Determinacin de Na en leche comercial mediante

Espectroscopia de Emisin Atmica

Sodium determination in commercial milk by Atomic

Emmision Spectroscopy

Determinao de Na em leite comercial por Espectroscopia

de Emisso Atmica
Adriana Liceth Rodrguez a & Vctor Alfonso Nio Ramrez a
a
Facultad de Ciencias, Departamento de Qumica. Universidad Nacional de Colombia, Colombia.

Resumen
La determinacin de sodio en leche se realiz utilizando la tcnica elemental denominada Espectroscopia de Emisin
Atmica de llama (FES) fundamentada en la emisin espectral de sodio (Na) a 589 nm. El origen de las muestras
evaluadas fueron dos marcas comerciales de leche lquida descremada Carulla y Alquera, las cuales segn los
resultados experimentales obtenidos tiene una diferencia 331 y 297 ppm respectivamente por encima de la
concentracin reportada por el fabricante. Por otro lado el efecto como agente supresor de ionizacin del CsCl al
0.1% solo pudo ser comprobado en las curvas de calibracin.

Palabras clave: emisin espectral, agente supresor de ionizacin, tcnica elemental

Introduccin hacer una medida y control de los minerales

El Sodio (Na) es un elemento esencial de
nuestro organismo, el cual, en una medida
promedio de composicin elemental en
cuerpo humano (adulto, 70 kg), es de 100
g, donde la recomendacin dietaria para
adultos e infantes es de 1200-1300 mg y
120-370 mg respectivamente (1). La razn
de su importancia es debido al rol
fundamental que cumple en los gradientes
de concentracin osmtica de electrolitos
en las clulas y en la transmisin de los
impulsos nerviosos. Por tal razn, es
necesario que se consuma este elemento
esencial en la dieta, siendo la leche una
buena fuente tanto de iones Ca2+ como de
iones Na+. Dado lo anterior es conveniente
1
que se encuentran en la leche que se
consume diariamente y si los productores
realmente proporcionan informacin
fidedigna de su concentracin en las cartas
nutricionales que se proporcionan junto con
el producto.La espectrofotometra de
emisin atmica por llama (EEA) es una
tcnica elemental que permite realizar una
medida cuantitativa de distintos elementos
presentes en una muestra gracias a que los
tomos en estado elemental, en presencia
de una fuente que les permita alcanzar un
estado energtico mayor al basal, sus
electrones son excitados. (fig. 2). Los
tomos regresan nuevamente a su estado
basal con rapidez, emitiendo su espectro de
lneas caracterstico, el cual es nico,
haciendo las veces de huella dactilar propia
del elemento (fig. 3) (2)
a) Fig. 2. Excitacin del elemento en la llama (2)
b) Fig. 3. Emisin caracterstica por decaimiento (2)
Puesto que la intensidad de la seal emitida
es proporcional a la concentracin del
elemento, se puede cuantificar la
concentracin en una muestra problema
mediante curva de calibracin de
concentracin conocida del analito a
analizar.
Mediante un equipo apropiado, se puede
succionar la muestra hasta un dispositivo,
conocido como mechero premezcla que
permite realizar tres pasos bsicos para
poder obtener la seal de emisin del
elemento: de solvatacin, volatilizacin y
atomizacin del analito. Gracias a que se
llega a una temperatura en la que el sodio,
que es el analito de inters para la muestra
de leche, se encuentra en su estado atmico,
alcanza un nivel energtico ms alto y
emite su espectro de lneas caracterstico, el
cual ser dispersado por el monocromador
a fin de escoger una sola lnea de emisin
espectral y finalmente esta es detectada por
un fotomultiplicador (fig. 3)
A temperatura ambiente todos los tomos
de una muestra estn esencialmente en el
2
Fig. 3 Esquema bsico de un equipo de Espectroscopia de
emisin atmica.
estado basal. El paso para que un electrn
pase a orbitales superiores se da gracias a la
llama del mechero que proporciona una
energa adecuada para que el electrn pase
a dicho estado excitado. Cuando decae
nuevamente el electrn a su estado basal
produce emisin de fotones. Las lneas de
589.0 y 589.6 nm son las ms intensas y a
ellas se debe al color amarillo que aparece
cuando hay presencia de sodio en sales o
muestras (3). Por tal motivo debe escogerse
la lnea espectral ms intensa y limpia
posible de toda interferencia espectral a fin
de lograr la mejor sensibilidad. A fin de
ayudar a que se obtenga el tomo en su
estado elemental es necesario disminuir el
efecto de interferencia por ionizacin, a fin
