Diplomatura en Ciencia y Tecnologa Tcnicas Analticas Instrumentales

Tcnicas Analticas Instrumentales

Introduccin

DEPARTAMENTO DE CIENCIA Y TECNOLOGIA

UNIVERSIDAD NACIONAL DE QUILMES
Roque Senz Pea 352 (B1876BXD) Bernal Buenos Aires Argentina

Diplomatura en Ciencia y Tecnologa

Profesor: Dr. Gerardo Caballero

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PRESENTACIN

1. El curso de Qumica Instrumental en la Diplomatura en Ciencia y Tecnologa.

El curso de Qumica Instrumental corresponde a la Diplomatura en Ciencia y

Tecnologa de la UNQ. En ese sentido constituye parte de la formacin bsica y general
de la Licenciatura en Biotecnologa y de la carrera de Ingeniera en Alimentos.

El propsito general del curso es el de presentar a los futuros profesionales un

panorama de algunos aspectos bsicos de la qumica instrumental, de forma tal que:

i) Los licenciados en biotecnologa sean capaces de establecer estrategias de

resolucin de problemas relacionados con la identificacin y cuantificacin
de sustancias orgnicas e inorgnicas en matrices biolgicas.
ii) Los licenciados en tecnologa de alimentos puedan plantear la resolucin de
problemas relacionados con la determinacin cuali-cuantitativa de distintos
analitos en matrices de alimentos.

En ambos casos el nfasis del curso est puesto en la presentacin de los principios
generales de un conjunto de tcnicas instrumentales seleccionadas, habitualmente
utilizadas en la resolucin de problemas analticos cuali-cuantitativos. El nivel del curso
propone la incorporacin de estos principios generales y el desarrollo de los
conocimientos necesarios para poder comunicarse con especialistas en este mbito.

2. Objetivos generales.

Se espera que al finalizar la materia los alumnos estn en condiciones de:

Comprender los principios generales de los mtodos instrumentales ms
importantes
Comprender la naturaleza del problema analtico y establecer una estrategia de
resolucin
Correlacionar las propiedades fsicas y qumicas del analito, y el tipo de matriz del
analito, con el mtodo instrumental a utilizar.
Interpretar la informacin estructural y cuantitativa obtenida con los mtodos
instrumentales ms importantes
Interpretar normas, literatura cientfica, etc. relacionadas con la resolucin de
problemas cualitativos y cuantitativos en matrices complejas (biolgicas y
alimentos) y su evaluacin.
Poder comunicarse con facilidad con especialistas en qumica instrumental.

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3. Metodologa y actividades

Presentacin de conceptos generales y ejemplos seleccionados por parte de los

docentes en clases terico-prcticas.
Anlisis de situaciones problemas por los docentes en clases.
Anlisis y resolucin de guas de problemas por los alumnos, en forma individual
y/o en grupos, dentro y fuera del horario de clases.
Discusin con los docentes en forma individual (consultas) o colectivas de los
problemas resueltos, en horario de clase y en horarios adicionales de consultas.
Ejecucin de trabajos prcticos de laboratorio (en horario de clase de problemas)
individualmente o en grupos, sobre la base de guas de TP e indicaciones de los
docentes.
Presentacin de informes de los trabajos prcticos de laboratorio.
Preparacin de un seminario por parte de los alumnos sobre temas del captulo 14
del Programa Analtico. Los temas se elegirn a mediados del cuatrimestre y los
alumnos realizarn un trabajo de bsqueda bibliogrfica fuera del horario de
clases, bajo la gua y supervisin de los docentes.
Lectura de bibliografa por parte de los alumnos en horarios extra-clases, sobre la
base de las recomendaciones docentes

4. Material disponible, rgimen de cursada y evaluacin.

Se encuentran disponibles para los alumnos el siguiente material:

- Filminas de las tericas
- Gua de problemas
- Tablas de datos
- Gua de laboratorio
Las guas de problemas tienen una doble finalidad: por un lado constituyen la
ejercitacin que permite fijar los conceptos analizados en clase, sobre la base del
trabajo personal; por otro lado, dan una referencia al estudiante acerca del grado de
progreso que est realizando, en la medida que logra resolver los problemas de cada
serie. Las consultas acerca de los problemas permitirn a los docentes tener una idea
sobre el grado de avance y las dificultades generales registradas por el curso.
Las tablas de datos constituyen el material auxiliar necesario para la resolucin de las
actividades-problemas planteadas y la gua de laboratorio contiene los protocolos de
las actividades experimentales con los cuales se llevarn a cabo los trabajos prcticos.
Todo este material se encontrar disponible en la pgina web:

https://sites.google.com/site/taiunq/

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La evaluacin se efectuar a travs de dos exmenes parciales (uno por cada parte del
programa) que incluyen los aspectos discutidos en las guas de problemas y en los
trabajos prcticos de laboratorio. Cada parcial puede recuperarse slo una vez en las
fechas establecidas en el cronograma. Para promocionar la materia deben aprobarse
los parciales en primera instancia con no menos de catorce puntos (puede sacarse seis
en un slo parcial). Si saca menos de seis puntos en un parcial pero ms de cuatro en
ambos parciales, debe rendir un examen integrador de toda la materia denominado
coloquio, para lo cual tendr una oportunidad al final de la cursada. El coloquio no
incluye temas de laboratorio y se aprueba con una nota mnima de cuatro puntos.
Si hubiera sacado menos de cuatro puntos en cualquiera de los dos parciales, para
aprobar la materia debe recuperar el parcial desaprobado con ms de cuatro puntos
(slo tiene una oportunidad por parcial) y rendir el coloquio y aprobarlo con ms de
cuatro puntos.
Adems de las condiciones antes mencionadas, para aprobar la materia se deber
tener los informes de los prcticos de laboratorio aprobados. Los informes debern ser
entregados al comienzo de la clase siguiente a aquella en que se realiz el prctico y
podrn ser aprobados, devueltos a los estudiantes para correcciones de algunos
aspectos de los mismos, o considerados insuficientes; en este ltimo caso esos
alumnos debern realizar nuevamente el prctico.
La asistencia a las clases de laboratorio es obligatoria. El trabajo no realizado por
ausencia o desaprobado (dos como mximo) debe recuperarse en las fechas
propuestas en cada curso. La asistencia a clases terico-prcticas debe cumplirse en un
mnimo de 70%.
Adems los alumnos debern presentar una monografa sobre un tema del Captulo
14, preseleccionado a mediados del cuatrimestre. La presentacin del tema se har al
final del cuatrimestre y ser en forma oral en grupos de 2 o 3 alumnos.

Dr. Gerardo Caballero Dra. Carolina Martnez

gmcaballero@unq.edu.ar carolinasmartnez@gmail.com

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Programa analtico
Primera parte: El problema de la determinacin estructural de las molculas aisladas
Captulo 1: Introduccin a la espectroscopa
Interaccin de la radiacin electromagntica con la materia. Interpretacin clsica y
cuntica. Espectros de absorcin y de emisin. Transiciones espectroscpicas. Mtodos
cualitativos y cuantitativos.
Lectura recomendada: (3)

Captulo 2: Espectroscopa ultravioleta-visible (UV-VIS)

Fundamentos tericos del proceso de absorcin. Caractersticas de los espectros de las
sustancias orgnicas. Instrumentacin: sistemas monocromadores y sistemas de
arreglo de diodos. Aplicaciones cualitativas. Aplicaciones cuantitativas (ley de Lambert-
Beer). Interpretacin de espectros.
Lectura introductoria: (C2)
Lectura recomendada: (3)

Captulo 3: Espectroscopa de fluorescencia.

Fluorescencia molecular: principios y aplicaciones cuantitativas. Instrumentacin.
Lectura recomendada: (3)

Captulo 4: Espectroscopa infrarroja (IR)

Fundamentos tericos: vibraciones y rotaciones moleculares. Bandas caractersticas de
los principales grupos funcionales. Instrumentacin: sistemas clsicos y FTIR.
Aplicaciones cuali-cuantitativas.
Lectura introductoria: (1,2,C3,C7)
Lectura recomendada: (3,4)

Captulo 5: Espectroscopa de resonancia magntica nuclear (RMN)

Principios de la resonancia magntica nuclear: momento angular y espn nuclear.
Desplazamientos qumicos: apantallamiento nuclear. Acoplamiento espn-espn:
modelos de multipletes, ncleos equivalentes. Relajacin de los espines.
Instrumentacin. Interpretacin de espectros:
1
H-RMN: apantallamiento nuclear y desplazamiento qumico. Relacin entre el
desplazamiento qumico y la estructura molecular. Acoplamientos espn-espn de
primer orden. Constantes de acoplamiento. Integracin de las seales. Interpretacin
de espectros.

