INTRODUCCIN AL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

ANGELA YICETH TORRES CORREDOR, LEONEL DAVID BALLESTEROS,

HENRY YUSMN PEREZ ARENAS, DANIEL STIWAR NIO SANDOVAL
anyictorres@uniboyaca.edu.co, ldballesteros@uniboyaca.edu.co,
hyperez@uniboyaca.edu.co, dcnino@uniboyaca.edu.co

La presente prctica se realiz con el objetivo de conocer los diferentes

materiales y equipos bsicos del laboratorio de microbiologa para el cultivo de
microorganismos, conocer las principales normas de comportamiento y
seguridad dentro del laboratorio durante las prcticas a desarrollar, para ello
se realizaron montajes en el microscopio ptico con el fin de observar
distintos materiales los cuales se asemejan a estructuras morfolgicas de
algunos tipos de microorganismos , adems de ello se trabaj en la prctica
del manejo de la caja de Petri la cual es esencial en el desarrollo de la materia
para los distintos cultivos de bacterias. Todo esto con el fin de conocer el
funcionamiento de los equipos y materiales del laboratorio con los cuales se
podrn realizar las prcticas de manera adecuada y esto har que se tengan
los resultados deseados.

INTRODUCCIN

La microbiologa es la ciencia que Para poder desarrollar todos los

se encarga del estudio de los procedimientos microbiolgicos es
organismos ms pequeos que necesario conocer y manejar
existen, dentro de estos podemos eficientemente las tcnicas
incluir a las bacterias y a los
hongos. Para tener un propuestas, teniendo siempre
acercamiento a estos organismos, presentes las normas de
es necesario utilizar diferentes bioseguridad.
tcnicas de cultivo a nivel de
laboratorio, lo cual no hubiera sido OBJETIVO GENERAL
posible sin el descubrimiento de la
caja de Petri y los medios de cultivo
y dems materiales que facilitan su Identificar los principales elementos
reproduccin, pues brindan los utilizados en el laboratorio de
nutrientes necesarios para su microbiologa, as como la funcin
sobrevivencia. Con el objetivo del de cada uno de ellos.
estudio de su morfologa, el buen
manejo del microscopio es OBJETIVOS ESPECFICOS
crucial, pues gracias a este
instrumento se puede tener una Manipular correctamente los
aproximacin a sus estructuras elementos utilizados en el
celulares. laboratorio de microbiologa,
teniendo presente las normas de
bioseguridad.
Recordar las partes y 2 asas rectas
funcionamiento del microscopio lana
ptico. algodn
Comparar los principales mtodos Hoja impresa
de cultivo utilizados para los aceite de inmersin
diferentes tipos de tijeras
microorganismos. laminas porta objetos
laminas cubre objetos
MATERIALES papel de arroz

5 cajas de Petri PROCEDIMIENTO:

1 gradilla Para el reconocimiento de las
1 mechero partes y funcionamiento del
3 tubos de ensayo microscopio se deben seguir el
2 Asas redondas siguiente procedimiento:
 MARCO TERICO
Montaje hmedo hongo
filamentoso
Los montajes generalmente
hmedos permiten observar la
movilidad de los microscopios
vivos. Se utiliza tambin para
observar procesos como la mitosis,
meiosis y la formacin de esporas.
Para realizar un montaje hmedo
se debe verter una gota de agua o
del lquido que contiene los
microscopios en el centro de una
lmina portaobjetos y cubrirlo con
una lmina cubreobjetos. Para
evitar la evaporacin se puede
sellar el espacio que hay entre el
portaobjetos y el cubreobjetos con
vaselina o alguna sustancia similar.
Tcnicas de inoculacin.
Modalidades de inoculacin de
productos patolgicos para cultivo
difieren segn las caractersticas
del producto: slido, lquido,
procedente de cavidad estril, con
flora acompaante, etc. La finalidad
que se persigue en el primo cultivo
es la obtencin de colonias
aisladas para su posterior estudio.
Siembra por agotamiento: Se
trata de un mtodo rpido y simple
de agotamiento productivo y
continuo del inculo (material
microbiano utilizado para sembrar
un medio de cultivo) sobre un
medio slido contenido en una
cpsula de Petri. Con ste
procedimiento se puede conseguir
una buena separacin de las
colonias y aislarlas fcilmente. A
medida que se realizan estras las
bacterias pasan del asa al medio
en un nmero cada vez menor, de
manera que las estras iniciales
proporcionan un crecimiento
confluente, mientras que a lo largo
de las ltimas estras se
desarrollan colonias bien aisladas.
Imagen 1 Siembra por agotamiento.
Siembra Masiva: Consiste en
distribuir la muestra de manera
uniforme por la superficie del medio
de cultivo contenido en la placa. Es
el mtodo idneo para el recuento
de colonias (utilizando asas
calibradas) y para la realizacin del
antibiograma por el mtodo de
difusin. La metodologa general a
seguir seria la siguiente:
Con asa o escobilln, segn
los casos, efectuar la
descarga sobre la parte
media de la placa y extender
haciendo numerosas estras
confluentes hasta la periferia
de la placa.
Girar la placa 180 y repetir la
misma operacin, partiendo
de la descarga anterior.
Girar ahora 90 y estriar la
mitad de la placa como al
principio.
Estriar finalmente la placa en
su totalidad, en las
direcciones diagonales.
Microscopio electrnico
Es una fuente de luz que utiliza un
haz de electrones que se desplazan
en el vaco y en lnea recta. Con el
microscopio electrnico es posible
observar objetos muy pequeos
como los virus que no pueden ser
resueltos con el microscopio ptico.
En el microscopio electrnico en
lugar de lentes se emplean campos
magnticos que enfocan los haces
de los electrones, por ltimo, todos
los microscopios electrnicos
cuentan con un sistema que registra
o muestra la imagen que produce
los electrones.
Microscopio ptico
Es un instrumento formado por un
sistema de lentes: objetivos y
oculares que amplan los objetos
extremadamente pequeos para
posibilitar su observacin. El lente
del objetivo proporciona una imagen
intermedia ampliada del objetivo, el
lente ocular que recoge la imagen
es dada por el objetivo y la aumenta.
El desarrollo de este aparato suele
asociarse con los trabajos de Anton
van Leeuwenhoek.
Este instrumento ha sido de gran
utilidad, sobre todo en los campos
de la ciencia donde la estructura y la
organizacin microscpica es
importante donde se realizan
diferentes estudios para crear
nuevos microcomponentes.
Es una herramienta indispensable
en la elaboracin de vacunas,
gracias al microscopio se pueden
observar los diminutos seres que
habitan en nuestro entorno.
Tambin se utiliza en laboratorios
de histologa y anatoma patolgica,
donde la microscopa permite
determinadas aplicaciones
diagnsticas como el diagnstico de
certeza del cncer, numerosas
estructuras cristalinas, pigmentos,
lpidos, protenas, depsitos seos,
depsitos de amiloide entre otras.
RESULTADOS OBTENIDOS
Primer Montaje

