UNIVERSIDAD DR.

JOS MATAS DELGADO

FACULTAD DE AGRICULTURA E INVESTIGACIN AGRCOLA
JULIA HILL DE OSULLIVAN

SINTESIS: "CULTIVO IN VITRO DE VEGETALES

NOMBRE DE ALUMNO: MARROQUIN DE LA O, GABRIELA PAOLA

NMERO DE CARNET: 201402686

CTEDRA: INTRODUCCION A LA BIOTECNOLOGIA.

CATEDRATICA: CRISTABEL CRUZ MUOZ

FECHA DE ENTREGA: MARTES 26 DE septiembre de 2017

 Objetivos

OBJETIVO GENERAL:
Reconocer las diferentes aplicaciones de los procesos de los cultivo in vitro de
vegetales en funcin de los procesos industriales involucrados en la elaboracin de
alimentos y e impacto que tiene la en la industria agroalimentaria y en la economa de la
misma, para la mejora de nuevos procesos innovadores en el pas.

OBJETIVOS ESPECFICO:
identificar los procesos, efectos, requisitos necesarios para llevar acabo los
procesos de los cultivos in vitro de los vegetales.
Reconocer la importancia del cultivo in vitro.
Reconocer los avances en la industria agroalimentaria y las aplicaciones del
cultivo in vitro para la industria alimentaria.
Analizar en que consiste los procesos de cultivo in vitro.
 INTRODUCCION

El cultivo de tejidos en su acepcin amplia puede ser definido como un

conjunto muy heterogneo de tcnicas que presentan en comn el hecho
de que un explante (una parte separada del vegetal que pueden ser
protoplastos clulas desprovistas de pared celular clulas, tejidos u
rganos), se cultiva aspticamente en un medio articial de composicin
qumica denida y se incuba en condiciones ambientales controladas.

El cultivo de tejidos vegetales o cultivo in vitro de tejidos vegetales, es una

tcnica de reproduccin en condiciones totalmente aspticas, en la que a
partir de un pequeo segmento inicial de tejido es posible regenerar en poco
tiempo miles o millones de plantas genticamente iguales a la planta madre,
cuando a este tejido le es aplicado un estmulo por medio de variables fsicas
y qumicas controladas en un medio de cultivo.

A diferencia de las tcnicas tradicionales de cultivo, esta poderosa

herramienta permite la propagacin de grandes volmenes de plantas en
menor tiempo; as como el manejo de las mismas en espacios reducidos.
Por otro lado, la tcnica es de gran utilidad en la obtencin de plantas libres
de patgenos; plantas homocigotas, en la produccin de plantas en peligro
de extincin, en estudios de ingeniera gentica, etc.
 CULTIVO IN VITRO
Un cultivo in vitro es aquel realizado sobre un medio nutritivo en condiciones estriles.
Puede ser de: plantas, semillas, embriones, rganos, explantos, clulas y protoplstos
El cultivo in vitro consiste en tomar una porcin de una planta (ej. el pice, una hoja o
segmento de ella, segmento de tallo, meristemo, embrin, nudo, semilla, antera, etc.) y
colocarla en un medio nutritivo estril (usualmente gelificado, semislido) donde se
regenerar una o muchas plantas. Durante las ltimas dcadas, la tcnica del cultivo in
vitro ha ganado especial inters para el establecimiento de diversas plantas para la
produccin de compuestos o la obtencin de cultivos ms sanos y con caractersticas
genticas especficas. El cultivo in vitro de vegetales se basa en el aislamiento de
rganos, tejidos o clulas vegetales y en el ajuste de las condiciones necesarias para la
obtencin de respuestas fisiolgicas o morfognicas a partir de es-tos explantes
(Hxtermann, 1997). El cultivo de clulas y tejidos in vitro (CCTV) involucra diferentes
tcnicas a partir de diferente material vegetal tales como cloroplastos, clulas, tejidos,
rganos e incluso plantas completas.

Caractersticas del cultivo in vitro:

