UNIVERSITATEA BABE-BOLYAI

FACULTATEA DE BIOLOGIE I GEOLOGIE

INFLUENE ANTROPICE ASUPRA

POPULAIILOR DE MICROORGANISME DIN
LACURILE DE ACUMULARE SECU I VLIUG,
JUD. CARA-SEVERIN

REZUMATUL TEZEI DE DOCTORAT

RADU ALEXANDRU FETKE

COORDONATOR TIINIFIC:
PROF. UNIV. DR. MIHAIL DRGAN-BULARDA

CLUJ-NAPOCA
2016
 C U P RI N S

Pagina
INTRODUCERE ....................................................................................................................... 1
SCOPUL I OBIECTIVELE LUCRRII ............................................................................ 3

CAPITOLUL I. MICROBIOLOGIA ACVATIC ................................................................ 5

1. 1. Caracterizarea general a mediilor acvatice lacurilor .................................................. 5
1.1.1. Microbiota lacurilor ..................................................................................................... 6
1. 2. Stadiul actual al cunoaterii n cercetrile de microbiologie acvatic ......................... 9
1.2.1. Diversitatea comunitilor microbiene n ape ...........................................................11
1.3. Calitatea apei supuse potabilizrii n Romnia ...............................................................14

CAPITOLUL II. POLUAREA APELOR DE SUPRAFA ................................................16

2. 1. Tipuri de poluare a apelor ...............................................................................................16
2. 2. Cercetri privind factorii implicai n poluarea apelor ..................................................21
2.2.1. Studii legate de prezena metalelor grele n mediul acvatic ......................................21
2.2.2. Studii privind efectul micropoluanilor .....................................................................24
2.2.3. Cercetri asupra unor indicatori igienico-sanitari din ape ......................................25

CAPITOLUL III. MATERIALE I METODE ......................................................................30

3.1. Caracterizarea lacurilor de acumulare Secu i Vliug ....................................................30
3.2. Prelevarea i pregtirea probelor pentru analize ............................................................34
3.2.1. Amplasarea punctelor de recoltare a probelor de ap i sediment .........................34
3.2.2. Prelucrarea probelor de sediment pentru analize microbiologice i enzimologice 35
3.3. Metode fizico-chimice ........................................................................................................36
3.4. Metode microbiologice .......................................................................................................39
3.4.1. Determinarea bacteriilor heterotrofe aerobe .............................................................39
3.4.2. Determinarea bacteriilor implicate n circuitul azotului ..........................................41
3.4.2.1. Determinarea bacteriilor amonificatoare .............................................................41
3.4.2.2. Determinarea bacteriilor nitrificatoare ...............................................................42
3.4.2.3. Determinarea bacteriilor denitrificatoare ...........................................................43
3.4.3. Determinarea bacteriilor implicate n circuitul fierului ...........................................44
3.4.3.1. Determinarea bacteriilor fier-reductoare ...........................................................44
 3.4.4. Metoda pentru stabilirea indicatorului bacterian al calitii apei i sedimentului .45
3.5. Metode enzimologice ...........................................................................................................46
3.5.1. Determinarea activitii dehidrogenazice ...................................................................46
3.5.2. Determinarea activitii catalazice ..............................................................................49
3.5.3. Determinarea activitii fosfatazice.............................................................................51
3.5.4. Determinarea activitiloe enzimatice calitative (oligaze i poliaze) .......................53
3.5.5. Determinarea indicatorului enzimatic al calitii sedimentului (IECS) .................56
3.6. Metode pentru determinarea bacteriilor igienico-sanitare .............................................57
3.6.1. Determinarea numrului probabil de bacterii mezofile la 37 C ............................59
3.6.2. Determinarea numrului probabil de bacterii coliforme totale prin MTM ...........60
3.6.3. Determinarea numrului probabil de bacterii coliforme totale prin metoda
membranei filtrante ......................................................................................................62
3.6.3.1. Determinarea genului Escherichia ...................................................................63
3.6.3.2. Determinarea numrului probabil de bacterii coliforme fecale
termotolerante .............................................................................................................68
3.6.4. Determinarea enterococilor fecali ..............................................................................69
3.6.4.1. Metoda tuburilor multiple (MTM) i mediul cu azid de sodiu ......................69
3.6.4.2. Metoda membranei filtrante ..............................................................................71
3.7. Metode ecotoxicologice de testare a polurii apelor celor dou lacuri de acumulare
testul de bioluminescen ....................................................................................................72
3.8. Metode biologice ................................................................................................................73
3.9. Metode statistice ..................................................................................................................74

REZULTATE I DISCUII
CAPITOLUL IV. STABILIREA PARAMETRILOR FIZICO-CHIMICI AI APEI .........77
4.1. Determinarea parametrilor fizici .....................................................................................77
4.2. Determinarea parametrilor chimici .................................................................................78

CAPITOLUL V. ANALIZA MICROBIOLOGIC A APEI ...............................................84

5.1. Determinarea abundenei populaiilor microbiene ........................................................84
5.2. Determinarea cantitativ a bacteriilor heterotrofe aerobe ............................................84
5.3. Determinarea cantitativ a bacteriilor amonificatoare ..................................................87
5.4. Determinarea cantitativ a bacteriilor nitrificatoare .....................................................90
5.5. Determinarea cantitativ a bacteriilor denitrificatoare .................................................96
5.6. Determinarea bacteriilor implicate n circuitul fierului
 - bacteriile fier-reductoare .................................................................................................99
5.7. Determinarea indicatorului bacterian de testare a calitii apei ................................105
5.8. Concluzii ..........................................................................................................................107

CAPITOLUL VI. ANALIZA ENZIMOLOGIC A APEI I SEDIMENTULUI ...........109

6.1. Determinarea activitii enzimatice cantitative ...........................................................110
6.1.1. Activitatea dehidrogenazic actual i potenial ..................................................110
6.1.2. Activitatea fosfatazic ................................................................................................117
6.1.3. Activitatea catalazic .................................................................................................120
6.2. Determinarea indicatorului enzimatic de calitate al sedimentului..............................124
6.3. Determinarea enzimatic calitativ ................................................................................127
6.3.1. Evidenierea unor oligaze i poliaze din sedimentele celor dou lacuri ...................127
6.4. Concluzii ...........................................................................................................................137

CAPITOLUL VII. STABILIREA GRADULUI DE IGIEN A APEI, PRIN

DETERMINAREA INDICATORILOR SANITARI ..........................................................139
7.1. Determinarea numrului probabil de bacterii coliforme totale (germeni coliformi
totali) .................................................................................................................................141
7.2. Determinarea numrului celui mai probabil de germeni coliformi fecali
(termotolerani) ................................................................................................................143
7.3. Determinarea numrului celui mai probabil al enterococilor fecali ..........................145
7.4. Variaia cantitativ i calitativ a bacteriilor igienico-sanitare .................................146
7.5. Stabilirea naturii polurii fecale a apei lacurilor de acumulare Secu i Vliug ........149
7.6. Stabilirea calitii sanitare a apelor celor dou lacuri de acumulare ........................154
7.7. Stabilirea unor corelaii statistice ntre indicatorii igienico-sanitari i parametrii
fizico-chimici .....................................................................................................................158
7.8. Concluzii ..........................................................................................................................160

CAPITOLUL VIII. DETERMINAREA GRADULUI DE POLUARE A APEI PRIN

DIFERITE TESTE ECOTOXICOLOGICE ......................................................................162
8.1. Testul ecotoxicologic de determinare a polurii - testul de bioluminiscen Vibrio
fischeri ..............................................................................................................................163
8.2. Concluzii ..........................................................................................................................172
CAPITOLUL IX. MONITORIZAREA I EVALUAREA CALITII APEI CELOR
DOU LACURI DE ACUMULARE SECU I VLIUG...................................................173

CONCLUZII GENERALE ...................................................................................................176

LISTA DE LUCRRI TIINIFICE publicate din domeniul tezei de doctorat ............182
BIBLIOGRAFIE ....................................................................................................................183
CUVINTE CHEIE: apa potabil, lacurile de acumulare Secu i Vliug, bacterii igienico-
sanitare, grupe de bacterii, activiti enzimatice.

INTRODUCERE

Apele curgtoare i lacurile reprezint surse de aprovizionare cu ap potabil a multor

orae i comuniti umane. Poluarea apei este una dintre problemele acute la nivel global, i care
a nceput s fie studiat din ce n ce mai mult i n ara noastr. Conform directivelor Uniunii
Europene (Directiva Cadru n domeniul apei 60/2000/CE), componenta biotic din ruri devine
principala int pentru evaluarea calitii mediului i pentru planurile de management a calitii
apelor. Utilizarea metodelor biologice de determinare a calitii apei este motivat prin faptul c
acestea furnizeaz note de calitate a apei care reflect evoluia calitii apei n timp i spaiu, n
timp ce metodele clasice, fizico-chimice, ofer doar o imagine instantanee a calitii apei i sunt
mai costisitoare.
Aceast tez de doctorat analizeaz pentru prima dat microbiologia i enzimologia
lacurilor de acumulare Secu i Vliug, jud. Cara-Severin. Teza i propune s analizeze
abundena, distribuia, diversitatea i semnificaia ecologic a unor grupe de bacterii din apa i
sediementul celor dou lacuri de acumulare, starea igienico-sanitar a acestora precum i analiza
activitilor enzimatice din sedimentul celor dou lacuri.
Teza de doctorat aduce contribuii de o real valoare tiinific legate de apa potabil din
oraul Reia. n acest sens au fost prezentate n cadrul unor conferine naionale i
internaionale dar i publicate n reviste recunoscute CNCS: 2 prezentri orale la 2 conferine
naionale i 1 prezentare poster la conferina internaional Paris; 1 abstract publicat n volumul
ISI al unei conferine intrenaionale; 3 articole tiinifice publicate n reviste categoria B+ i 1
articol ntr-o revist naional recunoscut de CNCS.
Analiza rezultatelor prezentate a evideniat c obiectivele propuse n cadrul tezei au fost
atinse, iar rezultatele obinute sunt originale i au un caracter de noutate pe plan naional,
argumentnd folosirea unor tehnici de microbiologie i enzimologie n vederea stabilirii calitii
apei i implicit a cuantificrii microorganismelor din structura apei celor dou lacuri de
acumulare Secu i Vliug, jud. Cara-Severin.
 SCOPUL I OBIECTIVELE LUCRRII

nelegerea conceptual a rolului bacteriilor n ecosistemele acvatice i n circuitele

biogeochimice este strns legat de cunoaterea modului n care este controlat creterea,
abundena i diversitatea acestora.
Doresc s atrag atenia autoritilor n vederea elaborrii unor strategii globale de control
i intervenie n cele dou lacuri de acumulare Secu i Vliug, elaborarea unor lucrri de
reconstrucie ecologic. Oprirea exploatrilor forestiere n perimetrul de protecie aferent
lacurilor. Tierea pdurii are implicaii dramatice asupra modificrii ecosistemului acvatic, mai
ales c aceste lacuri sunt sursa de alimentare cu ap n aval a 70.000 oameni. Reabilitarea
verigilor lanului trofic, evaluarea i monitorizarea impactului activitii numeroaselor puncte
de tieri de copaci i a distrugerii albiei rurilor ce alimenteaz aceste lacuri. Exploatarea
butenilor cu utilaje i camioanele grele ale jefuitorilor de pdure afecteaz tot parcursul rului
din amonte. Ecologizarea i modernizarea rampelor de rumegu, deeuri multiple i a dejeciilor
umane i animaliere, elaborarea unor programe de dezvoltare economic i de mediu cu caracter
de agroturism prin valorificarea resurselor naturale existente conform cu normele europene i
respectarea legislaiei proteciei mediului.

