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- Tema
Resumen
Objetivos
Justificacin
Estas araas tienen registros fosiles de sus primeras apariciones desde el periodo
devnico, carbonfero, eoceno, oligoceno, mioceno.
El segundo mecanismo est relacionado con la latrofilina, una protena que sirve
como receptor de la latrotoxina independiente de calcio. Esta protena se
encuentra insertada en la membrana citoplasmtica y una vez unida la latrotoxina,
se activan los canales de Ca++; sin embargo, este mecanismo no est an muy
claro.
Entre todas estas sustancias, de las cuales la mayor parte es an desconocida, hay
unas cuantas que son, o podran ser, de gran utilidad e inters en mbitos tan
diversos como la medicina y la farmacologa, o todo tipo de industrias, tecnologas
e ingenieras. Las sustancias producidas, o sintetizadas, por las clases de
artrpodos llamadas arcnidos e insectos (los artrpodos comprenden a ms del
80% de todas las especies animales que se conocen), y concretamente en las
sustancias que utilizan para el ataque, la defensa y la alimentacin (venenos,
reacciones o fibras fascinantes, como la tela de araa).
Problema a investigar
Uno de los principales problemas con los anti venenos es que al no conocer la
composicin de todos los venenos de las diferentes especies, se utilizan venenos
generales universales para la picadura de algn organismo sin importar que tipo de
especies sea debido a que una enzima que es comn a todos los venenos, y cuya
funcin es la de facilitar la difusin del mismo, es la hialuronidasa, presente tambin
en los venenos de muchos insectos o serpientes. La principal responsable de las
lesiones cutneas necrticas en la mordedura de la reclusa es la esfingomielinasa-
D.
Todos los anti venenos producen reacciones adversas. Estas reacciones fueron
clasificadas por la Organizacin Mundial de la Salud como reacciones tardas y
reacciones tempranas, las cuales a su vez pueden ser de dos tipos: reacciones
tempranas **anafilcticas y reacciones tempranas anafilactoides.
Reacciones tardas (hipersensibilidad tipo III).
Las reacciones tardas corresponden al cuadro clnico conocido como enfermedad
del suero, una hipersensibilidad tipo III que ocurre de 7 a 15 das despus de la
administracin del anti veneno. En estas reacciones, el organismo del paciente
reconoce a las protenas heterlogas como extraas y produce una respuesta de
anticuerpos en su contra. En la fase inicial de esta respuesta hay un exceso de
antgeno, por lo que se forman complejos inmunes pequeos y solubles, que
difunden y se depositan en lugares como las membranas sinoviales y las
membranas basales de glomrulo y de endotelio.
Reacciones anafilactoides
Son las que se observan con ms frecuencia durante la administracin de anti
venenos. Para que estas ocurran, a diferencia de las reacciones anafilcticas, no
se requiere exposicin previa al producto. Aunque las causas por las cuales ocurren
este tipo de reacciones no son del todo comprendidas, su induccin se ha
relacionado con la actividad anticomplementaria de los anti venenos y la presencia
de anticuerpos en el anti veneno contra antgenos celulares del paciente y
anticuerpos del paciente contra las protenas constituyentes del anti veneno.
Antecedentes
El veneno de Latrodectus mactans es neurotxico, lo que significa que bloquea la
transmisin de impulsos nerviosos, paralizando el sistema nervioso central y
produciendo dolores musculares intensos. Si la viuda negra es presionada contra la
piel humana, reacciona naturalmente mordiendo para su defensa.
Los efectos ms comunes de la mordedura comprenden dolor abdominal,
espasmos musculares abdominales e hipertensin. En algunos varones mordidos
se han reportado casos de priapismo, que cedieron con la administracin del
antdoto. Aunque el veneno de esta araa es peligroso, raramente llega a ser letal.
Si es correcta y puntualmente tratada, la vctima se recupera totalmente. La
mordedura de una viuda negra es distinguida por una herida doble. Los nios y los
adultos que no estn en buenas condiciones fsicas sufren ms la mordedura
pudiendo tener en estos casos consecuencias mortales.