Es empleado a microescala
Hay optimizacin de las condiciones ambientales
No se produce el patrn normal de desarrollo de una planta
Hace factible la manipulacin de las clula individuales o tejidos. Fundamental
para transformacin gentica.
Los cultivos celulares y sus aplicaciones (cultivos de clulas vegetales)
El trmino genrico cultivo de tejidos vegetales involucra a diferentes tcnicas de cultivo
de material vegetal diverso, incluyendo a los protoplastos (clulas desprovistas de su
pared celular), clulas, tejidos, rganos y plantas completas. Mediante stas y otras
tcnicas de cultivo, es posible obtener plantas libres de microbios en un medio nutritivo
asptico (estril) en condiciones ambientales controladas. Tambin se lo conoce como
cultivo in vitro de plantas por realizarse en recipientes de vidrio (hoy tambin de otros
materiales).
Las primeras experiencias relacionadas con el cultivo de tejidos vegetales se remontan
a 1902, pero recin en 1922 se logr el primer experimento exitoso: la germinacin in
vitro de semillas de orqudeas. Luego de la germinacin, las plntulas obtenidas se
transfirieron a un medio de cultivo en condiciones aspticas, y as se mantuvieron
protegidas del ataque de patgenos (hongos, virus y bacterias). Hoy esta tcnica tiene
numerosas aplicaciones:
Propagacin masiva de plantas, especialmente para especies de difcil
propagacin por otros mtodos, o en vas de extincin
Clonacin de individuos de caractersticas agronmicas muy deseables
durante todo el ao
Obtencin de plantas libres de virus
Produccin de semillas sintticas
Conservacin de germoplasma (conjunto de individuos que representan la
variabilidad gentica de una poblacin vegetal)
Obtencin de metabolitos secundarios
Produccin de nuevos hbridos
Mejora gentica de plantas (incluyendo obtencin de plantas transgnicas)
Germinacin de semillas.
Produccin de haploides.
Estudios fisiolgicos diversos
LAS BASES BIOLGICAS DEL CULTIVO DE TEJIDOS:
LA TOTIPOTENCIA es la capacidad de una clula de generar un individuo
completamente idntico a la clula madre, la cual tiene la misma informacin gentica y
la misma funcin (Kieran & Col, 1997), es decir, indica que cualquier clula vegetal
contiene una copia ntegra del material gentico de la planta a la que pertenece sin
importar su funcin o posicin en ella, y por lo tanto tiene el potencial para regenerar una
nueva planta completa (Ferl y Paul, 2000).
La reproduccin asexual de plantas por cultivo de tejidos es posible gracias a que, en
general, varias clulas de un individuo vegetal poseen la capacidad necesaria para
permitir el crecimiento y el desarrollo de un nuevo individuo completo, sin que medie
ningn tipo de fusin de clulas sexuales o gametas. Esta capacidad se denomina
totipotencialidad celular, y es caracterstica de un grupo de clulas vegetales conocidas
como clulas meristemticas, presentes en los distintos rganos de la planta. La
potencialidad de una clula diferenciada (una clula de conduccin, epidrmica, etc.)
para generar tejidos nuevos y eventualmente un organismo completo, disminuye con el
grado de diferenciacin alcanzado por esa clula, pero puede revertirse parcial o
completamente segn las condiciones de cultivo a las que se la someta. Las clulas
vegetales crecidas en condiciones aspticas sobre medios de cultivo adicionados con
hormonas vegetales, pueden dividirse dando dos tipos de respuesta:
una desdiferenciacin celular acompaada de crecimiento tumoral, que da lugar a una
masa de clulas indiferenciadas denominada callo, la cual bajo las condiciones
adecuadas es capaz de generar rganos o embriones somticos (llamados as porque
son estructuras similares a un embrin, pero que no se originaron por unin de gametas),
una respuesta morfogentica por la cual se forman directamente rganos
(organognesis) o embriones (embriones somticos).
La primera respuesta se conoce como organognesis o embriognesis indirecta
(mediada por un estado de callo) mientras que la segunda respuesta se considera
organognesis o embriognesis directa.
El cultivo in vitro consiste en tomar una porcin de una planta (a la que se denominar
explanto, como por ej. el pice, una hoja o segmento de ella, segmento de tallo,
meristema, embrin, nudo, semilla, antera, etc.) y colocarla en un medio nutritivo estril
(usualmente gelificado, semislido) donde se regenerarn una o muchas plantas.
La totipotencialidad celular es clave en el desarrollo de plantas genticamente
modificadas o transgnicas. Una vez realizada la transformacin, ya sea por
Agrobacterium o por el mtodo de biobalstica, el paso siguiente es el cultivo in vitro, con
el fin de obtener, a partir del explanto inicial transformado, plntulas que lleven el
transgn en todas sus clulas.
CULTIVO IN VITRO DE PLANTAS Y SU RELACIN CON LA BIOTECNOLOGA
El cultivo in vitro (trmino que literalmente significa en vidrio), incluye muchas tcnicas
destinadas a introducir, multiplicar y regenerar, entre otros recursos, material vegetal o
animal en condiciones controladas y aspticas. El cultivo in vitro, constituye un paso
fundamental en la obtencin y regeneracin de plantas genticamente modificadas, o
transgnicas, mediante tcnicas de ingeniera gentica. Es decir que existe una estrecha
relacin entre el cultivo de tejidos vegetales y la biotecnologa moderna. Normalmente
se utilizan cultivos de tejidos, seguido de la regeneracin de la planta completa, y la
subsiguiente expresin de los genes introducidos, o transgenes.
Cultivo in Vitro de material vegetal
Cultivo de tejidos vegetales es una descripcin genrica que involucra diferentes
tcnicas de cultivo de material vegetal diverso, incluyendo las de protoplastos (clulas
desprovistas de su pared celular), clulas, tejidos, rganos y plantas completas.
Mediante stas y otras tcnicas de cultivo, es posible obtener plantas libres de microbios
en un medio nutritivo asptico (estril) en condiciones ambientales controladas.
Las primeras experiencias relacionadas al cultivo de tejidos vegetales se remontan a
1902, pero recin en 1922 se logr el primer experimento exitoso: germinacin in vitro
de semillas de orqudeas. Luego de la germinacin, las plntulas obtenidas se
transfirieron a un medio de cultivo en condiciones aspticas, y as se mantuvieron
protegidas del ataque de patgenos (hongos, virus y bacterias).
EL CULTIVO IN VITRO Y LA BIOTECNOLOGA:
La micropropagacin
La propagacin de plantas in vitro es una tcnica muy utilizada en cultivos de importancia
econmica. Permite cultivar clulas, tejidos, rganos, semillas, embriones y obtener
individuos selectos en forma rpida. Los cultivos son realizados por personal
especializado en medios especficos (hormonas, minerales, vitaminas, fuente de
carbono, agente gelificante, agua, etc.) y condiciones ambientales controladas
(temperatura, humedad y luz). Una vez ajustados los protocolos para la especie o cultivo
de inters, es posible automatizar el proceso de modo de llevarlo a mayor escala de
produccin.
La micropropagacin (propagacin clonal por cultivo in vitro) constituye uno de los
mtodos biotecnolgicos que mayores logros ha aportado al desarrollo de la agricultura,
ya que se la usa en la produccin masiva de especies hortcolas, aromticas,
medicinales, frutcolas, ornamentales y forestales.
Entre las ventajas de la micropropagacin se pueden mencionar:
- Posibilita incrementar rpidamente nuevos materiales.
- Permite controlar las condiciones ambientales, debido a su independencia de los
mismos (luz, temperatura y humedad controlada).
- Permite estudiar diversos procesos fisiolgicos.
- Evita el riesgo de contaminacin con patgenos, ya que se realiza en medios
esterilizados.
- Se pueden obtener gran cantidad de individuos en espacios reducidos.
- Permite la obtencin de individuos uniformes.
- Facilita el transporte del material.
La micropropagacion consiste en la propagacin de un genotipo a gran escala a travs
del empleo de tcnicas de cultivo de tejidos. Posibilita la produccin de plantas de calidad
uniforme a escala comercial, a partir de un genotipo selecto y con una tasa de
multiplicacin ilimitada.
Dentro del proceso de micropropagacin diferenciamos varias fases o etapas:
0: Seleccin y Preparacin de la planta madre
1: Desinfeccin de las yemas de la planta y/o desinfeccin de semillas
2: introduccin del material seleccionado in vitro
3: Multiplicacin de brotes
4: Enraizamiento
5: Aclimatacin

