FENOMENE DE TRANSPORT PRIN MEMBRANA CELULAR

1. Structura membranei celulare

2
2. Clasificarea modalitilor de transport membranar
3. Transportul pasiv
Difuzie
Difuzie facilitat
Difuzia prin canale ionice i pori
4. Transportul activ
Transportul activ primar
Transportul activ secundar
5. Receptori i traductori de informaie n membranele biologice
Definiia receptorului
Etapele semnalizrii intercelulare
Clasificarea semnalelor
Tipuri de receptori membranari, exemple
CHAPITRE D'QUATION 3 SECTION 1FENOMENE DE TRANSPORT PRIN MEMBRANA CELULAR ................................. 1
3
1. STRUCTURA MEMBRANEI CELULARE ...................................................................................................................... 4
ROLUL MEMBRANEI .............................................................................................................................................................. 4
MODELUL MOZAICULUI ......................................................................................................................................................... 5
2. CLASIFICAREA MODALITILOR DE TRANSPORT MEMBRANAR .............................................................................. 9
3. TRANSPORTUL PASIV ............................................................................................................................................ 10
ECUAIA LUI NERNST .......................................................................................................................................................... 10
DIFUZIA SIMPL ................................................................................................................................................................. 11
DIFUZIA FACILITAT ............................................................................................................................................................ 11
DIFUZIA PRIN CANALE IONICE SI PORI...................................................................................................................................... 13
4. TRANSPORTUL ACTIV ............................................................................................................................................ 15
TRANSPORTUL ACTIV PRIMAR ............................................................................................................................................... 15
TRANSPORTUL ACTIV SECUNDAR ........................................................................................................................................... 17
5. RECEPTORI SI TRADUCTORI DE INFORMATIE IN MEMBRANELE BIOLOGICE .......................................................... 19
DEFINITIA RECEPTORULUI .................................................................................................................................................... 19
ETAPELE SEMNALIZARII INTERCELULARE .................................................................................................................................. 19
CLASIFICAREA SEMNALELOR ................................................................................................................................................. 19
CLASIFICAREA RECEPTORILOR MEMBRANARI ............................................................................................................................ 20
Receptorii ionotropi .................................................................................................................................................. 20
Receptorii care funcioneaz prin intermediul proteinelor G .................................................................................... 21
Receptori asociai cu enzime..................................................................................................................................... 24
ALTE RESURSE........................................................................................................................................................... 24
1. Structura membranei celulare 4

Rolul membranei
Caractere generale ale membranei

o Are o grosime medie de 7,5 nm

o Este ansamblu de structuri supramoleculare aflat la periferia celulei (sau a organitelor

celulare, Figura 1)

o separ mediul intern de cel extern (celular de interstiial)

o ndeplinete funcii legate de procese metabolice fundamentale.

o Proprietile de semipermeabilitate i selectivitate.

Rolul membranei:

o transportul unor molecule, ioni, macromolecule, complexe supramoleculare, dintr-o parte

n alta a ei;

o traducere i transfer de informaie adus de diferii stimuli (mecanici, electrici,

electromagnetici, chimici, termici etc.) prin receptorii specifici pe care i conine;

o interconversia diferitelor forme de energie, prin enzimele sau complexele enzimatice pe

care le conine.

Figura 1 Organizarea general a celulei

 5

(a) (b)
Figura 2 (a) bistrat lipidic, (b) modelul mozaic al stratului celular al lui Nicholson i Singer.

Modelul mozaicului
Modelul mozaicului fluid proteolipidic al lui Nicholson i Singer (1972) : bistrat lipidic, n care sunt inserate
proteine i glicoproteine (Figura 2). Membrana se sprijin pe un citoschelet alctuit din proteine fibrilare (exemplu:
spectrina, anchirina i actina fibrilar - n hematii) (Figura 5).

Bistratul lipidic

o Structura biochimic

Fosfolipide (Figura 3a)

Fosfatidilcolin

Fosfatidilserin

fosfatidilinositol etc.,

glicolipide

colesterol (Figura 3c).

o Moleculele lipidice sunt amfifile (Figura 3b).

extremitate polar (cap polar): capetele polare sunt expuse mediului apos

extremitate hidrofob (cozi hidrofobe) - dou lanuri de hidrocarburi - ntre cozile hidrofobe iau
natere legturi hidrofobe

o Moleculele lipidice se organizeaz spontan, pe baza principiului de minimizare a energiei poteniale, astfel nct
cozile lor hidrofobe s evite contactul cu apa realiznd:

structuri micelare (Figura 3, d i e)

bistraturi (vezicule membranare sau membrane plane)(Figura 3f)

o Bistratul lipidic este o structur dinamic, prezentnd fluiditate: moleculele lipidice execut micri de translaie i
rotaie. De exemplu:

translaie n stratul n care se afl (difuzie lateral)

rotaie n jurul propriei axe

basculare dintr-un monostrat n cellalt

flexie (ndoire) (Figura 3g)

