Prctica de microscopa

Madeleyn Bastidas- Diana Charfueln

Departamento de Automtica y Electrnica
Universidad Autnoma de Occidente
Santiago, de Cali Colombia
Madeleyn.bastidas@uao.edu.co
diana.charfuelan@uao.edu.co

Abstract This document will carry out the correct way El microscopio normalmente cuenta con 3 objetivos de
to work with the light microscope, recognize its parts and distinto aumento (4x, 10x, 40x) ejemplo 10 x donde la
functions. The microscope allows us to see details and x indica que se amplifica una imagen 10 veces en su
structures that we do not observe a simple view. Its use is tamao real. Estos objetivos van montados sobre la base
not allowed to carry out research and discoveries that are
important in the field of medicine, engineering and other
giratoria que nos permite intercambiarlos para aumentar
branches of research de nuestra visibilidad cada vez se observa de manera ms
I. INTRODUCCIN ampliada es importante conocer que existen 2 tipos de
objetivos en seco e inmersin. En seco el aumento vara
Hay gran cantidad de clulas y microorganismos que de 4x a 40x y alcanza con el ndice de refraccin del aire
influyen significativamente en la vida de un ser vivo y que para que la imagen se forme ntidamente. En inmersin
por ello es fundamental ser estudiadas para mejorar la los lentes tiene aumentos que oscilan entre 90x y 100x en
calidad de vida. El instrumento que ayuda a que se realice estos lentes es necesario aumentar el ndice de refraccin
ese estudio utiliza microscopia de luz, es un instrumento para esto es necesario utilizar aceite.
de uso fundamental en el laboratorio para poder observar
a fondo algunos elementos como una lmina delgada de
cebolla, la mucosa salival, sangre y diferentes tipos de
tejidos de algunas especies. Adems es importante
conocer en qu consiste la microscopa confocal y el uso
del aceite de inmersin. Todo esto con el fin de conocer
ms detalladamente el elemento que estamos estudiando
y poder determinar algunas de sus partes y funciones.