El cultivo de meristemas
En la yema apical se encuentran un grupo de clulas que conforman el meristema apical
(tiene un tamao entre 0,01 y 0,3 mm), tejido embrionario que tiene la capacidad de
formar todos los tejidos de la planta. A partir de ellos se pueden regenerar plantas
completas
 Cultivo de clulas y rganos vegetales en biorreactores
Una vez obtenidos los callos a partir de algn explanto, los mismos pueden disgregarse
para obtener una suspensin de clulas. La misma puede utilizarse para generar
embriones somticos (la base de las semillas sintticas), o puede directamente cultivarse
para producir metabolitos secundarios, que son compuestos qumicos sintetizados por
las clulas vegetales en determinadas condiciones, con gran utilidad para las industrias
farmacutica y alimenticia, entre otras, Los cultivos celulares se llevan a cabo en
biorreactores, que son recipientes de distinta capacidad (de unos pocos a miles de litros),
diseados para propiciar el crecimiento y/o la multiplicacin de distinto tipo de clulas y/u
rganos
CONCLUSIONES
1. El cultivo de tejidos vegetales in vitro, representa una alternativa para el desarrollo
de nuevas tcnicas en beneficio de las ciencias agrcolas, asi como tambin para
diferentes cambios genticos en nuevas siembras de productos asi como
produccin gentica de las plantas.