El Sistema de Vigilancia de la Exposicin a Txicos del reporte anual de la
Asociacin Estadounidense de Centros de Control de Envenenamientos en 1997,
indic que se documentaron 2,757 picaduras por viuda negra en 66 centros de
control (Litovitz 1998). Estos centros abarcan 93% de la poblacin de Estados
Unidos con todos sus estados, excepto por Oklahoma, Arkansas, Mississippi,
Carolina del Sur, Vermont y Maine. De estas 2,757 picaduras, 783 fueron tratadas
en una clnica o centro de salud y se registr que 380 pacientes presentaron una
intoxicacin moderada o severa. No hubo muertes. No existen registros de
resultados con respecto al uso del antiveneno para L. mactans. Es muy difcil
calcular el nmero de pacientes que sufren envenenamiento significativo cada ao
y que no fueron reportados a un centro de envenenamiento.
En Mxico existen pocos datos confiables, pues apenas se inician los esfuerzos
para documentar adecuadamente la casustica de ste cada da ms importante
problema de salud. El Instituto Mexicano del Seguro Social (IMSS) es pionero en la
organizacin de estos datos y en 1998 determin separar del rubro global de
animales ponzoosos a la araa, como se hizo inicialmente con el alacrn y
despus con serpiente. Durante ese mismo ao se informaron 4,142 casos de
personas atacadas por araas que sufrieron una intoxicacin, lo que corresponde a
un 4.3 % de los pacientes atacados por algn animal ponzooso. La Secretaria de
Salud a nivel nacional acepta que aproximadamente el 11 % de las personas
agredidas por un animal ponzooso lo son por una araa.
En la Cruz Roja de Len, Guanajuato, se atendi durante ese ao a 48 pacientes
intoxicados por viuda negra, a 63 durante 1999, a 75 durante el 2000 y a 73 en el
2001. La ciudad de Guadalajara,
Jalisco, reporta un promedio anual de 500 pacientes intoxicados por la misma
causa. Con base en estas cifras es posible darse una idea sobre la magnitud de tan
importante problema de salud, pues se sabe que el registro an es bastante
deficiente. En cuanto a mortalidad, sta de cero en un total de cerca de 2000
pacientes manejados hasta el presente. Esta experiencia es muy similar a la de los
cientos de mdico que ya han tenido la fortuna de usar el antdoto.
Los antdotos tradicionales producen efectos colaterales y los dolores pueden seguir
hasta 72 horas despus. El Instituto de Biotecnologa de la UNAM en Morelos
desarroll entre 1998 y 2000, empleando la ingeniera gentica, un antiveneno
llamado Aracmyn que realiza su efecto en 15 minutos. Este antdoto ha sido
aprobado en Colombia, Mxico, Panam, Per, Venezuela y Estados Unidos.
Cabe mencionar que el Instituto Bioclon, filial del laboratorio Silanes, es dueo de
la patente del antiveneno Aracmyn, parte de cuyo desarrollo e investigacin
ocurrieron en las instalaciones del mencionado Instituto. Aracmyn, junto con otros
anti venenos faboterpicos, se exportan a frica, Centroamrica y Sudamrica. En
los Estados Unidos, la FDA ya autoriz la venta de Aracmyn, Alacramyn y
Antivipmyn.
Se han presentado protocolos para la recoleccin de veneno de araas utilizando
la estimulacin elctrica, lo que demuestra el procedimiento de la viuda negro
occidental (Viuda negra). El veneno de recogida es til para diversos anlisis aguas,
incluyendo la identificacin directa de protenas mediante espectrometra de masas,
ensayos funcionales, y la estimulacin de la expresin gnica veneno para los
estudios de transcriptmica. Esta tcnica tiene la ventaja sobre los protocolos
isofinales de veneno de homogeneizados de la glndula enteros, que no se separan
los componentes del veneno autnticos a partir de protenas celulares que no son
secretadas como parte del veneno. Los resultados representativos demuestran la
deteccin de pptidos del veneno conocido de la muestra recogida utilizando la
espectrometra de masas. El procedimiento de recogida de veneno es seguido por
un protocolo para la diseccin de las glndulas de veneno de araa, con resultados
que demuestran que esto conduce a la caracterizacin de las protenas y pptidos
del veneno-expresado en el nivel de secuencia.