 Proteinele membranare 6

o Tipologia proteinelor membranare n funcie de modul n care se nsereaz n membrane:

proteine intrinseci (integrale) - traverseaz membrana celular o dat (glicoforina) sau de mai multe ori
(exemplu - proteinele transportoare, pompe ionice constituite din mai multe helixuri)

proteine extrinseci (periferice) - ptrund n membran pe o anumit distan, pe una din cele dou
fee, sau sunt ataate la suprafaa membranei (receptorii membranari, proteine cu rol imunologic etc.)

o Structura dinamic : micri de difuzie lateral i rotaie (Figura 4), mai restrictive (depinznd de interaciunile cu
alte proteine).

(a) (b) (c)

(d) (e)

(f) (g)
Figura 3 (a) Macromolecule lipidice: A - capt polar (hidrofil), B - coad hidrofob; (b) structura chimic a moleculor
lipidice; (c) inseria moleculelor de colesterol ntre macromoleculele lipidice din bistratul lipidic; (d) micelii formate
prin regruparea capetelor hidrofobe nspre interior (organizare specific n contact cu apa); (e) micelii formate n
jurul unui molecule centrale; (f) bistrat lipidic cu capete hidrofile spre exterior; (g) exemple ale micrilor moleculor
lipidice in membrana.
 7

Laser bleaching

Figura 4 Punerea n eviden a difuziei. Celula este colorat n gri. Punctele verzi arat prezena anticorpilor marcai
fluorescent care s-au legat la proteine pe suprafaa celulei. Punctele verzi se mic pe suprafaa celular.
Cercettorul poate aciona cu un fascicul laser scurt i intens care elimin markerii fluoresceni ntr-o zon restrns
a suprafeei celulare. Aceast fotodecolorare produce o zon celular nemarcat. Cu timpul, proteinele etichetate
fluorescent i care nu au fost atinse de impulsul laser difuzeaz la loc n zona de decolorare, iar proteinele
decolorate difuzeaz n restul celulei. Zona decolorat dispare i celula este uniform marcata. Acest experiment a
fost utilizat pentru a demonstea c proteinele difuzia lateral traversnd membrana.

(a) (b)
Figura 5 (a) citoschelet; (b) membrana eritrocitara.
 Membranele artificiale (model) - permit studiul unor procese membranare. Dintre acestea fac parte
8
lipozomii i bistratele lipidice (Figura 6a), BLM1 (Figura 6b) sau SSM2 (Figura 6c).

(a)

(b) (c)
Figura 6 (a) lipozom, (b) BLM i (c) SSM.

1
BLM (black lipid membranes membrane lipidice negre) sunt bistrate formate prin plasarea unei picturi lipidice pe
un orificiu aflat n septul care separ dou compartimente ale unei cuve de teflon. Pe bistrat se pot adsorbi fragmente
membranare coninnd proteina de studiat sau proteolipozomi. Se pot apoi msura semnalele electrice obinute prin
stimularea proteinei. n cazul proteinei fotosensibile bacteriorodopsina, stimularea se face cu ajutorul unui puls de
lumin. Pentru alte proteine se pot folosi substrate caged adic prinse ntr-un compus chimic care sub aciunea
radiaiilor UV elibereaz substratul. De asemenea, se pot face msurtori pe canale ionice incorporate n BLM.
2
SSM (solid supported membranes membrane lipidice pe suport solid) sunt bistrate formate prin plasarea unei
picturi lipidice pe un strat de aur depus pe o plcu de sticl i mercaptanizat. La fel ca n cazul BLM pe bistrat se pot
adsorbi fragmente membranare coninnd proteina de studiat sau proteolipozomi.
2. Clasificarea modalitilor de transport membranar 9
1. Macrotransport (endocitoza, transcitoza, exocitoza) - Figura 7a.

a. Fagocitoza - proces n care celula nglobeaz particule de substan solid, nvelite n

pseudopode (prelungiri citoplasmatice) care fuzioneaz n spatele lor.

b. Pinocitoza - (Figura 8a) - nvelirea picturilor de lichid i macromoleculelor ntr-un bistrat

lipidic i formarea de vezicule care fuzioneaz (Figura 8b) cu membrana celular i prin
aceasta pot fi transportate dintr-o parte n cealalt a membranei.

i. Exocitoz - n terminaiile nervoase i celulele secretorii (exemplu: diferii

neurotransmitori cum ar fi acetilcolina, glutamatul etc.)

ii. Transcitoz prin endoteliul capilar - trecerea proteinelor plasmatice din snge n
spaiul extravascular.

