 cm/seg. Convertendo estes valo-
res em km/h, uma molcula de gua se desloca em uma velocidade igual a 1.360 SH sulfidril
km/h, a glicose a 428 km/h, e a mioglobina a 47 km/h.
CH2
Referncia: Berg HC (1993) Random Walks in Biology: Expanded Edition, p. 5-6, CH2
Princeton University Press. O
CH C carboxilato
2-19 A termodinmica considera o sistema como um todo, ou seja, inclui as molculas O
amino NH3 +
2-20 Toda populao de molculas de ATP disponveis no corpo reciclada 1.800 vezes
por dia, um pouco mais de uma vez por minuto. A converso de 3 moles de gli-
cose em CO2 gera 90 moles de ATP ([3 moles de glicose] x [30 moles de ATP/mol
de glicose]). O corpo contm 5 x 102 mol de ATP ([2 x 103 mol/L] x 25 L). Como a
concentrao de ATP no muda, cada molcula precisa ser reciclada 1.800 vezes
por dia ([90 moles de ATP/dia] / [5 x 102 mol de ATP]).
2-22 Escalar o monte Matterhorn a partir do topo do monte Zermatt, uma distncia
vertical de 2.818 m, requer 496 kcal:
9,8 m J kcal
trabalho 75 kg 2 2.818 m
seg kg m2/seg2 4,18 103
495,5 kcal
Este valor equivale a 1,5 barra energtica. Na realidade, o corpo humano no con-
verte energia em trabalho com 100% de eficincia, e sim com aproximadamente
25% de eficincia, o que aumenta a necessidade calrica para cerca de 6 barras.
2-24 Na ausncia de oxignio, a energia celular obtida pela fermentao, o que requer
um maior fluxo do ciclo glicoltico para gerar quantidades suficientes de ATP. Na
presena de oxignio, a clula capaz de gerar ATP pela fosforilao oxidativa,
que gera ATP de modo mais eficaz que a gliclise, e menos molculas de glicose
so necessrias para gerar a mesma quantidade de ATP.
A habilidade da cepa TrpE de ser alimentada pelas outras duas cepas indica que
TrpD e TrpB acumulam intermedirios mais distantes da via metablica do que
a etapa controlada pelo gene TrpE. A habilidade da cepa TrpD de ser alimentada
por TrpB e no por TrpE situa este gene no meio da via. Como TrpB no capaz
de ser alimentada por nenhuma outra cepa, isso indica que este gene controla a
etapa mais prxima ao triptofano.
3-4 Falso. O nmero de turnover constante, pois ele corresponde ao valor de Vmx
dividido pela concentrao enzimtica. Por exemplo, um aumento de duas vezes
na concentrao da enzima induzir um valor de Vmx duas vezes maior, mas no
afetar o nmero de turnover: 2 Vmx/2 [E] k3.
3-7 Uma vez que cada posio em uma protena de 300 aminocidos pode ser ocupa-
da por um dos 20 aminocidos de ocorrncia natural, existem 20300 (o que equiva-
le a 10390) protenas possveis. A massa de uma destas possveis protenas seria:
110 d 300 a g
massa 10390 protenas
a protena 6 1023 d
massa 5,5 10370 g
Portanto, a massa de protenas ultrapassaria a massa total observada no universo
(1080 g) em um fator de 10290!
3-8 Em termos gerais, uma identidade de pelo menos 30% suficiente para a identi-
ficao de protenas homlogas nas buscas em bancos de dados. As identidades
entre 20 e 30% so problemticas, pois as protenas identificadas como possveis
homlogas podem ser falso-positivas, uma limitao da tcnica. A busca por
sequncias de protenas homlogas de relacionamento evolutivo mais distante
facilitada pelo uso de sequncias de aminocidos mais curtas, pois quando se
3-10
A. Estes dados so consistentes com a hiptese de que o comportamento de mola da
molcula de titina se deve ao desenovelamento sequencial dos seus domnios Ig.
Inicialmente, o fragmento continha sete domnios Ig, havendo sete picos no grfi-
co resultante de fora versus extenso. Os picos resultantes observados correspon-
dem ainda ao esperado em uma perda sequencial da estrutura secundria dos
domnios da protena. A adio de um agente desnaturante elimina os picos do
grfico, pois a protena j ter perdido a estrutura dos seus domnios Ig, aumen-
tando a extenso que ela atinge por unidade de fora aplicada. Quando estes do-
mnios so estabilizados por ligaes entre eles e, portanto, se tornam incapazes
de se desenovelarem, os picos desaparecem do grfico e a extenso por unidade
de fora aplicada diminui.
B. O espaamento entre os picos, de aproximadamente 25 nm, corresponde quase
perfeitamente ao valor calculado para o desenovelamento sequencial dos dom-
nios Ig. Um domnio enovelado ocupa 4 nm, mas, quando desenovelado, os seus
89 aminocidos alinhados ocupam cerca de 30 nm (89 0,34 nm), um aumento
de 26 nm.
C. A presena de picos separados indica que cada domnio se desdobra quando sub-
metido a uma fora caracterstica, implicando que cada domnio apresenta uma
estabilidade definida. A coleo de domnios se desdobra na ordem do menos ao
mais estvel. Assim, necessrio um pouco mais de fora a cada vez para desdo-
brar o prximo domnio.
D. A quebra abrupta da fora reflete uma caracterstica importante das protenas: a
cooperatividade. As protenas tendem a perder a sua estrutura terciria e secun-
dria de um modo tudo-ou-nada. Um pequeno nmero de ligaes de hidrognio
responsvel por manter a estrutura de um domnio (Figura R3-1), e o rompi-
mento destas ligaes desencadeia o processo tudo-ou-nada de perda da estrutu-
ra tridimensional.
3-11
A. Estima-se que a sntese de uma protena composta por 10.000 aminocidos ocorra
da maneira correta em 37% das vezes.
PC (fc)n (0,9999)10.000
0,37
3-12
A. As concentraes relativas das protenas Src normal e mutante so inversamente
proporcionais ao volume em que elas esto distribudas. A protena mutante Src
est distribuda no mesmo volume celular, que :
Vclula (4/3)r3 4(10 106 m)3/3 4,1888 1015 m3
Src X Src X
K [Src X]
[Src] [X]
A baixa concentrao da protena mutante nas regies adjacentes membrana ir
deslocar o equilbrio no sentido dos componentes livres, reduzindo a quantidade
de complexos formados, resultando na ausncia de efeito da protena mutante em
induzir a proliferao celular.
3-13 O anticorpo se liga segunda protena com uma constante de equilbrio, K, igual
a 5 107 M1.
Uma possvel soluo para este tipo de problema considerar o valor de G
relacionado ao valor do log K atravs de um fator ~2,3 RT, que equivale a 1,4
kcal/mol a 37C. Desta forma, um aumento de 10 na constante de equilbrio (um
aumento de 1 no valor de log K) corresponde a um decrscimo de 1,4 kcal/mol
no valor de G. Um aumento de 100 na constante de equilbrio corresponde a
um decrscimo de 2,8 kcal/mol no valor de G, e assim sucessivamente. Esta
relao permite uma estimativa rpida das alteraes induzidas na constante de
equilbrio por alteraes na energia livre, e vice-versa. No problema apresentado,
o aumento total no valor de G igual a 2,8 kcal/mol, o que requer uma dimi-
nuio de 100 vezes no valor de K, e a constante de equilbrio para a ligao da
segunda protena igual a 5 107 M1.
A soluo deste problema requer o clculo da variao da energia livre repre-
sentada pela ligao da primeira protena:
G 2,3 RT log K
Substituindo K:
tendo a mesma forma da equao para a frao ligada. Portanto, quando a con-
centrao de substrato, [S], 10 vezes maior que a constante de Michaelis, Km,
a velocidade igual a 90% da velocidade mxima, Vmx. Quando [S] 100 vezes
menor que o valor de Km, a velocidade 1% da Vmx.
Estas relaes tambm so vlidas para a dissociao de grupos cidos, HA,
como funo dos valores de pH. Quando o valor de pH se encontra 2 unidades
acima do valor de pK, 99% dos grupos cidos esto ionizados. Quando o valor de
pH 1 unidade menor que o valor de pK, 10% destes grupos esto ionizados.
3-15 Quando [S] zero, a velocidade igual a 0/Km e, portanto, igual a zero. Quando
[S] Km, a razo de [S]/([S] Km) igual a , e a velocidade igual a 1/2 Vmx. Em
valores infinitos de [S], a razo [S]/([S] Km) igual a 1, e a velocidade igual a
Vmx.
3-16
A. Uma enzima composta inteiramente por D-aminocidos apresentar a mesma
conformao da enzima composta por L-aminocidos, sendo a sua imagem espe-
cular exata.
B. Espera-se que esta enzima correspondente imagem especular seja capaz de re-
conhecer a imagem especular do seu substrato. Desta forma, uma D-hexoina-
se adicionaria um fosfato a uma molcula de l-glicose, mas no molcula de
d-glicose.
Este experimento foi conduzido com a protease do HIV. A protease especular
capaz de reconhecer e clivar a estrutura especular do seu substrato.
4-3 Verdadeiro. A carga negativa do esqueleto de DNA pode ser neutralizada pelas
cargas positivas das cadeias laterais bsicas de lisina e arginina, que so os amino-
cidos presentes no cerne das histonas.
4-4 Falso. O movimento dos nucleossomos ao longo do DNA ou mesmo entre seg-
mentos de DNA pode ser catalisado pelos complexos de remodelamento da cro-
matina utilizando a energia da hidrlise de ATP.
4-5 Verdadeiro. A duplicao gnica permite que um dos dois genes sofra divergncia,
isto , adquira funes diferentes, mas relacionadas.
4-8 Como C sempre forma par com G nos DNAs de fita dupla, ento a quantidade de
G igual a de C, ou seja, 20% em base molar. O restante a quantidade de A e T,
que tambm se equivalem, sendo de 30% cada.
Primeira Segunda
inverso inverso
4-14 Como os blocos dos gene Hox so ricos em segmentos no codificantes conser-
vados e, provavelmente, elementos reguladores, as inseres de elementos trans-
ponveis nesses blocos so eliminadas por seleo de purificao. Essas inseres
provavelmente interrompem a regulao apropriada dos genes Hox.
Referncia: Lander ES et al. (2001) Initial sequencing and analysis of the human
genome. Nature 409, 860-921.
5 3 5-10 Caso as quebras com reparo impreciso estejam distribudas aleatoriamente pelo
genoma, ento esperado que 2% alterem genes ou reguladores importantes.
5 3
Desta forma, as funes de cerca de 40 genes estariam comprometidas em cada
clula. Como o genoma humano diploide, para alguns loci o alelo no afetado
seria suficiente para a funo normal da protena, j para outros a funo poderia
ser afetada.
5-11 Duas verses da juno Holliday dupla resultante de uma invaso de fitas esto
mostradas na Figura R5-2.