I. MICROBIOLOGIA ACVATIC

Cercetrile de microbiologie acvatic constituie un domeniu de dat relativ recent care

i-au fcut debutul printr-o serie de abordri de ordin strict sanitar. n ultimele decenii atenia
oamenilor de tiin se orienteaz tot mai pregnant asupra studiilor complexe, ecologice, ale
marilor acumulri de ap, tiind c civilizaia industrial actual, prin efectele sale secundare, a
determinat accelerarea unor procese ecologice extrem de complexe, n mediile acvatice, cu
consecine deseori contrare conceptului de dezvoltare durabil. Abordarea cercetrilor de
microbiologie acvatic din punct de vedere ecofiziologic dezvluie ns posibiliti nebnuite de
evaluare a strii generale a unei ape.
Apa nu este un bun comercial oarecare, ci un patrimoniu care trebuie protejat, aprat
i tratat ca atare Art 1 Directive 2000/60/EC of the European Parliament and of the Council of
23 October 2000 establishing a framework for Community action in the field of water policy
 Lacurile ofer condiii foarte diferite pentru dezvoltarea microorganismelor n funcie
de: viteza de curgere, debitul apei, adncime, coninutul mineral dependent de condiiile
geologice. Datorit contactului mrit cu litosfera de-a lungul malurilor i splrii acestora de
cursul de ap, apar fenomene de eroziune, de mbogire cu substane minerale i organice din
sol, i cu microorganisme alohtone.
Dup gradul de poluare se identific trei tipuri majore de ape:
- oligosaprobe cu cantitate mare de oxigen, coninut redus de substane organice dizolvate
i nivel sczut de descompunere organic;
- mezosaprobe cu grad mediu de poluare, cantitate mai mic de oxigen i nivel moderat de
degradare a substanelor organice;
- polisaprobe cu o mare concentraie de materie organic i o concentraie redus sau
absent de oxigen.
Principalii indicatori bacteriologici de poluare din ape i sedimente sunt: grupul
bacteriilor coliforme totale i fecale (considerat ca indicator primar al contaminrii fecale a
apei) i enterococii fecali. n funcie de prezena izolat sau asociat a acestor bacterii, precum
i de variaia lor cantitativ sezonier i anual, se poate face o apreciere asupra strii igienico-
sanitare a apelor. O schimbare orict de mic cantitativ sau calitativ n cazul unei populaii
microbiene permite stabilirea strii ecologice a mediului acvatic i identificarea eventual a
sursei de poluare unde este cazul. Baums i colab., (2007) utilizeaz metoda de detectare a
indicatorilor fecali din apa unui ru folosind luminex. Luminex 100 este o suspensie care
permite analiza rapid pe un mediu de microtitrare. Majoritatea bolilor transmise prin ap au ca
ageni etiologici microorganismele eliminate din tubul digestiv. Monitorizarea bacteriologic
este obligatorie la nivelul apelor, permind depistarea posibilelor surse de poluare fecaligen.
Am ales ca obiect de studiu dou lacuri de acumulare Secu i Vliug din judeul Cara-
Severin cu scopul de a detecta influenele antropice asupra populaiilor de microorganisme din
acestea.
Scopul acestei cercetri este acela de detectare a prezenei n apa i sedimentele celor
dou lacuri de acumulare Secu i Vliug a microorganismelor utilizate ca indicatori ai polurii,
a celor patogene, a mai multor grupe de bacterii implicate n circuitele biogeochimice,
determinarea potenialului bacterian i enzimatic al sedimentelor, analiza activitii bacteriene
din sedimentele apelor i a activitii enzimatice, respectiv, stabilirea strii de calitate sanitar a
acestor ape. Potenialul enzimatic al sedimentului reflect n mod direct sau indirect activitatea
microbiotei, influena diferiilor factori fizici, chimici, antropogeni i chiar a intensitii
activitilor enzimatice. De aceea, funcionarea unui ecosistem nu poate fi neleas fr
anticiparea activ a proceselor enzimatice.
 n acest context obiectivele acestui studiu sunt urmtoarele:
Stabilirea parametrilor fizico-chimici ai apelor celor dou lacuri de acumulare Secu i
Vliug (determinarea temperaturii, pH-ului, Eh-ului, a substanelor organice, a coninutului
de oxigen dizolvat, consumului biochimic de oxigen (CBO5), conductivitii electrice, a
coninutului de amoniu, azotailor, azotiilor, plumbului, fierului, cadmiului,etc.);
Studierea dinamicii i semnificaiei ecologice a unor grupe de bacterii (bacterii implicate n
circuitul biogeochimic al azotului, sulfului, fierului i carbonului) din apa i sedimentul celor
dou lacuri n relaie cu factorii biotici - de mediu i abiotici - determinani;
Stabilirea activitii enzimatice din sedimente prin evidenierea cantitativ (activitatea
dehidrogenazic, catalazic, fosfatazic) i calitativ prin evidenierea unor oligaze i poliaze
din sedimentele celor dou lacuri de acumulare;
Determinarea indicatorului enzimatic al calitii sedimentului (IECS), i a celor doi
indicatori bacterieni al calitii apei (IBCA) i sedimentului (IBCS);
Stabilirea gradului de igien a apei, prin determinarea indicatorilor sanitari (germenii
coliformi totali, coliformi fecali, enterococi fecali) datorit repercursiunilor pe care aceti
indicatori le pot avea asupra sntii umane;
Determinarea gradului de poluare a apei celor dou lacuri de acumulare Secu i Vliug prin
testul ecotoxicologic de bioluminiscen a bacteriei Vibrio fischeri;
Monitorizarea i evaluarea calitii apei celor dou lacuri de acumulare Secu i Vliug sub
influena factorilor antropici n scopul elaborrii unor strategii de reabilitare i conservare a
ecosistemelor acvatice afectate, aplicabile i n cazul altor hidrosisteme similare.

II. MATERIALE I METODE

Lacul Secu: lac acumulare, bazinul Brzava, altitudine 350 m, suprafaa 105,67 ha, volum
de ap 15.132.000 m.c. cu adncimea maxim 27 m situat n lanul Munilor Semenic. Construit
n 1963 servete la alimentarea cu ap a municipiului Reia avnd i rol de agrement n cadrul
Staiunii Turistice Secu
Lacul Vliug: lac de acumulare, bazinul Brzava, altitudine 500m, suprafa de 66,2 ha
volum de 11.732.000 m.c., 40 m adncime, lanul Munilor Semenic. Construit n 1953 servete
la alimentarea cu ap a lacului Secu aflat n aval i implicit a municipiului Reia avnd i rol de
agrement n cadrul Staiunii Turistice Crivaia
 Prelevarea, conservarea, transportul, pstrarea i identificarea probelor conform
standardului SR EN 2852/1994.
Determinarea parametrilor fizicico-chimici. n vederea stabilirii influenei factorilor de
mediu abiotici asupra densitii i compoziiei comunitilor microbiene studiate, s-au
determinat urmtorii parametrii fizico-chimici: temperatura (T), pH-ul, oxigenul dizolvat (O2),
conductivitatea, consumul biochimic de oxigen (CBO5), cantitatea de materie organic,
determinat prin CCO-MN, azot mineral total (N total), azotai, azotii, amoniu, sulfai, fosfor
total (P total) i fier total (Fe total), prezena unor metale grele (Cu, Pb, Zn, Cd).
Determinarea grupelor ecofiziologice de bacterii s-a fcut pentru a evalua diversitatea
funcional a microbiotei i a proceselor biochimice din habitatele acvatice ale celor dou lacuri
de acumulare. Bacteriile heterotrofe aerobe s-au determinat prin metoda plcilor turnate
(Drgan-Bularda, 2000). Pentru determinarea bacteriilor amonificatoare se aplic metoda
tuburilor multiple MTM (Cua 1996). n cazul bacteriilor nitrificatoare i a bacteriilor fier-
reductoare are ca principiu metoda tuburilor multiple MTM (Carpa i colab., 2014). Pe baza
numrului de bacterii aparinnd mai multor grupe ecofiziologice se stabilete indicatorul
bacterian al calitii apei i sedimentului (Muntean, 1995-1996).
Metode enzimologice. Au fost determinate activiti enzimatice cantitative i calitative.
Dintre activitile enzimatice cantitative studiate: determinarea activitii: dehidrogenazice-
metoda Casida, (Carpa i colab., 2014; Drgan Bularda, 2000), catalazice- metoda Kappen,
(Muntean i colab, 1996), fosfatazice- metoda Kramer i Erdei (Drgan Bularda, 2000), din
sedimentul lacurilor studiate. Determinarea activitilor enzimatice calitative (oligaze i
poliaze): zaharoz, maltoz, celobioz, lactoz, amidon, dextran, levan, inulin.
Determinarea bacteriilor igienico-sanitare. Dup standarde ISO i STAS s-au
determinat numrul probabil de bacterii mezofile la 37 C (STAS 3001-91), numrul probabil
de bacterii coliforme totale prin metoda membranei filtrante n cadrul laboratorul
AQUACARA, numrul probabil de bacterii coliforme fecale termotolerante prin metoda
tuburilor multiple (Cua 1996, Drgan-Bularda, 2000) sau metoda membranei filtrante,
enterococii fecali.
Metode ecotoxicologice de testare a polurii apelor celor dou lacuri de acumulare
testul de bioluminescen cu Vibrio fischeri (SR EN ISO 11348-3:2003; SR EN ISO 11348-
1:1998).
Metode statistice. La calcularea i corelarea rezultatelor analizelor se opereaz cu metode
statistice. Media aritmetic, abaterea standard sau S, eroarea standard a mediei, testele
statistice de semnificaie, analiza de varian. ANOVA, coeficientul de corelaie.
 III. ANALIZA FIZICO-CHIMIC A APEI

n vederea stabilirii influenei factorilor de mediu abiotici asupra densitii i

compoziiei comunitilor microbiene studiate, au fost determinai urmtorii parametrii fizico-
chimici: temperatura (T), pH-ul, oxigenul dizolvat (O2), conductivitatea, consumul biochimic de
oxigen (CBO5), cantitatea de materie organic, determinat prin CCO-MN, azot mineral total
(Nmin.t), azotai, azotii, amoniu, sulfai, fosfor total (P total) i fier total (Fe total), prezena
unor metale grele (Cu, Pb, Zn, Cd).

