Cuestionario

Mara Romero, Dra. Johanna Ortiz U, PhD.

Universidad de Cuenca, Facultad de Ciencias Qumicas, Carrera de Ingeniera Qumica
Asignatura: Anlisis Instrumental-Cromatografa, Cuenca-Ecuador, Fecha de entrega: 11-10-2017

1. Concepto de Cromatografa
La Cromatografa es un mtodo fsico de separacin en el que los componentes de una muestra se distribuyen
entre dos fases, una de las fases es un lecho estacionario de gran superficie (fase estacionaria) y la otra es un
fluido en movimiento (fase mvil) que atraviesa el lecho estacionario.
2. Resuma el proceso de funcionamiento de un cromatgrafo de gases

El mecanismo de operacin de un cromatgrafo de gases comienza con suministro de uno o varios gases de
elevada pureza al GC y la inyeccin de la muestra. El inyector vaporiza las muestras voltiles, los cuales son
transportados a la columna por medio del gas portador, mientras la columna permanece en un horno a temperatura
controlada. Los solutos recorren la columna a diversas velocidades que viene determinadas principalmente por
las propiedades fsicas de estos solutos, as como por la temperatura y composicin de la propia columna. El
soluto con menor tiempo de retencin es el primero en salir de la columna, seguido por el resto de solutos a
medida que cada soluto eluye entra en el detector calentado donde se genera una seal electrnica en funcin
de la interaccin del soluto con el detector. Un sistema de datos almacena el nivel de la seal y la grfica en
funcin del tiempo transcurrido para generar un cromatograma.

3. Mediante un cuadro sinptico indique la clasificacin de los mtodos cromatogrficos, definiendo

brevemente los conceptos relacionados.

Cromatografia Liquida: Cromatografia liquido-solido (LSC) o

De acuerdo con el estado fisico
de la fase movil y estacionaria
Cromatografia Liquido-Liquido (LLC) .Este tipo de
cromatografia puede darse en columna, en capa delgada o en
papel.
Cromatografia de gases: Cromatografia gas-solido
(GSC) o Cromatografia gas-liquido (GLC). Siempre
se da en columna

Cromatografia en columna: La fase

movil puede ser un liquida, gas o
un fluido supercritico
Cromatografia de capa fina (TLC): Se
Metodos De acuerdo al lecho utiliza para separar moleculas
Cromatograficos cromatografico relativamente pequeas
Cromatografia plana: Esta limitada al
uso de una fase movil liquida. La
cromatografia plana puede ser de 2 tipos
: Cromatografia en papel: Se basa
en las interacciones del anita con
las celdas formadas por las fibras
Adsorcion: adsorcion de los analitos de la celulosa
sobre la fase estacionaria (solido
adsorbente)
De acuerdo con el mecaismo
de retencion
Reparto o particion: distribucion de las
moleculas del analito entre la fase movil y
la fase estacionaria liquida

Intercambio Ionico: utiliza una fase

estacionaria con componentes con
carga electrica
4. Concepto de tiempo de retencin y tiempo muerto

Tiempo de retencin: Es el tiempo que un soluto tarda en recorrer la columna.

Tiempo muerto: Es el tiempo que un compuesto no retenido tarda en recorrer la columna
5. Coeficiente de reparto: concepto y frmula
Es la constante de equilibrio que describe la distribucin de un soluto entre dos fases, la fase mvil y la fase
estacionaria.

=

Donde:
y son las concentraciones de soluto en la fase estacionaria y la fase mvil, respectivamente.

6. Factor de capacidad: concepto, frmula e interpretacin

Es la relacin de la cantidad de tiempo que un soluto pasa en la fase estacionaria y la fase mvil.
( )
=

Donde () es el tiempo de retencin del componente A y es el tiempo muerto

El factor de capacidad es independiente de la velocidad de flujo de la fase mvil y de las dimensiones de la
columna por lo que puede usarse para comparar retenciones en instrumentos diferentes.

7. Factor de selectividad: concepto, frmula e interpretacin

Es un trmino que define que tan selectiva es una columna para separar dos picos y se mide como el tiempo o la
distancia existente entre los valores mximos de dos picos:

=

Donde:
es el factor de capacidad del compuesto B (que es el mas retenido) y es el factor de capacidad del
compuesto A (que es el menos retenido). Con esta definicin es siempre mayor a la unidad.
Si = 1, ambos picos tendrn el mismo tiempo de retencin y coeluiran.