5 3 5-12 A recombinao irrestrita entre sequncias repetidas rearranjaria rapidamente
ou o genoma, o que levaria a um grande nmero de descendentes inviveis, colo-
cando a espcie em risco. Essa calamidade evitada pelo sistema de reparo de
5 3 erros. As sequncias repetidas diferem um pouco umas das outras. Quando os
intermedirios da recombinao se formam entre essas sequncias, muitos erros
esto presentes nas regies de heterodplex. Esses erros em grande quantidade
5 3 so detectados pelo sistema de reparo, que aborta o processo de recombinao
assegurando que as sequncias em recombinao sejam bastante idnticas.
Figura R5-2 Juno Holliday dupla (Res-
posta 5-11). A nova sntese de DNA est
indicada por linhas onduladas.
6-3 Falso. O pareamento oscilante ocorre entre a terceira posio do cdon e a primei-
ra posio do anticdon. Lembre-se sempre que a contagem dos nucleotdeos
feita na direo de 5 para 3 da fita de cidos nucleicos que est sendo considera-
da.
6-4 Falso. Este argumento sempre levou em considerao que poucos tipos de reaes
esto representados nas ribozimas das clulas atuais, mas sabe-se que muitos
processos catalticos nas clulas atuais so realizados por ribozimas (a traduo
o melhor exemplo). Alm disso, experimentalmente j foi possvel identificar
diversas ribozimas com capacidades de catlise relativas a uma ampla gama de
reaes biolgicas e to ou quase to eficientes quanto enzimas proteicas. Se as ri-
bozimas esto subrepresentadas nas clulas modernas isso provavelmente ocorra
devido disponibilidade de 20 aminocidos, em contrapartida s quatro bases.
Essa diferena entre os componentes de cidos nucleicos e protenas permite po-
tencialmente que as enzimas proteicas utilizem um nmero maior de estratgias
catalticas e lhes fornece maior possibilidade de ligao a diferentes substratos.
6-5 Na Figura Q6-1 (p. 409, do original), a RNA-polimerase deve estar se movimentan-
do da direita para a esquerda e no apresenta possibilidade de girar livremente
em torno da fita-molde, pois pode-se observar tanto supertores positivas, a sua
frente (representando uma compactao), quanto supertores negativas, atrs
dela (representando relaxamento da fita de DNA). Isso s est ocorrendo porque,
6-7 Para responder esta questo, deve-se inicialmente considerar que a fase de leitura
de qualquer um dos transcritos maduros originados dada pelo xon 1. Assim,
seja qual for a sequncia ou o nmero de nucleotdeos dos demais xons, impre-
terivelmente a fase de leitura j estar estabelecida quando a maquinaria de tra-
duo alcanar um ponto determinado qualquer. As afirmaes A e B podem
ser verdadeiras, mas no so obrigatoriamente verdadeiras. Tanto no caso dos
xons 2 e 3 quanto no caso dos xons 7 e 8, o importante que a fase de leitura de-
finida no seja alterada, visto que a sequncia proteica deve ser a mesma para os
segmentos do mRNA que correspondem aos xons 1 e 10. Assim, se for utilizado
o xon 2 ou o xon 3 (ou o 7 versus o 8), o importante que a entrada no xon
a seguir respeite a fase de leitura normal (ou padro) para aquele xon, e isso s
poder ocorrer seguindo-se obrigatoriamente a afirmao C, ou seja, os xons al-
ternativos devem possuir um nmero de nucleotdeos que, quando dividido por
trs (o nmero de nucleotdeos em um cdon), apresente o mesmo resto. Pode-se
testar este exerccio visto que a sequncia do gene da -tropomiosina conhe-
cida: tanto o xon 2 quanto o xon 3 contm o mesmo nmero de nucleotdeos
(126), que divisvel por trs, sem resto, e portanto permitem a entrada no xon
seguinte na mesma fase. Os xons 7 e 8 tambm contm o mesmo nmero de
nucleotdeos, que dividido por trs fornece um resto igual a um. Conforme salien-
tado anteriormente, apesar de conterem o mesmo nmero de nucleotdeos (o que
parece dar razo resposta A), este fato no obrigatrio. Se o xon 2 tivesse 126
nucleotdeos e o xon 3 possusse 129 nucleotdeos, a entrada no xon seguinte
ocorreria na mesma fase de leitura.
6-8 Como est sendo considerado que todas as mutaes envolvem uma nica altera-
o nucleotdica, consultando uma Tabela do cdigo gentico pode ser concludo
que s os seguintes cdons poderiam estar envolvidos: GUG para valina, GCG
para alanina, AUG para metionina e ACG para treonina. Para que houvesse isola-
mento de um mutante valina para treonina em um nico passo, seria necessrio
que dois nucleotdeos adjacentes sobre o cdon GUG (valina) fossem alterados
(o primeiro G para A e o U para C), originando o ACG que codifica para treoni-
na. Deve ser considerado que, apesar de estarmos trabalhando com mutagnese
induzida, cada uma das alteraes, individualmente, resultante de um evento
relativamente pouco frequente e que, portanto, a ocorrncia de dois eventos de
mutao em dois nucleotdeos adjacentes seria ainda menos frequente; ou seja,
um duplo mutante deve ser bastante raro.
6-9 A traduo depende do encaixe dos tRNAs carregados no stio adequado, encaixe
este determinado pelo pareamento correto entre cdon e anticdon. O EF-Tu po-
siciona um tRNA-aminoacil (o tRNA carregado) no stio aceptor do ribossomo e
sofre hidrlise do GTP ligado, o que faz com que ele deixe o stio, abandonando o
tRNA-aminoacil. Como a taxa de hidrlise do GTP mais rpida quando um pa-
reamento cdon-anticdon correto est formado, se um tRNA-aminoacil pareado
incorretamente encontra-se no stio aceptor, o GTP do EF-Tu demora mais tempo
6-12 O RNA capaz de atuar tanto no estoque da informao gentica, atividade que
ainda desempenha em certos organismos, como determinados vrus, quanto na
catlise de reaes qumicas, atividade representada pelas ribozimas. Ou seja, o
RNA apresenta caractersticas que o aproximam tanto do DNA quanto das prote-
nas. O somatrio destas caractersticas nos permite imaginar um processo original
de duplicao de molculas de RNA que aliasse a atividade cataltica manuteno
desta informao (referente capacidade cataltica) nas molculas-filhas. A con-
tinuidade deste processo de duplicao, a gerao de novas molculas-filhas e a
incorporao de novas informaes representariam os passos iniciais da evoluo
da vida naquele que chamado o mundo de RNA. Como ainda hoje molculas
de RNA podem ser observadas atuando como catalisadoras de diferentes reaes
fundamentais nas clulas, esta proposta bastante atraente e parece vivel.
Apesar de poder estocar informao, o RNA uma molcula muito mais fr-
gil que o DNA. Geralmente composta por uma fita simples, a molcula de RNA
mais sensvel a leses do que o DNA. No RNA, o grupo hidroxila no carbono 2 do
C U acar ribose um agente para a catlise da ligao fosfodister 3-5, que une os
5 G C A C C G nucleotdeos adjacentes. Como o DNA usa desoxirribose, escapa deste mecanis-
U
3 C G U G G C mo de quebra da cadeia. Alm disso, como a hlice dupla do DNA composta por
A C duas fitas complementares, no caso de leso ou mesmo de incorporao de um
nucleotdeo errneo durante o processo de duplicao do DNA, h a possibilida-
de de que estes danos sejam reparados eficientemente pela comparao com a
sequncia da fita complementar. A prpria composio de bases do DNA torna-o
5 GCACUCCGUCGGCAUGC 3
mais eficiente como estoque mais estvel de informao. O uso de timina no DNA
3 CGUGAGGCAGCCGUACG 5 (no RNA usada a uracila) estabelece uma proteo contra os efeitos da deamina-
o. A deaminao de T d origem a uma base anormal (metil C), que facilmente
identificada como estranha aos cidos nucleicos, ao passo que a deaminao de U
d origem a um C, que uma base normalmente presente.
G
5 G C A U C C G 6-13 O sistema de complementaridade reversa faz com que uma molcula comple-
A
3 C G U G G G C mentar a este RNA possua uma sequncia que formar um grampo bastante se-
A melhante ao desta molcula, como ilustrado na Figura R6-1.
As estruturas destas duas molculas em grampo sero bastante semelhantes,
Figura R6-1 Estruturas em grampo sendo idnticas nas regies de fita dupla que envolvem pareamentos de base GC
formadas por uma fita de RNA, cuja se- e AU tradicionais. As regies de fita simples seriam distintas entre as duas mol-
quncia foi dada na Questo 6-13, e sua
culas em grampo. Alm dos pareamentos tradicionais de base (GC e AU), no RNA
fita complementar (sequncia inferida a
pareamentos GU tambm podem estar presentes e so estveis. Desta forma, a
partir da sequncia de RNA original for-
necida). Na parte central da figura esto molcula complementar sequncia de RNA que foi dada nesta questo formaria
ilustradas as sequncias de RNA de fita um grampo com um pareamento a mais do que o grampo da molcula original.
simples (emparelhadas para evidenciar Essa diferena est representada na Figura R6-1.
sua complementaridade), e acima e
abaixo esto ilustradas as respectivas
estruturas em grampo derivadas. O pa-
reamento incomum GU na estrutura em
grampo, abaixo do dplex, est salien-
tado em um quadro tracejado.
7-4 Cada fosfato adicionado altera a carga da protena em uma unidade, mas tem pou-
co efeito sobre a sua massa molecular. Como consequncia, as protenas que di-
ferem apenas no nmero de fosfatos adicionados iro apresentar a mesma massa,
mas diferentes pontos isoeltricos, formando um conjunto de bandas horizontais,
conforme mostrado na Figura R7-1. importante ressaltar que um conjunto de
bandas horizontais no prova que estas protenas estejam relacionadas por fos-
forilao; podem ser protenas de mesma massa molecular e pontos isoeltricos
distintos. Para resolver este problema, possvel tratar as amostras com fosfatase
antes da separao por eletroforese.
7-7
A. Algumas das molculas de RNA-polimerase desviaram do fluxo principal, pois
se ligam ao DNA e deslizam antes de se desligarem e retornarem ao fluxo prin-
cipal das molculas. Esta ligao no deve ser especfica, pois as molculas de
RNA-polimerase se deslocam por longas distncias de DNA. Algumas regies da
molcula de RNA-polimerase, normalmente envolvidas na ligao a sequncias
promotoras, tambm esto envolvidas no seu deslocamento pela cadeia de DNA,
pois esta ligao no especfica eliminada quando a RNA-polimerase encontra
uma regio da cadeia de DNA que contenha uma sequncia promotora forte.
B. O deslocamento ao longo da cadeia de DNA permite que protenas que se ligam
ao DNA em locais especficos possam encontrar seus alvos muito mais rapida-
mente do que seria esperado atravs de uma difuso tridimensional, pois reduz
a dimenso de busca pela regio de ligao para apenas uma. Acredita-se que a
maior parte das protenas que se liga ao DNA em locais especficos acelere a sua
ligao por deslocamento pela cadeia de DNA e transferncia entre segmentos da
cadeia.
