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Artculo de revisin

TECNICAS INMUNOLOGICAS Y LA INMUNOCROMATOGRAFIA

IMMUNOLOGICAL TECHNIQUES AND IMMUNOCHROMATOGRAPHY

Interno de Tecnologa Mdica Herrera Espinoza Gustavo Adib1


1Hospital Regional Docente Clnico Quirrgico Daniel Alcides Carrin. Junn,
Per.

RESUMEN

La reaccin antgeno anticuerpo conocida tambin como inmunocomplejo o


complejo inmune, es resultado del contacto entre un antgeno y un anticuerpo, que
se caracteriza por ser rpido, especfico y espontneo. En esta reaccin se
distinguen dos etapas las cuales son, la interaccin primaria no visualizable y la
interaccin secundaria que sigue despus de la primaria, las tcnicas
inmunolgicas que evidencian la interaccin Antgeno - Anticuerpo a travs de una
reaccin secundaria como la aglutinacin, precipitacin o floculacin. Mediante
estas tcnicas inmunolgicas se realiza la determinacin de enfermedades
relacionadas con el agua causada por bacterias y protozoarios patgenos,
infeccin por el virus de la inmunodeficiencia humana, y el uso de pruebas rpidas
basadas en el principio de la inmunocromatografia para la deteccin de
leptospirosis humana.

PALABRAS CLAVE: Antgeno, anticuerpo, tcnicas inmunolgicas,


inmunocromatografia.

SUMMARY

The antibody antigen reaction known also as immune complex or immune complex
is the result of the contact between an antigen and an antibody, which is
characterized by being fast, specific and spontaneous. In this reaction we
distinguish two stages which are the non - displayable primary interaction and the
secondary interaction that follows after the primary immunological techniques that
evidence the antigen - antibody interaction through a secondary reaction such as
agglutination, precipitation or flocculation. Immunological techniques are used to
determine diseases related to water caused by bacteria and protozoan pathogens,
human immunodeficiency virus infection, and the use of rapid tests based on the
principle of immunochromatography for the detection of human leptospirosis.
KEYWORDS: Antigen, antibody, immunological techniques,
immunochromatography.

INTRODUCCION

Las tcnicas inmunolgicas basadas en reacciones de aglutinacin, precipitacin o


floculacin son las que evidencian la interaccin Antgeno Anticuerpo a travs de
una reaccin secundaria que es visualizable macroscpicamente 1. Las tcnicas de
aglutinacin involucra una interaccin Antgeno Anticuerpo que lleva a la
aparicin de un aglutinado, esta tcnica consiste en hacer reaccionar cantidades
equivalentes de Antgeno Anticuerpo, en esta tcnica el antgeno es particulado
pero tambin se pueden emplear antgenos solubles gracias a que se puede
emplear distintas partculas inertes como por ejemplo partculas de ltex las cuales
se usan en tcnicas como la PCR , FR Y ASO, y realizar un pegado qumico o
fisicoqumico del antgeno soluble a dichas partculas para generar un antgeno
particulado til para fines de identificacin.

FIGURA N 01: reaccin de aglutinacin por la interaccin Antgeno Anticuerpo.

Por otro lado estn las tcnicas de precipitacin que se basan en mezclar
cantidades suficientes de un antgeno soluble con anticuerpos especficos, la
interaccin antgeno - anticuerpo puede dar lugar a una red capaz de ser
visualizada como un precipitado, esta estar constituida por grandes complejos
inmunes formados por la interaccin Antgeno Anticuerpo, pero para que pueda
visualizarse la precipitacin tiene que haber cantidades iguales entre antgenos y
anticuerpos1.

La tcnica de aglutinacin ha sido utilizada en la identificacin rpida de bacterias


y protozoos en agua se han desarrollado con xito mtodos por aglutinacin de
ltex para Salmonella spp., Vibrio cholerae y E. coli1. Segn los estudios sobre la
identificacin rpida de bacterias y protozoos en agua se pudo llevar a cabo la
tcnica de precipitacin pero se dio a conocer el principio de esta tcnica como
una pequea introduccin a lo que son tcnicas de aglutinacin 1.

FIGURA N 02: zona de exceso de Anticuerpos, zona de equivalencia y zona de exceso de


Antgenos.

Tambin est la tcnica inmunocromatografica que es una de las tcnicas


de inmunodiagnstico ms modernas cuyas principales ventajas son la simplicidad
y rapidez de la prueba se presenta en un formato de tira, en el cual la muestra
problema fluye a lo largo de un sustrato slido por medio de una accin capilar.
Esta tcnica tiene como principio la visualizacin dela reaccin antgeno
anticuerpo por la acumulacin del conjugado anti IgM humana con oro coloidal
en zonas especficas del papel de nitrocelulosa donde se encuentran absorbidos
en una lnea el antgeno especifico y sobre otra lnea las sustancias controles
como son la polo-L-lisina o el anticuerpo complementario al que forma parte del
conjugado, en muestras negativas se visualizara solo una lnea correspondiente a
la retencin del conjugado sobre la zona de control y en muestras positivas se
visualizaran dos lneas paralelas, las pruebas inmunocromatograficas son una
variante muy til ya que ofrecen resultados entre 15 a 20 minutos. Esta tcnica ha
sido utilizada para el diagnstico rpido de leptospirosis humana y hiv3, 2.

