ANALISIS MICROBIOLOGICO DEL AMBIENTE Y

SUPERFICIE 25 de Junio del 2016

ANALISIS MICROBIOLOGICO DEL AMBIENTE Y

SUPERFICIE
Anyeline Assia M, Luis Serpa M, Joseph Lemos.
Universidad Del Magdalena.
Facultad de Ingeniera

RESUMEN
El anlisis microbiolgico se realiza con el fin de determinar la contaminacin o causas
de contaminacin dadas en el ambiente y superficies ya que de las condiciones de estas
depender de la calidad del sitio. De acuerdo con esto se deben llevar a cabo cierto
control de estas variables, para ello se utilizaron algunos mtodos previamente vistos.
Para la prueba de ambientes se desarroll tomando cajas de Petri con agar SPC, AC
(Cet), EMB Y RF dejndolas abiertas y expuestas al ambiente del consultorio de
medicina general ubicado en el bloque III de la Universidad del Magdalena por 30 min,
previo a esto se procedi a cerrar y encubar. Cuando de realizo el anlisis para
superficies se utiliz la tcnica del hisopo, tomando la muestra de uno de los mesones
del laboratorios seguido a esto se sembr en agar AN y AC (Cet); y se llev a incubar a
la respectivas temperaturas.
Palabras claves: microorganismos, ambiente, superficie, calidad.

ABSTRACT
The microbiological analysis is realized in order to determine the pollution or reasons of
pollution given in the environment and surfaces since of the conditions of these it will
depend on the quality of the site. In agreement with this there must be carried out
certain control of these variables, for it some before seen methods were in use. For the
test of environments it developed taking Petri's boxes with agar SPC, AC (Cet), EMB
AND RF making them opened and exposed to the environment of the doctor's office of
general medicine located in the block the III of the University of the Magdalena for 30
min, before this it was proceeded to close and encubar. When of I realize the analysis
for surfaces, the technology of the hyssop was in use, taking the sample of one of the
inns of the laboratories followed to this it was sowed in agar AN and AC (Cet); and it
led to incubating to respective temperatures.
Key words: microorganisms, environment, surface, quality,
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INTRODUCCION
Uno de los factores que afecta la calidad
ambiental y microbiana de un lugar
determinado, es la falta de higiene y
normas mnimas de sanidad. En
momentos donde la contaminacin
microbiana puede aparecer se debe al
entorno, las superficies de contacto y
otros factores que pueden aportar
bacterias, se presentan como un foco
infeccioso de diversos microorganismos.
La prctica proporciono los elementos
necesarios de conocimiento acerca de los
anlisis realizados a los ambientes, el
entorno. Los resultados de estas
determinaciones muestran el nivel de
asepsia y desinfeccin. Adems, permite
conocer los puntos crticos de control.
Sedimentacin en placa
Clase
UFC/4 h
A <1
B 5
C 50
D 100
Los anlisis microbiolgicos tienen
como fin determinar si los procesos
desarrollados en una empresa son o no
los suficientes para mantener la
inocuidad de los productos all
procesados.
La evaluacin de la calidad
microbiolgica del ambiente nos indica
la cantidad de microorganismos que
estn presentes en un rea determinada.
Mientras ms limpia sea un rea, menor
ser el nmero de microorganismos
presentes en el aire de la misma.
La siguiente tabla muestra los valores
permisibles de los microorganismos que
pueden estar presente en un rea
determinada. Clasificacin de cuartos
limpios. Manual de buenas prcticas de
manufactura. OMS 823.
Mximo n de
microorganismos viables
permitidos/m3
Menos de 1
5
100
500

Clase A: Operaciones de alto riesgo. pueden ser equipos de trabajo, mesones,

sillas, paredes entre otras.
Clase B: Es el ambiente de los
alrededores de la zona A.
Clase C y D: reas limpias donde se OBJETIVO:
realizan las fases menos crticas, pero
importantes. Evaluar la calidad
microbiolgica de un
El control microbiolgico de superficie determinado ambiente y
nos proporciona informacin acerca el superficie para obtener una
nmero de microorganismos presentes estimacin representativa de la
en una superficie determinada; sin microbiota.
importar el origen de la superficie esta
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MATERIALES:
Cajas de Agar Eosina Azul de
Metileno (EMB)
Cajas de Agar SPC
Cajas de Agar Saboraud (AS)
Cajas de Agar Baird Parker (BP)
Cajas de Agar Cetrimide (AC)
Tubos de ensayos esteriles con
diluyente (Solucin salina)
Hisopos estriles
Cuadrante de 24 30 cm2 de
cartulina/polisulfona/aluminio.
PROCEDIMIENTO:
Control microbiolgico del ambiente
Seleccione el ambiente a trabar y
establezca su rea de muestreo.
Exponer placas con el medio de
cultivo EMB, BP, AS, SPC y AC
durante un periodo de 30
minutos.
Incubar las placas a 35 +/- 2C en
posicin invertida durante 24
48 horas, para los cultivos de
hongos incube a 25 +/- 2C por
75 horas.
Contar el nmero de colonias en
la placa.
Calcular el nmero de
microorganismos que caen por
cm2 durante 1 minuto.
Clculo del nmero de
microorganismos por cm2
Para calcular la cantidad de
microorganismos que cayeron en la
placa por unidad de tiempo:
Contar el nmero de colonias en la placa.
Este nmero se expresa como UFC
(Unidades Formadoras de Colonias), ya
que varios microorganismos podran
estar juntos y al multiplicarse slo se
ver una colonia.
Calcular el rea de la placa (A).
A = r2
Para una placa de 9 cm de dimetro el
rea es
A = 3,14 x 4,52
cm2
= 63,62 cm2
Calcular el nmero de microorganismos
que caen en el rea por unidad de tiempo.
Se puede expresar en: UFC/ placa/ min -
UFC/ cm2/ min - UFC/ rea total/ min.
Ejemplo
Se expone una placa de 9 cm de dimetro
en un rea durante 30 minutos. Se incuba
24 horas a 35 +/- 2 o C y se cuentan 25
colonias. Calcular el nmero de
UFC/placa/min. Y UFC/cm2 /min.
25 UFC ---------30 min
X ---------------- 1 min
X = 0,833 UFC/placa/min.
Si deseamos expresar los valores en
UFC/cm2
/min.
0,833ufc -------- 63,62 cm2
X ----------------------- 1 cm2
X =0,0131 UFC/cm2 /min.
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Es importante asegurarse al momento de
comparar los resultados, que stos estn
expresados en las mismas unidades.