II. DESARROLLO DE CONTENIDOS

A. Microscopio.
Instrumento que permite observar objetos que son
demasiado pequeos para ser observados a simple vista.
El microscopio cuenta con tres sistemas principalmente.
Sistema mecnico: Son las piezas que no
intervienen en la formacin de la imagen ni en el
cambio de la luz un ejemplo: tornillo micro,
platina, columna, etc.
Sistema de iluminacin: est integrado por los
componentes encargados de colectar la luz,
dosificarla, y dirigirla ejemplo: Espejo
condensador, diafragma.
Sistema ptico: Incluye todos los elementos que
ayudan en la ampliacin de la imagen es decir los
objetos oculares: lentes del microscopio.
Fig. 1 Detalle del
revolver porta objetivos y objetivos de uso
habitual (4X, 10X y 40X) en un microscopio Olympus BHT.
B. Microscopia de luz.
La microscopia de luz permite el paso de luz no alterada a
travs de un sistema de lentes de manera de producir un
campo brillante donde se pueden observar pequeos objetos.
Para poder estudiar microorganismos como bacterias, hongos,
parsitos, etc.
III. OBJETIVOS
 Entender el principio de la microscopa de luz,
conocer las partes del microscopio y sus
respectivas funciones.
Observar e identificar partes estructurales y tipo
de tejido de las muestras con las que se desarrolla
el laboratorio.
Utilizar correctamente el microscopio de luz para
la observacin de estructuras con el detalle que
permite su correcto uso.
Poder identificar glbulos rojos, glbulos
blancos, plaquetas, etc. Que se pueden observar
en la muestra de sangre.
Entender el funcionamiento y la diferencia de
cada objetivo (4x, 10x, 40x y 100X) que se
encuentran en el porta objetivos con el fin de
identificar y poder observar con mayor aumento.
Comprender la importancia y la funcin del aceite
de inmersin en la microscopia de luz.
IV. MATERIALES Y MTODOS.
A continuacin se enuncian los materiales con los que se
desarroll la prctica de laboratorio.
Microscopio de luz
Lmina portaobjetos
Lmina cubreobjetos
Aceite de inmersin
Colorante azul de metileno
Fino corte de cebolla
Muestra de sangre
Muestra de esfago de conejo
Muestra de mdula sea roja de la vaca
Gotas de reactivo lugol
Para iniciar con el desarrollo de la actividad en el
laboratorio se deben conocer las partes que componen
el microscopio de luz con el fin de que se obtuvieran
buenos resultados en cada uno de las muestras. De igual
manera se debi dar un previo estudio a la gua de
laboratorio.
En primera instancia se tom un trozo muy
pequeo de una de las escamas internas del bulbo
de cebolla, retirando una pequea fraccin de la
epidermis de esta. Se observan la forma
estructural de la clula, el ncleo de la clula, los
nuclolos al igual que los leucoplastos de esta
muestra. En este procedimiento se agrega una
gota de agua encima de dicho elemento y debe ser
cubierta con una lmina cubreobjetos; se ubica
esta lamina en la platina del carro, con el objeto
haca arriba y sujeta con las pinzas, para lograr
mayor precisin de lo observado se usan tanto el
macrmetro como el micrmetro el proceso antes
descrito ser utilizado en la 5 muestras que
trabajamos en el laboratorio.
Fig. 2 Desarrollo de prctica de laboratorio primera muestra
bulbo de cebolla con gotas de reactivo de lugol.
Como segunda muestra se tom una muestra de
mucosa salival de una de las integrantes del grupo
en el cual se realiz el mismo procedimiento
antes descrito. En esta muestra no se observa
claramente las clulas ni estructuras de la
muestra.
Tercera muestra Sobre la lmina limpiada
anticipadamente con alcohol, se coloca una gota
de sangre, se realiza un extendido de esta con la
ayuda de otra lamina y deje secar; se Trata el
extendido con metanol hasta que se evapore y se
cubra toda la lmina con colorante de Wright, este
se deja operar de5-8 minutos para finalmente
lavarlo con agua. Se sita la lmina en la platina.
Para lograr observacin de la estructura de la
muestra se mueven cada uno de los objetivos
desde el mnimo (10x) hasta el mximo sin mover
la lmina y se ajusta la imagen segn la
necesidad. Despus de observar las anteriores 3
muestras se procedi a elegir 2 lminas de
coleccin las cuales fueron medula sea roja de
la vaca y esfago de conejo las observamos y
 encontramos las caractersticas mostrados en
cada una de las lminas.
Fig. 3 Lminas de coleccin lamina superior medula
sea roja de la vaca, lamina inferior esfago de conejo.
V. RESULTADOS Y DISCUSIN.
A. Muestra Bulbo de Cebolla.
Fig.4 Imagen de resultados obtenidos en la primera muestra (objetivo4x
superior izquierda, objetivo 40x inferior izquierda, objetivo 10x superior
derecha y objetivo 100x inferior derecha).
En esta muestra de capa fina de cebolla con objetiv 4x
, 10x,40x y 100x tinturadas con lugol para observar ms
detalladamente la muestra en forma de celdas alargadas,
con burbujas de agua se logr diferenciar la membrana y
el citoplasma sin embargo es difcil ver los organelos
celulares tales como el ncleo y el nuclolo de la clula.
B. Muestra Mucosa Salival.
Fig.5 Imagen de resultados obtenidos en la segunda muestra
(objetivo40x superior izquierda, objetivo 10x inferior izquierda,
objetivo 4x lateral derecha).
C. Muestra de sangre.
Fig.6 Imagen de resultados obtenidos en la tercera muestra (objetivo4x
superior izquierda, objetivo 40x inferior izquierda, objetivo 10x superior
derecha y objetivo 100x inferior derecha).
En esta muestra Gracias al colorante Wright se pudo
diferenciar los glbulos rojos de los glbulos blancos.
Los glbulos rojos son los que se encuentran en mayor
cantidad. Los glbulos blancos son un poco ms grandes
pero es mucho ms difcil verlos lo cual necesitan ser
teidos. Y las plaquetas los puntos negros que se ven en
ms cantidad.
 E. Muestra de esfago de conejo.