OBJETIVO DE LOS LENTES DEL

MICROSCOPIO
Su objetivo es captar y ampliar la
imagen formada en los objetivos. El Imagen 2 Montaje hmedo con Algodn, objetivo
poder de aumento del ocular se 4X.
encuentra marcado en el ocular. Un
ocular por 4 puede aumentar la
imagen 4 veces la imagen que
produce el objetivo, Un ocular por 6
la aumenta 6 veces. Un ocular por
10 la aumenta 10 veces nunca se
deben tocar los lentes con las
manos. Si se ensucian, se deben
limpiar estos lentes con papel arroz.

Para qu sirve el microscopio

Imagen 3 Montaje hmedo con Algodn, objetivo
10X.
 Imagen 7 Montaje hmedo con letra papel peridico,
Imagen 4:Montaje hmedo con Algodn, objetivo
objetivo 40X.
40X.

Segundo Montaje Tercer Montaje.

Imagen 8 Montaje hmedo con lana, objetivo 4X.

Imagen 5 Montaje hmedo con letra papel peridico,

objetivo 4X.

Imagen 9 Montaje hmedo con lana, objetivo 10X.

Imagen 6 Montaje hmedo con letra papel peridico,

objetivo 10X.
 Referencias
Negrori, M. (2009). Microbiologia
Estomatologica, fundamentos y guia
practica (2 ed.). Buenos Aires:
EDITORIAL MEDICA
PARAMERICANA recuperado el 5 de
agosto de 2016,
https://books.google.com.co/books?id=
Gxmui-
vjZBgC&pg=PA557&dq=siembra+por+
agotamiento&hl=es&sa=X&ved=0ahUK
Ewjj3cKioqvOAhWDmR4KHTqfBzAQ6
AEIHDAA#v=onepage&q=siembra%20
por%20agotamiento&f=false
Imagen 10 Montaje hmedo con lana, objetivo 40X.

Segunda parte de laboratorio:

aprender el proceso de siembra de
cultivos de bacterias.

Anlisis.
En cuanto a los montajes
elaborados con cada uno de los
elementos (lana, papel peridico y
algodn) se logra observar
mediante el microscopio una
simulacin a lo que se puede
observar de acuerdo a las hifas de
un hongo en el caso de la lana y el
algodn, en cuanto a la letra se
observa la letra al contrario debido
al lente convexo que posee el
microscopio.
Por otro lado una parte esencial de
nuestro primer laboratorio de
microbiologa fue poder tener un
primer contacto con el material el
cual vamos a trabajar durante todo
el semestre, una tcnica que
utilizaremos seguido es la siembra
por agotamiento, esto con el fin de
poder obtener colonias separadas
para poder tener como cultivos ms
puros y para poder hacer una
identificacin ms precisa de los
microorganismos presentes.
La finalidad con la cual debemos
tener el mechero cerca a nuestro
lugar de trabajo y ms junto con el
material que estamos trabajando