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C-RMN: el problema de la sensibilidad nuclear. Interpretacin de espectros.
Secuencias especiales: DEPT.
Experimentos bidimensionales: experimentos de correlacin (COSY).
Lectura introductoria: (1,2,C4,C7,C8)
Lectura recomendada: (3,5,6)

Captulo 6: Espectrometra de Masas (EM)

Fundamentos del fenmeno de ionizacin y ruptura molecular. El espectrmetro: sus
componentes: Mtodos de ionizacin: Ionizacin electrnica (EI), ionizacin qumica
(CI), electroespray (ESI), bombardeo por tomos rpidos (FAB), ionizacin por
desorcin lser asistida por una matriz (MALDI). Su aplicacin para distinto tipos de
molculas. Los analizadores: cuadrupolos, sector magntico y elctrico, tiempo de
vuelo (TOF), ciclotrn inico de resonancia por transformada de Fourier (ICR-FT),
Orbitrap.
Rupturas caractersticas de los grupos funcionales ms importantes: alcanos,
compuestos halogenados, alcoholes, teres, aminas, aldehdos y cetonas, cidos y
derivados. Interpretacin de espectros.
Lectura introductoria: (1,2,3,C7)
Lectura recomendada: (7,8, 14)

Captulo 7: Espectroscopa de rayos X

Principios fundamentales: emisin de rayos X. Instrumentacin. Mtodos de difraccin
de rayos X. Identificacin de compuestos cristalinos por rayos X. Aplicacin en la
resolucin de la estructura de las macromolculas.
Lectura recomendada: (3)

Segunda parte: El problema de la determinacin cualitativa y cuantitativa de analitos

en matrices complejas
Captulo 8: Mtodos selectivos: potenciometra
Electrodos indicadores: electrodos metlicos, electrodos de membrana.
Funcionamiento del pH-metro. Electrodos de vidrio selectivos para otros cationes.
Lectura recomendada: (3)

Captulo 9: Mtodos selectivos: Espectroscopa de absorcin atmica

Fundamentos de la espectroscopa de llama. Tipos de instrumentos: fuentes,
atomizadores. ICP, ICP-Masa. Aplicacin a la deteccin de metales en matrices
complejas.

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Lectura recomendada: (3)

Captulo 10: Introduccin a los mtodos cromatogrficos en columna

Fase mvil y estacionaria. Cociente de distribucin. Cromatograma: tiempo de
retencin y tiempo muerto. Ecuacin de Van Deemter. Selectividad. Resolucin.
Distintos mtodos en columna. Criterios para su utilizacin.
Lectura recomendada: (3)

Captulo 11: Mtodos separativos: Cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC).

Principios. Parmetros cromatogrficos: solvente de elucin, tiempo de retencin,
resolucin, flujo ptimo. Tipos de cromatografa lquida: cromatografa lquido-slido
(LSC), cromatografa lquido-lquido (LLC), cromatografa de fase ligada (BPC),
cromatografa de intercambio inico (IEC), cromatografa de exclusin por tamao
(SEC), tipos de columnas y solventes de elucin para cada caso. Modos de operacin:
fase normal y fase reversa. Aplicacin a distintos tipos de molculas.
Instrumentacin: inyectores, bombas, desgasificadores, detectores UV-VIS, de
fluorescencia, electroqumico, de ndice de refraccin, de dispersin de la luz
evaporativo (ELSD).
Mtodos cuali-cuantitativos.
Lectura introductoria: (3)
Lectura recomendada: (9,C6)

Captulo 12: Mtodos separativos: Cromatografa gaseosa (CG)

Principios. Gas de transporte, tipos de columnas (capilares y orificio ancho).
Instrumentacin: inyectores, horno, detectores: detector de ionizacin de llama (FID),
detector de captura electrnica (ECD), detector selectivo para nitrgeno y fsforo
(NPD). Mtodos cuali-cuantitativos.
Lectura introductoria: (3)
Lectura recomendada: (10)