C. Se as sequncias-alvo estiverem presentes em molculas curtas de DNA, o tempo
de busca por estas sequncias ser lento e muito prximo ao de uma busca tridi-
mensional. Por outro lado, se estas sequncias-alvo estiverem presentes em lon-
gas molculas de DNA, esta busca ser acelerada pelo processo de deslocamento.
Desta forma, protenas que se ligam ao DNA em locais especficos encontraro
seus alvos mais rapidamente em uma populao de longas molculas de DNA.
7-9 Estes resultados indicam que a sntese tecido-especfica da ApoB100 nas clulas
do fgado e da protena ApoB48 nas clulas do intestino resultado da diferena
no processamento dos transcritos de RNA. Os resultados apresentados na Tabela
Q7-1 (p. 498 da obra) mostram que o DNA oriundo do fgado e do intestino apre-
senta a sequncia oligo-Q, mas no a sequncia oligo-STOP. Portanto, as diferen-
as observadas nos tecidos no podem resultar da presena de genes indepen-
dentes. Como o mRNA ApoB do intestino apresenta um cdon de parada onde
o mRNA ApoB do fgado apresenta um cdon da glutamina, as duas molculas
de mRNA no codificam a mesma protena. As protenas ApoB48 e ApoB100 no
esto relacionadas por clivagens tecido-especficas. Um destes dois tecidos altera
Referncias: Powell LM, Wallis SC, Pease RJ, Edwards YH, Knott TJ e Scott J (1987)
A novel form of tissue-specific RNA processing produces apolipoproteins-B48 in
intestine. Cell 50, 831-840.
Chen S-H, Habib G, Yang CY, Gu ZW, Lee BR, Weng S-A, Silbermann SR, Cai S-J.
Deslypere JP, Rosseneu M, Gotto AM, Li W-H e Chan L (1987) Apolipoprotein B-48
is the product of a messenger RNA with an organ-specific in-frame stop codon.
Science 238, 363-366.
8-2 Falso. Nenhum instrumento capaz de detectar menos do que uma molcula, ou
seja, 1,7 yoctomol. Um yoctomol equivale a 0,6 molcula.
8-4 Verdadeiro. Se cada ciclo duplica a quantidade de DNA, ento 10 ciclos equivalem
a 210 amplificaes, 20 ciclos a 220 e 30 ciclos a 230.
8-5 A tripsina uma protease que cliva a maioria das protenas. A colagenase es-
2+
pecfica para o colgeno e o EDTA quela Ca , que necessrio para manter as
caderinas unidas nas ligaes entre as clulas. O tratamento no mata as clulas,
pois os danos ocorrem nos componentes extracelulares que as clulas podem res-
tabelecer.
8-6 Sim. Normalmente isso feito pela introduo de anticorpos de uma espcie em
uma segunda espcie, por exemplo, injetando anticorpos de camundongo em co-
bras. Tambm possvel obter anticorpos contra anticorpos em uma mesma es-
pcie. Nesse caso, a maior parte das molculas injetadas ser reconhecida como
prpria, mas a poro da molcula de anticorpo que se liga ao antgeno, idiotipo,
poder desencadear uma resposta imune.
8-9
A. Como mostrado na Figura R8-1A, no incio o DNA est distribudo uniformemen-
te na soluo de CsCl de densidade uniforme. Aps a centrifugao, o CsCl em-
purrado para baixo no tubo, formando um gradiente linear em equilbrio (Figura
Figura R8-1 Sedimentao de equil- (A) CONDIO INICIAL (B) APS CENTRIFUGAO
brio do DNA em uma soluo de CsCl
(resposta 8-9). (A) Densidade do CsCl e
1,76
Densidade do CsCl
distribuio do DNA no incio do experi-
mento. (B) Densidade de distribuio do
CsCl e DNA em equilbrio. CsCI
1,70
CsCI
1,64 DNA
8-11 Como mostrado abaixo para clulas de mamferos, 100 g/mL correspondem a 5
105 clulas de mamferos e 5 x 108 clulas bacterianas.
clulas 100
g mL clula mg (10
m)
4 3
cm3
3 3
gel gel 200 mg 1.000
m 1.000
g (cm) mL
5 10 clulas/gel
5
8-12 O iniciador 1 hibridizar com a fita inferior e realizar a sntese para a direita, en-
quanto o iniciador 8 hibridizar com a fita superior e realizar a sntese para a
esquerda. Os iniciadores 2, 3, 6 e 7 no hibridizariam com as fitas. Os iniciadores 4
e 5 hibridizariam, mas sintetizariam as fitas para as direes erradas.
8-13 Um fragmento de fita dupla de DNA do tamanho correto gerado no terceiro ciclo
da reao de amplificao (Figura R8-2).
8-14 Uma mutao de ganho de funo normalmente dominante, pois muitas vezes
tem uma consequncia fenotpica mesmo quando a protena est presente em
apenas metade da concentrao da protena do tipo selvagem. Essas mutaes
podem aumentar a atividade da protena tornando-a ativa em momentos inapro-
TERCEIRO CICLO
priados. Uma mutao dominante negativa dominante, pois um nico alelo de-
fectivo capaz de determinar o fentipo, ou seja, mesmo na presena de um alelo
normal, o produto gnico mutante interfere com a funo do produto normal,
causando uma perda de funo.
8-15 Com certeza, assim como ocorreu com outras enfermidades, se a doena no exis-
tisse, o papel da insulina e de outras protenas no seria notado e a identificao e
o seu papel na fisiologia no seriam to bem estudados.
9-3 Verdadeiro. Um feixe de laser pode ser focado com preciso, e assim ativar mol-
culas encarceradas em um determinado momento e local preciso na clula.
9-4 As lentes de imerso no leo aumentam a largura do cone de luz que alcana a
objetiva, o que uma limitao-chave na resoluo.
9-6 Como o ndice de refrao da gua muito prximo ao da crnea, a principal for-
a refratria da crnea eliminada. culos melhoram a viso embaixo da gua,
pois colocam ar em frente da crnea, restaurando a diferena normal nos ndices
refratrios nessa interface.
9-7 Resoluo se refere habilidade de ver dois objetos pequenos como entidades se-
paradas, e magnificao se refere ao tamanho da imagem em relao ao tamanho
do objeto.
9-8 Ambos os tipos de anticorpos secundrios amplificam o sinal inicial, mas a am-
plificao por anticorpos que carregam enzimas ligadas pode ser at 1.000 vezes
mais eficiente e mais sensvel.
9-9 GFPs mutantes foram geradas com diferentes aminocidos em torno do cromfo-
ro, o que influencia a capacidade do cromforo de interagir com a luz. O compri-
mento de onda no qual o cromforo excitado e no qual ele emite fluorescncia
depende do seu ambiente molecular.
Referncia: Service RF (2004) Immune cells speed the evolution of novel protein.
Science 306, 1457.
9-10 O aumento na FRET depende da fosforilao da protena, uma vez que nenhum
aumento ocorre na ausncia de protena Abl ou ATP, ou quando o fosfato remo-
vido por uma tirosina-fosfatase. Assim, a fosforilao deve fazer com que CFP e
YFP se aproximem. Uma possvel explicao que a adio de um fosfato tiro-
sina no substrato permite que o segmento da protena se dobre para se ligar ao
domnio adjacente de ligao da fosfotirosina, diminuindo a separao dos dom-
nios CFP e YFP (Figura R9-1).
9-11
0,61
Resoluo
n sin
0,61 (0,004 nm)
sin
(0,1 nm)
arcsin 0,0244 = 1,4
CF
Cinase + ATP
CF
Substrato
P
fosfatase
YF
P
526 nm
YFP
P
Protena de
ligao
fosfotirosina
9-12 Estruturas protuberantes lanam uma sombra atrs delas mesmas, enquanto que
depresses no. Como mostrado na Figura R9-2, na microscopia a sombra parece
mais brilhante pela ausncia de metal.
10-3 Falso. As clulas ajustam a fluidez de suas membranas por meio da modificao
dos lipdeos que as compem. Exemplos clssicos incluem as balsas lipdicas e as
membranas apicais de clulas epiteliais polarizadas.
10-4 Qualquer ruptura na bicamada cria uma ponta exposta gua. Como isso ener-
geticamente desfavorvel, as molculas da bicamada rompida se arranjaro de
forma espontnea para eliminar a extremidade livre, pois a conformao de bica-
mada mais favorvel energeticamente do que a de micelas.
10-5 Este processo converte cido graxo insaturado em saturado, j que ocorre reduo
das ligaes duplas por hidrogenao. O leo vegetal convertido em margarina
porque as cadeias de cidos graxos das molculas lipdicas ficam bem prximas
umas das outras, aumentando a viscosidade. A margarina feita a partir de leos
vegetais hidrogenados, cujas ligaes duplas foram removidas pela adio de to-
mos de hidrognio, tornando-a mais slida temperatura ambiente.
10-6 Uma balsa lipdica composta somente por lipdeos dever possuir 19.000 molcu-
las de lipdeos por monocamada, portanto 38.000 molculas por balsa. O clculo
feito considerando que uma balsa de 70 nm de dimetro tem aproximadamente
3,8 103 nm2 de rea (3,14 352) e uma molcula lipdica de 0,5 nm de dimetro
tem 0,2 nm2 (3,14 0,252). Logo, o nmero de molculas dado por 3,8 103/0,2.
Cerca de 760 protenas devero estar presentes nessa mesma balsa (38.000/50).
10-7
A. Ocorre que o fosfolipdeo 1 est mais acessvel ao ascorbato que o fosfolipdeo 2,
sendo reduzido mais rapidamente. Mais detalhadamente, o radical nitrxido do
fosfolipdeo 1 est na cabea hidroflica que, por sua vez, est em contato direto
com o meio extracelular. Essa proximidade propicia uma rpida reao com o as-
corbato. J o radical nitrxido do fosfolipdeo 2 encontra-se ligado cadeia de ci-
do graxo, estando parcialmente enterrado no interior da membrana e, portanto,
menos acessvel ao ascorbato.
B. Percebe-se que no h alterao no perfil da perda de sinal da ESR dos eritrcitos
fantasmas, com relao ausncia ou presena de ascorbato, em comparao ao
perfil dos eritrcitos normais. provvel que exista algum agente redutor no ci-
toplasma dos eritrcitos normais que seja capaz de reduzir o fosfolipdeo 1 (mais
exposto), mas no o fosfolipdeo 2 (menos exposto). Em resumo, nos eritrcitos
normais, o fosfolipdeo 2 fica estvel na ausncia de ascorbato e o fosfolipdeo 1
fica instvel, pois os fosfolipdeos da monocamanda citoplasmtica so expostos
ao agente redutor citoplasmtico, eliminando metade do sinal.