2. Microtransport - Figura 7b.

a. pasiv

b. activ

(a)

(b)
Figura 7 Tipuri de transport: (a) Macrotransport; (b) Microtransport (Alberts et al., The Cell).
 10

(a) (b)
Figura 8 (a) Pinocitoza i (b) mecanismul fuziunii. (D click pentru a vizualiza pe site animaia celor dou procese).

3. Transportul pasiv
Ecuaia lui Nernst
Transportul pasiv este reprezentat de ctre deplasarea moleculelor i ionilor n sensul gradientului
electrochimic sau de presiune - aparent fr consum de energie metabolic. Aparent, deoarece
gradientul electrochimic respectiv este rezultatul unor procese anterioare realizate cu consum de
energie. Prin transport pasiv sistemul are tendina de a ajunge la echilibru termodinamic.

Expresia diferenei de potenial electrochimic notm: c1 = cin, c2 = cex, V1 = Vin, V2 = Vex obinem:

cin
(1) W Win Wex RT ln zF Vin Vex .
cex

o Dac W > 0 - ionii au tendina de a prsi celula.

o Dac W < 0 - ionii au tendina de a ptrunde n celul, dac membrana este permeabil
pentru acetia.

Echilibrul termodinamic : Transportul unei specii ionice nceteaz la echilibru (W = 0):

RT cex
(2) E Vin Vex ln (ecuaia lui Nernst)
zF cin

Mmodaliti de transport pasiv (Figura 9):

o difuzia simpl;

o difuzia facilitat;

o difuzia prin canale i pori.

 11

Figura 9 Transportul pasiv.

(a) (b)

(c)
Figura 10 (a) i (b) Mecanismul difuziei simple. (c) Dizolvarea speciei transmembranare.

Difuzia simpl
Difuzia simpl (Figura 10 a i b) se produce prin dizolvarea speciei moleculare transportate n
membran (Figura 10c) i depinde de raportul dintre solubilitatea substanei respective n
bistratul lipidic i solubilitatea ei n ap, deci de coeficientul de partiie .

Coeficientul de permeabilitate P este

D
(3) P

Difuzia facilitat
Difuzia = utilizarea unor molecule transportoare existente n membran sau introduse artificial n
aceasta.

Molecule transportoare au o anumit specificitate pentru o anumit specie molecular sau ionic.

o Transportori pentru glucoz, colin, pentru diferii ioni (n acest caz transportorul se
numete ionofor).

o Transportori pot distinge speciile levogire de cele dextrogire (Figura 11a). Ei acioneaz n
sensul gradientului electrochimic.
 12

(a) (b)
Figura 11 (a) Selecia izomerilor optic activi. (b) Succesiunea evenimentelor n difuzie facilitat.

Mecanismul de transport se bazeaz pe proprietatea transportorului de a se putea gsi n dou stari

conformaionale T1 i T2 (Figura 11b).

o Molecula transportat (substratul S) se leag pe una din feele membranei (Figura 12). Se
produce n urma legrii o modificare conformaional n starea T 2 i situsul de legare este
expus prii opuse cu scderea afinitii pentru specia respectiv i eliberarea acesteia. Prin
eliberare se revine la conformaia iniial i ciclul se repet

o Procesul se desfoar conform cineticii Michaelis-Menten pentru reaciile enzimatice.

o Exemplele :

model transportul uniport al glucozei este dat n Figura 12c).

modelul ionofor al antibioticului valinomicin (Figura 12b), molecul hidrofob

+
care poate ncorpora ionii de K , translocndu-i prin membran (i Rb, mai slab).
+
Valinomicina face ca ionii de K s ias din celula bacterian, provocndu-i
moartea.
+ +
modelul ionofor este nigericina care permite un schimb neutru K , H .

(a) (b)

(c)
3
Figura 12 (a) Mecanismul general al difuziei facilitate prin proteina . Exemple: (b) transportul valinomicina i (c)
transportul uniport al glucozei.

