Toxicidad aguda en semillas de lechuga

Angeles V, Itzel A; Pea G, Karla M; Ramrez V, Juan M; Valencia S, Sandra

Toxicologa 1752 Equipo 3

Resumen

El aumento de la investigacion ambiental en Mexico refleja la preocupacion publica por el medio ambiente. Es
por esto que se ha visto un auge en el uso de los bioensayos, ya que involucran el uso de un organismo vivo para
evaluar la toxicidad de un qumico, e igualmente proveen una imagen integrada de la toxicidad de un efluente,
una muestra de agua, sedimento o tierra de un lugar contaminado. Sabemos que la contaminacin ambiental por
compuestos de zinc resulta importante, al ser compuestos que entran al agua, aire y suelo como resultado tanto
de procesos naturales como de actividades humanas. En este caso el modelo utilizado fue semillas de lechuga
(Lactuca sativa) siendo la variedad Buttercrunch la recomendada por la EPA, FDA y OCDE; es por esto que en
este trabajo se realiz un bioensayo utilizando semillas de lechuga, con el fin de evaluar la toxicidad del acetato
de zinc sobre este organismo de prueba, mediante el estudio de la germinacin y el crecimiento del vegetal tras
una exposicin aguda al compuesto en evaluacin. Para el experimento se trabajaron cinco concentraciones de
0.05 %, 0.1 %, 0.15 %, 0.20 % y 0.30 % de acetato de zinc, un control positivo con solucin de cobre (II) al 4 %
y un control negativo (agua), llevando a incubacin de estas por 168 horas (7 das). Al trmino se cont el
nmero de semillas germinadas, y de estas se midi la longitud de la radcula e hipocotilo, con el fin de calcular
el porcentaje de inhibicin de la elongacin, obtenindose en el control positivo (Cu (II)) que ninguna semilla
germin, mientras que en el control negativo (H2O) se obtuvo una longitud mayor para la radcula e hipocotilo
en comparacin a todos los sistemas de prueba, en los cuales se obtuvieron porcentajes de inhibicin de la
elongacin de entre el 0.43 y 94.01 %, as como porcentajes de inhibicin de germinacin entre 1.43 y 7.86 %,
tiles para la construccin de una grfica dosis-respuesta, en la cual se determin una CL50 de 0.1585 %. Con
base en estos datos, y con la observacin de los efectos subletales (inhibicin de la elongacin, necrosis, etc.), se
determin la generacin de toxicidad aguda en el modelo biolgico y por consiguiente, el posible riesgo
ecolgico y en el humano del acetato de zinc.

Palabras clave: Lechuga, Lactuca sativa, acetato de zinc (II), toxicidad aguda, fitotoxicidad, bioensayo, germinacin, plntula, radcula,
hipoctilo.