IV. ANALIZA MICROBIOLOGIC A APEI

Pentru a stabili relaiile dintre populaiile microbiene din ecosistemele acvatice i a

influenelor pe care bacteriile din sedimente le pot exercita asupra calitii apelor, pe lng
activitatea enzimologic i aspecul igienico-sanitar am urmrit i compoziia grupelor
ecofiziologice de bacterii implicate n descompunerea i mineralizarea substratului din ape i
sedimente, am luat n studiu bacteriile heterotrofe aeorbe, bacteriile implicate n ciclul
biogeochimic al azotului i al fierului.

IV.1. Determinarea cantitativ a bacteriilor heterotrofe aerobe

Acest studiu analizeaz pentru prima data dinamica i diversitatea ecologic a grupelor de
bacterii implicate n ciclul biogeochimic al azotului i al fierului. n apa lacului de acumulare
Secu n anii 2009 i 2010 bacteriile heterotrofe aerobe au fost de ordinul 106-107. S-au
nregistrat fluctuaii mari ntre punctele de prelevare ns valori maxime ale s-au nregistrat n
seciunea de mijloc a lacului de acumulare Secu (Fig. 1).
120000000 2009 2010

100000000
Nr. bacterii/ml

80000000

60000000

40000000

20000000

0
Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac

Puncte de prelevare

Fig. 1. Distribuia numeric a bacteriilor heterotrofe aerobe n apa lacului de acumulare Secu n
anul 2009 i anul 2010.
 n apa lacului de acumulare Vliug n anii 2009 i 2010 bacteriile heterotrofe aerobe nu au
prezentat fluctuaii foarte mari ntre punctele de prelevare (Fig. 2).

120000000
2009 2010

100000000

Nr. bacterii/ml
80000000

60000000

40000000

20000000

0
Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac

Puncte de prelevare

Fig. 2. Distribuia numeric a bacteriilor heterotrofe aerobe n apa lacului de acumulare Vliug
n anul 2009 i anul 2010.

Aceste rezultate au artat c grupul bacteriilor heterotrofe aerobe a fost cel mai numeros
n ambele lacuri de acumulare (Secu i Vliug) i n ambii ani studiai (2009 i 2010).

IV.2. Determinarea cantitativ a bacteriilor amonificatoare

n apele celor dou lacuri de acumulare studiate bacteriile amonificatoare (BAM) se
regsesc ntr-un numr destul de mare ceea ce demontreaz prezena la nivelul acestor ape a
unor cantiti crescute de amoniu (Fig. 3).

350000
2009 2010

300000

250000
Nr. bacterii/ml

200000

150000

100000

50000

0
Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac

Puncte de prelevare

Fig. 3 . Distribuia numeric a bacteriilor amonificatoare n apa lacului de acumulare Secu n

anul 2009 i anul 2010.
 Comparativ cu lacul de acumulare Secu n apa lacului de acumulare Vliug au fost
detectate bacterii amonificatoare n numr ceva mai ridicat (Fig. 4).

450000
2009 2010
400000

350000

300000

Nr. bacterii/ml
250000

200000

150000

100000

50000

0
Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac
Puncte de prelevare

Fig. 4. Distribuia numeric a bacteriilor amonificatoare n apa lacului de acumulare Vliug n

anul 2009 i anul 2010.

Bacteriile amonificatoare n apele lacurilor de acumulare Secu i Vliug se regsesc ntr-

un numr mare n cei doi ani de studiu. Valorile maxime se ating n partea de baraj (cap).
Aceste valori ridicate pot fi explicate prin acumularea de materie organic de natur vegetal
sau animal i a temperaturilor mai ridicate ale apei care stimuleaz dezvoltarea i activitatea
microorganismelor din aceste habitate.

IV. 3. Determinarea cantitativ a bacteriilor nitrificatoare

n lacul de acumulare Secu numrul nitritbacteriilor la nivelul probelor de ap analizate a
prezentat fluctuaii ntre seciunile analizate cele mai mari valori nregistrndu-se n partea de baraj
(Fig. 5). Cele mai mici valori au fost nregistrate n partea sudic a lacului de acumulare Secu.

16000
2009 2010 14000
2009 2010
14000
12000
12000
10000
Nr. bacterii/ml

10000
Nr. bacterii/ml

8000
8000
6000
6000

4000
4000

2000 2000

0 0
Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac

Puncte de prelevare Puncte de prelevare

Fig. 5, 6. Distribuia numeric a nitrit-bacteriilor (stnga) i a nitrat-bacteriilor (dreapta) n apa

lacului de acumulare Secu n anul 2009 i anul 2010.
 Numrul nitratbacteriilor la nivelul probelor de ap din lacul de acumulare Secu a prezentat
fluctuaii ntre seciunile analizate. Valorile acestor bacterii au fost ceva mai sczute comparativ cu
valorile nitritbacteriilor. Cele mai mari valori s-au nregistrat n partea de baraj centru (Fig. 6).
n lacul de acumulare Vliug numrul nitritbacteriilor la nivelul probelor de ap analizate a
prezentat fluctuaii ntre seciunile analizate cele mai mari valori nregistrndu-se n partea de
centrala a barajului (Fig. 7 ).

12000
2009 2010 12000 2009 2010

10000
10000

8000 8000
Nr. bacterii/ml

Nr. bacterii/ml
6000 6000

4000 4000

2000 2000

0 0
Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac

Puncte de prelevare Puncte de prelevare

Fig. 7, 8. Distribuia numeric a nitrit-bacteriilor (stnga) i a nitrat-bacteriilor (dreapta) n apa

lacului de acumulare Vliug n anul 2009 i anul 2010.

Numrul nitratbacteriilor la nivelul probelor de ap din lacul de acumulare Vliug a prezentat

fluctuaii ntre seciunile analizate. i n acest lac de acumulare la fel ca n lacul Secu, valorile
nitratbacteriilor au fost ceva mai sczute comparativ cu valorile nitritbacteriilor. Cele mai mari
valori s-au nregistrat n partea de baraj nord i baraj centru (Fig. 8). n seciunea de mijloc dar i de
coad a lacului fluctuaia nitratbacteriilor nu a fost foarte mare. n general numrul nitratbacteriilor
a fost mai sczut n anul 2010 comparativ cu anul 2009.
Bacteriile nitrificatoare sunt prezente att n apa ct i n sedimente, densitatea lor maxim
fiind atins la nivelul straturilor superioare n bazinele acvatice, la interfaa dintre ap i sedimente.
Fiind sensibile la gradul de oxigenare a apei, numrul acestor bacterii la nivelul sedimentelor ne
poate furniza date importante despre starea de circulaie a apei n bazinele acvatice.

IV.4. Determinarea cantitativ a bacteriilor denitrificatoare

Numrul bacteriilor denitrificatoare la nivelul probelor de ap din lacul de acumulare Secu a
prezentat fluctuaii ntre seciunile analizate. Cele mai mari valori s-au nregistrat n partea de
mijloc centru a lacului de acumulare Secu (Fig. 9). Valorile bacteriilor denitrificatoare n celelalte
seciuni de baraj au fost mult mai sczute comparativ cu partea de mijloc centru a lacului de
acumulare.
 140000
2009 2010

120000

100000

Nr. bacterii/ml
80000

60000

40000

20000

0
Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac
Puncte de prelevare

Fig. 9. Distribuia numeric a bacteriilor denitrificatoare n apa lacului de acumulare Secu n

anul 2009 i anul 2010.

Att pentru lacul Secu ct i pentru Vliug exist similitudini, densitatea cea mai mare
nregistrndu-se n seciunea de mijloc a lacurilor de acumulare (fig. 10).

180000
2009 2010
160000

140000

120000
Nr. bacterii/ml

100000

80000

60000

40000

20000

0
Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac

Puncte de prelevare

Fig. 10. Distribuia numeric a bacteriilor denitrificatoare n apa lacului de acumulare Vliug n
anul 2009 i anul 2010.

Numrul bacteriilor denitrificatoare la nivelul probelor de ap analizate n apa celor dou

lacuri de acumulare a variat ntre 14x104 i 18x104.

IV.5. Determinarea bacteriilor fier-reductoare

n anul 2009, n lacul de acumulare Secu, valorile bacteriilor fier-reductoare au fost de
ordinul sutelor. De remarcat este faptul c ncrctur maxim s-a nregistrat n seciunea de
mijloc a lacului de acumulare Secu (Fig. 11).
 700
1400
600
1200
500
Nr. bacterii/ml

1000

Nr. bacterii/ml
400
800

300 600

200 400

100 200

0 0
Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac
Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac
Puncte de prelevare Puncte de prelevare

Fig. 11, 12. Distribuia numeric a densitii bacteriilor fier-reductoare din apa lacului
de acumulare Secu n anul 2009 (stnga) i n anul 2010 (dreapta).

n anul 2010, n lacul de acumulare Secu, valorile bacteriilor fier-reductoare aproape s-

au dublat. Valorile maxime s-au nregistrat tot n seciunea de mijloc nord a lacului de
acumulare Secu (Fig. 12).

Distribuia numeric a bacteriilor fier-reductoare n apa lacului de acumulare Vliug n

anul 2009 i anul 2010 a fost mai bine reprezentat fiind de ordinul miilor (Fig. 13).