Fig.7 Imagen de resultados obtenidos en la tercera muestra de sangre en el

objetivo 100x en la que observa 1. Glbulos blancos, 2.plaquetas y 3.
Glbulos rojos.
Fig.9 Imagen de resultados obtenidos en la quinta muestra
(objetivo4x superior izquierda, objetivo 40x inferior izquierda,
D. Muestra de medula sea roja de la vaca. Objetivo 10x superior derecha y objetivo 100x inferior derecha).

Descripcion de esta no se que ponerle

VI. CONCLUSIONES.

Se pudo observar y analizar varias muestras

del laboratorio en las cuales se hizo un
reconocimiento de las diferencia de cada una
ests especialmente de muestras animales y
vegetales.
Fig.8 Imagen de resultados obtenidos en la cuarta muestra Se trabaj con una muestra de sangre y se logr
(objetivo4x superior izquierda, objetivo 40x inferior izquierda, identificar plaquetas, glbulo blanco, glbulos
Objetivo 10x superior derecha y objetivo 100x inferior derecha).
rojos.
Descripcion de esta no se que ponerle Se practic y mejoro el uso adecuado del
microscopio
Se conoci el uso del aceite de inmersin y
algunos colorantes que nos permiten tener una
mejor visibilidad de la muestra.

VII. MEJORAS AL PROCESO.
Sera conveniente que al momento de realizar la
prueba con la muestra de sangre se pueda obtener
diferentes muestras de sangre para poder hacer
una diferenciacin entre ellas.
VII.CUESTIONARIO.
1. En qu consisten la microscopa confocal?
El microscopio confocal cuenta con un lser y un sistema
de barrido para permitir que la persona que lo est
utilizando tenga un imagen ms clara y especfica en el
plano que se requiera observar, sin ignorar ninguna de las
dimensiones. Cuenta con tres fuentes de luz las cuales son
lmpara de luz visible, lmpara de vapor de mercurio y
lser; que parte de aportar a la definicin de la imagen
modifican el contraste permitiendo que la observacin sea
ms precisa y detallada. En conclusin la microscopa
confocal permite observar imgenes tridimensionales de
la morfologa de la muestra con la que se est trabajando.
2. Cules son las clases de glbulos blancos que
existen y cul es la funcin de cada clase?
Los glbulos blancos o tambin llamados leucocitos son
clulas de respuesta inmunitaria de nuestro organismo; se
encuentran en la sangre y son los llamados defensas de
nuestro organismo. Los glbulos blancos se clasifican de
acuerdo a sus ncleos en mononucleares y polimorfo
nucleares.
En los mononucleares estn los linfocitos; estos son
glbulos blancos de menor tamao encargados de
reaccionar frente a materiales extraos, son encargados de
la inmunidad especfica o adquirirla. Tambin estn los
monocitos, que son glbulos blancos agrunolocitos, son
ms grandes que los anteriores y se generan en la medula
sea pero como viajan a diferentes rganos a travs de la
sangre se pueden encontrar en tejidos como los pulmones,
bazo, ganglios linfticos, entre otros. Su funcin es
comerse distintos microorganismos o restos celulares.
En los glbulos blancos polimorfo nucleares estn los
neutrfilos; que son de tipo granulocito, tiene un periodo
de vida de das o incluso horas, sin embargo, es el ms
abundante en el cuerpo humano y es el encargado de la
fagocitosis de hongos y bacterias. Tambin se encuentran
los basfilos; son los menos abundantes en la sangre y su
funcin es la respuesta alrgica a travs de la liberacin
de histamina y serotonina en bajas cantidades,
entendiendo esto como respuesta inmunitaria del cuerpo.
Y por ltimo estn los eosinfilos, que son responsables
en la patognesis de las enfermedades alrgicas y la
muerte de parsitos.
3. Cul es la funcin del aceite de inmersin en la
microscopa de luz?
El aceite de inmersin para microscopa tiene
aproximadamente el mismo ndice de refraccin que el
vidrio. Mediante el aceite de inmersin se elimina casi
completamente la desviacin de los rayos de luz y se
aumenta considerablemente la eficacia de los objetivos de
los microscopios. Funcin principal es aumentar la
resolucin que ofrece el microscopio, se consigue cuando
se hace inmersin en aceite transparente que tiene alto
ndice refractivo del lente del objetivo como el objeto que
se tiene en observacin.
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