FIGURA N 03: Funcionamiento de una prueba inmunocromatografica.

VENTAJAS Y DESVENTEJAS DE LAS TECNICAS INMUNOLOGICA Y LA


INMUNOCROMATOGRAFIA
Las ventajas de las reacciones de aglutinacin y precipitacin desde el punto de
vista de su utilidad en el laboratorio es que son muy sencillas de realizar, no
requieren de ningn equipamiento para su lectura, son rpidas y fciles de
implementar. Por otro lado las tcnicas de aglutinacin presentan mayor
sensibilidad que las tcnicas por precipitacin por lo que las han sustituido en
muchos casos, pero sin embargo cabe mencionar que las reacciones de
aglutinacin y precipitacin presentan una menor sensibilidad que las tcnicas
basadas en la interaccin primaria tales como ELISA e Inmunofluorescencia1,2.

Ventajas de la tcnica inmunoicromatografica. La metodologa para su uso es fcil


y se realiza en pocos pasos asimismo la interpretacin para su lectura es clara, los
resultados se pueden visualizar al cabo de 15 a 20 minutos segn la marca que se
est usando, las desventajas de esta tcnica se debe a la poca exactitud y
especialmente a la baja sensibilidad ya que esta tcnica son a veces
insatisfactorias, no son pruebas cuantitativas por ese motivo no son pruebas
confirmatorias por lo que se tiene que emplear otras pruebas ms especficas para
la confirmacin de un diagnostico3.

CUADRO N 01: Cuadro descriptivo de tcnicas inmunolgicas, su principio,


ventajas y desventajas.
CONTROL DE CALIDAD DE LAS PRUEBAS DE AGLUTINACION,
PRECIPITACION E INMUNOCROMATOGRAFICAS
TECNICA PRINCIPIO VENTAJAS DESVENTAJAS
INMUNOLOGICA
PRECIPITACION Interaccin Ag Ac que lleva a la Sencillas de realizar. Presentan una menor
aparicin de un aglutinado. No requieren de ningn sensibilidad que las
Se usan antgenos solubles equipamiento para su tcnicas basadas en la
lectura interaccin primaria
Rpidas y fciles de tales como ELISA e
implementar Inmunofluorescencia.
AGLUTINACION Interaccin Ag Ac que lleva a la Sencillas de realizar
aparicin de un aglutinado.
Se usan Ag particulados. No requieren de ningn
equipamiento para su
lectura.
Rpidas y fciles de
implementar.
Presentan mayor
sensibilidad que las
tcnicas por
precipitacin.
INMUNOCROMATO Se basa en la migracin de una Uso es fcil. Exactitud y sensibilidad
GRAFIA muestra a travs de una Se realiza en pocos insatisfactorias.
membrana de nitrocelulosa. pasos. No son pruebas
Resultados cuantitativas.
visualizables al cabo de
15 a 20 minutos
Para las pruebas basadas en reaccin de aglutinacin y precipitacin se
recomienda procesar juntamente con las muestras, sueros control de reactividad
conocida para controlar la performance del ensayo. Cada Laboratorio debe
disear su propio sistema de Control de Calidad Interno y establecer las medidas
correctivas si se observan desvos de calidad.

En las pruebas inmunocromatograficas una lnea en el control de la prueba del


dispositivo sirve como un control interconstrudo. Cada prueba vlida debe mostrar
la lnea del control dentro del tiempo de lectura del resultado. La aparicin de la
lnea de control indica que los reactivos de esa prueba estn funcionando como
est especificado.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. MSc. Hermes Fundora Hernndez, MSc. Yamila Puig Pea, MSc. Sergio
Chiroles Rubalcaba, MSc. Andrea Mara Rodrguez Bertheau, MSc. Juan
Gallardo Daz y MSc. Yoslaine Milin Samper. Mtodos inmunolgicos
utilizados en la identificacin rpida de bacterias y protozoarios en aguas.
Revista Cubana de Higiene y Epidemiologa. 2013; 51 (1):84-96.

2. MsC. Jos Antonio Lamotte Castillo. Infeccin por VIH/sida en el mundo


actual. MEDISAN 2014; 18(7):117.

3. MSc. Yendrys Prez Elias; MSc. Ana Margarita Obregn Fuentes; MSc.
Isabel del Carmen Rodrguez Reyes y Dra. Martha Julia Alfonso Gonzlez.
Actualizacin en el diagnstico de la leptospirosis humana. Revista Cubana
de Medicina Militar. 2015; 44(4):416-427.