4000 6000

3500 5000
3000
Nr. bacterii/ml

4000
Nr. bacterii/ml

2500

2000 3000

1500 2000
1000
1000
500

0 0
Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada
Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac

Puncte de prelevare Puncte de prelevare

Fig. 13, 14. Distribuia numeric a densitii bacteriilor fier-reductoare din apa lacului
de acumulare Vliug n anul 2009 (stnga) i n anul 2010 (dreapta).

n anul 2010, n lacul de acumulare Vliug, valorile bacteriilor fier-reductoare au crescut

uor. Valorile maxime s-au nregistrat n seciunea de mijloc nord a lacului Vliug (Fig. 14).
Din punct de vedere biologic i microbiologic, studiul acestei ape are un rol esenial n
stabilirea cilor de impact i n aplicarea unor metode eficiente de meninere a apei celor dou
lacuri de acumulare Secu i Vliug n limite de calitate foarte bun.
 IV.6. Determinarea indicatorului bacterian de testare a calitii apei
Valorile indicatorului bacterian al calitii apei (IBCA) au fost calculate utiliznd
valorile individuale ale fiecrui grup ecofiziologic studiat pentru lacul de acumulare Secu i
pentru lacul de acumulare Vliug.

4,5
6
4

3,5 5

3
4
2,5
IBCA

IBCA
2009 3
2 2009
1,5 2
2010
1 2010
1
0,5

0 0
Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada Baraj Baraj Baraj Mijloc Mijloc Mijloc Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac Nord Centru Sud Nord Centru Sud lac

Locul de prelevare Locul de prelevare

Fig. 15, 16. Valorile indicatorului bacterian al calitii apei (IBCA) pe parcursul anilor
luai n studiu n lacul de acumulare Secu (stnga) i n lacul de acumulare Vliug (dreapta).

n lacul de acumulare Secu valorile indicatorului bacterian au fost mult mai crescute n
anul 2010 comparativ cu anul 2009 (Fig. 15). Valorile IBCS sufer modificri n funcie de
sezonul n care au fost realizate analizele.
n lacul de acumulare Vliug se poate observa acelai lucru, valori mai ridicate ale
indicatorului au fost nregistrate tot n anul 2010 (Fig. 16).

V. ANALIZA ENZIMOLOGIC A APEI I SEDIMENTULUI

V.1. Determinarea activitii enzimatice cantitative

n cele 7 probe de sediment au fost determinate cantitativ urmtoarele activiti
enzimatice: activitatea dehidrogenazic actual (ADA) (reducerea TTC- clorura de 2,3,5-trifenil
tetrazoliu, n probe fr adaos de glucoz) i activitatea dehidrogenazic potenial (ADP) (cu
adaos de glucoz), activitatea fosfatazic (AF) i activitatea catalazic (AC).
V.1.1. Activitatea dehidrogenazic actual i potenial
n anul 2009 valorile activitii dehidrogenazice actuale i poteniale n lacul de acumulare
Secu au fost medii ceea ce demonstreaz existena unui potenial microbian mediu n acest lac
de acumulare (Fig. 17 i Fig. 18).
 Adiia de glucoz are un efect stimulativ constant, dar nu foarte ridicat, asupra activitii
dehidrogenazice din sedimnetul lacului studiat. Valorile activitii dehidrogenzice poteniale n
lacul de acumulare Secu n anul 2009 au fost crescute cu cel puin un ordin de mrime datorit
adugrii glucozei (Fig. 17).

7 10
9
6

mg formazan/g s.u.
mg formazan/g s.u.

8
5 7
6
4
5
3 4
3
2
2
1 1
0
0
Baraj Baraj Baraj Mijl. Mijl. Mijl. Coada
Baraj Baraj Baraj Mijl. Mijl. Mijl. Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud Lac
Nord Centru Sud Nord Centru Sud Lac
Punctele de prelevare Punctele de prelevare

Fig. 17, 18. Intensitatea activitii dehidrogenazice actuale (ADA) (stnga) i a activitii
dehidrogenazice poteniale (ADP) (dreapta) n sedimentul lacului de acumulare Secu (2009).

n anul 2010 n lacul de acumulare Secu s-au nregistrat valori ale activitii
dehidrogenazice actuale i poteniale puin mai ridicate comparativ cu valorile obinute n anul
2009. Acest lucru demonstreaz o mbuntire a potenialului microbian n acest lac de
acumulare. Comparativ cu activitatea dehidrogenazic actual, activitatea dehidrogenzic
potenial n lacul de acumulare Secu n anul 2010 a prezentat valori crescute datorit adgurii
sursei de carbon suplimentare, intensitatea fiind aproape uniform pe toate seciunile luate n
studiu (Fig. 20).

8 12

7 10
mg formazan/g.s.u.
mg formazan/g.s.u.

6
8
5
4 6
3
4
2
1 2

0 0
Baraj Baraj Baraj Mijl. Mijl. Mijl. Coada Baraj Baraj Baraj Mijl. Mijl. Mijl. Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud Lac Nord Centru Sud Nord Centru Sud Lac

Fig. 19, 20 . Intensitatea activitii dehidrogenazice actuale (ADA) (stnga) i a activitii

dehidrogenazice poteniale (ADP) (dreapta) n sedimentul lacului de acumulare Secu (2010).

Activitatea dehidrogenazic n sedimentul lacului Secu a prezentat oscilaii n cei doi ani
de studiu prezentnd valori mai ridicate comaprativ cu lacul de acumulare Vliug probabil
datorit prezenei n aceste sedimente a unei cantiti suficiente de substane organice, care
determin o bun dezvoltare a microorganismelor, activitatea lor fiind caracterizat de nivelul
activitii dehidrogenazice actuale.

V.1.2. Activitatea fosfatazic

n general valorile activitii fosfatazice n cele dou lacuri de acumulare au fost mai
ridicate n anul 2009 comparativ cu anul 2010. O fluctuaie numeric destul de mare a activitii
fosfatazice a fost observat n toate seciunile analizate n anul 2009 n lacul de acumulare Secu
(Fig. 21). n anul 2010 activitatea fosfatazic a nregistrat valori mai sczute n toate seciunile
analizate comparativ cu cele nregistrate n anul 2009 (Fig. 22).

140
120

120
100
mg. fenol/g s.u.

100 mg fenol/g.s.u.
80
80
60
60
40
40

20 20

0 0
Baraj Baraj Baraj Mijl. Mijl. Mijl. Coada Baraj Baraj Baraj Mijl. Mijl. Mijl. Sud Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud Lac Nord Centru Sud Nord Centru Lac

Punctele de prelevare Punctele de prelevare

Fig. 21, 22. Intensitatea activitii fosfatazice (AF) n sedimentul lacului de acumulare Secu n
anul 2009 (stnga) i n anul 2010 (dreapta).

n sedimentele din lacul de acumulare Vliug, activitatea fosfatazic a fost detectat n

toate seciunile luate n studiu o ntensitate mai ridicat prezentnd coada lacului (Fig. 23).

120 100
90
100 80
mg fenol/g.s.u.

mg fenol/g.s.u.

70
80
60
60 50
40
40 30
20
20
10
0 0
Baraj Baraj Baraj Mijl. Mijl. Mijl. Coada Baraj Baraj Baraj Mijl. Mijl. Mijl. Coada
Nord Centru Sud Nord Centru Sud Lac Nord Centru Sud Nord Centru Sud Lac

Punctele de prelevare Punctele de prelevare

Fig. 23, 24. Intensitatea activitii fosfatazice (AF) n sedimentul lacului de acumulare Vliug n
anul 2009 (stnga) i n anul 2010 (dreapta).
 n anul 2010 s-au nregistrat valori mai sczute ale activitii fosfatazice n sedimentele
provenite din lacul de acumulare Vliug (Fig. 24). Valori mai sczute au fost nregistrate n
seciunea mijloc sudic.
Activitatea fosfatazic din sedimentele lacurilor Secu i Vliug au prezentat valori destul
de ridicate att n anul 2009 ct i n 2010. Aceast activitate fosfatazic intens nregistrat n
cele doau lacuri de acumulare n aproape toate seciunile studiate, indic faptul c sedimentele
reprezint rezervorul principal de fosfor din bazinele acvatice (Muntean i colab., 1996-1997).

V.1.3. Activitatea catalazic

Dac comparm valorile activitilor catalazice nregistrate n cele dou lacuri de
acumulare se poate observa c n lacul Secu valorile au fost mult mai ridicate dect n lacul
Vliug. Aceste valori ridicate ale activitii catalazice nregistrate n lacul Secu pot fi datorate
prezenei n sedimente a unor substane puternic reduse (sulfiii) i a acizilor humici (Muntean i
colab., 1999).

Tabel 1. Distribuia valorilor activitii catalazice nregistrat n sedimenul lacurilor de

acumulare Secu i Vliug n anul 2009 i 2010.
Locul de Lacul de acumulare Secu Lacul de acumulare Vliug
prelevare 2009 2010 2009 2010
mg H2O2/g.s.u. mg H2O2/g.s.u.
Baraj Nord 19,8 14 12 8
Baraj Centru 13,6 11 6 5,3
Baraj Sud 7,3 8 7,5 7
Mijloc Nord 10,4 9,5 8,4 6,8
Mijloc Centru 8,5 7,6 6,5 5,2
Mijloc Sud 17 12 7 4
Coada lac 12 9,5 9 8

V.1.4. Determinarea indicatorului enzimatic de calitate al sedimentului

n Fig. 25 sunt prezentate variaiile potenialului enzimatic al calitii sedimentelor
analizate din lacul de acumulare Secu, n anii 2009 i 2010, aa cum sunt reflectate de ctre
valorile indicatorilor studiai.
 0,3
2009 2010 0,7
2009 2010
0,25 0,6

0,2 0,5

0,4

IECS
IECS

0,15
0,3
0,1
0,2

0,05 0,1

0 0
Baraj Baraj Baraj Sud Mijloc Mijloc Mijloc Coada lac Baraj Baraj Baraj Sud Mijloc Mijloc Mijloc Coada
Nord Centru Nord Centru Sud Nord Centru Nord Centru Sud lac

Locul de prelevare Locul de prelevare

Fig. 25, 26. Valorile indicatorului enzimatic al calitii sedimentului (IECS) pe parcursul
anilor luai n studiu n lacul de acumulare Secu (stnga) i n lacul Vliug (dreapta).

n figura 26 este redat indicatorul enzimatic al calitii sedimentului din lacul de

acumulare Vliug. Aici se poate observa existena unui indicator mult mai crescut comparativ
cu cel obinut n lacul Secu.

V.2. Determinarea enzimatic calitativ

Activitatea enzimatic calitativ s-a determinat n cte 3 puncte pentru fiecare lac de
acumulare (3 probe din lacul Secu i 3 probe din lacul Vliug). Au fost detectate activiti
enzimatice calitative oligazice i poliazice. Dintre activitile oligazice au fost detectate prin
cromatografie pe hrtie invertaza, maltaza, celobiaza i lactaza. Dintre acestea prezint in acest
rezumat doar activitatea invertazic i maltazic. Dintre activitile poliazice au fost studiate
prin cromatografie pe hrtie amilaza, celulaza, glicogenaza, dextranaza i inulinaza. Dintre
acestea prezint n rezumat doar activitatea amilazic i inulinazic.

