UAM-I CINTICA QUMICA

Trimestre 16-O

PRCTICA NO. 4

HIDRLISIS DE LA SACAROSA CATALIZADA POR CIDO

Introduccin: La reaccin que se presenta a continuacin:

+ H2O +

sacarosa glucosa fructosa

se lleva a cabo en presencia de un cido. Esta reaccin presenta la particularidad de que a medida
que avanza, se observa un cambio en el poder ptico rotatorio de la solucin, debido a la conversin
de la sacarosa a glucosa y fructosa. Por esta razn, es posible analizar la reaccin siguiendo los
cambios por tcnicas polarimtricas. Sin embargo, en el presente experimento se usar una tcnica
diferente, la cual toma como base el hecho de que la fructosa y la glucosa actan como azcares
reductores activos, y la sacarosa-reactivo del cual se parte, no. De esta manera la capacidad
reductora de la solucin puede ser una medida del grado de conversin de la sacarosa a glucosa y
fructosa.
Como la sacarosa no tiene capacidad reductora es necesario aadir un agente reductor de azcares,
como el anin 3,5-dinitrosalicilato, cuya estructura es:

Parte Experimental.
Material de laboratorio por equipo Reactivos

2 pipetas graduadas de 1 mL NaOH 1M o NaOH

1 pipetas aforadas de 2 mL HCl 1 M o HCl concentrado
1 pipeta aforada de 5 mL Sacarosa 0.03 M
1 pipeta graduada de 2 mL Glucosa
1 pipeta graduada de 5 mL Fructosa
1 gradilla con 12 tubos de ensayo de 20 mL 3,5-cido dinitrosaliclico

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1 propipeta Tartrato de potasio
3 vasos de precipitado de 50 mL cido actico
1 vaso de precipitado de 500 mL Acetato de sodio
1 probeta de 50 mL Agua destilada
1 parilla elctrica Agua desionizada
2 celdas para el espectrofotmetro
1 espectrofotmetro

Material para preparar soluciones segn corresponda

Solucin reductora
1 matraz aforado de 100 mL
1 vaso de precipitado de 500 mL
1 vaso de precipitado de 100 mL
1 esptula
1 agitador de vidrio
3 platitos para pesar
Usar agua desionizada
Solucin estndar glucosa-fructosa
1 matraces aforado de 100 mL
1 esptula
2 platitos para pesar
Solucin buffer
1 vaso de precipitado de 500 mL
1 micropipeta
1 agitador magntico
1 esptula
1 pH-metro
1 platito para pesar
Solucin de HCl 1 M, 50 mL
1 matraz aforado de 50 mL
1 micropipeta
Solucin NaOH 1 M, 150 mL
1 matraz aforado de 150 mL
1 esptula
Platito para pesar
Usar agua desionizada

El agente reductor de azcares se obtiene mezclando dos soluciones: a) Solucin con 2.50 g de 3,5-
cido dinitrosaliclico en 100 mL de NaOH 1 M caliente, y b) solucin con 7.5 g de tartrato de potasio
(NaKC4H4O4.4H2O) en 75 mL de agua destilada caliente. Estas soluciones son mezcladas lentamente
y diluidas con agua destilada caliente a un volumen total de 250 mL.

La solucin estndar de glucosa-fructosa contiene 0.09 g de glucosa y 0.09 g de fructosa disueltos

en 100 mL de agua destilada (en un matraz aforado).

La solucin buffer (pH = 5) de acetato se prepara con 1.025 g de acetato de sodio en 250 ml de agua
destilada, a la cual se le aaden 0.6625 g de cido glacial. Mida el pH de la solucin.

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Procedimiento.

Se usar una solucin de sacarosa, cuya hidrlisis ser medida a un cierto tiempo. La reaccin ser
detenida por una solucin de hidrxido de sodio que tendr como fin consumir los iones H+
catalticos. Se calentar la solucin para desarrollar el color producido por el reactivo reductor. Por
ltimo se medir la absorbancia en un espectrofotmetro.
Con una calibracin adecuada, las lecturas de absorbancia darn el nmero de moles de glucosa y
fructosa presente en la solucin. Combinando est informacin con el tiempo de reaccin, se podr
obtener la velocidad promedio a la cual la sacarosa es convertida en glucosa y fructosa. Asimismo,
realizando una de las pruebas a diferentes temperaturas se podr calcular la energa de activacin
aparente de la reaccin.