de que se tenga la seal ms intensa posible
ya que los iones exhiben propiedades
espectroscpicas diferentes a un tomo
neutro y no pueden ser determinados por
espectroscopia de absorcin atmica. (4).
Para este fin debe agregarse una sal alcalina
que tenga un potencial de ionizacin menor
que el del analito, de tal forma que esta se
ionice ms fcilmente que el analito de
inters, aportando una concentracin
relativamente alta de electrones a la llama
de tal suerte que desplace el equilibrio de
ionizacin hacia la izquierda, permitiendo
que el tomo de inters se mantenga en su
estado elemental.
+ como en el apartado anterior las muestras
Puesto que es un anlisis cuantitativo, a fin
de disminuir cualquier tipo de de variacin
entre las debe trabajarse bajo las mismas
condiciones instrumentales e igual
composicin de reactivos. Esto garantiza
menor error y mayor similitud entre las
condiciones qumicas de la curva y de la
muestra a analizar.
Materiales y mtodos
Elaboracin de curva de calibracin.
La solucin estndar fue preparada con
NaCl diluido en agua desionizada, con el
objetivo de obtener una concentracin de
1000 ppm de ion Na, a partir de esta
solucin stock se realiz una dilucin de
100 veces, logrando as, una concentracin
de 10 ppm y finalmente partiendo de esta
solucin se realizaron seis puntos de
calibracin de las siguientes
concentraciones 0.1, 0.2, 0.5, 1 y 2 ppm.
En el diseo experimental se tuvo como
objetivo evaluar la influencia del CsCl
como agente supresor de ionizacin en la
determinacin de Na, por lo tanto, se
realizaron dos curvas de calibracin; una
sin CsCl y otra con 0.1% CsCl, en ambos
casos se utiliz las concentraciones de
patrones ya relacionadas.
Preparacin de la muestra.
Se analizaron dos marcas comerciales de
leche Leche descremada Carulla y
Leche sin grasa Alquera denotadas A y
B respectivamente, la muestra fue diluida
3
625 veces con agua desionizada y
solubilizada en un bao de ultrasonido,
fueron preparadas sin y con 0.1% de CsCl
en cada caso por triplicado.
Anlisis espectrofotomtrico.
Los estndares y muestras fueron
analizados en un espectrofotmetro de
absorcin atmica AA 300 aanalyst modelo
300 Perkin Elmer, configurado en la seal
tipo emisin, la llama fue de Aire/Acetileno
a un flujo de 10/3 L/min respectivamente,
los anlisis fueron evaluados a una longitud
de onda analtica de 589.0 nm y un slit de
0.20 nm y un detector fotomultiplicador de
amplio rango con ventana de transmisin
UV.
Una vez la curva de calibracin fue corrida
en el equipo, se procedi al anlisis de las
muestras, tanto con adicin de CsCl 0.1% y
sin CsCl a fin de determinar el efecto
cuando se agrega un supresor de
ionizacin. Los anlisis se realizaron en dos
tiempos diferentes, en el primero se corri
la curva de calibracin sin CsCl y seguido
a esto se analizaron las muestras sin CsCl
de las dos marcas de leche comercial ya
mencionadas, los anlisis con CsCl no fue
posible correrlos debido a que el acetileno
se agot y se apag la llama, por lo tanto,
solo fue posible evaluar tres puntos de la
curva de calibracin. Debido a lo anterior
fue necesario realizar nuevamente los
anlisis experimentales en los cuales solo
se evalu la leche comercial Leche
descremada Carulla en las dos
modalidades de anlisis con CsCl y sin
CsCl. En el segundo momento de anlisis
slo fue evaluada la marca comercial
leche descremada Carulla en las dos
modalidades. A fin de aclarar la
nomenclatura relacionada en la seccin de
resultados y discusin (figura 4) se
denomina CsCl-1 al anlisis realizado en el
primer momento, CsCl-2 corresponde al
anlisis realizado siete das despus con las
mismas soluciones de calibracin y los
prefijos sin y con hacen referencia a la
ausencia o presencia de CsCl en el anlisis.
RESULTADOS Y DISCUSIN
En la figura 4 se relaciona los resultados
experimentales para las curvas de
calibracin de Na, en el que se destaca, que
en ambos momentos de medida, es decir en
la primera medida realizada y la medida
realizada siete das despus, los ensayos
mostraron el efecto que el CsCl al 0.1%
tiene en el aumento de la absorbancia, pues
en el caso que es incluido dicha sal
inorgnica la absorbancia se incrementa en
comparacin con los ensayos en no es
incluido, indicando que el Cs cumple la
funcin de supresor de ionizacin,
manteniendo al Na en su forma elemental
para poder llevar a cabo el fenmeno de
emisin, energa que ser despus