V.2.1. Evidenierea unor oligaze i poliaze din sedimentele celor dou lacuri
n cromatograma din fig. 27 este prezentat activitatea zaharazic n probele de sediment
n ambele lacuri de acumulare Secu i Vliug. Pe baza spoturilor de glucoz rezultate din
hidroliza zaharozei sub aciunea zaharazei se poate aprecia c aceast activitate inveratzic este
prezent n toate probele de sediment luate n studiu, existnd totui mici diferene de intensitate
marcate de intensitatea spoturilor.
 Fig. 27 . Activitatea zaharazic (SA). 1-3 probe de sediment Vliug; I-III probe de
sediment Secu + substrat enzimatic (zaharoz 2%), S=control soluie de zaharoz 2%.
G=glucoz.

Cromatograma din Fig. 28 prezint rezultatele activitii maltazice n probele de sediment

ale celor dou lacuri de acumulare. Sedimentele lacului Secu au fost mai active n ceea ce
privete activitatea enzimatic dect cele din lacul Vliug.

Fig. 28. Activitatea maltazic (MA). 1-3 probe de sediment Vliug; I-III probe de
sediment Secu + substrat enzimatic (maltoz 2%), M=control soluie de maltoz 2%.
G=glucoz a=spot de maltoz. b= spot de glucoz.

n cromatograma din Fig. 29, este prezentat activitatea amilazei prin prezena spotului
glucozei n toate cele ase probe de sediment examinate. Se poate observa c probele de
sedimente din lacul Secu sunt mai active n ceea ce privete activitatea amilazei dect cele din
sedimentele din lacul Vliug.
 Fig. 29. Activitatea amilazic (AA). 1-3 probe de sediment Vliug; I-III probe de
sediment Secu + substrat enzimatic amidon 2%), A=control soluie de amidon 2%. G=glucoz
a=spot de amilaz. b= spot de glucoz.

n figura 30 se poate observa prezena activitii inulinazice pentru toate cele ase probe,
cel mai intens spot al fructozei fiind cel al probei 1 din lacul Vliug i pentru probele I i III din
lacul Secu. Pentru proba II din lacul Secu intensitatea spotului de fructoz este la limita de
detecie.

Fig. 30. Activitatea inulinazic (IA). 1-3 probe de sediment Vliug; I-III probe de
sediment Secu + substrat enzimatic inulin 2%), I=control soluie de inulin 2%. F=fructoz.

VI. STABILIREA GRADULUI DE IGIEN A APEI, PRIN

DETERMINAREA INDICATORILOR SANITARI

n apa lacului de acumulare Secu, bacteriile igienico-sanitare au fost prezente n densiti

numerice relativ sczute pe parcursul studiului, ns comparativ cu lacul de acumulare Vliug
valorile indicatorilor studiai au fost mai ridicate n lacul Secu.
O fluctuaie numeric a grupelor igienico-sanitare de bacterii a fost observat n toate
punctele analizate. n apa lacului de acumulare Vliug, bacteriile igienico-sanitare au fost
prezente n densiti numerice mult mai sczute n majoritatea punctelor de prelevare, exceptnd
coada lacului. Din grupul de bacterii igienico-sanitare luat n studiu, bacteriile coliforme totale
au prezentat densiti maxime pe toat perioada studiului, n timp ce enterococii fecali au fost n
numr sczut i foarte sczut n aproape toate punctele de prelevare analizate.
n lacul de acumulare Secu se poate observa densitatea mai ridicat a bacteriilor
coliforme totale n anul 2009 comparativ cu anul 2010, nregistrnd un numr mai ridicat spre
coada lacului (Fig. 31).

600
Nr. coliformi totali/100 ml

500

400

300

200

100

0
Coada

Coada
Baraj N
Baraj C

Baraj N

Baraj C
Mijl. N
Mijl. C

Mijl. N

Mijl. C
Baraj S

Baraj S
Mijl. S

Mijl. S
2009 2010

Fig. 31. Distribuia valorilor medii anuale ale densitiilor bacteriilor coliforme totale
din Lacul Secu pe parcursul anului 2009 i 2010.

n lacul de acumulare Vliug se poate remarca c bacteriile coliforme totale au fost mai
numeroase n anul 2009 comparativ cu anul 2010 (Fig. 32). De asemenea, valori mai ridicate ale
bacteriilor coliforme totale s-au nregistrat la coada acestui lac unde se desfoar diverse
activiti de agrement.

600

500
Nr. coliformi totali/100 ml

400

300

200

100

0
Baraj C

Baraj C
Coada

Coada
Baraj S

Baraj S
Baraj N

Baraj N
Mijl. C

Mijl. C
Mijl. S

Mijl. S
Mijl. NM

Mijl. NM

2009 2010

Fig. 32. Distribuia valorilor medii anuale ale densitiilor bacteriilor coliforme totale din Lacul
Vliug pe parcursul anului 2009 i 2010.
 VI.1. Determinarea numrului celui mai probabil de germeni coliformi fecali
O fluctuaie numeric destul de ridicat a bacteriilor coliforme fecale a fost observat n
Lacul Secu n anul 2009. n probele de ap din acelai lac, dar n anul 2010, valorile
coliformilor fecali au sczut aproape la jumtate (Fig. 33).

400
350
Nr. coliformi fecali/100 ml

300
250

200
150
100

50
0

Coada

Coada
Baraj N

Baraj C

Baraj N

Baraj C
Mijl. N

Mijl. C

Mijl. N

Mijl. C
Baraj S

Baraj S
Mijl. S

Mijl. S
2009 2010

Fig. 33. Distribuia valorilor medii anuale ale densitiilor bacteriilor coliforme fecale din Lacul
Secu pe parcursul anului 2009 i 2010.

n probele de ap din Lacul Vliug, valorile coliformilor fecali au fost mai sczute
comparativ cu valorile nregistrate n Lacul Secu (Fig. 34). Comparnd valorile obinute n cei
doi ani de studiu se poate remarca i n acest caz, c n anul 2009 valorile coliformilor fecali au
fost mult mai ridicate comparativ cu anul 2010.

140

120
Nr. coliformi fecali/100 ml

100

80

60

40

20

0
Baraj C

Baraj C
Coada

Coada
Baraj S

Baraj S
Baraj N

Baraj N
Mijl. C

Mijl. C
Mijl. S

Mijl. S
Mijl. NM

Mijl. NM

2009 2010

Fig. 34. Distribuia valorilor medii anuale ale densitiilor bacteriilor coliforme fecale din Lacul
Vliug pe parcursul anului 2009 i 2010
 VI. 2. Determinarea numrului celui mai probabil al enterococilor fecali
n Fig. 35 este reprezentat distribuia valorilor medii anuale ale densitiilor enterococilor
fecali din Lacul Secu, unde se observ c aceste bacterii au fost mai numeroase n anul 2009
comparativ cu anul 2010.

80
70
Nr. ent. fecali/100 ml

60
50
40
30
20
10
0
Baraj S

Baraj S
Baraj N
Baraj C

Baraj N
Baraj C
Coada

Coada
Mijl. S

Mijl. S
Mijl. C

Mijl. N
Mijl. C
Mijl. N.

2009 2010

Fig. 35. Distribuia valorilor medii anuale ale densitiilor enterococilor fecali din Lacul Secu pe
parcursul anului 2009 i 2010.

n Fig. 36 este reprezentat distribuia valorilor medii anuale ale densitilor enterococilor
fecali din Lacul Vliug. n acest lac valorile enterococilor fecali au fost mult mai sczute
comparativ cu valorile din Lacul Secu.

50
45
40
Nr. ent. fecali/100 ml

35
30
25
20
15
10
5
0
Baraj C

Baraj C
Coada

Coada
Baraj S

Baraj S
Baraj N

Baraj N
Mijl. C

Mijl. C
Mijl. S

Mijl. S
Mijl. NM

Mijl. NM

2009 2010

Fig. 36. Distribuia valorilor medii anuale ale densitiilor enterococilor fecali din Lacul Vliug
pe parcursul anului 2009 i 2010.

VI.3. Variaia cantitativ i calitativ a bacteriilor igienico-sanitare

n apa lacului de acumulare Secu, bacteriile igienico-sanitare au fost prezente n densiti
numerice mai ridicate comparativ cu lacul de acumulare Vliug. n Fig. 37 sunt reprezentate
valorile medii anuale i erorile standard ale bacteriilor coliforme totale, coliforme fecale i a
enterococilor fecali din apa Lacului Secu.
600
C totali
C fecali

500
Ent

Nr.bacterii/100 ml
400

300

200

100

Coada

Coada
Baraj N

Baraj C

Baraj N

Baraj C
Mijl. N

Mijl. C

Mijl. N

Mijl. C
Baraj S

Baraj S
Mijl. S

Mijl. S
2009 2010

Fig. 37. Mediile anuale i valorile erorilor standard ale densitii bacteriilor igienico-sanitare n
Lacul Secu.

n Fig. 38 sunt reprezentate valorile medii anuale i erorile standard ale bacteriilor
coliforme totale, coliforme fecale i a enterococilor fecali din apa Lacului Vliug. n ansamblu,
bacteriile igienico-sanitare au avut o distribuie relativ uniform n cei doi ani de studiu.

700 C totali
C fecali
600
Ent
500
Nr. bacterii/100 ml

400
300
200
100
0
Baraj C

Baraj C
Coada

Coada
Baraj S

Baraj S
Baraj N

Baraj N
Mijl. C

Mijl. C
Mijl. S

Mijl. S
Mijl. NM

Mijl. NM

2009 2010

Fig. 38. Mediile anuale i valorile erorilor standard ale densitii bacteriilor igienico-sanitare n
Lacul Vliug.

n apa barajului de acumulare Secu, dintre indicatorii igienico-sanitari, bacteriile coliforme

totale au reprezentat 61% n 2009 i respectiv 72% n anul 2010. (Fig. 39).
 Lacul Secu, 2009 Lacul Secu, 2010

5% 5%
23%

34% 72%
61%

C totali C fecali Ent C totali C fecali Ent

Fig. 39. Variaia cantitativ (%) ale bacteriilor coliforme totale din apa Lacului Secu n anul
2009 i anul 2010.

Enterococii fecali, care certific o poluare fecal recent au prezentat valori sczute att n
anul 2009 ct i n anul 2010 (5%).
n apa lacului de acumulare Vliug, bacteriile coliforme totale au reprezentat 65% n 2009
i respectiv 78% n anul 2010, constituind cel mai numeros grup din cadrul bacteriilor igienico-
sanitare. Bacteriile coliforme fecale dar i enterococii fecali au fost mai numeroi n anul 2009
dect n anul 2010 (Fig. 40).
Variaia cantitativ procentual stabilit ntre cele trei tipuri principale de bacterii indic o
proporie mare a bacteriilor coliforme totale att pentru lacul de acumulare Secu ct i pentru
lacul Vliug.