La caracterizacin bioqumica de los venenos que muestran tpicamente se
componen de una amplia variedad de protenas y pptidos, que actan en gran
medida de los sistemas circulatorio y nervioso de los animales inyectados para
entregar rpidamente toxinas constituyentes. Una pequea fraccin de los animales
venenosos puede representar una amenaza para los seres humanos, en particular
las especies con distribuciones **sinantrpicas. El estudio de la composicin del
veneno y las actividades funcionales ha jugado un papel importante en la
caracterizacin funcional de los componentes celulares de vertebrados (en
particular los canales inicos neuronales) y en la elucidacin de los procesos
celulares fundamentales (por ejemplo **neurosecrecin). Por otra parte, seleccionar
pptidos del veneno tiene propiedades tiles en contextos biomdicos, incluyendo
sus usos como tratamientos para el cncer y el dolor, y se extraen para el desarrollo
de antiveneno. Los venenos tambin juegan un papel destacado en la investigacin
ecolgica y evolutiva, por tanto, la coleccin de estas secreciones peligrosas tiene
muchas utilidades.
Hiptesis
Elaborar un anti veneno especfico para la araa capulina o viuda negra
(Latrodectus mactans) para su uso en personas que hayan sido picadas por este
organismo, evitando el uso de anti venenos que produzcan daos colaterales de
efecto temprano o tardo o en los pacientes atendidos.
Trminos
Picomolar: Medida de la concentracin de un soluto en una disolucin.
Divalente: Elemento o compuesto que ha perdido dos electrones y tiene dos
protones ms que el nmero total de electrones y una carga de +2, que
simboliza el exceso de los mencionados protones.
Acetilcolina: Sustancia qumica que acta en la transmisin de los impulsos
nerviosos.
Catecolaminas: Son un grupo de sustancias que incluyen la adrenalina, la
noradrenalina y la dopamina, las cuales son sintetizadas a partir del
aminocido tirosina.
Quelceros: Piezas bucales de los quelicerados, un subfilo de artrpodos que
incluye los arcnidos.
Postracin: Estado de abatimiento o decaimiento en que se encuentra una
persona por causa de una enfermedad o un sentimiento de gran tristeza.
Nefritis: Inflamacin de los tejidos del rin.
KDa: Kilodalton.
Anafilaxia: reaccin alrgica grave en todo el cuerpo a un qumico que se ha
convertido en alergeno.
Sinantropia: capacidad de algunas especies de flora y fauna para habitar en
ecosistemas urbanos o antropizados, adaptndose a las condiciones
ambientales.
Neurosecrecin: Secrecin, por parte de las neuronas, de hormonas o
factores de liberacin.
Modelo Lgico
Tipo de investigacin:
Investigacin explicativa: En el mbito de la Investigacin, se conoce con el nombre
de Investigacin Explicativa al proceso orientado, no slo a describir o hacer un
mero acercamiento en torno a un fenmeno o hecho especfico, sino que busca
establecer las causas que se encuentran detrs de ste. Es aquella que tiene
relacin causal; no slo persigue describir o acercarse a un problema, sino que
intenta encontrar las causas del mismo. Este trabajo entra dentro del subtipo de la
investigacin explicativa de diseos experimentales los cuales aplican experimentos
"puros", entendiendo por tales los que renen tres requisitos fundamentales:
1) Manipulacin de una o ms variables independientes.
2) Medir el efecto de la variable independiente sobre la variable dependiente.
3) Validacin interna de la situacin experimental.
Los estudios de este tipo implican esfuerzos del investigador y una gran capacidad
de anlisis, sntesis e interpretacin. Asimismo, debe sealar las razones por las
cuales el estudio puede considerarse explicativo. Su realizacin supone el nimo de
contribuir al desarrollo del conocimiento cientfico".
