Universidad de Costa Rica

Escuela de Qumica
Laboratorio de Qumica Orgnica I QU-0213
II Semestre 2016
Informe de Cromatografa
Jefferson A. Crdenas Matamoros ______________________________ Carn: B41427
Profesora: Karina Rodrguez Mora_ ________________________________ Grupo: 02
Asistente: Jeycob Rodrguez Quesada __________________________ Carrera: Ing. Qumica

Resumen:
Se realiz una extraccin del pigmento de la espinaca para realizarle cromatografa de pigmentos naturales
mediante la tcnica de cromatografa de columna, usando slice gel como fase estacionaria y dos tipos de
disolventes como fase mvil (A. ter de petrleo : Tolueno : Acetato de Etilo 45:40:15 y B. ter de Petrleo :
Acetato de Etilo 50:50) de los cuales se determin que el disolvente A genera mejores resultados que el B.
Adems en la cromatografa de papel, se us papel filtro como fase estacionaria y una disolucin de NaCl
como fase mvil para separar los pigmentos del colorante de los M&Ms de los cuales se obtuvo un resultado
ms favorable con el colorante rojo.

Introduccin:
Mikhail Tswett, fue un botnico ruso, nacido en Italia y graduado de la Universidad de Ginebra, al cual se le
reconoce como la primera persona en formalizar el uso de la cromatografa en 1906, para la separacin de
pigmentos naturales de las plantas, llamados clorofilas y carotenoides. Tswett, agreg material adsorbente a
una columna de vidrio, posteriormente agreg el extracto que contena los pigmentos de las plantas, despus
de un tiempo, logr notar como la columna adquiri una coloracin diferente por partes, de tal modo
comprob la separacin de la mezcla de pigmentos en sus componentes. (Romero, 2016).

Existen dos grupos en los que se divide la cromatografa, uno de ellos es la Cromatografa de Particin, la cual
se caracteriza por tener una fase estacionaria lquida anclada a un soporte slido y una fase mvil lquida,
teniendo como requisito que ambas fases sean inmisibles, para que no interaccionen entre s, y se pueda
generar la separacin de la mezcla, un ejemplo de esto es la cromatografa de papel. (Bautista, 2016).
Mientras el otro grupo es la cromatografa de Adsorcin, en la cual la fase estacionaria es un slido y la fase
mvil es un lquido o gas (Prez, 2016).
La cromatografa puede ser empleada de forma industrial, por ejemplo, en la tecnologa de alimentos y
productos esenciales, se realiza la caracterizacin de aceites esenciales y aromas para la elaboracin de
perfumes, licores y artculos de aseo. Tambin en el tema de control ambiental se estudian empleando este
mtodo los hidrocarburos aromticos. Mientras en la qumica forense se emplea la cromatografa de gases
para la determinacin de alcohol en la sangre o anlisis de licores. (Cceres, 2016).

La prctica de cromatografa tiene como objetivos realizar una columna de cromatografa para la separacin
de pigmentos naturales de la espinaca, as como realizar una cromatografa de papel con pigmentos artificiales
que se utilizan en algunos confites.

Seccin Experimental:

El procedimiento utilizado para realizar dicho experimento fue recuperado del Manual de Laboratorio de
Qumica Orgnica General I (Prez, 2016). Se realizaron algunos cambios, los cuales se detallan a continuacin:
la cromatografa de capa fina y analgsicos no fue realizada.

Resultados y Discusin:

Al finalizar la prctica de cromatografa, se lleg a los siguientes resultados.

Cuadro I. Valores obtenidos de Rf para cada mezcla de disolventes usada en el laboratorio.

Valor de Rf para la
mezcla de 1,00 0,85 0,43 0,20
disolventes A.
Valor de Rf para la
mezcla de 0,46 ---- ---- ----
disolventes B.
A. ter de petrleo: Tolueno : Acetato de Etilo 45:40:15; v/v y B. ter de Petrleo : Acetato de Etilo 50:50;
v/v.