C. Sim. possvel observar na Figura Q10-3 (p. 649 da obra) que a metade dos fos-
folipdeos 2 era sensvel ao ascorbato, quantidade esta equivalente ao marcador
10-10 Essa associao pode ser mediada por foras de van der Waals, as quais tm papel
fundamental em biologia estrutural. Embora sejam relativamente fracas, as foras
de van der Waals tornam-se importantes quando duas superfcies macromolecu-
lares so complementares e muitos tomos esto envolvidos, pois desta forma so
capazes de manter as molculas unidas.
11-2 Falso. A saturao dos transportadores fcil de imaginar, pois eles devem ligar-se
molcula que ser transportada e, portanto, sua capacidade de carga limita-
da pela disponibilidade dos stios de ligao. No caso dos canais, pode-se fazer
uma analogia com uma autoestrada interrompida por um tnel estreito atravs do
qual os veculos devem passar em fila nica. Apesar de ainda no ser totalmente
compreendido como ocorre a passagem dos ons nos canais, acredita-se que ons
permeveis devem esconder a maior parte das molculas de gua associada a eles
para poder atravessar, em fila nica, a poro mais estreita o filtro de seletivida-
de do canal. Como no caso do tnel estreito com uma nica pista de passagem,
esta situao limita a passagem dos ons, e conforme as concentraes inicas
aumentam, o fluxo de ons atravs do canal tambm aumenta, at alcanar um
nvel de saturao devido ao efeito de gargalo da entrada do tnel (lembre-se que
a passagem deve ser feita em fila nica). Assim, tanto os transportadores como os
canais sofrem saturao.
camada lipdica: tamanho (pequena > grande) e polaridade (no polar > polar >
carregada).
11-6
A. Sim, eles podem normalizar tanto as concentraes de H quanto de Na. Para
cada trs ciclos de antiporte Na-H, que importa um Na e exporta um H, a
bomba de Na-K cicla uma vez, exportando trs ons Na em cada operao. A
cada ciclo da bomba de Na-K ocorrer tambm hidrlise de ATP. Esta hidrlise
de ATP por H2O gera ADP e H2PO4 (o qual possui um pK de 6,86). Assim, em
um pH intracelular de 7,2, aproximadamente 70% sero ionizados em HPO42 e
H. No h necessidade de preocupao com a ocorrncia de hidrlise e o conse-
quente possvel desbalano das concentraes de H, pois, em outros pontos da
clula, diferentes processos convertem os produtos de hidrlise novamente em
ATP e mantm uma concentrao basal.
B. A ao conjunta destas duas bombas promove o aumento tanto da concentrao
interna de K quanto do potencial de membrana, pois remove 3H a cada 2K que
so introduzidos na clula.
11-9 Para calcular a concentrao relativa a uma bola neste hemisfrio, necessrio
inicialmente calcular o volume do hemisfrio que pode ser explorado pela bola
ligada a uma corrente que controla o canal. De acordo com os dados forneci-
dos na figura, este hemisfrio corresponde a 2,05 104 nm3 ([2/3] 3,14 [21,4
nm]3), o que corresponde a 2,05 10-20 litros ([2,05 104 nm3] [cm/107 nm] 3
[litro/1.000 cm3]). Uma nica bola ocupa este espao e, portanto, a concentrao
de uma bola neste volume equivale a 8,13 10-5 M ou 81,3
M (1 molcula/2,05
10-20 litros) (mole/6 1023 molculas)]. Assim, a concentrao local da bola
aproximadamente a mesma que a concentrao de peptdeos livres necessria
para inativar o canal.
11-10 Usando a equao de Nernst e os dados apresentados na tabela Q 11-1 (p. 694 da
obra), podemos calcular o potencial de membrana esperado devido s diferenas
na concentrao de K atravs da membrana em repouso:
C0
V 58 mV log
Ci
9 mM
V 58 mV log
344 mM
V 92 mV
O mesmo raciocnio aplicado ao Na resulta em um valor de 48 mV. De acordo
com a questo, o potencial de membrana medido em um axnio gigante de lula
intacto (potencial de repouso) igual a 70 mV, valor este que se aproxima do
valor calculado considerando-se apenas o K. Ainda na questo, informado que,
quando o axnio, suspenso em gua do mar, estimulado para a conduo do im-
pulso nervoso, o potencial de membrana transientemente alterado e alcana um
valor de 40 mV (potencial de ao). Este valor bastante semelhante ao obtido
quando o potencial de membrana devido apenas ao Na considerado.
Para entender estas duas situaes (potencial de repouso com valor semelhan-
te ao potencial de membrana considerando-se apenas o envolvimento de K e
potencial de ao com valor semelhante ao potencial de membrana no momento
em que se considera apenas o envolvimento de Na), preciso lembrar que o K
responsvel majoritariamente pelo potencial de repouso e o Na responsvel
pelo potencial de ao. Uma membrana em repouso 100 vezes mais perme-
vel ao K do que ao Na, pois canais de liberao de K permitem a sada do K
at que o potencial de membrana seja suficientemente elevado para se opor ao
gradiente de concentrao de K. A entrada de Nacompensa a perda de cargas
positivas representada pela sada de K e reduz o gradiente mximo. Se no fosse
a bomba de Na-K, que continuamente remove Na, o potencial de repouso da
membrana seria completamente dissipado.
O canal de Na controlado por voltagem, por sua vez, controla o potencial de
ao. Quando a membrana estimulada, h a abertura deste canais, permitindo
que ons Na entrem na clula. A magnitude do potencial de membrana resultan-
te limitada pela diferena nas concentraes de Na atravs da membrana. O
influxo de Na reverte o potencial de membrana localmente, o que leva abertura
de canais de Na adjacentes e, em ltima instncia, faz com que um potencial de
ao se propague a partir do stio de estmulo original.
a
Referncia: Hille B (1992) Ionic Channels of Excitable Membranes, 2 edio, p.
23-58. Sunderland, MA: Sinauer.
12-3 Falso. O trfego ocorre pelos poros em ambas as direes e no est claro como os
poros coordenam este trfego para evitar colises.
12-5 Falso. Seria verdadeiro se todas as protenas tivessem a poro N-terminal virada
para o citosol. No caso das protenas que possuem a poro N-terminal voltada
para o lmen, o segundo segmento transmembrana e os demais segmentos pares
atuaro como sinais de incio de transferncia e os segmentos subsequentes m-
pares atuaro como sinais de parada.
12-6 Sem um sinal de distribuio que a direcione para a organela onde requerida, a
protena permanece no citosol.
12-7
A. Neste caso, em que o sinal de importao ao RE est localizado na regio N-ter-
minal da protena e atua antes que o sinal interno de importao ao ncleo seja
sintetizado, a protena entrar no RE. Uma vez dentro do RE, a sequncia-sinal
de importao ao ncleo no funcionar mais, pois os receptores citoslicos de
importao nuclear estaro ausentes.
B. Como anteriormente, o sinal de importao ao RE atuar antes que o sinal interno
de importao ao peroxissomo seja sintetizado. Logo, a protena entrar no RE e o
sinal de importao ao peroxissomo no poder funcionar.
C. Para que o sinal de reteno no RE pudesse atuar, a protena deveria possuir tam-
bm o sinal de importao ao RE. Portanto, seu destino ser a mitocndria.
D. Neste caso, a protena iria alternar entre o citosol e o ncleo, pois os sinais respon-
sveis no so excludentes.
12-9
A. As cabeas foram as nicas formas que no se acumularam no ncleo quando
injetadas no citoplasma, logo a poro da nucleoplasmina responsvel pela loca-
lizao no ncleo deve estar presente na cauda.
B. Os resultados a partir de nucleoplasmina completa ou de seus fragmentos con-
tendo a cauda no so suficientes para distinguir entre difuso passiva e trans-
porte ativo; eles apenas mostram que a cauda carrega uma poro importante da
nucleoplasmina, podendo ser um sinal de localizao ou um stio de ligao. J
os resultados com as cabeas de nucleoplasmina so mais determinantes e corro-
boram contra a possibilidade de difuso passiva. As cabeas no difundem para
o citoplasma quando injetadas no ncleo e vice-versa, sugerindo que so muito
grandes para passar pelos poros nucleares.
12-10 Aproximadamente uma histona deve ser transportada por cada poro nuclear a
cada segundo:
32.000.000
octmeros 8 histonas dia 1
n de molculas de histona 4
dia octmero 8,64 x 10 s 3.000 poros
0,99 histonas/segundo/poro
durante a fase S do ciclo celular que as histonas so sintetizadas e importadas ao
ncleo. Esta fase normalmente dura 8 h. Logo, a taxa de transporte fica a 3 histo-
nas por segundo e restrita fase S do ciclo celular.
12-11
A. Isso se deve ao fato de RanQ69L no ser capaz de hidrolisar GTP eficientemente.
Se fosse utilizado Ran-GTP, parte dele seria convertida em Ran-GDP, deixando os
resultados inconclusivos. Utilizando uma forma de Ran que no hidrolisa GTP,
pode-se assumir que a forma de Ran presente no ensaio ser Ran-GTP.
B. A protena candidata est entre as presentes na canaleta 1, entre 7 kD e 14 kD (ver
Figura Q12-3 (p. 747 da obra)), j que o fator de importao nuclear foi eludo a
partir da coluna de afinidade por Ran-GDP e no RanQ69L-GTP. Esta, por sua vez,
capturou um conjunto de protenas entre 97 kD e 116 kD que a coluna de Ran-
GDP no capturou. Trata-se de receptores de importao nuclear, os quais no
possuem envolvimento algum na internalizao de Ran-GDP no ncleo.
C. Outra protena qual o fator de importao de Ran-GDP liga-se a NTF2 (Fator
de transporte nuclear 2). Aps se ligar fortemente a Ran-GDP, a NTF2 se liga s
regies repetidas de FG (fenilalanina-glicina) das nucleoporinas do complexo
de poro nuclear. O complexo NTF2-Ran-GDP cursa a trilha de FG at entrar no
ncleo, onde Ran-GDP convertido em Ran-GTP por Ran-GEF. Assim, o com-
plexo se desfaz e NTF2 retorna ao citoplasma para trazer uma nova molcula de
Ran-GDP.
D. Poderiam ser utilizadas formas de NTF2 contendo mutaes em regies crticas
para sua interao com Ran-GDP. Se a protena portadora de uma substituio
de aminocido impedir a formao do complexo, ela no ser mais capaz de pro-
mover a captao de Ran-GDP para o ncleo, comprovando sua participao no
processo.
Referncia: Maarse AC, Blom J, Grivell LA e Meijer M (1992) MPI1, an essential CONFORMAO ORIGINAL
gene encoding a mithocondrial membrane protein, is possibly involved in protein
import into yeast mitochondria. EMBO J. 11, 3619-3628. COOH
1 3 5
12-13 Para que a DHFR possa entrar na mitocndria, ela precisa desdobrar-se. Ocorre Citosol
que o metotrexato se liga fortemente ao stio ativo da enzima, que impede a atua-
o de chaperonas e consequentemente qualquer modificao de conformao.
