Profa. Dra. Maria Luiza B.

Sousa Atta
Faculdade de Farmcia da UFBA
Departamento de Anlises Clnicas e Toxicolgicas
Laboratrio de Pesquisa em Imunologia - LAPIM
Hipersensibilidade

Sintomas ou sinais clnicos iniciados por exposio a
um estmulo definido, em dose tolerada por pessoas
sadias.

WAO (World Allergy Organization), 2004
Hipersensibilidade

Classificao de Coombs e Gell (1963)

hipersensibilidade tipo I (imediata)

hipersensibilidade tipo II (citolticas, citotxicas e
estimuladoras)

hipersensibilidade tipo III (complexos imunes)

hipersensibilidade tipo IV (tardia, de imunidade celular)
 Hipersensibilidade

Alrgicos

IgE-mediados No-IgE-mediados

No-Atpicos Atpicos Clulas T

Insetos Eosinfilos

Helmintos IgG-mediados

Drogas Outros

Outros

No-alrgicos
Johansson et al., ACI International, 2002
Atopia x Alergia

Atopia
Tendncia pessoal e/ou familiar, geralmente na
infncia ou adolescncia, para tornar-se sensibilizado e
produzir anticorpos IgE em resposta a exposies
normais para alrgenos, geralmente protenas. Como
consequncia estas pessoas podem desenvolver sintomas
tpicos de asma, rinoconjuntivite, ou eczema/dermatite.

Alergia
Reao de hipersensibilidade iniciada por
mecanismos imunolgicos especficos.
WAO, 2004.
Fatores que influenciam na atopia
Classificao das doenas alrgicas

Asma alrgica mediada por IgE.

Rinite alrgica mediada por IgE.

Conjuntivite alrgica mediada por IgE.

Eczema atpico.

Urticria alrgica.

Alergia alimentar mediada por IgE.

Alergia a droga mediada por IgE.

Alergia a saliva ou veneno de insetos.

Anafilaxia alrgica mediada por IgE.
WAO, 2004.
A Imunoglobulina E (IgE)

Sousa-Atta,MLB. LAPIM/FFAR
IgE
Propriedades da IgE

Anticorpo presente na resposta imune Th2

Peso molecular em torno de 187 kDa

Termolbil

Baixa concentrao no soro

Vida mdia de apenas 48 h no sangue

Possui receptores de diferentes afinidades sobre clulas
onde se fixa por semanas

Presente em altas concentraes nas helmintases e
algumas protozooses

No tem capacidade aglutinante nem ativa Complemento
Receptor de alta afinidade FcRI

Clulas: Mastcitos (tecidos) e Basfilos (sangue)

 Mecanismo imune da alergia mediada por IgE
Re-exposio ao alrgeno
1o. Contato com
alrgeno
Ag

Ag Ag
CAP

Apresentao
do alrgeno IgE

Mastcito
LTh2

Citocinas
Ag
Mediadores
IL-4 bioativos
IL-10
IL-13
LB

Alergia
Hipersensibilidade tipo I

Ppula + eritema, leitura em 15 20 minutos

Principais fontes de alrgenos

caros (D. pteronyssinus, D. Farinae, B. tropicalis)

Plens

Plos e epitlios de animais domsticos (gato,
cachorro)

Fungos (A. alternata, Aspergillus, C. albicans)

Alimentos (frutos do mar, peixe, nozes, castanhas,
amendoim, ovo, leite, trigo e soja)

Ltex

Medicamentos (antibiticos, analgsicos e anestsicos)
Dermatophagoides pteronyssinus
(Der p 1)
Identificao, purificao e isolamento
de alrgenos

www.thermoscientific.com/phadia
Principais caractersticas dos alrgenos

Antgenos T-dependentes

Protenas (glicoprotenas)

Bons imungenos

Podem ser enzimas proteolticas

Baixo peso molecular

Alta solubilidade

Estabilidade

Quando haptenos, ligam-se s protenas do organismo
para induzir a resposta imune de IgE
Diagnstico da Alergia
Diagnstico clnico

Testes cutneos

Dosagem de IgE

IgE especfica

Mediadores da inflamao alrgica

Pesquisa de alrgenos ambientais

Provas cutneas
Princpio dos testes alrgicos cutneos
Mastcitos da pele sensibilizados com IgE

Reconhecimento imune do alrgeno

aplicado na derme

Liberao de mediadores
(ex. histamina)

Vasopermeabilidade Vasodilatao, Eritema

Ppula
Prick-Test ou Teste de Puntura
Multitest para alergia
Aspectos relacionados aos testes cutneos para alergia

Dependem de uma reao
Maior especificidade que os
imune mediada por IgE testes in vitro
fixada nos mastcitos da
Leitura imediata
pele e da integridade

Baixo custo
funcional destas clulas

Melhor experincia da

Interferncia de
clnica mdica
medicamentos e
dermografismo
Resultados no
comparveis quando

Necessidade de alrgenos
avaliados alrgenos de
bem padronizados devido
diferentes procedncias por
a possibilidade de reaes
diferentes formas de
cruzadas
puntura

