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Control biolgico por microorganismos antagonistas

M. Ezziyyani, A. Sid Ahmed, C. Perez Sanchez, M.E. Requena, M.E. Candela
27/10/05

Actualmente se entiende por biocontrol la reduccin de la intensidad o las

actividades productoras de enfermedades de un patgeno o parsito, lograda
mediante la manipulacin del ambiente, del hospedero o de los antagonistas del
patgeno o plaga que se quiere controlar. En este ltimo caso el biocontrol consiste
en la utilizacin de microorganismos naturales o modificados, para reducir los
efectos de organismos indeseables, favoreciendo al mismo tiempo el desarrollo de
los microorganismos beneficiosos para las plantas. Los microorganismos
antagonistas comprenden cualquier organismo que interfieren en la supervivencia
o desarrollo de los patgenos.

Para lograr el control biolgico se pueden seguir tres vas: Exploracin en el propio
medio de los agentes de biocontrol, introduccin o liberacin masiva de agentes
de control y manipulacin del ambiente para favorecer el desarrollo de los
antagonistas naturales presentes en el mismo. Hace dcadas qued establecido que
las interacciones microbio-microbio, son clave en el desarrollo y funcin de la
rizosfera y que las poblaciones de microorganismos pueden interaccionar de
manera sinrgica (o aditiva) o bien antagnica. Es obvio que aquellos
microorganismos que ejercen algn tipo de antagonismo sobre otros
microorganismos patgenos de la planta, benefician indirectamente, el desarrollo
de sta, en trminos de la proteccin de su estado sanitario. Tal actividad
microbiana, que funciona por mecanismos de competencia por nutrientes o sitios
de colonizacin, produccin de sustancias antimicrobianas, o enzimas
extracelulares, opera de forma natural desde que existen las plantas. Sin embargo,
puesto que esta actividad natural no est controlada especficamente, sus resultados
son impredecibles. Es ms, la aplicacin de pesticidas funguicidas y otros
agroqumicos puede incluso interferir con dicho recurso natural. Surge entonces el
concepto prctico de control biolgico de enfermedades, que implica el manejo
racional y dirigido de organismos apropiados, componentes comunes de los
agrosistemas, para proteger a la planta frente al ataque de patgenos diversos.
Entre ellos podemos distinguir los microorganismos productores de enfermedades
como virus, bacterias, hongos, nematodos, etc, y los organismos productores de
plagas como los insectos.

El control biolgico de los patgenos es generalmente muy especfico y usa

organismos que atacan o interfieren con patgenos especficos. En algunos casos
es posible encontrar una nica cepa microbiana que sea eficaz en muchos
ambientes, pero en la mayora de los casos, se requieren cepas diferentes en
localidades diferentes. En general, la aplicacin de tales inoculantes, sigue
demandando contraste y validez agronmicos, aunque nunca ha perdido su carcter
de prctica prometedora. La necesidad de reducir el uso de fertilizantes qumicos
y productos fitosanitarios de sntesis ha dado paso a la prctica de la inoculacin.
En efecto, la demanda impuesta por la sostenibilidad est conduciendo al uso de
estrategias que mantenga una proteccin del medio ambiente. En este contexto, el
uso de inculos microbianos, incluyendo algunos que han sido modificados
genticamente, esta cobrando nuevamente inters. Los microorganismos mas
usados pertenecen a los
gneros Rhizobium, Pseudomonas, Bacillus, Trichoderma, Streptomyces, etc,.
Aunque tambin los hongos micorrcicos, han sido objeto de investigaciones
orientadas a su aplicacin prctica. El control biolgico es el mejor mtodo de
optimizar, a propsito, las actividades de las especies beneficiosas y conseguir
reducir las actividades dainas de ciertas plagas y enfermedades, pero en cualquier
caso siempre hay que controlar las alteraciones que la liberacin de los
antagonistas puede suponer para el equilibrio de un ecosistema y tratar de
minimizar los riesgos.