Abstract

The increase of environmental research in Mexico reflects the public concern about the environment. Because of
this, theres been a rise in the use of bioassays to evaluate the toxicity of a substance: because they use a living
organism, they provide an integrated picture of the toxicity of an effluent, water, soil or sediment sample from a
polluted site. We know that the environmental contamination by zinc compounds is important, because they can
enter water, air and soil as a result of natural processes and human activities. In this paper, we utilized lettuce
seeds (Lactuca sativa) as a biomodel, considering that the Buttercrunch variety is the one recommended by the
EPA, FDA and OECD. These lettuce seeds were used to evaluate the toxicity of zinc acetate, determining the
vegetables rate of germination and growth after an acute exposure to the zinc compound. Five concentrations of
zinc acetate were used (0.05%, 0.1%, 0.15%, 0.2%, 0.3%), including also a positive control (4% copper (II)
solution) and a negative control (water). All the systems were incubated during 168 hours (7 days). At the end
the number of seeds that germinated was counted, and the length of the radicle and hypocotyl was measured in
order to calculate the percentage of inhibition of elongation, resulting in no seeds germinated with the positive
control (Cu (II)), while in the negative control (H 2O) a greater length for the radicle and hypocotyl was obtained
in comparison to all the tested systems, in which elongation inhibition percentages were obtained between 0.43
and 94.01%, as well as germination inhibition rates from 1.43 to 7.86%. These rates were used to make a dose-
response relationship graph, which was then used to determine the LC50 of the zinc acetate (0.1585%). Using the
LC50 and the observation of sublethal effects (such as elongation inhibition and necrosis) we were able then to
determine the generation of acute toxicity in the biological model and thus, the possible ecological and human
risk the zinc acetate poses.
Keywords Lettuce, Lactuca sativa, zinc acetate (II), acute toxicity, phytotoxicity, bioassay, germination, seedling, radicle, hypocotyl.
Introduccin
El aumento de la investigacion ambiental en
Mexico refleja la preocupacion publica por el
medio ambiente. El uso de bioensayos para
detectar cambios causados por agentes txicos
se ha vuelto cada vez ms comn en estudios de
diagnstico y monitoreo. Como indica el
nombre, los bioensayos involucran el uso de un
organismo vivo para evaluar la toxicidad de un
qumico. Para usar dichos ensayos en una
evaluacin ambiental, se requiere que posean
ciertas caractersticas como: estar
estandarizados, ser sencillos, de bajo costo,
tener un punto final definido, y ser lo
suficientemente sensibles como para distinguir
diferencias entre lugares geogrficos (Paton et
al. 2005).
Los bioensayos proveen una imagen integrada
de la toxicidad de un efluente, una muestra de
agua, sedimento o tierra de un lugar
contaminado. Los bioensayos se basan en que el
organismo de prueba reaccionar de una manera
predecible a distintos tipos de contaminantes
ambientales (Cornell University, 2009).
El uso de plantas en los bioensayos es
especialmente til para la evaluacin de la
fitotoxicidad en suelos contaminados por
diversas sustancias, aunque la sensibilidad de
los parmetros de germinacin y crecimiento se
hayan puesto a debate (Da Silva et al., 2013).
Las plantas son especialmente tiles para
evaluar efectos txicos de nuevos herbicidas, o
compuestos similares a herbicidas (Wang,
1991).
El usar semillas de lechuga (Lactuca sativa)
provee ventajas sobre otros organismos de
prueba: Son baratas, fciles de cultivar y no
requieren mantenimiento entre experimentos. Es
la variedad Buttercrunch de la lechuga que es
recomendada por la Agencia de Proteccin
Ambiental (EPA), la Administracin de
Alimentos y Medicamentos (FDA) y la
Organizacin para la Cooperacin y el
Desarrollo Econmico (OCDE) (Cornell
University, 2009).
Las semillas de lechuga se han usado, entre
otras cosas, para probar la efectividad del
saneamiento de un suelo contaminado por
plomo; disear estrategias de saneamiento para
un sitio contaminado por el tratamiento de
madera con creosota y otros compuestos; y
analizar efluentes industriales (Cornell
University, 2009).
El zinc es un metal de color grisceo,
oligoelemento esencial en los seres vivo, ya que
se encuentra prcticamente en la totalidad de las
clulas, pero existe con mayor abundancia en
determinados tejidos animales. Este desempea
un papel importante en el crecimiento y
desarrollo, la respuesta inmunitaria, la funcin
neurolgica y la reproduccin. A nivel celular,
la funcin del zinc puede ser cataltica,
estructura y reguladora. Casi 100 enzimas
diferentes dependen del zinc para poder
incrementar la velocidad (catalizar) de las
reacciones qumicas vitales (Rubio, 2007).
La contaminacin ambiental por compuestos de
zinc resulta importante, ya que este es un
compuesto que entra al agua, aire y suelo como
resultado tanto de procesos naturales como
actividades humanas. La mayor parte de este,
entra al ambiente por el resultado de la minera,
la refinacin de minerales de zinc, plomo y
cadmio, la produccin de acero, la incineracin
de carbn y de desperdicios, el desage de
industrias, iodo, abonos, por su presencia en
pilas, bateras, pinturas, esmaltes, caucho, etc.
Todos los productos, actividades y procesos
antes mencionados, pueden aumentar los niveles
de zinc en aire, agua y suelo. En el caso del
agua, la cantidad de zinc puede aumentar a
medida que la acidez del agua aumenta. Este por
tanto es altamente txico para organismos
acuaticos, as como plantas. Puede provocas a
largo plazo efectos negativos en el medio
ambiente acuatico (ATSDR, 2005).
En este trabajo, se realiz un bioensayo
utilizando semillas de lechuga (Lactuca sativa),
con el fin de evaluar la toxicidad del acetato de
zinc sobre este organismo de prueba, mediante
el estudio de la germinacin y el crecimiento del
vegetal (radcula e hipocotilo) tras una
exposicin aguda al compuesto en evaluacin.
Metodologa
Para el experimento se trabajaron siete lotes de
germinados de lechuga: cinco en
concentraciones de 0.05 %, 0.1 %, 0.15 %, 0.20
% y 0.30 % de acetato de zinc, un control
positivo con solucin de cobre (II) al 4% y un
control negativo (agua). Cada lote de acetato de
zinc se compona de 7 rplicas, cada una con 20
plntulas.
Tras la incubacin de estas por 168 horas (7
das) se cont el nmero de semillas
germinadas, y de estas, se midi la longitud de
la radcula e hipocotilo, con el fin de calcular el
porcentaje de inhibicin de crecimiento.
Resultados
Los resultados reportados para el experimento
incluyen el nmero y porcentaje de semillas
germinadas que se obtuvieron en cada sistema.
Esto se observa en la tabla No. 1. Adems, cabe
sealar que en los sistemas utilizados como
controles negativos, la no germinacin fue del
100% (es decir, que ninguna de las semillas
prolifer), mientras que en el control positivo, la
no germinacin fue nula, pues todas las semillas
utilizadas lograron germinar.