Captulo 13: Mtodos separativos: Electroforesis capilar

Fundamentos del mtodo. Instrumentacin. Aplicaciones: secuenciacin de ADN y
ARN; anlisis de contaminantes en alimentos.
Lectura recomendada: (3)

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Captulo 14: Mtodos separativos acoplados: LC-MS y GC-MS

GC-MS: Instrumentacin: interfases, sistemas de vaco, analizadores cuadrupolares, de
trampa de iones y TOF.
LC-MS: Tipos de interfases: Haz de partculas, Ionizacin a presin atmosfrica:
Electrospray, APCI, APPI. Analizadores de masa: cuadrupolos, trampas inicas tiempo
de vuelo, sectores, transformadas de Fourier, Orbitrap. Aplicaciones: determinacin de
secuencia de biomolculas; determinacin de trazas de contaminantes en alimentos.
Lectura recomendada: (11, 12, 13, 14)

Bibliografa principal :

(1) Qumica Orgnica. Seyhan Ege. Editorial Revert. 1997.

(2) Qumica Orgnica. Morrison y Boyd. Pearson Education. 1998.
(3) Principios de Anlisis Instrumental . D.A. Skoog , F.J. Holler y S.R. Crouch .
6ta. Edicin, 2008
(4) Espectroscopa infrarroja. Jess Rubio. Serie de Qumica Orgnica,
monografa n 12. Secretara General de la Organizacin de Estados
Americanos. Programa Regional de Desarrollo Cientfico y Tecnolgico.
Segunda Edicin. 1981.
(5) Spectrometric Identification of Organic Compounds. R.M. Silverstein, F.X.
Webster. John Wiley and Sons Inc. Sixth Edition. 1998.
(6) Resonancia Magntica Nuclear. P.J.Hore. Editorial Eudeba. Primera Edicin.
2000
(7) Introduccin a la Espectrometra de Masa de sustancias orgnicas. O.R.
Gottlieb, R.B. Filho, F. Aragao Craveiro, J. W. Alencar. Serie de Qumica,
monografa n 17. Secretara General de la Organizacin de Estados
Americanos. Programa Regional de Desarrollo Cientfico y Tecnolgico.
Segunda Edicin. 1983.
(8) Interpretacin de Espectros de Masas. F. W. McLafferty. Editorial Revert.
(9) Practical HPLC Methodology and Applications. B.A. Bidlingmeyer. John Wiley
and Sons Inc. 1992.
(10) Modern Practice of Gas Chromatography. R.L. Grob (Ed.) John Wiley and Sons
Inc. Third Edition. 1995.
(11) A Global View of LC/MS. R. Willoughby, E. Sheehan, S. Mitrovich. Global View
Publishing. 1998.
(12) Liquid Chromatography Mass Spectrometry: An Introduction. Robert Ardrey.
Wiley. 2003

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(13) Gas Chromatography and Mass Spectrometry: A Practical Guide. F. Kitson, B.

Larsen, C. McEwen, Academic Press, 1996
(14) Quantitative Chemical Analysis; Daniel Harris; Ed. W.H. Freeman; Seventh
Edition, 2010

Bibliografa de consulta:

(1) Qumica Orgnica. Francis Carey. Mc Graw Hill Ed. Tercera Edicin. 1999.
(2) http://www.chemistry.ccsu.edu/glagovich/teaching/316/uvvis/uvvis.html
(3) http://www.organicworldwide.net/infrared.html
(4) http://www.cis.rit.edu/htbooks/nmr/inside.html
(5) Pesticide Analytical Manual. Volume 1. Chapter 5, 6. Federal Drug
Administration (accesible en forma gratutita en
http://www.cfsan.fda.gov/~frf/pami3.html)
(6) HPLC for Food Analysis. A primer. A. Gratzfeld-Hsgen, R. Schister. Hewlett-
Packard Company 1996 (accesible en forma gratuita en
http://www.chem.agilent.com)
(7) Experimental Organic Chemistry. Daniel Palleros. John Wiley & Sons. 2000
(8) The Basics of NMR, J. P. Hornak
http://www.cis.rit.edu/htbooks/nmr/bnmr.htm

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