Lmen
Referncia: Eilers M e Schatz G (1986) Binding of specific ligand inhibits import do RE
2 4 6
of a purified precursor protein into mitochondria. Nature 322, 228-232.
NH2
12-14 Os poros formados pelas porinas permitem a passagem de todos os ons e inter-
medirios metablicos, porm seu tamanho no comporta protenas maiores que NOVA CONFORMAO
10 kD.
NH2
12-15 Nas clulas sem peroxissomos, a catalase est localizada no citosol, como mostra
a colorao uniformemente distribuda fora do ncleo (Figura Q12-4B, p. 747 da
obra). Nas clulas normais, a catalase aparece como pequenos pontos, justamen-
te por estar internalizada nos peroxissomos. COOH
1 3 5
Referncia: Kinoshita N, Ghaedi K, Shimozawa N, Wanders RJA, Matsuzono Citosol
Y, Imanaka T, Okumoto K, Suzuki Y, Kondo N e Fujiki Y (1998) Newly identified
Chinese hamster ovary cell mutants are defective in biogenesis of peroxisomal
membrane vesicles (peroxisome ghosts), representing a novel complementation Lmen
group in mammals. J. Biol. Chem. 273, 24122-24130. 2
do RE
4 6
12-16 Se o primeiro segmento hidrofbico transmembrana fosse convertido em um
Figura A12-1 Conformao da pro-
segmento hidroflico, o segmento N-terminal ficaria no citosol, pois o primeiro
tena de mltiplas passagens e da nova
segmento transmembrana que serviria de sinal de incio de transferncia estaria
protena resultante da transformao
ausente. No entanto, a eliminao desse sinal no afetaria a funo do segundo do seu primeiro segmento hidrofbico
sinal de transferncia, o qual iniciaria a transferncia dos segmentos C-terminais, em um segmento hidroflico (Resposta
mantendo-os na conformao original da protena (Figura A12-1). 12-16).
13-7 Assim que ocorre a fuso, os complexos trans-SNARE resultantes unem as duas
membranas, inativando as v-SNAREs e as t-SNAREs. Quando os complexos so
dissociados pela NSF, as v-SNAREs podem permanecer inativadas, ligando-se a
protenas inibidoras. possvel que o acmulo de v-SNAREs igual ou maior que a
populao de t-SNAREs nas membranas-alvo seja prevenido por vias de recupe-
rao de v-SNAREs que as retornam para a membrana doadora.
13-8 Como abordado na resposta Questo 13-1, as lminas citoslicas das duas bica-
madas so sempre as primeiras a entrar em contato e fusionar, e todas as SNAREs
Referncia: Meuse CW, Krueger S, Majkrezak CF, Dura JA, Fu J, Connor JT e Plant
AL (1998) Hybrid bilayer membranes in air and water: infrared spectroscopy and
neutron reflectivity studies. Biophys. J. 74, 1388-1398.
13-10 No experimento 1, a alta atividade de fosfatase alcalina foi gerada porque as ves-
culas de cada linhagem carregavam tanto v-SNAREs quanto t-SNAREs. No caso de
alguma das vesculas no possuir v-SNAREs ou t-SNAREs, a atividade reduz para
30-60%, como pode ser visto nos experimentos 3, 4, 6, 7, 8 e 9. Nos experimentos
2 e 5, nos quais ambas as vesculas no apresentam vSNAREs ou t-SNAREs, res-
pectivamente, a atividade da fosfatase to baixa quanto a detectada para uma
vescula que no possui as duas SNAREs (experimentos 10 e 11). Logo, na fuso de
vesculas vacuolares, no importante qual tipo de SNARE est em que vescula,
e sim que a vescula correspondente esteja portando uma SNARE complementar.
13-11 Sem o sinal de recuperao, a PDI seria enviada para fora da clula. Isso aconte-
ceria porque o fluxo de PDI do RE para o Golgi seria unicamente de ida devido
ausncia do sinal de recuperao e, a partir do Golgi, a PDI seria secretada assim
como o restante das protenas que no possuem sinal de localizao.
13-12 O receptor tem uma alta afinidade pela sequncia KDEL nos agrupamentos tu-
bulares das vesculas e do aparelho de Golgi, de forma que captura protenas resi-
dentes no RE que escaparam ou que estejam presentes em baixas concentraes,
e apresenta uma baixa afinidade pela sequncia KDEL no RE, para descarregar a
carga, apesar da altssima concentrao de protenas residentes do RE que contm
KDEL. Acredita-se que este controle de afinidade esteja relacionado s diferentes
condies inicas e de pH estabelecidas nos diferentes compartimentos.
Como mencionado anteriormente, o receptor de KDEL tem como principal
funo capturar protenas que escaparam do RE. Logo, o sistema ideal o que
concentra os receptores de KDEL no aparelho de Golgi. No seria esperado que o
receptor de KDEL apresentasse um sinal de recuperao para o RE, j que ele deve
ficar o maior tempo possvel no aparelho de Golgi. Porm, ele possui um sinal
condicional capaz de se ligar COPI e, assim, pode ser internalizado em vesculas
que tm o RE como destino.
13-13 Todas as enzimas hidrolticas dos lisossomos possuem atividade tima em con-
dies cidas (pH ~5). A membrana dos lisossomos normalmente mantm essas
enzimas destrutivas fora do citosol (cujo pH em torno de 7,2), mas sua depen-
dncia de um pH cido protege o contedo do citosol contra danos, mesmo que
ocorra um vazamento.
13-14 As protenas adaptadoras selecionam a carga a ser internalizada nas vesculas re-
vestidas por clatrina. Assim, fica claro que a perda de AP3 resulta em um defeito
na rede trans de Golgi. Logo, o transporte de pigmento do Golgi para os lisosso-
mos fica prejudicado, resultando no fentipo apresentado. Em humanos, acredi-
ta-se que a sndrome de Hermansky-Pudlak seja decorrente de uma deficincia
na produo de lisossomos especializados. Portadores dessa sndrome possuem
alterao de pigmentao similar do camundongo Mocha, com tendncia he-
morrgica e doena pulmonar.
Referncias: Kantheti P, Qiao X, Diaz ME, Peden AA, Meyer GE, Carskadon SI,
Kapfhamer D, Sufalko D, Robinson MS, Noebels JL e Burmeister M (1998) Muta-
tion in AP-3 delta in the mocha mouse links endosomal transport to storage defi-
ciency in platelets, melanosomes, and synaptic vesicles. Neuron 21, 111-122.
Zhen L, Jiang S, Feng L, Bright NA, Peden AA, Seymour AB, Novak EK, Elliot R,
Gorin MB, Robinson MS e Swank RT (1999) Abnormal expression and subcellular
distribution of subunits proteins of the AP-3 adaptor complex lead to platelet sto-
rage pool deficiency in the pearl mouse. Blood 94, 146-155.
13-15
A. Como as clulas Hurler suplementam a enzima que falta nas clulas Hunter e
vice-versa, pode-se concluir que os fatores corretivos so as prprias enzimas
lisossomais. Essas enzimas vo para o meio provavelmente porque escapam da
via lisossomal e so secretadas. Aps serem internalizadas pela clula, as enzimas
chegam aos lisossomos via endocitose mediada por receptor (M6P) e ali perma-
necem, pois o local de atuao dessas enzimas de degradao.
B. A protease degrada as enzimas diretamente. O periodato e a fosfatase alcalina ina-
tivam o receptor M6P, que crucial para a entrada das enzimas na clula.
C. Dificilmente um programa de compensao como esse funcionaria para enzimas
citoslicas. Mesmo que conseguissem atravessar a membrana, as protenas exter-
nas ficariam retidas em algum compartimento e, finalmente, seriam levadas aos
lisossomos para serem degradadas.
13-16 A membrana deve ser retornada a uma taxa de 100% a cada meia hora, pois o
macrfago mantm sua rea de membrana relativamente constante ao longo do
tempo.
13-17
A. Os formatos das curvas de HRP e EGF so diferentes porque s EGF se liga a um
receptor especfico para ser internalizado. O HRP entra por endocitose de fase
fluida. Assim, sua taxa de internalizao contnua e depende apenas da sua con-
centrao no meio. J a taxa de captao de EGF depende do nmero de recepto-
res presente nas clulas, sendo passvel de saturao.
B. Tem-se que a taxa de captao de EGF de 16 pmol/h na concentrao de 40 nM
e que HRP capturado a uma taxa de 2 pmol/h na concentrao de 40
M. Logo,
a taxa de captao de HRP na concentrao de 40 nM de 2 103 pmol/h, j que
ocorre uma diluio de 1.000 vezes. Comparando-se as duas taxas na concentra-
o de 40 nM, o EGF seria internalizado 8.000 vezes mais rpido do que o HRP
(16/2 103).
A 40
M, tanto EGF como HRP seriam captados por pinocitose a uma taxa de
2 pmol/h. A diferena que o EGF tambm seria internalizado por endocitose
mediada por receptor a uma taxa de 16 pmol/h, o que faria sua internalizao ser
9 vezes mais rpida do que a do HRP (216/2).
Volume 4r3
3
(4/3) 3,14 (2 10 cm)
-6 3
17
3,4 10 cm (mL)
3
Uma soluo de 40
M de HRP contm 2,4 1016 molculas HRP/mL:
6 10 molculas
17
40 mol HRP L
HRP
L 1.000 mL
mol
2,4 10 molculas/mL
16
O nmero de molculas de HRP por vescula dado por 2,4 1016 3,4 10-17
0,8.
D. Os cientistas quiseram enfatizar que, ao utilizar receptores especficos, a clula
consegue captar molculas do seu meio a taxas muito maiores do que por endoci-
tose de fase fluida. O receptor aumenta as chances de uma molcula ser internali-
zada, levando em considerao as baixas concentraes em que essas molculas
se encontram nos fluidos biolgicos.
H 8
3,16 10 mol H 6 10 H (4/3)(3,14)(0,5
m)
23 3
L
15
10
m
3
mitocndria L mol H mitocndria
9,9
Considerando que a matriz da mitocndria iniciou com pH 7 (10-7 M H), ela de-
veria conter aproximadamente 31 prtons (31,4), e teria de bombear para fora cer-
ca de 21 prtons para alcanar o pH 7,5.
14-6 Tem-se que cada par de eltrons reduz um tomo de oxignio. Logo, 12 pares re-
duziriam 6 tomos de oxignio e, consequentemente, 30 ATPs seriam gerados.