2. Las condiciones controladas para cultivar plantines confiere la oportunidad de

aplicar la biotecnologa de la micropropagacin en cualquier poca del ao, y asi
tener una mejor eficacia en la cultivacin para esta aplicacin.

3. La mayor desventaja de algunos mtodos de propagacin vegetativa in vitro

consiste en el riesgo de que se produzcan mutaciones y variaciones genticas.

4. En el cultivo de tejidos las separaciones de explante y las operaciones

relacionadas con su incubacin in vitro, depende en gran medida del tipo de
explante y del sistema de cultivo empleada; por lo cual las tcnicas que se
empleen, no son exactamente las mismas para meristemos. Los cultivos en vitro
requieren tcnicas heterogneas donde los explante requieren condiciones
contraladas y aspticas.

5. Unas de las bases biolgicas importantes es la totipotencia ya que indica que

cualquier clula vegetal contiene una copia ntegra del material gentico de la
planta a la que pertenece sin importar su funcin o posicin en ella, y por lo tanto
tiene el potencial para regenerar una nueva planta completa.
RECOMENDACIONES

1. Se recomienda que a travs del cultivo in vitro sea posible obtener material para
la siembra a lo largo de todo el ao. Tambin se facilita la reproduccin de
especies de difcil reproduccin o de crecimiento lento.

2. Deben realizarse en condiciones muy controladas y totalmente estriles. El

proceso se inicia con la eleccin de la planta madre, la cual debe estar en
condiciones ptimas. La planta es desinfectada, para luego extraer los fragmentos
que se van a cultivar.

3. todas las plantas producidas in vitro son plantas demasiado frgiles por lo que,
deben de ser aclimatadas bajo invernadero en alveolos con turba para
endurecerse y posteriormente trasplantarlas a maceta o vivero de campo.
 BIBLIOGRAFIA

Biotecnologia y Mejoramiento Vegetal II. Levitus G., Echenique V., Rubinstein C.,
Hopp E., Mroginski L. (Eds.) INTA ediciones (2010). http://intainforma.inta.gov.ar/wp-
content/uploads/2010/09/bio_WEB.pdf De este libro, los capitulos mas generales son
I1, I2, I4, IV1, IV2, IV3 y V9

Cultivo in vitro de Jatropha curcas para la Obtencin de Curcina. Instituto Politcnico

Nacional. Mxico Extrado de https://www.intagri.com/articulos/nutricion-vegetal/cultivo-in-
vitro-de-celulas-y-tejidos-vegetal - Esta informacin es propiedad intelectual de INTAGRI
S.C., Intagri se reserva el derecho de su publicacin y reproduccin total o parcial.

http://asesorias.cuautitlan2.unam.mx/fondo_editorial/comite_editorial/manuales/culti
vosdetejidosvegetales_manualprac.pdf
GLOSARIO
Explante: tejido vivo separado de su organismo propio y transferido a un artificial
de crecimiento.

folculos: son estructuras que se encuentran dentro de los ovarios y donde los
vulos se desarrollan y completan su maduracin
.
fecundacin in vitro: procedimiento por el que se extraen los vulos del ovario
de una mujer y se combinan con los espermatozoides afuera del cuerpo para
formar embriones. Los embriones crecen en el laboratorio por varios das y luego
se colocan en el tero de una

totipontencialidad: es la capacidad de algunas clulas (en este caso las

vegetales) de dar origen a clulas de cualquier tejido y eventualmente dar lugar a
una planta completa. Gracias a esa propiedad, podemos obtener clones de una
planta madre a partir de lo que llamamos "gajo" o "esqueje"

aseptico: ausencia de hongos, bacterias, virus, micoplasmas u otros

microorganismos en los cultivos.
cepa celular: una cepa celular deriva tanto de un cultivo primario como de una
lnea celular por la seleccin o clonado de clulas que tienen propiedades o
marcadores especficos.

clon: una poblacin de clulas derivada por mitosis de una sola clula. un clon no
es necesariamente homogneo y, adems, el trmino "clon" o "clonado" no debe
ser usado para indicar la homogeneidad, gentica o de otro tipo, de una poblacin
celular.
cultivo de tejidos: el mantenimiento o crecimiento de tejidos in vitro en modo tal
que pueden llevar a cabo su diferenciacin preservando su arquitectura y/o
funcin.
 Propagacin: conjunto de fenmenos fsicos que conducen a las ondas del
transmisor al receptor

Germinacin: es el proceso mediante el cual un embrin se desarrolla hasta

convertirse en una planta. Es un proceso que se lleva a cabo cuando el embrin
se hincha y la cubierta de la semilla se rompe.