8. Por qu la seal de un detector de un cromatgrafo se presenta como pico Gaussiano?

Debido a la dispersin de los tiempos de residencia en la columna (o de las velocidades de elucin) alrededor de
un valor medio, originndose un pico Gaussiano en el que casi un 96% del rea se encuentra dentro del intervalo
comprendido entre mas y menos dos veces la desviacin estndar alrededor del mximo.
9. Eficiencia de la columna: concepto, frmula e interpretacin
La eficiencia es una medida del grado de ensanchamiento de una banda cromatogrfica y equivale a una magnitud
adimensional llamado nmero de platos tericos.
2
= 5.545 ( )

Donde
N es el nmero de platos tericos (o eficiencia)
es el tiempo de retencin del pico
es ancho del pico medido a la mitad de la altura.
Mientras mayor sea el nmero de platos tericos de una columna, mayor ser su eficiencia y por tanto se podr
lograr una mayor resolucin.

10. Altura equivalente de los platos tericos: concepto, frmula e interpretacin

La eficiencia de la columna tambin puede medirse como un equivalente en altura a un plato terico (H o HETP).
En el clculo de H se evidencia que la eficiencia de la columna es una funcin de las dimensiones de la columna
aunque tambin es funcin del tipo de fase mvil y su velocidad de flujo, u del tipo de compuesto y su mecanismo
de retencin.

=

Donde
H es la altura equivalente del plato terico
L es la longitud de columna
N es el nmero de platos tericos.
Mientras menor sea H mayor ser su eficiencia y mejor su anlisis. H depende el ancho de la columna.

11. Resolucin: concepto, frmula e interpretacin

Es el parmetro que indica la calidad de una separacin que es la distancia o tiempo entre los puntos mximos
de dos picos contiguos

1
= ( )( )( )
4 1

Donde es el valor medio de y (de dos compuestos contiguos)

La resolucin constituye una medida cuantitativa de la capacidad de la columna para separar dos solutos.
12. Escriba y grafique la ecuacin de Van Deemter indicando el significado de cada uno de sus trminos

= + + .

Donde:
H: es la altura equivalente del plato terico (expresada en metros)
A: es la difusin de Eddy (m)
B: es la difusin molecular (2 1)
C: es la resistencia a la transferencia de masas (s)
v: es la velocidad lineal de la fase mvil (L/ 1)

Termino A (Difusin por turbulencia, en multicanales, en remolino o Difusin de Eddy)

El primer factor de la ecuacin de Van Deemter surge de la multitud de trayectorias de distintas longitudes que
toma la fase mvil, y las molculas durante la elucion, que fluye a travs de la columna, que esta empacada con
partculas de diferentes tamaos y formas acomodadas de manera irregular

Termino B (Difusin Longitudinal)

Se refiere a la difusin longitudinal del soluto en la fase mvil y contribuye al ensanchamiento de las bandas
cromatograficas, esto ocurre debido a que la concentracin del soluto es menor en los bordes de la banda que en
el centro.

=
Termino C (Resistencia a la transferencia de masa)
Este ltimo trmino se relaciona con el hecho de que el equilibrio para la distribucin del soluto entre las fases
mvil y estacionaria se da tan lentamente que la columna cromatografica operar en condiciones lejos del equilibrio
El termino C puede descomponerse en y , segn se considere la transferencia de masa en la fase
estacionaria y la fase mvil.

13. Explique la aplicabilidad de la ecuacin de Van Deemter en la seleccin del gas portador en GC. Incluir
grfico

El termino B de la ecuacin de Van Deemter se ve afectado, pues los coeficientes de difusin para los gases
suelen ser 105 veces mayores que en fase lquida, es decir, el termino difusin depende de la naturaleza del gas
portador, lo que a su vez influir sobre la velocidad ptima de la FM haciendo que a una mayor velocidad sea
menor la difusin, lo que afectara el tiempo de retencin.