Control de microorganismos por

superficie
Definir el rea donde se va a
tomar la muestra.
Coloque un cuadrante estril de
cartulina con un rea entre 24 y
30 cm2. Medio AC (Cetrimide agar)
Tome el hisopo estril y
humedzcalo con un diluyente
(solucin salina) y proceda a
realizar el frotis sobre la
superficie a evaluar, en por lo
menos dos direcciones distintas,
rotndolo ligeramente.
Luego la cabeza del hisopo
colquela en el diluyente. A
partir de esta solucin tome
alcuotas para sembrarlas en
placas con agar SPC, BP, EMB, Medio RF
AS y AC.
Incube a 37C por 24/48 horas y
25C/72 horas los cultivos de
hongos.
Realice el conteo de colonias.
Calcule el nmero de UFC/rea.

RESULTADOS
Anlisis del ambiente del Medio EMB
consultorio de medicina
general de la Universidad del
Magdalena
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Medio SPC

Sedimenta
Sedimentac
Medio cin de
in de placa
de placa
UFC/placa/
Cultivo UFC/cm2/
min
min
AC
(Cetrim
0 0
ide Medio AN
agar)
RF 0.133 2.09x10-3
EMB 0.7 0.011
SPC 0.366 5.76x10-3 ANALISIS DE RESULTADOS

Anlisis de superficie de los

mesones de laboratorio de Como se puede notar en el medio AC
microbiologa de la (cetrimide agar) no creci ningn
Universidad del Magdalena. microorganismo, pero conociendo la
especialidad de este agar, el cual se
utiliza para determinar la presencia de
pseudomonas, cabe resaltar que en el
consultorio de medicina general de la
Universidad del Magdalena no se
encuentra o no se registra presencia de
pseudomonas.
Denotamos una leve preocupacin por el
Medio AC (cet) notado aunque leve crecimiento de UFC
en el agar EMB, puesto que es un medio
para el crecimiento de enterobacterias
tambin posiblemente sea crecimiento
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de E. coli, y como ya sabemos este es un
claro indicador de contaminacin fecal.
Tambin sabiendo las implicaciones que
tiene el rea analizada como lo es un
consultorio mdico que su ambiente
debe estar totalmente estril, dando a
este lugar una clasificacin segn el
OMS 823, este clasificara para un zona
de clase A, sin embargo como se puede
analizar en los diferentes medios de
cultivos utilizados vemos que se
encuentra entre los parmetros de
microorganismos permisibles.
CONCLUSION
2. En qu consiste la desinfeccin
Con estos anlisis podemos concluir que
siempre habr cierto riesgo y presencia
de algn microorganismo puesto que es
difcil pero de vital importancia reducir a
cero tanto el riesgo como la presencia de
estos, y con la ayuda de estos anlisis de
laboratorio podemos determinar los
factores, lugares de mayor crecimiento,
como tambin a distinguir que clase de
microorganismos estn presentes para
saber la mejor manera de radicarlos
minimizando as los riesgos de
contaminacin sea cual sea el rea de
estudio.
ANEXO
CUESTIONARIO
1. Qu factores ambientales
favorecen el crecimiento y
desarrollo de los
microorganismos en plantas de
alimentos?
R/ los principales factores que
favorecen el crecimiento tanto en
las plantas de alimento como en
los alimentos como tal, son:
Factores intrnsecos: nutrientes,
PH, potencial redox y oxgeno,
actividad del agua, estructura
biolgica.
Factores extrnsecos:
temperatura, humedad relativa
del ambiente, presencia y
concentracin de gases
atmosfricos, presencia y
actividades de otros
microorganismos.
y esterilizacin de ambientes y
superficies?
R/ESTERILIZACION: es el
proceso mediante el cual se
alcanza la muerte de todas las
formas de vida microbianas,
incluyendo bacterias y sus
formas esporuladas altamente
resistentes, hongos y sus esporos,
y virus. Se entiende por muerte,
la prdida irreversible de la
capacidad reproductiva del
microorganismo. (Deberan
estar incluidos dentro de esta
definicin la eliminacin de
estructuras como los
priones?).Se trata de un trmino
absoluto, donde un objeto est
estril o no lo est, sin rangos
intermedios.
DESINFECCION: en este
proceso se eliminan los agentes
patgenos reconocidos, pero no
necesariamente todas las formas
de vida microbianas.
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Es un trmino relativo, donde microorganismos contaminantes.
existen diversos niveles de Estos procedimientos se aplican
desinfeccin, desde una nicamente a objetos
esterilizacin qumica, a una inanimados.
mnima reduccin del nmero de
BIBLIOGRAFIA II%5B1%5D.p
http://www1.up df
http://datateca.
rh.edu/esther/la http://estudio_d
unad.edu.co/co
b-micro- e_la_calidad_m
ntenidos/20150
aplicada/confer icrobiolgica_de
4/contLinea/lec
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