Agar DNA

Medio de cultivo utilizado para la deteccin de enzimas desoxirribonucleasas.

Es especialmente til para la diferenciacin entre especies de estafilococos, as como para la
diferenciacin
de Serratia spp. de especies de Klebsiella y Enterobacter.

Fundamento

En el medio de cultivo, la triptena es la fuente de nitrgeno, aminocidos, y aporta los nutrientes

necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano.
El cido desoxirribonucleico (ADN), se encuentra en grado altamente polimerizado, y es el sustrato
de la enzima desoxirribonucleasa (DNAsa), la cual lo hidroliza. El cloruro de sodio mantiene el
balance osmtico y el agar es el agente solidificante.
Este medio de cultivo, permite diferenciar bacterias que poseen la enzima desoxirribonucleasa de
aquellas que no la poseen.
La presencia de la enzima, se puede detectar mediante el agregado de cido clorhdrico 1N.
El cido desoxirribonucleico hidrolizado presenta transparencia, mientras que el cido
desoxirribonucleico polimerizado, precipita y torna opacidad al medio de cultivo.

Siembra
A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio, sembrar un inculo denso, ya sea en
estra o por la tcnica de spot.

Incubacin
En aerobiosis, durante 24-48 horas a 35-37 C.
Cubrir la placa con cido clorhdrico 1N, y observar dentro de los primeros 5 minutos.

Resultados

Positivo: halo claro, transparente alrededor del crecimiento bacteriano.

Negativo: el medio se observa opaco.

Despus de la incubacin y una vez aadido el HCl registrar las zonas de claros alrededor de cada
punto de crecimiento. Una zona claramente definida indica que el DNA ha sido roto en fracciones
de nucletidos que no han sido precipitadas por el cido. Registrar estos microorganismos como
DNasa positivos. Las colonias DNasa negativas no muestras claros.