3
Proteina este purttoare, transportnd substratul prin membran. Alte mecanisme de difuzie facilitat sunt de asemenea posibile. n cadrul
difuziei facilitate, proteina permite moleculelor i ionii s intre i s prseasc celula micornd gradientul de concentraie. n acest exemplu precis,
Difuzia prin canale ionice i pori 13

Direciile de difuzie :

o Canalele ionice (Figura 14) sunt proteine specializate care strbat bistratul i permit
trecerea unor substane care nu sunt liposolubile. Permit trecerea ionilor n ambele sensuri
i sunt selective.

o Porii (Figura 13) sunt structuri neselective, conteaz doar diametrul particulei.

Specia transportat se leag de proteina canal, formnd un complex enzim-substrat care evolueaz
pe baza cineticii Michaelis-Menten.

o Pentru ca ionul s treac dintr-o parte n cealalt este necesar ca un canal s fie deschis.
Filtrul recunoate un anumit tip de ion i l las s treac n vestibul. Senzorul primete
informaia din exterior, fie din partea unei molecule receptoare, fie direct de la un semnal
electric, i, dac informaia este corespunztoare, comand deschiderea porii permind
ionului s intre sau s ias din celul, mpins de potenialul su electrochimic.

o n anumite situaii, accesul ionului este interzis, chiar dac poarta este deschis, datorit
interveniei inactivatorului I (Figura 15). Cnd canalul este deschis are loc o trecere pasiv,
preponderent n sensul gradientului electrochimic. Transportul prin canale poate fi inhibat
cu ajutorul unor blocani specifici cum ar fi unele toxine (tetrodotoxina inhib funcionarea
+
canalului de Na+ din membrana axonal, tetraetilamoniul blocheaz canalul de K ).
Asemenea blocani specifici permit studierea proprietilor canalelor sau identificarea
proteinelor canal.

Deschiderea i nchiderea canalului sunt rezultatul unei modificri conformaionale care este
comandat printr-un mecanism specific.
+ +
o electric - modificarea potenialului membranar (ex. canalele de Na , K (vezi Figura 14b) n
membrana axonal);
+ ++
o chimic (ex. acetilcolina, canalul de Na , Ca controlat de GMPc n membrana celulelor
fotoreceptoare);
+
o alte mecanisme (de ex. mecanic: canalul de K din vrfurile stereocililor celulelor ciliate din
organul lui Corti).

Deosebiri ntre cele dou tipuri de difuzie (facilitat, canale):

concentraia moleculelor i ionilor (specii ilustrate prin puncte roii) este mai mare n interiolul celulei decnt n exterior. Astfel purttorul proteic
permite punctelor roii s prseasc celula. Atunci cnd concentraia este mai mare n exterior proteina va permite speciilor mobile s intre n
celul la fel de uor. De observat c nu sunt implicate molecule de ATP sau gradieni ionici n difuzia facilitat.
Un exemplu de difuzie facilitata este cazul celulelor hepatice care controleaz concentraia de glucoz n organism. Celulele hepatice depoziteaz
glucoza n exces sub form de glicogen i atunci cnd nivelul glicemiei este mare (imediat dup o mas cu carbohidrai) atunci se descompune
glicogenul n gluco-1-fosfat care este transformat n gluco-6-fosfat care este la final transformat n glucoz simpl.
Decompunerea glicogenului este controlat hormonal. Gluco-1-fosfatul i gluco-6-fosfatul obinute prin descompunerea glicogenului are
impermeabile la membran i nu exist protein de transport care s permit moleculelor s prseasc celula. Totui exist o protein de
transport care funcioneaz prin facilitarea difuziei care permite glucozei s traverseze membrana liber nainte i napoi.
 transportorii au o specificitate mai mare (pot distinge ntre speciile levogire i dextrogire - n celul 14
pot ptrunde prin difuzie facilitat numai glucoza dextrogir i aminoacizii levogiri). Pot transporta
mii de ioni/s.

canalele au o vitez mult mai mare de transport al ionilor (milioane sau chiar sute de milioane de
ioni/s). Atunci cnd au loc procese care necesit modificri brute ale concentraiei sau compoziiei
ionice (de ex. n producerea influxului nervos) canalele ionice sunt mai adecvate pentru transportul
speciilor implicate n aceste procese.

transportorii sunt n numr mult mai mare;

transportorii pot participa la transportul activ secundar.

Figura 13 Difuzia prin pori.

(a) (b)
Figura 14 (a) Schema canalului membranar; (b) Schema canalului de potasiu.

+ 4
Figura 15 Aciunea inactivatorului I asupra transportului Na .

