Universidad Tecnolgica de Panam

Facultad de Ciencias y Tecnologa

Ingeniera en Alimentos

Estudiantes:
Katherine Vzquez 8-937-508
Issamar Valderrama 8-951-435
Julissa Gonzlez 4-766-1455
Astrith Prado 8-938-1649

Microbiologa General

Prof. Damarys Corts

Informe de Laboratorio #2
Uso y conservacin del microscopio

1LI-111

Martes 12 de Septiembre de 2017

2017
 INTRODUCCIN
La microscopa es el conjunto de mtodos para visualizar objetos pequeos, es decir los que estn fuera de la
vista normal. La microscopa generalmente implica la difraccin, reflexin o refraccin de algn tipo de
radiacin incidente en el sujeto de estudio.
El microscopio es el instrumento de microbiologa ms importante, ya que el estudio de la microbiologa
requiere de algunos conocimientos sobre cmo funcionan los microscopios y ciertas nociones de microscopa.
La funcin importante del microscopio es aumentar la imagen de los objetos y as nos permite visualizar las
estructuras internas de clulas, tejidos y organismos, esto es mediante los objetivos. Los tipos de objetivos ms
conocidos son: 4x, 10x, 40x. 100x

Hay dos parmetros que son especialmente importantes en microscopa: el aumento y la resolucin.
El aumento es una medida de qu tan grande puede un microscopio (o el conjunto de lentes en un
microscopio) hacer que parezca un objeto. El aumento total de un microscopio se calcula multiplicando los
aumentos los aumentos de los objetivos y del ocular.

La resolucin de un microscopio o lente es la distancia ms corta a la que dos puntos pueden estar separados y
distinguirse como objetos separados. Mientras menor sea este valor, mayor ser el poder de resolucin del
microscopio y mejor la nitidez y el detalle de la imagen. Si dos clulas bacterianas estuvieran muy juntas una
de otra en una lmina, podran verse como un solo punto borroso en un microscopio de poca resolucin, pero
se veran como entidades separadas en uno de alta resolucin.
Tanto el aumento como la resolucin son importantes si quieres obtener una imagen ntida de algo muy
pequeo.
Un poco de historia
Antonie van Leeuwenhoek (1632-1723), un holands vendedor de telas, aficionado a pulir lentes, logr
fabricar lentes lo suficientemente poderosas como para observar bacterias, hongos y protozoos, a los que
llam "animlculos".
El primer microscopio compuesto fue desarrollado por Zacharias Janssen. A partir de ste, los avances
tecnolgicos permitieron llegar a los modernos microscopios de nuestro tiempo, los que existen de varios tipos
y son usados con diferentes fines.
Los microscopios se dividen en dos clases
1. Los pticos: campo claro, campo oscuro, contraste de fase, fluorescencia.
2. Los electrnicos: electrnico de barrido y de transmisin.

la microscopia es aplicada en mltiples formas en la ciencia de los alimentos, ya que atreves del conocimiento
de sus tcnicas, se pueden identificar tanto a los microorganismos benficos como a los microorganismos
patgenos del hombre
 OBJETIVOS
Objetivo general:
1. comprender la importancia de la microscopia y el microscopio en la ingeniera en alimentos y tambin
en las diversas ramas de la ciencia.
Objetivos especficos:
1. identificar las partes en que se compone el microscopio de luz
2. conocer las funciones de cada una de las partes del microscopio y su importancia
3. indicar los pasos a seguir para obtener un buen enfoque en el microscopio de luz.
4. Determinar el tamao del campo visual del microscopio.
5. Das a conocer las unidades de medidas de mayos uso en micrometra.
6. Reconocer la importancia del microscopio en el desarrollo de las ciencias biolgicas.
7. Comprender los cuidados que se deben tener al usar el microscopio.
 MATERIALES
EQUIPO:
1. Microscopio
2. Portaobjetos
3. Cubreobjetos
4. gotero
MUESTRAS:
1. Agua estancada
2. Pan con moho blanco
3. Keke con moho verde
4. Semillas de lechuga
PROCEDIMIENTO
Uso del microscopio

Conectar y encender el microscopio

Introducir la muestra

Colocar objetivo que se utilizar

Encender la luz y regular con el diafragma

Desplazar con el carro mecnico

NO
Se ve de forma clara
Anotar resultados
la muestra

SI

Enfocar con los tornillos macromtrico y micromtrico.

Revisar la muestra y anotar resultados

 Preparacin de la muestra

Verificacin de la muestra al microscopio

La muestra est
correctamente
NOO
preparada?