detectada y representada por la absorbancia
que se relaciona directamente con la
concentracin por medio de la ley de
Lambert-Bouguer-Beer.
A si mismo en la tabla 1 se encuentran los
valores que corresponden a las regresiones
lineales de las curvas CsCl fue de 0.99 en
ambos casos, coeficiente que evidencia la
correlacin lineal que se obtuvo entre los de
calibracin de la figura. 4, en donde el
ensayo con CsCl-1 no es reportado, debido
a que la corrida de la curva de calibracin
fue interrumpida como fue mencionado
anteriormente y los puntos medidos no son
suficientes para generar una curva de
calibracin que permita comparar con los
resultados para el ensayo Sin CsCl. En este
punto se mencionar que el coeficiente de
correlacin lineal para los tratamientos sin
datos, por lo tanto, a este mtodo es
aplicable la ley de Beer. Por el contrario, el
ensayo con CsCl presenta un coeficiente de
correlacin de 0.97, lo que evidencia una
mayor dispersin en los datos y por tanto
un mayor error al momento en que el
equipo interpola para determinar la
concentracin de la muestra y en trminos
analticos no es representativo.
Por otro lado, al evaluar la sensibilidad de
calibracin en los ensayos CsCl-1 y CsCl-2
que corresponde a la pendiente de la recta
de calibracin, indica la variacin de la
respuesta producida por unidad de
variacin de concentracin del analito. [5]
Se puede observar en la tabla 1 que en los
ensayos realizados a los siete das CsCl-2
disminuye aproximadamente tres veces la
sensibilidad de la curva de calibracin. Este
comportamiento se puede atribuir al
cambio de condiciones instrumentales
como altura de la llama, flujos o cambios
estabilidad de la matriz y la curva de
calibracin. Sin embargo, lo anteriormente
mencionado debe ser verificado
nuevamente en el laboratorio.
Fig.4. Curvas de calibracin de Na ppm sin y con CsCl 0.1%; en
1 y 2 hace referencia a las repeticiones realizadas, la segunda fue
medida siete das despus del primer ensayo.
4
Tabla.1 Datos de lneas de tendencia de curvas de calibracin sin
detectado y que pudo involucrar
y con CsCl 0.1%; m (pendiente), b (intercepto), r2 (coeficiente microorganismos que aportes Na+, un agua
de correlacin lineal. 1 y 2 hace referencia a las repeticiones desionizada no conforme o un inapropiado
realizadas, la segunda fue medida siete das despus del primer
ensayo. anlisis y etiquetado en la leche comercial.
No obstante, para realizar esta afirmacin
Ensayo m b r2 es necesario confirmarlo con ms ensayos
de laboratorio siguiendo las directrices de
Sin CsCl-1 0,14 -2,4x10-3 0,99 una metodologa analtica para la
determinacin de Na en leche.
Sin CsCl-2 0,041 -2,6x10-3 0,99
Tambin es importante destacar que
tericamente la concentracin en ppm con
Con CsCl-1 N. A N. A N. A una muestra analizada con CsCl ser ms
alta que una que no contenga supresor de
ionizacin sin embargo este resultado
Con CsCl-2 0,047 7,1x10-3 0,97 terico no fue observado
experimentalmente en el segundo momento
de medida tal como se evidencia en la Tabla
Al contrastar los valores de sodio en leche 2 en donde la medida con CsCl es
de referencia y experimentales se aproximadamente dos veces menor que la
encuentran diferencias significativas (ver medida sin CsCl. Esto puede ser atribuido
Tabla 2) en donde la exactitud de la a que el CsCl puede alterar el sistema de
metodologa corresponde a la diferencia anlisis debido a que la segunda medida se
entre el valor de referencia y el valor realiz siete das despus, tiempo en el que
medido. Por ejemplo, al comparar el valor el CsCl pudo tener algn efecto en la matriz
de referencia de ambos fabricantes con las de medida.
medidas realizadas en el primer momento
sin CsCl se encuentran diferencias de 331 y Con respecto a la precisin de los
297 ppm por encima de las marcas resultados y teniendo en cuenta que la
comerciales Carulla y Alquera desviacin estndar de los resultados
respectivamente. Estos resultados son individuales no debe ser mayor al 0.3% (6).
atribuidos a varios factores tales como: En todos los resultados experimentales (ver
parmetro instrumental inadecuado, por Tabla 2) la desviacin estndar es superior
ejemplo, temperatura de la llama, errores a este valor, este error en los resultados es
por parte del experimentador, estado de la atribuido las prcticas realizadas por el
muestra, por ejemplo, inicio de experimentador.
fermentacin de la muestra que no fue