14. Explique la aplicabilidad de la ecuacin de Van Deemter en la seleccin del tamao de partcula del
soporte de las columnas en LC. Incluir grfico
A partir de la ecuacin de Van Deemter se determinaran condiciones experimentales que disminuyan el valor de
H, este disminuye con el tamao de partcula (dp) y con empaquetamiento uniforme () as como operando con
capas finas de fase estacionaria liquida (df), de baja viscosidad y a temperatura elevada para incrementar Ds,
minimizando los volmenes muertos de las conexiones y aplicando la muestra en una zona lo ms estrecha
posible en la cabeza de la columna.

15. Indique los principales gases y sus propiedades que pueden ser utilizados como gas portador o fase
mvil en GC

El hidrogeno: permite alcanzar tiempos de anlisis cortos en un amplio rango de velocidad lineal gracias
a su muy baja viscosidad incluso a altas temperaturas, su desventaja, ser un gas combustible.
El helio: es seguro y permite conseguir las mejores resoluciones y eficiencias por lo que suele ser el de
la primera eleccin.
El nitrgeno: es seguro, provee buena eficiencia pero muy lenta en comparacin a otros gases.
16. Indique 3 diferencias entre la inyeccin del modo Split o Splitless en GC

El modo Split es ideal para disminuir el volumen de inyeccin, impidiendo la sobrecarga de la columna.
El modo Split incluye un sistema de divisin de flujo a la salida de la cmara de mezcla de la muestra
con el gas portador.
El volumen de inyeccin recomendado en modo Split es 0,5

17. Cules son las consideraciones para definir en el GC:

a) Temperatura del inyector: 100-375 C
b) Temperatura mnima de la rampa de temperatura: Ti> Tamb+20C
c) Temperatura final de la rampa de temperatura: no debe sobrepasar la temperatura mxima de operacin de
la columna.
d) Velocidad de calentamiento en la rampa de temperatura:

Mezclas muy complejas: hasta 20C/min

Gradientes: 5-10 C/min
Calentamiento muy lento: 2C/min
e) Temperatura mnima del detector: Temperatura ambiente

18. Indique la clasificacin de los detectores de GC segn su grado de selectividad y de un ejemplo de

cada tipo

Universales o no-selectivos: Responde a la mayora de los compuestos, excepto al gas portador. Ejm.:
TCD
Semi-especficos: Presenta selectividad intermedia. Ejm.: FID
Especficos o selectivos: Exhiben una amplia respuesta a un grupo particular de sustancias con un
mnimo de respuesta a otras. Un detector selectivo responde a un rango de compuestos que presentan
una propiedad fsica o qumica en comn; en cambio un detector especfico responde a un compuesto
qumico en partcula. Ejm.: ECD
19. Indique la clasificacin de los detectores de GC segn la recuperacin de la muestra y de un ejemplo
de cada tipo

No destructivos: Estos detectores para producir la seal no requiere modificar qumicamente a la

muestra. Este tipo de detectores son dependientes del flujo del gas portador. Ejm.: TCD
Destructivos: Este tipo de detectores requieren destruir a la muestra, por lo general por pirolisis. Ejm.:
FID

20. Mediante un cuadro sinptico indique la clasificacin y concepto de los tipos de columnas capilares
en GC

Capilares de pared recubierta (WCOT): Consiste en tubos capilares

con la pared interna recubierta de una fina capa de fase estacionaria.

Capilares abiertas de silice fundida (FSOT): Son de silice fundida

Columnas Capilares

purificada con un contenido minimo de oxidos metalicos . Permiten el

analisis con tiempos de respuesta rapidos.

Capilares con soporte recubierto (SCOT): Contienen varias veces la fase

estacionaria de una columna capilar de pared recubierta, tiene una
mayor capacidad de carga.
Permeabilidad alta.
Eficacia menor que en las columnas SCOT

Capilares abiertas de capa porosa (PLOT):

Cromatografia gas - solido.
Recubierta por un material poroso solido
adsorbente.
Permeabilidad alta

21. Defina 3 caractersticas principales de la sustancia conocida como soporte

El soporte ideal consiste de partculas esfricas, pequeas, y con dimetro de poros uniforme (10 o
menor)
Debe ser estable a altas temperaturas
Debe ser qumicamente inactivo