Capturar la imagen

Procesamiento de la imagen

Anotar resultados

Obtencin de resultados

Anlisis de resultados
 PARTES DEL MICROSCOPIO

tornillo macromtrico tornillo micromtrico

Carro mecnico
condensador diafragma
platina
Columna o brazo

revolver oculareas
tubo

base
Lmpara Objetivos

Cuidados del microscopio

transporte iluminacin

si tiene: no es
sujetarlo por el
necesario ajustar
brazo
la fuente de luz

posicin vertical
si no tiene: se
para que no se
debe ajustar la
caigan los
fuente de luz
oculares
 RESULTADOS
OBJETIVO OBSERVACIN MUESTRA

Con este objetivo, tuvimos la

4x oportunidad de apreciar
simples puntos, que eran
microorganismos.

Con este objetivo, la muestra

se poda ver ms clara pero
para apreciar an
10x necesitbamos ms
acercamiento.

Con este objetivo, pudimos

100x apreciar con muchsima ms
precisin los residuos y
microorganismos presentes
en la muestra.
 Muestra del pan moho muestra de la semilla de lechuga

ANLISIS DE RESULTADOS
A. Partes del Microscopio. Se realiza el reconocimiento visual y funcionamiento de las partes de los diferentes
microscopios presentes en el Laboratorio de Microbiologa.
Tabla No. 1. Partes del Microscopio
Tipo de Partes Parte Funcionamiento
Base Punto de apoyo del microscopio.
Brazo Sostiene el tubo y sirve para transporte.
Revlver Sistema giratorio que contiene los objetivos.
Sistema Tornillo Proporciona claridad a la imagen, ajuste fino.
Mecnico Micromtrico
Tornillo Enfoque o ajuste grueso.
Macromtrico
Platina Plataforma para la muestra
Carro mecnico Desplaza del portaobjeto.
Ocular Aumenta la imagen formada por los objetivos.
Objetivos Lentes convergentes aumentadores de la
Sistema ptico imagen.
Condensador Lentes convergentes concentradores de la luz.
Diafragma Regula la cantidad de luz.
Iluminacin Proporciona intensidad de luz.
Tubo Sostiene el revlver y los objetivos.
Se realiz adicional, un taller de reconocimiento de las partes mediante el dibujo e interpretacin de lo
aprendido.

B. Cuidado de Microscopio.
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicin de observacin,
asegurarse de que la parte mecnica de la platina no sobresale del borde de la misma.
2. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se
ensucien y daen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en lugar dentro de un
armario para protegerlo del polvo.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de
ptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto
sobre la platina si no se est
utilizando el microscopio.
5. Despus de utilizar el objetivo de
inmersin, hay que limpiar el aceite
que queda en el objetivo con
pauelos especiales para
ptica o con papel de ptica. En
cualquier caso, se pasar el papel
por la lente en un solo sentido y
con suavidad. Si el aceite ha llegado a
secarse y pegarse en el
objetivo, hay que limpiarlo con
xilol. No hay que abusar de este tipo
de limpieza, porque si se aplican
estos disolventes en exceso se pueden
daar las lentes y su sujecin.
6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (Macromtrico, micromtrico, platina, revlver y
condensador).
7. El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la preparacin para
prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni
hacerlo mientras se est observando a travs del ocular.
8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn lquido, secarlo con un
pao.
9. Guarde el microscopio en el objetivo de baja potencia en el punto ms alejado de la platina y sin que los
bordes de esta sobresalgan.

C. Uso del microscopio.

Una vez identificadas las partes, se prosigui a colocar muestras previamente preparadas para su observacin
en el microscopio; para esto se tuvo que enfocar primero las imgenes en el microscopio, iniciando por el
menor aumento (en este caso los aumentos eran de 5x o 4x, 10x, 40x y 100x) y hacia el objetivo con mayor
aumento. Se observaron las muestras y se fotografiaron.

Tabla No. 2. Identificacin de Muestras

Muestras
1. Agua de una fuente natural Pocas estructuras
2. Moho del pan
3. Moho de panecillo de coco
4. Semillas de lechuga
Resultados Observaciones
No haba muchos microorganismos. Se
observ la presencia de estructuras
diminutas posiblemente vegetales. Esto
se debe a que el agua de la muestra era
de una corriente de agua que estaba
clara.
No identificado No identificado
Moho Unas pocas estructuras, identificadas
como moho del pan, Rhizopus nigricans.
Color mbar y blanco, formadas por
telaraas del microorganismo.
Pared y cispela Se observa la pared de la semilla y su
tamao proporcional al aumento.