Lacul Valiug, 2009 Lacul Valiug, 2010

9% 5%

17%
26%
65%
78%

C totali C fecali Ent C totali C fecali Ent

Fig. 40. Variaia cantitativ (%) ale bacteriilor coliforme totale din apa Lacului Vliug n anul
2009 i anul 2010.

VI. 4. Stabilirea calitii sanitare a apelor celor dou lacuri de acumulare (Secu i
Vliug).
Cea mai important condiie de potabilitate a unei ape este absena din ap a
enterobacteriilor patogene. n general n testele de laborator sunt cercetate microorganismele
prezente n mod natural n materiile fecale ale omului i ale animalelor cu snge cald, care
reprezint indicatori ai polurii fecale ai apei, prezena lor relevnd posibilitatea prezenei
bacteriilor patogene. Din punctul de vedere al abundenei numerice a indicatorilor bacteriologici
igienico-sanitari pot fi stabilite clasele de calitate ale unei ape (tabel 2 i tabel 3).

Tabel 2. Stabilirea calitii sanitare a apei lacului de acumulare Secu pe baza indicatorilor
bacteriologici n anul 2009.
Perioda Parametrii Punctele de prelevare
de bacteriologici
prelevare (nr./ml.)
1 2 3 4 5 6 7
Coliformi totali 240 164 272 102 100 550 390
Primvara Coliformi fecali 48 39 200 48 76 42 285
Enterococi fecali 6 8 18 6 3 7 40
Clasa de calitate III III III III II III III
Coliformi totali 270 182 242 98 99 575 357
Coliformi fecali 52 39 211 51 78 49 290
Vara Enterococi fecali 2 7 12 9 4 6 15
Clasa de calitate III III III II II III III
Coliformi totali 320 210 310 87 100 610 440
Coliformi fecali 67 51 261 64 88 74 324
Toamna Enterococi fecali 5 10 11 6 2 5 36
Clasa de calitate III III III II II III III
1= Baraj Nord; 2= Baraj Centru; 3= Baraj Sud; 4= Mijloc Nord; 5= Mijloc Centru; 6= Mijloc Sud; 7= Coada lac

Tabel 3. Stabilirea calitii sanitare a apei lacului de acumulare Vliug pe baza

indicatorilor bacteriologici n anul 2009
Perioda Parametrii Punctele de prelevare
de bacteriologici
prelevare (nr./ml.)
1 2 3 4 5 6 7
Coliformi totali 110 142 98 85 91 118 389
Primvara Coliformi fecali 54 64 28 38 67 96 112
Enterococi fecali 15 19 8 12 20 37 21
Clasa de calitate III III II II II III III
Coliformi totali 156 165 103 90 102 120 420
Coliformi fecali 65 67 37 46 70 100 128
Vara Enterococi fecali 12 20 10 18 21 45 26
Clasa de calitate III III III II III III III
Coliformi totali 180 178 123 120 112 145 560
Coliformi fecali 68 71 44 58 81 109 148
Toamna Enterococi fecali 19 24 10 12 28 35 22
Clasa de calitate III III III III III III III
1= Baraj Nord; 2= Baraj Centru; 3= Baraj Sud; 4= Mijloc Nord; 5= Mijloc Centru; 6= Mijloc Sud; 7= Coada lac
 Pentru lacul de acumulare Secu dar i pentru lacul de acumulare Vliug, n anul 2009
calitatea sanitar a apei a fost de categoria III (poluat) n majoritatea punctelor studiate.

VII. DETERMINAREA GRADULUI DE POLUARE A APEI PRIN

DIFERITE TESTE ECOTOXICOLOGICE

VII. 1. Testul ecotoxicologic de determinare a polurii - testul de bioluminiscen

Vibrio fischeri.
Pentru a evidenia ncrctura cu poluani chimici a apelor celor dou lacuri de acumulare
Secu i Vliug a fost aplicat acest test de bioluminescen cu bacteria Vibrio fischeri, conform
SR EN ISO11348-1.
Pentru acesta s-au utilizat medii de cultur lichide speciale n care a fost inoculat specia
bioluminescent Vibrio fischeri (Fig. 41). Aceasta a fost incubat, apoi diferite concentraii din
apele de testat au fost adugate, iar luminescena a fost msurat cu ajutorul bioluminometrului.
Pentru testarea luminescenei este nevoie de cel puin doi poluani chimici la care s se
fac raportarea rezultatelor. Astfel au fost realizate dou curbe de inhibiie pentru dou metale
grele (crom i zinc). Prima curba de inhibiie s-a realizat pentru crom utiliznd K2Cr2O7. Acest
compus chimic este frecvent utilizat n protocolul SR EN ISO11348-1, de testare a unor ape
ncrcate asupra luminescenei la Vibrio fischeri.

Fig. 41. Vibrio fischeri pe mediu de cultur lichid n lumin normal i n ntuneric.

Pe baza valorilor citite la bioluminometru la expunerea de 15 i respectiv 30 de minute a

bacteriei Vibrio fischeri cu cromul (mg/l) (K2Cr2O7) s-a realizat curba de inhibiie determinnd
astfel procentul efectului inhibitor (Fig. 42).
 90
80
70

Efectul inhibitor (%)

y = 7.175x - 9.331
60
50
40 y = 7.663x - 9.517
Ht 15
30
Ht 30
20
10
0
-10 0 2 4 6 8 10 12
-20
K2Cr2O7 (mg/l)

Fig. 42. Curba de inhibiie a K2Cr2O7 utilizat n protocolul de testare a apei celor dou lacuri de
acumulare asupra luminescenei la Vibrio fischeri.

A doua curb de inhibiie s-a realizat pentru zinc utiliznd ZnSO4. Acest compus chimic
este la fel de frecvent utilizat n protocolul SR EN ISO11348-1, de testare a unor ape ncrcate
asupra luminescenei la Vibrio fischeri. Pe baza valorilor citite la bioluminometru la expunerea
de 15 i respectiv 30 de minute a bacteriei Vibrio fischeri cu zincul (mg/l) (ZnSO4) s-a realizat
curba de inhibiie determinnd astfel procentul efectului inhibitor (Fig. 43).

100
y = 2.628x - 0.748
80
Efectul inhibitor (%)

60 Ht 15
Ht 30
40
y = 2.064x - 2.678
20

0
0 10 20 30 40
-20 ZnSO4 x 7H20 (mg/l)

Fig. 43. Curba de inhibiie a ZnSO4 utilizat n protocolul de testare a apei celor dou lacuri de
acumulare asupra luminescenei la Vibrio fischeri.

Pe baza valorilor i a curbelor de inhibiie obinute se poate afirma c aceste substane de

referin (K2Cr2O7 i ZnSO4 x 7H2O) utilizate n acest test sunt conforme i se ncadreaz n
limitele admise ale standardului SR EN ISO11348-1.
Ulterior s-a trecut la testarea propriu-zis a probelor de ap provenite din cele dou lacuri
de acumulare Secu i Vliug. La fel ca i pentru substanele de referin i pentru aceste probe
de ap expunerea s-a realizat tot la 15 i respective 30 de minute.
 Dup expunerea de 15 minute respective dup 30 de minute s-au citit unitile relative de
luminescen (URL) la bioluminometru.
Pe baza unitilor relative de luminescen (URL) nregistrate la luminometru s-au realizat
grafice unde se poate observa clar c aceste valori au fost relative mai sczute n lacul de
acumulare Secu (Fig. 44) comparativ cu lacul de acumulare Vliug (Fig. 45).

10000000 15 min

9000000

8000000

7000000

6000000
URL

5000000

4000000

3000000

2000000

1000000

0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Diluiile probelor de ap

Fig. 44. Unitile relative de luminescen ale tulpinii de Vibrio fischeri nregistrate la 15
minute de expunere n probele de ap din lacul Secu.
12000000
15 min

10000000

8000000
URL

6000000

4000000

2000000

0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Diluiile probelor de ap

Fig. 45. Unitile relative de luminescen ale tulpinii de Vibrio fischeri nregistrate la 15
minute de expunere n probele de ap din lacul Vliug.

Pentru interpretarea corect a testului de luminescen expunerea s-a prelungit la 30 de

minute i apoi s-au citit unitile relative de luminescen (URL) la bioluminometru.
 Pe baza unitilor relative de luminescen (URL) nregistrate la luminometru dup 30 de
minute de expunere s-au realizat grafice unde se poate observa c aceste valori au sczut puin
att n lacul de acumulare Secu (Fig. 46) ct i lacul de acumulare Vliug (Fig. 47).

8000000 30 min

7000000

6000000

5000000
URL

4000000

3000000

2000000

1000000

0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Diluiile probelor de ap

Fig. 46. Unitile relative de luminescen ale tulpinii de Vibrio fischeri nregistrate la 30
minute de expunere n probele de ap din lacul Secu.

Comparnd rezultatele dintre cele dou lacuri, dup 30 de minute de expunere, se constat
i de acest dat c n lacul de acumulare Secu aceste valori au fost relativ mai sczute
comparativ cu lacul de acumulare Vliug.

9000000 30 min

8000000

7000000

6000000

5000000
URL

4000000

3000000

2000000

1000000

0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Diluiile probelor de ap

Fig. 47. Unitile relative de luminescen ale tulpinii de Vibrio fischeri nregistrate la 30
minute de expunere n probele de ap din lacul Vliug.

Totui aceste rezultate obinute ne indic o absen a polurii cu substane chimice

periculoase att n lacul de acumulare Secu ct i lacul de acumulare Vliug. Datorit
proprietilor sale, Vibrio fischeri a ajuns s fie folosit n teste de ecotoxicitate la fel ca i
bacteria luminiscent Photobacterium phosforeum care este folosit pentru evaluarea apelor,
apelor menajere i apelor uzate menajere n standardul german din 1992 DIN 38412 Part 341
(Hoffmann i colab., 2003).
Valorile celor dou substane de referin utilizate (K2Cr2O7 and ZnSO4 x 7H2O) au fost
n limitele admise de standardul SR EN ISO11348-1.
Rezultate obinute indic absena polurii cu substane chimice periculoase att n lacul de
acumulare Secu ct i lacul de acumulare Vliug.