Como no estado estacionrio a taxa de produo de ATP igual de consumo, o
corao levaria 6 segundos para consumir uma quantidade de ATP igual aos seus
nveis de estado estacionrio:
Tempo 5
mol ATP 6 O2 min g 60 s
g 30 ATP 10
mol O2 min
6s
14-7 A ordem dos carreadores de eltrons na cadeia respiratria pode ser determinada
pela taxa de oxidao: quanto mais prximo o carreador estiver do oxignio, mais
rapidamente ele ser oxidado. Assim, teremos:
citocromo b citocromo c1 citocromo c citocromo (a a3) O2
14-8 O denitrofenol no mais prescrito pois seu uso levou vrias mortes. Esse desa-
coplador da fosforilao oxidativa reduz a eficincia da fosforilao oseidativa e
com isso no h ATP suficiente para suprir todas as funes celulares.
14-9
A. Considerando que a energia de um mol de ftons dada pela energia de um fton
vezes o nmero de Avogadro (N), a energia a 400 nm ser:
E Nhc/
6 10 ftons 1,58 10-37 kcal/s 3 1017 nm
23
1
mol fton s 400 nm
71 kcal/mol
Para os comprimentos de 680 nm e 800 nm, tem-se 42 kcal/mol e 36 kcal/mol,
respectivamente.
B. Levaria 140 segundos para que um mol de ftons atingisse um metro quadrado.
Considerando que um metro quadrado recebe 0,3 kcal de uma luz cujo compri-
mento de onda gera 42 kcal/mol, o clculo dado por:
s 42 kcal
Tempo
0,3 kcal mol
140 s/mol
C. Uma planta de tomate com uma folha de um metro quadrado de rea levaria me-
nos de duas horas para fazer um mol de glicose a partir de CO2:
140 s 8 moles de ftons 6 moles de CO2
Tempo
mol de ftons mol de CO2 mol de glicose
6.720 s (112 min)
Na realidade, a eficincia de captura de ftons pelas plantas est longe de ser
100%. Mesmo sob condies timas de luz solar, gua e temperatura, a eficincia
fica em torno de 5%. Na maioria dos casos, no chega a 1%, como o caso da be-
terraba, que fica em 0,02%.
D. A eficincia da converso de energia luminosa em energia qumica, aps a captu-
ra dos ftons nas condies dadas, de 33%.
mol de CO2 mol de ftons 112 kcal
Eficincia
8 moles de ftons 42 kcal mol de CO2
0,33 ou 33%
14-10 Como as duas plantas fixam CO2, a concentrao de CO2 na cmara diminuir. Em
termos de competio por CO2, o milho leva vantagem, pois sua enzima de fixao
de CO2 de alta afinidade. J a enzima do gernio-ribulose-bifosfato-carboxilase ,
alm de possuir uma afinidade mais baixa por CO2, ir capturar oxignio quando
o CO2 estiver em baixas concentraes. A consequncia dessa via (fotorrespira-
o) a liberao de CO2, sem a produo de estoques de energia til, o que
extremamente favorvel ao milho.
15-2 Falso. Na biologia sempre possvel encontrar excees. Apesar da maioria dos
segundos mensageiros, incluindo o AMP cclico, o Ca2+ e o IP3, ser solvel em gua
e difundir livremente pelo citosol, existem segundos mensageiros como o diacil-
glicerol que so solveis em lipdeos e difundem no nvel da membrana.
15-3 Falso. Assim como na questo anterior, na biologia existem regras gerais, mas no
necessariamente universais. Se podemos dizer que as protenas de ligao a GTP
esto uniformemente ativas quando esto ligadas a GTP e inativas quando esto
ligadas a GDP, de forma que GEFs ativam protenas ligadas a GTP e GAPs as ina-
tivam, o mesmo raciocnio no verdadeiro para protena-cinases e fosfatases.
Dependendo do stio de ligao de fosfato que est sendo usado, poder mesmo
ocorrer ativao ou inativao de uma dada protena. Alm disso, a ligao de um
fosfato pode ativar algumas protenas-alvo e inativar outras, ou seja, comutadores
moleculares acionados por protena-cinases podem responder tanto por ativao
quanto por inativao.
15-7 Falso. Plantas e animais lidam de forma diferente com as questes de sinalizao
clula-clula, apesar de existir uma certa sobreposio nas molculas de comuni-
cao. Algumas das famlias de receptores nucleares como Ras, JAK, STAT, TGF,
Notch, Wnt ou Hedgehog so exclusivas de animais, no estando presentes em
plantas.
15-9 A analogia dos diversos tipos de comunicao entre seres humanos e sinalizaes
celulares bastante esclarecedora.
A. Uma conversa telefnica uma comunicao entre duas pessoas que ocorre de
maneira privada e que pode envolver a troca de informaes a uma grande dis-
tncia. Assim, podemos considerar esta conversa como anloga sinalizao si-
nptica, apesar de a sinalizao sinptica ser unidirecional, enquanto uma con-
versa telefnica envolve um dilogo.
B. A conversa entre pessoas que esto presentes em um coquetel diferencia-se da
anterior no apenas por envolver um conjunto de indivduos, mas tambm por
estar restrita localmente, o que a coloca como anloga sinalizao parcrina.
C. Um anncio pelo rdio pode ser comparado a um sinal endcrino, pois enviado
para todo o organismo, mas recebido apenas pelas clulas-alvo que possuem
um receptor especfico. Em outras palavras, o sinal de rdio emitido e est dispo-
nvel para todos, mas apenas ser recebido pelos ouvintes sintonizados naquela
estao de rdio.
D. Finalmente, quando uma pessoa fala consigo mesma ela est fazendo algo seme-
lhante a um sinal autcrino, ou seja, ela simultaneamente quem envia e quem
recebe a mensagem.
15-11 Mesmo que se considere que a recepo do sinal em nvel da membrana celular
o evento primordial para que uma dada clula responda a um estmulo, a sinali-
zao completa depender do processamento deste sinal inicial pela maquinaria
intracelular. Desta forma, clulas com receptores idnticos, mas associados a dis-
tintas maquinarias ou cascatas internas de sinalizao, respondero de diferentes
formas a uma mesma molcula sinalizadora. Mesmo que as cascatas de sinaliza-
o disparadas sejam muito semelhantes, basta a ocorrncia de protenas efeto-
ras distintas no final das cascatas para que a resposta seja diferente. Alm disso,
fatores como a quantidade de receptores presentes na superfcie celular tambm
podem interferir na resposta celular a um dado ligante.
RESPOSTA GRADUAL celular. b) Se a efetora simultaneamente ativar uma enzima e inibir outra que ca-
talisa a reao reversa, a reao direta responder fortemente a um aumento gra-
dual da concentrao da efetora. Esta uma estratgia comum muito utilizada em
vias metablicas envolvidas na produo e no consumo de energia. c) Apesar de
RESPOSTA TUDO-OU-NADA as duas proposies anteriores serem capazes de gerar respostas abruptas, uma
resposta verdadeiramente do tipo tudo-ou-nada ocorrer se a molcula efetora
induzir uma retroalimentao positiva envolvendo uma molcula-alvo ativada,
o que contribuir para sua prpria ativao futura. Isso acontece, por exemplo,
100 quando o produto de uma enzima ativada liga-se enzima para ativ-la.
MAP-cinase ativa (%)
15-18 Para que a ativao de Ras dependa da inativao de uma GAP, tanto GAP quanto
GEF devem ser ativas na ausncia do sinal. Desta forma, a GEF ir constantemen-
te carregar Ras com GTP, e a GAP ir manter a concentrao de Ras-GTP baixa
via induo constante de hidrlise de GTP, para fazer com que Ras retorne a seu
estado ligado a GDP. Sob estas condies, a inativao de GAP resultaria em um
rpido aumento nos nveis de Ras-GTP, permitindo uma rpida sinalizao. Ape-
sar de ser efetivo em termos de regulao dos nveis de Ras ativo, este processo
tambm leva a um grande desperdcio de energia. Para manter Ras em seu estado
inativo, o GTP deve ser constantemente hidrolisado para GDP, o qual deve ento
ser reconvertido em GTP (por ATP) via energia desviada do metabolismo energ-
tico celular. A regulao via ativao de uma GEF evita este problema.
15-19 Uma hiptese de trabalho provvel e bastante simples consiste em postular que
clulas de Drosophila com gentipo heterozigoto Dsh/+ expressam apenas a me-
tade da quantidade normal de Dishevelled. Como as clulas com baixa expresso
(presumida) de Dishevelled apresentam um fentipo normal, pode-se imaginar
que Frizzled esteja antes de Dishevelled na cascata. Se Frizzled est sendo su-
perexpressa, mas Dishevelled atua como gargalo, ento o defeito corrigido. A
hiptese acima apoiada pelas funes conhecidas dos produtos dos genes em
questo: Frizzled um receptor Wnt e Dishevelled uma protena de sinalizao
intracelular. Optando por uma hiptese simples e apoiada pelo conhecimento da
funo dos produtos gnicos, se as funes de Dishevelled e Frizzled fossem des-
conhecidas e fssemos guiados apenas pelas interaes genticas, poderamos
imaginar relaes bem mais complexas nas quais Dishevelled atuaria na cascata
antes de Frizzled.
16-3 Falso. Apesar de estar parcialmente correta no que se refere entrada de Ca2+ atra-
vs de canais de Ca2+ sensveis voltagem nos tbulos T, a afirmao est incorreta
ao definir que este estmulo suficiente, per se, para gerar uma contrao muscu-
lar rpida. Para que essa contrao muscular rpida ocorra, e para que a contrao
seja organizada, a entrada inicial de Ca2+ deve atuar abrindo canais de liberao
de Ca2+ no retculo sarcoplasmtico. Estes canais de liberao de Ca2+ permitem
um rpido e organizado fluxo de Ca2+ no citoplasma, o que ento propiciar uma
contrao muscular rpida e coordenada atravs de sua ligao troponina C.
Referncia: Detrich WH, Parker SK, Williams RC, Nogales E e Downing KH (2000)
Cold adaptation of microtubule assembly and dynamics. J. Biol. Chem. 275, 37038-
37047.
16-7 As clulas devem manter um estoque de subunidades livres de actina para que
exista a possibilidade de um crescimento rpido em resposta a um estmulo es-
pecfico em um local determinado. Nas clulas, as subunidades de actina no se
encontram sob a forma de actina pura, mas, em grande parte, ligadas timosina.
A timosina atua bloqueando a actina sob uma forma que no pode hidrolisar o
ATP ligado, o que consequentemente a impede de ser adicionada s extremidades
de um filamento. A concentrao de subunidades livres de actina nas clulas
portanto, reduzida pela timosina e se aproxima da concentrao crtica. Para que
sejam incorporadas em um filamento, as subunidades de actina devem ser resga-
tadas deste pool inativo pela profilina. Como a atividade da profilina altamente
regulada, a polimerizao ocorrer tambm sob um controle severo.
16-8
A. A cinesina apresenta movimento unidirecional sobre um microtbulo. Este mo-
vimento unidirecional ditado pela ligao e pela hidrlise de ATP, etapas que
esto associadas a alteraes conformacionais na cabea de cinesina. Estas alte-
raes conformacionais so finamente coordenadas e resultam no deslocamento
dos domnios motores da cinesina sobre o microtbulo.