5

Una solucin que se propone para mejorar
los resultados obtenidos en el anlisis de
sodio en leche es el uso de metodologa
como adicin estndar y estndar interno.
Especficamente para el anlisis de sodio
por espectroscopa de emisin de llama los
autores Fortunato et. al (7) proponen el so
una metodologa de anlisis denominada
Anlisis de Dilucin de Estndar SDA por
sus siglas en ingls, que combina los
principios de adicin de estndar y estndar
interno en este ltimo caso utilizando el
litio como estndar interno. La
determinacin de Na en biodiesel fue el
objetivo del estudio para llegar a la
conclusin de que la metodologa SDA
mejora la precisin y la exactitud del
anlisis de sodio por espectroscopia de
emisin atmica con llama. Tambin es
importante resaltar que en el caso del
anlisis de leche lquida los autores como
Valverde y Trejos (8) y Nobrega et. al (9)
utiliza como pretratamiento HNO3 como
medio de dilucin para eliminar grasas o
cualquier tipo de interferencia en la matriz
para determinar si la adicin de un supresor
de ionizacin genera un aumento en la
seal del analito de inters comparado a
cuando esta no est presente.
Marca Contenido nutricional de
Comercial de Na
Leche
Etiqueta ppm Con
CsCl
Descremada 115 mg 548 N.A
Carulla (A) Na/210ml
0% grasa 110 mg 510 N.A.
Alquera (B) Na/200ml
protenas en el medio, para despus la
muestra ser analizada por emisin atmica.
Conclusiones
La concentracin experimental de Na en
leche comercial marca Carulla y Alquera
por tcnica de Espectrofotometra de
Emisin Atmica. fue de 887 ppm +/- 17
ppm y 807 ppm +/- 48 ppm
respectivamente sin la adicin de un
supresor de ionizacin CsCl. Esta
concentracin es superior a la reportada en
el contenido nutricional de los fabricantes.
Por otro lado, en las curvas de calibracin,
tanto en el experimento CsCl-1 como CsCl-
2 se observa un aumento en la intensidad de
seal cuando se agrega una sal alcalina
comparado a cuando esta no se adiciona,
demostrando que el Cs cumple la funcin
de supresor de ionizacin para Na. Para
futuros anlisis de sodio en leche se
recomienda un tratamiento previo a la
muestra con el objetivo de disminuir
Tabla 2. Valores de referencia para Na en leche y
resultados experimentales, (promedio +/- desviacin
estndar), n=3.La diferencia es igual al valor de referencia
menos el valor medido.
1 2
ppm ppm
Sin CsCl Diferencia Con Sin CsCl Diferencia
CsCl
887 17 331 445 21 780 6 103 232
807 48 297 N.A. N.A. N. A N.A.
1
Bibliografa

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