Facultad de Qumica. UNAM Alejandro Baeza .

2006
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Qumica Analtica Instrumental I

Anlisis de mezclas por espectrofotometra.
Documento de apoyo.
Dr. Alejandro Baeza. Semestre 2007-I

1.0 Selectividad espectral en espectrofotometra electrnica.

La interaccin de la energa radiante en el intervalo del UV y VIS del espectro

electromagntico con las molculas se verifica a nivel de capas externas de electrones.
Toda vez que cada molcula tiene su propia configuracin electrnica, el patrn de
respuesta absorcin en funcin de la longitud de onda, pT=A=f( ), conocido como
espectro de absorcin o espectro electrnico, tiene un perfil diferente dependiendo de
cada especie absorbente.

Si se toma en cuenta que la Ley de Lambert-Beer-Bouger, como toda ley lmite, es

aditiva:
n
pT = A = i l [i ]
i =0

la medicin del pT o absorbancia, A, puede usarse para determinar la concentracin de

uno o ms analitos en una mezcla sin necesidad de operaciones analticas de separacin
previas si sendos espectros de absorcin son suficientemente diferentes. A modo de
ejemplo se presentan dos casos en el tratamiento de datos para determinar
espectrofotomtricamente la concentracin de dos analitos en una mezcla:

a) Los espectros estn poco resueltos (muy cercanos):

Se tienen dos compuestos de concentracin C1 y C2 cuyos espectros de

absorcin son muy sercano y por tanto los valores de longitud de onda de mxima
absorcin, 1 y 2, tambin son muy cercanos:

pT= A

C1

C2

C1+C2

1 2

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Para determinar las concentraciones C1 y C2 se opera de la siguiente manera:

1) Se prepara una disolucin del estndar 1 de concentracin C1 y se

determina su pT = A a diferentes valores de longitud de onda, :
A1 = 1lC1 (1)

2) Se prepara una disolucin de estndar 2 de concentracin C2 y se determina

su pT = A a diferentes valores de longitud de onda, :
A2 = 2lC2 (2)

3) Se determina el pT = Am a diferentes valores de longitud de onda, :

Am = 1lC1x + 2lC2 x (3)

De las ecuaciones (1) y (2) se despejan los valores de 1 y 2 y se sustituye en (3)

considerando l=1 y se divide entre A1:

A1
1 =
C1
A2
2 =
C2

Am C1x A2 C2 x
= +
A1 C1 A1 C2

Con los diferentes valores de A1, A2 y Am determinado a los diferentes valores de , se

elabora el grfico:
Am A
= f 2
A1 A1

Se obtiene una grfica con las siguientes caractersticas:

Am

A1
C2 x
m=
C2
C1x
C1

A2

A1

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a) Los espectros estn resueltos (muy separados):

Se tienen dos compuestos de concentracin C1 y C2 cuyos espectros de absorcin

son muy cercano y por tanto los valores de longitud de onda de mxima absorcin, 1 y
2, tambin estn bien separados:

pT= A

C1

C2

1 2

Para determinar las concentraciones C1 y C2 se opera de la siguiente manera:

1) Se prepara una disolucin estndar de concentracin C1, se determina su

pT=A1 en una celda de l = 1 a la longitud de onda de su mxima absorcin, 1 y a la
longitud de onda de mxima absorcin de C2. Se calculan los valores de su absortividad
molar 1 a estas dos longitudes de onda:

A11
1 =
1
C1
A1 2
1 =
2
C1

2) Se prepara una disolucin estndar de concentracin C2, se determina su

pT=A2 en una celda de l = 1 a la longitud de onda de su mxima absorcin, 2 y a la
longitud de onda de mxima absorcin de C1. Se calculan los valores de su absortividad
molar 2 a estas dos longitudes de onda:

A2 2
2 =
2
C2
A 2 1
2 =
1
C2

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3) Se determina el valor de la absorbancia de la mezcla, pT=Am, a las dos
longitudes de onda de mxima absorcin:

Am1 = 11 C x1 + 2 1 C x 2

Am2 = 12 C x1 + 2 C x 2

Toda vez que se conocen sendos valores de 1 y 2 a los dos valores de 1 y 2,

puede entonces resolverse el sistema de dos ecuaciones simultneas para calcular los
valores de las concentraciones desconocidas del componente 1, Cx1 y del componente 2,
Cx2.

Observaciones:

Los mtodos anteriores son muy generales y se aplican con seguridad hasta 3 o 4
componentes. En otros casos es necesario investigar otras estrategias para procesar los
datos de absorbancia o bien combinar estos mtodos de selectividad espectral con
mtodos de selectividad qumica.

2.0 Selectividad espectral y qumica en espectrofotometra electrnica.

Para ilustrar la relacin entre el pT o absorbancia y las reacciones en solucin se

aplica la Ley de Lambert-Beer-Bouger a un cido del tipo HA/A- de pKa = 5 y diferentes
concentraciones, fCo, en el intervalo [0.1Co -10Co]. Se considera que a la longitud de
onda de trabajo HA = 1000 mo-1lLcm-1 y A = 0. Se calcula el pT=A en una celda de l = 1
cm en diferentes medios de reaccin: a) agua pura; b) pH = pKa-1; c) pH = pKa;
d) pH = pKa +1

En agua pura el pT = A esta determinada por la libre disociacin del cido bajo los
trminos de la Ley de Oswald:

pT =A = HAl [HA] Ka 2
=
pT = A = HAl[ fCo(1 )] fCo 1

En medio amortiguado el pT = A esta dado por:

pT = A = il iCo

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Las figuras siguientes muestran las grficas obtenidas:

influencia del pH(pKa=5) influencia del pH (acercamiento)

pT=A pT=A

0.100 0.040

0.090
0.035

0.080
0.030
0.070

0.025
0.060

0.050 0.020

0.040
0.015

0.030
0.010
0.020
0.005
0.010

0.000 0.000
0 0.00002 0.00004 0.00006 0.00008 0.0001 0 0.00001 0.00002 0.00003 0.00004
fCo fCo (Co = 0.1 m M)
(Co=0.1mM)
(pH libre) pH=pKa+1 pH=pKA pH=pKa-1 (pH libre) pH=pKa+1 pH=pKA pH=pKa-1

Para ilustrar la utilidad de controlar el medio de reaccin con amortiguadores se

presente un caso hipottico de dos acidos HA y HL de valores HA = HL de
concentraciones CHA = Co = 1mM y CHL = 0.1Co y de pKaHA = 5 y pKaHL = 9.

El pT = A esta dado por la siguiente expresin general a pH controlado:

pT = A = il [i ]
pT = A = il iCo
Co
pT = A = il
i(H )

Co
pT = A =
Kai
1 + H +
[ ]

1
Ka
pT = A = Ao 1 + +i
H [ ]

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Puede representarse de manera logartmica para facilitar el diseo del pH del
medio para la determinacin de CHA y CHL en la mezcla:

Ka
log A = log Ao log 1 + +i
H [ ]
La siguiente figura muestra la variacin de log A = f(pH) para HA y HL:

log Ao = f(pH)
pH
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

-1
log A

-2

-3

HA HL log (H) log (OH)

Se corrobora que:

lim A = Ao
i 1
Se determina el pT = A de la mezcla a pH = 2 y despus repetir la determinacin a
pT = A a pH = 7 y deducir por diferencia.

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