Tabla No. 1.- Resultados de semillas de lechuga germinadas.

Equi No Germinadas % No Germinadas
po
0.05% 0.10% 0.15% 0.20% 0.30% 0.05% 0.10% 0.15% 0.20% 0.30%

1 0 0 0 0 5 0 0 0 0 25

2 3 0 0 0 0 15 0 0 0 0

3 1 0 1 0 0 5 0 5 0 0

4 2 0 0 0 3 10 0 0 0 15

5 0 0 2 4 0 0 0 10 20 0

6 1 2 2 4 1 5 10 10 20 5

7 0 0 1 3 0 0 0 5 15 0

7 2 6 11 9 35 10 30 55 45

1 0.29 0.86 1.57 1.29 5 1.43 4.28 7.86 6.43

El nmero de semillas para cada sistema fue de 20. Se muestra el nmero de semillas que germinaron
as como el porcentaje que estas representan en comparacin con el total de semillas evaluadas (20)
 en cada uno de los sistemas tras la explosin a Zn(O2CCH3) en concentraciones de 0.05%, 0.10%,
0.15%, 0.20% y 0.30%. Asi, la CI50 indica la concentracion a la que se inhibe en un 50 % la
germinacin.
Adems de la germinacin o no de las lechugas, longitud de la radcula disminuy a medida que
que indica la viabilidad de estas, en el aumentaba la concentracin de Acetato de Zinc
experimento se consider tambin la longitud de en el sistema, sucediendo lo mismo con la
crecimiento de la radcula y el hipocotilo de las longitud del hipocotilo. Como la viabilidad de
plntulas. Estos resultados aparecen en la tabla las semillas en los controles negativos fue nula,
No. 2. Como se observa en esta tabla, la se toma la longitud como 0 cm.

Tabla No. 2 .- Resultados para la longitud del crecimiento de radcula e hipocotilo con diferentes
tratamientos.
Equi Zn(O2CCH3) Zn(O2CCH3) Zn(O2CCH3) Zn(O2CCH3) Zn(O2CCH3) C+ (Cu (II) C- (H2O)
po 0.05% 0.10% 0.15% 0.20% 0.30% 4%)

Radc Hipo Radc Hipo Radc Hipo Radc Hipo Radc Hipo Radc Hipo Radc Hipo
ula cotilo ula cotilo ula cotilo ula cotilo ula cotilo ula cotilo ula cotilo
(cm) (cm) (cm) (cm) (cm) (cm) (cm) (cm) (cm) (cm) (cm) (cm) (cm) (cm)