Tabla No.3. Ilustraciones comparativas de las muestras

Muestra observada en el laboratorio Comparacin de referencia

1.Agua de una fuente natural

 2.Moho del pan No identificado

3. Moho de panecillo de coco

4. Semillas de Lechuga

CONCLUSIN
El microscopio de luz se compone de diversas partes cada una con una funcin especfica para lograr el buen
funcionamiento del mismo. Cada una de las partes va conectadas entre s creando una sola pieza de uso
necesario en cada laboratorio de distintas especialidades como lo es el de alimentos, en medicina para la
neurociencia y los diagnsticos de nuevas enfermedades, para visualizar muestras transparentes y las partes
internas de las clulas; entro otras funciones de cada microscopio.
Siendo el microscopio un artefacto tan valioso y compuesto de muchas piezas hay que tener un cuidado
especial para mantenerlo en aptas condiciones, esto se logra guardndolo como se debe, limpiando sus
objetivos y lentes luego de utilizarlo; apagando la lmpara y luego se desconecta el microscopio.
Para lograr un buen enfoque de las muestras en un microscopio hay que acercar la platina a los objetivos
(dependiendo que tamao es) esto se logra con el movimiento del carro mecnico. Adems se necesita el
enfoque con los tornillos macromtrico y micromtricos

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. http://hnncbiol.blogspot.com/2008/01/microscopia_22.html
2. https://es.khanacademy.org/science/biology/structure-of-a-cell/introduction-to-
cells/a/microscopy
3. http://www.etpcba.com.ar/DocumentosDconsulta/OPTICA/optica/Historia%20de%20la
%20Microscopia.pdf
4. https://microinmuno.files.wordpress.com/2012/01/prc3a1ctica-02-microbiologc3ada.pdf
5.
6. http://members.tripod.com/biol_uprponce/images/pdfs/ag04/Lab_02_3013_Microscopio_bs.p
df
 7.
8. http://biblioteca.duoc.cl/bdigital/Documentos_Digitales/600/610/39594.pdf
9.
10. https://es.scribd.com/doc/14173110/2-Manejo-y-Cuidado-Del-Microscopio
11.
12. http://www.biologia.edu.ar/botanica/tema24/24-5semilla.htm
13.
14. http://eduysergiointhecraneobiology.blogspot.com/2013/10/observacion-moho-del-pan.html

ANEXOS
Tipos de microscopio:
MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO
En este microscopio toda la luz desde el espcimen y sus alrededores es colectada por el objetivo para formar
una imagen contra un fondo brillante.
Funcionamiento: Un condensador proyecta un cono de luz sobre las clulas, cuando atraviesa las
clulas el haz luminoso en forma de cono, penetra el objetivo, este proyecta una imagen aumentada en
el plano focal del ocular amplindola nuevamente.
El campo claro es la forma ms simple de microscopa donde la luz pasa a travs de o reflejada del
espcimen. La iluminacin no se altera por aditamentos que cambien las propiedades de la luz (como
polarizadores o filtros).

Usos: Muestras fijadas y teidas, anlisis de tejidos y patologa, investigaciones, cursos bsicos de
microbiologa.
 MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO
Funcionamiento: El microscopio de campo oscuro es una modificacin al sistema de campo claro, que
consiste en bloquear los rayos centrales que alcanzan al condensador, por medio de un disco o algn
otro tipo de dispositivo, de manera tal que el cono iluminador es un cono hueco de luz, con mayor
apertura numrica que la del objetivo.
Usos:
Observar materiales en suspensin, permitiendo detectar con gran facilidad
partculas slidas con ndices de
refraccin muy cercanos al del medio en que
se encuentran
Resulta una herramienta til para visualizar
estructuras muy delgadas.
Se utiliza para analizar elementos
biolgicos transparentes y sin pigmentar,
invisibles con iluminacin normal, sin fijar la
muestra, es decir, sin matarla.
Partes:
1. Parte Mecnica: Sirve de soporte.
2. Parte ptica: constituida por tres sistemas de lentes:Objetivo, ocular y
condensador.
Existen dos clases de condensador de campo oscuro:
* Cardiode: superficie con curva de cardioide.
* Paraboloide: superficie central de curvatura en parbola.
MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA
Funcionamiento: El microscopio de fluorescencia se utiliza para visualizar muestras capaces de emitir
fluorescencia, es decir, capaces de emitir una determinada longitud de onda cuando incide sobre ella
luz de longitud menor. En otras palabras Es la propiedad que tienen ciertos elementos qumicos
denominados fluorforos o fluorocromos de emitir luz visible cuando sobre ellos incide una radiacin
intensa.
 Usos:
Calidad de los Alimentos. Para contar el nmero de microbios
presentes en los productos alimenticios y productos lcteos como la
leche.

Monitoreo Ambiental. Para contar los microbios en muestras de aire,

agua y evaluar la salud de los ecosistemas.