VIII. MONITORIZAREA I EVALUAREA CALITII APEI CELOR

DOU LACURI DE ACUMULARE SECU I VLIUG

n vederea monitorizrii i evalurii calitii apei celor dou lacuri de acumulare Secu i
Vliug, care alimenteaz oraul Reia cu ap potabil trebuie luate n considerare urmtoarele
aspecte:
* Dragarea periodic a lacurilor reprezint o soluie eficient pentru a ntrzia
succesiunea lacului, ordinea n timp a ecosistemului acvatic, pstrarea climaxului. Direcia de
succesiune a biocenozelor depinde de raportul dintre acumularea i difuzarea energiei n mediul
exterior.
* Stoparea defririlor n perimetrul lacurilor i n afara perimetrului lacului. Tierea
pdurii de pe versanii lacurilor produc printre alte daune ecologice cunoscute i rumegu.
Rumeguul mpreun cu gunoaiele din sursele antropice (cabane, pensiuni, restaurante, scurgeri
de canalizare, turiti necivilizai) i alte substane organice din covorul vegetal ptrunse n
bazinele acvatice determin, ca efecte generale, scderea concentraiei oxigenului dizolvat,
proliferarea microorganismelor patogene i a celor saprofite, mrirea turbiditii apei, afecteaz
organismele acvatice filtratoare, mpiedic respiraia petilor prin colmatarea branhiilor, acoper
unele specii bentonice de pe substrat i le provoac moartea.
* Sensibilizarea i contientizarea autoritilor locale pentru monitorizarea i
conservarea acestor ecosisteme valoroase att pentru mediu dar mai ales pentru sntatea
populaiei.
* Respectarea perimetrelor de protecie a acestor lacuri i un studiu mai atent asupra
eliberrii de autorizaii de construcie pentru proiectele care nu se ncadreaz n legislaia de
mediu.
 * Cel mai important dar n acelai timp cel mai vulnerabil l constituie aplicarea
legislaiei de mediu. Legislaia european i cea adaptat pentru specificul rii noastre exist i
este bun dar aa cum am artat i n capitolele anterioare, grupurile de interese asociate dup
organizare mafiot cu filiere politice transpartinice aplic legea discreionar pentru propriile
interese cu consecine dezastruoase. Dac legile se vor respectata ad literam problemele
polurii cu toat avalana negativ s-ar reduce considerabil pn la limitele de autoreglare i
autoremediere natural a acestor valoroase ecosisteme.
* Pentru asigurarea calitii apei potabile a oraului Reia i protecia infrastructurii se
impune n primul rnd protecia surselor de ap (lacurile de acumulare Secu i Vliug),
respectarea etapelor de curare i igienizare a apei, meninerea funcional a sistemului de
distribuie a apei potabile la populaie.
* Conform planului de siguran al apei potabile i recomandrile Organizaiei Mondiale
a Sntii se impune o monitorizare permanent a parametrilor fizico-chimici i microbiologici
impui de legislaie, pentru a preveni eventualele riscuri legate de prezena unor germeni
patogeni.

CONCLUZII GENERALE

Acest studiu realizeaz pentru prima dat un studiu complex de ecologie microbian a
lacurilor de acumulare Secu i Vliug. Principalele obiective de cercetare au constat n stabilirea
strii ecologice a apei i sedimentului (prin determinarea grupelor ecologice de bacterii), a strii
igienico-sanitare a apei (prin determinarea indicatorilor bacteriologici), determinarea activitii
enzimatice a sedimentului celor dou lacuri de acumulare (prin analiza cantitativ a patru
activiti enzimatice i analiza calitativ a nou activiti enzimatice), studiul efectului polurii
apelor asupra creterii i viabilitii tulpinii de Vibrio fischeri, n vederea determinrii
impactului polurii mixte asupra populaiilor bacteriene i a eventualelor riscuri asociate cu
acestea, asupra sntii populaiei ca urmare a utilizrii apei n mod neadecvat.
Grupele ecofiziologice de bacterii. Microorganismele din ciclul bacterian al azotului i
al fierului studiate n aceast lucrare au fost determinate cantitativ att n probele din lacul de
acumulare Secu ct i n probele din lacul de acumulare Vliug. Substanele organice dizolvate
n ap i temperatura i au un rol important n dezvoltarea populaiilor microbiene, influennd
valorile numerice nregistrate pe parcursul celor doi ani de recoltare a probelor.
 Grupele ecofiziologice de bacterii studiate (bacterii heterotrofe aerobe - BHA, bacterii
amonificatoare - BAM, nitrit- NiB i nitrat-bacterii - NaB, bacterii denitrificatoare BDN i
bacterii fier-reductoare FeR) au prezentat variaii cantitative n funcie de anul de prelevare i
de punctele de prelevare a probelor. Valorile crescute caracterizeaz sezoanele calde de var
cnd au fost prelevate probele, cauzele fiind temperaturile din aceste sezoane ale anului i
aportul crescut de materie organic de natur vegetal i animal.
Bacteriile din cele 6 grupe ecofiziologice studiate au prezentat o abunden numeric
diferit n funcie de grup astfel: BHA 107108 celule, BAM s-au regsit n medie n numr de
105106 celule, NiB n numr de 102 celule, NaB n numr de 103, BDN 104105 celule, iar
bacteriile FeR 102103 celule. Dintre bacteriile implicate n circuitul biologic al azotului cel mai
bine reprezentate numeric au fost BAM, iar n cel mai mic numr s-au regsit NiB.
Valorile IBCA au prezentat fluctuaii n funcie de punctele de prelevare. Cele mai
crescute valori ale IBCA au fost consemnate n punctele de prelevare Mijloc Sud (IBCA=
4,251), respectiv, coada lacului pentru lacul de acumulare Secu (IBCA=4,213). Pentru lacul de
acumulare Vliug valorile maxime ale IBCA au fost nregistrate n punctele de prelevare Baraj
Centru (IBCA=4,952). Valorile IBCA scad n punctele situate nspre coada lacului Vliug.
Activitile enzimatice - determinate din sedimentele celor dou lacuri de acumulare
Secu i Vliug constituie un instrument eficient de evaluare a diversitii microbiotei implicate
n ciclurile biogeochimice al elementelor. Cunoaterea intensitii activitii enzimatice
reprezint o nou i important metod de cercetare n cadrul proteciei apelor, permind
caracterizarea gradului de impurificare a ecosistemelor acvatice, respectiv, ofer posibilitatea de
a menine calitatea apei n limite bune sau chiar foarte bune.
Activitile enzimatice cantitative: activitatea dehidrogenazic actual (ADA), activitatea
dehidrogenazic potenial (ADP), activitatea fosfatazic (AF) i activitatea catalazic (AC) au
prezentat variaii ale intensitii lor n funcie de sezon respectiv, de punctul de prelevare a
probelor. n funcie de punctele de prelevare intensitatea activitilor enzimatice difer n funcie
de tipul enzimei studiate.
Valorile IECS au prezentat fluctuaii n funcie de punctele de prelevare. Cele mai
crescute valori ale IECS au fost consemnate n punctele de prelevare Mijloc Sud 0,246, pentru
lacul de acumulare Secu. Pentru lacul de acumulare Vliug valorile IECS nregistrate n
punctele de prelevare au fost mult mai crecute comparativ cu cele nregistrate n lacul Secu.
Analizele enzimatice calitative a enzimelor studiate prezint variaii de intensitate, n
funcie de enzima studiat i de punctele de colectare.
 Activitatea oligazelor (maltaza, zaharaza, lactaza i celobiaza) a fost semnificativ n
toate probele de sedimente analizate n cazul ambelor lacuri de acumulare Secu i Vliug,
judeul Cara -Severin.
Activitatea poliazelor (amilaza, dextranaza, glicogenaza, celulaz i inulinaza) arat
prezena acestora n aproape toate punctele de prelevare, cu excepia activitii glicogenazei.
Indicatorii bacteriologici igienico-sanitari studiai au fost reprezentai de germenii
coliformi totali, coliformi fecali, respectiv grupul enterococilor fecali. Fiecare din grupele
studiate a prezentat oscilaii sezoniere i oscilaii numerice n funcie de punctele de prelevare a
probelor. Valorile crescute ale acestor indicatori sunt caracteristice sezonului de var atunci
cnd temperaturile mai crescute ale apei favorizeaz dezvoltarea i activitatea
microorganismelor. Valorile indicatorilor bacteriologici igienico-sanitari sunt mai crescute n
cazul punctelor de prelevare situate pe partea nordic i sudic dar i la coada lacurilor datorate
influenelor antropice i ale urbanizrii. Natura polurii fecaligene n apele celor dou lacuri de
acumulare a fost stabilit pe baza raportului CF/EF.
Din punct de vedere al stabilirii calitii sanitare apa lacului de acumulare Secu se
ncadreaz n clasa III de calitate sanitar (poluat) n majoritatea seciunilor. Doar n punctele
4= Mijloc Nord i 5= Mijloc Centru, calitatea sanitar a apei a fost ncadrat la clasa II uor
poluat.
Calitatea sanitar a apei lacului de acumulare Vliug se ncadreaz n clasa III de calitate
sanitar (poluat) n toate seciunile luate n studiu. Asupra acestui lac de acumulare i-a pus
amprenta tot mai mult antropizarea, acest lucru fiind reflectat i de poluarea fecaligen
nregistrat n toate seciunile studiate.
Prelucrarea statistic demonstreaz existena in cele dou lacuri de acumulare a unor
legturi funcionale ntre indicatorii igienico-sanitari studiai. Corelaiile semnificative s-au
stabilit ntre cele trei grupe de bacterii igienico-sanitare, iar ntre acestea i indicatorii fizico-
chimici cele mai puternice corelaii au fost cu cantitatea de substan organic, temperatur i
oxigen dizolvat (dar n acest caz corelaia a fost negativ.)
Poluarea apei celor dou lacuri de acumulare Secu i Vliug cu ape uzate menajere
influeneaz negativ calitatea apei avnd un efect inhibitor asupra activitii i dezvoltrii
microbiene.
Testarea ecotoxicologic cu Vibrio fischeri. Bioluminiscena bacterian, prezent la
speciile Vibrio sp. i Photobacterium sp., reprezint expresia respiraiei celulare, de aceea
factorii fizico-chimici i biologici care afecteaz integritatea celular afecteaz i luminiscena
emis de acestea. Msurarea luminiscenei bacteriene reprezint astfel, o tehnic important,
sensibil i rapid pentru evaluarea toxicitii apei.
 Valorile celor dou substane de referin utilizate (K2Cr2O7 and ZnSO4 x 7H2O) au fost
n limitele admise de standardul SR EN ISO11348-1.
n urma analizei probelor de ap din lacul Secu i Vliug privind luminiscena tulpinii de
Vibrio fischeri nregistrate la 15 minute de expunere s-au nregistrat un maxim de uniti
relative de luminescen de 12000000 URL pentru Vliug i 10000000 URL pentru Secu.
La 30 de minute de expunere a tulpinii Vibrio fischeri la probele de ap din lacurile de
acumulare Secu i Vliug s-a constatat o reducere a unitilor relative de luminescen la
8000000 URL pentru probele de ap din lacul Secu i 9000000 URL pentru probele de ap din
lacul Vliug.
Rezultate obinute indic absena polurii cu substane chimice periculoase att n lacul
de acumulare Secu ct i lacul de acumulare Vliug.
Testul de bioluminescen este forte sensibil la concentraii mici de compui toxici
prezeni n mediu. Se pare c pentru poluarea antropic acest test nu poate fi aplicat.
Concluzia final. Rezultatele obinute n cadrul acestei teze de doctorat evideniaz
starea actual a apelor celor dou lacuri de acumulare (Secu i Vliug) sub influena factorilor
antropici care acioneaz cumulat modificnd calitatea bazinului hidrografic n special n
sectoarele expuse polurii antropice.
Influena antropic generat n principal de turism i exploatrile forestiere influeneaz
evident i negativ ecosistemele valori semnificativ mari ale densitilor bacteriilor igienico-
sanitare nregistrndu-se n zonele populate de oameni (mal sudic Secu, mal estic Vliug).
Comparnd cele dou lacuri ntre ele pe baza datele igienico-sanitare i fizico-chimice,
se constat c lacul Secu are o ncrctur bacterian mai mare pentru toate grupele de bacterii,
iar ca o constatare general se poate spune c lacul Vliug din amonte este mai curat dect
lacul Secu din aval.
Concluzia este c cele dou lacuri de acumulare Secu i Vliug trebuie s fie foarte bine
conservate i pstrate, i de asemenea trebuie permanent supravegheate i monitorizate,
deaoarece sunt ape destinate potabilizrii. De reducerea polurii antropice n jurul i n cadrul
ecosistemului acvatic monitorizat al celor dou lacuri de acumulare Secu i Vliug depinde
potenialul ecologic al acestora.
 BIBLIOGRAFIE SELECTIV