En la prctica, el control biolgico se puede enfocar de tres formas: En primer

lugar est el control biolgico clsico. En este sistema los microorganismos
antagonistas se obtienen en su medio natural y se utilizan en otro, donde ellos no
existan antes. En este lugar la plaga o enfermedad se haba establecido porque ha
vencido a los microorganismos autctonos que existan y ya no tiene enemigos
naturales. La introduccin de los nuevos organismos de biocontrol conduce a una
reduccin a largo plazo de la poblacin de la plaga o enfermedad en los habitats
elegidos. Tpicamente, el control biolgico clsico ha sido el de ms xito en el
sistema agro-econmico o en los cultivos de rboles, viedos, plantas
ornamentales y bosques perennes. Aunque los xitos de la introduccin del control
biolgico son constatables, el futuro es muy difcil de predecir. Casi solo el 30%
de las introducciones han permanecido estables y la supresin con xito de ciertas
plagas y enfermedades ha ocurrido menos frecuentemente de lo esperado. La clave
para el xito en casi todos los proyectos de control biolgico es el descubrimiento
y la importacin de enemigos naturales que produzcan altos niveles de parasitismo
o depredacin en los lugares nativos de la plaga o enfermedad.

Otros factores, tales como la adaptacin de los enemigos naturales al clima del
nuevo lugar, bsquedas adecuadas y habilidades de utilizacin que permita
descubrir y controlar la plaga o enfermedad, cuando todava es baja la
concentracin del inculo del patgeno, parece ser el punto crtico. En segundo
lugar tenemos el control biolgico conservador. Este es el que menos se asemeja a
un verdadero biocontrol, pero es la base real del manejo integrado de plagas.
Consiste fundamentalmente en favorecer la abundancia de los enemigos naturales
de los patgenos causantes de plagas, reduciendo influencias dainas y resaltando
las positivas. Se consigue por medio de insecticidas de espectro reducido;
cambiando el tiempo de aplicacin del insecticida para evitar daos a sus enemigos
naturales con ciclos de vida distintos; proporcionando habitas alternativos para que
los enemigos naturales tengan alimentacin, un lugar para reproducirse o invernar
y provisin de nctar ya sea por plantas que cubren el suelo o por seleccin de una
variedad de plantas que tengan nectarios como alimento para enemigos naturales.
En tercer lugar tenemos el control biolgico aumentativo. Con este se pueden
seguir dos tcticas: el control inoculativo y el control inundativo.

El control inoculativo consiste en favorecer la llegada y el desarrollo de los

enemigos naturales que se quieren combatir, previamente al inicio o crecimiento
de la cosecha de las plantas a proteger, con el fin de proceder a su disminucin y
destruccin. Este mtodo de control biolgico es la base para el control de plagas
y enfermedades en muchos sistemas de invernadero. Algunos patgenos de
insectos tienen numerosas ventajas sobre los pesticidas qumicos convencionales.
Estos incluyen: especificidad para los organismos objetivo o a un nmero limitado
de especies husped, poco o ningn impacto directo sobre parsitos y depredadores
invertebrados, no residuos txicos, compatibilidad con otros agentes de biocontrol,
no dainos a vegetales y plantas, posibilidad de control a largo plazo, adaptable a
la modificacin gentica de la biotecnologa y fcil aplicacin. El control
inundativo es diferente de las estrategias clsicas e inoculativas, por lo que la
liberacin de enemigos naturales -y no de sus descendientes- son los agentes
activos de control. Tpicamente, liberaciones a gran escala de enemigos naturales
se realizan repetidas veces durante el ciclo de la cosecha.

En el mundo biolgico existe una interaccin continua entre los patgenos

potenciales y sus antagonistas, de forma tal que estos ltimos contribuyen a que en
la mayora de los casos no se desarrollen las enfermedades. En condiciones
naturales los microorganismos estn en un equilibrio dinmico en la superficie de
las plantas. No es fcil determinar con precisin los mecanismos que intervienen
en las interacciones entre los antagonistas y los patgenos sobre la planta o en las
heridas. En general los antagonistas no tienen un nico modo de accin y la
multiplicidad de modos de accin es importante a tener en cuenta para seleccionar
a un antagonista. Si el antagonista posee varios modos de accin reduce los riesgos
de desarrollo de resistencia en el patgeno. Este riesgo de resistencia tambin se
reduce mediante el uso de combinaciones de antagonistas con diferente modo de
accin. Se han descrito varios mecanismos mediante los cuales los antagonistas
ejercen su accin para controlar el desarrollo de patgenos. Entre ellos
encontramos la induccin de resistencia, pero fundamentalmente el biocontrol se
basa en la antibiosis y competencia por el espacio o por los nutrientes (Fig. 1) y en
las interacciones directas con el patgeno: micoparasitismo y lisis enzimtica (Fig.
2). Un ejemplo de control biolgico de una enfermedad, utilizando
microorganismos antagonista, es el caso de la tristeza del pimiento causada por
el oomiceto patgeno Phytophthora capsici.