Para definir este tipo de estudio, debern tenerse en cuenta las siguientes
interrogantes:
Los resultados de la investigacin se orientan a la comprobacin de hiptesis de
tercer grado?
Las hiptesis que se ha planteado estn construidas con variables que a su vez
contienen otras variables?
Las hiptesis que se ha planteado establecen la manera como una determinada
caracterstica u ocurrencia es determinada por otra?
Los resultados del trabajo pueden constituirse en un aporte al modelo terico de
la explicacin de hechos y fenmenos que puedan generalizarse a partir del
problema de investigacin?
Protocolo
1.- Preparacin del aparato electro-estimulador
1) Conecte el cable de alimentacin electro-estimulador a la salida y adjuntar
pedal externo para la entrada de seal externa.
Nota: Los cables elctricos deben estar aislados correctamente y metal expuesto
actual entrega no se deben tocar. Use guantes de ltex o nitrilo para la
proteccin. Interruptor de energa electro-estimulador debe estar en la posicin
OFF al conectar el cable de alimentacin y fijar los cables.
2) Conecte el electrodo positivo al terminal de salida de rojo en electro-
estimulador (cuando el interruptor de polaridad est en modo normal) y
conectar el electrodo negativo al terminal de salida negro. Nota: Cada
alambre electrodo debe terminar en una pinza.
3) Establecer estimulador para los siguientes ajustes iniciales recomendados:
Tensin = 7 V, Frecuencia = 1 pulsos por segundo, retardo = 0 milisegundos,
duracin = 200 milisegundos, pulsos individuales cambian = regular, y el
interruptor de modo = apagado.
4) Prueba de salida de electrodos adjuntando pinzas de cocodrilo a voltmeter
cables de prueba positivos y negativos. Encienda el interruptor de
alimentacin estimulador y suministrar corriente con pedal de pie.
2. Preparacin de inmovilizar frceps y Otros Materiales
4. Coleccin de Veneno
1) Encienda el vaco y spray quelceros araa con una solucin de agua con
una segunda punta roma de la jeringa nEedle. Succionar el agua con la aguja
de vaco para eliminar las impurezas.
2) Toque la aguja de vaco con electrodo negativo unido a tribuna araa y
entregar impulsos con pedal de pie una o ms veces. Vaco regurgitar de
inmediato si es necesario.
Nota: tribuna araa se encuentra dentro de la boca posterior a queliceras en la
superficie dorsal entre quelceros y enditos (ver Foelix 20 para la anatoma detallada
de araa). Nota: Con cada impulso, el contrato de las piernas de la araa, y el
veneno ser visible en forma de gotas claras que salen de los colmillos.
3) Recoger las gotitas de veneno con punta microcapilar y punta capilar de
transferencia en el tubo de 0.5 ml con agua o solucin tampn (solucin ser
absorbido por capilaridad).
Nota: evitar perforar araa con capilar que puede conducir a la contaminacin de la
hemolinfa y la muerte. Tambin evitar la contaminacin de los capilares con seda y
cola de hileras.
4) Adjuntar transferencia jeringa con adaptador de tubo para microcapilar (en el
extremo opuesto a la punta de la coleccin) y dsolucin de veneno ispense
de nuevo en el tubo. Ponga el tubo en hielo.
Nota: Deshgase de los capilares de residuos en un contenedor de objetos
punzantes cerca.
5) Coloque plstico recoger abierto el vial, junto con su tapa, cerca de la araa.
Sujete cuidadosamente las patas de araa con pinzas de diseccin roma a
cabo en una mano y pluma cuidadosamente abierta frceps dientes con la
otra mano, araa cayendo en la recogida de vial con unas pinzas romas y
rpidamente cierre la tapa. Continuar con los tubos que contienen veneno de
araa-siguiente y almacenar en -80 C congelador cuando haya terminado.
Nota: seguir ejerciendo cuidado al mover la araa de las pinzas de nuevo en el vial.
Asegrese de que el vial colector y la tapa es cercana a la araa para su rpida
transferencia y usan guantes.