4
Culoarea roz reprezint bistratul lipidic al membranei. Albastru reprezint partea hydrofon=b a canalului care trebuie s interacioneze cu
bistratul lipidic hidrofob. Rou reprezint prile canalului care sunt hidrofile. De observat c exist un canal hidrofil care traverseaz complet
4. Transportul activ 15
Transportul activ este o form de transport care necesit energie metabolic - cuplare energetic
imediat. Se realizeaz n sensul invers gradientului de potenial electrochimic. Se disting dou
forme de transport activ:

o transportul activ primar ;

o transportul activ secundar.

Transportul activ primar

Transportul activ primar se realizeaz cu ajutorul pompelor ionice membranare, structuri proteice
transportoare din clasa proteinelor integrale. O pomp ionic este caracterizat prin prezena unui
centru activ cu acces alternativ spre partea extracelular i spre cea citoplasmatic. Accesul este
modificat ca urmare a unei tranziii conformaionale.

+ +
Pompa ionic Na , K - ATP-aza (Figura 16a).

o Este alctuit din patru subuniti proteice (2 subuniti a i 2 subuniti b); subunitatea a
are activitate ATP-azic.

o Hidroliza ATP furnizeaz energia care permite translocarea a 3 ioni de Na n exteriorul

celulei i a doi ioni de K n interior.

o Este o pomp electrogenic ntruct are ca rezultat un transfer net de o sarcin pozitiv per
ciclu n exteriorul celulei. Energia pentru un transport activ provine de la molecula de ATP
care este utilizat pentru fosforilarea transportorului. Astfel, pentru a funciona o pomp
necesit o surs continu de ATP.

o Pentru fiecare molecul de ATP utilizat, trei ioni Na+ sunt pompai n afara celulei i 2 ioni
K+ sunt introdui din celul.

Mecanismul de transport conform schemei Albers-Post:

+ ++
o Enzima n conformaia E1 ia Na pe partea citoplasmatic i leag ATP (n prezena Mg ).

o ATP este hidrolizat, complexul fosforilat sufer o tranziie conformaional E 1 - E2 n urma

+ +
creia scade afinitatea pentru Na i crete pentru K .

membrana hidrofob. Atunci cnd membrana este n starea de repaus, potenialul membranar este ntre -20 i -200 mV (nuntru valoarea este
negativ) dup tipul de celul. Acest potenial membranar este ilustrat de mai multe sarcini pozitive pe membrana extern i de sarcini negative pe
membrana intern.
Potenialul membranar de repaus menine nchis canalul. Atunci cnd potenialul membranar scade brusc (observai scderea brusc a numrului
de sarcini pozitive i negative), canalul sufer a schimbare conformaional (porile roii i modific orientarea) i poarta se deschide.
Scderea brusc a potenialului membranar poate avea mai multe cauze cum ar fi de exemplul evenimentele ce au loc n momentul sinapsei, cele
care au loc n timpul propagrii unui potenial de aciune sau cele care au loc n momentul unui accident mecanic. Dup ce canalul este deschis, ionii
Na+ intr n canal, echilibrnd gradientul de concentraie (ridicat n exterior i sczut n interior). n timp ce ionii ncrcai pozitiv, Na+ ptrund
nuntru, se asociaz cu sarcinile negative de pe suprafaa intern a membranei i neutralizeaz mai de parte potenialul membranar. Aceast
scdere suplimentar a potenialului membranar permite canalelor adiacente s-i ating pragul de deschidere i s se deschid conducnd la o
cascad de deschideri de canale ce sunt situate din ce n ce mai departe de locul stimulului iniial.
Cnd valoarea pozitiv a potenialului membranar este suficient de mare (indicnd un exces de ioni Na+ pe faa intern a membranei), canalul
sufer o nou schimbare conformaional i devine inactiv. n forma sa inactiv canalul se nchide, astfel nct ionii Na+ nu-l mai pot traversa.
n acest moment, ntr-o alt zon a membranei pompa Na/K poate ncepe s pompeze Na+ n cealalt parte a membranei. Acest proces restabilete
potenialul membranar i permite canalului s se nchid.
 + +
o Ionii de Na se desprind, se ataeaz ionii de K . Are loc o defosforilare i n urma acesteia
16
+ +
proteina pierde afinitatea pentru K . Se desprind ionii de K i enzima revine n conformaia
iniial E1 (Figura 17).

Alte exemple de pompe ionice sunt

+ +
o pompa de H , K din mucoasa gastric
++
o pompa de Ca din reticulul sarcoplasmic

o pompa protonic bacteriorodopsina (sub aciunea luminii pompeaz protoni din interiorul
n exteriorul celulei).