1. Calibracin
Se tomarn lecturas de absorbancia a 540 nm, producida por la accin de los reactivos en presencia
de cantidades conocidas de glucosa y fructosa. Se usar una solucin diluida de glucosa-fructosa
(SGF) conteniendo 0.09 g de glucosa y 0.09 g de fructosa por litro. Cuatro soluciones estndar sern
suficientes (Tabla 1).

Tabla 1. Volmenes de los reactivos correspondientes en mL para la preparacin de las soluciones

estndar

Solucin V H2O V SGF V Buffer

1 2.3 0.2 0.5
2 2.1 0.4 0.5
3 1.9 0.6 0.5
4 1.7 0.8 0.5
B 2.5 0.0 0.5

En cada caso, en tubos de ensayo limpios, despus de mezclar los reactivos, se seguir el
procedimiento descrito en la parte 2 a partir de la etapa (4). El blanco B, ser usado para verificar
que la solucin, en ausencia de glucosa y fructosa no da lectura de absorbancia, en consecuencia,
las lecturas sern el resultado de la accin del reactivo reductor sobre las soluciones de SGF.
Los datos de absorbancia obtenidos en las soluciones (1) a (4) sern graficados en funcin de los
micromoles de glucosa y fructosa presentes (la solucin SGF contiene 0.005 moles de glucosa +
fructosa por litro).

2. Mediciones
1) Aadir alcuotas de la solucin de sacarosa 0.03 M y de agua destilada a tubos de ensayo de
acuerdo a la tabla 2.
2) A cada tubo por separado, aada el volumen indicado en la Tabla 2 de la solucin 1 M de
HCl para iniciar la hidrlisis cataltica e inmediatamente comience a tomar el tiempo.
3) A los 15 minutos exactos, pare la reaccin aadiendo 5 mL de una solucin 1 M de NaOH.
4) Aada 2 mL del reactivo 3,5-dinitrosalicilato
5) Caliente en un bao de agua en ebullicin por 5 minutos.
6) Enfre el tubo de reaccin a temperatura ambiente.
7) Diluya aadiendo agua destilada (45 mL para la calibracin y 39 mL para las mediciones,
medidos con una probeta), de manera que el volumen final sea de 50 mL.
8) Lea la absorbancia de cada tubo a 540 nm

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Tabla 2. Volmenes en mL de los reactivos correspondientes a la hidrlisis-

Tubo Sacarosa 0.03 M Agua HCl 1 M

1 1.0 2.0 1.0
2 1.0 1.0 2.0
3 2.0 1.0 1.0
4 2.0 0.0 2.0

Escoja una serie de la Tabla 2 y repita la experiencia a otras dos temperaturas, por ejemplo 0C y
60C.

Sugerencias:
Es posible variar la concentracin de sacarosa con el fin de aumentar o disminuir el tiempo de
reaccin.

Clculos.

1. De los resultados (1) a (4) se puede estimar la constante de velocidad suponiendo la ley de
velocidad siguiente:

-d[S]/dt = k[S][H+]

D los valores de k obtenidos

2. Sus resultados cumplen con la ley de velocidad propuesta?

3. Calcule la actividad por sitio o Turn-over number (T.O.N.). Nmero de molculas de
sacarosa hidrolizadas por segundo, por iones de H+ presentes.
4. A partir de la ley de Arrhenius calcule la energa de activacin aparente y compare con los
valores reportados:

Hidrlisis de la sacarosa Ea (Kcal/mol)

Con catalizador cido-mineral 26
Con enzima invertasa 9

Explique las diferencias observadas.

BIBLIOGRAFA
1. Bell J.A., Chemical principles in practice, Addison-Wesley Pub. Co. (1967)
2. Dawber J.G., Brown D.R., y Reed R.A., J. of Chem. Educ., 43, 34 (1966).