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1. INTRODUO

Para a anlise do DNA de, a primeira etapa importante o seu isolamento. O

procedimento a seguir tem carter didtico e utilizado para extrair grandes
quantidades de DNA a partir de cebola. Protocolos similares so usados nas
extraes de DNA de outras fontes, como amostras de sangue, tecidos, etc.
A extrao de DNA consta fundamentalmente de trs etapas:
1. Ruptura (fsica e qumica) das membranas celulares para liberao do material
gentico;
2. Desmembramento dos cromossomos em seus componentes bsicos: DNA e
protenas;
3. Separao do DNA dos demais componentes celulares.

2. OBJETIVO

Entender como pode ser feita a separao de cidos nuclicos com base nas suas
caractersticas.
Verificar o comportamento de diferentes grupos de biomolculas em diferentes
solues.
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Justificar.

3. FUNDAMENTAO TERICA

As molculas do detergente so capazes de desestruturar a organizao das

molculas de lipdios presentes nas membranas celulares promovendo o
rompimento celular. O aquecimento em banho-maria favorece a desnaturao das
molculas de DNA (abertura das fitas duplas) e o sal (Nacl) estabiliza as fitas
simples de DNA.
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O isopropanol usado porque o DNA insolvel em lcool e deste modo promove a

separao dos cidos nuclicos da soluo e, em funo de sua menor densidade
em relao gua e outros componentes celulares, o DNA migra para a superfcie
da soluo. O lcool tambm desidrata as molculas de DNA, fazendo com que elas
se aglutinem formando um aglomerado visvel.

Fundamentao terica insuficiente, sem contextualizao.

Falta referncias bibliogrficas.
Justificar texto.

4. MATERIAIS

Tabela 4. 1. Referente aos materiais utilizados no experimento.

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Quantidade Descrio das vidrarias

5 Bquer de 250 mL
5 Funil
5 Proveta graduada de 100 mL
5 Basto de vidro

Tabela 4.2. Referente aos reagentes e solues.

Quantidade Reagentes e solues
10 g Cloreto de sdio
120 mL Detergente
200 mL lcool etlico (gelado aprox. -10C)
120 mL gua destilada

Tabela 4.3. Referente Matria-prima / Insumo ou Analito

Quantidade Matria-prima / Insumo ou Analito
1 Cebola descascada
--- Papel de filtro ou gaze
--- Faca

Tabela 4.4. Referente aos equipamentos por grupo.

Quantidade Equipamento por grupo
Banho Maria 60 C
Gelo

5. PROCEDIMENTOS
Inicialmente foi picado em quadrados 01 cebola. Misturou-se em um bquer 120 mL
de detergente, 10g de Nacl e 120 mL de gua obtendo uma soluo. Agitou-se at
dissolver. Juntar essa soluo com a cebola e levar ao banho maria a 60 C pro 15
minutos mexendo aos poucos. Aplicou-se o choque trmico a soluo, ou seja, foi
levado ao gelo, aguardando 5 minutos. Agitou-se novamente antes de coar a mistura
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em papel de filtro, excluir o material slido, colocar o material lquido em um tubo de

ensaio. Verificar o DNA precipitado no etanol.

6. RESULTADOS E DISCUSSES
O Nacl se dissocia em ons Na + Cl-, depois de imerso em soluo. Tais ons
interagem com os fosfatos das molculas de DNA, neutralizando e estabilizando-as,
possibilitando que o DNA se torne menos solvel em gua

.A funo do detergente sdio dodecil sulfato a de emulsionar gorduras; o SDS

atua nas membranas que so formadas por fosfolipdios, desestruturando-as.

A macerao pode ser substituda pelo uso do liquidificador, sendo que seu uso
limitado h no mximo 5 segundos, pois pode haver degradao das molculas de
DNA.
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A temperatura de 60 C por 15 minutos tem a funo de desnaturar as protenas,

inclusive as DNases, alm de degradar a parece celular e lisa da clula. O gelo em
que submetida soluo aps o aquecimento serve para reduzir a quebra das
molculas de DNA.

O lcool etlico permite uma maior desidratao das molculas. Porm no foi
possvel a observao do DNA (emaranhado), que se apresenta por filamentos
esbranquiados.

7. CONCLUSO

Em relao ao experimento sobre Extrao de cidos nuclicos, alguns fatores

como a viscosidade e pureza do detergente e tambm a temperatura utilizadas no
permitiu que conclussemos com xito a est prtica, portanto no conseguimos
extrair DNA do produto usado, ou seja, a cebola.

Ok!
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8. BIBLIOGRAFIA

CIDO DESOXIRRIBONUCLEICO. Disponvel em: <HTTPS://pt.wikipedia.org/wiki/

%C3%81cido_desoxirribonucleico >ACESSO EM 06 DE JULHO DE 2017 .

Apenas uma referncia insuficiente para um relatrio.