Al realizar la cromatografa de columna con ambos disolventes, se puede notar que la cromatografa
elaborada con el disolvente B, genera unos resultados visuales mucho ms claros (ver figura 1 y 2). Esto se da,
debido a que la mezcla de disolventes A, es menos polar que la mezcla de disolventes B, debido a la presencia
de Tolueno en la mezcla A y a la mayor distancia entre los valores obtenidos de Rf para dicho disolvente como
se muestra en el cuadro I, diferente de los resultados para el disolvente B, el cual no logr separar la mezcla y
mostr apenas un punto un placa cromatogrfica. Se dice que entre ms afinidad haya entre la mezcla que se
requiera separar, el extracto de espinaca en este caso, con el disolvente, la cromatografa de columna va a
correr mejor y mucho ms rpido que con un disolvente con el cual no tenga tanta similitud con el extracto.
Para que la cromatografa funciona correctamente, la fase estacionaria debe ser distinta a nivel de polaridad
del disolvente, la Slice gel es un adsorbente bastante polar, lo que facilita la realizacin de la tcnica de
separacin de mezclas en estudio.

Figura 1: Cromatografa de columna con el disolvente B. Figura 2. Cromatografa de Columna con el disolvente A.

El Rf corresponde a la distancia que recorre cada componente de la mezcla y esta expresada como la velocidad
de migracin o relacin frontal. (Prez, 2016). En la figura 3 se puede observar de qu manera se calcula el Rf.

Figura 3. Clculo del Rf e ilustracin de la forma de llegar al resultado.

En la cromatografa de papel se utiliz papel filtro como fase estacionaria, el cual tena unas dimensiones de
7x7 cm2 y una disolucin de NaCl al 0.1% como fase mvil, se colocaron haciendo uso de un capilar, los
colorantes de las pastillas de M&Ms en la lnea inferior del papel filtro y se identificaron con su respectivo
color, la placa fue sumergida en forma de cilindro en un beaker con el disolvente (fase mvil) y se obtuvo
como resultado que los colorantes rojo y naranja haban recorrido una distancia mayor que los dems
colorantes (Azul, verde y amarillo). Por lo tanto se puede decir, basado en que la muestra va a recorrer mayor
distancia en la placa mientras ms similar sea a la fase mvil, que el colorante rojo y naranja son ms polares
que los dems colorantes.

Conclusiones:

La mezcla de disolventes ter de Petrleo : Tolueno : Acetato de Etilo (45:1:5;v/v) muestra mejores resultados
que el otro disolvente en estudio debido a su similitud con el extracto de los pigmentes de espinaca.

El colorante rojo y naranja recorren mayor distancia en la placa de papel filtro debido a su similotud polar con
la fase mvil.

Para realizar una correcta cromatografa, la fase estacionaria y la fase mvil deben ser diferentes en cuanto a
polaridad y no deben reaccionar entre s, para que la muestra pueda fluir correctamente mientras sea similar a
la polaridad del disolvente.

La cromatografa puede ser usada industrialmente en la qumica forense, en el control ambiental, en la

tecnologa de alimentos y muchas ms industrias.

El uso de la cmara de yodo o la luz ultravioleta permiten una mejor revelacin de los resultados de la
cromatografa.

Bibliografa

Bautista, M. (1 de Noviembre de 2016). SlideShare. Obtenido de

http://es.slideshare.net/arelydlrc/cromatografa-de-particin
Cceres, B. (1 de Noviembre de 2016). Universidad Nacional de San Antonio Abad del Cusco. Obtenido de
http://www.unsaac.edu.pe/centrosproduccion/laboratorio/aplicaciones.php
Prez, A. (2016). Manual de Laboratorio de Qumica Orgnica Genaral I. San Jos: Universdad de Costa Rica.
Romero, A. (1 de Noviembre de 2016). UNAM.MX. Obtenido de
http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/Cromatografia.pdf