(a) (b)
+ +
Figura 16 (a) Schema general a Na /K - ATP-azei. (b) Mecanismul de transport (schema Albers-Post).

+ +
Figura 17 Funcionarea Na , K - ATP-azei.
 17

+ + + +
Figura 18 Mecanismul pompei Na /K . A se observa c iniial ionii Na (oranj) sunt la interiorul celulei i ionii K
(albastru) sunt n afra celulei. Membrana plasmatic este figurat n negru. Proteina de transport transmembranar
+
(galben) este deschis ctre interior (a). n momentul n care sunt captai trei ioni Na , proteina transportoare
reacioneaz cu ATP i este fosforilat (b). Porteina transportoare fosforilat are un fosfat anorganic legat covalent
la protein. Fosforilarea proteinei de transport duce la o modificare confromaional a proteinei de transport astfel
+
nct siturie de legare a ionilor sunt deschise ctre exterior(c). Cei trei ioni Na prsesc siturile de legare, iar aceste
+
situri i schimb proprietile astfel nct s fie mai dificil s se lege cu ioni Na . n acelai timp siturile de legare ale
+ +
ionilor K devin active (d). Legarea a doi ioni K conduce la hidroliza gruprii fosfat legat covalent. ndeprtarea
grupri fosfat duce la o nou modificare conformaional astfel nct siturile de legare s fie din nou orientate ctre
+
interiorul celulei. Ionii K prsesc siturile de legare i ptrund n celul (e). Proteina transportoare este n acest
moment pregtit pentru un nou ciclu de transport.

Transportul activ secundar

Transportul activ secundar = ptrunderea speciilor transportate ntr-un compartiment (extracelular
sau intracelular) mpotriva gradientului lor electrochimic, prin asocierea cu molecule care se
deplaseaz normal conform propriului lor gradient de concentraie. Gradientul este, ns, meninut
prin transport activ primar.

Transportorul ntlnit n difuzia facilitat poate lega cele dou molecule

o fie n aceeai stare conformaional (pe aceeai parte) - simport (co-transport).

n simport (Figura 19) - enzima leag pe aceeai parte, n conformaia T1, ambele
specii i sufer tranziia T1 - T2 numai dup legarea ambelor.
+
Exemplu: glucoza n celulele mucoasei intestinale se asociaz cu Na care intr
+
pasiv. Ionii de Na sunt eliminai activ prin transport primar, prin hidroliza ATP, iar
glucoza rmne. Transportul este electrogenic deoarece are ca rezultat net
transportul unei sarcini pozitive dintr-o parte a membranei n cealalt.

o fie pe cele dou pri, n stri conformaionale diferite - antiport (contra-transport).

 n antiport proteina transportoare leag n starea T2 un alt ion dect cel care
18
sufer difuzia facilitat, care va fi evacuat n compartimentul n care potenialul lui
electrochimic este mai mare.

Exemple:

+ ++
muchiul cardiac - antiport 3 Na / 1 Ca - electrogenic (sarcina net +1).
++
Asigura concentraia sczut a Ca n interior pe seama pomprii active
+ +
a Na+de ctre Na ,K - ATP-aza.

+ +
transportorul de 1 Na /2 H din membrana bacteriei E. coli.

(a) (b)
Figura 19 Mecanismul de simport (transportul simultan al dou molecule sau ioni prin membrana lipidic
bilaminar n aceiai direcie). Ovalul galben reprezint membrana plasmatic a celulei. Ovalurile negre reprezint
proteinele transportoare transmembranare, simportul. Cercurile roii reprezint moleculele n concentraie mare n
+
celul (de ex. glucoz), iar romburile albastre reprezint moleculele sau ionii ca de exemplu Na a cror concentraie
+
este mai mare n exterior. (a) Ionii Na pot intra n celul (pentru a compensa gradientul de concentraie) dac i
numai dac simultan moleculele de glucoz se deplaseaz invers gradientului de concentraie. Sinporterul leag
+
iniial ionii Na i dup aceea leag glucoz. (b) n momentul n care cele dou specii sunt legate proteina sufer o
modificare astfel nct siturile de legare se orienteaz spre interiorul celulei. Moleculele prsesc sinporterul n mod
secvenial.

Figura 20 Transportul glucozei n intestin.

