Prctica no. 4: Determinacin de Protenas.

Objetivo: Mediante una reaccin qumica se identificara la presencia de protenas en alimentos. Adems se
reforzara el conocimiento de la estructura de las protenas y del enlace peptdico.

Fundamento Terico:

Determinacin de Protenas por el mtodo de biuret.

La reaccin de biuret es un mtodo general para la determinacin de protenas o pptidos. Se basa en la reaccin
del sulfato de cobre con compuestos que tengan dos o ms enlaces peptdicos, en un medio alcalino. El producto
es un complejo color violeta, cuya intensidad de color depende de la cantidad de enlaces peptdicos presentes. Los
dipptidos y los aminocidos dan esta prueba negativa.

Material
Clara de huevo
Leche
gelatina
Agua destilada o natural.
Solucin de Hidrxido de Sodio al 10%
Solucin de sulfato de cobre al 0.5%
Tubo de ensayo con taparrosca o tubos
falcon.
Gradilla para tubos de ensayo
Pipetas desechables de 5ml
Solucin de Sulfato de cobre al 0.5%
Solucin de Hidrxido de sodio al 10%
Procedimiento:

1. Preparen las soluciones de sulfato de cobre al 0.5% y la de Hidroxido de Sodio al 10%

2. En un tubo de ensayo, mezcle 0.5 ml de clara de huevo con 3 ml de agua natural, y agrega 4 ml de la
solucin de hidrxido de sodio al 10%. Tapa el tubo y mezcla.
3. Agrega gota por gota y mezclando la solucin de sulfato de cobre al 0.5%.
4. Observa y anota.
5. Repite los pasos 2, 3 y 4 con la leche y la gelatina.

Resultados:

En el siguiente cuadro especifique la intensidad de la coloracin, la cual es proporcional a la presencia de protena.

Utilice 1, 2. o 3 cruces: la mayor intensidad le asignan 3 cruces (+++).

INTENSIDAD DE LA COLORACION DEL ALIMENTO AL APLICAR LA PRUEBA DE BIURET

Alimento Presencia de Protena (coloracin)
Clara de huevo
Leche
Gelatina

Investiga y responde brevemente las siguientes preguntas:

1. Por qu la prueba de biuret es negativa para dipptidos, si estos contienen enlaces peptdicos?
2. Cules protenas o pptidos estn presentes en la clara de huevo y en la leche?

Conclusiones:
Referencias:
Silvia Quesada Mora. Manual de experimentos de laboratorio para bioqumica, paginas 31-33. Editorial
Universidad Estatal a distancia. Primera Edicin. San Jos, Costa Rica, 2007.
Ruth P. Bolton, Elizabeth V. Lamphere, Mario Menesini, Paul C. Huang. Laboratory Experiments in Action
Chemistry. Holt Rinehart and Winston, Inc.

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