B. Os pequenos traos que, em conjunto, indicam a caminhada da cinesina refletem
os movimentos desta molcula sobre um microtbulo. possvel observar que
a cinesina locomoveu-se 80 nm em 9 s, o que resulta em uma velocidade mdia
de 9 nm/s. A velocidade in vivo da cinesina 100 vezes mais rpida. Nesse expe-
rimento, as condies de concentrao de ATP e a fora exercida pelo padro de
interferncia foram ajustadas para facilitar a observao dos passos individuais da
cinesina.
C. Contando os passos da molcula de cinesina na Figura Q 16-2 (p. 1.051 da obra),
chega-se a um total de 10 passos em um percurso de 80 nm de comprimento, o
que indica um comprimento mdio de cada passada individual de aproximada-
mente 8 nm.
D. Tanto o comprimento dos passos da cinesina, apresentado na resposta anterior
(letra C), quanto o intervalo entre as subunidades de cada -tubulina sobre um
protofilamento de microtbulo igual a 8 nm. Visto que a cinesina possui dois
domnios que podem se ligar -tubulina, pode-se imaginar um movimento
sequencial de cada domnio, ou seja, ela provavelmente mantm um dos dom-
nios ancorados e d uma passada com o outro domnio rumo ao prximo stio
de ligao da -tubulina. Assim, uma cinesina parece se mover saltando de uma
-tubulina para a prxima sobre o protofilamento, como se fosse uma pessoa que
atravessa um riacho sobre pedras.
E. No so fornecidos dados sobre o nmero de ATPs hidrolisados a cada passada.
Experimentos realizados pelos mesmos pesquisadores sugerem que a hidrlise
de um ATP no capaz de induzir vrios passos: uma menor concentrao de ATP
foi capaz de promover o mesmo padro de passos, mas estes foram realizados em
uma escala de tempo mais longa. Ou seja, se a hidrlise de um nico ATP pudesse
gerar vrios passos sob estas condies experimentais, deveriam ter sido obser-
vados agrupamentos de passos. Nenhum dos experimentos realizados conseguiu
eliminar a possibilidade de que a hidrlise de um ATP necessria para a realiza-
o de cada passo.
16-10 A Figura R16-2 ilustra como devem estar estendidos os sarcmeros em cada um
dos pontos indicados pelas setas da Questo 16-3. No segmento I, o aumento na
tenso associado diminuio no comprimento do sarcmero deve-se ao incre- III
mento no nmero de interaes entre as cabeas de miosina e a actina. No seg- 1,6
mento II, a actina comea a se sobrepor zona nua da miosina, gerando um plate-
au no qual o nmero de interaes com cabeas de miosina permanece constante.
No segmento III, os filamentos de actina comeam a se sobrepor, o que interfere
na interao tima entre actina e miosina e produz um relaxamento na tenso. IV
No segmento IV, o espaamento entre os discos Z menor do que o comprimento 1,3
dos filamentos espessos de miosina, fazendo com que eles se deformem. Isto gera
uma sbita queda na tenso muscular.
Referncia: Gordon AM, Huxley AF e Julian FJ (1966) The variation in isomet- Figura R16-2 Diagramas esquemticos
ric tension with sarcomere length in vertebrate muscle fibres. J. Physiol. 184, 170- de sarcmeros nos pontos indicados por
setas na Figura Q16-3 (Resposta 16-10).
192.
Os nmeros referem-se ao comprimento
em micrmetros.
17-3 Verdadeiro. A durao do ciclo celular deve, de fato, condizer com o tempo que a
clula leva para dobrar de tamanho. Se a durao do ciclo celular fosse diminuda
(ou aumentada) em relao ao tempo requerido pela clula em proliferao para
dobrar de tamanho, a clula se tornaria gradativamente menor (ou maior) a cada
ciclo de diviso, levando a problemas de multiplicao.
17-5 Falso. Se foras iguais e opostas puxassem os cromossomos em direo aos dois
polos opostos do fuso, eles no seriam posicionados na placa metafsica, mas sim
em locais aleatrios entre os polos. Acredita-se que trs foras principais sejam
importantes ao movimento dos cromossomos nos microtbulos do fuso mittico:
a fora em direo aos polos gerada pelo cinetocoro, a fora em direo aos polos
gerada pelo fluxo de microtbulos (em alguns tipos celulares) e a fora de ejeo
polar. Cada cromossomo submetido a uma fora em direo aos polos que
contrabalanada por uma fora de ejeo polar, isto , que afasta os cromossomos
do polo. Quando um cromossomo se aproxima do fuso, a fora de ejeo polar
aumenta de intensidade. Isso temporariamente diminui a fora em direo aos
polos, fazendo com que o cromossomo seja afastado do polo e posicionado exata-
mente no equador dos polos, dando origem placa metafsica.
17-7 Tal fato pode ser considerado notvel porque os genes e as protenas do ciclo ce-
lular, diferentemente das enzimas da maioria das reaes metablicas (que em
geral funcionam bem isoladamente, ou seja, na ausncia de outras protenas
essenciais sua atividade), devem necessariamente interagir com vrias outras
protenas. A formao de complexos proteicos entre os diferentes componentes
do ciclo celular uma caracterstica importante e crtica progresso do ciclo,
17-9
A. O ponto de execuo do mutante sensvel temperatura est indicado na Figura
R17-1. Quando a temperatura foi aumentada, as clulas que no haviam alcan-
ado o ponto de execuo no ciclo celular se multiplicaram e formaram brotos
grandes, mas no se dividiram. Paralelamente, as clulas que haviam ultrapas-
sado o ponto de execuo no ciclo celular se dividiram e ento interromperam
sua multiplicao, originando a morfologia-marco caracterstica do prximo ciclo
celular.
B. A morfologia-marco define o momento exato em que a clula pra sua progresso
ao longo do ciclo celular. No caso deste mutante sensvel temperatura, como in-
dicado na Figura R17-1, a morfologia-marco claramente distinta da morfologia
no ponto de execuo. Portanto, o ponto de execuo e o ponto de parada do ciclo
celular no so equivalentes no mutante que foi isolado.
17-10 Para que as clulas se dividam normalmente, as coesinas devem estar presentes
durante a fase S, pois a identificao das cromtides-irms pelos componentes da
maquinaria celular responsveis por sua unio somente pode ser realizada quan-
do o DNA est sendo replicado. Como as coesinas no apresentam especificidade
de ligao ao DNA, torna-se impossvel distinguir quais cromossomos so efeti-
vamente irmos aps a separao das cromtides-irms. Portanto, as cromtides-
irms devem ser mantidas unidas aps sua formao, a fim de que sejam correta-
mente segregadas s duas clulas-filhas durante a mitose.
ponto de
execuo
aumento do
tamanho do
broto com a
mudana de
temperatura
17-11 Isso possvel porque a maior parte das molculas de coesina liberada dos bra-
os cromossmicos no incio da mitose, quando, ento, as molculas de conden-
sina comeam a efetuar a condensao dos cromossomos. Assim, na ausncia de
uma grande quantidade de molculas de coesina, as condensinas compactam as
cromtides-irms como domnios separados, sendo que a pequena quantidade
de molculas de coesina restante suficiente para que as cromtides-irms se
mantenham unidas at o estgio de anfase.
17-12 Os mdicos ainda no emitiram alerta sobre o consumo excessivo de cafena por-
que a dose necessria para a interferncia no mecanismo do ponto de verificao
da replicao do DNA extremamente alta, muito maior que a quantidade ingeri-
da por pessoas que consomem muito caf (ou caf forte) e bebidas base de cola.
Considerando que uma xcara de caf tpica (150 mL) contm 100 mg de cafena
(196 g/mol), chegamos concluso de que a concentrao de cafena em uma
xcara de caf de cerca de 3,4 mM, estando, portanto, abaixo dos 10 mM necess-
rios para a interferncia no mecanismo do ponto de verificao da replicao do
DNA. Devemos levar em considerao, ainda, que a cafena ingerida ser diluda
no volume de gua (cerca de 40 L) presente no corpo de um adulto tpico. Assim,
supondo que a cafena ingerida no ser metabolizada ou excretada pelo orga-
nismo, seriam necessrias 784 xcaras de caf (contendo 100 mg de cafena cada
xcara) para que se alcanasse a concentrao de 10 mM.
17-13 A ordem : prfase (Figura Q17-3E), prometfase (Figura Q17-3D), metfase (Fi-
gura Q17-3C), anfase (Figura Q17-3A), telfase (Figura Q17-3F) e citocinese (Fi-
gura Q17-3B), ver p. 1.113 da obra.
17-14 Como existem 46 cromossomos na espcie humana e cada um possui dois cineto-
coros, existem, no total, 92 cinetocoros em uma clula humana em mitose.
17-15
A. Basicamente, os microtbulos do cinetocoro so estveis porque suas duas extre-
midades no so desagregadas, o que possvel pela ligao do centrossomo em
uma extremidade e do cinetocoro na outra.
B. A desagregao dos microtbulos astrais ocorre quando as molculas de tubu-
lina esto abaixo da concentrao celular mnima necessria montagem des-
sas estruturas, uma vez que a taxa de adio no equilibra a taxa de dissociao.
Desse modo, os microtbulos se tornam cada vez mais curtos. Devido presena
e estabilidade dos microtbulos do cinetocoro, o destacamento do centrossomo
e a desintegrao ao acaso dos microtbulos no so explicaes plausveis ao
desaparecimento dos microtbulos astrais aps a diluio.
C. O nmero e o comprimento dos microtbulos possibilitariam a identificao dos
provveis mecanismos de desaparecimento dos microtbulos astrais operantes
ao longo do tempo. Na hiptese de destacamento dos microtbulos, o nmero de
microtbulos por centrossomo diminuiria, mas seu comprimento permaneceria
igual. Na hiptese de despolimerizao dos microtbulos, o nmero de micro-
tbulos por centrossomo permaneceria constante, mas seu comprimento dimi-
nuiria uniformemente. Na hiptese de desintegrao aleatria dos microtbulos
(isto , ao longo de sua extenso), o nmero de microtbulos por centrossomo
permaneceria constante, mas seu comprimento seria varivel.
17-16 As duas mquinas citoesquelticas montadas nas clulas animais para a execu-
o dos processos de mitose e citocinese so o fuso mittico e o anel contrtil.
O fuso mittico responsvel pela segregao e distribuio dos cromossomos
s clulas-filhas durante a mitose, sendo composto de microtbulos e uma srie
de outras protenas, incluindo protenas motoras. O anel contrtil responsvel
18-3 A superexpresso da protena secretada que se liga ao ligante Fas poderia contri-
buir sobrevivncia dessas clulas tumorais protegendo-as contra o ataque de
linfcitos T citotxicos. No momento em que se liga ao ligante Fas presente na
superfcie dos linfcitos T citotxicos, a protena secretada impede o ligante Fas
de se ligar ao Fas presente na superfcie das clulas tumorais. Desta maneira, as
clulas tumorais estariam protegidas contra a atividade indutora de morte celular
dos linfcitos T citotxicos.