Fig.1. Confrontaciones in vitro donde se aprecia varios modos de accin ejercidos por antagonistas como la bacteria Burkholderia cepacia (B.c.)
y el hongo Trichoderma harzianum (T.h.) sobre el patgeno Phytophthora capsici (P.c.). [A]: Antibiosis y competicin por los nutrientes y por
el espacio. Ejemplo de inhibicin del crecimiento vegetativo de P. capsici en presencia de la bacteria B. cepacia. [B]: Micoparasitismo y lisis
enzimtica. Ejemplo de inhibicin del crecimiento del patgeno por el hongo T. harzianum cuya colonia crece sobre P. capsici.

Fig.2. Detalle del Micoparasitismo debido al enrollamiento masivo de las hifas de T. harzianum alrededor de las de P. capsici. Fotografa de
microscopa electrnica de la interaccin entre el hongo antagonista y el oomiceto patgeno.

El pimiento es una hortcola, angiosperma de la

Familia Solanaceae, gnero Capsicum, especie annuum. En la Regin de Murcia,
se cultiva pimiento tanto al aire libre como en invernadero y aunque antiguamente
la variedad mas cultivada era la bola que se destinaba a ser transformada en
pimentn, actualmente la mayor superficie de cultivo, aproximadamente 1800
hectreas se utiliza para variedades de carne gruesa tipo California para consumo
en fresco (Fig. 3). La mayor parte se localiza en el Campo de Cartagena y acapara
directa o indirectamente un gran nmero de mano de obra. El cultivo de pimiento
en invernaderos cubiertos con plstico, est ampliamente extendido para responder
a las exigencias de este cultivo fuera de la temporada. En los ltimos aos, se han
empezado a probar los cultivos sin suelo y con sistemas de riego cerrados cultivos
hidropnicos que tienen como objetivos la limitacin de las infecciones
fitopatognicas del suelo y el reciclaje de la disolucin nutritiva para el mejor
aprovechamiento de los nutrientes. Porque efectivamente, en invernadero la
produccin se puede extender a todo el ao, pero tiene el serio inconveniente de
necesitar esterilizar los suelos antes de la siguiente plantacin, ya que se infectan
por los numerosos patgenos que crecen en las clidas y hmedas condiciones
ambientales que se dan en el invernadero.

Fig. 3. Plantas de pimiento cultivadas en condiciones controladas bajo plstico, que han sido inoculadas con el patgeno P. capsici y tratadas con
microorganismos antagonistas agentes de biocontrol. Todas las plantas sobreviven a la infeccin menos una (control, sin tratamiento) que muere.

Una de las enfermedades mas devastadoras que afectan a los pimientos es la

conocida por tristeza o secacausada por Phytophthora capsici. El nombre
de Phytophthora deriva del griego (phyton: planta y phthora:
destruccin). Phytophthora capsici (Fig. 4) es un hongo telrico que
taxonmicamente pertenece a la clase Oomycetes y al orden de
los Peronosporales. La mayora de los Oomycetes son acuticos. Su forma de
supervivencia ante condiciones adversas es por zoosporas, las cuales poseen dos
flagelos laterales, uno liso y otro con brbulas. Phytophthora capsici tiene un
poder de competicin saproftica muy bajo en el suelo. Sin embargo, el patgeno
puede guardar su poder infectivo en el suelo durante algunos das en forma de
zoosporas, algunas semanas en forma de esporocistos y varios aos en forma de
clamidosporas y de oosporas. Se ubica predominantemente en las capas mas
superficiales del suelo, ya que al ser un hongo telrico esta fuertemente relacionado
con el potencial hdrico del mismo
Fig. 4. Aspecto macroscpico y microscpico del patgeno Phytophthora capsici. [A]: P. capsici creciendo en medio lquido con formacin de
colonias esfricas que liberan zoosporas. [B]: Aspecto macroscpico de la colonia miceliana creciendo en medio slido de patata-dextrosa-agar
(PDA). [C]: Detalle de un esporangio productor de zoosporas visto al microscopio electrnico de barrido (2300 X).

