Mecanismos de separacin

En funcin del mecanismo de separacin, las tcnicas de cromatografa pueden clasificarse en:

- Cromatografa de adsorcin. La separacin depende de los equilibrios de adsorcin-desorcin de

los componentes de la mezcla, entre la fase estacionaria slida y la fase mvil lquida o gaseosa. La
fuerza con que es adsorbido un componente depende de la polaridad de este, de la actividad del
adsorbente y de la polaridad de la fase mvil. En general cuanto ms polar es un compuesto ms
fcilmente ser adsorbido. El orden general de elucin de algunos compuestos orgnicos, de la
actividad de algunos adsorbentes y de la fuerza de elucin de algunos disolventes comunes, se
recogen en la Tabla I. La cromatografa de adsorcin, es una tcnica que est particularmente bien
adaptada para la separacin de compuestos de polaridad baja y media. La separacin de compuestos
muy polares mediante cromatografa de adsorcin requiere, debido a la gran retencin que ofrecen,
la utilizacin de adsorbentes muy poco activos, o bien, tratamientos qumicos previos para la
preparacin de la muestra (preparacin de trimetilsilil derivados, etc.) a fin de reducir su polaridad.

- Cromatografa de reparto. Est basada en la separacin de una mezcla de substancias mediante el

reparto existente entre la fase mvil (lquido o gas) y la fase estacionaria (lquida) soportada o
ligada sobre un slido adecuado. La mayor o menor migracin de un compuesto en este tipo de
cromatografa, ser funcin del coeficiente de reparto de ste entre la fase estacionaria y la fase
mvil:
La cromatografa de reparto es utilizable para la separacin de mezclas de compuestos de polaridad
media y alta. Ejemplos de este tipo de cromatografa, son las cromatografas sobre papel, slice
hidratada y la cromatografa lqida de alta eficacia en fase reversa.

- Cromatografa por tamao molecular, tambin llamada de permeacin de gel o de tamiz

molecular. Consiste en la separacin de las molculas basndose en su tamao en lugar de en su
solubilidad o polaridad. Las fases estacionarias empleadas para este tipo de cromatografa son
inorgnicas (zeolitas), o geles orgnicos compatibles con disolventes acuosos (agarosa,
poliacrilamida) u orgnicos (copolmeros estireno/divinilbenceno). Estas fases estacionarias poseen
cavidades en las cuales las molculas de los compuestos a separar pueden penetrar y ser retenidas,
siendo las molculas mayores las eluidas de la columna en primer lugar; el rango de trabajo de estas
fases estacionarias, se define como el intervalo de pesos moleculares que pueden ser separados; otro
parmetro que caracteriza a este tipo de fases, es su lmite de exclusin, que se define como el peso
molecular a partir del cual los compuestos pasarn a travs del lecho estacionario sin experimentar
retencin.

- Cromatografa de cambio inico. Las separaciones por intercambio inico, se llevan a cabo con
materiales insolubles y de textura porosa, los cuales presentan grupos reactivos asociadosa iones
lbiles capaces de intercambiarse con los del medio que les rodea, por lo queinevitablemente este
tipo de cromatografa ha de realizarse en medio lquido. La cromatografa de intercambio inico, es
utilizable para la separacin de substancias inicas, tanto inorgnicas como orgnicas.