Referncia: Pitti RM, Marsters SA, Lawrence DA, Roy M, Kischkel FC, Dowd P,
Huang A, Donahue CJ, Sherwood SW, Baldwin DT, Godowski PJ, Wood WI, Gurney
AL, Hillan KJ, Cohen RL, Goddard AD, Botstein D e Ashkenazi A (1998) Genomic
amplification of a decoy receptor for Fas ligand in lung and colon cancer. Nature
396, 699-703.
18-7 As duas clulas na Figura Q18-2 (p. 1.129 da obra) liberaram a protena de fuso
citocromo c-GFP de suas mitocndrias dentro de alguns minutos: 6 minutos para
a clula na Figura Q18-2A e 8 minutos para a clula na Figura Q18-2B. O tem-
po aps a exposio luz UV em que a liberao ocorreu variou muito entre as
duas clulas, o que indica que as clulas individuais liberam citocromo c de suas
mitocndrias muito rapidamente, mas que a liberao acionada em diferentes
intervalos de tempo, sendo, portanto, dependente de cada clula.
Referncia: Goldstein JC, Waterhouse NJ, Juin P, Evan GI e Green DR (2000) The
coordinate release of cytochrome c during apoptosis is rapid, complete and kine-
tically invariant. Nat. Cell Biol. 2, 156-162.
19-4 Falso. A elastina composta principalmente por dois tipos de pequenos segmen-
tos que se alternam na cadeia polipeptdica: segmentos hidrofbicos (respons-
veis pelas propriedades elsticas da molcula) e segmentos de hlice ricos em
lisina e alanina (que formam ligaes cruzadas entre as molculas adjacentes). A
elasticidade da elastina essencialmente devida falta de estrutura secundria.
19-5 A citao de Warren Lewis est correta, pois as propriedades de adeso das clulas
(entre si e com a matriz extracelular) so fundamentais estruturao e manuten-
o dos diferentes tecidos do corpo. Contudo, deve-se ressaltar que uma grande
frao do corpo constituda de tecido conjuntivo (ossos e tendes) e, nesse caso,
a coeso e a integridade dependem primordialmente da qualidade da matriz ex-
tracelular, e no das clulas l presentes.
19-6 Os fragmentos Fab, derivados da digesto de anticorpos IgG com papana (que se-
para os dois stios de ligao do anticorpo), foram utilizados no bloqueio da agre-
gao celular porque os dois stios de ligao dos anticorpos IgG so idnticos.
Isso gera a possibilidade de ligaes cruzadas entre as molculas reconhecidas
por esses anticorpos. Assim, se os anticorpos intactos fossem utilizados no blo-
queio da agregao celular, poderiam ocorrer ligaes cruzadas entre as molcu-
las de superfcie das clulas em estudo, que no seriam adequadamente separa-
das (Figura R 19-1).
19-7
19-9 Tal afirmao remete atual percepo dos diversos papis desempenhados pela
lmina basal das fibras musculares, que no se restringem sustentao estrutu-
ral de clulas e tecidos. As clulas podem, de fato, deixar mensagens qumicas na
lmina basal, as quais dirigem a diferenciao e a funo das clulas subjacentes,
como no caso da regenerao de msculos e neurnios motores. Molculas es-
pecficas contidas na lmina basal, por exemplo, definem o local exato da juno
neuromuscular e orientam sua reconstituio, o que tambm pode ocorrer e ser
importante durante o desenvolvimento embrionrio e fetal do organismo.
19-10 Como a substituio de uma alanina por D723 na cadeia e por R995 na cadeia
levou a altos nveis de ativao espontnea da integrina IIb3, isso sugere que
19-11 A resina incha devido a efeitos osmticos. Como o polmero negativamente car-
regado, ele aprisiona um nmero equivalente de ctions (presentes no gel ainda
seco) para manter a neutralidade eltrica. Devido a foras eletrostticas, essas car-
gas (negativas e positivas) esto confinadas ao volume ocupado pelo polmero. A
Sephadex incha rapidamente quando em contato com a gua porque a concen-
trao de partculas no volume do gel maior que na gua, o que faz com que a
gua, para equilibrar as concentraes dentro e fora das unidades da estrutura,
flua para dentro do gel. O efeito osmtico contrrio ocorre quando o tampo con-
tendo 50 mM de NaCl adicionado ao gel inchado: a concentrao de partculas
muito maior na soluo salina que no gel inchado, o que faz com que a gua, para
equilibrar a concentrao de ons, flua para fora do gel.
19-12 A maioria das protenas do organismo possui nveis baixos de d-aspartato em sua
composio, pois o processo de racemizao de l-aspartato a d-aspartato ocorre
lentamente. Assim, as protenas que possuem uma meia-vida curta (com um tem-
po de reciclagem rpido) apresentam nveis baixos de d-aspartato em sua compo-
sio, ao passo que as protenas que possuem uma meia-vida mais longa (com um
tempo de reciclagem lento) apresentam nveis mais altos de d-aspartato em sua
composio. O fato de a elastina possuir nveis relativamente altos de d-aspartato
(e que aumentam com o passar do tempo) sugere que essa protena sintetizada
muito cedo durante o desenvolvimento do organismo e degradada muito lenta-
mente. Isso foi comprovado em seres humanos que incorporaram o radioistopo
14
C em suas molculas de elastina devido contaminao ambiental gerada em
testes com armas nucleares.
Referncia: Shapiro SD, Endicott SK, Province MA, Pierce JA e Campbell EJ (1991)
Marked longevity of human lung parenchymal elastic fibers deduced from preva-
lence of d-aspartate and nuclear weapons-related radiocarbon. J. Clin. Invest. 87,
1828-1834.
19-13 A melhor opo simplesmente deixar a alface murcha de molho em gua pura:
devido osmose, a alface absorver gua e ficar mais fresca. Se a alface murcha
for deixada de molho em gua salgada ou gua com acar, o efeito osmtico con-
trrio ocorrer e ela ficar mais flcida, pois mais gua ser retirada dela. A luz
clara e intensa tambm no ajudar a melhorar o aspecto da alface murcha, uma
vez que a fotossntese no est mais ativa aps um certo perodo de tempo. Assim,
com a luz, a alface ficar ressecada.
Referncia: Tyerman SD, Bohnert HJ, Maurel C, Steudle S e Smith JAC (1999)
Plant aquaporins: their molecular biology, biophysics and significance for plant
water relations. J. Exp. Bot. 50, 1055-1071.
20-3 Falso. Existem poucas evidncias que sustentam tal afirmao, com exceo de
casos bastante especficos, como 2-naftilamina e asbestos.
20-4 Falso. O DMBA no um agente mutagnico especfico, uma vez que ocasiona
mutaes em todo o genoma do organismo. Como o gene Ras ativado sua ver-
so cancergena por uma alterao especfica de A para T, levando a uma altera-
o especfica de aminocido, somente aquelas mutaes induzidas pelo DMBA
nesse stio do gene Ras daro origem a clulas cancerosas.
Referncia: Knudson AG (2001) Two genetic hits (more or less) to cancer. Nat.
Rev. Cancer 1, 157-162.
20-7 Em mulheres com mais de 50 anos, as taxas de morte por cncer de mama e cr-
vice se reduzem devido menopausa, quando a produo de hormnios (prin-
cipalmente estrognio) diminui. O estrognio promove a proliferao de clulas
nos seios e no tero. Portanto, com a diminuio da produo de estrognio, a
populao de clulas em proliferao nesses rgos tambm diminui, o que reduz
o risco de desenvolvimento de cncer.
Referncia: Armitage R e Doll R (1954) The age distribution of cancer and a multi-
stage theory of carcinogenesis. Br. J. Cancer 8, 1-12. Reimpresso em (2004) Br. J.
Cancer 91, 1983-1989.
20-8 Os oncogenes equivalem a aceleradores estragados, uma vez que, em sua forma
mutada, induzem a proliferao celular anormal, no respondendo aos controles
normais de multiplicao. Os genes supressores de tumor equivalem a freios que-
brados, pois normalmente funcionam inibindo etapas das vias de sinalizao que
regulam o crescimento e a proliferao celular. Sem a ao inibidora dos genes
supressores de tumor, as vias de sinalizao perdem o controle. Os genes de ma-
nuteno do DNA equivalem a maus mecnicos. Como esses genes so respon-
sveis pela manuteno adequada dos cromossomos no genoma (durante sua
replicao e em resposta a danos causados ao DNA), haver, se forem mutados,
um aumento do nmero de mutaes genticas deletrias, o que pode levar a al-
teraes nos proto-oncogenes e genes supressores de tumor.
20-9 A base biolgica dos dados observados est relacionada noo de que o desen-
volvimento do cncer pode ser encarado como um processo microevolutivo no
qual o acmulo crescente de mutaes em determinados genes leva perda dos
controles que regulam o crescimento e a multiplicao celular. No caso dos ho-
mens que continuaram a fumar aps os 50 anos, o risco de acmulo dessas muta-
es aumentado devido contnua exposio aos efeitos txicos das substncias
presentes no cigarro. O contrrio ocorre naqueles que pararam de fumar aos 30
anos, nos quais a taxa de acmulo de mutaes bastante diminuda e compar-
vel de pessoas que nunca fumaram, reduzindo, assim, o risco de ocorrncia de
neoplasias.
20-11
A. Neste estudo, seis filtros de seleo foram aplicados para eliminar as alteraes de
sequncias que aparentemente no contribuem para o tumor.
1. Filtros para mutaes silenciosas que geram cdons sinnimos (eliminao
de 163.006 alteraes).
2. Filtros para alteraes tambm presentes no DNA dos indivduos normais (eli-
minao de 163.006 alteraes).
3. Filtros para alteraes que correspondem a polimorfismos conhecidos (elimi-
nao de 11.004 alteraes).
4. Filtros para alteraes de sequncias que no podem ser confirmados aps
reamplificao e novo sequenciamento (eliminao de 9.295 alteraes).
5. Filtros para alteraes que tambm esto presentes nos tecidos normais do
mesmo indivduo com tumor (eliminao de 4 alteraes).
Referncia: Warrell RP Jr, de The H, Wang Z-Y e Degos L (1993) Acute promye-
locytic leukemia. N. Engl. J. Med. 329, 177-189.
20-13 Nesse caso, os produtos dos oncogenes so os nicos alvos moleculares possveis
para essas pequenas molculas. Como o produto de um oncogene exibe um fen-
tipo dominante, que promove o crescimento e a proliferao celular, sua inibio
pode fazer com que a clula cancerosa retorne a um estado mais normal de ativi-
dade. J os produtos dos genes supressores de tumor e dos genes de manuteno
do DNA no so alvos moleculares viveis busca e ao desenvolvimento de dro-
gas anticancergenas, pois essas classes de genes causam cncer pela ausncia de
produo de suas respectivas protenas inibidoras.