1 1.05 2.78 0.51 1.57 1.07 1.24 0.025 0.345 0.155 0.2 0 0 - -

2 1.9 2.2 0.92 0.71 0.52 1.62 0.075 0.25 0.13 0.1 - - 1.67 2.31

3 0.65 1.78 0.365 1.48 0 0.16 0.24 0.48 0.115 0.4 0 0 - -

4 0.52 1.47 0.21 0.12 0.2 0 0.1 0 0.1 0 0 0 - -

5 0.915 2.4 0.3 1.1 0.01 0.17 0.06 0.47 0.01 0.11 - - - -

6 1 2.72 0.12 0 0.15 0 0.15 0.15 0.12 0 - - - -

7 1.03 2.8 0.33 0.84 0.15 0.34 0.1 0.24 0.06 0.26 0 0 - -

1 2.3 0.39 0.83 0.3 0.5 0.11 0.28 0.1 0.15 0 0 1.67 2.31

s 0.44 0.52 0.26 0.61 0.38 0.65 0.07 0.17 0.05 0.14 0 0 - -

El nmero de semillas para cada sistema fue de 20. Se muestran los valores promedio de la longitud
de la radcula e hipocotilo que se obtuvieron tras la explosin a Zn(O2CCH3) en diferentes
concentraciones (0.05%, 0.10%, 0.15%, 0.20% y 0.30%).

Con el fin de calcular la concentracin letal
media (CL50) del acetato de zinc sobre las
semillas de lechuga, se debe calcular el
porcentaje de inhibicin del crecimiento de la
radcula y el hipocotilo para cada sistema
(concentracin de acetato de zinc) utilizado,
teniendo en cuenta el crecimiento de los
sistemas control. Esto se refleja en la tabla No.
3, donde se observa que para el sistema con una
concentracin de acetato de zinc de 0.05%, el
crecimiento de la la radcula se inhibe en un
40.12%, mientras que la inhibicin del
crecimiento del hipocotilo se acerca a 50% en el
sistema con concentracin de 0.10%, donde la
inhibicin se da en un 64.07%.
Tabla No. 3. Porcentaje de inhibicin de la elongacin de la radcula y el hipocotilo para cada
tratamiento respecto al control negativo.
Zn(O2CCH3) Zn(O2CCH3) Zn(O2CCH3) Zn(O2CCH3) Zn(O2CCH3)
0.05% 0.10% 0.15% 0.20% 0.30%
Radcula Hipoco Radcula Hipoco Radcula Hipoco Radcula Hipoco Radcula Hipocot
tilo tilo tilo tilo ilo

% 40.12 0.43 76.65 64.07 82.03 78.35 93.41 87.88 94.01 93.51
Inhibi-
cin
Los resultados reportados indican el porcentaje de inhibicion de la longitud de la radicula e
hipocotilo, comparado con las longitudes de los recipientes de control (sin sustancia toxica).

A partir de los resultados obtenidos en la tabla esta grfica y realizar el clculo

No. 1, se puede trazar la grfica No. 1, que
contrasta la inhibicin de la germinacin de las
semillas contra la concentracin de acetato de
zinc en cada sistema. Para obtener la CL50, se
realiza una curva dosis-respuesta (grfica No. 2)
a partir de la primera grfica. Al interpolar en
correspondiente, se encuentra que la CL50 que
presenta el acetato de zinc sobre las semillas de
lechuga es de 0.1585%, es decir, una
concentracin cercana al tercer sistema utilizado
en la experimentacin (0.15%).

Grfica No. 1. Porcentaje de inhibicin de la germinacin vs concentracin de acetato de zinc.

Grfica No. 2. Curva dosis-respuesta para acetato de zinc.