La forma de diseminacin en el caso de este tipo de hongos es por agua de riego,

debido a su carcter acufilo y a la presencia de zoosporas mviles. Adems por
la salpicadura de las gotas de agua al chocar con el suelo se ha encontrado una
diseminacin horizontal de hasta un metro. P. capsici inverna en forma de
oosporas, clamidosporas o micelio en el suelo o en las races que ha infectado. El
hongo forma ms micelio y zoosporas durante las estaciones hmedas y
moderadamente fras y puede transmitir la enfermedad a otras plantas. En la
primavera, las oosporas y clamidosporas germinan en forma de zoosporas mientras
que el micelio prosigue su desarrollo y/o produce zoosporangios que liberan
zoosporas. Estas ltimas nadan en el agua del suelo e infectan las races de la
planta. La evidencia reciente sugiere que las zoosporas de P. capsici, sobrevivan
en suelo por lo menos cinco aos y pueden seguir siendo contagiosas por 10 aos.
Puesto que las zoosporas se forman por el acoplamiento de diversas paredes,
representan una combinacin de las paredes de dos genes (A1 y A2), esto puede
ayudar al patgeno a desarrollar resistencia a los fungicidas. Los estudios
etiolgicos han permitido determinar a los patgenos Phytophthora
capsici Leon. Veticillium dahliae Kleb., as como la asfixia radicular, agentes
responsables de alteraciones que pueden denominarse por su especial
sintomatologa dentro de lo que comnmente llamamos tristeza. El viento no
tiene influencia en la diseminacin de P. capsici.

La primera descripcin de Phytophthora capsici como causante del

marchitamiento del pimiento se debe a Leonian en 1922 en Norteamrica. La
enfermedad se describe en Espaa por primera vez en 1964 y ha sido denominada
tradicionalmente tristeza o seca (Fig. 5). Sus efectos son mortales, pues
penetrando por las races impide la absorcin de agua y nutrientes y cuando la
planta presenta los primeros sntomas, ya est invadida y no tiene cura. Los
sntomas son: marchitamientos totales o parciales y menor desarrollo radicular de
la planta, debido a la prdida de turgencia de los tejidos. Los tallos sin embargo,
permanecen erectos con las hojas y frutos prendidos a la planta. En condiciones
ptimas de temperatura (21-31C), el proceso de infeccin de P. capsici consiste
en la germinacin de los esporangios (6-35 min), penetracin (1-4 horas) e
incubacin (3-6 das). Con temperaturas de 5C el hongo detiene por completo su
desarrollo y a 0C muere; en los lmites superiores, a 38C se paraliza, pero no
muere con temperaturas an mayores. El exceso de nitrgeno y de calcio en el
suelo incrementa la enfermedad causada por P. capsici, mientras que el potasio la
disminuye. Tambin el pH bajo influye en la inhibicin del hongo.

Fig. 5. Sntomas de la enfermedad tristeza oseca de la planta de pimiento cv. California wonder causada por Phytophthora capsici. Cronologa
del desarrollo a lo largo de 9 das.

El ataque tiene lugar en las races o el cuello de la planta y se extiende hacia arriba
por la base del tallo; se forma un chancro en el cuello y hay pudricin y
ennegrecimiento de las races. Cuando las condiciones ambientales son favorables,
el hongo crece y ataca la planta en sus distintos estadios de desarrollo. En las
plntulas, P. capsici infecta en pocos das los rganos emergidos de la semilla y
antes de salir del suelo les causa el ahogamiento y la muerte. En las plantas
jvenes, P. capsici ataca el tallo de la planta, a veces por debajo de la superficie
del suelo o la raz principal y antes de que aparezca la podredumbre por encima de
la superficie del suelo, se ocasionan sntomas parecidos a los producidos por la
sequa en la parte area de la planta. En las plantas adultas, el hongo infecta
primero a las races pequeas y luego lentamente se extiende al resto de las races.
Las partes areas de la planta tanto hojas como frutos, suelen daarse cuando se
les aplica material infectado con el patgeno.