Diagnstico. Para detectar la presencia de algunas enfermedades,

como la malaria, la tuberculosis y la meningitis. La microscopia
fluorescente permite a los funcionarios de salud detectar
enfermedades, incluso en muestras en que los organismos estn
muertos o no puede ser cultivados.

Qumica. Para excitar los tomos y luego observar el comportamiento de los electrones.

Neurociencia. Los microscopios fluorescentes se utilizan para estudiar la organizacin del sistema
nervioso humano.

Partes: Lo que hace distinto a este microscopio es el cubo de filtros.

-Filtro de colores:
*El de excitacin: Ubicada entre la fuente de luz y el preparado. Permite el paso de ondas de luz con longitud
que caiga en el rango azul con el fin que el preparado sea alcanzado exclusivamente por la luz azul y produzca
emisin de luz fluorescente.
*El de barrera: Ubicada antes del ocular para prevenir daos retinianos que podran ser causados por rayos
ultravioleta que escapan el espejo dicrmico. Corta completamente la luz de excitacin no deseada, es decir
selecciona la longitud de onda de emisin del fluorocromo.
*Espejo Dicroico: Permite la separacin de la luz de excitacin y la fluorescencia. Posicionado en 45 respecto
al eje ptico, la longitud de onda ms corta es reflejada y la longitud de onda ms larga lo atraviesa.
MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES
Funcionamiento: Se basa fundamentalmente en el retraso que se produce en las ondas de luz al
atravesar objetos de distintos ndices de refraccin, aprovechando y amplificando dichos retrasos. Su
manera de funcionar es por medio del condensador, se logran separar los rayos luminosos que son
difractados por el objeto de los que lo hacen, al pasar por la muestra, los rayos que atraviesan objetos
ms densos experimentan un retraso de un cuarto de lambda, y al pasar por el anillo de fase, debido a
la forma del anillo de fase, estas ondas se retrasan un cuarto de lambda ms. Por lo que estos desfases
de las ondas luminosas se perciben como diferencias en el contraste, en distintos tonos de grises.

Usos:
Muy til a la hora de examinar tejidos vivos, por lo que se utiliza con frecuencia en biologa y medicina.

Partes:

Fundamentalmente el microscopio de contraste de fase es un microscopio ptico de campo claro con algunas
modificaciones, como objetivos y condensadores especiales.
El condensador presenta un disco que proyecta un haz de luz con forma anular, y en la lente de salida de los
objetivos, se agregan unos anillos de fase, que son discos
transparentes con un diseo en relieve, cabe destacar que existen dos
tipos diferentes de anillos de fase, denominados positivo y negativo,
los cuales tienen distintos efectos sobre la luz y, por lo tanto, las
imgenes se ven diferentes en cada uno, esto se explicar ms
adelante.
Para convertir un microscopio convencional en uno de contraste de
fases se sustituye el condensador y el objetivo por los de contraste de
fases, los cuales contienen un filtro en anillo y una placa de fases
respectivamente. Los objetivos de contraste de fases se identifican por
sus letras verdes y la indicacin del tamao del anillo de fases (Ph1, Ph2, Ph3 o PhC, PhL, PhP).

MICROSCOPIO ELECTRNICO
 Funcionamiento: El principio de funcionamiento de un microscopio electrnico se basa en utilizar
electrones en lugar de luz visible. La longitud de onda con la que se mueve un electrn es inversamente
proporcional a su velocidad. Esto significa que si los electrones son acelerados a altas velocidades
pueden obtenerse longitudes de onda muy cortas.

Partes: Las partes principales de un microscopio electrnico incluyen aquellos elementos utilizados
para generar electrones y dirigirlos hacia la muestra. Esto incluye:

-Fuente de electrones: es equivalente a la fuente de luz en un microscopio

ptico. En este caso es necesario disponer de un emisor de electrones. En
general se utiliza un filamento de tungsteno. Este filamento es calentado de
modo que la energa de sus tomos y electrones aumenta.
-Lentes electromagnticas: en lugar de utilizar lentes de vidrio, los
microscopios electrnicos utilizan lentes electromagnticas. Estas lentes
generan campos elctricos y magnticos de modo que su interaccin con los
electrones hace que sus trayectorias diverjan o converjan en un punto.
-Cmara de vaco: el procedimiento expuesto anteriormente debe llevarse a
cabo dentro de una cmara de vaco. De lo contrario, los electrones
interactuaran con las molculas del aire y no sera posible determinar sus
trayectorias adecuadamente.
-Detector (Pantalla fluorescente): esta pantalla reacciona de modo distinto
segn cual sea el nmero de electrones que impactan en ella. De este modo es posible detectar las zonas
donde impactan ms o menos electrones y deducir as la imagen de la muestra.

Otros Microscopios