Baums, I.B., Goodwin, K.D., Kiesling, T., Wanless, D., Diaz, M.R., Fell, J.W., 2007, Luminex detection
of fecal indicators in river samples, marine recreational water, and beach sand. Marine Pollution
Bulletin, 54(5): 521-536.
Burian, P.,2002, Lacul de acumulare-analiza biologic[The Storage Lake: Biological Analysis],
University Press, Edit.Universitii de Medicin i Farmacie, Trgu-Mure, p.117
Carpa R., Drgan-Bularda M., 2008, Oligase and polyase activities in various type of soils from Parng
mountains. Studia Universitatis Babe-Bolyai, Biologia, L II(1):91- 101.
Carpa R., Drgan-Bularda M., Muntean V., 2014, Microbiologie General, Lucrri practice, Ed. Presa
Univ. Clujean, Cluj-Napoca.
Cua, V., 1996, Instruciuni metodologice pentru analiza microbiologic a sedimentelor din ecosistemele
acvatice, Inst. Cercet. Ing. Mediului, Bucureti, 4, p.14-20.
Cua, V., Astratinei, V., 1996, Cercetri privind evoluia calitii bacteriologice a apei lacurilor de pe
valea rului Colentina, n zona municipiului Bucureti. Hidroelectrica, 41, p. 21-27.
Drgan-Bularda, M., 2000, Microbiologie general, Lucrri practice, Cluj-Napoca.
Fetke R., Carpa, R., Drgan-Bularda M., 2013, Enzymatic activities in sediments from Secu and Valiug-
Gozna dam reservoirs, Cara-Severin, Romania. ELBA Bioflux 5(2):93-102.
Hoffmann, C., Sales, D., Christofi, N., 2003, Combination ecotoxicity and testing of common chemical
discharges to sewer using the Vibrio fischeri luminiscence bioassay, Int. Microbiol., 6, 41-47.
Jones, J.G., 1979, Microbial Nitrate Reduction in Freshwater Sediments. Journal of General
Microbiology, 115, p. 27-35.
Kenneth, T., 2003, Procaryotes in the environment and major groups of prokaryotes. In: Bacteriology
303 Main Page, University of Wiskonsisn-Madison (ed.), Department of Bacteriology.
Lumperdean, M., Drgan-Bularda, M., 2006, The quantitative distribution of some ecological groups of
bacteria from the Tarnia dam reservoir Cluj county. Studia. Univ. Babe-Bolyai, Biologia, Cluj-
Napoca, 50(1): 109-118.
Madigan, M. T., Martinko, J.M., Parker, J., 2000, Brock Biology of Microorganisms. 9th ed. Prince-
Hall, Inc., Englewood Cliffs, New Jersey.
Muntean,V., Crian,R., Paca,D., Kiss, S., Drgan-Bularda,M., 1996, Enzymological classification of
salt lakes in Romania, Kluwer Academic Publishers, Netherlands, Internat.J. Salt Lake Res.,5
Muntean,V., tef, L.C., Drgan-Bularda, M., 2004, Cercetri enzimologice asupra unor sedimente din
Rul Mure, Romanian Biological Sciences I
Muntean,V., Paca, D., Crian, R., Influence of substrateand final reaction product on synthesis and
activity of phosphatase in a salt lake sediment, Stud.Univ.Babe-Bolyai,Biol.,Cluj-Napoca,44(1-2)
Muntean, V., Crian, R., Paca, D., 2001, Cercetri enzimologice asupra nmolului din balta srat
Alunei Trnaveni. Studii i Cercetri, Biologie (Bistria), 6, p. 7-12.
Muntean, V., tef, L.C., Drgan-Bularda, M, 2005, Cercetri microbiologice asupra unor sedimente de
pe cursul mijlociu al rului Mure, Studia Universitatis Babe-Bolyai, Biologia, L, 2, p.175-181.
Pop, I., 1977, Biogeografie ecologic. Editura Dacia, Cluj-Napoca
Zarnea, G., 1994, Tratat de Microbiologie general. Vol. V: Ecologia microorganismelor. Ed. Acad.
Rom., Bucuresti,
European Parliament and of the Council, Directive 2000/60/EC of the European Parliament and of the
Council of 23 October 2000
STAS 3001-91, Apa-analiza bacteriologic.
European Parliament and of the Council, Directive 2000/60/EC of the European Parliament and of the
Council of 23 October 2000
SR EN ISO11348-1.:1999 Water quality. Determination of the inhibitory effect of water samples on the
light emission of Vibrio fischeri (Luminescent bacteria test). Method using freshly prepared
bacteria
SR EN 2852/1994, Ap potabil. Prelevarea, conservarea, transportul, pstrarea i identificarea probelor.
SR ISO 10523/1997, Calitatea apei. Determinarea pH-ului.
SR EN 25813/2000, Calitatea apei. Determinarea coninutului de oxigen dizolvat. Metoda iodometric.
SR EN 1889-1/2003 Calitatea apei. Determinarea consumului biochimic de oxigen dup n zile (CBOn).
Partea 2: metode pentru probe nediluate.
SR EN 2788 ISO 7888/1997 Calitatea apei. Determinarea conductivitii electrice.
SR ISO 7150-1/2001 Calitatea apei. Determinarea coninutului de amoniu. Metoda spectrofotometric.
SR ISO 7890-1/1998. Calitatea apei. Determinarea azotailor
SR ISO 3048-2/1996). Ap potabil. Determinarea coninutului de nitrii. Metoda prin spectrometrie de
absorbie molecular.
SR ISO 6332/1996 Calitatea apei. Determinarea coninutului de fier. Metoda spectrometric cu 1,10-
fenantrolin.
SR EN ISO11348-1:1999 Water quality. Determination of the inhibitory effect of water samples on the
light emission of Vibrio fischeri (Luminescent bacteria test). Method using freshly prepared
bacteria
SR EN ISO 11348-1:2003 Calitatea apei. Determinarea efectului inhibitor a probelor de ap asupra
luminiscenei de Vibrio fischeri (Testul cu bacterii luminiscente). Partea 1: Metoda cu bacterii
proaspt preparate
 LISTA DE LUCRRI TIINIFICE PUBLICATE
din domeniul tezei de doctorat

I. Articole publicate n reviste BDI, categ. B+ i alte categ. recunoscute CNCS

1. FETKE R., Carpa R., Drgan-Bularda M., 2015, Sanitary parameters of water from Secu
and Vliug dam reservoirs, Cara-Severin county, Romania., Analele Universitii Oradea, Fascicula
Biologie, Tom. XXII, 2, 63-69.
2. FETKE R., Carpa R., Drgan-Bularda M., 2014, Forms of water pollution short
review, Studii si Cercetari, Biology, 19, 99-111.
3. FETKE R., Carpa R., Drgan-Bularda M., 2013, Enzymatic activities in sediments
from Secu and Vliug-Gozna dam reservoirs, Cara-Severin, Romania. ELBA Bioflux 5(2):93-
102.
4. FETKE R., Carpa R., Drgan-Bularda M., 2011, Research on the qualitative enzymatic
activities in sediments from Secu and Gozna-Vliug dam reservoirs, Cara-Severin county
(Romania), ELBA, Bioflux, 67-76.

II. Abstracte publicate n volumele conferinelor internationale (ISI)

1. Maior M.C., Carpa R., FETKE R., Muntean V., 2014, Determination of the inhibitory
effect of water samples on the light emission of Vibrio fischeri, p. 525, FEBS Journal 281
(Suppl. 1) 65784.

III. Participri la conferine internaionale i naionale

1. Maior M.C., Carpa R., FETKE R., Muntean V., 2014, Determination of the inhibitory
effect of water samples on the light emission of Vibrio fischeri, prezentare poster, FEBS-EMBO
Conference, Paris, Frana, 30 aug. - 4sept., poster.
1. FETKE R., Carpa R., Drgan-Bularda M., 2011, Date privind potenialul enzimatic al
lacurilor de acumulare Secu i Vliug, jud. Cara-Severin, prezentare oral, Sesiunea Anual de
Comunicri tiinifice Complexul Muzeal, Bistria-Nsud, 11-12 noiembrie 2011.
2. FETKE R., Carpa R., Drgan-Bularda M., 2010, Influene antropice asupra
potenialului microbian i enzimatic din lacurile Secu i Vliug, jud. Cara-Severin, prezentare
oral Sesiunea Anual de Comunicri tiinifice Complexul Muzeal Bistria-Nsud, 26-27
noiembrie 2010.