Una de las formas de luchar contra la enfermedad es desinfectar los suelos de

cultivo antes y despus de la plantacin. Habitualmente se han utilizado pesticidas
para ello, pero ya se sabe que la mayora de estos productos qumicos no son
especficos y su aplicacin en los campos de cultivo mata indiscriminadamente a
un amplio rango de microorganismos e insectos, adems de resultar txicos para
los mamferos, incluido el hombre.

Contra el patgeno P. capsici, la desinfeccin del suelo de cultivo sobre todo en

invernaderos o cultivos protegidos suele hacerse con bromuro de metilo (BM). As,
los investigadores y tcnicos en agricultura se estn enfrentando a uno de los
mayores retos de los ltimos aos, el de encontrar alternativas al bromuro de metilo
para controlar plagas, malas hierbas y enfermedades de las plantas. La alternativa
que se proponga debe tener eficacia similar al BM, y adems de no contaminar el
medio ambiente, fundamentalmente debe ser econmico y viable, caractersticas
que no han sido hasta ahora exigidas a ningn otro pesticida. El BM es el biocida
que destaca por su amplio espectro de accin frente a los patgenos de los
vegetales, as como su alta efectividad en cuanto a penetracin y difusin en el
suelo, incluso en aquellos que presentan contenidos de humedad y temperatura
altos. Sin embargo, el BM no se retiene en su totalidad en el suelo, sino que del 50
al 95% pasa en forma de emisiones gaseosas a la estratosfera. All se liberan
tomos de bromo que reaccionan con el ozono y otras molculas estables que
contienen cloro, dando lugar a una reaccin en cadena que contribuye a la
disminucin de la capa de ozono, incrementando la emisin de rayos ultravioletas
con los consiguientes riesgos para la salud y el medio ambiente. La evidencia
cientfica de la destruccin de la capa de ozono por el BM, dio lugar a la toma de
decisiones que contribuyesen a la retirada de este producto, apoyndose en
acciones reguladoras. La 10 Reunin del Protocolo de Montreal estableci, para
los pases desarrollados, un programa en el que se acord la reduccin, de forma
gradual, de los usos agrcolas del BM, hasta llegar a su eliminacin total para el
ao 2005 y para pases del Artculo 5 su eliminacin en el ao 2015.

La retirada de un producto qumico del mercado puede conducir, a corto plazo, al

reemplazo de ste por otro producto que no est prohibido, lo cual puede resolver
el problema temporalmente, pero a medio y largo plazo, las soluciones sostenibles
no pueden basarse en productos qumicos, sino que deben ser principalmente
mtodos fsicos, biolgicos o la integracin de ambos. Esta situacin que es real,
se acompaa actualmente por las exigencias medioambientales lideradas por la
opinin pblica sobre los productos qumicos, que obligan a optar por estrategias
ms seguras y ecolgicas que permitan mantener los patgenos y/o la enfermedad
por debajo de un nivel aceptable. Por lo tanto, cualquier alternativa que permita el
control de patgenos puede ser especialmente til si al mismo tiempo ayuda a
reducir agresiones que los productos qumicos causan al medio ambiente.

El control biolgico mediante el uso de microorganismos antagonistas es una de

las alternativas que mas atencin ha recibido en los ltimos aos. La existencia de
microorganismos telricos, asociados de forma natural con las plantas, los hace
ideales para escoger entre estos, aquellos que inhiben a los patgenos. As, el
control biolgico mediante el uso de microorganismos antagonistas surge como
respuesta a la bsqueda de nuevas formas de control de patgenos en la produccin
agrcola, en las que prima la calidad de las cosechas y el respeto a los recursos
naturales y humanos. El control biolgico es la respuesta a la creciente inquietud
de la opinin pblica en cuanto al uso abusivo de productos qumicos como los
fertilizantes, pesticidas insecticidas y herbicidas.

Las investigaciones realizadas por el grupo de Investigacin Fitopatologa de la

Universidad de Murcia, dirigidos por la Dra. M Emilia Candela han analizados
diferentes microorganismos de biocontrol para ser utilizados como antagonistas,
determinando modos de accin complementarios con los que reducir la
enfermedad (Bibliografa). Actualmente ultiman los anlisis de dosis y
formulacin de un biopreparado de antagonistas, capaz de inhibir totalmente al
patgeno e impedir la incidencia de la enfermedad an en cultivos de pimientos
sobre suelos infectados por P. capsici.

BIBLIOGRAFA

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