Clculo de la CL50:
CL50= 10-0.8
CL50= 0.1585 %

Anlisis de resultados para la especie utilizada, expresada como CL50 o

El bioensayo de toxicidad con semillas de
lechuga (Lactuca sativa) es una prueba estatica
de toxicidad aguda (120 horas de exposicion) en
el que se pueden evaluar los efectos fitotoxicos
de compuestos puros o de mezclas complejas en
el proceso de germinacion de las semillas y en el
desarrollo de las plantulas durante los primeros
dia s de crecimiento. Como puntos finales para la
evaluacion de los efectos fitotoxicos, se
determina la inhibicion en la germinacion y la
inhibicion en la elongacion de la radic ula y del
hipocotilo (Sobrero y Ronco, 2004).
Las respuestas de estas pruebas de laboratorio
para definir ecotoxicidad pueden ser clasificadas
en dos grupos: agudas o letales, en este caso las
semillas son sometidas a diferentes
concentraciones del contaminante. Al realizar
este procedimiento se espera obtener respuestas
con base en la mortalidad que permitan indicar
el grado de toxicidad del elemento o compuesto,
CE50, estas se refieren a la concentracin que
provoca un efecto en el 50% de las semillas
expuestas en el ensayo. Al realizar la curva
dosis-respuesta, considerando el efecto letal
analizado (inhibicin de la germinacin), se
determin una CL50 de 0.1585 %, es decir, que a
esta concentracin del txico evaluado debera
de presentarse inhibicin de la germinacin en
la mitad de los individuos de la poblacin
expuesta, sirviendo esto como parmetro para
establecer un rango seguro de exposicin a este
compuesto. Como segundo grupo se encuentran
las de tipo crnico o subletales, que son pruebas
que tienen como finalidad evidenciar repuestas
que no implican la muerte de la semilla
evaluada; en este ensayo se determinan factores
como la conducta de la semilla, fecundidad,
desarrollo y bioacumulacin, entre otros (Lpez,
2007).
Es importante destacar que durante el perio do de
germinacion y los primeros dias de desarrollo de
la plantula ocurren numerosos procesos
fisiologicos en los que la presencia de una
sustancia toxica puede interferir alterando la
supervivencia y el desarrollo normal de la
planta, siendo por lo tanto una etapa de gran
sensibilidad frente a factores externos adversos
(Sobrero y Ronco, 2004).
As pues, con la germinacin de la planta se da
el rompimiento de la envoltura seminal, por
medio de factores ajenos a la planta, como lo es
la humedad y la temperatura; las cuales generan
un espacio adecuado para su germinacin, para
llegar a la formacin de la planta el embrin
debe sobrepasar las siguientes fases: Fase de
hidratacin: La absorcin de agua es el primer
paso de la germinacin, sin el cual el proceso no
puede darse. Durante esta fase se produce una
intensa absorcin de agua por parte de los
distintos tejidos que forman la semilla. Dicho
incremento va acompaado de un aumento
proporcional en la actividad respiratoria. Fase
de germinacin: Representa el verdadero
proceso de la germinacin. En ella se producen
las transformaciones metablicas, necesarias
para el correcto desarrollo de la plntula. En esta
fase la absorcin de agua se reduce
considerablemente, llegando incluso a detenerse.
Fase de crecimiento: Es la ltima fase de la
germinacin y se asocia con la emergencia de la
radcula (cambio morfolgico visible). Esta fase
se caracteriza porque la absorcin de agua
vuelve a aumentar, as como la actividad
respiratoria. (Snchez y Snchez, 2009)
Por otra parte, muchas de las reacciones y
procesos involucrados son generales para la gran
mayoria de las semillas, por lo que la respuesta
de esta especie y los datos obtenidos a partir de
la aplicacion de esta prueba son en gran medida
representativos de los efectos en semillas o
plantulas en general (Sobrero y Ronco, 2004).
En el caso especfico del zinc, este puede
inducir genotoxicidad, generando dano al ADN.
Puede formar entrecruzamientos, y de forma
directa e indirecta inhibe la reparacion del ADN
al interactuar una gran variedad de enzimas de
reparacin. As mismo modifica la transduccion
de senales, modula la expresion de genes, altera
la respuesta inmune y afecta la homeostasis
celular (Hendricks, et al., 2004)
El zinc tambin puede producir citotoxicidad
por un detrimento de los niveles de glutation
reducido y un incremento de los niveles de la
forma oxidada del glutation. Tambien in vitro y
a niveles elevados, produce muerte celular
debido a que en primer lugar es capaz de
generar especies reactivas de oxig eno y en
segundo lugar a que activa la cascada de la
MAP-kinasa (Hernndez, 2009). De esta forma,
al entrar en contacto con las semillas al estar
estas en su proceso de germinacin, su
crecimiento se ver afectado ya que su material
gentico (ADN) se encontrar afectado
directamente por dicho compuesto, produciendo
que no la semilla no germine o el crecimiento de