(a) (b) (c) (d)

Figura 21 Transportul antiport (http://bio.winona.msus.edu/berg).
5. Receptori i traductori de informaie n membranele biologice 19

Definiia receptorului
Receptorii membranari = structuri macromoleculare aflate n membrana celular, care au
capacitatea de a recunoate o molecul semnal din mediul extracelular, numit mesager prim, i de
a interaciona cu ea rapid i reversibil. n urma interaciei, celula poate sintetiza o alt molecul
semnal mesager secund care declaneaz rspunsul celular specific. Mesagerul secund poate fi,
uneori, chiar complexul receptor mesager prim.

Exemple

o Mesageri primi: mediatorii chimici, hormonii, antigenii, medicamentele, drogurile etc.

o Mesageri secunzi : acidul adenozin monofosforic ciclic (c-AMP), acidul guanozin

monofosforic ciclic (c-GMP), diacil glicerolul (DAG), inozitol trifosfatul (InosP3).

Semnalizarea intercelular se realizeaz prin intermediul reelei complexe de receptori membranari

i al liganzilor specifici ai acestor receptori, liganzi care reprezint semnalele.

Etapele semnalizrii intercelulare

1. Sinteza moleculei semnal

2. Eliberarea moleculei semnal

3. Transportul moleculei semnal ctre int

4. Detecia semnalului

5. Rspunsul celular

6. Desprinderea moleculei semnal de receptor

Clasificarea semnalelor
semnale endocrine reprezentate de hormonii produi n glandele endocrine, secretai n snge i
distribuii n organism;

semnale paracrine, generate de celule, acioneaz local n vecintate;

semnale de contact, necesit contactul intercelular;

semnale nervoase, se transmit de-a lungul axonilor ctre celulele int

semnale autocrine (celulele secret molecule semnal care se leag de receptorii proprii).
 20

Figura 22 Semnale intercelulare: (a) semnale endocrine; (b) semnale paracrine; (c) semnale neuronale; (d) semnale
de contact (Alberts et al., Molecular Biology of the Cell, 2002).

Clasificarea receptorilor membranari

I. Receptori asociai cu canale ionice (ionotropi)

II. Receptori care acioneaz prin intermediul proteinelor G

III. Receptori legai de enzime (sunt fie ei nii enzime, fie sunt asociai cu enzime pe care le activeaz).
Enzimele respective sunt, n marea lor majoritate, protein kinaze.

Receptorii din ultimele dou clase mai sunt numii i receptori metabotropi.

Receptorii ionotropi

Receptorii asociai cu canale ionice au o zon receptoare de care se leag mesagerul prim i o zon
efectoare prin care comunic senzorului canalului comanda de deschidere sau nchidere a porii; n
urma activrii afecteaz direct activitatea celulei prin deschiderea nemijlocit a unor canale ionice.

Exemplu: receptorul nicotinic de acetilcolin (Figura 23 Receptorul nicotinic de acetilcolin.). Prin

legarea Ach de subunitile a ale receptorului, are loc o modificare conformaional n urma creia
canalul interior format de cele 5 subuniti se deschide i permite trecerea nestingherit a ionilor.
 21

Figura 23 Receptorul nicotinic de acetilcolin.

Receptorii care funcioneaz prin intermediul proteinelor G

Receptorii care acioneaz prin intermediul proteinelor G sunt receptori metabotropi care pot
determina sinteza mesagerilor secunzi (prin intermediul unei proteine efectoare).

Ciclul epinefrinei :

o Mesagerul prim : Epinefrina (adrenalina) se leag de receptorul specific (de zona

receptoare a acestuia).

o Receptorul leag o protein G (n urma unei modificri conformaionale).

3 subuniti notate a, b i g

n stare liber leag GDP

n stare legat sufer o modificare conformaional : elibereaz GDP i leag GTP

la subunitatea a.

subunitatea a se separ de subunitile b i g i difuzeaz pna cnd ntlnete un

efector (zona efectoare), adenilat ciclaza ce activeaz i catalizeaz transformarea
ATP din celul n c-AMP;

Dup activarea efectorului, subunitatea a a proteinei G, prin hidroliza GTP devine

inactiv i se recombin cu subunitile b i g, refcnd proteina G. Procesul se
poate relua.

o Mesagerul secund : c-AMP declaneaz o serie de reacii enzimatice prin care este activat
enzima fosforilaz i aceasta din urm determin transformarea glicogenului n glucoz ce
este eliberat din celul (rspunsul celular).

