UNIVERSIDAD NACIONAL

PEDRO RUIZ GALLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

rea de Microbiologa y Parasitologa

MICROBIOLOGA DEL SUELO

BACTERIAS RIZOSFRICAS FIJADORAS DE NITRGENO

Alumna
Ravines Arriaga C. Alejandra

Lambayeque, septiembre del 2017

 OBTENCIN Y PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA |

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Imgenes. 1) Races obtenidas de un cultivo de Maz. 2) Mantener expuestas al sol las races con suelo
rizosfrico, 72h aproximadamente. 3) Fragmentar las races en tamaos de 5 cm. 4) Depositarlas en papel.
5) Pesar 10 g de races junto con suelo adherido. 6) Depositar la toda la muestra en frascos de 250 ml
conteniendo 90 ml de SSE. 7) Tapar correctamente el frasco. 8) Agitar el contenido vigorosamente durante
10 minutos. 9) Tendremos como resultando el sobrenadante, necesario para el aislamiento de bacterias
rizosfricas.

PGINA 1
 AISLAMIENTO DE BACTERIAS RIZOSFRICAS FIJADORAS DE NITRGENO |

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Imgenes. 1) Se tomaron alcuotas del sobrenadante de la muestra procesada y se sembraron mediante

la tcnica de puntura en los medios correspondientes; slido y semislido. 2) Los tres medios slidos se
sembraron mediante la tcnica de agotamiento y estra. Medio BEIJ, medio LG y medio LGI. 3) Los 5
medios semislidos con nitrgeno, para bacterias microaerfilas, fueron sembrados por la tcnica de
punura. Los medios fueron LGI, NFb, LGIp, JNFb y JMV. 4) Los medios semislidos se llevaron a
incubacin a 30C por 7 das. 5) Despus del tiempo de incubacin se observaron cambios en ambos
medios, tanto semislido como en el medio slido.

PGINA 2
 LECTURA DE AEROBIAS, SUBCULTIVO E IDENTIFICACIN FENOTPICA DE BACTERIAS
RIZOSFRICAS FIJADORAS DE NITRGENO|

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Imgenes. 1) Despus de la incubacin de las placas con los medios slidos, se observ crecimiento en todas
ellas. Placa con medio LG, hubo crecimiento y se identificaron colonias del gnero Azotobacter, de las cuales se
procedi a hacer un subcultivo para confirmar su presencia. 2) Placa con medio BEIJ, se observ crecimiento
de colonias caractersticas de Beijerinkia spp. Se procedi a hacer un subcultivo confirmativo. 3) Placa con
medio LGD, se observ crecimiento de colonias con caractersticas de Derxia spp. 4) Subcultivo con medio LG,
se confirm la presencia de Azotobacter spp. 5) Subcultivo con medio BEIJ. Se confirm la presencia de
Beijerinkia spp. 6) Subcultivo con medio LG. Se observ crecimiento de Derxia spp.

PGINA 3
 LECTURA E IENTIFICACIN FENOTPICA DE BACTERIAS RIZOSFRICAS MICROAEROFILAS
FIJADORAS DE NITRGENO |

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Imgenes. 1) Medios de cultivo semislidos de los cuales se hizo
la siembra, todos formaron pelcula y tuvieron un viraje del
indicador (+) en todos los medios JNFb, LGIP, LGI, JMV, NFb. 2)
Observacin muy clara del viraje y de las pelculas formadas, lo que
demuestran el metabolismo microaerbio del microrganismo.

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Imgenes. 1) Medios de cultivo slidos para la siembra de

rizobacterias aisladas. Medios BEIJ, LG, LGD. 2) Siembra en los
viales.

PGINA 4
 RESULTADOS E INTERPRETACIN |

Tabla N 1. Crecimiento de bacterias rizosfricas microaerfilas en los subcultivos respectivos.

MEDIO PRIMERA SIEMBRA

JNFb +

JMV +

LGI +

LGI - P +

NFb +

Tabla N 2. Crecimiento de bacterias rizosfricas aerobias en los subcultivos respectivos.

MEDIO Primera Siembra Segunda Siembra Cepas

LG + + 2

LGD + - _

BEIJ + + 2

CONCLUSIONES |

Se aislaron bacterias rizosfricas aerobias de races de cultivos de maz.

Los cultivos puros obtenidos fueron sembrados de los medios LG y BEIJ.
Es posible aislar bacterias fijadoras de nitrgeno de races plantas de maz e
identificarlas fenotpicamente, por la presencia de una pelcula y el viraje de un
colorante que obtena los medios de cultivo semislidos que contenan medios como:
JMV, NFb, LGI-P, JNFb, LGI.

PGINA 5