Riscos de reaes adversas
para o paciente
Imunoensaios
Principais testes

Nvel de IgE srica

Pesquisa de anticorpos IgE antialrgenos

Dosagem de mediadores da inflamao alrgica

Pesquisa e quantificao de alrgenos ambientais
Dosagem de IgE

MTODO

Imunoensaio de captura

(ELISA, ELFA, FIA e CLIA)
Dosagem de IgE por imunoensaio de captura
Fase slida

Ac anti-IgE marcado

IgE
Anti-IgE
IgE srica

VALORES REFERENCIAIS

Variam de acordo com a idade e populao avaliada

Adultos: < 150 UI/mL

Interferncias de doenas parasitrias

COMENTRIOS

Boa reprodutibilidade

Falta de especificidade diagnstica devido ao aumento
de IgE nas doenas parasitrias, autoimunes e em casos
de mieloma e imunodeficincia
Indicaes clnicas para dosagem de
IgE srica

Aspergilose bronco-pulmonar (ABPA)

Avaliao da dermatite atpica

Imunodeficincia

Mieloma

Identificao de risco de desenvolvimento de alergia

Avaliao dos testes para anticorpos IgE
Imunoensaios para anticorpos IgE

Finalidade

Diagnstico laboratorial das alergias

Estudos epidemiolgicos

Controle de qualidade na produo de alrgenos

Imunoensaios comerciais para anticorpos IgE

ImmunoCAP (EAST, fluorimetria)

IMMULITE (CLIA)

Outros
Diferenas entre os imunoensaios
comerciais para anticorpos IgE

Desenho do teste

Tipo de alrgeno (purificado ou recombinante)

Alrgenos disponveis

Quantificao dos resultados obtidos

Sensibilidade

Especificidade
Imunoensaios para anticorpos IgE

PRINCIPAIS ELEMENTOS

Qualidade dos alrgenos

Forma de deteco

Sistema de calibrao

Complexidade operacional

Custo/benefcio
Pesquisa de anticorpos IgE atravs de ensaio
indireto
Fase slida

IgE

alrgeno
Anti-IgE marcado
Pesquisa de anticorpos IgE atravs de ensaio de
captura
Fase slida

IgE

Anti-IgE
Alrgeno
Fatores que interferem na especificidade dos
imunoensaios para anticorpos IgE

Reconhecimento antignico
(alrgenos maiores e alrgenos menores)

Natureza qumica do antgeno

Reao cruzada
(anticorpos de baixa afinidade, eptopos glicosilados)

Co-sensibilizao
(alergia a antgenos com estruturas comuns)

Qualidade do alrgeno
(pureza, antigenicidade, concentrao e estabilidade)
Principais aspectos dos testes para
anticorpos IgE

Possibilidade de falsas reaes positivas

Resultados positivos com testes cutneos negativos

Significado clnico dos resultados obtidos

Resultados mais demorados

Alto custo e baixo aproveitamento dos kits
 Indicaes clnicas dos imunoensaios
para anticorpos IgE

Diagnstico de alergia em pacientes com testes cutneos
indeterminados

Dermografismo

Impossibilidade de suspenso da terapia com anti-
histamnicos ou beta-bloqueadores

Possibilidade de reaes adversas durante o teste
cutneo

Diagnstico complementar da ABPA

Substituio dos testes de provocao no diagnstico da
alergia alimentar

Pacientes idosos ou crianas muito novas

Necessidade de resultados quantitativos
Paralelismo entre IgE total e anticorpos
IgE

(Dolen, Allergy 2003)

Ttulos de anticorpos IgE 10 kU/L nos testes in vitro
com alrgenos apresentam boa correlao com a clnica

(Malandain, Imuno-analyse & Biologie spcialise 2003)

A propabilidade de alergia se correlaciona de forma
positiva com os ttulos de anticorpos IgE in vitro

(Ahlstedt, Clin Exp Allergy 2002)

Dosagem da liberao imune de
histamina de basfilos

Indicao clnica:

Avaliao do estado alrgico

Demonstrao de anticorpos IgE

Substituto dos testes in vitro para ac IgE

Controle de qualidade de alrgenos

Alternativa para o teste de pele

Material: leuccitos lavados ou basfilos isolados

Tcnica usada: imunoensaio competitivo
Novos testes

Imunocromatografia

Citometria de fluxo
Pesquisa de alrgenos ambientais
Identificao e quantificao de alrgenos
no ar e em amostras de poeira domstica

Mtodos:

Anlise morfolgica

Cultivo de caros e fungos

Imunoensaios qualitativos e quantitativos de
extratos salinos de poeira usando anticorpos
monoclonais
Tratamento das alergias

Medidas preventivas.

Uso de anti-histamnicos e imunossupressores.

Imunoterapia alrgeno-especfica.

Imunoterapia com anticorpos anti-IgE: Xolair.

Asma grave

Ambiente hospitalar

Alto custo
Bibligrafia:

IMUNOLOGIA CLNICA NA PRTICA MDICA.
Editor: Jlio C. Voltarelli, - So Paulo : Editora
Atheneu, 2009.

DIAGNSTICO E TRATAMENTO DAS DOENAS
IMUNOLGICAS. GELLER M, SCHEINBERG M
(Eds). 1 Ed. Elsevier, So Paulo, 2005.

DIAGNSTICO LABORATORIAL DAS PRINCIPAIS
DOENAS INFECCIOSAS E AUTO-IMUNES.
FERREIRA W & VILA SLM (Eds) 2 Ed, Guanabara-
Koogan, Rio de Janeiro, 2001.