Mesagerul prim Epinefrina (adrenalina)

Mesagerul secund c-AMP
Etape R + G(a-GDP,b,g) G(a-GTP, b, g)
a-GTP + adenilat ciclaza adenilat ciclaza/a-GTP: ATP c-AMP
a-GTP a-GDP G (a-GDP,b,g)
Aciunea mesagerului secund c-AMP + enzima fosforilaz enzima fosforilaz* : glicogenglucoz
 22

Figura 24 Mecanism ce implic epinefrina

Ciclul biochimic al rodopsinei n excitaia vizual.

o Mesagerul prim : lumina

o Receptorul pentru lumin, rodopsina, leag n urma fotoactivrii traductina (protein G)

Traductina activeaz o protein efectoare (PDE).

PDE convertete c-GMP (mesager secund) n GMP.

Prin aceast conversie se nchid canalele de Na i Ca. Celula se hiperpolarizeaz i

informaia este transmis creierului pe cile nervoase.

o Mesagerul secund : c-GMP poate activa o serie de protein kinaze care, la rndul lor,
determin n ultim instan eliberarea de hormoni, neurotransmitori etc.

Mesagerul prim lumina

Mesagerul secund c-GMP
Etape Rodopsina +lumin Rudopsina* - traductina (G)
traductina: PDE*: c-GMP GMP
Aciunea mesagerului secund c-GMP GMP: canalele Na, Ca se nchid
(rspunsul celular) Hiperpolarizarea celulei transmiterea informaiei

Alte exemple

o Mesagerul prim : angiotensina, glucoza, Ach etc

o Mesageri secunzi : DAG sau InosP3 (IP3)(Figura 25).

o Receptori leag molecule semnal (Figura 26),

Activeaz apoi o protein G

Proteina G activeaz o enzim numit fosfolipaza C.

Substratul acestei enzime este reprezentat de fosfolipide, n special fosfatidil

inositol 4-5 difosfat (PIP2). Enzima descompune PIP2 n
 inositol 1,4,5-trifosfat (IP3), eliberat in citosol 23
diaciglicerol (DAG) care rmne ataat de bistratul lipidic.

IP3 se leag de un receptor specific situat in membrana reticulului endoplasmic,

receptor care este un canal de calciu.

La legarea IP3 canalul de Ca se deschide. La rndul sau, calciul eliberat poate

aciona si el ca mesager secund pentru alte procese celulare.

activarea, mpreun cu DAG, a protein kinazei C- Ca dependente i

aceasta poate fosforila diverse proteine.

activarea calmodulinei care poate apoi interaciona cu alte proteine etc.

Mesagerul prim angiotensina, glucoza, Ach

Mesagerul secund DAG sau InosP3 (IP3)
Etape R+mesager prim R* : fosfolipaza C*
fosfolipaza C* : PIP2 IP3 + DAG
Aciunea mesagerului secund IP3 + RE(Ca) canalul Ca deschide Ca
(rspunsul celular) Ca+DAG : protein kinaza* : fosforilarea proteinelor
Ca : calmodulina* : interacia cu alte proteine

Figura 25 Receptori cu mesageri secunzi.

Figura 26 Receptori cuplai cu hidroliza fosfatidil inozitolului.

Receptori asociai cu enzime 24
Se activeaz o protein kinaz citoplasmatic (Figura 27). Activitatea celulei este influenat n etape: mai
nti are loc o modificare metabolic a celulei. Aceasta poate n final s duc la deschiderea sau nchiderea unui canal
ionic ori poate modifica o alt activitate a celulei (de exemplu transcripia unei proteine ori alt rspuns celular
specific). Exemplu: receptorul de insulin (Figura 28) poate activa o tirozin kinaz, se fosforileaz alte proteine i n
final se produce rspunsul celular care poate fi creterea permeabilitii pentru glucoz.

Figura 27 Activarea protein-kinazei citoplasmatice.

Figura 28 Receptorul de insulin.

Alte resurse
1. Carnegie Mellon, Department of Biological Sciences, "Animating Biology":
http://telstar.ote.cmu.edu/biology/animation/
2. Stanford Univ, Sea Urchin Embryology Group:
http://www.stanford.edu/group/Urchin/GIFS/
3. Winona State University, Biology Department, Dr. Steve Berg:
http://course1.winona.edu/sberg/Free.htm
http://course1.winona.edu/sberg/ANIMTNS/Directry.htm
4. Campbell N, Reece J, Biology, 7th Edition, Ed. Pearson, Benjamin, Cummings, ISBN: 978-0805371710, 2005.
5. Alberts B, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K, Walter P, Molecular Biology of the Cell, Ed. Garland Science,
ISBN: 978-0815332183, 2002.
6. Eremia D, Curs de Biofizica Medicala, Ed. UMF Carol Davila, 1993.