la radcula y el hipocotilo sea diferentes en
comparacin con las de las plntula control -.
Cabe mencionar que en el ser humano el
principal efecto txico del zinc parece derivar de
su interferencia con el metabolismo normal del
cobre, lo que conduce a una anemia por
deficiencia de ste en caso de nutricin
parenteral o en personas con ingestas
prolongadas superiores a 150 mg/da. Otras
alteraciones que se pueden presentar consisten
en erosiones gstricas, depresin del sistema
inmune y disminucin del colesterol plasmtico
unido a las protenas de alta densidad. Dichas
situaciones son poco frecuentes por el amplio
margen existente entre ingesta normal y txica,
sealndose que los efectos adversos aparecen
slo cuando se ingiere en cantidades superiores
a 4 8 g de zinc. (Rubio, 2007)
As pues, en la prueba tradicional de
germinacion de semillas, la evaluacion del
efecto en la elongacion de la radic ula y del
hipocotilo de las plantulas permite ponderar el
efecto toxico de compuestos solubles presentes
en niveles de concentracion tan bajos que no son
suficientes para inhibir la germinacion, pero que
sin embargo pueden retardar o inhibir
completamente los procesos de elongacion de la
radic ula o del hipocotilo, dependiendo ello del
modo y sitio de accion del compuesto (Sobrero
y Ronco, 2004). Este proceso de inhibicin de
elongacin se puede observar en la tabla 2, en el
que se presentan los resultados para todos los
sistemas y cmo es que en diferentes lotes
expuestos a las mismas concentraciones de
txico, van a variar en cuanto al efecto final,
dando una perspectiva amplia de la importancia
de la ecotoxicologa, ya que, no todos los
organismos presentan la misma respuesta final,
por lo que es necesario realizar promedios de
todos los resultado, as como la determinacin
de la varianza para poder observar que tanto
variaron los resultados de los diferentes lotes
frente a la misma concentracin.
Teniendo en cuenta el resultado del promedio y
la desviacin estndar, se determin el
porcentaje de inhibicin de la elongacin, como
se muestra en el tabla No. 3, donde se puede
observar que los valores oscilan entre 0.43 y
94.01 %, estos valores fueron determinados con
respecto al control negativo, es decir, el grupo
no expuesto al txico de prueba, notndose as
que mientras se incrementa la concentracin del
compuesto evaluado, aumenta a su vez la
presencia de rasgos indicativos del efecto
subletal, reflejados en los porcentajes ya
mencionados. Cabe destacar que la radcula
present mayor sensibilidad desde las
concentraciones ms bajas, indicando que el
acetato de zinc daa primordialmente esta zona
de la plntula en el proceso de elongacin.
Los efectos cuantificados sobre la elongacion de
la radicula o del hipocotilo son efectos
subletales. La inhibicion en la germinacion
podria considerarse como un efecto letal
siempre y cuando se pueda corroborar que
finalizada la exposicion a una muestra las
semillas no germinaron por muerte del embrion
y que no existe simplemente un retraso en el
proceso de germinacion, manteniendose la
viabilidad de la semilla (Sobrero y Ronco,
2004).
Otro aspecto a considerar es el mayor desarrollo
en la elongacion de la radic ula o el hipocotilo en
algunas muestras con respecto al control. La
exaltacion en un punto final u hormesis no debe
ser interpretada como un efecto favorable o
estimulante. Si bien es posible que muchos
compuestos (por ejemplo Cu, Zn) a bajas
concentraciones produzcan exaltacion por ser
micronutrientes vegetales (Sobrero y Ronco,
2004).
Finalmente, a travs de esta prueba es posible
evaluar el efecto de la adicin de bioslidos al
suelo sobre las semillas de lechuga (Lactuca
sativa L.). Este bioensayo es importante para
determinar la madurez de los bioslidos y sus
niveles de toxicidad sobre las semillas. La
germinacin debe estar por sobre el 50% para
considerar que no produce efectos negativos
sobre las plntulas (Sobrero y Ronco, 2004).
Conclusiones
Se realiz un bioensayo utilizando semillas de
lechuga (Lactuca sativa), con el fin de evaluar la
toxicidad del acetato de zinc sobre este modelo
biolgico, mediante el estudio de la germinacin
y el crecimiento del vegetal (radcula e
hipocotilo) tras una exposicin aguda al
compuesto de prueba. Se determin que en las
semillas de lechuga el acetato de zinc presenta
en una CL50 de 0.1585 %, valor al cual la mitad
de la poblacin expuesta debera inhibir su
germinacin, y aunado a la observacin de
efectos subletales consistentes en la inhibicin
de la elongacin de la radcula e hipocotilo en
un rango del 0.43 al 94.01 %, se determina que
el compuesto evaluado produce efectos txicos
agudos en el modelo biolgico, y por tanto,
podra considerarse tambin de riesgo para el ser
humano y a nivel ecolgico.
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